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华蟾素诱导人乳腺癌细胞株MCF-7细胞凋亡与Bax/Bcl-2的关系 被引量:7
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作者 徐晓武 杨小敏 +2 位作者 金洲祥 许远 朱少俊 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2012年第6期580-583,共4页
目的:观察华蟾素在诱导人乳腺癌MCF-7细胞株凋亡的过程中Bax和Bcl-2蛋白表达的变化及意义。方法:在人乳腺癌细胞株MCF-7中分别加入不同终浓度的华蟾素,24h、48h及72h后检测指标。应用MTT比色法检测细胞增殖活力,倒置显微镜观察细胞形态... 目的:观察华蟾素在诱导人乳腺癌MCF-7细胞株凋亡的过程中Bax和Bcl-2蛋白表达的变化及意义。方法:在人乳腺癌细胞株MCF-7中分别加入不同终浓度的华蟾素,24h、48h及72h后检测指标。应用MTT比色法检测细胞增殖活力,倒置显微镜观察细胞形态学变化,TUNEL法检测细胞凋亡指数,Western blot法检测Bax/Bcl-2蛋白表达,共聚焦显微镜观察Bax蛋白分布。结果:华蟾素能显著抑制MCF-7细胞增殖;倒置显微镜下发现凋亡的MCF-7细胞固缩、核染色质凝聚;western blot发现华蟾素能上调MCF-7细胞Bax蛋白表达,但对Bcl-2蛋白表达无影响,正常MCF-7细胞内的Bax均匀分布于细胞质中,华蟾素处理后,Bax明显地聚集于线粒体,呈现线粒体的转位。结论:华蟾素诱导MCF-7细胞凋亡,并在该过程中导致的Bax蛋白表达上调并且向线粒体转位。 展开更多
关键词 华蟾素注射液 乳腺癌细胞株mcf-7 凋亡 BAX Bcl-2
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黄芩素联合U0126诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的分子机制研究 被引量:3
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作者 安宏元 向川南 +5 位作者 喻小兰 唐利 李燕 唐小平 张宇骄 夏纪毅 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第10期6-13,共8页
目的探讨黄芩素和U0126诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的分子机制。方法单独及联合使用20μmol黄芩素、10μmol U0126处理MCF-7细胞24 h;光学显微镜观察细胞数量变化,流式细胞术检测MCF-7细胞周期变化,CCK8法检测细胞增殖变化,TUNEL法和... 目的探讨黄芩素和U0126诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的分子机制。方法单独及联合使用20μmol黄芩素、10μmol U0126处理MCF-7细胞24 h;光学显微镜观察细胞数量变化,流式细胞术检测MCF-7细胞周期变化,CCK8法检测细胞增殖变化,TUNEL法和流式细胞术检测细胞凋亡,实时聚合酶链反应(Real Time PCR)和Western blot检测凋亡相关因子m RNA和蛋白的表达水平。结果与黄芩素单独刺激MCF-7细胞相比,黄芩素联合U0126刺激MCF-7细胞时,S期细胞比例降低更明显;MCF-7细胞经不同浓度黄芩素或U0126处理后,增殖抑制,且具有浓度依赖性(P<0.05);与黄芩素单独处理MCF-7细胞相比,黄芩素与U0126联合处理时,细胞凋亡更加显著(P<0.05),早期凋亡和晚期凋亡均增多(P<0.05);与黄芩素或U0126单独处理MCF-7细胞相比,黄芩素和U0126联合处理MCF-7细胞时,凋亡抑制因子Bcl-2的m RNA水平降低(P<0.05),凋亡促进因子Bax的m RNA水平增高(P<0.05),ERK1/2、GSK-3β和P38的磷酸化水平降低(P<0.05),凋亡促进因子Bax表达量增高(P<0.05),凋亡抑制因子Bcl-2表达量降低(P<0.05)。结论黄芩素或U0126通过调控Bcl-2/Bax的表达水平以及ERK1/2、GSK-3β和P38的磷酸化水平抑制MCF-7细胞增殖,促进细胞凋亡,且具有协同效应。因此,黄芩素和U0126可联合用于临床治疗乳腺癌,具有重要临床意义。 展开更多
关键词 黄芩素 U0126 乳腺癌细胞株mcf-7 凋亡 分子机制
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聚束微波亚高温热疗诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的研究 被引量:1
