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高通量悬浮芯片技术检测多农兽药残留 被引量:15
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作者 刘楠 苏璞 +5 位作者 朱茂祥 杨陟华 潘秀颉 王红勇 晁福寰 高志贤 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第5期673-677,共5页
建立了一种同时可检测多农兽药残留的高通量悬浮芯片技术。以常用的7种农兽药为待测靶标物,通过优化条件,使抗原抗体基本完全反应,操作简便快捷,最多可同时检出7种农兽药残留靶标物;实验结果表明,高通量悬浮芯片检测标准回归曲线方程和... 建立了一种同时可检测多农兽药残留的高通量悬浮芯片技术。以常用的7种农兽药为待测靶标物,通过优化条件,使抗原抗体基本完全反应,操作简便快捷,最多可同时检出7种农兽药残留靶标物;实验结果表明,高通量悬浮芯片检测标准回归曲线方程和相应的决定系数R2表现良好;在对含有多种农兽药残留的不同盲样的检测中,检测浓度值与实际浓度的相对偏差较小。高通量悬浮芯片技术为多农兽药残留的快速检测提供了新方法,此系统可用于多农兽药残留实际样品的初步检测,整个检测过程仅耗时1~2h,基本上满足了多农兽药残留检测的灵敏、特异、快速和高效的需求,具有广阔的应用和发展前景。 展开更多
关键词 悬浮芯片 高通量 微球 残留 中位荧光强度
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悬浮芯片法与常规酶联免疫吸附法检测3种兽药残留的比较 被引量:8
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作者 刘楠 苏璞 +4 位作者 高志贤 朱茂祥 杨陟华 潘秀颉 晁福寰 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第7期960-964,共5页
建立氯霉素,克伦特罗和雌二醇3种兽药残留同时检测的悬浮芯片法。通过将3种兽药的BSA蛋白结合物偶联于悬浮芯片的固相载体——聚苯乙烯荧光微球上作为检测探针,采用间接竞争法,在液相反应体系中,3种小分子兽药抗原和微球上的兽药结合物... 建立氯霉素,克伦特罗和雌二醇3种兽药残留同时检测的悬浮芯片法。通过将3种兽药的BSA蛋白结合物偶联于悬浮芯片的固相载体——聚苯乙烯荧光微球上作为检测探针,采用间接竞争法,在液相反应体系中,3种小分子兽药抗原和微球上的兽药结合物共同竞争液相中各自特异性的生物素化单抗,再加入藻红蛋白标记的链霉亲和素,反应后检测获得荧光信号,绘制出3种兽药残留检测的标准曲线。同时进行3种兽药的常规酶联免疫吸附法标准曲线的测定。在检测技术、检出限、检测区间、特异性、盲样测定和多元分析等方面对两种方法进行比较。除了特异性外的其它指标的比较中,悬浮芯片法均具有明显优势。两种方法的特异性检测具有良好的一致性。高通量悬浮芯片技术,具有操作简单、灵敏快速和成本低廉等优点,为多种兽药残留的快速检测提供了新方法。 展开更多
关键词 悬浮芯片 酶联免疫吸附法 残留 微球 中位荧光强度
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悬浮芯片技术在食品安全检测方面应用进展 被引量:2
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作者 李烨 郭启悦 +3 位作者 任舒悦 张迎春 杨仕平 高志贤 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第5期1236-1242,共7页
食品安全是重要的民生问题,如何保障食品安全,守护"舌尖上的中国"一直是国家和人民关注的焦点问题。悬浮芯片技术是唯一被美国食品药品管理局(Food and Drug Administration, FDA)批准的生物芯片技术,具有准确、灵敏、高通量... 食品安全是重要的民生问题,如何保障食品安全,守护"舌尖上的中国"一直是国家和人民关注的焦点问题。悬浮芯片技术是唯一被美国食品药品管理局(Food and Drug Administration, FDA)批准的生物芯片技术,具有准确、灵敏、高通量等优点,可以满足食品安全部门监管,食品行业自检需求,被越来越多的研究者应用于食品安全方面的检测。因此了解该技术的发展及应用对研究者有重要意义。本文主要对悬浮芯片技术的原理及组成、在食品安全检测中的应用进行了概述,阐述了近5年该技术在检测食源性微生物、农兽药残留、转基因食品和过敏原方面的应用,并对悬浮芯片技术进一步发展方向进行展望。 展开更多
关键词 悬浮芯片 高通量 食品安全 荧光编码微球 中位荧光强度
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多参数流式细胞术筛选急性早幼粒细胞白血病免疫表型特征 被引量:1
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作者 李婷 伍平 +6 位作者 陈曼 王爱先 傅旻婧 吴雪英 甄军毅 宫美维 王卉 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期747-754,共8页
