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基于上皮细胞-间充质转化的搜风愈喘方调控哮喘大鼠气道重塑的机制研究 被引量：2
1
作者 李艳丽 张宇婧 闫永彬 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期208-215,共8页
目的探讨搜风愈喘方通过调控上皮细胞-间充质转化(EMT)抑制哮喘气道重塑的作用机制。方法将60只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组及搜风愈喘方高、中、低剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组均采用卵清白蛋白(OVA... 目的探讨搜风愈喘方通过调控上皮细胞-间充质转化(EMT)抑制哮喘气道重塑的作用机制。方法将60只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组及搜风愈喘方高、中、低剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组均采用卵清白蛋白(OVA)注射和雾化复制哮喘大鼠模型。各组大鼠给予相应药物灌胃21 d后处死大鼠,苏木素-伊红(HE)染色,观察肺组织病理形态学变化;透射电镜观察大鼠肺组织中上皮细胞超微结构情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中的转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素17(IL-17)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测肺组织匀浆中TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)的mRNA表达。蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测肺组织中TGF-β1、α-SMA、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清中TGF-β1、IL-17含量明显升高(P<0.01),肺组织中TGF-β1、α-SMA和N-cadherin mRNA和蛋白表达明显上调(P<0.01),E-cadherin mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.01);HE染色显示气道壁及肺泡壁增厚,视野内可见大量炎症细胞浸润,炎症评分明显升高(P<0.01);透射电镜显示肺组织中上皮细胞水肿程度严重,胞内基质局部溶解、变淡,细胞器肿胀明显。与模型对照组比较,地塞米松组和搜风愈喘方各剂量组大鼠血清中TGF-β1、IL-17含量明显降低(P<0.05,P<0.01),TGF-β1、α-SMA和N-cadherin mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),E-cadherin mRNA和蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01);肺组织炎症细胞浸润减轻,支气管壁及肺泡壁增厚程度减轻,地塞米松组和搜风愈喘方高剂量组炎症评分降低(P<0.05);超微结构显示上皮细胞水肿程度明显减轻,细胞膜完整,胞内基质均匀,细胞器大多轻微肿胀。结论搜风愈喘方可降低TGF-β1水平,从而改善肺组织EMT,达到防治哮喘气道重塑的目的。 展开更多
关键词 搜风愈喘方 哮喘 气道上皮细胞 上皮细胞-间充质转化 气道重塑 大鼠
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生长停滞特异性转录本5在乳腺癌中低表达并抑制上皮细胞-间充质转化 被引量：12
2
作者 丁勇兴 段克才 陈素莲 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1427-1435,共9页
目的探讨生长停滞特异性转录本5(lncRNA-GAS5)在乳腺癌中发展和上皮细胞-间充质转化(EMT)过程中的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应法检测乳腺癌组织和癌旁组织(n=36)、乳腺癌MCF-7亲本和耐药细胞中lncRNA-GAS5的表达,并分析GAS5表... 目的探讨生长停滞特异性转录本5(lncRNA-GAS5)在乳腺癌中发展和上皮细胞-间充质转化(EMT)过程中的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应法检测乳腺癌组织和癌旁组织(n=36)、乳腺癌MCF-7亲本和耐药细胞中lncRNA-GAS5的表达,并分析GAS5表达与乳腺癌临床分期和淋巴结转移相关性;qRT-PCR法、Western blot和免疫组化法检测细胞周期和EMT相关蛋白的表达;迁移、趋化和黏附分离实验检测细胞生物学活性;通过光学显微镜观察细胞的形态学变化;以耐药细胞株构建裸鼠乳腺癌模型,体内探讨过表达GAS5对紫杉醇抗乳腺癌作用的影响。结果 LncRNA GAS5转录本水平相对于癌旁组织是显著降低的(P<0.05),GAS5低表达与乳腺癌TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05);耐药细胞株中GAS5表达下调(P<0.05),GAS5与P21表达正相关,而与CDK6表达呈负相关;体外干扰GAS5促进乳腺癌亲本细胞株发生EMT表型改变和侵袭能力增加,而过表达lncRNA GAS5可抑制乳腺癌耐药细胞株EMT表型和侵袭能力(P<0.05),并提高紫杉醇的药物敏感性。体内实验发现,过表达GAS5通过逆转EMT标志蛋白,提高紫杉醇抑制肿瘤生长和肺转移的作用。结论 LncRNA GAS5低表达可能通过诱导EMT促进乳腺癌的肺转移,可能是乳腺癌的一个潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 生长停滞特异性转录本5 乳腺癌 上皮细胞-间充质转化
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趋化因子受体4调节PI3K/Akt和Erk信号通路促进卵巢癌SKOV3细胞上皮细胞-间充质转化 被引量：4
