γ分泌酶抑制剂阻断Notch信号通路对肺腺癌细胞A549增殖的影响 被引量：7

1

作者 周敏 范志文 韩瑞超 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1024-1028,共5页

目的观察γ分泌酶抑制剂MW167阻断Notch信号对肺腺癌细胞A549增殖的影响。方法正常氧条件下培养肺腺癌细胞A549,通过Western blotting及RT-PCR方法检测Notch受体各亚型的表达。在正常氧条件下,不同浓度(5、10、20μmol/L)MW167处理肺腺... 目的观察γ分泌酶抑制剂MW167阻断Notch信号对肺腺癌细胞A549增殖的影响。方法正常氧条件下培养肺腺癌细胞A549,通过Western blotting及RT-PCR方法检测Notch受体各亚型的表达。在正常氧条件下,不同浓度(5、10、20μmol/L)MW167处理肺腺癌细胞A549(加药组),48 h后采用Western blotting方法检测Notch1蛋白表达的变化,采用RT-PCR方法检测Notch信号通路下游基因HES1mRNA表达的变化,应用MTT法检测MW167对细胞增殖的影响;每个浓度设二甲基亚砜对照组。结果 Notch1～4各亚型在A549细胞均有表达。5、10、20μmol/L MW167处理肺腺癌A549细胞48 h后,各加药组与对照组相比,Notch1蛋白表达升高(P<0.05),而HES1 mRNA表达下降(P<0.05),随MW167浓度升高,对HES1 mRNA表达的抑制率逐渐升高(r=0.927,P<0.01)。MTT法检测结果显示各加药组吸光度高于对照组(P<0.05),且随MW167浓度升高,细胞增殖率相应升高(r=0.904,P<0.01)。结论在正常氧条件下,MW167可阻断Notch信号通路,对A549细胞起促增殖作用;Notch1信号通路可能在A549细胞中起一定抑癌作用。 展开更多

关键词 γ分泌酶抑制剂 NOTCH信号 肺腺癌

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γ分泌酶抑制剂DAPT对庆大霉素致大鼠耳损伤及修复过程中听力及Notch2/hes1信号通路表达的影响 被引量：3

2

作者 黄飞 刘成福 王小琴 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期272-276,共5页

目的观察γ分泌酶抑制剂DAPT对庆大霉素致大鼠耳损伤及修复过程中听力变化及Notch2/hes1信号通路表达的影响。方法 72只成熟大鼠随机分成三组,每组24只;对照组给予生理盐水3ml.kg-1.d-1腹腔注射,连继10天,庆大霉素组给予Gen 120mg.kg-1.... 目的观察γ分泌酶抑制剂DAPT对庆大霉素致大鼠耳损伤及修复过程中听力变化及Notch2/hes1信号通路表达的影响。方法 72只成熟大鼠随机分成三组,每组24只;对照组给予生理盐水3ml.kg-1.d-1腹腔注射,连继10天,庆大霉素组给予Gen 120mg.kg-1.d-1腹腔注射,连继10天,DAPT组给予DAPT 5mg.kg-1.d-1腹腔注射,连用5天后停用2天,再用3天,同时腹腔注射Gen 120mg.kg-1.d-1,连继10天。各组注射前及注射后1、14、28天进行ABR检测后处死动物,应用免疫印迹蛋白、实时定量PCR观察大鼠Notch2/hes1信号通路的表达。结果对照组注射前后ABR反应阈无明显变化,与注射前相比,DAPT组和庆大霉素组注射后1、14、28天ABR阈值均明显升高,但随时间的延长阈值有所下降(P<0.05),其中,第28天DAPT组ABR反应阈较庆大霉素组下降明显(P<0.05);与对照组相比,DAPT组和庆大霉素组Notch2/hes1的表达均明显增高(P<0.05);与庆大霉素组相比,DAPT组的Notch2/hes1表达明显降低(P<0.05)。结论在庆大霉素致耳损伤及修复过程中,DAPT可能通过抑制Notch2/hes1信号通路减轻耳蜗毛细胞损伤并促进耳蜗毛细胞修复,进而促进听功能恢复。 展开更多

关键词 γ分泌酶抑制剂 Notch2/hes1信号通路 庆大霉素 听力 大鼠

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As_2O_3联合γ分泌酶抑制剂对HepG_2细胞凋亡的诱导作用及其机制 被引量：1

3

作者 周明 王雪雯 +2 位作者 杨莉 宋海林 段晶晶 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期470-475,共6页

