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应用荧光素二乙酸脂水解酶活性研究不同绿地土壤微生物活性 被引量:12
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作者 蒋炳伸 李鸿雁 杨喜田 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第8期130-133,共4页
为了研究不同绿地土壤微生物活性特征,应用荧光素比色法和碱液吸收滴定法,对郑州市不同绿地的FDA(荧光素二乙酸酯)水解酶活性及微生物呼吸强度进行了分析,结果表明,不同绿地表层土壤FDA水解酶活性由高到低的顺序为:人工林地>人工草灌... 为了研究不同绿地土壤微生物活性特征,应用荧光素比色法和碱液吸收滴定法,对郑州市不同绿地的FDA(荧光素二乙酸酯)水解酶活性及微生物呼吸强度进行了分析,结果表明,不同绿地表层土壤FDA水解酶活性由高到低的顺序为:人工林地>人工草灌地>行道绿地(文化路)>行道绿地(诚信路)>隔离带绿地>人工草坪>人工灌木地>花卉绿地;人工林地、人工灌木地随土层深度增加FDA水解酶活性、土壤微生物呼吸强度呈下降趋势;FDA水解酶活性与微生物呼吸强度相关系数(r)为0.939 7,这表明FDA水解酶活性与土壤微生物呼吸强度呈正相关,两者均能反映土壤微生物活性,且荧光素比色法优势在于简单、快速、灵敏,这种方法测定总微生物的活性具有广泛性,故FDA水解酶活性更能反映土壤总微生物的活性。 展开更多
关键词 荧光乙酸 微生物呼吸强度 微生物活性 绿地
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荧光素二乙酸酯荧光微孔板法在细胞活力测定中的应用 被引量:3
2
作者 陈熙 杨秀颖 +1 位作者 方莲花 杜冠华 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期710-714,共5页
目的评估荧光素二乙酸酯(FDA)微孔板检测法在细胞活力测定中的应用。方法培养板接种细胞,加入FDA孵育一定时间,多功能微板分析仪测定荧光值。评价FDA孵育时间、浓度及其他影响因素对检测精确度的影响,并与四甲基偶氮唑盐(MTT)方法在... 目的评估荧光素二乙酸酯(FDA)微孔板检测法在细胞活力测定中的应用。方法培养板接种细胞,加入FDA孵育一定时间,多功能微板分析仪测定荧光值。评价FDA孵育时间、浓度及其他影响因素对检测精确度的影响,并与四甲基偶氮唑盐(MTT)方法在H2O2损伤及细胞数量的检测方面进行比较。结果随着孵育时间的延长,荧光值与细胞数的相关系数随之增加,27-30 min时可达到0.99。FDA终浓度在10-30μg/ml时,荧光值与细胞数的相关系数较高。在H2O2损伤模型检测中,与四甲基偶氮唑盐相比,FDA在H2O2高浓度时相关性更强。结论 FDA法检测细胞活力稳定可靠,适用于多种条件下的细胞活力检测及药理学研究。 展开更多
关键词 荧光乙酸 荧光 微孔板检测 细胞活力 四甲基偶氮唑盐 细胞毒
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四溴及四碘荧光素二乙酸酯急性毒性及对S180作用的观察
3
作者 王达纬 孙以方 +2 位作者 吴勇杰 张培棪 王流芳 《兰州医学院学报》 1990年第2期65-68,共4页
本文报道四溴荧光素二乙酸酯(25号)及四碘荧光素二乙酸酯(24号)小鼠单次腹腔注射LD_50分别为1047.1 mg/kg,608.64mg/kg.以LD_50 1/10剂量,每日1次腹腔注射,连续7次,对小鼠移植性肿瘤S180有抑制作用,抑瘤率分别为31%,19%.实验中未见小鼠... 本文报道四溴荧光素二乙酸酯(25号)及四碘荧光素二乙酸酯(24号)小鼠单次腹腔注射LD_50分别为1047.1 mg/kg,608.64mg/kg.以LD_50 1/10剂量,每日1次腹腔注射,连续7次,对小鼠移植性肿瘤S180有抑制作用,抑瘤率分别为31%,19%.实验中未见小鼠有脱毛现象. 展开更多
关键词 四溴荧光 乙酸 急性毒性 S180瘤株 抑瘤率
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日本酸性茶园土壤的微生物生物量和荧光素二乙酸酯水解活性
4
作者 韩文炎 《中国茶叶》 2004年第3期40-40,共1页
关键词 日本 酸性茶园土壤 微生物生物量 荧光 乙酸酯水解活性
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高纯度荧光素钠的制备工艺研究
5
作者 高乾善 高光杰 +1 位作者 胡建强 李福伟 《山东科学》 CAS 2009年第2期43-45,共3页