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作者 李永强 廖思娜 《广西医科大学学报》 CAS 2011年第4期515-516,共2页
目的:探讨亚高温热疗诱导人乳腺癌细胞株MCF-7发生凋亡作用的机制。方法:取对数生长期的人乳腺癌细胞株MCF-7细胞及空白对照组细胞,采用40~41℃,2h聚束微波亚高温热疗分别作用于两组细胞,用Annexin V-FITC/PI法检测两组细胞的凋亡率。... 目的:探讨亚高温热疗诱导人乳腺癌细胞株MCF-7发生凋亡作用的机制。方法:取对数生长期的人乳腺癌细胞株MCF-7细胞及空白对照组细胞,采用40~41℃,2h聚束微波亚高温热疗分别作用于两组细胞,用Annexin V-FITC/PI法检测两组细胞的凋亡率。结果:聚束微波亚高温(41℃,2h)热疗可以诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡,凋亡细胞数随时间的延长而增多。结论:聚束微波亚高温热疗可能通过诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 聚束微波 亚高温 热疗 乳腺癌细胞株mcf-7 凋亡
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SIRPα1转染对乳腺癌细胞株MCF-7增殖和凋亡的影响
4
作者 张璐瑶 王晨 曾科 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1503-1507,共5页
目的:探讨外源性SIRPα1基因对乳腺癌细胞株MCF-7增殖和凋亡的影响及相关的分子生物学机制。方法:乳腺癌细胞株MCF-7本身不表达SIRPα1,将SIRPα1基因转染入MCF-7,用EGF刺激,Western blot法检测JNK蛋白及磷酸化的JNK蛋白表达水平的变化,... 目的:探讨外源性SIRPα1基因对乳腺癌细胞株MCF-7增殖和凋亡的影响及相关的分子生物学机制。方法:乳腺癌细胞株MCF-7本身不表达SIRPα1,将SIRPα1基因转染入MCF-7,用EGF刺激,Western blot法检测JNK蛋白及磷酸化的JNK蛋白表达水平的变化,MTT法检测细胞的增殖活性,TUNEL法检测细胞凋亡水平。结果:转染SIRPα1基因后,JNK蛋白的总量没有发生变化,而磷酸化的JNK减少,同时细胞增殖受抑,凋亡增加。SIRPα1胞内段的酪氨酸残基可被多种有丝分裂原活化而发生磷酸化。用EGF刺激转染SIRPα1质粒的MCF-7细胞,与未加刺激的相比,细胞凋亡无明显变化。结论:SIRPα1能促进乳腺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,是一种候选的抑癌基因。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞株mcf-7 EGF SIRPα1基因 JNK蛋白 细胞凋亡
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类胡萝卜素对乳腺癌细胞株MCF-7细胞DNA的损伤作用的影响 被引量:18
5
作者 彭光华 李忠 +2 位作者 刘良忠 戚向阳 张声华 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期279-281,293,共4页
目的 : 探讨类胡萝卜素对乳腺癌细胞 MCF- 7中 DNA的损伤作用的影响。方法 : 通过体外细胞培养 ,用单细胞电泳方法检测类胡萝卜素对乳腺癌细胞 MCF- 7中 DNA的损伤程度。结果及结论 :  β-胡萝卜素和虾青素对人乳腺癌细胞株 MCF- 7... 目的 : 探讨类胡萝卜素对乳腺癌细胞 MCF- 7中 DNA的损伤作用的影响。方法 : 通过体外细胞培养 ,用单细胞电泳方法检测类胡萝卜素对乳腺癌细胞 MCF- 7中 DNA的损伤程度。结果及结论 :  β-胡萝卜素和虾青素对人乳腺癌细胞株 MCF- 7细胞中 DNA分子均有较大程度的损伤 ,且与处理的浓度和时间存在一定的相关性 ;角黄素对 MCF- 7细胞中 DNA分子有一定的损伤作用 ;番茄红素、玉米黄素和玉米黄素双棕榈酸酯对人乳腺癌细胞株 MCF- 7细胞中 DNA分子均无损伤作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 mcf-7细胞 DNA损伤 类胡萝卜素
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血管内皮生长因子C在人乳腺癌细胞株MCF-7及MCF-7/Adr中的表达 被引量:3
6
作者 高杰 刘执玉 +2 位作者 王伟 毕玉顺 田铧 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期163-166,共4页