目的:探讨As2O3通过Notch信号通路对HepG2细胞凋亡的影响,阐明其作用机制。方法:体外培养的HepG2细胞分为空白组、As2O3组、MW167组和联合组;采用不同浓度As2O3和MW167处理HepG2细胞24、48和72h,MTT法检测细胞增殖抑制率。根据MTT结果... 目的:探讨As2O3通过Notch信号通路对HepG2细胞凋亡的影响,阐明其作用机制。方法:体外培养的HepG2细胞分为空白组、As2O3组、MW167组和联合组;采用不同浓度As2O3和MW167处理HepG2细胞24、48和72h,MTT法检测细胞增殖抑制率。根据MTT结果选取无细胞毒剂量As2O3和MW167(As2O30.25mg·L-1、MW167 10μmol·L-1)分组干预HepG2细胞48h;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR和Western blotting法检测Notch-1、Bcl-2和Caspase-3mRNA和蛋白表达水平。结果:不同浓度As2O3和MW167处理HepG2细胞均可抑制细胞增殖,呈剂量效应关系;无细胞毒剂量As2O3和MW167处理不同分组HepG2细胞48h后,与空白组比较,As2O3组、MW167组和联合组细胞凋亡率升高(P<0.05),其中以联合组升高最为明显;与空白组比较,As2O3组、MW167组和联合组细胞中Bcl-2、Notch-1mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),其中以联合组降低最为明显;与空白组比较,As2O3组、MW167组和联合组细胞中Caspase-3mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05),其中以联合组升高最为明显。结论:As2O3可诱导肝癌HepG2细胞凋亡,其作用机制可能与通过Notch信号通路下调细胞中Bcl-2、Notch-1基因和蛋白表达水平以及上调细胞中Caspase-3基因和蛋白表达水平有关联。 展开更多

关键词 HEPG2细胞 γ分泌酶抑制剂 三氧化二砷 细胞凋亡

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γ分泌酶抑制剂联合BMSC对小鼠急性移植物抗宿主病的影响

4

作者 王燕 李斑斑 +5 位作者 滕清良 孙兆刚 刘双 李纯璞 马华 郭冬梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期937-943,共7页

目的:建立aGVHD小鼠模型,探讨低剂量γ分泌酶抑制剂(GSI)联合BMSC对小鼠aGVHD的调控作用及其机制。方法:选择C57BL/6(H-2b)→BALB/c(H-2d)作为异基因移植供、受体,建立aGVHD模型。BALB/c受鼠随机分为6组,分别为照射后输注骨髓细胞组(BM)... 目的:建立aGVHD小鼠模型,探讨低剂量γ分泌酶抑制剂(GSI)联合BMSC对小鼠aGVHD的调控作用及其机制。方法:选择C57BL/6(H-2b)→BALB/c(H-2d)作为异基因移植供、受体,建立aGVHD模型。BALB/c受鼠随机分为6组,分别为照射后输注骨髓细胞组(BM),照射后输注骨髓细胞与脾细胞组(BM+SC),照射后输注骨髓细胞与脾细胞+DMSO组(BM+SC+DMSO)(移植对照组),照射后输注骨髓细胞与脾细胞+GSI组(BM+SC+GSI),照射后输注骨髓细胞与脾细胞及骨髓基质细胞组(BM+SC+BMSC),照射后输注骨髓细胞与脾细胞及骨髓基质细胞+GSI组(BM+SC+BMSC+GSI)。含GSI的两组小鼠在移植后1、2、3 d以腹腔注射GSI 5μmol/kg,以DMSO为对照。观察小鼠一般状况、生存时间及造血恢复情况,ELISA法测定细胞因子,免疫组化检测病理组织学改变等,研究其对allo-BMT后造血重建和a GVHD发生发展的影响。结果:BMSC与GSI联合组的小鼠在观察期内存活率80%,明显高于其他各组小鼠, BMSC、GSI或者两者联合治疗组在移植后21 d以上时,a GVHD的发生率均降低。GSI部分促进白细胞恢复,且对血小板的恢复无明显延迟作用。同时,BMSC与GSI联合组小鼠的外周血清中Th1型细胞因子(IFN-γ)含量明显低于GSI组小鼠(P<0.01),联合组Th2型细胞因子(IL-4)含量明显高于GSI组小鼠(P<0.01),IL-17含量显著低于相应对照组(P<0.001)。结论:低剂量GSI联合BMSC促进造血重建并调节细胞因子IFN-γ、IL-4及IL-17的分泌。GSI联合BMSC达到协同抑制aGVHD发生及进展的目的。 展开更多

关键词 γ分泌酶抑制剂 骨髓基质细胞 急性移植物抗宿主病 造血重建 细胞因子

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γ分泌酶抑制剂对乏氧环境下骨肉瘤细胞增殖及侵袭力影响的实验研究分 被引量：5