3
作者 孟巧绒 李楠 闫旭 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第22期5547-5549,共3页
目的观察趋化因子受体4(CXCR4)通过激活PI3K/Akt和Erk信号通路在卵巢癌SKOV3细胞上皮细胞-间充质转化(EMT)中的作用。方法 Boyden小室检测激活CXCR4后SKOV3细胞迁移和侵袭能力的变化情况。Western印迹方法检测激活CXCR4后SKOV3细胞中EM... 目的观察趋化因子受体4(CXCR4)通过激活PI3K/Akt和Erk信号通路在卵巢癌SKOV3细胞上皮细胞-间充质转化(EMT)中的作用。方法 Boyden小室检测激活CXCR4后SKOV3细胞迁移和侵袭能力的变化情况。Western印迹方法检测激活CXCR4后SKOV3细胞中EMT相关蛋白的表达情况及PI3K/Akt和Erk信号通路的活化情况。PI3K/Akt和Erk信号通路抑制剂预处理SKOV3细胞后,采用Western印迹方法检测SKOV3细胞中EMT相关蛋白的表达情况。结果同对照组相比,激活CXCR4后可促进SKOV3细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01),下调SKOV3细胞中与EMT相关的E-钙黏蛋白表达,并上调EMT相关波形蛋白的表达。Western印迹结果显示随着CXCR4刺激时间的延长,SKOV3细胞中PI3K/Akt蛋白和Erk蛋白磷酸化水平逐渐升高。采用PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002和Erk信号通路抑制剂U0126预处理SKOV3细胞后,CXCR4介导的E-钙黏蛋白表达下调和波形蛋白表达上调被阻断。结论 CXCR4通过激活SKOV3细胞中的PI3K/Akt信号通路和Erk信号通路,下调SKOV3细胞中E-钙黏蛋白表达,并上调波形蛋白的表达,从而促进卵巢癌SKOV3细胞EMT的发生。 展开更多
关键词 趋化因子受体4 信号通路 上皮细胞-间充质转化 迁移 侵袭
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下调miR-153促进高糖诱导的肾小管上皮细胞-间充质转化 被引量：4
4
作者 王筱霞 姜珍珍 +6 位作者 汪年松 陈玉强 李军辉 范瑛 刘玉梅 鲍宏达 程东生 《中国中西医结合肾病杂志》 2013年第10期850-854,I0001,共6页
目的:探讨miR-153调控高糖诱导肾小管上皮细胞(HK2)-间充质转化(EMT)的机制,为研究糖尿病肾病(DN)间质纤维化机制提供新思路。方法:采用生物信息学方法预测调控Snail的候选miRNAs;在db/db小鼠肾组织中验证所有候选miRNAs的表达并分别与S... 目的:探讨miR-153调控高糖诱导肾小管上皮细胞(HK2)-间充质转化(EMT)的机制,为研究糖尿病肾病(DN)间质纤维化机制提供新思路。方法:采用生物信息学方法预测调控Snail的候选miRNAs;在db/db小鼠肾组织中验证所有候选miRNAs的表达并分别与Snail做pearson相关性分析,筛选出与Snail负相关最显著的miRNA;以高糖诱导的HK2细胞为载体,转染该miRNA mimics 72 h后,采用real-time PCR、western blot方法,观察该miRNAs、Snail以及E-cadherin的表达改变。结果:调控Snail的候选miRNAs共7个,分别是:miR-153、miR-30e、miR-30d、miR-30b、miR-384-5p、miR-30a、miR-30c;与db/m相比,miR-153、miR-30d及miR-30e在db/db小鼠肾皮质中表达显著下调(P<0.05),其中miR-153与Snail表达水平负相关最显著(r=-0.501 56);高糖诱导HK2细胞下调miR-153,肾小管上皮细胞标志蛋白E-cadherin表达减少;过表达miR-153抑制HK2细胞表达Snail,而E-cadherin水平增加。结论:MiR-153可能通过靶基因Snail参与调控高糖诱导的HK2细胞EMT。 展开更多
关键词 近端肾小管上皮细胞(HK2) 上皮细胞-间充质转化(EMT) miR-153 SNAIL 生物信息学
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高糖环境下缬沙坦对肾小管上皮细胞-间充质转化过程中骨膜蛋白、转录激活因子1的影响
5
作者 张光明 弓慧杰 《中国药房》 CAS 北大核心 2016年第13期1815-1818,共4页
目的:研究在高糖环境下缬沙坦对肾小管上皮细胞-间充质转化(EMT)过程中骨膜蛋白(Periostin)、转录激活因子1(AP-1)的影响。方法:体外高糖环境下培养人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),分为空白对照组和缬沙坦高、中、低剂量组(10^(-3)、10^(-4... 目的:研究在高糖环境下缬沙坦对肾小管上皮细胞-间充质转化(EMT)过程中骨膜蛋白(Periostin)、转录激活因子1(AP-1)的影响。方法:体外高糖环境下培养人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),分为空白对照组和缬沙坦高、中、低剂量组(10^(-3)、10^(-4)、10^(-5)mol/L),作用48 h;另设正常对照组。观察各组HK-2细胞形态学变化,检测各组HK-2细胞活力(OD值),细胞中Ⅲ型胶原含量、AP-1蛋白表达和Periostin、AP-1 mRNA表达。结果:与正常对照组比较,其余各组HK-2细胞部分细胞间隙增大并与附近的细胞脱离接触,细胞分裂旺盛,细胞活力、Ⅲ型胶原含量、AP-1蛋白表达和Periostin、AP-1 mRNA表达均增强(P<0.05)。与空白对照组比较,缬沙坦高、中、低剂量组细胞活力、Ⅲ型胶原含量、AP-1蛋白表达和Periostin、AP-1 mRNA表达均更低(P<0.05),其中缬沙坦中剂量组作用最明显(P<0.01)。结论:体外高糖环境下可促进HK-2细胞EMT过程;缬沙坦可通过抑制AP-1的过表达进而下调转分化的肾小管上皮细胞中Periostin蛋白表达,从而减缓EMT过程。 展开更多
关键词 缬沙坦 肾小管上皮HK-2细胞 上皮细胞-间充质转化 骨膜蛋白 转录激活因子1
