Hedgehog信号通路通过上皮细胞间质转分化调控乳腺癌细胞侵袭 被引量：8

1

作者 任徽 郭华 +3 位作者 陈明伟 魏光兵 樊林 李徐奇 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期48-52,共5页

目的研究Hedgehog信号通路对乳腺癌细胞侵袭能力的影响及其可能机制。方法通过Western blot和Real-time RT-PCR,检测人乳腺癌细胞MDA-231和人正常乳腺上皮细胞MCF-10A中SHH、SMO和Gli-1蛋白和mRNA表达。通过小干扰RNA转染MDA-231,以未... 目的研究Hedgehog信号通路对乳腺癌细胞侵袭能力的影响及其可能机制。方法通过Western blot和Real-time RT-PCR,检测人乳腺癌细胞MDA-231和人正常乳腺上皮细胞MCF-10A中SHH、SMO和Gli-1蛋白和mRNA表达。通过小干扰RNA转染MDA-231,以未转染细胞为正常对照组,转染siRNA Control为阴性对照组,Western blot和RT-PCR法检测靶向沉默SMO基因的效果,Transwell小室侵袭试验检测各组MDA-231细胞的侵袭能力,Western blot检测Gli-1、Snail、MMP-9、E-cadherin和Vimentin的表达变化。结果人乳腺癌细胞MDA-231高表达SHH、SMO和Gli-1。通过RNA干扰技术靶向沉默MDA-231细胞SMO基因,其细胞侵袭能力显著下调,其Gli-1、Snail、MMP-9、Vimentin表达下调,E-cadherin表达增强。结论 Hedgehog通路的异常激活与乳腺癌细胞侵袭相关,其机制可能与诱导乳腺癌上皮细胞间质转分化有关。 展开更多

关键词 乳腺癌 侵袭 肿瘤 HEDGEHOG通路 上皮细胞间质转分化

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姜黄素对缺氧诱导肝癌细胞HepG2上皮细胞间质转分化(EMT)的逆转作用 被引量：5

2

作者 常远鸿 江梅 刘凯歌 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第9期1763-1767,共5页

目的:探讨姜黄素对缺氧诱导下人原发性肝癌细胞HepG2上皮细胞间质转分化的影响和可能机制。方法:将HepG2细胞分为3组:正常对照组、CoCl2组、CoCl2+姜黄素组。分组干预48小时后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,相差显微镜观察细... 目的:探讨姜黄素对缺氧诱导下人原发性肝癌细胞HepG2上皮细胞间质转分化的影响和可能机制。方法:将HepG2细胞分为3组:正常对照组、CoCl2组、CoCl2+姜黄素组。分组干预48小时后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,相差显微镜观察细胞形态变化,划痕试验检测细胞迁移能力,Real-time RT-PCR检测HIF1-αmRNA的表达变化,Western blot检测HIF1-α蛋白,上皮细胞表面标志E-Cadherin和间质细胞表面标志vimentin的变化。结果:分组干预48h,CoCl2组细胞增殖较对照组增高,而CoCl2+姜黄素组增殖较正常组降低;CoCl2组较正常对照组迁移能力显著增强,CoCl2+姜黄素组细胞迁移能力与CoCl2组相比明显下降;Real-time RT-PCR显示3组细胞HIF1-αmRNA的表达无明显差异;但是Western blot结果发现,相对于正常对照组,CoCl2组HIF1-α蛋白明显上调,CoCl2+姜黄素组HIF1-α蛋白变化不大;同时,CoCl2组E-cadherin表达水平下降而vimentin表达水平上升,CoCl2+姜黄素组无明显变化。结论:姜黄素可逆转缺氧诱导的肝癌细胞HepG2增殖和迁移能力增加,可能与其抑制缺氧诱导的HIF1-α蛋白上调和上皮细胞间质转分化有关。 展开更多

关键词 肝细胞癌 侵袭 缺氧 上皮细胞间质转分化 姜黄素

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Rho激酶信号转导通路对醛固酮诱导的人肾小管上皮细胞间质转分化的影响

3

作者 符克英 魏佳莉 +4 位作者 蔡俊宏 黄海燕 韩叶光 王茹 张培 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第6期812-814,共3页

