目的:基于肿瘤蛋白53(tumor protein 53,p53)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11/xCT)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)通路探讨疏肝祛瘀解毒方(SGQYJDF)诱导铁死亡抑制裸鼠肝癌增殖...目的:基于肿瘤蛋白53(tumor protein 53,p53)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11/xCT)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)通路探讨疏肝祛瘀解毒方(SGQYJDF)诱导铁死亡抑制裸鼠肝癌增殖。方法:通过将人肝癌细胞株SK-Hep-1注射于裸鼠右腋皮下,建立异种皮下移植瘤模型,成模后分为模型对照组、SGQYJDF低、中、高剂量组和SGQYJDF中剂量联合Sorafenib组,按分组连续灌胃14 d,期间观察裸鼠肿瘤体积;灌胃14 d后,测量肿瘤质量并计算生长抑制率,采用HE染色观察各组肿瘤组织病理学变化;比色法检测各组肿瘤组织内丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和亚铁离子(ferrous ions,Fe^(2+))水平;免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测各组肿瘤组织内增殖标志物(Kiel 67 antigen,Ki-67)及GPX4表达;免疫荧光法(immunofluorescence,IF)检测肿瘤组织内p53和xCT的表达;Western blot法检测p53、xCT和GPX4的表达水平。结果:(1)在肿瘤增殖方面,通过观察裸鼠肿瘤体积及质量并计算生长抑制率,与模型对照组比较,SGQYJDF能够呈剂量相关性的降低肿瘤体积(P<0.01),抑制肿瘤质量增长(P<0.01),各组肿瘤组织均未见明显浸润,同时通过IHC观察计算肿瘤组织内Ki-67阳性细胞率可知,与模型对照组比较,SGQYJDF能够呈剂量相关性降低肿瘤组织Ki-67阳性细胞率(P<0.01),抑制其增殖能力;(2)在铁死亡生化指标方面,通过检测计算相对含量,与模型对照组比较,SGQYJDF能够呈剂量依赖性提高肿瘤组织内Fe^(2+)含量和MDA含量,同时降低GSH的含量(P<0.01);(3)在蛋白表达方面,通过IHC、IF与Western blot实验,与模型对照组比较,SGQYJDF能够呈剂量相关性地上调p53(P<0.05)的表达,同时抑制xCT(P<0.05)和GPX4(P<0.01)的表达。此外,在实验结果中,我们发现人体等效量的SGQYJDF与Sorafenib联用,其效应高于两倍人体等效量的SGQYJDF。结论:提示SGQYJDF可能通过上调裸鼠皮下移植瘤p53的表达、抑制xCT和GPX4的表达从而诱导其发生铁死亡,抑制其增殖。展开更多
