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外泌体调节头颈部鳞状细胞癌上皮间充质转化的研究进展
1
作者 于娟 沈世敏 王有虎 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS CSCD 2024年第4期107-112,共6页
随着全球头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)发病率的逐年增加及流行病学趋势的改变,以及面对HNSCC患者多于疾病晚期确诊且常伴有转移的现况,HNSCC在肿瘤微环境中发生转移的因素越来越受到关注。本文就外泌体在肿瘤进展中的细胞通讯作用、上皮间... 随着全球头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)发病率的逐年增加及流行病学趋势的改变,以及面对HNSCC患者多于疾病晚期确诊且常伴有转移的现况,HNSCC在肿瘤微环境中发生转移的因素越来越受到关注。本文就外泌体在肿瘤进展中的细胞通讯作用、上皮间充质转化(EMT)在肿瘤进展中的作用、外泌体与EMT间的关系及外泌体在HNSCC EMT中的研究进展及其针对肿瘤EMT方面的临床应用前景进行综述,旨在探求在肿瘤微环境中外泌体对于HNSCC EMT的影响。 展开更多
关键词 头颈部鳞状细胞癌 外泌体 上皮间充质转化 肿瘤转移
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Gli2调控Hedgehog通路活化对Tca8113细胞增殖、转移和上皮间充质转化的影响
2
作者 刘茂林 王晓堂 +3 位作者 宋晓娜 马云辉 常潇琪 宋国华 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期1-9,共9页
目的 本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分... 目的 本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分别检测Gli2对Tca8113细胞增殖、生长、迁移与侵袭的影响。进一步利用qRT-PCR与Western blot实验探究Gli2调控Tca8113细胞恶性增殖和转移机制。结果 口腔癌细胞Tca8113中Gli2的mRNA和蛋白表达升高。干扰Gli2表达可抑制Tca8113细胞增殖、生长、迁移及侵袭。进一步研究发现干扰Gli2表达可抑制Hedgehog(Hh)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。此外,干扰Gli2表达可显著影响上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。结论 口腔癌病变过程中Gli2被异常激活,干扰Gli2表达显著抑制口腔癌细胞的增殖、生长、迁移和侵袭。Gli2通过调控Hh通路与EMT通路,进而影响口腔癌细胞的迁移和侵袭。本研究为阐明口腔癌的发病机制提供新思路,并为口腔癌的临床治疗提供新视角。 展开更多
关键词 TCA8113细胞 口腔癌 GLI2 细胞迁移 细胞侵袭 HEDGEHOG通路 上皮间充质转化
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人肝癌Huh7细胞上皮间充质转化与VEGFa/VEGFR2自分泌途径的相关性及华蟾素的调控作用
3
作者 叶明君 吴晓红 +4 位作者 陈诗雨 李白坤 王萌 朱继民 李庆林 《安徽中医药大学学报》 CAS 2024年第5期66-71,共6页
目的探究华蟾素(cinobufagin,CBG)注射液对人肝癌Huh7细胞血管内皮生长因子a(vascular endothelial growth factor a,VEGFa)/血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)自分泌信号通路及上皮间充质... 目的探究华蟾素(cinobufagin,CBG)注射液对人肝癌Huh7细胞血管内皮生长因子a(vascular endothelial growth factor a,VEGFa)/血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)自分泌信号通路及上皮间充质转化进程的影响。方法通过CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验和成球实验检测人肝癌Huh7细胞增殖、迁移、侵袭和成球能力;免疫荧光双标实验对人肝癌Huh7细胞VEGFa/VEGFR2进行共定位分析,ELISA法检测人肝癌Huh7细胞上清液中VEGFa水平,Western blot法检测人肝癌Huh7细胞中VEGFa/VEGFR2通路及上皮间充质转化相关蛋白表达水平。结果CBG注射液能显著抑制人肝癌Huh7细胞的增殖、迁移、侵袭和成球能力;人肝癌Huh7细胞可能存在VEGFa/VEGFR2自分泌途径;CBG注射液能抑制VEGFa的分泌,降低下游p-VEGFR2、p-PI3K、p-AKT及间充质标志物N-Cadherin、Vimentin、Snail蛋白的表达水平,升高上皮标志物E-Cadherin蛋白的表达水平。结论CBG注射液可能通过VEGFa/VEGFR2自分泌途径调控人肝癌Huh7细胞上皮间充质转化。 展开更多
关键词 华蟾素 肝癌 增殖 侵袭 上皮间充质转化 VEGFa/VEGFR2自分泌途径
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消疣汤对宫颈HR-HPV持续感染患者疗效及对宫颈癌Hela细胞上皮间充质转化的影响
4
作者 门昊 艾雯霞 刘丽 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第9期1385-1391,共7页