目的探讨Rho激酶对醛固酮(ALD)诱导的人肾小管上皮细胞间质转分化的影响。方法人肾小管上皮细胞(HK-2)培养于含15%FBS的RPMI-1640培养液中,依普利酮(10μmol/L)和Rho激酶抑制剂Y27632(1μmol/L)预处理细胞30 min后,100 nmol/L ALD作用H... 目的探讨Rho激酶对醛固酮(ALD)诱导的人肾小管上皮细胞间质转分化的影响。方法人肾小管上皮细胞(HK-2)培养于含15%FBS的RPMI-1640培养液中,依普利酮(10μmol/L)和Rho激酶抑制剂Y27632(1μmol/L)预处理细胞30 min后,100 nmol/L ALD作用HK-2细胞24或48 h,ELISA法测定培养上清液中Rho激酶蛋白的含量,实时定量PCR检测细胞α-SMA、E-cadherin mRNA的表达,Western blot测定细胞α-SMA、E-cadherin蛋白的表达。结果 ALD显著上调HK-2细胞Rho激酶蛋白的表达及α-SMA mRNA和蛋白的表达,减低E-cadherin mRNA和蛋白的表达。Rho激酶抑制剂Y27632及依普利酮可拮抗上述效应。结论ALD可激活HK-2细胞Rho激酶的活化,并通过Rho激酶诱导HK-2细胞间质转分化而加速肾小管间质纤维化的进展。 展开更多

关键词 醛固酮 上皮细胞间质转分化 RHO激酶 人近端肾小管上皮细胞 小管间质纤维化

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SOCS2在1型糖尿病肾病肾小管上皮细胞间质转分化中的作用 被引量：2

4

作者 孙翼 高永棣 +2 位作者 董蓉 俞佳丽 查艳(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第19期2391-2395,共5页

目的:研究细胞因子信号传导抑制因子(SOCS)2在1型糖尿病肾病(T1DN)肾小管上皮细胞间质转分化(EMT)的作用。方法:28只雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组(n=7)和T1D组(n=21)。T1D组单次空腹腹腔注射链脲佐菌素(STZ)100 mg/kg,48 h后随机血糖... 目的:研究细胞因子信号传导抑制因子(SOCS)2在1型糖尿病肾病(T1DN)肾小管上皮细胞间质转分化(EMT)的作用。方法:28只雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组(n=7)和T1D组(n=21)。T1D组单次空腹腹腔注射链脲佐菌素(STZ)100 mg/kg,48 h后随机血糖测定结果≥16.7 mmol/L,确诊为1型糖尿病(T1D)。建模成功后,将21只T1D小鼠随机分为3组:T1DN组(n=7)、联合组(贝那普利联合胰岛素用药,n=7)、胰岛素组(胰岛素单独用药,Insulin,n=7)。持续给药8周后处死小鼠,收集血清、尿和肾组织,分别进行生化、病理和相关蛋白与mRNA的检测。结果:与对照组[(3.81±0.24)mmol/L,(32±4.68)μg/24 h]相比,T1DN组血糖、尿蛋白[(21.70±2.26)mmol/L,(286±42.41)μg/24 h]均明显增高(P<0.001),联合组血糖、尿蛋白[(11.84±0.69)mmol/L,(173±17.83)μg/24 h]均明显下降(P<0.001),而Insulin组[(13.05±0.81)mmol/L]血糖明显下降(P<0.001),但对尿蛋白[(262±34.40)μg/24 h]作用不明显。天狼星红染色结果显示对照组肾组织结构完整,肾间质未见胶原纤维沉积;T1DN组肾组织结构破坏,间质胶原纤维沉积明显增多(P<0.001);联合组上述病变明显减轻(P<0.001),Insulin组减轻效果不明显。T1DN组肾组织中FN和SOCS2表达明显增加,E-cadherin表达明显减少(P<0.001);联合组E-cadherin表达明显增加,FN和SOCS2表达明显减少(P<0.001);Insulin组的效果不明显。Pearson相关性分析显示,T1DN小鼠肾组织中SOCS2的表达水平与肾组织胶原纤维沉积量和FN呈正相关,与E-cadherin呈负相关。结论:SOCS2在T1DN肾组织的EMT过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 1型糖尿病肾病 上皮-间质细胞转分化 细胞因子信号传导抑制因子2

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槲皮素对1型糖尿病肾病肾小管上皮细胞间质转分化的作用 被引量：6