背景与目的:血管内皮生长因子C(vascularendothelialgrowthfactorC,VEGF-C)是近期发现的血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)家族的新成员。研究发现VEGF-C可特异性作用于淋巴管内皮细胞,并在多种人类肿瘤中表达。... 背景与目的:血管内皮生长因子C(vascularendothelialgrowthfactorC,VEGF-C)是近期发现的血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)家族的新成员。研究发现VEGF-C可特异性作用于淋巴管内皮细胞,并在多种人类肿瘤中表达。为探索VEGF-C在肿瘤发生、发展中的作用,我们分别检测了VEGF-CmRNA和蛋白在人乳腺癌细胞株MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr中的表达。方法:根据VEGF-C基因序列,设计合成地高辛标记的特异性寡核苷酸探针,运用原位杂交方法检测培养的细胞株MCF-7和MCF-7/Adr中VEGF-CmRNA的表达,并运用免疫组织化学方法检测两种细胞中VEGF-C蛋白的表达,实验中用缓冲液分别代替杂交液和一抗作阴性对照。结果:原位杂交法检测到MCF-7和MCF-7/Adr细胞的胞浆中有阳性蓝色颗粒,免疫组化检测发现两种细胞的胞浆中均有阳性棕黄色颗粒,而阴性对照细胞的胞浆中则均无阳性颗粒。结论:人乳腺癌细胞株MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr细胞能够转录VEGF-CmRNA,并在其细胞浆中翻译合成相应的蛋白。 展开更多
关键词 VEGF-C 乳腺癌 细胞株 mcf-7 mcf-7/ADR 血管内皮生长因子C 基因表达
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环境雌激素对乳腺癌细胞株MCF-7凋亡作用的影响 被引量:11
7
作者 余增丽 张立实 吴德生 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2002年第6期348-351,共4页
[目的 ]通过观察对 壬基酚 (nonylphenol ,NP)、双酚A(bisphenolA ,BisA)和邻苯二甲酸二丁酯 (dibutylphthalate ,DBP)对乳腺癌细胞株MCF 7凋亡的影响 ,探讨环境雌激素促进MCF 7细胞增殖的生物学机制。 [方法 ]将在DMEM培养液 (含 10 ... [目的 ]通过观察对 壬基酚 (nonylphenol ,NP)、双酚A(bisphenolA ,BisA)和邻苯二甲酸二丁酯 (dibutylphthalate ,DBP)对乳腺癌细胞株MCF 7凋亡的影响 ,探讨环境雌激素促进MCF 7细胞增殖的生物学机制。 [方法 ]将在DMEM培养液 (含 10 %小牛血清 )中的MCF 7细胞采用开放式单层贴壁培养 ,加受试物前 5d将培养细胞用PBS洗涤后改为在无酚红DMEM(含 5 %经活性碳 葡聚糖苷处理的胎牛血清 ,CDT FBS)中培养连续 5d ,其目的是耗尽细胞内储存的雌激素。实验设溶剂对照组、雌激素对照组、抗雌激素 (它莫西芬 )对照组及三个实验组 ,采用流式细胞术、DNA片段凝胶电泳和细胞苏木素染色 (HE) ,观察环境雌激素对雌激素耗尽所诱导的细胞凋亡作用的影响。 [结果 ] 3 2× 10 -6mol/LNP和 3 2×10 -5mol/LBisA对MCF 7细胞处理 72h ,与对照组相比 ,流式细胞仪分析结果表明 ,二倍体细胞 (G1期细胞 )明显增加 ,亚二倍体细胞峰 (即细胞凋亡率 )消失 ,DNA凋亡片段凝胶电泳不显示典型的凋亡DNA片段梯带 ,细胞苏木素染色结果也显示凋亡细胞明显减少。 [结论 ]与溶剂对照组相比 ,NP和BisA均能够抑制MCF 7细胞的凋亡作用 ,而 3 2× 10 -4mol/LDBP对细胞凋亡的影响作用不明显。这一结果提示 ,该类物质有可能是通过抑制细胞凋亡而? 展开更多
关键词 环境雌激素 乳腺癌细胞株 mcf-7 细胞凋亡 作用 影响 对-壬基酚 双酚A 邻苯二甲酸二丁酯
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鱼藤素对乳腺癌细胞株MCF-7增殖和凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响 被引量:13
8
作者 初钊辉 梁晓华 +3 位作者 周鑫莉 黄若凡 詹琼 蒋京伟 《中西医结合学报》 CAS 2011年第5期533-538,共6页
