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Cartiex^(TM)Ⅱ型胶原蛋白对大鼠骨关节炎治疗效果研究
1
作者 沈艳华 潘明明 +5 位作者 孙菠 张乐文 胡宇蝶 肖敏 朱美红 周正宇 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS 北大核心 2024年第4期20-28,共9页
为探讨Cartiex^(TM)Ⅱ型胶原蛋白对碘乙酸钠诱导的大鼠骨关节炎(OA)的治疗作用,大鼠膝关节腔内单次注射碘乙酸钠溶液,建立大鼠骨关节炎模型;造模后分别以Ⅱ型胶原蛋白及牛骨胶原蛋白灌胃;试验期间每周测量大鼠饮食、饮水、体重、足底机... 为探讨Cartiex^(TM)Ⅱ型胶原蛋白对碘乙酸钠诱导的大鼠骨关节炎(OA)的治疗作用,大鼠膝关节腔内单次注射碘乙酸钠溶液,建立大鼠骨关节炎模型;造模后分别以Ⅱ型胶原蛋白及牛骨胶原蛋白灌胃;试验期间每周测量大鼠饮食、饮水、体重、足底机械痛;试验结束后心脏采血测量血清中前列腺素E2(PGE-2)、转化生长因子β(TGF-β)、金属基质降解酶13(MMP-13)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;取膝关节甲醛固定、脱钙后进行病理检查。结果表明:造模大鼠膝关节在试验期间出现明显肿胀,各给药组与OA模型组相比均有不同程度缓解。Ⅱ型胶原蛋白高、低剂量组能显著升高大鼠机械痛值,并显著降低血清中MMP-13、IL-1β、IL-6、TNF-α含量,显著升高PGE-2、TGF-β含量。Ⅱ型胶原蛋白干预后,大鼠关节炎症状明显改善,软骨组织增生,炎症细胞浸润明显减少,Mankin’s评分显著降低。综上,Ⅱ型胶原蛋白可调节骨关节炎大鼠血液中相关炎症因子表达,降低关节痛,减少炎症细胞浸润,改善滑膜组织炎症,并促进软骨增生,进而缓解骨关节炎症状;相对于阳性对照品,Cartiex^(TM)Ⅱ型胶原蛋白具有用量少、效果好、起效快的优点。 展开更多
关键词 大鼠 ⅱ型胶原蛋白 碘乙酸钠 骨关节炎
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性别差异对牛Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎模型的影响
2
作者 孙文婷 万盈盈 +4 位作者 杨家煕 王文乾 王皓男 叶婉婷 寇秋爱 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期25-34,共10页
目的构建雌性及雄性牛Ⅱ胶原诱导的关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,比较性别差异对CIA模型关节及关节外表现的影响。方法选用雌性及雄性SD大鼠并注射牛Ⅱ型胶原和弗氏完全佐剂诱导CIA模型,评估各组大鼠的一般情况、关节炎... 目的构建雌性及雄性牛Ⅱ胶原诱导的关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,比较性别差异对CIA模型关节及关节外表现的影响。方法选用雌性及雄性SD大鼠并注射牛Ⅱ型胶原和弗氏完全佐剂诱导CIA模型,评估各组大鼠的一般情况、关节炎指数、足肿胀度、血清炎症因子及纤溶酶原激活物抑制剂水平、脾指数、膝关节及踝关节病理、右后足爪骨破坏情况、肺间质病变情况。结果雌性CIA大鼠的关节炎指数在初次免疫后第21天较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05),但两组足肿胀度在观察的任一时间点均无显著差异(P>0.05);雌性CIA大鼠血清肿瘤坏死因子α、白介素1β和脾指数均较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05,P<0.001),纤溶酶原激活物抑制剂水平无显著差异(P>0.05);雌性CIA大鼠膝关节和踝关节病理的炎症细胞浸润及滑膜增生评分较雄性CIA大鼠显著升高(P<0.05),雌性CIA大鼠膝关节软骨损伤及右后足爪骨破坏程度均较雄性显著升高(P<0.05);雌性和雄性CIA大鼠均出现了肺间质炎症细胞浸润及轻度纤维化,但雌性比雄性的肺间质病变更重。结论使用SD大鼠构建的雌性及雄性CIA模型均能兼具关节炎及肺间质病变,但雌性CIA大鼠的病变程度更重,在使用CIA模型进行RA相关研究时应关注性别差异带来的影响。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 性别差异 牛ⅱ型胶原诱导的关节炎模型 间质性肺病
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高效液相色谱法测定非变性Ⅱ型胶原蛋白含量的研究
3
作者 周舒扬 查圣华 +1 位作者 姜水红 张宏 《中国食品添加剂》 CAS 2024年第8期217-222,共6页
