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羊肉产品中若干动物源性成分的七重PCR检测技术应用研究 被引量：34
1
作者 冯海永 韩建林 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第9期85-90,共6页
试验建立了猪、牛、绵羊、山羊、鸡、马和牦牛种属鉴别的七重PCR体系,分析了牛、牦牛、山羊源性成分七重PCR检测的灵敏度,检测了10种市售羊肉产品中的动物源性成分。结果表明,采用常规的琼脂糖凝胶电泳可以区分157～517 bp的片段及相互... 试验建立了猪、牛、绵羊、山羊、鸡、马和牦牛种属鉴别的七重PCR体系,分析了牛、牦牛、山羊源性成分七重PCR检测的灵敏度,检测了10种市售羊肉产品中的动物源性成分。结果表明,采用常规的琼脂糖凝胶电泳可以区分157～517 bp的片段及相互差异在41 bp以上的多重PCR扩增产物,从而实现对这7个物种的快速及准确鉴别,其中对3个物种(牛、牦牛、山羊)DNA的检测灵敏度在2.5 ng左右;所检测的10种羊肉产品中有2种并不是包装上所宣称的羊肉,而是混杂有牛肉或完全用牛肉替代。 展开更多
关键词 七重pcr 羊肉产品 动物源性成分 种属鉴别
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转基因玉米的七重PCR鉴定方法
2
作者 陈贞 芦春斌 +3 位作者 杨梦婕 马骏 白卫斌 吴希阳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期161-164,共4页
以玉米内源基因IVR、外源抗除草剂基因(BAR、PAT)、抗虫基因Cry1Ab、筛选基因NPTII、CaMV35S启动子和NOS终止子为检测的目的片段,分别设计了7对引物,通过研究较佳引物终浓度配比和退火温度,建立了玉米转基因成分七重PCR检测体系。结果表... 以玉米内源基因IVR、外源抗除草剂基因(BAR、PAT)、抗虫基因Cry1Ab、筛选基因NPTII、CaMV35S启动子和NOS终止子为检测的目的片段,分别设计了7对引物,通过研究较佳引物终浓度配比和退火温度,建立了玉米转基因成分七重PCR检测体系。结果表明,建立的七重PCR体系用于同时检测内源基因和转基因成分是可行的,检测方法效率高、稳定性好。 展开更多
关键词 玉米 转基因成分 七重pcr检测
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七重PCR检测技术在羊肉产品中若干动物源性成分检测中的应用 被引量：1
3
作者 孙虹 《食品安全导刊》 2018年第27期139-139,共1页
近年来,食品安全欺诈问题日益突出,经常出现肉制品掺假现象,在肉类产业中,羊肉是其中的重要组成部分,消费需求极,。因此,本文基于七重PCR检测技术建立了羊肉产品中若干动物源性成分检测方法。本文从试验材料、试验方法、结果分析这3个... 近年来,食品安全欺诈问题日益突出,经常出现肉制品掺假现象,在肉类产业中,羊肉是其中的重要组成部分,消费需求极,。因此,本文基于七重PCR检测技术建立了羊肉产品中若干动物源性成分检测方法。本文从试验材料、试验方法、结果分析这3个方面进行分析,基于过往研究成果,对羊肉熟制品进行检验并分析,以此分析七重PCR检测技术的实际应用情况。 展开更多
关键词 基因组DNA样品 凝胶成像系统 七重pcr产物
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多重PCR检测转基因水稻的转基因成分 被引量：26
4
作者 魏霜 陈贞 +3 位作者 芦春斌 马骏 白卫滨 吴希阳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期159-162,共4页
以水稻内源基因SPS、外源抗虫基因Cry1Ab、外源抗虫基因Cry1Ab/Ac、外源抗虫基因Btc、报告基因GUS、NOS终止子和CaMV35S启动子为检测对象,设计7对引物,通过优化PCR扩增体系中不同引物浓度的配比及退火温度,建立水稻转基因成分的七重PCR... 以水稻内源基因SPS、外源抗虫基因Cry1Ab、外源抗虫基因Cry1Ab/Ac、外源抗虫基因Btc、报告基因GUS、NOS终止子和CaMV35S启动子为检测对象,设计7对引物,通过优化PCR扩增体系中不同引物浓度的配比及退火温度,建立水稻转基因成分的七重PCR检测体系。结果表明:建立的七重PCR体系能有效检测出水稻及其他作物(大豆、玉米、棉花籽、菜籽粕)中的转基因成分,检测过程简便、特异性好。 展开更多
关键词 转基因检测 水稻 七重pcr
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猪呼吸和繁殖障碍类病毒性疫病多重PCR检测方法的建立及应用 被引量：9
5
作者 张森 石远菊 +4 位作者 汤德元 王彬 郭倩妤 廖少山 杨志刚 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期32-37,48,共7页
根据GenBank中PRRSV ORF6、PCV2 ORF2、PPV NS1、PRV gB、SIV M、JEV NS1、CSFV E2等基因的部分片段,分别设计特异性引物,用实验室已保存的病毒及阳性病料,通过对7个病毒单一PCR的退火温度和敏感性进行优化和检测,再选择合适的多重PCR... 根据GenBank中PRRSV ORF6、PCV2 ORF2、PPV NS1、PRV gB、SIV M、JEV NS1、CSFV E2等基因的部分片段,分别设计特异性引物,用实验室已保存的病毒及阳性病料,通过对7个病毒单一PCR的退火温度和敏感性进行优化和检测,再选择合适的多重PCR缓冲体系及酶,优化退火温度、模板及引物浓度,最后检测多重PCR的敏感性、特异性及重复性,建立一种能够同时且快速鉴别PRRSV、PCV2、PPV、PRV、SIV、JEV和CSFV这7种常见猪呼吸道和繁殖障碍类病毒的多重PCR检测方法,并用其对2017-2019年贵州部分地区的150份临床病料进行检测。多重PCR特异性检测结果表明:从混合病毒基因组中分别扩增出大小为224,353,424,549,684,831,1 137 bp的特异性片段,未扩增出E.coli、APP、PEDV及正常组织的DNA/RNA;敏感性试验表明,该方法对病毒的最低检测量分别为PRRSV 94 pg、PCV2 66 pg、PPV 68 pg、PRV 20 pg、SIV 35 pg、JEV 17 pg、CSFV 14 pg;重复性试验表明:相同条件下的6次重复试验均能扩增出7个病毒的目的条带;应用试验表明:150份临床病料中二重感染阳性率高达66.00%(99/150);三重感染阳性率达11.33%(17/150);四重感染阳性率达2.00%(3/150);五重感染阳性率达0.67%(1/150);六重感染阳性率为0,七重感染阳性率为0,阳性PRRSV、PCV2、PPV、JEV、SIV的多重PCR与单一PCR的符合率均为100.00%,阳性CSFV和PRV的符合率为90.00%以上,研究建立的多重PCR检测方法具有敏感性高、特异性强、重复性好的特点,对猪场猪呼吸和繁殖障碍类病毒病混合感染的快速诊断具有十分重要的意义。 展开更多
关键词 PRRSV PCV2 PPV PRV SIV JEV CSFV 七重pcr 检测
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