目的通过免疫信息学方法预测针对中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的T/B细胞抗原表位。方法从NCBI获取S蛋白序列后,运用MEGA11进行多序列比对及系统发育树构建,Expasy Protparam分析其理化性质,SOPMA预测其二级结构。随后对S蛋白建模...目的通过免疫信息学方法预测针对中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的T/B细胞抗原表位。方法从NCBI获取S蛋白序列后,运用MEGA11进行多序列比对及系统发育树构建,Expasy Protparam分析其理化性质,SOPMA预测其二级结构。随后对S蛋白建模并进行模型验证。再通过NetCTL-1.2、NetMHC pan EL 4.1和IEDB预测杀伤性T细胞(CTL)表位,NetMHCⅡpan-4.0、IFNepitope和IL-4pred预测辅助性T细胞表位(HTL),ABCpred和BepiPred-2.0预测线性B细胞表位(LBL),ElliPro工具预测构象B细胞表位(CBL)。最后对上述预测得到的线性表位进行抗原性、致敏性和毒性预测。结果S蛋白序列保守性较高,且来自不同国家的100个MERS-CoV S蛋白可以装进同一系统进化枝。理化性质分析结果显示,S蛋白亲水性总平均值为-0.078,在哺乳动物网织红细胞中半衰期约为30 h。模型验证结果显示构建的S蛋白模型是合理的。从S蛋白中预测得到具有抗原性、无致敏性和无毒性的CTL表位2个、HTL表位2个,LBL表位15个。ElliPro工具预测得到的CBL表位5个。结论MERS-CoV的S蛋白是亲水性的稳定蛋白;综合多种生物信息学方法可以预测得到T/B细胞抗原表位,对开发针对MERS-CoV的多肽疫苗具有重要借鉴意义。展开更多
2012年9月在沙特阿拉伯首次报告了2例临床表现类似于严重急性呼吸综合征（SARS）的新型冠状病毒感染病例,此后中东、欧洲相继报告了多例该病病例。2013年5月23日世界卫生组织（World Health Organization,WHO）将这种新型冠状病毒命名...2012年9月在沙特阿拉伯首次报告了2例临床表现类似于严重急性呼吸综合征（SARS）的新型冠状病毒感染病例,此后中东、欧洲相继报告了多例该病病例。2013年5月23日世界卫生组织（World Health Organization,WHO）将这种新型冠状病毒命名为＂中东呼吸综合征冠状病毒（Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV）＂。展开更多
中东呼吸综合征(Middle East Respiratory Syndrome,MERS)是2012年发现的由一种新型冠状病毒感染所致的,具有高病死率的急性重症呼吸道疾病,该冠状病毒为中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-COV)。目前,该疾病在中东地区蔓延流行,并扩散至其...中东呼吸综合征(Middle East Respiratory Syndrome,MERS)是2012年发现的由一种新型冠状病毒感染所致的,具有高病死率的急性重症呼吸道疾病,该冠状病毒为中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-COV)。目前,该疾病在中东地区蔓延流行,并扩散至其他多个国家,已引起世界各地广泛关注。本文对MERS的流行病学特征、临床救治及全球应对现状等进展做一综述,为今后MERS的有效预防和防控发展提供建议参考。展开更多
中东呼吸综合征(Middle East respiratory syndrome,MERS)是由一种新型冠状病毒引起的呼吸系统疾病,2012年首次报道,病死率较高,且近年来发病例数明显上升,范围也逐步扩大,引起了广泛的关注。2015年5月26日,中国出现了首例输入性MERS病...中东呼吸综合征(Middle East respiratory syndrome,MERS)是由一种新型冠状病毒引起的呼吸系统疾病,2012年首次报道,病死率较高,且近年来发病例数明显上升,范围也逐步扩大,引起了广泛的关注。2015年5月26日,中国出现了首例输入性MERS病例,建立相应的防控体系刻不容缓。作者对目前MERS的流行现状进行概述,结合"One Heal"理念,阐述针对MERS等人兽共患病的防控策略,为新发传染病的防控提供新的思路。展开更多