5

作者 王淼 袁冰 +4 位作者 刘平 李贺伟 刘洋 邹利军 郭朗 《生物骨科材料与临床研究》 CAS 2019年第2期10-14,共5页

目的探讨乏氧状态下分泌酶抑制剂(γ-secretase inhibitors,DAPT)介导Notch1信号通路对骨肉瘤MG-63细胞系增殖、凋亡、侵袭、转移的影响及相关机制。方法以骨肉瘤细胞株MG-63为研究对象,分为正常组(NC)、乏氧组(Hypoxia)和含有DAPT的乏... 目的探讨乏氧状态下分泌酶抑制剂(γ-secretase inhibitors,DAPT)介导Notch1信号通路对骨肉瘤MG-63细胞系增殖、凋亡、侵袭、转移的影响及相关机制。方法以骨肉瘤细胞株MG-63为研究对象,分为正常组(NC)、乏氧组(Hypoxia)和含有DAPT的乏氧组作为实验组(Hypoxia+DAPT)。采用流式细胞仪检测处理后的细胞周期,CCK-8方法检测细胞的增殖能力,并使用Western Blot检测MG-63细胞株中Notch1、HIF-1、Hes-1蛋白的表达情况,通过Transwell实验来验证其转移能力。同时探讨DAPT在乏氧环境下对细胞增殖和细胞周期方面的影响,分析其介导的Notch1下调情况及其抑制乏氧对MG-63细胞的促增殖作用。结果与正常组相比较,乏氧组细胞的增殖能力及侵袭能力均较正常组有显著的提升,差异具有统计学意义(<0.05)。而实验组与乏氧组相比较,分泌酶抑制剂(DAPT)能显著降低其增殖及侵袭能力(<0.05)。Western Blot结果显示,与正常组相比,乏氧组和实验组均可上调Notch1、HIF-1、Hes-1相关蛋白的表达;但是与乏氧组对比,实验组可显著下调Notch1、HIF-1、Hes-1蛋白的表达水平(<0.05)。流式细胞仪结果显示:与正常组相比,乏氧组和实验组均可促进细胞由G1期转向G2期;而与乏氧组对比,实验组可显著抑制细胞由G1期转向G2期,使细胞周期停滞,差异具有统计学意义(<0.05)。增殖实验结果显示,与正常组相比,乏氧组和实验组均可促进细胞增殖;而与乏氧组对比,实验组可显著抑制细胞增殖,差异具有统计学意义(<0.05)。结论分泌酶抑制剂可通过下调Notch1通路显著抑制乏氧状态下骨肉瘤细胞株MG-63的增殖与侵袭,阻断Notch1表达可能是潜在的治疗骨肉瘤的机制之一。 展开更多

关键词 γ分泌酶抑制剂(DAPT) 乏氧环境 Notch1信号通路 骨肉瘤 细胞增殖

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γ分泌酶抑制剂阻断Notch信号通路对肝癌细胞增殖的影响

6

作者 孟继明 唐红娜 +2 位作者 刘晓明 王朝阳 任学群 《河南大学学报（医学版）》 CAS 2017年第3期187-190,共4页

[目的]探索γ分泌酶抑制剂MW167阻断Notch信号通路对肝癌细胞增殖的影响。[方法]通过Western blotting和RT-PCR方法检测Notch受体各亚型的表达。用不同浓度(5、10、20μmol/L)MW167处理肝癌细胞,48h后用Western blotting法检测Notch各... [目的]探索γ分泌酶抑制剂MW167阻断Notch信号通路对肝癌细胞增殖的影响。[方法]通过Western blotting和RT-PCR方法检测Notch受体各亚型的表达。用不同浓度(5、10、20μmol/L)MW167处理肝癌细胞,48h后用Western blotting法检测Notch各蛋白的表达,采用RT-PCR法检测Notch信号通路下游基因HES1 mRNA表达,MTT法测定细胞增殖。[结果]HepG2细胞中可检测到Notch1~4蛋白和mRNA的表达。不管是与培养基对照还是DMSO对照相比,不同浓度MW167对Notch1~4蛋白的表达没有显著影响。与相应浓度的对照组相比,MW167处理组HES1 mRNA表达下降(P<0.05)。随着MW167处理浓度升高,HES1 mRNA表达抑制率逐渐升高(P<0.05)。MTT法检测结果显示,MW167处理的细胞,其吸光度高于对照组(P<0.05),且随着MW167浓度的升高,细胞增殖率相应升高。[结论]HepG2细胞中可检测到Notch1~4蛋白和mRNA的表达,MW167处理可降低HES1 mRNA表达,MW167处理可促进细胞的增殖。 展开更多

关键词 γ分泌酶抑制剂 MW167 NOTCH信号通路 肝细胞肝癌

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酶抑制剂及其构效优化在阿尔茨海默病中的应用

7

作者 储超扬 肖彪 +8 位作者 单江晖 陈是燏 张楚霞 周钰愉 方甜园 林志成 谢凯 徐淑君 李丽萍 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1510-1529,共20页

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种以进行性认知功能障碍和行为损害为特征的中枢神经系统退行性病变,而临床上缺乏有效治疗AD的药物。近些年来研究发现,多种酶抑制剂如胆碱酯酶抑制剂、单胺氧化酶抑制剂、分泌酶抑制剂等能... 阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种以进行性认知功能障碍和行为损害为特征的中枢神经系统退行性病变,而临床上缺乏有效治疗AD的药物。近些年来研究发现,多种酶抑制剂如胆碱酯酶抑制剂、单胺氧化酶抑制剂、分泌酶抑制剂等能改善胆碱能系统的障碍、Aβ的产生和沉积、Tau蛋白的过度磷酸化、氧化应激损伤、突触可塑性下降等AD发生发展的不同环节,从而改善AD症状和认知功能。本文综述了近年来酶抑制剂或抑制剂构效优化靶向调节胆碱酯酶、单胺氧化酶、分泌酶等在AD治疗中的研究进展,以期为AD的治疗和药物研发提供新思路。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 乙酰胆碱酯酶抑制剂 单胺氧化酶抑制剂 β分泌酶抑制剂 γ分泌酶抑制剂 糖原合成酶激酶抑制剂 抑制剂构效优化

