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β-catenin和突变体ΔN90腺病毒载体的构建及其在MSCs中的表达
1
作者
崔恒进
王春燕
+3 位作者
胡君
谢桂琴
徐晓静
张焕相
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期153-158,共6页
旨在研究β-catenin对MSCs迁移的作用,构建β-catenin和突变体ΔN90的重组腺病毒载体,在MSCs中验证其表达情况。将目的基因定向克隆到pAdTrack-CMV穿梭载体上,并经PmeⅠ线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒同源重组,获得重组腺...
旨在研究β-catenin对MSCs迁移的作用,构建β-catenin和突变体ΔN90的重组腺病毒载体,在MSCs中验证其表达情况。将目的基因定向克隆到pAdTrack-CMV穿梭载体上,并经PmeⅠ线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒同源重组,获得重组腺病毒载体,在QBI-293A细胞中包装和扩增。结果显示,酶切和测序证实Ad-β-catenin和Ad-ΔN90质粒构建正确,荧光显微镜可观察到GFP的表达,并选出150 MOI为最适感染MSCs的感染复数,Western blot检测到Ad-β-catenin和Ad-ΔN90都能增加β-catenin的蛋白表达量,TOPFlash检测到Ad-β-catenin和Ad-ΔN90都能增加β-catenin的转录活性。说明成功构建Ad-β-catenin和Ad-ΔN90腺病毒载体,并获得高滴度病毒子。
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关键词
腺病毒载体
Β-CATE
n
I
n
δn90
骨髓间充质干细胞
构建
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职称材料
题名
β-catenin和突变体ΔN90腺病毒载体的构建及其在MSCs中的表达
1
作者
崔恒进
王春燕
胡君
谢桂琴
徐晓静
张焕相
机构
苏州大学基础医学与生物科学学院江苏省干细胞研究重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期153-158,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(30870642
31071220)
文摘
旨在研究β-catenin对MSCs迁移的作用,构建β-catenin和突变体ΔN90的重组腺病毒载体,在MSCs中验证其表达情况。将目的基因定向克隆到pAdTrack-CMV穿梭载体上,并经PmeⅠ线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒同源重组,获得重组腺病毒载体,在QBI-293A细胞中包装和扩增。结果显示,酶切和测序证实Ad-β-catenin和Ad-ΔN90质粒构建正确,荧光显微镜可观察到GFP的表达,并选出150 MOI为最适感染MSCs的感染复数,Western blot检测到Ad-β-catenin和Ad-ΔN90都能增加β-catenin的蛋白表达量,TOPFlash检测到Ad-β-catenin和Ad-ΔN90都能增加β-catenin的转录活性。说明成功构建Ad-β-catenin和Ad-ΔN90腺病毒载体,并获得高滴度病毒子。
关键词
腺病毒载体
Β-CATE
n
I
n
δn90
骨髓间充质干细胞
构建
Keywords
Ade
n
ovirus vector β-cate
n
i
n
A
n
90
MSCs Co
n
structio
n
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
β-catenin和突变体ΔN90腺病毒载体的构建及其在MSCs中的表达
崔恒进
王春燕
胡君
谢桂琴
徐晓静
张焕相
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
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