研究非变性Ⅱ型胶原蛋白含量的测定方法,对样品中的目标成分进行测定和方法学验证分析。通过高效液相色谱法(HPLC)测定非变性Ⅱ型胶原蛋白的含量,考察线性、精密度、准确度、耐用性。实验结果表明,非变性Ⅱ型胶原蛋白(以L-羟脯氨酸计),... 研究非变性Ⅱ型胶原蛋白含量的测定方法,对样品中的目标成分进行测定和方法学验证分析。通过高效液相色谱法(HPLC)测定非变性Ⅱ型胶原蛋白的含量,考察线性、精密度、准确度、耐用性。实验结果表明,非变性Ⅱ型胶原蛋白(以L-羟脯氨酸计),在0~398.48μg/mL范围内线性关系较好;精密度较好;平均回收率为99.2%,RSD为0.87%;耐用性较好。经过全面的方法学验证,该实验方法稳定可靠,适用于高效液相色谱法测定非变性Ⅱ型胶原蛋白的含量,并可应用于相关产品的质量控制工作。 展开更多
关键词 非变性ⅱ型胶原蛋白 L-羟脯氨酸 检测方法 高效液相色谱
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C-末端Ⅱ型胶原和骨桥蛋白与绝经后女性退变性膝骨关节炎疼痛的相关性 被引量：1
4
作者 刘宇飞 刘凯 +2 位作者 艾奇 靳宜 王亚非 《新疆医科大学学报》 CAS 2023年第6期768-771,776,共5页
目的 探究C-末端Ⅱ型胶原(CTX-Ⅱ)和骨桥蛋白(OPN)与绝经后女性退变性膝骨关节炎疼痛的相关性。方法 以2019年2月-2021年7月北京市朝阳区中医医院骨伤科收治的96例绝经后女性退变性膝骨关节炎患者为研究对象根据Kellgren-Lawrence分级... 目的 探究C-末端Ⅱ型胶原(CTX-Ⅱ)和骨桥蛋白(OPN)与绝经后女性退变性膝骨关节炎疼痛的相关性。方法 以2019年2月-2021年7月北京市朝阳区中医医院骨伤科收治的96例绝经后女性退变性膝骨关节炎患者为研究对象根据Kellgren-Lawrence分级将患者分为轻度组、中度组与重度组。收集3组患者血清,采用酶联免疫吸附法试剂盒检测血清CTX-Ⅱ、OPN水平。采用视觉模拟评分法(Visual analogue scale, VAS)与西部安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数评分(Western Ontario and McMaster University Osteoarthritis Index, WOMAC)评估3组患者疼痛程度。采用单因素方差分析法分析3组患者临床指标差异,采用Pearson法分析CTX-Ⅱ、OPN水平与其他临床指标的相关性,多元逐步回归模型分析影响VAS、WOMAC评分的临床因素。结果 3组患者随着患者症状加重,血清CTX-Ⅱ、OPN水平与VAS、WOMAC评分均升高,差异有统计学意义(P<0.05),病程、年龄、绝经年龄、BMI差异无统计学意义(P>0.05)。血清CTX-Ⅱ、OPN水平与VAS评分、WOMAC评分均呈显著正相关(P<0.05),CTX-Ⅱ、OPN水平是影响VAS与WOMAC评分的临床指标。结论 CTX-Ⅱ、OPN水平升高与绝经后女性退变性膝骨关节炎患者疼痛呈显著正相关。 展开更多
关键词 C-末端ⅱ型胶原 骨桥蛋白 绝经后女性退变性膝骨关节炎 多元逐步回归模型
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Ⅱ型胶原病诊治进展 被引量：1
5
作者 何琴 吴蔚 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2023年第2期180-188,共9页
Ⅱ型胶原病是由于COL2A1基因变异导致的一大类骨骼-软骨发育异常的疾病。COL2A1基因位于常染色体12q13.11-q13.2上,主要编码合成Ⅱ型胶原蛋白。COL2A1突变导致各种骨骼异常、口面部特殊体征和眼部、听觉损害,各类型疾病表现形式广泛,基... Ⅱ型胶原病是由于COL2A1基因变异导致的一大类骨骼-软骨发育异常的疾病。COL2A1基因位于常染色体12q13.11-q13.2上,主要编码合成Ⅱ型胶原蛋白。COL2A1突变导致各种骨骼异常、口面部特殊体征和眼部、听觉损害,各类型疾病表现形式广泛,基因-表型相关性尚不明确。本文综述COL2A1突变导致骨骼-软骨发育异常的疾病临床表型和相关变异,同时对目前的诊治进展进行阐述。 展开更多
关键词 ⅱ型胶原病 COL2A1基因 突变 表型
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ATG5通过细胞自噬调控Ⅱ型胶原表达的实验研究
6
作者 邓琳 先梦麟 +3 位作者 杨玉有 耿娜娜 邝彪 郭风劲 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第17期1828-1837,共10页