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γ分泌酶抑制剂DAPT对胰腺癌细胞生长的影响 被引量：4

8

作者 杜潇 程中 +3 位作者 李旸 周总光 杨烈 张明鸣 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期699-702,共4页

目的探讨γ分泌酶抑制剂DAPT对人胰腺癌细胞生长的影响及其可能机制。方法选用胰腺癌细胞株AsPC-1、BxPC-3、MIAPaCa-2作为实验研究对象,应用不同剂量(100μmol/L,50μmol/L,10μmol/L)的DAPT作用不同时间后,CCK-8法检测细胞增殖,Annexi... 目的探讨γ分泌酶抑制剂DAPT对人胰腺癌细胞生长的影响及其可能机制。方法选用胰腺癌细胞株AsPC-1、BxPC-3、MIAPaCa-2作为实验研究对象,应用不同剂量(100μmol/L,50μmol/L,10μmol/L)的DAPT作用不同时间后,CCK-8法检测细胞增殖,Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡。结果与空白对照组相比,100μmol/L DAPT作用时3株胰腺癌细胞从3d开始出现增殖抑制(P<0.05);50μmol/L DAPT作用时AsPC-1细胞在5d出现增殖抑制(P<0.05),BxPC-3和MIAPaCa-2细胞在3~5d出现了抑制(P<0.05);10μmol/L DAPT作用时仅BxPC-3和MIAPaCa-2细胞在5d出现了生长抑制(P<0.05)。流式细胞术显示DAPT作用组细胞凋亡率较空白对照组增加。结论应用DAPT阻断Notch信号通路可通过促进胰腺癌细胞凋亡而抑制胰腺癌生长。 展开更多

关键词 胰腺癌 γ分泌酶抑制剂 DAPT NOTCH信号通路 凋亡

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γ分泌酶抑制剂阻断Notch1信号通路对人结肠癌耐药细胞化疗敏感性的影响 被引量：3

9

作者 胡敏 李少林 +1 位作者 袁犁 王勃 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第1期23-28,共6页

目的探讨应用γ分泌酶抑制剂(Gamma-secretase inhibitor,GSI)阻断Notch1信号通路后对人结肠癌耐药细胞株SW480/L-OHP化疗敏感性的影响。方法应用人结肠癌细胞系SW480,以反复诱导、逐渐递增奥沙利铂(L-OHP)浓度的方法,体外构建耐药细胞... 目的探讨应用γ分泌酶抑制剂(Gamma-secretase inhibitor,GSI)阻断Notch1信号通路后对人结肠癌耐药细胞株SW480/L-OHP化疗敏感性的影响。方法应用人结肠癌细胞系SW480,以反复诱导、逐渐递增奥沙利铂(L-OHP)浓度的方法,体外构建耐药细胞株SW480/L-OHP。采用CCK-8法检测细胞株对L-OHP的耐药指数,RT-PCR法检测survivin、notch1、hes1、cyclinD1基因mRNA的转录,Western blot检测Notch1和Hes1蛋白的表达。将耐药细胞分成对照组、L-OHP组(3.0μmol/L)、GSI组(10μmol/L)和GSI+L-OHP组,分别处理后,检测各组细胞的抑制率、凋亡率及survivin、notch1、hes1、cyclinD1基因mRNA的转录水平和Notch1、Nicd、Hes1蛋白的表达水平。结果与SW480亲本细胞相比,SW480/L-OHP细胞中survivin、notch1、hes1和cyclinD1基因mRNA转录水平及Notch1和Hes1蛋白表达水平均上调。GSI组耐药细胞的增殖受到抑制,GSI+L-OHP组抑制作用更明显;GSI组耐药细胞survivin、hes1、cyclinD1基因mRNA转录水平下调,Nicd和Hes1蛋白表达水平下调,GSI+L-OHP组下调更明显。结论 GSI通过阻断Notch1胞内段Nicd的释放,影响下游Hes1基因和蛋白的表达,从而抑制SW480/L-OHP细胞增殖,提高其化疗敏感性;且与L-OHP联合使用具有协同作用。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 抗药性 肿瘤 NOTCH1 γ分泌酶抑制剂

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γ分泌酶抑制剂阻断Notch信号通路对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响 被引量：7