目的探究消疣汤对宫颈HR-HPV持续感染患者的疗效及对宫颈癌Hela细胞上皮间充质转化(EMT)影响。方法收集高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续感染且病理分级为CINⅠ级的患者114例随机均分为干扰素组和消疣汤组,干扰素组应用重组人干扰素α-2... 目的探究消疣汤对宫颈HR-HPV持续感染患者的疗效及对宫颈癌Hela细胞上皮间充质转化(EMT)影响。方法收集高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续感染且病理分级为CINⅠ级的患者114例随机均分为干扰素组和消疣汤组,干扰素组应用重组人干扰素α-2b凝胶、消疣汤组在干扰素组的基础上给予消疣汤治疗,与治疗3个月时评价两组患者中医症候积分和临床疗效;将宫颈癌Hela细胞随机分为空白对照组(Control组),消疣汤低剂量组(XYD-L组,1 g/L)、中剂量组(XYD-M组,2 g/L)及高剂量组(XYD-H组,4 g/L),于24、48及72 h时,采用CCK-8法Hela细胞增殖能力、Transwell法检测侵袭能力、蛋白质印迹法检测细胞中E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin表达。结果与Control组相比,XYD-L组、XYD-M组和XYD-H组Hela细胞增殖能力、侵袭数目及细胞中N-Cadherin、Vimentin蛋白表达明显降低,细胞中E-Cadherin蛋白表达均明显增加(P<0.05);XYD-H组宫颈癌细胞增殖能力、侵袭数目及细胞中N-Cadherin、Vimentin蛋白表达明显低于XYD-L组、XYD-M组,细胞中E-Cadherin蛋白表达明显高于XYD-L组、XYD-M组(P<0.05);干扰素组HR-HPV持续感染患者治疗3个月时的临床疗效总有效率为78.95%、消疣汤组临床疗效总有效率(94.74%),P<0.05;和治疗前相比,治疗后两组患者中医症候积分明显降低(P<0.05);与治疗后干扰素组相比,消疣汤组患者中医症候积分明显降低(P<0.05)。结论消疣汤可明显改善宫颈HR-HPV持续感染患者临床症状,其机制可能与消疣汤影响宫颈癌细胞EMT及细胞的增殖和侵袭有关。 展开更多
关键词 消疣汤 宫颈HR-HPV持续感染 宫颈肿瘤 侵袭 上皮间充质转化
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FGF23对支气管上皮细胞生长、免疫平衡和上皮间充质转化的影响
5
作者 张舒晨 杨旭东 +2 位作者 李丹丹 侯新芳 何喜宁 《西部医学》 2024年第4期489-495,共7页
目的探究成纤维细胞生长因子23(FGF23)对支气管上皮细胞16HBE生长、免疫平衡和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法使用Lipofectamine 3000转染试剂对16HBE细胞分别转染NC-shRNA或FGF23-shRNA。转染后,使用10 ng/mL TGF-β1处理细胞48 h。1... 目的探究成纤维细胞生长因子23(FGF23)对支气管上皮细胞16HBE生长、免疫平衡和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法使用Lipofectamine 3000转染试剂对16HBE细胞分别转染NC-shRNA或FGF23-shRNA。转染后,使用10 ng/mL TGF-β1处理细胞48 h。16HBE细胞分为对照组、NC-shRNA组、FGF23-shRNA组、TGF-β1组、NC-shRNA+TGF-β1组和FGF23-shRNA+TGF-β1组。通过CCK-8法检测细胞增殖。使用ELISA试剂盒检测16HBE细胞上清液中IFN-γ、IL-4、IL-17和IL-10的水平。通过qRT-PCR、Western blot或免疫荧光染色检测16HBE细胞中FGF23、Klotho、FGFR4、E-cadherin、α-SMA和N-cadherin的mRNA或蛋白表达水平。结果与TGF-β1组相比,FGF23-shRNA+TGF-β1组的OD 450nm值降低(P<0.05)。与TGF-β1组相比,FGF23-shRNA+TGF-β1组的IFN-γ和IL-10的水平升高,而IL-4和IL-17降低(P<0.05)。与TGF-β1组相比,FGF23-shRNA+TGF-β1组的E-cadherin蛋白表达水平升高,而α-SMA降低(P<0.05)。与TGF-β1组相比,FGF23-shRNA+TGF-β1组的E-cadherin相对荧光强度升高,而N-cadherin降低(P<0.05)。与TGF-β1组相比,FGF23-shRNA+TGF-β1组的FGF23和FGFR4的mRNA和蛋白表达水平均降低,而Klotho均升高(P<0.05)。结论下调FGF23抑制了TGF-β1诱导的16HBE细胞的生长和EMT过程,并纠正了Th1/Th2和Treg/Th17的失衡,FGF23-Klotho-FGFR4信号可能是哮喘治疗的一种分子靶标。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子23 支气管上皮细胞 上皮间充质转化 免疫平衡 FGF23-Klotho-FGFR4信号
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基于深度学习和纳米振动的上皮间充质转化研究
6
作者 吴尚犬 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期125-125,共1页
上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)是上皮表型细胞通过特定程序转化为间充质表型细胞的生物学过程,其与癌症的转移和复发高度相关。研究EMT演化的力学问题以及研发EMT检测的力学手段是近些年来细胞力学、实验力学... 上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)是上皮表型细胞通过特定程序转化为间充质表型细胞的生物学过程,其与癌症的转移和复发高度相关。研究EMT演化的力学问题以及研发EMT检测的力学手段是近些年来细胞力学、实验力学领域内受到普遍关注的前沿交叉方向。本文探究了群体细胞EMT中的纳米振动。基于微悬臂梁检测技术,研究并发现了EMT过程中,群体细胞纳米振动显著增强。其中,EMT后新陈代谢的增强是引起纳米振动增强的主要原因之一。此外,微丝、微管、黏着斑以及细胞间连接这些亚细胞结构的改变也是EMT前后纳米振动差异的来源。进一步地,构建了群体细胞微纳米振动力学模型,模拟复现了上述实验现象,发现了与新陈代谢相关的力激励幅值、细胞刚度、细胞间连接强度等影响纳米振动的主要力学因素。进一步地,引入深度学习对纳米振动信号进行特征提取,实现了对EMT分类的高灵敏检测,仅用1s的数据,实现了92.5%的分类准确率。并且发现了神经网络提取了两个特征频段作为重要的分类依据。基于纳米振动实现了EMT逆转类抗癌药物的筛选。研究引入了动态力学特性角度,丰富了细胞EMT前后力学特性的研究广度,促进了对于EMT前后细胞代谢和结构变化的理解。本研究有望促进力学手段在生物医学方面的应用。 展开更多