目的 探究自噬相关蛋白ATG5通过影响自噬功能调控软骨细胞中Ⅱ型胶原的表达水平。方法 GEO数据库下载13例人软骨组织样本的转录组数据分析ATG5和COL2A1表达的相关性。雷帕霉素(Rapamycin, Rapa)和巴佛洛霉素A1(Bafilomycin A1,BafA1)处... 目的 探究自噬相关蛋白ATG5通过影响自噬功能调控软骨细胞中Ⅱ型胶原的表达水平。方法 GEO数据库下载13例人软骨组织样本的转录组数据分析ATG5和COL2A1表达的相关性。雷帕霉素(Rapamycin, Rapa)和巴佛洛霉素A1(Bafilomycin A1,BafA1)处理人软骨细胞C28/I2,Western blot及免疫荧光检测Ⅱ型胶原(CollagenⅡ,COL2)的表达水平。构建人源COL2A1启动子质粒,双荧光素酶报告实验检测过表达ATG5对COL2A1启动子转录活性的影响。mRFP-GFP-LC3自噬双标腺病毒动态监测过表达和敲低ATG5后自噬流的变化。Western blot检测过表达或敲低ATG5后Rapa及BafA1对COL2、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平的影响。结果 GEO数据库相关性分析结果显示在人软骨组织中ATG5和COL2A1的mRNA表达呈现正相关;Rapa和BafA1分别显著促进和抑制C28/I2细胞COL2的表达(P<0.05);成功构建人源COL2A1启动子质粒,并用双荧光素酶报告实验证实过表达ATG5上调COL2A1启动子转录活性(P<0.01);自噬双荧光病毒处理后,过表达ATG5组LC3-GFP荧光淬灭(P<0.01),自噬激活;敲低ATG5后,LC3-GFP荧光增强(P<0.05),自噬抑制;Rapa促进过表达ATG5上调的COL2和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达(P<0.05),BafA1显示与Rapa相反的作用(P<0.05)。结论 过表达ATG5上调Ⅱ型胶原的表达,且ATG5调控Ⅱ型胶原的表达依赖于细胞自噬。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨细胞 ⅱ型胶原 细胞自噬 ATG5
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清热养阴除湿汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠炎症因子的调节作用
7
作者 张阳利 张净 +1 位作者 王北 刘密凤 《中医药导报》 2023年第8期1-7,共7页
目的:观察清热养阴除湿汤(QYCD)对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠的保护作用。方法:采用牛Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,将24只CIA大鼠随机分为模型组(CIA组)、甲氨蝶呤组(0.625 mg/kg)、清热养阴除湿汤低剂量组(17 g/kg)、清热养阴除... 目的:观察清热养阴除湿汤(QYCD)对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠的保护作用。方法:采用牛Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,将24只CIA大鼠随机分为模型组(CIA组)、甲氨蝶呤组(0.625 mg/kg)、清热养阴除湿汤低剂量组(17 g/kg)、清热养阴除湿汤高剂量组(34 g/kg),每组6只,同时随机取6只大鼠作为正常对照组(Control组)。连续给药5周,每周观察大鼠足肿胀度及炎症指数;HE染色法观察大鼠踝关节组织病理形态学改变;micro-CT法观察骨破坏程度;ELISA法检测血清IL-4、IL-17A、TGF-β、IFN-γ水平;荧光PCR法检测脾脏组织T-bet mRNA、Gata-3 mRNA、RORγt mRNA、Foxp3 mRNA的表达。结果:初次免疫后3周CIA组大鼠右后足关节肿胀程度高于Control组(P<0.05),5周时CIA组大鼠关节炎评分最高(P<0.05)。甲氨蝶呤(MTX)、低剂量清热养阴除湿汤(QYCD-L)、高剂量清热养阴除湿汤(QYCD-H)可以缓解大鼠足关节的肿胀程度(P<0.05),减轻炎症细胞浸润、滑膜增殖及软骨表面的侵蚀,CIA大鼠骨破坏在一定程度上被缓解。QYCD-L组、QYCD-H组大鼠血清IFN-γ、IL-17A水平均低于CIA组(P<0.01或P<0.05),而血清IL-4、TGF-β水平均显著高于CIA组(P<0.01)。QYCD-L组、QYCD-H组大鼠T-bet mRNA、RORγt mRNA、Foxp3 mRNA相对表达量均高于CIA组(P<0.05或P<0.01),但Gata-3mRNA相对表达量与CIA组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:清热养阴除湿汤能有效改善CIA大鼠关节炎症状,其机制可能与调节炎症细胞因子及其转录因子水平有关。 展开更多
关键词 ⅱ型胶原诱导性关节炎模型 清热养阴除湿汤 炎症因子 骨破坏 甲氨蝶呤 大鼠