10

作者 卢余莉 谢程 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期578-581,611,共5页

目的观察γ分泌酶抑制剂(DAPT)对人宫颈癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法不同浓度DAPT对SKOV3细胞作用后,采用CCK-8法检测对SKOV3细胞的增殖抑制作用,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光双染色法及流式细胞术检测细胞凋亡,R... 目的观察γ分泌酶抑制剂(DAPT)对人宫颈癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法不同浓度DAPT对SKOV3细胞作用后,采用CCK-8法检测对SKOV3细胞的增殖抑制作用,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光双染色法及流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR、Western blot检测SKOV3细胞Notch1mRNA和蛋白表达水平的变化。结果与空白对照组相比,5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L浓度的DAPT对SKOV3细胞均有一定的增殖抑制作用(P<0.05),且其抑制作用呈剂量依耐性增加(P<0.05),24h抑制率分别为19.87%、28.38%、46.67%。与空白对照组相比,不同浓度的DAPT作用SKOV3细胞24h后凋亡率增加(P<0.05),且随DAPT浓度增加,凋亡细胞逐渐从早期凋亡过渡至晚期凋亡;Notch1mRNA和蛋白表达抑制,其抑制率分别为(10.23%、20.50%、38.83%)和(12.89%、27.47%、49.84%)。结论γ分泌酶抑制剂DAPT可阻断Notch信号通路,能抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调Notch1表达有关。 展开更多

关键词 γ分泌酶抑制剂 增殖 凋亡 NOTCH信号通路

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γ分泌酶抑制剂阻断Notch-Hes1信号通路对银屑病样皮炎小鼠γδT17细胞表达的影响 被引量：9

11

作者 王燕芹 李新新 +3 位作者 薛海波 纪洪 孙大康 马蕾 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期801-807,共7页

目的探讨γ分泌酶抑制剂阻断Notch-Hes1信号通路对银屑病样皮炎小鼠γδT17细胞表达的影响.方法将45只健康雄性SPF级BALB/c小鼠按照简单随机抽样法等分为对照组、模型组和干预组,模型组和干预组小鼠背部脱毛区均每日外涂5%咪喹莫特乳膏6... 目的探讨γ分泌酶抑制剂阻断Notch-Hes1信号通路对银屑病样皮炎小鼠γδT17细胞表达的影响.方法将45只健康雄性SPF级BALB/c小鼠按照简单随机抽样法等分为对照组、模型组和干预组,模型组和干预组小鼠背部脱毛区均每日外涂5%咪喹莫特乳膏62.5 mg,干预组还在外用咪喹莫特后立即接受γ分泌酶抑制剂(DAPT)10 mg/kg腹腔注射,每日1次;对照组仅每日外涂等剂量白凡士林.共处理6d,采用银屑病皮损严重程度指数(PASI)评估皮损变化.第7天麻醉小鼠心脏取血,取脾脏及皮肤组织,制备单细胞悬液,比较计算各组小鼠脾指数,苏木精-伊红染色观察皮肤组织病理学改变.流式细胞仪检测脾脏及皮肤组织中γδT17细胞比例,实时定量反转录PCR检测脾细胞悬液中Hes1 mRNA表达水平,酶联免疫吸附实验检测血清中白细胞介素17A(IL-17A)含量.采用单因素方差分析和重复测量的方差分析比较各组间指标差异,Pearson相关分析评价不同指标间的相关性.结果末次处理24h后,肉眼观察显示,干预组小鼠银屑病样皮炎改变明显轻于模型组,PASI显著低于模型组,且表皮增厚及真皮炎细胞浸润程度明显轻于模型组.模型组小鼠脾指数(12.534±1.636)、脾脏(24.659%±4.603%)及皮肤组织γδT17细胞比例(22.127%±5.670%)、脾脏Hes1 mRNA表达水平(4.867±0.543)、血清IL-17A含量[(22.478±2.776)ng/L]均明显高于对照组(P<0.01);干预组上述指标分别为9.449±1.040、14.966%±5.770%、13.631%±5.946%、2.541±0.347、(18.639±1.816)ng/L,均显著低于模型组(P<0.01).模型组及干预组小鼠脾脏γδT17细胞比例与血清IL-17A含量均呈正相关(r值分别为0.56和0.53,均P<0.05),皮损γδT17细胞比例与PASI均呈正相关(r值分别为0.56和0.52,均P<0.05),脾脏Hes1 mRNA表达水平与γδT17细胞比例(r值分别为0.61和0.58)、血清IL-17A含量(r值分别为0.60和0.54)均呈正相关(P<0.05).结论γ分泌酶抑制剂阻断Notch-Hes1信号通路能够明显抑制银屑病样皮炎小鼠γδT17细胞的表达,减轻银屑病样皮炎损害. 展开更多

关键词 银屑病 淀粉样前体蛋白分泌酶类 受体 NOTCH Th17细胞 白细胞介素17 HES1 γδT17细胞 γ分泌酶抑制剂

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I型γ-分泌酶抑制剂对恶性胶质瘤细胞株增殖及凋亡的影响 被引量：2

12

作者 叶永斌 林骏 +2 位作者 赵嘉佳 张兴梅 罗深秋 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期571-575,共5页

