本研究旨在探究鸡源IFN-λ3的克隆表达及抗病毒活性。试验成功扩增ChIFN-λ3基因并将其克隆到原核表达载体pET-32a(+)中。然后转化表达菌BL21并IPTG诱导表达,成功表达ChIFN-λ3重组蛋白(约35KD)。通过His柱纯化以及透析复性获得可溶蛋白...本研究旨在探究鸡源IFN-λ3的克隆表达及抗病毒活性。试验成功扩增ChIFN-λ3基因并将其克隆到原核表达载体pET-32a(+)中。然后转化表达菌BL21并IPTG诱导表达,成功表达ChIFN-λ3重组蛋白(约35KD)。通过His柱纯化以及透析复性获得可溶蛋白(0.191mg/ml)。通过体外抗VSV-EGFP病毒复制实验及Image Pro Plus数据分析IOD(sum)/Area(sum),结果显示复性后的重组ChIFN-λ3可以显著减少(约48.45%)VSV-EGFP在DF-1细胞系上的复制。结果表明,复性的原核表达重组ChIFN-λ3具有良好的抗病毒活性,为体外大量制备高效廉价的重组ChIFN-λ3奠定了基础。展开更多
目的:探讨白介素-28B(interleukin-28B,IL-28B)基因多态性与慢性乙型肝炎(c h r o n i c hepatitis B,CHB)病程进展的相关性.方法:本院门诊就诊患者分为如下组:无症状携带者组41例,进展性肝病组共65例;其中CHB组46例、肝硬化组19例.提...目的:探讨白介素-28B(interleukin-28B,IL-28B)基因多态性与慢性乙型肝炎(c h r o n i c hepatitis B,CHB)病程进展的相关性.方法:本院门诊就诊患者分为如下组:无症状携带者组41例,进展性肝病组共65例;其中CHB组46例、肝硬化组19例.提取全基因组DNA,并扩增IL-28B基因.单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)rs8099917及SNP rs12979860用限制性片段长度多态性法分型;对分型结果进行统计学分析.结果:SNP rs12979860位点CC、CT、TT 3个基因型,组成C、T两个等位基因.等位基因T的比例在无症状携带组、CHB组和肝硬化组中的比例分别为2.4%、8.7%和13.2%;差异有显著性意义(χ2=5.47,P<0.05).SNP rs8099917位点TT、TG、GG 3个基因型,组成T、G两个等位基因.等位基因G的比例在无症状携带组、CHB组和肝硬化组中的比例分别为8.5%、7.6%和7.9%;差异无统计学意义.结论:IL-28B基因多态性可能与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染后不同免疫状态相关并影响患者病情进展加重.SNP rs12979860的等位基因T可能是预示HBV感染后病情进展的影响因素.展开更多
文摘本研究旨在探究鸡源IFN-λ3的克隆表达及抗病毒活性。试验成功扩增ChIFN-λ3基因并将其克隆到原核表达载体pET-32a(+)中。然后转化表达菌BL21并IPTG诱导表达,成功表达ChIFN-λ3重组蛋白(约35KD)。通过His柱纯化以及透析复性获得可溶蛋白(0.191mg/ml)。通过体外抗VSV-EGFP病毒复制实验及Image Pro Plus数据分析IOD(sum)/Area(sum),结果显示复性后的重组ChIFN-λ3可以显著减少(约48.45%)VSV-EGFP在DF-1细胞系上的复制。结果表明,复性的原核表达重组ChIFN-λ3具有良好的抗病毒活性,为体外大量制备高效廉价的重组ChIFN-λ3奠定了基础。
文摘目的:探讨白介素-28B(interleukin-28B,IL-28B)基因多态性与慢性乙型肝炎(c h r o n i c hepatitis B,CHB)病程进展的相关性.方法:本院门诊就诊患者分为如下组:无症状携带者组41例,进展性肝病组共65例;其中CHB组46例、肝硬化组19例.提取全基因组DNA,并扩增IL-28B基因.单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)rs8099917及SNP rs12979860用限制性片段长度多态性法分型;对分型结果进行统计学分析.结果:SNP rs12979860位点CC、CT、TT 3个基因型,组成C、T两个等位基因.等位基因T的比例在无症状携带组、CHB组和肝硬化组中的比例分别为2.4%、8.7%和13.2%;差异有显著性意义(χ2=5.47,P<0.05).SNP rs8099917位点TT、TG、GG 3个基因型,组成T、G两个等位基因.等位基因G的比例在无症状携带组、CHB组和肝硬化组中的比例分别为8.5%、7.6%和7.9%;差异无统计学意义.结论:IL-28B基因多态性可能与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染后不同免疫状态相关并影响患者病情进展加重.SNP rs12979860的等位基因T可能是预示HBV感染后病情进展的影响因素.