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阿克他利对Ⅱ型胶原性关节炎小鼠的治疗作用及部分机制研究 被引量：19
8
作者 金涌 李俊 +2 位作者 张运芳 李常玉 徐叔云 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期814-817,共4页
目的　研究阿克他利 (Acta)对小鼠Ⅱ型胶原性关节炎 (CIA)的治疗作用。方法　采用Ⅱ型胶原 (CⅡ )乳剂皮内注射诱导的小鼠CIA模型。在此基础上 ,检测小鼠足肿胀、免疫功能的改变 ,以及对CⅡ的迟发性变态反应 (DTH)和血清中抗CⅡ抗体的测... 目的　研究阿克他利 (Acta)对小鼠Ⅱ型胶原性关节炎 (CIA)的治疗作用。方法　采用Ⅱ型胶原 (CⅡ )乳剂皮内注射诱导的小鼠CIA模型。在此基础上 ,检测小鼠足肿胀、免疫功能的改变 ,以及对CⅡ的迟发性变态反应 (DTH)和血清中抗CⅡ抗体的测定 ,同时进行了病理组织学的检查。结果　Acta(10 ,30 ,90mg·kg-1)ig对CⅡ诱导的小鼠足肿胀有明显的抑制作用 ;体外研究发现 ,Acta(10 ,30 ,90mg·kg-1)能使CIA小鼠过高的ConA增殖反应和IL 2的产生恢复至接近正常 ,同时对CIA小鼠过高的IL 1产生有明显的抑制作用 ;Acta(10 ,30 ,90mg·kg-1)ig可以明显减轻CⅡ诱发迟发性变态反应 (DTH) ,但Acta对CIA小鼠体内的抗体的产生无显著影响。病理学检查表明 ,Acta(10 ,30 ,90mg·kg-1)ig可以减轻CIA小鼠的骨膜增生和软骨破坏。结论　Acta对CIA小鼠具有治疗作用 ,该作用可能是通过细胞免疫调节实现的。 展开更多
关键词 阿克他利 ⅱ型胶原性关节炎 抗ⅱ型胶原抗体 沙物实验 治疗 免疫性疾病
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Ⅱ型胶原蛋白抗血清的制备和检测 被引量：8
9
作者 姜旭淦 朱敏娟 +3 位作者 葛彦文 吴亮 陈盛霞 许化溪 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2008年第1期34-36,39,共4页
目的:探讨Ⅱ型胶原蛋白(collagen protein typeⅡ,CⅡ)抗体产生规律,制备CⅡ抗血清。方法:采用纯化的鸡和猪CⅡ免疫新西兰白兔,每隔10 d收集血清,以改良间接ELISA法检测抗CⅡ抗体效价。结果:鸡CⅡ免疫新西兰白兔后,第10天抗体效价为1∶3... 目的:探讨Ⅱ型胶原蛋白(collagen protein typeⅡ,CⅡ)抗体产生规律,制备CⅡ抗血清。方法:采用纯化的鸡和猪CⅡ免疫新西兰白兔,每隔10 d收集血清,以改良间接ELISA法检测抗CⅡ抗体效价。结果:鸡CⅡ免疫新西兰白兔后,第10天抗体效价为1∶3 200,第20天升至1∶204 800;加强免疫后,第30天和第40天抗体效价分别达到1∶409 600和1∶819 200。猪CⅡ免疫新西兰白兔后,第10天血清中未能检测出抗体,第20天血清抗体效价为1∶3 200;加强免疫后,第30天和第40天抗体效价分别为1∶51 200和1∶102 400。结论:采用纯化的鸡和猪CⅡ免疫新西兰白兔后,经一定潜伏期血清中出现抗体,可以获得高效价抗CⅡ抗体血清。抗体产生情况符合机体初次及再次免疫应答的有关规律,但血清抗体产生的潜伏期和效价与不同种属来源的胶原蛋白有关。 展开更多
关键词 鸡 猪 ⅱ型胶原蛋白 抗ⅱ型胶原蛋白抗体 酶联免疫吸附实验
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类风湿性关节炎患者血清抗Ⅱ型胶原抗体的检测及意义 被引量：10
10
作者 刘玲 朱平 +2 位作者 王彦宏 樊春梅 陈庆平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期281-283,共3页
目的　探讨类风湿性关节炎 (RA)患者血清抗Ⅱ型胶原 (CⅡ )抗体阳性的意义。方法　分别以人Ⅱ型胶原蛋白(HCⅡ )及牛Ⅱ型胶原蛋白CⅡ (BCⅡ )作为包被抗原进行间接ELISA法 ,检测 30例RA患者 ,对照组 (30例非RA的风湿病患者和 34例健康... 目的　探讨类风湿性关节炎 (RA)患者血清抗Ⅱ型胶原 (CⅡ )抗体阳性的意义。方法　分别以人Ⅱ型胶原蛋白(HCⅡ )及牛Ⅱ型胶原蛋白CⅡ (BCⅡ )作为包被抗原进行间接ELISA法 ,检测 30例RA患者 ,对照组 (30例非RA的风湿病患者和 34例健康人 )血清抗CⅡ抗体。结果　以HCⅡ及BCⅡ作为包被抗原检测RA患者血清抗CⅡ抗体的阳性率分别约为 30 .0 %和 33.3% ;对照组血清中抗体阳性率均约为 1.6 % ;二者差异极其显著 (P <0 .0 1)。抗CⅡ抗体阳性的RA患者RF的阳性率高于抗CⅡ抗体阴性的RA患者。与HCⅡ和BCⅡ均发生阳性反应的血清 8例 ,均为早期RA患者。结论　抗CⅡ抗体可作为判断RA患者病情的辅助手段之一 。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎(RA) 酶联免疫吸附实验 ⅱ型胶原蛋白(Cⅱ) 抗ⅱ型胶原抗体