本文介绍了一种制备高纯度荧光素钠的新工艺。利用荧光素钠盐在DMF中与乙酰氯酰化,得到荧光素二乙酸酯。荧光素二乙酸酯的易结晶性可使杂质得以分离,再经过皂化、酸化、成盐的过程制得高纯度的荧光素钠。与常规工艺比较,该工艺具有产率... 本文介绍了一种制备高纯度荧光素钠的新工艺。利用荧光素钠盐在DMF中与乙酰氯酰化,得到荧光素二乙酸酯。荧光素二乙酸酯的易结晶性可使杂质得以分离,再经过皂化、酸化、成盐的过程制得高纯度的荧光素钠。与常规工艺比较,该工艺具有产率高、纯化效果好的特点。产品纯度大于99%,产率大于78%。 展开更多
关键词 纯化 制备 荧光乙酸 荧光
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汉逊酵母活性及活力荧光素二乙酸酯-碘化丙啶双荧光染色检测方法的建立及应用 被引量:1
6
作者 王玢 徐世友 +2 位作者 杨俊杰 周晖国 雷清 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1347-1352,共6页
目的建立用于检测汉逊酵母活性和活力的荧光素二乙酸酯(carboxyfluorescein diacetate,CFDA)-碘化丙啶(propidium iodide,PI)双荧光染色法。方法通过单因素试验,优化CFDA的染色时间(5、10、20、40、60、120 min)、工作液浓度(50、100、... 目的建立用于检测汉逊酵母活性和活力的荧光素二乙酸酯(carboxyfluorescein diacetate,CFDA)-碘化丙啶(propidium iodide,PI)双荧光染色法。方法通过单因素试验,优化CFDA的染色时间(5、10、20、40、60、120 min)、工作液浓度(50、100、200、300μmol/L)及PI的染色时间(5、10、15、20、25 min)、工作液浓度(2、10、20、30μmol/L)。采用最适条件检测理论存活率为0、25%、50%、75%和100%的汉逊酵母样品,荧光显微镜下观察荧光信号,ImageJ软件分析灰度值;计数存活及死亡细胞个数,计算实际存活率和实际死亡率。同时分析实际灰度值、实际存活率及实际死亡率与相应理论值的相关性。采用建立的CFDA-PI双荧光染色法检测3批汉逊酵母培养物的活性及活力。结果CFDA和PI的最佳染色时间为60和5 min,最佳工作液浓度为200和2μmol/L。不同理论存活率汉逊酵母样品的实际灰度值、实际存活率及实际死亡率与相应理论值均具有显著相关性(R^(2)=0.9983~0.9992,P<0.05)。3批汉逊酵母培养物活性及活力3次检测值的CV分别为3.20%~4.03%和1.10%~2.27%。结论成功建立了用于检测汉逊酵母活性和活力的CFDA-PI双荧光染色法,可用于相关研究中汉逊酵母活性和活力的快速检测。 展开更多
关键词 汉逊酵母 荧光乙酸 碘化丙啶 荧光染色 活性 活力
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基于FDA-PI双荧光复染法的茄病镰刀菌孢子活性检测 被引量:13
7
作者 柴阿丽 韩云 +3 位作者 武军 石延霞 谢学文 李宝聚 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第14期2757-2766,共10页
【目的】茄病镰刀菌(Fusarium solani)孢子活性的检测是病害有效防控的基础。传统的孢子萌发法操作复杂,耗时费力,需要建立一种简便、快速的孢子活性检测方法。研究旨在建立基于荧光素二乙酸酯(fluorescein diacetate,FDA)-碘化丙啶(pro... 【目的】茄病镰刀菌(Fusarium solani)孢子活性的检测是病害有效防控的基础。传统的孢子萌发法操作复杂,耗时费力,需要建立一种简便、快速的孢子活性检测方法。研究旨在建立基于荧光素二乙酸酯(fluorescein diacetate,FDA)-碘化丙啶(propidium iodide,PI)双荧光复染法和流式细胞术(flow cytometry,FCM)的茄病镰刀菌孢子活性检测技术。【方法】通过测定FDA和PI的最佳染色时间和最佳工作浓度,建立茄病镰刀菌孢子活性检测的FDA-PI复染法。为评价该方法的准确性,一方面用FDA-PI法检测已知死孢子比例(0、25%、50%、75%、100%)的茄病镰刀菌样品,分析实测死亡率和理论死亡率的相关性;另一方面,经物理、化学和杀菌剂处理后,比较FDA-PI复染法和孢子萌发法的检测结果。【结果】确定了FDA和PI的最佳染色参数,其中PI的最佳工作浓度为3μg·m L-1,最佳染色时间为4℃处理10 min;FDA的最佳工作浓度为100μg·m L-1,最佳染色时间为25℃处理20 min。用该技术检测已知死孢子比例样品,各样品实测孢子死亡率和理论死亡率之间呈极显著正相关(R2=0.99,P<0.05)。经物理和化学处理后,FDA-PI复染法测得的孢子死亡率与孢子萌发法测得的孢子萌发率之间也呈显著负相关(R2=0.99,P<0.05)。经杀菌剂处理后,随着药剂浓度增高,对茄病镰刀菌杀灭效果增强。其中,氰胺化钙处理后,FDA-PI复染法和孢子萌发法检测孢子死亡率结果一致;而咯菌腈和多菌灵处理后,FDA-PI复染法检测孢子死亡率略低于孢子萌发法检测结果。【结论】建立了基于FDA-PI复染法和流式细胞术的茄病镰刀菌孢子活性检测技术,该技术可以替代传统的孢子萌发方法,大幅度缩减病原菌活性检测时间,提高检测效率,对植物病原真菌活性检测平台的建立具有重要的参考价值,将其应用于杀菌剂的筛选还需要进一步的深入研究。 展开更多