关键词 上皮间充质转化 亚细胞结构 细胞间连接 深度学习 动态力学特性 实验力学 细胞代谢 新陈代谢
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UHRF2与UBE2V1在高糖诱导肾小管上皮细胞上皮间充质转化过程中的作用机制
7
作者 侯光生 党丽丽 +4 位作者 袁磊 李沛垚 郑倩 肖辉 王辉 《陕西师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期12-20,共9页
糖尿病肾病是糖尿病的主要并发症,也是引发慢性肾病的主要诱因。UBE2V1作为唯一一类参与K63泛素化的E2酶参与糖尿病肾病的发生,而UHRF2在K63泛素化途径中作为E3泛素连接酶发挥作用。采用实时荧光定量、基因沉默和过表达、划痕测试、免... 糖尿病肾病是糖尿病的主要并发症,也是引发慢性肾病的主要诱因。UBE2V1作为唯一一类参与K63泛素化的E2酶参与糖尿病肾病的发生,而UHRF2在K63泛素化途径中作为E3泛素连接酶发挥作用。采用实时荧光定量、基因沉默和过表达、划痕测试、免疫印迹分析、K63泛素化蛋白分离和免疫沉淀等方法探究UHRF2与UBE2V1在高糖诱导肾小管上皮细胞上皮间充质转化过程中的作用机制。研究发现高葡萄糖可以增加UHRF2和UBE2V1在肾小管上皮细胞中的表达,引发上皮间充质转化;高糖培养的肾小管上皮细胞中上皮间充质转化标志蛋白α-SMA和ZEB1的表达显著上调,同时E-cadherin的表达显著下调;敲低UHRF2或UBE2V1会抑制α-SMA和ZEB1的上调,减弱E-cadherin的下调;UBE2V1可能介导高糖培养肾小管上皮细胞中UHRF2转录的上调,并可能增加UHRF2中K63的泛素化。研究结果反映出UHRF2和UBE2V1均参与了高糖条件下肾小管上皮细胞的上皮间充质转化过程,二者可能协同促进糖尿病肾病纤维化,这些发现为治疗糖尿病肾病提供了新思路。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 上皮间充质转化 泛素 E3泛素连接酶
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糖原合成激酶-3β通过上皮间充质转化参与糖尿病肾病发生发展的研究进展
8
作者 孙宣锋 曹慧霞 +3 位作者 焦晓静 张丽娜 阎磊 邵凤民 《新乡医学院学报》 CAS 2024年第1期77-81,共5页
糖尿病肾病(DN)是糖尿病重要的并发症之一,发病机制复杂,目前尚未完全阐明。上皮间充质转化(EMT)在DN的发生发展中发挥重要作用。糖原合成激酶-3β(GSK-3β)通过多个信号转导通路参与EMT过程,影响DN的发生进展。本文就GSK-3β参与DN中EM... 糖尿病肾病(DN)是糖尿病重要的并发症之一,发病机制复杂,目前尚未完全阐明。上皮间充质转化(EMT)在DN的发生发展中发挥重要作用。糖原合成激酶-3β(GSK-3β)通过多个信号转导通路参与EMT过程,影响DN的发生进展。本文就GSK-3β参与DN中EMT的相关机制研究进展进行综述。 展开更多
关键词 糖原合成激酶-3β 糖尿病肾病 上皮间充质转化 信号通路
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雷酚内酯通过NF-κB途径逆转肺气管上皮细胞上皮间充质转化进程的研究
9
作者 岑梦姣 翁鹏程 《浙江医学》 CAS 2024年第2期139-145,I0005,共8页
目的探讨雷酚内酯对肺气管上皮细胞上皮间充质转化(EMT)进程的影响。方法首先通过细胞计数试剂盒8法检测雷酚内酯对Beas-2b细胞活性的影响,确定雷酚内酯用药剂量。将细胞分为对照组、模型组、1μmol/L雷酚内酯组和10μmol/L雷酚内酯组... 目的探讨雷酚内酯对肺气管上皮细胞上皮间充质转化(EMT)进程的影响。方法首先通过细胞计数试剂盒8法检测雷酚内酯对Beas-2b细胞活性的影响,确定雷酚内酯用药剂量。将细胞分为对照组、模型组、1μmol/L雷酚内酯组和10μmol/L雷酚内酯组。对照组不作任何处理;模型组细胞给予10 ng/mL TGF-β1联合10 ng/mL TNF-α处理48 h;雷酚内酯组细胞在模型基础上,添加终浓度为1μmol/L或10μmol/L雷酚内酯进行共孵育48 h。使用相差显微镜观察各组细胞形态变化,免疫荧光实验检测EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(Vimentin)的表达。通过RT-PCR和Western blot法检测E-cadherin、α-SMA和Vimentin mRNA和蛋白表达水平。进一步通过Western blot法检测NF-κB通路及EMT相关转录因子Snail家族锌指1(SNAI1)、锌指E-Box绑定同源盒1(ZEB1)和Twist家族BHLH转录因子1(TWIST1)蛋白表达水平。结果1μmol/L和10μmol/L的雷酚内酯能够提高细胞活性,并降低模型组细胞的迁移能力。免疫荧光和Western blot结果显示,雷酚内酯可抑制由TGF-β联合TNF-α诱导的EMT,与模型组比较,1μmol/L雷酚内酯组和10μmol/L雷酚内酯组α-SMA、Vimentin蛋白荧光强度下调,E-cadherin蛋白荧光强度上调。此外,对EMT相关转录因子的检测结果显示,模型组细胞磷酸化p65、TWIST1、ZEB1、SNAI1蛋白表达水平均上调,而雷酚内酯能够下调以上EMT相关转录因子。结论雷酚内酯可通过抑制NF-κB降低EMT相关转录因子SNAI1、ZEB1和TWIST1的表达,从而抑制由TGF-β联合TNF-α诱导的Beas-2b细胞的EMT进程。 展开更多
关键词 哮喘 上皮间充质转化 雷酚内酯 TGF-Β NF-ΚB
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miR-29在乙型肝炎肝硬化患者中的表达及对肝星状细胞活化和上皮间充质转化的影响
10
作者 周晶 王俊红 +2 位作者 彭林艳 陈国斌 杨路平 《国际消化病杂志》 CAS 2024年第1期36-41,共6页