目的 探讨I型γ-分泌酶抑制剂（GSI-I）对U87、U251胶质瘤细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用.方法 应用GSI-I作用于U87、U251胶质瘤细胞,通过MTT法观察GSI-I对上述两种细胞的增殖抑制作用,通过流式细胞仪检测GSI-I对该两种细胞细胞周期的影... 目的 探讨I型γ-分泌酶抑制剂（GSI-I）对U87、U251胶质瘤细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用.方法 应用GSI-I作用于U87、U251胶质瘤细胞,通过MTT法观察GSI-I对上述两种细胞的增殖抑制作用,通过流式细胞仪检测GSI-I对该两种细胞细胞周期的影响及诱导凋亡的作用.结果RT-PCR及实时定量荧光RT-PCR结果显示,GSI-T可明显抑制胶质瘤细胞中Notch通路的活性,主要体现为Notch通路的靶基因Hes-1表达明显下调.MTT检测结果显示2.5μmol/L及以上浓度的GSI-I对U87及U251胶质瘤细胞有明显的增殖抑制作用.与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,且该抑制作用呈剂量依赖型增加.流式细胞检测结果显示GSI-I主要使U87胶质瘤细胞的细胞周期阻滞在G1期而抑制细胞增殖,对于U251胶质瘤细胞则主要通过诱导凋亡来抑制增殖.结论 GSI-I可明显抑制U87及U251胶质瘤细胞的增殖并诱导凋亡,为恶性胶质瘤的临床治疗提供了理论参考依据. 展开更多

关键词 γ分泌酶抑制剂 神经胶质瘤 细胞周期 细胞凋亡

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Notch1信号通路通过调控Th17细胞参与实验性自身免疫性甲状腺炎的发生和发展 被引量：3

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作者 刘昊 李依雯 +1 位作者 朱玉娇 薛海波 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第5期420-425,共6页

目的探讨Notch1信号通路是否通过调控辅助性T细胞17(Th17)参与实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)的发生和发展。方法将24只小鼠随机平均分为NC组、EAT-A组(给予猪甲状腺免疫球蛋白多点皮下注射)、EAT-B组(猪甲状腺免疫球蛋白多点皮下注射... 目的探讨Notch1信号通路是否通过调控辅助性T细胞17(Th17)参与实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)的发生和发展。方法将24只小鼠随机平均分为NC组、EAT-A组(给予猪甲状腺免疫球蛋白多点皮下注射)、EAT-B组(猪甲状腺免疫球蛋白多点皮下注射前给予γ分泌酶抑制剂腹腔注射)。HE染色观察甲状腺内淋巴细胞浸润程度;流式细胞术检测小鼠脾脏单核细胞(SMC)悬液中Th17细胞比例;ELISA法检测血清甲状腺球蛋白(TgAb)滴度和SMC培养上清白细胞介素-17A(IL-17A)浓度;实时PCR分析脾细胞中Notch1、Hes1、RORγt和IL-17A mRNA表达水平;Western blotting检测脾脏组织中IL-17A蛋白表达水平。结果EAT-A组和EAT-B组小鼠甲状腺中有不同程度淋巴细胞浸润,与NC组相比血清TgAb滴度显著升高(P<0.01)。EAT-A组和EAT-B组小鼠Notch1、Hes1、RORγt和IL-17A mRNA表达,以及SMC中Th17细胞比例、IL-17A浓度、IL-17A蛋白表达水平均高于NC组(均P<0.01)。EAT-B组上述指标显著低于EAT-A组(均P<0.01)。EAT-A组小鼠SMC中Th17细胞比例与血清TgAb滴度、脾脏Notch1 mRNA及IL-17A蛋白表达水平均呈正相关。结论EAT小鼠中Notch1信号通路的表达上调,阻断此信号通路后小鼠甲状腺炎症程度减轻,同时伴有Th17细胞比例明显降低,提示Notch1信号通路可能通过调控Th17细胞参与EAT的发生和发展。 展开更多

关键词 辅助性T细胞17 自身免疫性甲状腺炎 γ分泌酶抑制剂 NOTCH1 白细胞介素-17

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靶向BCMA的嵌合抗原受体T细胞治疗三重难治性多发性骨髓瘤的研究进展

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作者 陈瑾 吕鸿雁 +3 位作者 刘晗 刘建宁 卢佳配 张金巧 《临床荟萃》 CAS 2023年第7期654-658,共5页

目前,尽管在以蛋白酶体抑制剂(PIs)、免疫调节剂(IMiDs)和抗CD38单克隆抗体(MoAbs)等为主的新药时代下,多发性骨髓瘤(MM)患者的生存期得到了显著的提高,但复发与进展仍不可避免,复发后对后续治疗的反应持续时间越来越短,最终出现顽固性... 目前,尽管在以蛋白酶体抑制剂(PIs)、免疫调节剂(IMiDs)和抗CD38单克隆抗体(MoAbs)等为主的新药时代下,多发性骨髓瘤(MM)患者的生存期得到了显著的提高,但复发与进展仍不可避免,复发后对后续治疗的反应持续时间越来越短,最终出现顽固性耐药。三重难治性多发性骨髓瘤(TCR MM)是目前治疗的难点。B细胞成熟抗原(BCMA)是MM理想的靶抗原,靶向BCMA的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法产生了持久而深度的缓解,显著改善了TCR MM患者的预后。现结合相关文献对上述疗法在临床方面的最新进展进行综述,旨在为临床治疗提供更多理论参考。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 γ分泌酶抑制剂 靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体T细胞 嵌合抗原受体 T细胞治疗