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重组人Ⅱ型胶原250-270多肽对特异性体液免疫的抑制作用 被引量：4
11
作者 王宏坤 朱平 +4 位作者 李晓燕 郑朝晖 贾俊峰 丁进 樊春梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期742-744,共3页
目的:研究口服重组人Ⅱ型胶原250-270多肽(CⅡ250-270)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠特异性体液免疫反应的抑制作用,为应用口服CⅡ250-270治疗类风湿关节炎提供理论依据。方法:ELISA测定加强免疫后小鼠血清中抗原特异性抗体的表达,ELISPO... 目的:研究口服重组人Ⅱ型胶原250-270多肽(CⅡ250-270)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠特异性体液免疫反应的抑制作用,为应用口服CⅡ250-270治疗类风湿关节炎提供理论依据。方法:ELISA测定加强免疫后小鼠血清中抗原特异性抗体的表达,ELISPOT检测小鼠脾脏淋巴细胞中抗原特异性抗体形成细胞。结果:口服重组人CⅡ250-270小鼠血清中抗CⅡ和抗CⅡ250-270的IgG抗体水平[A值分别为(0.82±0.02)、(0.84±0.04)]比CⅡ免疫对照组[抗CⅡ的IgG抗体水平,A值为(1.01±0.06)]显著降低,而且特异性抗CⅡ250-270的IgG抗体反应在口服多肽组被明显抑制(P<0.01);口服重组人CⅡ250-270小鼠的CⅡ和CⅡ250-270特异性抗体形成脾细胞的增殖频率分别为(158±9计数/孔)、(181±10计数/孔),比CⅡ免疫对照组[CⅡ特异性抗体形成脾细胞的增殖频率为(247±16计数/孔)]也显著减少(P<0.05)。结论:口服重组人CⅡ250-270多肽具有抑制CIA小鼠的特异性体液免疫的作用,可能是此疗法治疗CIA多发性关节炎的重要机制。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 胶原诱导性关节炎 ⅱ型胶原 ⅱ型胶原250—270多肽 口服耐受
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血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体检测法的建立与应用 被引量：3
12
作者 姜旭淦 陈盛霞 +8 位作者 吴琴 汤俊民 马建芬 储青 吴亮 颜小云 刘荻 姚加平 许化溪 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期176-178,共3页
目的建立血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的ELISA法,探讨其在类风湿关节炎(RA)患者中的应用价值。方法以自提可溶性鸡Ⅱ型胶原蛋白(soluble chicken collagen type Ⅱ,SCCⅡ)作为包被抗原,优化实验条件,建立抗Ⅱ型胶原蛋白抗体间接ELISA法。对12... 目的建立血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的ELISA法,探讨其在类风湿关节炎(RA)患者中的应用价值。方法以自提可溶性鸡Ⅱ型胶原蛋白(soluble chicken collagen type Ⅱ,SCCⅡ)作为包被抗原,优化实验条件,建立抗Ⅱ型胶原蛋白抗体间接ELISA法。对124例RA病人和54例健康人血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体进行检测。结果血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的检测条件为:SCCⅡ包被浓度为20μg/ml;以含10%羊血清的缓冲液进行封闭、稀释血清和酶标抗体;采用双波长(450nm/630nm)进行测定。RA患者和健康人血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体阳性率分别为19.35%(24/124)和1.85%(1/54),两组有明显的统计学差异(P<0.01)。结论以SCCⅡ为包被抗原检测抗Ⅱ型胶原蛋白抗体可作为判断RA患者病情的一个辅助诊断指标。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 酶联免疫吸附实验 ⅱ型胶原蛋白 抗ⅱ型胶原蛋白抗体