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TGF-β--Smad信号通路和上皮细胞-间充质转化在支架后血管狭窄中的研究进展 被引量：2
6
作者 吴一凡 刘福全 《中国介入影像与治疗学》 CSCD 北大核心 2017年第3期182-185,共4页
血管支架术后存在着较高的支架处再狭窄风险,其中转化生长因子-β(TGF-β)—Smad信号通路、上皮细胞-间充质转化(EMT)等发挥了重要的作用。本文对TGF-β—Smad信号通路、EMT在血管支架术后再狭窄过程中的作用及相关机制进行综述。
关键词 支架 狭窄 TGF-β-Smad信号通路 上皮细胞-间充质转化
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肾小管上皮细胞-间充质转化在糖尿病肾病中作用的研究进展 被引量：7
7
作者 王紫涵 何洋 +1 位作者 王梦婷 王俭勤 《新医学》 CAS 2021年第12期897-902,共6页
糖尿病肾病(DN)是糖尿病重要的微血管并发症。近年多项研究表明,肾小管上皮细胞(TEC)的上皮细胞-间充质转化(EMT)在DN的发病机制中起重要作用,但EMT在肾纤维化中的作用以及该作用是否存在于人类体内仍是正在讨论的问题,该文就TEC的EMT参... 糖尿病肾病(DN)是糖尿病重要的微血管并发症。近年多项研究表明,肾小管上皮细胞(TEC)的上皮细胞-间充质转化(EMT)在DN的发病机制中起重要作用,但EMT在肾纤维化中的作用以及该作用是否存在于人类体内仍是正在讨论的问题,该文就TEC的EMT参与DN的分子机制以及目前对EMT参与DN肾纤维化的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 肾小管上皮细胞 上皮细胞-间充质转化 肾纤维化
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长链非编码RNA NEAT1通过miR-34a靶向GAS1激活PI3K-AKT信号通路对宫颈癌的增殖、侵袭和上皮细胞-间充质转化的影响研究 被引量：4
8
作者 刘莹 谢锦霞 李恒 《中国性科学》 2021年第5期59-63,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1对宫颈癌细胞增殖、侵袭和上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响和机制研究。方法选取2019年10月购自上海生物细胞研究所的宫颈癌细胞株(Hela细胞)和人宫颈上皮永生化细胞株(H8细胞)作为研究对象。通过实... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1对宫颈癌细胞增殖、侵袭和上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响和机制研究。方法选取2019年10月购自上海生物细胞研究所的宫颈癌细胞株(Hela细胞)和人宫颈上皮永生化细胞株(H8细胞)作为研究对象。通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NEAT1在Hela细胞和H8细胞中的差异表达,分析NEAT1对Hela细胞增殖、侵袭和EMT的影响。miRanda和双荧光素酶报告基因实验分析NEAT1和miR-34a之间的关系,检测NEAT1通过miR-34a对Hela细胞增殖、侵袭与EMT的影响,TargetScan和双荧光素酶报告基因实验分析miR-34a和GAS1的关系,检测miR-34靶向GAS1激活PI3K-AKT信号通路对Hela细胞增殖、侵袭和EMT的影响。分别用MTT、细胞侵袭实验和Western blot检测细胞的增殖、侵袭和EMT能力。结果 Hela细胞中NEAT1的表达上调(P<0.01),miR-34a表达下调(P<0.01),敲低NEAT1抑制了Hela细胞增殖、侵袭与EMT,NEAT1 3′UTR与miR-34a特异性结合。同时敲低NEAT1和miR-34a的表达,NEAT1表达的下调能部分逆转miR-34a下调对细胞功能的影响。同时过表达NEAT1和miR-34a, NEAT1能部分逆转miR-34a上调对细胞功能的影响。miR-34a和GAS13′UTR特异性结合,敲低GAS1抑制了Hela细胞增殖、侵袭与EMT,干扰GAS1抑制了Hela细胞p-PI3K、p-AKT蛋白的表达。和干扰miR-34a相比,同时抑制GAS1和miR-34a的表达能够逆转p-PI3K、p-AKT蛋白的上升。MK2206抑制了Hela细胞增殖、侵袭与EMT,而IGF-1促进了细胞的增殖、侵袭与EMT。结论 NEAT1通过miR-34a靶向GAS1激活了PI3K-AKT信号通路,从而促进宫颈癌的发展。 展开更多
关键词 NEAT1 MIR-34A GAS1 PI3K-AKT 宫颈癌 上皮细胞-间充质转化
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Wnt信号通路与肾小管上皮细胞-间充质转化的关系 被引量：7
9
作者 杨欢 张琼 《中国中西医结合肾病杂志》 2016年第5期464-466,共3页
肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞（myofi Broblast,MF）,失去上皮细胞的表型,并获得间充质的特点,如钙黏素（E-cadherin）的表达减少,并出现α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,这种现象被称为肾小管上皮细胞-间充质转化（epithelia... 肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞（myofi Broblast,MF）,失去上皮细胞的表型,并获得间充质的特点,如钙黏素（E-cadherin）的表达减少,并出现α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,这种现象被称为肾小管上皮细胞-间充质转化（epithelial to mesenchymal transition,EMT）[1]。研究证实[2],肾小管上皮细胞通过EMT进入肾间质,引起细胞外基质堆积, 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞 WNT信号通路 间充质细胞 胞外基质堆积 转分化 CADHERIN CATENIN 信号转导 肾间质纤维化 钙黏素