5

作者 赵海霞 曹盼盼 +1 位作者 刘林昊 刘风勋 《天津中医药》 CAS 2022年第5期663-667,共5页

[目的]研究槲皮素在1型糖尿病肾病(T1DN)肾小管上皮细胞间质转分化中的作用。[方法]30只雄性SD大鼠随机分为3组:对照组、T1DN组和槲皮素组,每组10只。除对照组以外,其他大鼠空腹注射100 mg/kg链脲佐菌素,构建T1DN模型。槲皮素组大鼠灌胃... [目的]研究槲皮素在1型糖尿病肾病(T1DN)肾小管上皮细胞间质转分化中的作用。[方法]30只雄性SD大鼠随机分为3组:对照组、T1DN组和槲皮素组,每组10只。除对照组以外,其他大鼠空腹注射100 mg/kg链脲佐菌素,构建T1DN模型。槲皮素组大鼠灌胃100 mg/kg槲皮素,对照组和T1DN组大鼠灌胃同剂量的生理盐水,每日1次,持续8周。通过Masson和天狼星染色检测肾组织病理学变化;采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质免疫印记法(Western blot)检测肾皮质中转化生长因子-β(TGF-β)/Smad信号通路、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Snail和E-钙黏蛋白(E-cadherin)和基因的表达。[结果]天狼星染色结果显示,对照组的肾组织结构完整,肾间质未见胶原纤维沉积,T1DN组肾组织结构破坏,间质胶原纤维沉积明显增加,槲皮素改善肾组织损伤,间质胶原纤维减少。Real-time PCR和Western blot结果显示,与对照组比较,T1DN组的TGF-β、Smad2/3、α-SMA、Snail蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.05),E-cadherin的表达显著减少(P<0.05)。与T1DN组比较,槲皮素组的TGF-β、Smad2/3、α-SMA、Snail蛋白和mRNA表达显著降低(P<0.05),E-cadherin的表达显著增加(P<0.05)。[结论]槲皮素可能通过降低TGF-β、Smad2/3、α-SMA、Snail的表达,促进E-cadherin的表达,从而抑制肾小管上皮细胞间质转分化和肾间质纤维化的发生发展。 展开更多

关键词 1型糖尿病肾病 肾小管上皮细胞间质转分化 槲皮素 大鼠实验

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Ⅱ型肺泡上皮细胞间质转分化中的Notch-1/Twist-1信号通路机制 被引量：3

6

作者 汤娟 柯洁 +2 位作者 付裕 何晓伟 李先伟 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期577-583,682,共8页

目的:通过研究Notch-1/Twist-1信号通路参与Ⅱ型肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)作用,为阐明肺纤维化(PF)发病机制提供理论依据。方法:动物实验设对照组和博莱霉素(BLM)组(n=15)。气管注射BLM(7500 U/kg)诱导肺纤维化大鼠模型,造模后28 d... 目的:通过研究Notch-1/Twist-1信号通路参与Ⅱ型肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)作用,为阐明肺纤维化(PF)发病机制提供理论依据。方法:动物实验设对照组和博莱霉素(BLM)组(n=15)。气管注射BLM(7500 U/kg)诱导肺纤维化大鼠模型,造模后28 d取左肺下叶固定于10%福尔马林中,进行HE、Masson及转化生长因子-β1(TGF-β1)免疫组化染色。体外培养Ⅱ型肺泡上皮细胞(RLE-6TN),细胞实验设对照(Control)组、TGF-β1(5 ng/ml)组、TGF-β1+Notch-1 siRNA阴性对照组(NC siRNA,100 pmol/L)和TGF-β1+Notch-1 siRNA干扰组(Notch-1 siRNA,100 pmol/L),每组设9个复孔。细胞先用NC siRNA或Notch-1 siRNA预处理24 h,再用TGF-β1处理48 h。检测肺组织和(或)II型肺泡上皮细胞内TGF-β1、I型胶原(collagen I)、III型胶原(collagen III)、E-钙粘蛋白(E-Cadherin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)、波形蛋白(Vimentin)、N-钙粘蛋白(N-Cadherin)、Notch-1、Notch-1胞内域(NICD)、Hes-1和Twist-1 mRNA和(或)蛋白表达。结果:动物实验结果显示,与对照组相比,BLM组肺泡萎缩、塌陷并发生融合,肺泡间隔明显增宽,可见大量炎性细胞的浸润。肺间质胶原纤维沉积明显增多,collagen I和collagen III的表达明显增加(P<0.01);另外,肺BLM组织中E-cadherin和ZO-1表达明显下降而Vimentin和N-cadherin的表达明显增加(P<0.01);同时,BLM组肺组织TGF-β1、Notch-1、NICD、Hes-1和Twist-1的表达也明显上调(P<0.01)。细胞实验结果显示,与Control相比,TGF-β1组Notch-1、NICD、Hes-1、Twist-1、collagen I和collagen III的表达明显升高,同时E-Cadherin和ZO-1的表达明显降低而Vimentin和N-cadherin的表达明显升高(P<0.01)。与TGF-β1组相比,Notch-1 siRNA能够明显降低TGF-β1诱导Notch-1、NICD、Hes-1和Twist-1的表达(P<0.05或P<0.01),同时E-Cadherin和ZO-1的表达明显升高而Vimentin和N-cadherin的表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。另外Notch-1 siRNA还能够明显降低TGF-β1诱导的collagen I和collagen III的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:Notch-1/Twist-1信号通路参与了Ⅱ型肺泡上皮细胞EMT,可能参与了肺纤维化的发生发展。 展开更多

关键词 肺纤维化 上皮细胞间质转分化 NOTCH-1 Twist-1 大鼠

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降钙素基因相关肽对大鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞间质转分化的作用及机制 被引量：7