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可溶性鸡Ⅱ型胶原蛋白的理化特性研究 被引量：2
13
作者 姜旭淦 陈盛霞 +1 位作者 吴亮 许化溪 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期268-271,共4页
目的研究可溶性鸡Ⅱ型胶原蛋白(SCCⅡ)的物理化学特性。方法用光谱法测定吸收峰和等电点,HPLC法检测氨基酸组成,乌氏黏度计测定不同条件下溶液的增比黏度。用SDS-PAGE测定相对分子量(Mr),结合免疫印迹法分析胃蛋白酶、胰蛋白酶、α-糜... 目的研究可溶性鸡Ⅱ型胶原蛋白(SCCⅡ)的物理化学特性。方法用光谱法测定吸收峰和等电点,HPLC法检测氨基酸组成,乌氏黏度计测定不同条件下溶液的增比黏度。用SDS-PAGE测定相对分子量(Mr),结合免疫印迹法分析胃蛋白酶、胰蛋白酶、α-糜蛋白酶和Ⅱ型胶原酶作用于SCCⅡ和热变性后的SCCⅡ(D-SCCⅡ)的酶解产物。结果 SDS-PAGE显示SCCⅡ亚基的Mr约为120×103,能与抗SCCⅡ抗体反应;D-SCCⅡ含有10多条免疫印迹呈阳性反应的片段。SCCⅡ溶液的最大吸收峰为230 nm,等电点pH约6.25。氨基酸组成中,Gly、Pro、Glu和Ala含量高,芳香族氨基酸低。SCCⅡ溶液的增比黏度随浓度的增加而增加,在25～45℃范围内随着温度的升高逐渐下降。在胃蛋白酶和糜蛋白酶作用下SCCⅡ的电泳和免疫印迹图谱无变化,Ⅱ型胶原酶可使SCCⅡ快速水解,胰蛋白酶作用后出现10条免疫印迹阳性条带;D-SCCⅡ经酶解后免疫印迹无阳性条带。结论 SCCⅡ具有独特的物理化学性质,对消化酶有一定抵抗作用,胰蛋白酶作用后可出现多条活性片段。 展开更多
关键词 ⅱ型胶原蛋白 类风湿关节炎 胰蛋白酶 ⅱ型胶原酶
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Ⅱ型胶原蛋白与弗氏完全佐剂大鼠关节炎模型的建立和比较 被引量：54
14
作者 林红 贺永怀 +2 位作者 黎燕 陆应麟 沈倍奋 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1999年第1期1-6,共6页
目的对Ⅱ型胶原蛋白（ＣⅡ－Ａ）和弗氏完全佐剂（Ａ－Ａ）大鼠关节炎模型在大体外观和足部组织病理学切片等方面进行观察比较。方法分别采用Ⅱ型胶原蛋白和弗氏完全佐剂诱导建立大鼠关节炎模型，利用排水法对大鼠足部体积进行测定，并... 目的对Ⅱ型胶原蛋白（ＣⅡ－Ａ）和弗氏完全佐剂（Ａ－Ａ）大鼠关节炎模型在大体外观和足部组织病理学切片等方面进行观察比较。方法分别采用Ⅱ型胶原蛋白和弗氏完全佐剂诱导建立大鼠关节炎模型，利用排水法对大鼠足部体积进行测定，并将大鼠后足进行组织病理学切片观察。结果从大体外观和足部病理切片上两种大鼠模型均显示出有明显的病变，但ＣⅡ－Ａ大鼠与Ａ－Ａ大鼠比较，滑膜增生及软骨破坏等继发性病变特征更为明显，关节炎持续时间也较长，更接近于人的类风湿性关节炎。结论ＣⅡ－Ａ大鼠模型与Ａ－Ａ相比是研究ＲＡ较为理想的动物模型。 展开更多
关键词 大鼠模型 关节炎 足部 ⅱ型胶原蛋白 佐剂 体外 组织病理学 病变 利用 诱导
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胰酶联合Ⅱ型胶原酶分离培养髓核细胞:培养基中葡萄糖浓度的选择 被引量：2
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作者 张存鑫 马进峰 王德春 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第20期2899-2906,共8页
背景:椎间盘退变是脊柱退行性疾病的发病基础,研究椎间盘的退变因素,对脊柱退行性的疾病的预防和治疗有重要意义。目的:采用胰酶联合Ⅱ型胶原酶消化法体外分离培养兔髓核细胞,并观察髓核细胞在不同葡萄糖浓度培养基中的生长及增殖状况,... 背景:椎间盘退变是脊柱退行性疾病的发病基础,研究椎间盘的退变因素,对脊柱退行性的疾病的预防和治疗有重要意义。目的:采用胰酶联合Ⅱ型胶原酶消化法体外分离培养兔髓核细胞,并观察髓核细胞在不同葡萄糖浓度培养基中的生长及增殖状况,确立最适宜髓核细胞生长的葡萄糖浓度。方法:胰酶联合Ⅱ型胶原酶消化法分离、培养兔髓核细胞,倒置显微镜观察细胞形态并计数细胞数量,绘制细胞生长曲线。苏木精-伊红和甲苯胺蓝染色观察细胞形态。细胞免疫组织化学染色结合免疫荧光染色检测Ⅱ型胶原蛋白表达情况。分别使用0,6.25,12.5,17.5,25 mmol/L葡萄糖培养基培养髓核细胞24 h后,检测各组髓核细胞增殖及凋亡情况。结果与结论:(1)髓核细胞形态:兔髓核细胞染色后镜下观察呈多角形、短梭形,有一两个核仁,随着传代次数增加,细胞伸出伪足,胞体逐渐变细长;(2)基因表达:体外分离培养髓核细胞的Ⅱ型胶原蛋白及聚集蛋白多糖基因均可稳定表达;(3)细胞增殖:各组中细胞增殖比率以葡萄糖17.5 mmol/L组最高,显著高于葡萄糖0,25 mmol/L组(P<0.05或P<0.01);(4)细胞凋亡:葡萄糖0 mmol/L组细胞凋亡率最高(P<0.05),其他各组差异无显著性意义(P>0.05)。(4)结果证实:胰酶联合Ⅱ型胶原酶消化法可收获较多的原代髓核细胞,葡萄糖浓度17.5 mmol/L比较适宜髓核细胞体外培养。 展开更多