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Notch信号通路调控上皮-间质转化影响膀胱癌侵袭性和耐药性 被引量：13

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作者 刘志欢 王义兵 +4 位作者 王共先 黄亮 郎斌 许晓源 傅斌 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第2期145-151,共7页

目的体外探讨Notch信号通路对膀胱癌细胞侵袭性与耐药性的影响及分子机制。方法采用Notch信号通路受体完全阻断剂(γ分泌酶抑制剂)处理膀胱癌T24、5637和J82细胞48 h后,倒置显微镜观察膀胱癌细胞增生及形态;用RT-PCR和Western blot在mRN... 目的体外探讨Notch信号通路对膀胱癌细胞侵袭性与耐药性的影响及分子机制。方法采用Notch信号通路受体完全阻断剂(γ分泌酶抑制剂)处理膀胱癌T24、5637和J82细胞48 h后,倒置显微镜观察膀胱癌细胞增生及形态;用RT-PCR和Western blot在mRNA和蛋白水平检测上皮-间质转化(EMT)分子标志物E-cadherin、N-cadherin、vimentin和Alpha-smooth muscle actin的表达;MTT、Transwell检测膀胱癌细胞耐药性及侵袭能力。结果完全阻断Notch信号通路后,镜下显示膀胱癌细胞形态变小,细胞分散;EMT分子标志物E-cadherin mRNA和蛋白水平表达上调(P<0.05),N-cadherin、vimentin、Alpha-smooth muscle actin mRNA和蛋白水平表达下调(P<0.05);膀胱癌细胞T24、5637和J82增殖明显被抑制(P<0.05);膀胱癌细胞T24、5637和J82穿过微孔膜的细胞数明显减少(P<0.05)。结论 Notch信号通路可通过调控EMT的变化而改变膀胱癌的侵袭性与耐药性。 展开更多

关键词 膀胱癌 NOTCH信号通路 上皮-间质转化 γ分泌酶抑制剂

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Notch1信号通路与急性T淋巴细胞白血病关系的研究进展 被引量：3

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作者 秦永亮 李永军 史敏 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1067-1069,共3页

急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)是一类预后不良的恶性淋巴细胞增殖性疾病,是我国儿童和青少年常见的恶性疾病之一,现阶段主要采取化疗的方式予以治疗。近年来,传统的化疗手段与效果取得了显著改善,但仍存在诸多问题,例如化疗药物抵抗的患... 急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)是一类预后不良的恶性淋巴细胞增殖性疾病,是我国儿童和青少年常见的恶性疾病之一,现阶段主要采取化疗的方式予以治疗。近年来,传统的化疗手段与效果取得了显著改善,但仍存在诸多问题,例如化疗药物抵抗的患者预后差、化疗毒副作用明显、缺乏敏感的生物标记物判断预后等。T-ALL的发病机制有待于进一步研究,开发新的有效药物与更合理的用药方式迫在眉睫。近些年的研究表明Notch1信号通路的异常激活与T-ALL的发生与发展存在紧密的联系,这使得T-ALL发生、发展与治疗的Notch1机制逐渐成为研究的新热点。本文就Notch1与T-ALL的发生与发展以及针对Notch1的潜在的治疗手段进行综述。 展开更多

关键词 白血病 T细胞 NOTCH1 γ分泌酶抑制剂 白藜芦醇

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Notch信号在白血病中的作用机制与靶向治疗 被引量：3

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作者 石丽芳 芮红兵 《医学综述》 2011年第10期1475-1478,共4页

Notch信号在细胞增殖、分化、生存、凋亡、抗肿瘤血管生成和自我更新中起重要作用。许多肿瘤均与Notch信号异常有关,在不同的肿瘤、同一肿瘤的不同发展阶段,甚至同一肿瘤的不同细胞系中Notch途径的作用都是不同的。最近研究发现,Notch... Notch信号在细胞增殖、分化、生存、凋亡、抗肿瘤血管生成和自我更新中起重要作用。许多肿瘤均与Notch信号异常有关,在不同的肿瘤、同一肿瘤的不同发展阶段,甚至同一肿瘤的不同细胞系中Notch途径的作用都是不同的。最近研究发现,Notch信号异常与白血病的发病、细胞周期阻滞和治疗预后有关。在Notch途径的相关靶点设计药物阻断或活化Notch信号进行白血病的治疗有更广阔的前景。现就Notch信号的组成、活化与Notch信号在白血病中的作用机制和靶向治疗进行综述。 展开更多

关键词 NOTCH 白血病 靶向治疗 基因突变 γ分泌酶抑制剂

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NOTCH1/PI3K信号通路在T-ALL治疗中的研究进展 被引量：6

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作者 汤煜媛 李翔鹏 +1 位作者 黄羽 李彩霞 《医学综述》 2016年第5期877-881,共5页