7

作者 李先伟 蒋莉莉 +2 位作者 左东泽 郝伟 吴海龙 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期249-253,共5页

目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)的作用并探讨其机制。方法:实验设Control组、TGF-β1(5 ng/ml)、CGRP(1、10、100 nmol/L)组、CGRP8-37(1μmol/L)+CGRP(100nmol/L)组。每组设9个复孔。细胞分别用CGR... 目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)的作用并探讨其机制。方法:实验设Control组、TGF-β1(5 ng/ml)、CGRP(1、10、100 nmol/L)组、CGRP8-37(1μmol/L)+CGRP(100nmol/L)组。每组设9个复孔。细胞分别用CGRP或加CGRP8-37预处理1 h,再用转化生长因子β1(TGF-β1)处理48 h。MTT法检测大鼠肺泡上皮Ⅱ型细胞(RLE-6TN细胞)活性。分别采用Real-time PCR和Western blot检测细胞E-cadherin、α-SMA、e IF3a、Notch1和collagenⅢmRNA及蛋白表达。结果:与TGF-β1(5 ng/ml)相比,不同剂量CGRP(1、10、100 nmol/L)均可明显提高RLE-6TN细胞活性,显著抑制e IF3a、Notch1、α-SMA及collagenⅢ胶原的表达,上调E-cadherin的表达,而CGRP的这些作用可以被CGRP阻断剂CGRP8-37所取消。结论:CGRP对EMT具有一定的抑制作用,其机制可能与其抑制Notch1、e IF3a表达有关。 展开更多

关键词 降钙素基因相关肽 上皮细胞间质转分化 eIF3a NOTCH1 大鼠

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Numb与上皮细胞间质转分化相关蛋白在胰腺癌中表达的相关性及其临床病理学意义 被引量：2

8

作者 盛伟伟 董明 +3 位作者 刘峥嵘 李昱骥 周建平 董齐 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期929-934,共6页

目的：探讨胰腺癌组织及细胞中Numb与上皮细胞间质转分化相关蛋白表达的相关性及其临床病理学意义。方法收集2005年1月至2012年12月中国医科大学附属第一医院胃肠外科保存的具有完整临床资料的胰腺癌手术切除标本63例，所有患者术后病... 目的：探讨胰腺癌组织及细胞中Numb与上皮细胞间质转分化相关蛋白表达的相关性及其临床病理学意义。方法收集2005年1月至2012年12月中国医科大学附属第一医院胃肠外科保存的具有完整临床资料的胰腺癌手术切除标本63例，所有患者术后病理证实均为导管腺癌。应用免疫组化方法检测63例胰腺癌标本中Numb、E钙黏蛋白（ E-cad）和波形蛋白（ Vimentin）表达情况，应用免疫印迹法和real-time PCR检测Numb、E-cad和Vimentin在胰腺癌细胞株BxPC.3和PANC.1中的表达情况。采用χ2检验及Pearson相关分析比较蛋白表达相关性及与患者临床病理学参数的关系，采用Kaplan.Meier单因素分析计算累积生存率，并行Log-Rank检验。结果免疫组化结果显示， Numb、E.cad和Vimentin在胰腺癌组织中阳性表达率分别为46.0％、41.3％和28.6％。 Numb表达与胰腺癌大小、分化程度及UICC分期呈负相关（ r＝－0.310，P＝0.010；r＝－0.359，P＝0.004；r＝－0.228， P＝0.020），E.cad表达与肿瘤分化程度呈负相关（ r＝－0.316，P＝0.012），Vimentin表达与肿瘤分化程度和淋巴结转移呈正相关（ r＝0.264，P＝0.036；r＝0.274，P＝0.030）。相关性分析结果显示，Numb表达与E-cad呈正相关（r＝0.325，P＝0.010），与Vimentin表达无相关性。单因素分析结果显示，Numb和E.cad共表达胰腺癌患者预后更好（ P＝0.046）。细胞水平免疫印迹法和real-time PCR结果显示， Numb蛋白和mRNA高表达的胰腺癌BxPC.3细胞株中E.cad高表达、Vimentin低表达；Numb蛋白和mRNA低表达的胰腺癌PANC-1细胞株中E.cad低表达、Vimentin高表达。结论 Numb和E.cad在胰腺癌组织及细胞中表达呈正相关，可能共同参与胰腺癌上皮细胞间质转分化的发生进展。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 波形蛋白 E钙黏蛋白 上皮细胞间质转分化

原文传递

苦参素对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞-间质转分化的影响 被引量：8

9

作者 高红宇 何晓峰 +3 位作者 邵菊芳 易艳 黄晓丽 刘晓城 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期535-539,共5页