目的:多参数流式细胞术(MFC)分析筛选急性早幼粒细胞白血病(APL)免疫表型特征。方法:回顾性描述性研究。纳入2016年1月1日至2023年12月31日于河北燕达陆道培医院就诊的130例急性髓系白血病(AML)患者,其中经典型APL(cAPL)组44例,微颗粒... 目的:多参数流式细胞术(MFC)分析筛选急性早幼粒细胞白血病(APL)免疫表型特征。方法:回顾性描述性研究。纳入2016年1月1日至2023年12月31日于河北燕达陆道培医院就诊的130例急性髓系白血病(AML)患者,其中经典型APL(cAPL)组44例,微颗粒变异型APL(APLv)组24例,非APL[包括NPM1突变AML(NPM1 mut AML)、AML伴KMT2A重排等]组62例。采用MFC免疫分型法分析和比较各组侧向散射光(SSC)中位表达强度(MEI)及其白血病细胞与自身成熟淋巴细胞MEI比值(T/L MEIR),CD34、髓过氧化物酶(MPO)、CD64和CD9的中位荧光强度(MDFI)及其上述参数白血病细胞与自身成熟淋巴细胞MDFI比值(T/L MDFIR)差异;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价流式多参数模型对cAPL和非APL、APLv和非APL的鉴别诊断效能。结果:cAPL组SSC的MEI、T/L MEIR高于APLv组和非APL组(P均<0.05),且APLv组高于非APL组(P<0.05);cAPL组和APLv组CD34的MDFI均高于非APL组(P均<0.05),APLv组的CD34 T/L MDFIR高于非APL组(P<0.05);cAPL组和APLv组MPO、CD9的MDFI、T/L MDFIR均高于非APL组(P均<0.05);cAPL组CD64的MDFI、T/L MDFIR均高于非APL组(P均<0.05)。ROC曲线结果显示,SSC的MEI、CD64的MDFI、CD9的MDFI、SSC的T/L MEIR和CD9的T/L MDFIR诊断cAPL的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.932、0.816、0.893、0.960和0.894,诊断APLv的AUC分别为0.725、0.737、0.791、0.729和0.736,其对鉴别cAPL和非APL、APLv和非APL均有较好的诊断价值(P均<0.05)。结论:通过MFC方法可分析筛选APL的免疫表型特征,对cAPL、APLv和非APL患者进行鉴别诊断。 展开更多
关键词 白血病 早幼粒细胞 急性 流式细胞术 免疫表型分型 中位荧光强度 鉴别诊断
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用于氯霉素和克伦特罗兽药残留检测的高通量悬浮芯片技术研究 被引量:9
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作者 刘楠 高志贤 +4 位作者 苏璞 晁福寰 朱茂祥 杨陟华 潘秀颉 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2009年第1期41-44,65,共5页
目的:建立一种检测氯霉素(chloramphenicol,CAP)和克伦特罗(clenbuterol,CL)兽药残留的新型高通量悬浮芯片技术。方法:合成2种兽药的牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)结合物,并进行紫外和质谱鉴定。将2种兽药的BSA蛋白结合物偶... 目的:建立一种检测氯霉素(chloramphenicol,CAP)和克伦特罗(clenbuterol,CL)兽药残留的新型高通量悬浮芯片技术。方法:合成2种兽药的牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)结合物,并进行紫外和质谱鉴定。将2种兽药的BSA蛋白结合物偶联于悬浮芯片的固相载体——聚苯乙烯荧光微球上,在液相反应体系中,2种小分子兽药抗原和微球上的结合物共同竞争液相中各自特异性的生物素化单抗,优化和筛选出微球上偶联BSA结合物和反应抗体的最适加入量。绘制2种兽药残留检测的标准曲线,进行特异性检测和盲样的测定。结果:2种小分子兽药可与BSA成功偶联,CAP和CL与BSA的偶联比分别为40∶1和31∶1。经过优化,2种结合物的最适加入量均为5μg/100μl羧基微球;最佳抗体加入量分别为5和1ng/2000个反应微球。检测的标准曲线方程和方程相应的决定系数分别为:YCAP=-250.323+4103.517/[1+(X/30121.243)0.980],r2=0.994和YCL=-263012.682+265751.765/[1+(X/6.063)0.115],r2=0.989。2种兽药悬浮芯片的检测区间分别为40~6.25×105ng/L和50~7.81×105ng/L;最低检出限为:40ng/L和50ng/L。CAP和CL最低检出限均低于国标。同时,悬浮芯片的特异度测试良好,与其他药物无明显交叉反应。悬浮芯片对盲样测定的检测浓度值与实际浓度偏差较小。扫描电镜对微球表面微观结构的观察也直观地确证了蛋白在微球上的成功偶联。结论:高通量悬浮芯片技术操作简单,灵敏快速,成本低廉,为多种兽药残留的快速检测提供了新方法,具有广阔的应用和发展前景。 展开更多
关键词 氯霉素 克伦特罗 药物残留 悬浮芯片 微球 中位荧光强度
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