目的:观察鱼藤素对MCF-7细胞株细胞增殖和凋亡及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路的影响,旨在研究其抗肿瘤机制。方法:细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK8)检测0、... 目的:观察鱼藤素对MCF-7细胞株细胞增殖和凋亡及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路的影响,旨在研究其抗肿瘤机制。方法:细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK8)检测0、1、5、10、15和20μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72h后对MCF-7细胞增殖的影响,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡率,透射电子显微镜观察细胞凋亡形态,蛋白质印迹法检测细胞内PI3K/Akt通路相关分子的蛋白表达。结果:5、10、15和20μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72h后能明显抑制MCF-7细胞增殖(P<0.01),抑制率随着浓度升高和时间延长而增加,各组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05);而1μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72h后对MCF-7细胞的增殖无明显影响(P>0.05)。5、10、15和20μmol/L鱼藤素作用6h后能诱导MCF-7细胞凋亡,透射电子显微镜下可观察到典型的凋亡细胞形态,而相同条件下1μmol/L鱼藤素对MCF-7细胞的凋亡诱导作用不明显。5μmol/L鱼藤素作用6h后,MCF-7细胞内磷酸化Akt(p-Akt)(Thr308)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phosphorylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)(Ser9)、磷酸化磷酸肌醇依赖性激酶1(phosphorylated 3-phosphoinositide-dependent protein kinase1,p-PDK1)(Ser241)和磷酸化人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因编码的蛋白(phosphorylated phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome10,p-PTEN)(Ser380)的表达量明显减少,而总Akt蛋白的表达量则无明显变化;1μmol/L鱼藤素作用6h后,细胞内上述所有蛋白的表达量均无明显变化。结论:鱼藤素可能通过抑制PTEN(Ser380)和PDK1(Ser241)蛋白的磷酸化,进而抑制Akt(Thr308)的磷酸化,间接抑制其下游GSK-3β(Ser9)的磷酸化,最终诱导MCF-7细胞凋亡和抑制其增殖。 展开更多
关键词 鱼藤素 1-磷脂酰肌醇3-激酶 Akt 细胞增殖 细胞凋亡 mcf-7细胞株 体外实验
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华蟾素对乳腺癌细胞株MCF-7的杀伤作用研究 被引量:16
9
作者 马丽娜 宋兵 +2 位作者 金花 彭元 蔡继业 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期37-41,共5页
目的研究华蟾素诱导人类乳腺癌MCF-7细胞的凋亡作用。方法利用CCK-8法检测华蟾素对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用;用流式细胞术检测细胞的凋亡抑制率;利用倒置荧光显微镜观察细胞整体形态的变化;利用原子力显微镜(AFM)高分辨率、高灵... 目的研究华蟾素诱导人类乳腺癌MCF-7细胞的凋亡作用。方法利用CCK-8法检测华蟾素对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用;用流式细胞术检测细胞的凋亡抑制率;利用倒置荧光显微镜观察细胞整体形态的变化;利用原子力显微镜(AFM)高分辨率、高灵敏度的特点,从纳米尺度上进一步观察细胞形貌及超微结构的变化。结果 CCK-8结果显示,华蟾素对MCF-7细胞的生长有明显的抑制作用,且随着剂量的增加(6.25~50 mg.L-1)而增大,当浓度为50 mg.L-1时,抑制率达到(68.40±1.02)%。采用流式细胞术对细胞凋亡的检测结果也表明华蟾素浓度为50 mg.L-1时,细胞晚期凋亡率最大,可达到(55.5±1.2)%。AFM与对照组相比,药物作用后,细胞开始坍塌变矮、细胞变小,周围呈月牙状或环状,浓度最大时,细胞中间出现较大孔洞。结论华蟾素能有效抑制MCF-7细胞的生长增殖并诱导其凋亡。利用AFM在单细胞水平上分析华蟾素对MCF-7细胞的作用,使分析结果更加全面。 展开更多
关键词 原子力显微镜 华蟾素 乳腺癌mcf-7细胞 细胞凋亡 超微结构 细胞水平 高分辨率