目的探讨苦参素对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞-间质转分化的影响及可能机制。方法大鼠行单侧输尿管结扎(UUO)建立肾小管间质纤维化模型。实验分为假手术、UUO及苦参素治疗组。治疗组在UUO的基础上每天以苦参素100mg/kg腹腔注射。各... 目的探讨苦参素对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞-间质转分化的影响及可能机制。方法大鼠行单侧输尿管结扎(UUO)建立肾小管间质纤维化模型。实验分为假手术、UUO及苦参素治疗组。治疗组在UUO的基础上每天以苦参素100mg/kg腹腔注射。各组于术后第7、14、21天分别处死5只大鼠,分别检测大鼠血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)及24h尿蛋白定量。用PAS及Masson染色法观察肾脏病理改变。用免疫组织化学法观察转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达。用RT-PCR法测定肾组织TGF-β1及α-SMA mRNA水平。结果与UUO组比较,苦参素治疗组肾脏TGF-β1、Smad3、α-SMA及ColⅠ的表达明显减少,肾小管损害和肾间质纤维化的程度也明显减轻。治疗组TGF-β1 mRNA及α-SMA mRNA表达显著低于对应时间点的UUO组。结论苦参素可下调TGF-β1、ColⅠ的表达,抑制肾小管上皮细胞转分化及肌成纤维细胞的活化与增殖,其作用途径可能是通过下调Smad3的表达,从而干预Smad3介导的细胞内信号转导,最终减轻肾间质纤维化。 展开更多

关键词 苦参素 肾间质纤维化 肾小管上皮细胞-间质转分化

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博莱霉素诱导α平滑肌肌动蛋白Cre重组酶转基因小鼠肺纤维化上皮细胞-间质转分化的研究 被引量：17

10

作者 蔡琳 吴壮 徐军 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS 2009年第1期52-56,共5页

目的探讨在博莱霉素诱导的肺纤维化中是否发生了上皮细胞-间质转分化(EMT)现象,支气管上皮细胞是否参与了这一过程。方法采用α平滑肌肌动蛋白Cre重组酶转基因小鼠(α-SMA-Cre/R26R双转基因鼠)为实验动物,构建博莱霉素诱导的小鼠肺纤维... 目的探讨在博莱霉素诱导的肺纤维化中是否发生了上皮细胞-间质转分化(EMT)现象,支气管上皮细胞是否参与了这一过程。方法采用α平滑肌肌动蛋白Cre重组酶转基因小鼠(α-SMA-Cre/R26R双转基因鼠)为实验动物,构建博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化模型,进行组织X-gal染色和α平滑肌肌动蛋白免疫荧光检测。结果气管内灌注博莱霉素的转基因小鼠支气管上皮下部分X-gal蓝染明显增多,终末小气道周围和肺血管壁蓝染细胞出现或增多,部分地区出现了支气管周围肺泡上皮细胞(ACE)阳性蓝染和浸润。结论在博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠模型中可以观察到EMT现象,气道上皮细胞和肺泡上皮细胞能向间充质细胞转化,参与肺纤维化病理过程。 展开更多

关键词 上皮细胞-间质转分化 肺纤维化 博莱霉素 CRE重组酶 Α平滑肌肌动蛋白 转基因小鼠

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microRNA与慢性肾脏疾病上皮-间质细胞转分化的研究进展 被引量：2

11

作者 张柯 肖力 +2 位作者 邹莎琳 孙林 刘伏友 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期470-473,共4页

关键词 MICRORNA 上皮-间质细胞转分化 肾脏疾病 腹膜透析

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PI3K/Akt信号通路对转化生长因子β1诱导的人肺上皮-间质细胞转分化的影响 被引量：7

12

作者 邹潇 曾玉兰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第3期358-360,共3页

目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)通路在转化生长因子β1(TGF-β1)体外诱导的人肺上皮细胞A549间充质化过程中的作用。方法:将体外培养的A549细胞随机分成3组:正常对照组、TGF-β1组及抑制剂组,正常对照组不... 目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)通路在转化生长因子β1(TGF-β1)体外诱导的人肺上皮细胞A549间充质化过程中的作用。方法:将体外培养的A549细胞随机分成3组:正常对照组、TGF-β1组及抑制剂组,正常对照组不加入TGF-β1,TGF-β1组加入10ng/mLTGF-β1,抑制剂组加入TGF-β1(10ng/mL)和PI3K的抑制剂Ly294002(10nmol/L),72h后通过RT-PCR检测各组A549细胞上皮标志物E-钙黏蛋白(E-cad)及间充质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的变化,ELISA方法检测间充质细胞标志物纤连蛋白(Fn)表达的变化,Westernblot检测Akt磷酸化(p-Akt)水平的变化。所有实验至少重复3次。结果:正常体外培养的A549细胞有E-cad表达及微量的α-SMA、Fn、p-Akt表达;TGF-β1组E-cad的表达下调,α-SMA、Fn、p-Akt的表达上调;抑制剂组与TGF-β1组比较E-cad的表达上调,α-SMA、Fn、p-Akt的表达明显抑制。结论:PI3K/Akt途径参与TGF-β1介导的肺上皮-间质细胞转分化过程,PI3K特异性抑制剂Ly294002可有效抑制TGF-β1介导的肺上皮-间质细胞转分化过程。 展开更多