目的 探讨miR-29在乙型肝炎肝硬化患者中的表达及对肝星状细胞(HSC)活化和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法 选择2020年6月至2022年6月应城市人民医院收治的104例乙型肝炎患者作为研究对象,其中单纯乙型肝炎患者52例(设为慢性乙肝组),... 目的 探讨miR-29在乙型肝炎肝硬化患者中的表达及对肝星状细胞(HSC)活化和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法 选择2020年6月至2022年6月应城市人民医院收治的104例乙型肝炎患者作为研究对象,其中单纯乙型肝炎患者52例(设为慢性乙肝组),乙型肝炎合并肝硬化患者52例(设为乙肝肝硬化组)。采用实时荧光定量PCR法测定血清miR-29a、mi R-29b和miR-29c的表达水平,并分析miR-29与乙型肝炎肝硬化患者Child-Pugh分级和临床分期的关系。用miR-29a/b/c重组慢病毒感染人HSC系LX-2,制备过表达miR-29细胞模型,并分析过表达miR-29对LX-2细胞增殖、活化和EMT的影响。结果 与慢性乙肝组相比,乙肝肝硬化组血清miR-29a、miR-29b和miR-29c的表达水平均显著降低(P均<0.01)。乙型肝炎肝硬化患者血清miR-29a、miR-29b、mi R-29c的表达水平均随着ChildPugh分级增高及临床分期加重而逐渐降低,组间差异均有统计学意义(P均<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,乙肝肝硬化组血清miR-29a、miR-29b、miR-29c的表达水平与Child-Pugh分级和临床分期均呈显著负相关(P均<0.01)。与空白对照组相比,重组慢病毒组的细胞增殖率显著降低,且α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)、Ⅲ型胶原(COLⅢ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)的蛋白及其m RNA的表达水平均显著降低,E-钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白及其mRNA的表达水平均显著升高,组间差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论 乙型肝炎肝硬化患者血清miR-29的表达水平较低,且其与Child-Pugh分级和临床分期相关;过表达mi R-29可能通过抑制HSC增殖、活化及EMT而发挥抗肝纤维化作用。 展开更多
关键词 乙型肝炎肝硬化 MIR-29 肝纤维化 肝星状细胞 上皮间充质转化
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情志应激激素受体调控Yes相关蛋白1影响乳腺癌细胞上皮间充质转化进程研究
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作者 曾伟 孙文娜 +2 位作者 廖女珠 罗丽珊 李耀泉 《中医药导报》 2024年第5期13-17,共5页
目的:探究情志应激激素受体(GR)与Yes相关蛋白1(YAP1)对乳腺癌MCF-7细胞转移的调控机制,以期为乳腺癌的治疗提供新思路。方法:通过免疫组化实验分析乳腺癌组织和癌旁组织GR和YAP1的表达;将MCF-7细胞分为:si NC组、si GR组和si YAP1组,... 目的:探究情志应激激素受体(GR)与Yes相关蛋白1(YAP1)对乳腺癌MCF-7细胞转移的调控机制,以期为乳腺癌的治疗提供新思路。方法:通过免疫组化实验分析乳腺癌组织和癌旁组织GR和YAP1的表达;将MCF-7细胞分为:si NC组、si GR组和si YAP1组,分别通过MTT实验、Transwell实验、细胞划痕实验和流式细胞术分析MCF-7细胞的增殖、侵袭、迁移能力及凋亡率,通过蛋白免疫印迹实验分析细胞GR和YAP1的表达水平。结果:与癌旁正常组织比较,乳腺癌组织YAP1与GR的表达水平升高。与si NC组比较,si GR组和si YAP1组的MCF-7细胞增殖能力、侵袭能力、迁移能力显著降低,凋亡率增加(P<0.05)。与si NC组比较,si GR组的MCF-7细胞的YAP1和GR表达水平降低(P<0.05),si YAP1组的MCF-7细胞的YAP1表达水平降低(P<0.05)。结论:乳腺癌患者的癌组织中YAP1与GR的表达水平升高。GR被激活后,通过调控细胞内的YAP1通路影响MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力以及凋亡率,进而导致乳腺癌MCF-7细胞转移,靶向调节YAP1抑制乳腺癌上皮间充质转化(EMT)发生可为乳腺癌患者提供新的治疗策略。 展开更多
关键词 情志应激 情志应激激素受体 Yes相关蛋白1 乳腺癌 上皮间充质转化 转移 MCF-7细胞
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SRPK1激活Wnt/β-catenin通路促进肝癌细胞上皮间充质转化 被引量：1
12
作者 石永杰 陈旖鹛 +5 位作者 黄思聪 嘉红云 周强 魏洁 肖绮雯 康嘉乐 《西部医学》 2023年第7期951-958,共8页
目的 探讨丝氨酸精氨酸蛋白激酶1(SRPK1)对肝癌细胞株HepG2上皮间充质转化(EMT)的作用。方法 通过Ualcan及TIMER 2.0数据库分析SRPK1 mRNA在肝细胞癌(LIHC)与正常样本、配对癌旁样本之间的表达差异,与生存时间、临床分期、病理分期、TP5... 目的 探讨丝氨酸精氨酸蛋白激酶1(SRPK1)对肝癌细胞株HepG2上皮间充质转化(EMT)的作用。方法 通过Ualcan及TIMER 2.0数据库分析SRPK1 mRNA在肝细胞癌(LIHC)与正常样本、配对癌旁样本之间的表达差异,与生存时间、临床分期、病理分期、TP53变异、人种、性别、年龄、体重等临床资料的关系。用HPA数据库的免疫组化数据验证SRPK1蛋白在LIHC组织及正常对照间的表达差异。构建SRPK1过表达及抑表达的HepG2细胞,并根据SRPK1表达差异分为SRPK1组及对照的Vector组,shRNA组及对照的Scramble组。Western blot检测4组细胞株SRPK1的蛋白水平。Western Blot、免疫荧光检测EMT分子标记物E-cadherin、Vimentin蛋白表达差异。核浆蛋白分离比较细胞β-catenin入核程度的变化。GEPIA2数据库分析在LIHC组织中SRPK1与Wnt/β-catenin通路下游基因Twist、MYC、MMP9的相关性,Real-time PCR验证SRPK1对Twist、MYC、MMP 9表达的影响。结果 SRPK1表达在LIHC组织中表达显著高于正常对照及配对癌旁样本(P<0.05),随疾病分期及病理分级增加而增加(P<0.05),高表达SRPK1组总生存期低于低表达组(P=0.035),LIHC患者TP53突变组SRPK1表达高于非突变组(P<0.05),在不同种族、性别、年龄、体重间无差别(P>0.05)。SRPK1过表达HepG2细胞E-cadherin表达下降,Vimentin表达增加(P<0.05);抑表达细胞E-cadherin增加,Vimentin下降(P<0.05)。SRPK1在LIHC组织中分别与Twist、MYC、MMP9表达呈正相关性(P<0.05);SRPK1过表达细胞β-catenin蛋白在细胞核中表达增加(P<0.05),Twist、MYC、MMP9表达增加(P<0.05);反之,抑表达细胞β-catenin在细胞核中表达下降(P<0.05),Twist、MYC、MMP9表达减少(P<0.05)。结论 SRPK1可能通过Wnt/β-catenin通路促进HepG2细胞EMT活化。 展开更多