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RhoA小干扰RNA抑制乳腺癌细胞株MCF-7及其裸鼠皮下移植瘤的实验研究 被引量:4
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作者 马骥 薛妍 +1 位作者 王鹏 刘文超 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2010年第12期1057-1061,共5页
目的观察RhoA小干扰RNA(siRhoA)对乳腺癌细胞株MCF-7增殖、迁移、周期和凋亡的影响以及对裸鼠移植瘤生长的影响。方法 siRhoA Lipofectamine2000介导下转染乳腺癌细胞MCF-7,转染48h后,采用Western blot技术检测RhoA蛋白的表达,MTT实验检... 目的观察RhoA小干扰RNA(siRhoA)对乳腺癌细胞株MCF-7增殖、迁移、周期和凋亡的影响以及对裸鼠移植瘤生长的影响。方法 siRhoA Lipofectamine2000介导下转染乳腺癌细胞MCF-7,转染48h后,采用Western blot技术检测RhoA蛋白的表达,MTT实验检测siRhoA转染细胞的增殖变化,损伤刮擦实验检测siRhoA转染细胞的迁移能力,流式细胞仪检测siRhoA转染细胞的周期和凋亡,裸鼠移植瘤实验检测siRhoA对肿瘤生长的影响。结果成功转染siRhoA的肿瘤细胞,Western blot显示RhoA蛋白表达在MCF-7细胞中明显下降;siRhoA对MCF-7细胞的增殖、迁移均有显著的抑制作用并能促进肿瘤细胞凋亡及细胞周期中S期细胞减少,G1/G0期细胞增加;裸鼠移植瘤内重复注射siRhoA后肿瘤生长明显减缓。结论 siRhoA能够明显抑制RhoA基因在乳腺癌细胞MCF-7中的表达,部分逆转MCF-7的恶性生物学行为并抑制裸鼠移植瘤的生长。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 RHOA RNA干扰 mcf-7细胞株 细胞增殖 裸小鼠
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葡萄籽多酚对人乳腺癌细胞株MCF-7/ADR的体内外耐药逆转作用 被引量:3
11
作者 张翠娟 周庚寅 +3 位作者 李丽 喻芳 孙妍琳 马超 《山东大学学报(医学版)》 CAS 2004年第6期640-642,647,共4页
目的:研究葡萄籽多酚(grapeseedpolyphenol熏GSP)对人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF鄄7/ADR的体内外耐药逆转作用。方法:采用MTT法检测1.2mg/L和2.4mg/LGSP对MCF鄄7/ADR的体外耐药逆转倍数。建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,实验分为4组:对照组,... 目的:研究葡萄籽多酚(grapeseedpolyphenol熏GSP)对人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF鄄7/ADR的体内外耐药逆转作用。方法:采用MTT法检测1.2mg/L和2.4mg/LGSP对MCF鄄7/ADR的体外耐药逆转倍数。建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,实验分为4组:对照组,GSP组,阿霉素穴adriamycin熏ADR雪组和ADR+GSP组,观察GSP对肿瘤细胞的体内耐药逆转作用;采用流式细胞术测定不同用药组P鄄糖蛋白穴Pgp雪表达变化。结果:体外1.2mg/LGSP即可有效逆转耐药,2.4mg/LGSP的逆转倍数为9.44;体内裸鼠抑瘤实验显示,GSP有一定抑瘤作用,联用ADR可显著抑制肿瘤生长,20mg/kgGSP可有效逆转CF鄄7/ADR细胞的耐药性,抑瘤率为54.64%。流式细胞术结果显示,联用GSP与ADR组肿瘤细胞Pgp表达明显低于单独使用ADR组。结论:GSP能在体内外逆转MCF鄄7/ADR细胞的耐药性,此作用可能是通过抑制Pgp表达实现的。 展开更多
关键词 抗药性 多药 乳腺肿瘤 小鼠 mcf-7细胞株 葡萄籽多酚 P糖蛋白
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硼替佐米和3-甲基腺嘌呤对人乳腺癌细胞株MCF-7的抑瘤效应 被引量:3
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作者 姚峰 王冠楠 +3 位作者 魏文 涂毅 童鹤翔 孙圣荣 《微循环学杂志》 2011年第4期7-9,12,I0002,共5页