关键词 转化生长因子Β1 人肺上皮细胞 上皮-间质细胞转分化 磷脂酰肌醇3激酶 丝氨 酸/苏氨酸蛋白激酶

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RNA干扰抑制Slug表达在TGF-β1诱导的肾小管细胞间质转分化中的抑制作用 被引量：7

13

作者 陶光利 张璟 +2 位作者 卓文磊 黄云剑 周保尚 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期872-875,882,共5页

目的观察Slug在TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞向间质细胞转分化中的表达及对黏附分子E-cadherin表达的影响。方法构建能表达针对Slug的小干扰RNA(Small interferingRNA,siRNA)的干扰载体(SlugsiRNAvector)和表达不针对任何已知mRNA的si... 目的观察Slug在TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞向间质细胞转分化中的表达及对黏附分子E-cadherin表达的影响。方法构建能表达针对Slug的小干扰RNA(Small interferingRNA,siRNA)的干扰载体(SlugsiRNAvector)和表达不针对任何已知mRNA的siRNA的阴性对照RNA干扰载体(Control siRNA vector),并用脂质体转染法瞬时转染HKC细胞。用TGF-β1分别处理HKC、siSlug和siC,刺激48h后,分别采用PT-PCR和Western blot技术检测各组Slug、α-SMA(alpha-smooth muscleactin)、和E-cadherin的表达水平。结果 TGF-β1刺激后Slug表达水平增高,E-cadherin表达水平降低;通过siRNA干扰后Slug表达减弱,而E-cadherin的表达增强。结论在TGF-β1诱导的HKC细胞EMT过程中,Slug表达与E-cadherin呈负相关,且RNAi阻滞Slug表达能有效地抑制TGF-β1诱导EMT,提示Slug是介导TGF-β1有效地诱导EMT的重要分子。 展开更多

关键词 SLUG 上皮细胞间质转分化 RNA干扰

原文传递

去甲斑蝥素抑制单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮-间充质转分化的实验研究 被引量：7

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作者 孙岩 李瑛 +5 位作者 孙林 刘健 凌光辉 刘映红 周循 刘伏友 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期46-52,共7页

目的:利用单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型,观察去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)对肾小管上皮细胞间质转分化的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)和UUO+NCTD治疗组(NCTD组),每组6只。采用单侧(左)输尿管结扎方法... 目的:利用单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型,观察去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)对肾小管上皮细胞间质转分化的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)和UUO+NCTD治疗组(NCTD组),每组6只。采用单侧(左)输尿管结扎方法,建立梗阻性肾小管间质纤维化大鼠模型,Sham组只游离输尿管而不结扎。术后14d处死动物,取结扎侧肾脏,同时处死Sham组大鼠,取出肾组织。采用免疫组化、Western Blot及RT-PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏蛋白(E-cadherin)与转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白的mRNA表达的变化。结果:免疫组化、Western Blot及RT-PCR均显示,与Sham组比较,UUO组肾组织α-SMA和TGF-β1的mRNA表达升高、E-cadherin蛋白和mRNA表达降低(P<0.05);NCTD能抑制UUO大鼠肾组织α-SMA和TGF-β1表达的上调,上调E-cadherin的表达(P<0.05)。结论:NCTD具有抑制UUO大鼠肾小管上皮-间充质转化的作用,该作用可能与抑制TGF-β1的过表达有关。 展开更多

关键词 去甲斑蝥素 肾小管上皮细胞间质转分化 转化生长因子Β1

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足细胞上皮-间充质转分化与肾小球疾病 被引量：4

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作者 陈海云 敖英 +1 位作者 朱亚男 汪晖 《临床肾脏病杂志》 2020年第5期425-430,共6页

目的足细胞对于维持肾小球滤过屏障的稳定性极为重要。足细胞的损伤可导致肾小球滤过功能障碍和相关肾脏疾病的发生。上皮-间质转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是足细胞损伤的一种表现形式,也是多种肾小球疾病的始动因... 目的足细胞对于维持肾小球滤过屏障的稳定性极为重要。足细胞的损伤可导致肾小球滤过功能障碍和相关肾脏疾病的发生。上皮-间质转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是足细胞损伤的一种表现形式,也是多种肾小球疾病的始动因素之一。本文主要针对足细胞EMT的定义、具体表现、诱导因素、发生机制及相关肾小球疾病及其防治进行综述,以期阐明足细胞EMT最近研究进展,为相关肾脏疾病的治疗提供参考。 展开更多