目的:利用昆虫杆状病毒表达系统重组表达中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-Co V)S1蛋白,并对其免疫效果进行评价。方法:构建含有MERS-Co V S1基因的重组杆状病毒质粒,转染Sf9细胞包装杆状病毒;重组病毒传代3次获得种子病毒,感染Sf9细胞,收...目的:利用昆虫杆状病毒表达系统重组表达中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-Co V)S1蛋白,并对其免疫效果进行评价。方法:构建含有MERS-Co V S1基因的重组杆状病毒质粒,转染Sf9细胞包装杆状病毒;重组病毒传代3次获得种子病毒,感染Sf9细胞,收获感染上清,通过镍离子亲和层析纯化获得S1重组蛋白;用纯化的S1蛋白免疫BALB/c小鼠,采用ELISA检测免疫小鼠血清抗原特异性的抗体水平;采用假病毒中和试验检测血清中抗体的中和活性。结果:获得了表达MERS-Co V S1蛋白的重组病毒株,在昆虫细胞中表达并纯化了S1重组蛋白;利用重组表达的S1蛋白免疫小鼠3次,血清S1特异性Ig G抗体滴度可达1∶102 400,免疫小鼠血清稀释至1/5120后中和百分比仍达50%以上。结论:利用昆虫细胞重组表达的MERS-Co V S1蛋白具有良好的免疫原性,并能有效诱导产生高滴度中和抗体,为发展MERS-Co V重组蛋白疫苗奠定了基础。展开更多
文摘目的通过免疫信息学方法预测针对中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的T/B细胞抗原表位。方法从NCBI获取S蛋白序列后,运用MEGA11进行多序列比对及系统发育树构建,Expasy Protparam分析其理化性质,SOPMA预测其二级结构。随后对S蛋白建模并进行模型验证。再通过NetCTL-1.2、NetMHC pan EL 4.1和IEDB预测杀伤性T细胞(CTL)表位,NetMHCⅡpan-4.0、IFNepitope和IL-4pred预测辅助性T细胞表位(HTL),ABCpred和BepiPred-2.0预测线性B细胞表位(LBL),ElliPro工具预测构象B细胞表位(CBL)。最后对上述预测得到的线性表位进行抗原性、致敏性和毒性预测。结果S蛋白序列保守性较高,且来自不同国家的100个MERS-CoV S蛋白可以装进同一系统进化枝。理化性质分析结果显示,S蛋白亲水性总平均值为-0.078,在哺乳动物网织红细胞中半衰期约为30 h。模型验证结果显示构建的S蛋白模型是合理的。从S蛋白中预测得到具有抗原性、无致敏性和无毒性的CTL表位2个、HTL表位2个,LBL表位15个。ElliPro工具预测得到的CBL表位5个。结论MERS-CoV的S蛋白是亲水性的稳定蛋白;综合多种生物信息学方法可以预测得到T/B细胞抗原表位,对开发针对MERS-CoV的多肽疫苗具有重要借鉴意义。
文摘2012年9月在沙特阿拉伯首次报告了2例临床表现类似于严重急性呼吸综合征（SARS）的新型冠状病毒感染病例,此后中东、欧洲相继报告了多例该病病例。2013年5月23日世界卫生组织（World Health Organization,WHO）将这种新型冠状病毒命名为＂中东呼吸综合征冠状病毒（Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV）＂。
文摘中东呼吸综合征(Middle East Respiratory Syndrome,MERS)是2012年发现的由一种新型冠状病毒感染所致的,具有高病死率的急性重症呼吸道疾病,该冠状病毒为中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-COV)。目前,该疾病在中东地区蔓延流行,并扩散至其他多个国家,已引起世界各地广泛关注。本文对MERS的流行病学特征、临床救治及全球应对现状等进展做一综述,为今后MERS的有效预防和防控发展提供建议参考。
文摘中东呼吸综合征(Middle East respiratory syndrome,MERS)是由一种新型冠状病毒引起的呼吸系统疾病,2012年首次报道,病死率较高,且近年来发病例数明显上升,范围也逐步扩大,引起了广泛的关注。2015年5月26日,中国出现了首例输入性MERS病例,建立相应的防控体系刻不容缓。作者对目前MERS的流行现状进行概述,结合"One Heal"理念,阐述针对MERS等人兽共患病的防控策略,为新发传染病的防控提供新的思路。
文摘目的:利用昆虫杆状病毒表达系统重组表达中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-Co V)S1蛋白,并对其免疫效果进行评价。方法:构建含有MERS-Co V S1基因的重组杆状病毒质粒,转染Sf9细胞包装杆状病毒;重组病毒传代3次获得种子病毒,感染Sf9细胞,收获感染上清,通过镍离子亲和层析纯化获得S1重组蛋白;用纯化的S1蛋白免疫BALB/c小鼠,采用ELISA检测免疫小鼠血清抗原特异性的抗体水平;采用假病毒中和试验检测血清中抗体的中和活性。结果:获得了表达MERS-Co V S1蛋白的重组病毒株,在昆虫细胞中表达并纯化了S1重组蛋白;利用重组表达的S1蛋白免疫小鼠3次,血清S1特异性Ig G抗体滴度可达1∶102 400,免疫小鼠血清稀释至1/5120后中和百分比仍达50%以上。结论:利用昆虫细胞重组表达的MERS-Co V S1蛋白具有良好的免疫原性,并能有效诱导产生高滴度中和抗体,为发展MERS-Co V重组蛋白疫苗奠定了基础。