关键词 组织工程 椎间盘 细胞凋亡 葡萄糖 组织构建 软骨细胞 髓核细胞 培养基 细胞培养技术 细胞增殖 ⅱ型胶原 聚集蛋白多糖 ⅱ型胶原酶消化法 国家自然科学基金
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T-2毒素对软骨Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖合成的影响以及硒的保护作用 被引量：18
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作者 陈静宏 曹峻岭 +5 位作者 楚雍烈 杨占田 师钟丽 王红林 郭雄 王治伦 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期381-385,共5页
目的探讨T-2毒素对软骨细胞主要间质成分Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖合成的影响和硒的保护作用。方法采用 MTT法检测T-2毒素对软骨细胞存活率的影响;用TB染色法检测人软骨细胞蛋白聚糖表达;免疫组织化学检测人软骨细胞胶原蛋白Ⅱ表达;RT-PC... 目的探讨T-2毒素对软骨细胞主要间质成分Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖合成的影响和硒的保护作用。方法采用 MTT法检测T-2毒素对软骨细胞存活率的影响;用TB染色法检测人软骨细胞蛋白聚糖表达;免疫组织化学检测人软骨细胞胶原蛋白Ⅱ表达;RT-PCR检测人软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖mRNA表达。结果 T-2毒素在浓度为 0．001-2 mg／L的范围内,对软骨细胞的作用呈较典型的浓度依赖关系和时间依赖关系,而且随着作用时间的延长,浓度依赖关系更加明显。T-2毒素(10～20μg／L)可以抑制软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖的合成及其mRNA表达。而加硒能较明显刺激软骨细胞蛋白聚糖mRNA表达,部分减弱T-2毒素的这种抑制,有一定的保护作用,但不显示对T-2 毒素引起的Ⅱ型胶原蛋白及其mRNA表达的保护作用。结论 T-2毒素对软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖合成有明显的抑制作用,微量元素硒对T-2毒素引起的软骨细胞蛋白聚糖改变有一定保护作用。 展开更多
关键词 ⅱ型胶原蛋白 蛋白聚糖 T-2毒素 软骨细胞 硒
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青藤碱对Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠滑膜炎症的抑制作用及其机理探讨 被引量：29
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作者 刘晓玲 陈光星 +3 位作者 李晓娟 黄清春 刘清平 陈纪藩 《广州中医药大学学报》 CAS 2002年第3期214-217,共4页
【目的】研究青藤碱对于胶原诱导型关节炎 (CIA)大鼠滑膜及表达IL - 6mRNA的影响。【方法】采用CIA大鼠动物模型 ,HE常规病理切片 ,观察青藤碱对滑膜的炎性浸润、巨噬A型细胞增生、纤维组织增生及原代培养滑膜细胞表达IL - 6mRNA的影响... 【目的】研究青藤碱对于胶原诱导型关节炎 (CIA)大鼠滑膜及表达IL - 6mRNA的影响。【方法】采用CIA大鼠动物模型 ,HE常规病理切片 ,观察青藤碱对滑膜的炎性浸润、巨噬A型细胞增生、纤维组织增生及原代培养滑膜细胞表达IL - 6mRNA的影响。【结果】青藤碱可明显减轻滑膜的炎性浸润、巨噬A细胞和纤维组织增生 ,减少滑膜细胞IL - 6mRNA的表达。【结论】青藤碱可以通过抑制滑膜细胞恶性增殖及IL - 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 作用机理 青藤碱 ⅱ型胶原 大鼠 滑膜炎 白细胞介素6 基因表达
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口服Ⅱ型胶原蛋白诱导免疫耐受治疗佐剂关节炎的研究 被引量：15