关键词 足细胞发育不良 足细胞上皮-间质转分化 肾小球疾病

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内质网应激在肺泡上皮间质转分化发生中的作用 被引量：1

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作者 陆勇林 李春艳 +3 位作者 郑珍珍 林子英 宋泽庆 刘刚 《广东医学院学报》 2016年第6期582-585,共4页

目的探讨衣霉素诱导的内质网应激在肺泡上皮细胞-间质转分化(EMT)中的影响及作用机制。方法以质量浓度为1.25、2.5、5.0 mg/L的衣霉素(TM)分别处理人肺腺癌上皮细胞A549 24 h,MTT法检测细胞活力;RTPCR和免疫印迹法检测GRP78、CHOP、E-... 目的探讨衣霉素诱导的内质网应激在肺泡上皮细胞-间质转分化(EMT)中的影响及作用机制。方法以质量浓度为1.25、2.5、5.0 mg/L的衣霉素(TM)分别处理人肺腺癌上皮细胞A549 24 h,MTT法检测细胞活力;RTPCR和免疫印迹法检测GRP78、CHOP、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、Smad2/3、转录因子Snail的表达;以5μg/L TGF-β1分别处理A549细胞24 h或48 h后,免疫印迹法检测GRP78和p-e IF2α的表达。结果 1.25 mg/L的TM处理A549细胞24 h后,GRP78 mRNA和蛋白表达升高,CHOP mRNA表达上调;E-cadherin蛋白表达下降,Smad2/3活化,Snail表达上调。而TGF-β1处理A549 24 h,GRP78和p-eIF2α表达均上调。结论衣霉素诱导的内质网应激可介导A549细胞发生EMT,同时EMT发生过程中伴随着内质网应激的发生。 展开更多

关键词 内质网应激 肺泡上皮细胞 上皮细胞-间质转分化TGF-β/Smad通路

原文传递

三七注射液对阿霉素肾纤维化大鼠ILK、MMP-7及肾小管上皮细胞转分化的影响 被引量：8

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作者 吴金玉 黄雪霞 +4 位作者 唐宇 邱少彬 龙韵 江旖旎 黄仁发 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1-7,共7页

目的观察三七注射液对阿霉素肾纤维化大鼠肾组织整合素连接酶(ILK)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、E-钙黏素(E-Cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响。方法 120只SD大鼠随机分为5组:正常组(n=24)、假手术组(n=24)、模型组(n=24)、... 目的观察三七注射液对阿霉素肾纤维化大鼠肾组织整合素连接酶(ILK)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、E-钙黏素(E-Cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响。方法 120只SD大鼠随机分为5组:正常组(n=24)、假手术组(n=24)、模型组(n=24)、三七注射液组(n=24)和三七总皂苷组(n=24),12周后处死大鼠。观察肾功能、24 h尿蛋白定量、肾脏病理改变,免疫组织化学法和Western blotting观察大鼠肾组织ILK、MMP-7、E-Cadherin和α-SMA蛋白的表达。结果假手术组大鼠肾组织结构正常,模型组大鼠出现肾间质纤维化,三七注射液组和三七总皂苷组大鼠小管间质病变减轻。模型组大鼠血清BUN和Scr水平、24 h尿蛋白定量、肾小管间质病理评分增高,肾组织ILK、MMP-7、α-SMA蛋白表达上调,E-Cadherin下调,与假手术组相比较,差异均有统计学意义(P<0.01);而三七注射液组和三七总皂苷组大鼠BUN和Scr水平、24 h尿蛋白定量、肾小管间质病理评分、肾组织ILK、MMP-7、α-SMA蛋白下降,E-Cadherin上调,与模型组相比较,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);三七注射液组和三七总皂苷组相比较,上述指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论三七注射液的肾保护作用可能与下调ILK、MMP-7水平,抑制肾小管上皮细胞转分化有关。 展开更多

关键词 阿霉素肾纤维化 三七注射液 整合素连接酶 基质金属蛋白酶-7 肾小管上皮-间质细胞转分化

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PI3K/AKT信号通路在TGFβ1致人腹膜间皮细胞转分化中的作用 被引量：5

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作者 樊敏 刘伏友 +3 位作者 段绍斌 杨宇 叶云 黄谷香 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期672-675,共4页