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红景天甙诱导骨肉瘤细胞系凋亡并抑制上皮细胞-间充质转化 被引量：2
10
作者 谭雄 陈洁 +3 位作者 毕国善 申昕 戴先鹏 颜红霞 《基础医学与临床》 CSCD 2020年第11期1506-1511,共6页
目的探讨红景天甙(Sal)对骨肉瘤细胞系(HOS、U2OS)增殖、凋亡以及上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响。方法体外培养骨肉瘤细胞系HOS以及U2OS细胞,用不同浓度Sal处理细胞24 h后,MTT法和流式细胞计量术分别检测细胞活性以及细胞凋亡水平;Wes... 目的探讨红景天甙(Sal)对骨肉瘤细胞系(HOS、U2OS)增殖、凋亡以及上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响。方法体外培养骨肉瘤细胞系HOS以及U2OS细胞,用不同浓度Sal处理细胞24 h后,MTT法和流式细胞计量术分别检测细胞活性以及细胞凋亡水平;Western blot检测细胞凋亡蛋白Bcl-2/Bak以及EMT相关分子E-cadherin、N-cadherin、Slug和Snial的表达水平。随后,通过Transwell小室法以及细胞划痕实验检测Sal对细胞侵袭以及迁移的影响。PI3K/Akt抑制剂处理细胞后,Western blot检测EMT相关分子E-cadherin、N-cadherin、Slug和Snial的变化情况。结果不同浓度Sal均能显著抑制HOS及U2OS细胞的细胞活性,并增加细胞凋亡率,且细胞中Bcl-2表达降低,Bak表达增高。150μmol/L的Sal能够显著降低HOS和U2OS细胞的侵袭率以及迁移水平。Western blot结果显示,150μmol/L Sal处理后,HOS和U2OS细胞中E-cadherin表达上调,N-cadherin、Slug和Snial表达下调。PI3K/Akt抑制剂处理后,E-cadherin表达水平较Sal单独处理的细胞进一步升高,而N-cadherin、Slug和Snial表达则显著下降(P<0.05)。结论Sal能够抑制骨肉瘤细胞系细胞的增殖、侵袭以及迁移,并促进细胞凋亡。同时,还能够通过抑制PI3K/Akt信号通路抑制骨肉瘤细胞系发生EMT。 展开更多
关键词 红景天甙 骨肉瘤细胞系 凋亡 上皮细胞-间充质转化
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转录因子Snail调控肿瘤上皮细胞-间充质转化的研究进展 被引量：1
11
作者 刘仁升 傅斌 《广东医学》 CAS 北大核心 2015年第9期1456-1458,共3页
上皮细胞-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）指上皮细胞通过特定程序转化为间质细胞表型的生物学过程。对于恶性肿瘤,EMT与肿瘤细胞的发生、发展、转移和侵袭性息息相关,而转录因子Snail可通过各种不同机制,在不同... 上皮细胞-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）指上皮细胞通过特定程序转化为间质细胞表型的生物学过程。对于恶性肿瘤,EMT与肿瘤细胞的发生、发展、转移和侵袭性息息相关,而转录因子Snail可通过各种不同机制,在不同层面影响EMT的启动和进展,以Snail为靶点的治疗也有一定的作用。因此,阐明Snail调控EMT的分子机制，将为进一步探索恶性肿瘤的发病机制和为临床恶性肿瘤的治疗提供新思路。本文将从Snail调控EMT的分子机制和肿瘤治疗作一综述。 展开更多
关键词 间充质细胞 SNAIL 肿瘤干细胞 上皮细胞 转录因子 侵袭性 乳腺癌细胞 生长因子 干细胞特性 细胞黏附分子
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HOXB7调控Wnt通路对骨肉瘤细胞上皮-间充质转化及侵袭、迁移的影响
12
作者 丁木亮 王俊杰 《贵州医科大学学报》 2025年第2期240-246,共7页
目的探讨同源盒基因B7(homeobox gene B7,HOXB7)调控Wnt通路对骨肉瘤细胞上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及侵袭、迁移的影响。方法以体外培养的人骨肉瘤细胞株MG63、143B、SaoS2及人间充质干细胞hMSCs为研究对... 目的探讨同源盒基因B7(homeobox gene B7,HOXB7)调控Wnt通路对骨肉瘤细胞上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及侵袭、迁移的影响。方法以体外培养的人骨肉瘤细胞株MG63、143B、SaoS2及人间充质干细胞hMSCs为研究对象,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)测定HOXB7 mRNA和蛋白表达;将MG63细胞分为对照组、si-NC组、si-HOXB7组、si-HOXB7+SKL2001组及si-HOXB7+XAV939组,采用Transwell小室和划痕实验检测细胞侵袭和迁移,Western blot检测基质金属蛋白酶(matrix metallopeptidase,MMP)-2、MMP-9、Wnt、波形蛋白(Vimentin)、β-连环蛋白(β-catenin)、原癌基因c-myc、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)及神经钙黏蛋白(N-cadherin)表达。结果骨肉瘤细胞系MG63、143B、SaoS2中HOXB7 mRNA和蛋白表达水平高于人间充质干细胞hMSCs(P<0.05),且HOXB7 mRNA和蛋白水平在MG63细胞中最高,故选择MG63细胞进行后续功能验证实验;沉默HOXB7表达后,HOXB7表达、侵袭和迁移细胞数、划痕愈合率及MMP-2、MMP-9、CyclinD1、Vimentin、N-cadherin、Wnt、核β-catenin及c-myc蛋白表达下降(P<0.05),E-cadherin、质β-catenin蛋白表达升高(P<0.05);SKL2001可逆转上述指标变化,而XAV939能促进这种变化(P<0.05)。结论沉默HOXB7可抑制骨肉瘤细胞侵袭、迁移和EMT,这与抑制Wnt通路相关蛋白表达有关。 展开更多