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作者 朱平 冷南 +5 位作者 王彦宏 王树宽 吴振彪 张惠琴 解惠 樊春梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期305-307,共3页
目的： 观察口服Ⅱ型胶原蛋白（ｔｙｐｅＩＩｃｏｌｌａｇｅｎ， ＣＩＩ） 对大鼠佐剂关节炎（ａｄｊｕｖａｎｔａｒｔｈｒｉｔｉｓ， ＡＡ） 的治疗作用。方法： 采用酶消化法， 提取牛软骨ＣＩＩ， 经口插管灌注将ＣＩＩ给予佐剂关节... 目的： 观察口服Ⅱ型胶原蛋白（ｔｙｐｅＩＩｃｏｌｌａｇｅｎ， ＣＩＩ） 对大鼠佐剂关节炎（ａｄｊｕｖａｎｔａｒｔｈｒｉｔｉｓ， ＡＡ） 的治疗作用。方法： 采用酶消化法， 提取牛软骨ＣＩＩ， 经口插管灌注将ＣＩＩ给予佐剂关节炎ＳＤ大鼠。结果： 口服ＣＩＩ可推迟ＡＡ的发病， 降低发病率， 明显减轻病变关节的炎症反应和使病程缩短。结论： 口服ＣＩＩ可诱导抗原特异性免疫耐受并对淋巴细胞的增殖反应有抑制作用， 而且此种免疫耐受作用可以剂量依赖的方式通过淋巴细胞转移。 展开更多
关键词 ⅱ型胶原蛋白 免疫耐受 佐剂关节炎 治疗
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可溶性猪软骨Ⅱ型胶原蛋白的提取与鉴定 被引量：15
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作者 宁志刚 王富友 +2 位作者 崔运利 熊娟 杨柳 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期954-955,958,共3页
目的从猪膝关节软骨中提取纯化Ⅱ型胶原蛋白,并对其进行鉴定。方法选择猪膝关节软骨为提取原料,用盐酸胍去除蛋白多糖、胃蛋白酶两步消化、氯化钠盐析、超纯水透析、离心浓缩等方法提取纯化Ⅱ型胶原蛋白;采用SDS-PAGE、氨基酸成分分析... 目的从猪膝关节软骨中提取纯化Ⅱ型胶原蛋白,并对其进行鉴定。方法选择猪膝关节软骨为提取原料,用盐酸胍去除蛋白多糖、胃蛋白酶两步消化、氯化钠盐析、超纯水透析、离心浓缩等方法提取纯化Ⅱ型胶原蛋白;采用SDS-PAGE、氨基酸成分分析对提取的Ⅱ型胶原蛋白进行鉴定;利用冻干的方法计算提取的浓度。结果 SDS-PAGE电泳结果显示提取的Ⅱ型胶原蛋白分子量约120 kD;氨基酸成分分析显示甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸含量最高,并且可以检出羟脯氨酸、羟赖氨酸,符合Ⅱ型胶原特征;该法提取的Ⅱ型胶原蛋白浓度为66 mg/mL。结论从猪关节软骨提取的Ⅱ型胶原蛋白纯度高,方法简便,提取的胶原蛋白浓度更高。 展开更多
关键词 ⅱ型胶原蛋白 软骨 电泳 聚丙烯酰氨凝胶
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桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素1β活性的影响 被引量：39
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作者 赵慧 顾立刚 +1 位作者 陈小军 孟明 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2005年第11期27-29,共3页
目的观察桂枝芍药知母汤对类风湿性关节炎(RA)的治疗作用,并探讨其作用机理。方法以Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的免疫性关节炎(CIA)大鼠为RA动物模型,通过测量其关节肿胀程度、关节炎指数观察桂枝芍药知母汤大、中剂量组的治疗效果;采用ELISA法... 目的观察桂枝芍药知母汤对类风湿性关节炎(RA)的治疗作用,并探讨其作用机理。方法以Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的免疫性关节炎(CIA)大鼠为RA动物模型,通过测量其关节肿胀程度、关节炎指数观察桂枝芍药知母汤大、中剂量组的治疗效果;采用ELISA法测定大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)活性,小鼠胸腺细胞法检测血清中白细胞介素1β(IL-1β)活性,探讨其作用机理。结果桂枝芍药知母汤大、中剂量组均可使大鼠踝关节肿胀程度和关节炎指数明显减少,与模型组比较差异显著(P<0.01);同时发现模型组大鼠血清TNF-α含量及IL-1β活性明显升高,治疗组起下调作用,接近正常组水平,与模型组比较差异显著(P<0.01)。结论TNF-α、IL-1β异常增高,与RA发病密切相关。桂枝芍药知母汤可以降低CIA大鼠血清中异常增高的TNF-α、IL-1β浓度,从而抑制或控制RA病情发展。 展开更多
关键词 桂枝芍药知母汤 ⅱ型胶原诱导性关节炎 肿瘤坏死因子-Α 白细胞介素1Β
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