目的:研究蛋白酶体活性抑制剂硼替佐米(Bortezomib)对人乳腺癌细胞株MCF-7的自噬诱导和增殖抑制作用,以及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)与Bortezomib联合应用对MCF-7细胞自噬及增殖的影响。方法:采用MTT法检测细胞增殖,蛋白质印迹法检... 目的:研究蛋白酶体活性抑制剂硼替佐米(Bortezomib)对人乳腺癌细胞株MCF-7的自噬诱导和增殖抑制作用,以及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)与Bortezomib联合应用对MCF-7细胞自噬及增殖的影响。方法:采用MTT法检测细胞增殖,蛋白质印迹法检测蛋白酶体活性及自噬相关蛋白LC3的表达。结果:Bortezomib能明显抑制MCF-7细胞增殖并诱导其自噬,3-MA与Bortezomib联合应用,可逆转Bortezomib诱导的细胞自噬,并增强Bortezomib对MCF-7细胞增殖的抑制(P<0.05)。结论:联合应用Bortezomib和3-MA可能对乳腺癌细胞自噬和增殖具有协同抑制作用。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂 自噬抑制剂 乳腺癌细胞株 mcf-7
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RNA干扰对乳腺癌细胞株MCF-7/Adr多药耐药性的逆转 被引量:1
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作者 曾爱华 何蕴韶 +2 位作者 王穗海 王伟毅 钟女奇 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期365-367,共3页
目的研究小分子干扰RNA对乳腺癌耐药细胞株MCF7/Adr多药耐药性的逆转作用。方法设计针对mdrl基因的SiRNA,转染进MCF-7/Adr细胞;用荧光定量PCR检测mdrlmRNA的表达,流式细胞仪分析Pgp表达,MTT法检测阿霉素对MCF-7/Adr细胞的半数抑制浓度(I... 目的研究小分子干扰RNA对乳腺癌耐药细胞株MCF7/Adr多药耐药性的逆转作用。方法设计针对mdrl基因的SiRNA,转染进MCF-7/Adr细胞;用荧光定量PCR检测mdrlmRNA的表达,流式细胞仪分析Pgp表达,MTT法检测阿霉素对MCF-7/Adr细胞的半数抑制浓度(IC50)。结果该SiRNA能使耐药细胞株MCF-7/Adr的mdrlmRNA和Pgp表达水平分别显著下调(P<0.01),并使阿霉素对MCF7/Adr的IC50显著降低(P<0.01)。结论RNA干扰可逆转乳腺癌MCF7/Adr细胞株的多药耐药性。 展开更多
关键词 RNA干扰 乳腺癌细胞株 mcf-7 Adr 多药耐药性 乳腺癌耐药细胞
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绿茶提取物对乳腺癌细胞株MCF-7的作用机制探讨 被引量:2
14
作者 冯强 李毅 +3 位作者 王文洋 夏鹏程 杨宪勇 张元湖 《中国实验诊断学》 2016年第12期1999-2002,共4页
目的研究绿茶提取物的抗肿瘤活性。方法不同浓度的绿茶提取物作用于MCF-7细胞,通过观察细胞形态,检测细胞周期和凋亡。结果绿茶提取物可以阻滞人乳腺癌细胞株MCF-7生长周期于G1期;荧光染色显示细胞凋亡率增高,电镜观察,出现细胞染色质... 目的研究绿茶提取物的抗肿瘤活性。方法不同浓度的绿茶提取物作用于MCF-7细胞,通过观察细胞形态,检测细胞周期和凋亡。结果绿茶提取物可以阻滞人乳腺癌细胞株MCF-7生长周期于G1期;荧光染色显示细胞凋亡率增高,电镜观察,出现细胞染色质浓缩、核周边集,线粒体形态正常等细胞凋亡的典型特征;绿茶提取物作用后可以导致MCF-7细胞中Caspase3蛋白活性增强,促进肿瘤细胞的凋亡。结论绿茶提取物对乳腺癌细胞均有一定的抑制作用,进一步筛选其有效成分可以用于肿瘤的预防与治疗。 展开更多
关键词 绿茶提取物 mcf-7 细胞凋亡 乳腺癌 抗肿瘤
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3,6-二羟黄酮对乳腺癌细胞株MCF-7细胞生长增殖的影响 被引量:1
15
作者 李春梅 刘新光 梁念慈 《海南医学》 CAS 2009年第8期6-8,共3页
目的观察3,6-二羟黄酮对乳腺癌细胞株MCF-7细胞的影响。方法分别用台盼蓝拒染观察药物对细胞的毒性作用,流式细胞术观察药物对细胞周期的影响。结果3,6-二羟黄酮对MCF-7细胞具有明显地细胞毒作用,呈一定的时效性;流式细胞术药物作用MCF-... 目的观察3,6-二羟黄酮对乳腺癌细胞株MCF-7细胞的影响。方法分别用台盼蓝拒染观察药物对细胞的毒性作用,流式细胞术观察药物对细胞周期的影响。结果3,6-二羟黄酮对MCF-7细胞具有明显地细胞毒作用,呈一定的时效性;流式细胞术药物作用MCF-748h后能引起其细胞周期发生变化。结论3,6-二羟黄酮能明显地抑制MCF-7细胞的增殖,并能引起其细胞周期的变化。 展开更多
关键词 3 6-二羟黄酮 mcf-7细胞株 增殖 细胞周期