关键词 丝氨酸精氨酸蛋白激酶1 肝细胞癌 HEPG2细胞 上皮间充质转化 WNT/Β-CATENIN通路
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柚皮素基于TGF-β2介导对白内障晶状体病理性上皮间充质转化的作用研究 被引量：1
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作者 李坤 王文英 《中国中医眼科杂志》 2023年第12期1101-1108,共8页
目的探讨白内障的发病机制是否与人晶状体上皮细胞系B3(HLE-B3)的病理性上皮间充质转化(EMT)有关,并评价柚皮素基于转化生长因子-β2(TGF-β2)介导对白内障晶状体病理性EMT的作用及机制。方法常规培养HLE-B3细胞,筛选TGF-β2和柚皮素的... 目的探讨白内障的发病机制是否与人晶状体上皮细胞系B3(HLE-B3)的病理性上皮间充质转化(EMT)有关,并评价柚皮素基于转化生长因子-β2(TGF-β2)介导对白内障晶状体病理性EMT的作用及机制。方法常规培养HLE-B3细胞,筛选TGF-β2和柚皮素的最佳浓度后,TGF-β2处理HLE-B3细胞诱导EMT,建立白内障体外模型。随机将细胞分为对照组(CG)、TGF-β2组(TGF-β2)、柚皮素组(Nar)、柚皮素+TGF-β2组(Nar+TGF-β2)培养48 h,采用跨孔迁移实验检测细胞侵袭能力,伤口愈合实验测定HLE-B3的迁移能力,细胞计数法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)法测定细胞增殖能力。Western Blot和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测EMT相关标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)和胞质紧密粘连蛋白1(ZO-1)的表达水平。结果(1)细胞活性与增殖:与CG组比较,Nar组和Nar+TGF-β2组细胞活性较低(t_(Nar)=16.404,t_(Nar)+TGF-β2=16.119,均P=0.000),EdU阳性细胞数较少(t_(Nar)=13.918,t_(Nar)+TGF-β2=13.473,均P=0.000),差异有统计学意义。(2)细胞侵袭和迁移:与CG组比较,TGF-β2组细胞侵袭个数较多(t=26.198,P=0.000),细胞迁移率较高(t=11.703,P=0.000);而Nar组细胞侵袭个数较少(t=23.975,P=0.000),细胞迁移率较低(t=7.198,P=0.000),差异均有统计学意义。(3)细胞凋亡:与CG组比较,TGF-β2组细胞凋亡率较高(t=5.806,P=0.000),Nar组细胞凋亡率较低(t=3.838,P=0.005),差异均有统计学意义。(4)EMT相关蛋白和mRNA:与CG组比较,TGF-β2组HLE-B3细胞α-SMA蛋白表达较高(t=4.847,P=0.001)、mRNA表达较高(t=8.684,P=0.000),E-cadherin和ZO-1蛋白表达较低(t_(E-cadherin)=5.584,t_(ZO-1)=5.251,均P=0.001)、mRNA表达较低(t_(E-cadherin)=5.379,P=0.001;t_(ZO-1)=2.365,P=0.045);Nar组α-SMA蛋白表达较低(t=5.144,P=0.001)、mRNA表达较低(t=3.961,P=0.004),E-cadherin和ZO-1蛋白表达较高(t_(E-cadherin)=6.175,t_(ZO-1)=8.383,均P=0.000)、mRNA表达较高(t_(E-cadherin)=5.379,t_(ZO-1)=5.125,均P=0.001),差异均有统计学意义。结论柚皮素能抑制TGF-β2诱导的HLE-B3细胞的增殖、侵袭、迁移、凋亡能力及EMT。 展开更多
关键词 柚皮素 人晶状体上皮细胞 白内障 上皮间充质转化 转化生长因子-Β2
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下调胰岛素样生长因子抑制miR-767-5p的表达对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间充质转化的影响
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作者 刘海英 陈峰 姚嘉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第22期2878-2884,共7页
目的研究抑制miR-767-5p对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法体外培养乳腺癌细胞,将miR-767-5p inhibitor和inhibitor-NC转染到乳腺癌细胞中。细胞分为3组:空白对照组(Control组),miR-767-5p inhibitor组和i... 目的研究抑制miR-767-5p对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法体外培养乳腺癌细胞,将miR-767-5p inhibitor和inhibitor-NC转染到乳腺癌细胞中。细胞分为3组:空白对照组(Control组),miR-767-5p inhibitor组和inhibitor-NC组,采用CCK-8法、Transwell法、划痕实验检测miR-767-5p抑制剂对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。Western blot检测迁移相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9的表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-767-5p和胰岛素样生长因子-1(IGF1)的靶向结合作用。