关键词 同源盒基因B7 WNT通路 骨肉瘤 侵袭 迁移 上皮-间充质转化
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TGF-β/WNT5a/JNK信号通路对人晶状体上皮细胞上皮-间充质转化的促进作用
13
作者 宋宇 包秀丽 《中华实验眼科杂志》 北大核心 2025年第3期219-226,共8页
目的研究转化生长因子β/无翅蛋白5a/c-Jun N-氨基末端激酶(TGF-β/WNT5a/JNK)信号通路对晶状体上皮细胞(LECs)纤维化的影响。方法将人LECs细胞系SRA01/04分为对照组、TGF-β组和WNT5a组,其中对照组细胞常规培养,TGF-β组和WNT5a组分别... 目的研究转化生长因子β/无翅蛋白5a/c-Jun N-氨基末端激酶(TGF-β/WNT5a/JNK)信号通路对晶状体上皮细胞(LECs)纤维化的影响。方法将人LECs细胞系SRA01/04分为对照组、TGF-β组和WNT5a组,其中对照组细胞常规培养,TGF-β组和WNT5a组分别采用TGF-β1和WNT5a处理24 h。采用Western blot法检测3个组细胞WNT5a、JNK、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白的相对表达量。另将细胞系分为对照组、TGF-β组、TGF-β+SP600125组和WNT5a+SP600125组,其中对照组细胞常规培养,TGF-β组、TGF-β+SP600125组和WNT5a+SP600125组分别采用TGF-β1处理24 h、TGF-β1处理24 h+JNK抑制剂SP600125处理2 h、WNT5a处理24 h+SP600125处理2 h。采用Western blot法检测4个组细胞WNT5a、JNK、p-JNK、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、纤维连接蛋白(FN)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的相对表达量;采用免疫荧光染色法检测各组细胞α-SMA的表达分布;采用Transwell小室实验检测各组细胞相对迁移数;采用Col-Ⅰ凝胶收缩实验检测各组细胞培养8、16、24和48 h时Col-Ⅰ凝胶面积比率。结果Western blot结果显示,TGF-β组和WNT5a组细胞WNT5a、JNK、p-JNK蛋白相对表达量均明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。TGF-β组、TGF-β+SP600125组、WNT5a+SP600125组细胞Col-Ⅰ、FN、α-SMA的蛋白相对表达量明显高于对照组,TGF-β+SP600125组和WNT5a+SP600125组细胞各蛋白相对表达量明显低于TGF-β组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,TGF-β组SRA01/04细胞由柱状的上皮细胞转分化为纺锤状的肌成纤维细胞,TGF-β+SP600125组和WNT5a+SP600125组细胞仍以柱状上皮细胞形态居多。TGF-β组、TGF-β+SP600125组和WNT5a+SP600125组细胞内α-SMA相对荧光染色强度明显高于对照组,TGF-β+SP600125组和WNT5a+SP600125组α-SMA相对免疫荧光强度明显低于TGF-β组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Transwell小室迁移实验结果显示,TGF-β组细胞相对迁移数明显高于对照组,TGF-β+SP600125组和WNT5a+SP600125组细胞相对迁移数明显低于TGF-β组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Col-Ⅰ胶原凝胶收缩实验结果显示,随着培养时间的延长,各组细胞Col-Ⅰ凝胶面积明显减小。各组不同时间点Col-Ⅰ凝胶面积比率总体比较,差异均有统计学意义(F分组=71.604,P<0.001;F时间=71.599,P<0.001);培养48 h时,TGF-β组、TGF-β+SP600125和WNT5a+SP600125组细胞Col-Ⅰ凝胶面积比率分别为(26.24±0.28)%、(64.02±1.05)%、(76.81±0.28)%,明显低于对照组的(90.20±0.31)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论WNT5a/JNK信号通路作为TGF-β信号通路下游作用靶点,促进了LECs上皮-间充质转化及细胞外基质沉积,提高了细胞收缩力。 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 c-Jun N-氨基末端激酶 转化生长因子-β 无翅蛋白5a 上皮-间充质转化 纤维化
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DADS下调DJ-1通过PTEN/Akt通路抑制人胃癌MGC803细胞侵袭与上皮-间质转化
14
作者 夏红 周娟 +3 位作者 刘芳 苏坚 苏波 苏琦 《现代肿瘤医学》 2025年第2期170-177,共8页