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Wnt1基因在乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中的表达与多柔比星化疗抵抗关系的研究 被引量:1
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作者 张战民 张晓华 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第36期3868-3870,共3页
目的探讨Wnt1在乳腺癌细胞中的表达及其在多柔比星化疗抵抗中的作用。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Wnt1基因在乳腺癌细胞中的表达;双链siRNA转染阻断Wnt1基因,RT-PCR和免疫印迹法(Western blotting)检测基因沉默效果;细胞... 目的探讨Wnt1在乳腺癌细胞中的表达及其在多柔比星化疗抵抗中的作用。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Wnt1基因在乳腺癌细胞中的表达;双链siRNA转染阻断Wnt1基因,RT-PCR和免疫印迹法(Western blotting)检测基因沉默效果;细胞毒实验(MTT)法检测乳腺癌细胞的生长抑制率。结果对照组、siRNA干扰组、多柔比星处理组,Wnt1沉默MCF-7/ADR+ADM组的细胞存活率分别为(100±5.2)%,(84.3±4.1)%,(68.7±4.7)%和(42.3±3.5)%,其他3组的细胞存活率与对照组比较,差异有统计学意义(F=5.381,P<0.05)。Wnt1沉默MCF-7/ADR+ADM组与其他3组比较细胞的存活率均降低,与对照组、siRNA干扰组和多柔比星处理组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);Wnt1在乳腺癌细胞呈高表达,siRNA沉默Wnt1基因,可以显著下调Wnt1mRNA和蛋白的表达。结论 Wnt1基因在乳腺癌细胞呈高表达,沉默Wnt1基因下调Wnt1基因的转录和翻译,能显著增强乳腺癌细胞对多柔比星的敏感性,部分逆转其对多柔比星的耐药性。 展开更多
关键词 多柔比星 Wnt1基因 乳腺肿瘤细胞株mcf-7 ADR 细胞抑制 蛋白表达
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乳腺癌细胞株MCF-7-PC-1-46的建立
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作者 常晓彤 万里川 +4 位作者 张浩 王健 李杰之 周建光 黄翠芬 《生物技术通讯》 CAS 2003年第1期36-38,63,共4页
以人前列腺癌C4-2细胞基因组DNA为模板,扩增出PC-1基因N端编码46个氨基酸残基及其上游非编码区共599bp的DNA序列,将其正向克隆到真核表达载体pIRES2中,并在脂质体介导下,转染人乳腺癌细胞MCF-7,经G418筛选获得阳性单克隆,细胞扩大培养后... 以人前列腺癌C4-2细胞基因组DNA为模板,扩增出PC-1基因N端编码46个氨基酸残基及其上游非编码区共599bp的DNA序列,将其正向克隆到真核表达载体pIRES2中,并在脂质体介导下,转染人乳腺癌细胞MCF-7,经G418筛选获得阳性单克隆,细胞扩大培养后,进行PCR和RT-PCR分析,检测外源PC-1基因在靶细胞中的整合与转录。PCR和RT-PCR结果表明,稳定转染细胞株MCF-7-PC-1-46具有外源目的基因的整合和相应mRNA的高表达。说明成功建立了稳定表达外源PC-1基因N端46个氨基酸的人乳腺癌细胞株,为进一步研究PC-1基因的生物学功能提供了实验材料。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞株 mcf-7-PC-1-46 PC-1基因 稳定转染 基因表达
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RNA干扰hTERT基因对人乳腺癌细胞株MCF-7周期及凋亡影响的研究
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作者 许景伟 樊丽 +2 位作者 刘哲丞 邹宇 关智勇 《中国医学创新》 CAS 2010年第20期32-34,共3页