RT-qPCR和Western blot实验检测IGF1 mRNA和蛋白的表达水平。采用Western blot检测EMT相关蛋白的表达水平。结果CCK-8实验结果显示,与Control组和inhibitorNC组相比,miR-767-5p inhibitor组显著抑制MCF-7细胞的增殖(P<0.05)。Transwell实验结果表明,与Control组和inhibitor-NC组相比,miR-767-5p inhibitor组乳腺癌细胞侵袭细胞数显著下降(P<0.05)。划痕实验结果显示,与Control组和inhibitor-NC组相比,miR-767-5p inhibitor组乳腺癌细胞迁移率显著下降(P<0.05)。荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-767-5p能够靶向结合IGF1。Western blot结果表明,与Control组和inhibitor-NC组相比,miR-767-5p inhibitor组的E-cadherin蛋白表达水平显著增高(P<0.05),Ncadherin、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。与Control组和inhibitor-NC组相比,miR-767-5p inhibitor组中IGF1的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论抑制miR-767-5p的表达可通过下调IGF1抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移及EMT的发生。 展开更多
关键词 乳腺癌 miR-767-5p 胰岛素样生长因子-1 上皮间充质转化 迁移侵袭
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LncRNA FENDRR调控miR-942-5p表达对食管癌细胞增殖、上皮间充质转化及侵袭的影响 被引量：2
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作者 杨海龙 王丁丁 +3 位作者 陈雨桐 陈晓伟 李冰 王欣丽 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第13期2425-2430,共6页
目的:探究LncRNA FENDRR通过miR-942-5p对EC细胞增殖、上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和侵袭的影响。方法:收集EC和食管正常组织,将EC-113细胞分为BC组(不转染)、过表达(OE)-FENDRR-NC组(转染pcDNA空质粒)、OE-... 目的:探究LncRNA FENDRR通过miR-942-5p对EC细胞增殖、上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和侵袭的影响。方法:收集EC和食管正常组织,将EC-113细胞分为BC组(不转染)、过表达(OE)-FENDRR-NC组(转染pcDNA空质粒)、OE-FENDRR组(转染pcDNA-LncRNA FENDRR质粒)、OE-FENDRR+miR-942-5p mimics-NC组(共转染pcDNA-LncRNA FENDRR+miR-942-5p mimics-NC)和OE-FENDRR+miR-942-5p mimics组(共转染pcDNA-LncRNA FENDRR+miR-942-5p mimics)。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分析组织或细胞中LncRNA FENDRR、miR-942-5p表达量;细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法、裸鼠成瘤实验、Transwell法分析EC-113细胞体外和体内增殖和侵袭活性;双荧光素酶报告实验和RNA pull down实验分析LncRNA FENDRR和miR-942-5p的靶向关系;蛋白质印迹法(Western blot)分析EMT相关蛋白表达。结果:转染pcDNA-LncRNA FENDRR质粒可增高EC-113细胞的LncRNA FENDRR表达量,降低miR-942-5p表达,同时降低体外和体内增殖活性、侵袭数量、N-钙黏附素(N-cadherin,N-CAD)、波形蛋白(vimentin,VIM)和Snial及基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)蛋白水平,增加E-钙黏附素(E-cadherin,E-CAD)蛋白水平(P<0.05),而miR-942-5p mimics逆转了上述作用。LncRNA FENDRR可靶向并下调miR-942-5p表达。结论:LncRNA FENDRR为miR-942-5p分子海绵,可以下调miR-942-5p表达,从而抑制EC细胞增殖、EMT和侵袭能力。 展开更多
关键词 长链非编码RNA FENDRR 微小RNA-199a-5p 食管癌 增殖 上皮间充质转化 侵袭
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细胞角蛋白17在胃癌细胞上皮间充质转化(EMT)中的作用及临床意义研究
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作者 钟玉兵 王韬 《中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生》 2023年第6期81-84,共4页