目的:探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)下调DJ-1通过PTEN/Akt通路抑制人胃癌MGC803细胞侵袭与上皮-间质转化的作用。方法:实验分为MGC803组、空载体组、DJ-1过表达组、MGC803+DADS组、空载体+DADS组、DJ-1过表达+DADS组。MTT... 目的:探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)下调DJ-1通过PTEN/Akt通路抑制人胃癌MGC803细胞侵袭与上皮-间质转化的作用。方法:实验分为MGC803组、空载体组、DJ-1过表达组、MGC803+DADS组、空载体+DADS组、DJ-1过表达+DADS组。MTT、平板克隆、细胞划痕和侵袭实验检测DADS对MGC803细胞增殖、克隆形成、迁移与侵袭的影响;相差显微镜观察DADS对MGC803细胞形态学的影响;qRT-PCR、Western blot与免疫荧光检测DJ-1、PTEN、p-Akt、Snail、Vimentin、E-cadherin、MMP-9与TIMP-3表达。结果:MTT显示,24 h、48 h和72 h后,DADS处理后,各组细胞的增殖率分别较处理前下降(P<0.05)。平板克隆显示,DADS处理后,克隆形成数较处理前各组减少(P<0.05)。划痕实验显示,24 h时,DADS处理后的划痕距离,分别较处理前各组增加(P<0.05)。迁移实验显示,DADS处理后,各组的迁移细胞较处理前各组减少(P<0.05)。侵袭实验显示,DADS处理后,侵袭细胞较处理前减少(P<0.05)。DADS处理后,DJ-1表达较处理前下降(P<0.05),PTEN表达较处理前上调(P<0.05),免疫荧光与上述结果一致。DADS处理后,各组p-Akt表达下调(P<0.05)。相差显微镜显示,DADS处理后,MGC803组与DJ-1过表达组异型性下降,Snail、Vimentin与MMP-9表达下调,E-cadherin与TIMP-3表达上调(P<0.05)。结论:DADS下调DJ-1可负调控PTEN/Akt通路抑制人胃癌MGC803细胞侵袭与上皮-间质转化。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 人胃癌MGC803细胞 DJ-1 PTEN/Akt通路 侵袭 上皮-间质转化
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miR-1247-5p/Smad2轴对胃癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化的影响
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作者 王健 程宪永 于宁 《天津医药》 2025年第2期118-123,共6页
目的 探讨miR-1247-5p在胃癌中的表达情况及其对胃癌细胞迁移、侵袭的影响机制。方法 分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库癌旁组织与胃癌组织中差异表达的miRNA;受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-1247-5p对恶性肿瘤预后的预测价值;实时荧光... 目的 探讨miR-1247-5p在胃癌中的表达情况及其对胃癌细胞迁移、侵袭的影响机制。方法 分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库癌旁组织与胃癌组织中差异表达的miRNA;受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-1247-5p对恶性肿瘤预后的预测价值;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测本院收集的10例胃癌和癌旁组织中miR-1247-5p的表达水平;蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析miR-1247-5p下游靶基因;双萤光素酶实验观察miR-1247-5p与Smad2的结合情况;Transwell实验检测过表达miR-1247-5p对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响;RT-qPCR、Western blot实验检测miR-1247-5p对Smad2和上皮间质转化(EMT)标记分子表达水平的影响。结果 TCGA数据库及本院收集的胃癌组织中miR-1247-5p表达水平均低于癌旁正常组织;ROC曲线分析表明miR-1247-5p表达水平是绝大部分肿瘤类型患者预后的独立预测指标。过表达miR-1247-5p显著抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力。生物信息学分析提示miR-1247-5p下游靶基因参与EMT等与肿瘤转移密切相关的通路。PPI分析表明Smad2是EMT信号通路中的Hub基因。双萤光素酶实验表明miR-1247-5p和Smad2存在结合位点。RT-qPCR、Western blot实验证实miR-1247-5p可抑制Smad2表达和EMT过程。结论 miR-1247-5p在胃癌组织中低表达,过表达miR-1247-5p可抑制EMT信号通路,降低胃癌细胞迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 胃肿瘤 上皮-间质转化 细胞运动 肿瘤浸润 Smad2蛋白质 miR-1247-5p
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miR-221-5p靶向VDR调控肾透明癌上皮细胞-间充质转化的机制
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作者 张群妹 狄文玉 +2 位作者 王海峰 焦路阳 鲁广建 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第17期4283-4286,共4页
目的探讨微小RNA(miR)-221-5p靶向维生素D受体(VDR)调控肾透明癌上皮细胞-间充质转化的潜在机制。方法过表达或敲低miR-221-5p后,检测肾透明癌细胞786-O中VDR的表达水平。荧光素酶报告实验检测miR-221-5p是否靶向VDR。过表达或敲低miR-2... 目的探讨微小RNA(miR)-221-5p靶向维生素D受体(VDR)调控肾透明癌上皮细胞-间充质转化的潜在机制。方法过表达或敲低miR-221-5p后,检测肾透明癌细胞786-O中VDR的表达水平。荧光素酶报告实验检测miR-221-5p是否靶向VDR。过表达或敲低miR-221-5p及过表达VDR或敲低VDR后,检测786-O中上皮细胞-间充质转化标志蛋白[E-钙黏蛋白(Cadherin)、β-连环蛋白(Catenin)和紧密连接蛋白(ZO)-1]表达水平、线粒体功能相关蛋白[电压依赖性阴离子通道蛋白(VDAC)1、线粒体内膜中视神经萎缩症蛋白(OPA)1和线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)]的表达水平及线粒体呼吸水平[基础呼吸、三磷酸腺苷(ATP)相关呼吸和最高呼吸]。