急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）是进行性的血液系统恶性疾病,以T细胞克隆增生、积聚和组织浸润为特点,好发于儿童和青少年,占儿童急性淋巴细胞白血病的10%-15%。NOTCH1和磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（PI3K-Akt）信号通路及... 急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）是进行性的血液系统恶性疾病,以T细胞克隆增生、积聚和组织浸润为特点,好发于儿童和青少年,占儿童急性淋巴细胞白血病的10%-15%。NOTCH1和磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（PI3K-Akt）信号通路及两者之间通过下游靶基因和靶蛋白实现的交互作用在T-ALL发生和发展中扮演重要角色。随着对这两条信号通路的认识逐渐深入,NOTCH1和PI3K-Akt信号通路成为治疗T-ALL的新靶点。 展开更多

关键词 急性T淋巴细胞白血病 磷脂酰肌醇3-激酶 NOTCH1 γ分泌酶抑制剂

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hUMSCs向胰岛前体细胞诱导分化过程中Notch1和神经元素3的表达

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作者 韩晶 洪艳 +1 位作者 王琪 檀梦天 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第7期773-780,共8页

目的:探讨人间充质干细胞(hUMSCs)向胰岛前体细胞诱导分化过程中Notch信号通路受体Notch1与神经元素3(Ngn3)变化。方法:分离培养并鉴定hUMSCs,采用分阶段联合诱导法(前10 d用含EGF低糖培养基诱导,后11 d用含激活素A和尼克酰胺高糖培养... 目的:探讨人间充质干细胞(hUMSCs)向胰岛前体细胞诱导分化过程中Notch信号通路受体Notch1与神经元素3(Ngn3)变化。方法:分离培养并鉴定hUMSCs,采用分阶段联合诱导法(前10 d用含EGF低糖培养基诱导,后11 d用含激活素A和尼克酰胺高糖培养基诱导)诱导hUMSCs向胰岛前体细胞分化,设单独培养的hUMSCs作为对照;观察诱导分化前后细胞的形态变化,免疫细胞化学法检测诱导后细胞Ngn3、胰高血糖素(Glucagon)表达鉴定胰岛前体细胞,电镜下观察诱导后胰岛前体细胞改变;采用免疫细胞化学法、real-time PCR法及Western blot法检测诱导第7天、第14天及第21天时细胞中Notch1及Ngn3的表达;Western blot法检测诱导并加入γ分泌酶抑制剂(DAPT)后第21天时细胞中Notch1及Ngn3的表达水平。结果:诱导后Glucagon免疫组化染色呈阳性,出现胰岛前体细胞集落,电镜下可见胞体内有分泌颗粒;real-time PCR和Western blot结果显示,Notch1水平在诱导后第7天时最高,Ngn3水平至第14天时达到峰值;添加Notch信号通路抑制剂后Ngn3表达水平升高。结论:Notch信号通路可能通过激活Notch1受体与下游基因Ngn3共同调控体外诱导hUMSCs向胰岛前体细胞分化过程。 展开更多

关键词 间质干细胞 胰岛前体细胞 NOTCH1 Ngn3 人脐带间充质干细胞 γ分泌酶抑制剂 诱导

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Notch信号通路小分子抑制剂DAPT的11C标记及在正常兔体内的初步动态显像研究

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作者 张姝 靳晓娜 +2 位作者 党永红 霍力 李方 《国际放射医学核医学杂志》 2019年第1期47-52,共6页

目的研究正电子核素11C标记Notch通路抑制剂(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-S-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)的制备方法,并进行正常兔PET/CT的初步动态显像。方法采用细胞计数Kit-8法检测不同浓度DAPT和CH3-DAPT对人胰腺癌细胞株MiaPaCa-2增... 目的研究正电子核素11C标记Notch通路抑制剂(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-S-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)的制备方法,并进行正常兔PET/CT的初步动态显像。方法采用细胞计数Kit-8法检测不同浓度DAPT和CH3-DAPT对人胰腺癌细胞株MiaPaCa-2增殖的影响,并计算半抑制浓度(IC50)。以DAPT为前体,使用全自动合成仪进行合成,得到产物11C-N-甲基-DAPT(简称11C-DAPT),并用高效液相色谱(HPLC)仪进行分离纯化。正常新西兰兔静脉注射125.8 MBq(3.4 mCi)11C-DAPT后,用PET/CT进行全身动态扫描。在不同器官勾画感兴趣区,测量放射性浓度随时间的动态变化。结果DAPT和CH3-DAPT均可抑制人胰腺癌MiaPaCa-2细胞的增殖,呈浓度依赖关系,72 h的IC50分别为64.2、180.0 μmol/L。11C-DAPT合成过程大约30 min,未校正放射化学产率为25%~35%,放射化学纯度>95%。11C-DAPT主要经肾脏排泄,全身脏器中肾脏摄取最高,肝脏、肠道、肺和脑摄取低。静脉注射后7 min肝脏、肾脏摄取达到高峰,28 min后降低>50%。结论11C-DAPT的合成过程简便、快速,放射化学纯度高。PET/CT的初步显像为进一步探索11C-DAPT作为胰腺癌新型靶向分子探针奠定了基础。 展开更多

关键词 同位素标记 正电子发射断层显像计算机体层摄影术 NOTCH信号通路 γ分泌酶抑制剂 (3 5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-S-苯基甘氨酸叔丁酯 分子探针

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