研究 CK17对胃癌细胞株体外侵袭转移能力的影响,以及调控上皮间充质转化(EMT)标志性基因的表达情况,为寻找胃癌诊疗新靶点提供理论依据。方法 胃癌细胞系AGS、MGC823、MGC803、SGC7901、MKN45、人胃癌细胞(HGC-27)、胃部正常黏膜组织上... 研究 CK17对胃癌细胞株体外侵袭转移能力的影响,以及调控上皮间充质转化(EMT)标志性基因的表达情况,为寻找胃癌诊疗新靶点提供理论依据。方法 胃癌细胞系AGS、MGC823、MGC803、SGC7901、MKN45、人胃癌细胞(HGC-27)、胃部正常黏膜组织上皮细胞株人胃黏膜细胞(GES-1),制定与完善靶向抑制CK-17指标水平表达的特异性小干扰RNA(Small interfering RNA;siRNA),同时瞬时转染人胃癌细胞SGC7901以及AGS细胞。实时荧光定量核酸扩增检测(Real-time Quantitative PCR Detecting System,qPCR)方法检查瞬时转染96小时后SGC7901以及AGS细胞中CK17mRNA指标表达水平;并且使用MTT比色方法细胞划痕愈合发光法、TransweII小室方法检查减少CK17指标表达水平对于细胞繁殖、迁移以及侵袭等方面的影响,使用蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB )方式对细胞中上皮间充质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)有关蛋白表达水平进行检测。结果 与正常胃黏膜上皮细胞相比,六种胃癌细胞株CK17指标表达水平均处于较高水平中,靶向抑制 siRNA CK-17组SGC7901及AGS细胞中CK-17 mRNA表达下调(P<0.01),该细胞的增殖、迁移和侵袭能力受到抑制,E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin、vimentin蛋白表达降低。结论 CK17可促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,该作用可能与EMT过程有关。 展开更多
关键词 细胞角蛋白17 胃癌 上皮间充质转化
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藏药二十五味松石丸抑制血管生成和上皮间充质转化改善四氯化碳-酒精诱导的大鼠肝纤维化研究 被引量：1
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作者 许湘 黄丹 +6 位作者 陆华冠 刘延涛 刘馨 谢新 雷昌 赵洪庆 刘建军 《中南药学》 CAS 2023年第5期1157-1163,共7页
目的研究二十五味松石丸是否通过抑制血管生成和上皮间充质转化改善四氯化碳(CCl_(4))-酒精诱导的大鼠肝纤维化模型。方法SPF级健康雄性SD大鼠30只,随机分为正常组,模型组,二十五味松石丸低、中和高[88、176、352 mg/(kg·d)]剂量组... 目的研究二十五味松石丸是否通过抑制血管生成和上皮间充质转化改善四氯化碳(CCl_(4))-酒精诱导的大鼠肝纤维化模型。方法SPF级健康雄性SD大鼠30只,随机分为正常组,模型组,二十五味松石丸低、中和高[88、176、352 mg/(kg·d)]剂量组,每组6只。采用50%CCl_(4)橄榄油腹部皮下左右交替注射,同时以5%酒精饮料喂养建立肝纤维化模型;正常组皮下注射同体积橄榄油以蒸馏水喂养,持续8周,造模的同时按照分组灌胃相应的药物和0.4%羧甲基纤维素钠治疗。HE和Masson染色检测大鼠肝脏组织病理变化和胶原纤维增生;生化试剂盒测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),酶联免疫分析测定肿瘤坏死因子(TNF-α)、透明质酸(HA)和层黏连蛋白(LA)水平;免疫组化检测血小板内皮细胞黏附分子-1(CD31)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达;免疫印迹法检测α-SMA、TGF-β1、E-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果与正常组相比,模型组大鼠肝组织病理损伤严重,胶原纤维明显增生;模型组中大鼠血清中ALT、AST活性明显升高,TNF-α含量明显增加,HA和LN含量明显升高;模型组大鼠肝组织内CD31、α-SMA、TGF-β1和Vimentin蛋白表达明显增加,E-cadherin蛋白表达明显降低。与模型组相比,二十五味松石丸各剂量组均能改善大鼠肝组织病理损伤、降低肝功能和肝纤维化指标,降低大鼠血清中TNF-α水平及肝组织内CD31、α-SMA、TGF-β1和Vimentin蛋白表达,增加E-cadherin蛋白表达。结论二十五味松石丸可改善CCl_(4)酒精复合因素诱导的大鼠肝纤维化,其作用可能与抑制血管新生和上皮间充质转化相关。 展开更多
关键词 二十五味松石丸 肝纤维化 血管生成 上皮间充质转化 血小板内皮细胞黏附分子-1
原文传递
圣草次苷通过上皮间充质转化途径抑制肺腺癌细胞的增殖及迁移 被引量：1
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作者 高明朗 赖凯 +5 位作者 邓宇 卢子龙 徐宸桢 王文捷 李宁 耿庆 《海南医学院学报》 CAS 2023年第3期190-197,共8页
目的:探究圣草次苷(Eriocitrin)对肺腺癌(Lung adenocarcinoma, LUAD)细胞系A549和H1299增殖和迁移能力的影响,以及对上皮间充质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)的作用机制。方法:采用CCK8方法检测不同浓度圣草次苷对LUAD... 目的:探究圣草次苷(Eriocitrin)对肺腺癌(Lung adenocarcinoma, LUAD)细胞系A549和H1299增殖和迁移能力的影响,以及对上皮间充质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)的作用机制。方法:采用CCK8方法检测不同浓度圣草次苷对LUAD细胞系A549和H1299增殖能力的影响;采用划痕实验评价A549和H1299细胞的迁移能力;用Western Blot法和qRT-PCR法分别检测EMT相关上皮钙黏蛋白(E-cadherin和N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、铁死亡相关蛋白SLC7A11、GPX4、FTH和EMT标志分子E-cadherin、N-cadherin、Snail的mRNA水平,及细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平,观察圣草次苷对LUAD细胞系铁死亡的影响。结果:圣草次苷可以明显抑制LUAD细胞系A549和H1299的增殖能力,并呈现出一定的剂量和时间依赖性。与对照组相比,不同浓度的圣草次苷作用24和48 h后均明显降低划痕愈合率,差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,圣草次苷增加了LUAD细胞系A549和H1299的ROS的表达水平,增加了EMT相关蛋白E-cadherin的蛋白表达水平,降低了N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平。此外,qRT-PCR结果也显示:圣草次苷上调了E-cadherin mRNA的表达,下调了N-cadherin、Snail mRNA表达,铁死亡相关基因SLC7A11、GPX4、FTH蛋白水平均下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:圣草次苷通过EMT途径抑制LUAD细胞的增殖和迁移,并促进铁死亡过程的发生,在LUAD预防和辅助化疗中具有一定的应用潜力。 展开更多