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt通路在转化生长因子β1(TGFβ1)体外诱导的人腹膜间皮细胞(HPMC)上皮-间质细胞转分化(EMT)过程中的作用。方法从人腹膜组织中分离和培养人原代腹膜间皮细胞。观察TGFβ1对人腹膜间皮细胞Akt磷酸化的影... 目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt通路在转化生长因子β1(TGFβ1)体外诱导的人腹膜间皮细胞(HPMC)上皮-间质细胞转分化(EMT)过程中的作用。方法从人腹膜组织中分离和培养人原代腹膜间皮细胞。观察TGFβ1对人腹膜间皮细胞Akt磷酸化的影响,在不同时间点检测p-Akt的表达水平。采用免疫印迹方法检测应用PI3K特异性抑制剂Wortmannin对TGFβ1诱导后细胞内p-Akt、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏附蛋白(E-Cadherin)表达的影响。结果10ng/mLTGFβ1刺激HPMC0.5h后p-Akt水平开始升高,1h后达到顶峰,2h后逐渐减弱。TGFβ1诱导HPMC48h后α-SMA表达显著升高,E-cadherin表达显著下降;同时加用Wortmannin则p-Akt、α-SMA表达明显抑制。结论PI3K/Akt信号系统参与TGFβ1介导的人腹膜间皮细胞EMT过程,提示对其通路的抑制可有效阻止TGFβ1介导的腹膜纤维化。 展开更多

关键词 人腹膜间皮细胞 上皮-间质细胞转分化 转化生长因子Β1 磷脂酰肌醇3激酶/Akt

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糖原合成酶激酶-3β磷酸化促进人腹膜间皮细胞转分化的实验研究 被引量：1

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作者 樊敏 刘伏友 +2 位作者 杨宇 叶云 黄谷香 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期329-334,共6页

目的:探讨糖原合成酶激酶(GSK)-3β磷酸化在人腹膜间皮细胞(HPMC)转分化中的作用。方法:从人腹膜组织中分离和培养人原代腹膜间皮细胞。观察GSK-3β抑制剂氯化锂(LiCl)对HPMCGSK-3β磷酸化的影响,在不同时间点(0,1,3,6,12h)和不同浓度(0... 目的:探讨糖原合成酶激酶(GSK)-3β磷酸化在人腹膜间皮细胞(HPMC)转分化中的作用。方法:从人腹膜组织中分离和培养人原代腹膜间皮细胞。观察GSK-3β抑制剂氯化锂(LiCl)对HPMCGSK-3β磷酸化的影响,在不同时间点(0,1,3,6,12h)和不同浓度(0,5,10,20,40mmol/L)LiCl下Western印迹检测p-GSK-3β和总GSK-3β表达水平的变化。Western印迹检测20mmol/LLiCl作用HPMC不同时间,α-SMA和E-cadherin蛋白的表达。间接免疫荧光染色方法检测α-SMA的表达和分布。结果:LiCl促进HPMCGSK-3β磷酸化在一定范围内呈浓度依赖性和时间依赖性(P<0.05),但总GSK-3β水平不变(P>0.05)。20mmol/LLiCl干预HPMC24h后,α-SMA表达显著增高(P<0.05),E-cad-herin表达显著下调(P<0.05)。间接免疫荧光结果显示20mmol/LLiCl作用24h后α-SMA表达显著增高(P<0.05)。结论:GSK-3β磷酸化能诱导HPMC发生上皮-间质细胞转分化,为治疗腹膜纤维化提供了新的思路。 展开更多

关键词 糖原合成酶激酶-3Β 氯化锂 人腹膜间皮细胞 上皮-间质细胞转分化

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CTGF反义寡核苷酸对人肾小管上皮细胞转分化的影响 被引量：1

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作者 廖晓莉 陈超 +3 位作者 陈涛 严玉霞 林春兰 蒋建伟 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期535-539,共5页

目的研究结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸(ASODN)对人肾小管上皮细胞(HKC)转分化的影响。方法用巨噬细胞趋化因子-1(MCP-1)和马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)联合诱导HKC转分化模型。实验设空白对照组、模型对照组、PEI组、CTGFASODN10ng/mL组和CT... 目的研究结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸(ASODN)对人肾小管上皮细胞(HKC)转分化的影响。方法用巨噬细胞趋化因子-1(MCP-1)和马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)联合诱导HKC转分化模型。实验设空白对照组、模型对照组、PEI组、CTGFASODN10ng/mL组和CTGF ASODN100ng/mL组,分别采用WST-8法、流式细胞术、RT-PCR法、细胞免疫组织化学法检测不同浓度的CTGF ASODN对HKC转分化模型细胞增殖和细胞周期的影响,以及α-SMA mRNA表达和α-SMA、TGF-β1、Fibronectin(FN)蛋白表达的变化。结果 100ng/mL的CTGF ASODN对MCP-1和AAⅠ联合诱导HKC转分化细胞具有促进细胞增殖的作用,并可减少实验模型导致的细胞S期阻滞,降低α-SMA mRNA表达,减少α-SMA、TGF-β1和FN蛋白的表达。结论 CTGFASODN能够抑制MCP-1和AAⅠ导致的人HKC转分化。 展开更多

关键词 结缔组织生长因子 反义寡核苷酸 上皮-间质细胞转分化 肾小管上皮细胞

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