结果过表达miR-221-5p在肾透明癌细胞中导致VDR的mRNA和蛋白水平明显下降(P<0.05),而敲低miR-221-5p则相反。进一步的双荧光素酶报告表明,miR-211-5p mimic能够针对野生型VDR mRNA-3′UTR组明显降低荧光素酶活性(P<0.05),但在突变型VDR mRNA-3′UTR组无明显差异(P>0.05)。此外,miR-221-5p过表达或VDR的敲低会导致肾透明癌细胞中上皮细胞-间充质转化标志蛋白的水平明显上升,而反之则明显下降(P>0.05),共表达或共敲低miR-221-5p和VDR时以上蛋白水平未发生显著变化(P>0.05)。miR-221-5p过表达或VDR敲低会导致线粒体功能相关蛋白水平明显下降,反之则明显上升(P<0.05),但是共表达或共敲低miR-221-5p和VDR时以上指标未发生显著变化(P>0.05)。miR-221-5p过表达或VDR敲低导致肾透明癌细胞中线粒体呼吸相关参数明显下降,反之则明显上升(P<0.05),但是共表达或共敲低miR-221-5p和VDR时以上指标未发生显著变化(P>0.05)。结论miR-221-5p通过调控VDR表达水平影响肾透明癌细胞的上皮细胞-间充质转化、线粒体功能及线粒体呼吸。 展开更多
关键词 微小RNA(miR)-221-5p 维生素D受体(VDR) 肾透明癌 上皮细胞-间充质转化 线粒体
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潜阳育阴颗粒对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞-间充质转化的影响 被引量：4
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作者 孔雪 黄国顺 +4 位作者 韩雪玲 张金波 戴晶 商锰男 邹冲 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期56-63,共8页
目的:通过观察潜阳育阴颗粒对肾小管上皮细胞表型的影响,探讨其对肾间质纤维化的干预作用。方法:将肾小管上皮细胞(HK-2)用不同质量浓度的转化生长因子(TGF)-β1(0、5、10、15、20、25μg·L^(-1))刺激24 h,用倒置相差显微镜观察细... 目的:通过观察潜阳育阴颗粒对肾小管上皮细胞表型的影响,探讨其对肾间质纤维化的干预作用。方法:将肾小管上皮细胞(HK-2)用不同质量浓度的转化生长因子(TGF)-β1(0、5、10、15、20、25μg·L^(-1))刺激24 h,用倒置相差显微镜观察细胞形态及生长状态,结合蛋白免疫印迹法(Western blot)结果选取最合适的TGF-β1质量浓度20μg·L^(-1)用于后续实验。将HK-2细胞分为6组,分别为空白组、TGF-β1组(质量浓度为20μg·L^(-1))、潜阳育阴颗粒低、中、高剂量组(0.5、1、2 g·L^(-1))、缬沙坦组(1×10^(-5) mol·L^(-1))。细胞增殖与活性检测(CCK-8)试剂盒检测各组细胞活性;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell法检测细胞侵袭能力;Western blot检测纤维黏连蛋白(FN)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)等相关蛋白表达水平。结果:TGF-β1刺激肾小管上皮细胞-间充质转化(EMT)的发生具有一定时间依赖性和浓度依赖性。与空白组比较,TGF-β1组给药浓度越高,干预时间越长,细胞呈长梭形改变越明显,迁移及侵袭能力显著增强,FN、α-SMA、Vimentin、ColⅠ、ColⅣ蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),同时E-cadherin蛋白表达水平下降(P<0.05)。与TGF-β1组比较,潜阳育阴颗粒各组均能维持正常细胞形态,细胞迁移及侵袭能力受到抑制,FN、α-SMA、Vimentin、ColⅠ、ColⅣ蛋白表达减少(P<0.05,P<0.01),E-cadherin蛋白表达明显恢复(P<0.05)。结论:潜阳育阴颗粒能够通过减少间质细胞表型表达,增加上皮细胞表型表达,逆转TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞间质转化。 展开更多
关键词 潜阳育阴颗粒 转化生长因子-β1(TGF-β1) 上皮细胞-间充质转化(EMT)
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外泌体调节复发性流产小鼠子宫内膜细胞上皮间充质转化的作用机制研究
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作者 李梦元 李冠杉 +7 位作者 韩倩 李思瑶 郑舒畅 辛明蔚 尹晓丹 王景尚 武颖 何军琴 《中国全科医学》 北大核心 2025年第8期962-972,共11页
背景复发性流产(RSA)是常见的生殖障碍性疾病,在胚胎植入过程中,子宫内膜发生上皮间充质转化(EMT),RSA的发生与该过程减弱密切相关。子宫内膜来源外泌体及其携带的miRNA参与细胞间通讯,影响细胞EMT,与RSA关系密切,但具体作用机制尚不明... 背景复发性流产(RSA)是常见的生殖障碍性疾病,在胚胎植入过程中,子宫内膜发生上皮间充质转化(EMT),RSA的发生与该过程减弱密切相关。子宫内膜来源外泌体及其携带的miRNA参与细胞间通讯,影响细胞EMT,与RSA关系密切,但具体作用机制尚不明确。目的本研究聚焦于外泌体在细胞EMT中的功能,通过实验验证子宫内膜来源外泌体及其分泌的miRNA-221对RSA小鼠子宫内膜细胞EMT的调控作用。方法2021年10月—2022年5月,选取SPF级、健康8周龄雌性小鼠24只,随机选取12只作为正常对照组,剩余12只小鼠制作RSA模型,造模结束后雌雄合笼,妊娠第4日处死雌性小鼠,分离和培养子宫内膜上皮细胞并收集外泌体,通过透射电镜和免疫印迹法(WB)进行外泌体鉴定;通过CCK-8、Transwell和流式细胞术检测外泌体干预前后两组细胞增殖、侵袭、迁移能力;细胞EMT相关蛋白[E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、基质金属蛋白酶7(MMP-7)、MMP-9]及外泌体标志蛋白(CD63、CD81、TSG101)的表达;外泌体处理后的细胞EMT标志蛋白(CD24-APC、CD44-FITC)的表达;转染miRNA-221模拟物和抑制物分析外泌体源性miRNA-221对小鼠子宫内膜上皮细胞EMT的作用,并通过WB和双荧光素酶报告基因检测进行分析。