目的观察载体介导的RNA干扰技术能否有效抑制人乳腺癌细胞株MCF-7的hTERT的表达及其对细胞周期及凋亡的影响。方法构建2个针对hTERT基因表达短发夹状siRNA的真核表达载体(pshRNA-hTERT)并转染人乳腺癌细胞株MCF-7,通过RT-PCR检测该基因m... 目的观察载体介导的RNA干扰技术能否有效抑制人乳腺癌细胞株MCF-7的hTERT的表达及其对细胞周期及凋亡的影响。方法构建2个针对hTERT基因表达短发夹状siRNA的真核表达载体(pshRNA-hTERT)并转染人乳腺癌细胞株MCF-7,通过RT-PCR检测该基因mRNA,Western blot蛋白质检测,端粒酶活性检测,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡等方法检测RNAi效果,从中筛选出基因沉默效果好的靶位点。结果转染乳腺癌细胞后,pshRNA-hTERT1,2质粒均能抑制hTERT基因表达,mRNA表达分别下调了54.6%,55.2%;蛋白表达分别下调46.6%,47.8%。端粒酶活性均明显下降。对乳腺癌细胞周期中S期细胞明显减少,G1/G0期细胞显著增加。结论 RNAi在体外明显抑制乳腺癌细胞中hTERT基因的表达和瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞mcf-7 端粒逆转录酶 RNA干扰
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化疗药物对人乳腺癌细胞株MCF-7的药效动力学研究 被引量:3
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作者 葛勇前 何志明 陆国椿 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2000年第2期168-171,共4页
目的 :用MTT法研究化疗药物氟尿嘧啶 ( 5 FU)、阿霉素 (ADM )、丝裂霉素 (MMC)、甲氨蝶呤 (MTX)对人乳腺癌细胞株 (MCF 7)的药效动力学特征。方法 :MCF 7细胞株在含有不同药物浓度的培养基中孵育不同时间 ,用MTT法测定细胞的抑制率。结... 目的 :用MTT法研究化疗药物氟尿嘧啶 ( 5 FU)、阿霉素 (ADM )、丝裂霉素 (MMC)、甲氨蝶呤 (MTX)对人乳腺癌细胞株 (MCF 7)的药效动力学特征。方法 :MCF 7细胞株在含有不同药物浓度的培养基中孵育不同时间 ,用MTT法测定细胞的抑制率。结果 :MCF 7细胞株对化疗药物的敏感性依次为ADM、5 FU、MMC ,对MTX不敏感 ,低浓度时 5 FU +ADM及 5 FU +MTX的联合用药表现了很强的协同作用 ;相同孵育时间下 ,随着药物浓度的增加 ,ADM、5 FU和MMC对MCF 7细胞株的抑制率明显增加 ,MTX的抑制率没有明显变化 ;而相同浓度下 ,在 2— 2 4h内 ,随着孵育时间的延长 ,细胞的抑制率变化不明显。计算不同作用时间时 ,相同药时曲线下面积 (AUC)的细胞抑制率 ,也呈现下降趋势。结论 :MCF 7细胞株对不同化疗药物的敏感性不同 ,化疗药物的联合应用可明显提高对细胞株的抑制率 ;在影响药剂动力学的主要因素中 ,当药物作用时间大于 2h时 。 展开更多
关键词 MTT法 乳腺癌 mcf-7 药物疗法
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△Np73小干扰RNA表达质粒抑制人乳腺癌细胞株MCF-7增殖
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作者 段思 张玉凤 +3 位作者 王爽 朱辰杰 王阳 张佩 《辽宁医学院学报》 CAS 2014年第5期1-4,11,I0001,共6页
目的应用小干扰RNA技术抑制△Np73表达,探讨其对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响。方法制备△Np73小干扰表达质粒,脂质体法转染人乳腺癌细胞株MCF-7;荧光显微镜下观察转染细胞绿色荧光蛋白表达,计算转染效率;MTT法检测转染质粒后细胞增... 目的应用小干扰RNA技术抑制△Np73表达,探讨其对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响。方法制备△Np73小干扰表达质粒,脂质体法转染人乳腺癌细胞株MCF-7;荧光显微镜下观察转染细胞绿色荧光蛋白表达,计算转染效率;MTT法检测转染质粒后细胞增殖抑制率;实时荧光定量PCR检测细胞转染质粒后△Np73和TAp73 mRNA的表达;共转染pcDNA3-HA/DNp73α表达质粒与△Np73小干扰质粒,Western Blot检测细胞转染后△Np73和TAp73表达。结果成功构建并转染△Np73小干扰表达质粒,转染效率达62%。经△Np73质粒干扰的细胞增殖活性显著下降,与阴性对照组相比差异显著。△Np73小干扰质粒转染细胞能有效抑制内源性△Np73 mRNA和外源性△Np73蛋白表达,对TAp73无显著抑制作用。结论针对△Np73基因设计的小干扰RNA表达质粒能显著降低MCF-7细胞中△Np73 mRNA及蛋白的表达,抑制细胞生长增殖,表明靶向沉默△Np73可能为未来人乳腺癌的治疗提供了一个有效途径。 展开更多
关键词 △Np73 mcf-7 RNA干扰 基因沉默 乳腺癌
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