关键词 圣草次苷 肺腺癌 增殖 迁移 上皮间充质转化 铁死亡
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SLC12A8通过JAK/STAT途径促进膀胱癌细胞的增殖、侵袭与迁移并触发上皮间充质转化 被引量：2
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作者 张晓林 吴浩松 汪盛 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1613-1621,共9页
目的探究溶质载体家族12成员8(SLC12A8)在膀胱癌中的表达及作用机制。方法利用TCGA数据库分析SLC12A8在膀胱癌中的表达、预后及其与临床病理特征关系。细胞通过瞬时转染siRNA,将实验分为siNC组和siSLC12A8组,各组终浓度为50 nmol/L。利... 目的探究溶质载体家族12成员8(SLC12A8)在膀胱癌中的表达及作用机制。方法利用TCGA数据库分析SLC12A8在膀胱癌中的表达、预后及其与临床病理特征关系。细胞通过瞬时转染siRNA,将实验分为siNC组和siSLC12A8组,各组终浓度为50 nmol/L。利用qRT-PCR检测干扰效率,CCK-8、Transwell及划痕实验检测各组膀胱癌细胞增殖、侵袭与迁移能力。GSEA对通路富集分析;分析SLC12A8与EMT标志物相关性。Western blot检测通路蛋白及EMT相关蛋白表达。通过应用Colivelin将实验分为siSLC12A8+NC组和siSLC12A8+Colivelin组,药物浓度为0.5μmol/L,利用cck-8及Transwell检测各组细胞生物学行为。结果SLC12A8在膀胱癌中高表达(P<0.05)、与不良预后及病理分期相关(P<0.05),并可作为独立预后因素。CCK-8、Transwell及划痕实验结果表明,与siNC组相比,siSLC12A8组细胞增殖、侵袭与迁移能力降低(P<0.05)。GSEA表明富集在JAK/STAT信号通路上(P=0.008)。相关性分析表明,SLC12A8与E-cadherin负相关(r=-0.183,P<0.001),而与N-cadherin正相关(r=0.302,P<0.001)、vimentin正相关(r=0.342,P<0.001)。Western blot结果显示,与siNC组相比,siSLC12A8组p-Jak2、p-Stat3蛋白水平降低,E-cadherin表达增加、N-cadherin和vimentin蛋白表达水平下降。应用Colivelin后,与siSLC12A8+NC组相比,siSLC12A8+Colivelin组细胞增殖、侵袭与迁移能力增加(P<0.05)。结论SLC12A8通过激活JAK/STAT信号通路促进膀胱癌进展,且与不良预后密切相关。 展开更多
关键词 SLC12A8 膀胱癌 JAK/STAT 增殖 上皮间充质转化
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S1P/S1PR1信号通路通过调控ROS/NLRP3对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞上皮间充质转化的影响
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作者 黄太平 王菁 +4 位作者 徐焕雨 杨佳 薛媛 张婷婷 田继华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1143-1148,共6页
目的探究S1P/S1PR1信号通路对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其可能的作用机制。方法采用不同浓度葡萄糖处理细胞,ELISA法检测细胞内S1P表达,Western blot检测S1PR1蛋白表... 目的探究S1P/S1PR1信号通路对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其可能的作用机制。方法采用不同浓度葡萄糖处理细胞,ELISA法检测细胞内S1P表达,Western blot检测S1PR1蛋白表达;将细胞分为正常对照组、HG组及HG+siS1PR1组,RT-PCR检测细胞E-cadherin、Vimentin、Fibronectin及Twist mRNA的表达,Western blot检测E-cadherin、α-SMA、Vimentin、NLRP3、ASC及NF-κB蛋白表达,流式细胞术检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;将细胞分为正常对照组、S1P组及S1P+siS1PR1组,Western blot检测Vimentin、Snail、α-SMA、NLRP3、ASC及NF-κB蛋白表达,荧光显微镜测定ROS水平。结果ELISA结果显示,高糖刺激下细胞内S1P含量明显升高。Western blot结果显示,30 mmol·L^(-1)浓度时S1PR1蛋白表达量与对照组相比明显升高;阻断S1PR1后可以抑制高糖诱导的Fibronectin、Vimentin及Twist mRNA表达,上调E-cadherin mRNA的表达,Western blot结果显示,E-cadherin蛋白表达升高,Vimentin,α-SMA蛋白表达下降,同时可抑制细胞内ROS的产生和NLRP3,ASC,NF-κB蛋白水平;加入S1P激活剂后细胞内ROS水平,Vimentin、α-SMA、Snail、NLRP3、ASC及NF-κB蛋白水平表达均升高,阻断S1PR1后表达均降低。结论高糖能诱导肾小管上皮细胞EMT,其机制可能与S1P/S1PR1信号通路作用于ROS/NLRP3轴有关。 展开更多
关键词 S1P/S1PR1信号通路 ROS NF-κB NLRP3 上皮间充质转化 肾小管上皮细胞
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