结果RSA组小鼠的子宫内膜上皮细胞具有异常的EMT,小鼠子宫内膜上皮细胞能够分泌外泌体。添加外泌体的RSA组细胞增殖率、迁移能力、侵袭能力、CD44^(+)/CD24^(+)表达水平高于细胞上清液RSA组(P<0.05)。与细胞上清液RSA组相比,添加外泌体的RSA组细胞的EMT标志蛋白E-cadherin水平降低,间质样标志蛋白N-cadherin和Vimentin以及基质标志蛋白MMP-7、MMP-9蛋白水平升高(P<0.05)。RSA组miRNA-221表达水平低于正常对照组(P<0.05)。与对照随机miRNA相比,miRNA-221模拟物激活了PI3K-AKT通路、NF-κB通路和p38通路(P<0.05)。与对照随机miRNA相比,miRNA-221模拟物降低了PTEN mRNA的表达水平(P<0.05),而miRNA-221抑制剂转染则增加了PTEN mRNA的表达水平(P<0.05)。结论子宫内膜来源外泌体miRNA-221可通过负向调控Pten基因,激活PI3K-AKT通路,促进子宫内膜上皮细胞EMT,影响RSA妊娠结局。 展开更多
关键词 复发性流产 上皮间充质转化 外泌体 miRNA-221 PTEN基因 PI3K-AKT通路
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肠道菌群通过诱导上皮细胞-间充质转化参与肛瘘发病的机制探讨 被引量：4
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作者 叶倩倩 柳奕诚 +2 位作者 罗春生 徐进 汪庆明 《中华全科医学》 2024年第1期121-125,共5页
肛瘘是肛肠疾病中的常见病、多发病,以肛周流脓、疼痛、瘙痒为主要症状,男性青壮年为主要发病人群。目前肛瘘发病机制尚不明确,治疗仍以手术为主,手术预后与术者对于内口的把握以及括约肌的保护有密切的关系。近年来,肠道菌群的研究被... 肛瘘是肛肠疾病中的常见病、多发病,以肛周流脓、疼痛、瘙痒为主要症状,男性青壮年为主要发病人群。目前肛瘘发病机制尚不明确,治疗仍以手术为主,手术预后与术者对于内口的把握以及括约肌的保护有密切的关系。近年来,肠道菌群的研究被推上热门,其在多种疾病中的作用也逐渐被证实,已有研究表示菌群变化与肠道微环境的紊乱参与肛瘘的发生,具体表现在菌群丰度多样性的增加和肠源性细菌的感染。上皮细胞-间充质转化(EMT)是癌症等疾病重要的表型变化,随着研究的深入,已被证明参与肛瘘的发生发展,尤以克罗恩病多见。本文基于肛瘘解剖学特征和主流发病机制,通过梳理国内外相关研究,总结肠道菌群-EMT-肛瘘之间存在的相关联系,从肠道菌群与肛瘘、肠道菌群与EMT、EMT与肛瘘三个方面阐述肛瘘发病机制,并得出肛门瘘管的形成可能是由于肠道菌群变化影响肠黏膜屏障稳态,进而诱导EMT发生并参与炎症诱导纤维化和瘘管的发展,由于EMT与隐腺肛瘘的研究较少,此机制仍需在隐腺肛瘘中进一步验证。该机制提示未来可以通过调节患者肠道菌群,减轻炎症反应和干预EMT进程参与肛瘘的预防和治疗,以期为肛瘘提供非手术的治疗新途径,达到减轻患者诊疗痛苦的目的。 展开更多
关键词 肠道菌群 上皮细胞-间充质转化 肛瘘 发病机制
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CKAP2L通过激活Wnt/β-catenin通路促进非小细胞肺癌细胞增殖和上皮-间质转化
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作者 罗雪 王艳君 +2 位作者 袁铭 周丁子 黎华 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 北大核心 2025年第1期1-12,共12页
目的:探究细胞骨架相关蛋白2样蛋白(cytoskeleton-associated protein 2-like,CKAP2L)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和迁移中的作用及其机制。方法... 目的:探究细胞骨架相关蛋白2样蛋白(cytoskeleton-associated protein 2-like,CKAP2L)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和迁移中的作用及其机制。方法:利用GEO和TCGA数据库筛选与NSCLC相关的潜在基因;用qRT-PCR、Western blot和免疫组化法检测NSCLC组织中CKAP2L的表达水平;用Kaplan-Meier曲线分析NSCLC患者生存率。以CKAP2L shRNAs、过表达质粒或Wnt/β-catenin抑制剂IWR-1处理细胞后,用qRT-PCR和Western blot检测细胞中CKAP2L的表达水平;用CCK-8和EdU染色检测细胞增殖情况;用Transwell检测细胞迁移情况;用Western blot和免疫荧光检测细胞中EMT和Wnt/β-catenin通路蛋白的表达水平。结果:CKAP2L在NSCLC患者肿瘤组织中表达上调(P<0.001),CKAP2L高表达与NSCLC患者预后差相关。与过表达对照组(OE-CTRL)相比,CKAP2L过表达组(OE-CKAP2L)NSCLC细胞增殖(P<0.01或P<0.001)、EMT和迁移(P<0.01)明显增强;与干扰对照组(sh-CTRL)相比,CKAP2L干扰组(sh-CKAP2L)NSCLC细胞增殖(P<0.01或P<0.001)、EMT和迁移(P<0.01)明显减弱。CKAP2L可上调Wnt/β-catenin通路相关蛋白(P<0.01)。结论:CKAP2L可能通过激活Wnt/β-catenin通路而加速NSCLC进展,可能成为治疗NSCLC患者的新靶点。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 细胞骨架相关蛋白2样蛋白 上皮-间质转化 WNT/Β-CATENIN通路
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