关键词 荧光乙酸 碘化丙啶 荧光染色 流式细胞术 茄病镰刀菌 活性分析
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设施栽培有机基质肥力特性及番茄根际酶活性的动态变化
8
作者 柴雨媛 邢佳林 +1 位作者 张应华 史静 《湖南农业科学》 2024年第10期23-30,共8页
为了明确根际酶活性对土壤/基质中肥力等环境因子的响应规律,以云南设施土壤、松球渣和草炭为研究材料,基于盆栽试验研究了设施土壤不栽培作物(CK)、设施土壤栽培番茄(T1)、松球渣基质栽培番茄(T2)、草炭基质栽培番茄(T3)共4组处理中栽... 为了明确根际酶活性对土壤/基质中肥力等环境因子的响应规律,以云南设施土壤、松球渣和草炭为研究材料,基于盆栽试验研究了设施土壤不栽培作物(CK)、设施土壤栽培番茄(T1)、松球渣基质栽培番茄(T2)、草炭基质栽培番茄(T3)共4组处理中栽培介质肥力因子及番茄根际酶活性的动态变化。结果表明:各处理硝态氮及铵态氮含量在不同周期均呈现不同趋势,第16周时2种速效氮含量高低排序均为T2>T3>T1>CK;各处理有效磷含量变化趋势一致,T2处理始终较高,第16周时比CK高42.26%;速效钾含量变化基本呈“单峰”趋势,含量排序为T2>T1>CK,T3处理始终缓慢减少且无波动;有机质含量T3处理显著高于其他处理。此外,根际过氧化氢酶(CAT)活性整体呈缓慢下降趋势,处理间差异不显著;T2处理的根际水解酶(FDA)表现出最高活性水平,分别为83.412μmol/(d·g)(第4周)和76.757μmol/(d·g)(第8周),显著高于其他处理;根际脱氢酶(DHA)以T2和T1处理的活性最强,12周后具有显著差异;T2处理的根际蔗糖酶(SC)活性呈现显著高水平,最高测定值为84.584μmol/(d·g),超出其他处理60.32%~65.56%;根际脲酶(UE)活性整体呈上升趋势,其中T2处理始终保持显著高水平。Mantel-Test相关性分析表明,硝态氮、铵态氮、速效钾和有机质含量都与根际酶在不同显著水平上存在响应关系。研究结论表明,松球渣和草炭基质的保肥能力优于一般设施土壤;松球渣基质栽培有利于番茄根际酶活性的提升;根际水解酶(FDA)与养分因子的关系最紧密。 展开更多
关键词 栽培基质 松球渣基质 草炭 速效养分 有机质 荧光乙酸酯(FDA)水解酶
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氢化荧光素二乙酸酯的合成及其在活细胞染色中的应用
9
作者 冯志明 冯丹 +2 位作者 熊灿娟 李旭红 曹小妹 《湖南师范大学学报(医学版)》 2014年第4期90-92,96,共4页
目的:合成氢化荧光素二乙酸酯,并用于肿瘤细胞的染色标记。方法:通过锌粉和冰醋酸还原荧光素制备二氢荧光素,再经乙酸酐酰化合成氢化荧光素二乙酸酯。氢化荧光素二乙酸酯对肿瘤细胞进行染色,并与荧光素二乙酸酯的染色结果进行对照。结果... 目的:合成氢化荧光素二乙酸酯,并用于肿瘤细胞的染色标记。方法:通过锌粉和冰醋酸还原荧光素制备二氢荧光素,再经乙酸酐酰化合成氢化荧光素二乙酸酯。氢化荧光素二乙酸酯对肿瘤细胞进行染色,并与荧光素二乙酸酯的染色结果进行对照。结果:不论是贴壁还是悬浮细胞,当浓度为1.0 mg/L孵育染色5 min时,FHDA可基本标记细胞,背景低,可定量检测细胞的荧光强度。结论:氢化荧光素二乙酸酯可用于肿瘤细胞的荧光标记及活性氧等细胞活性物质的检测。 展开更多
关键词 氢化荧光乙酸 荧光乙酸 荧光标记 细胞染色
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不同荧光染料对3种储存温度下血小板的标记效果
10
作者 陆英 袁青 +2 位作者 邝丽华 赵才翰 张祥忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期379-384,共6页
目的:研究5-氯甲基荧光素二乙酸酯(CMFDA)、碘代3,3'-二己氧基羰花青[DiOC_(6)(3)]和抗血小板膜糖蛋白(GP)Ibβ抗体衍生物对3种储存温度下血小板的标记效果,以期找出1种受温度因素影响小的血小板荧光标记物。方法:取C57小鼠的全血... 目的:研究5-氯甲基荧光素二乙酸酯(CMFDA)、碘代3,3'-二己氧基羰花青[DiOC_(6)(3)]和抗血小板膜糖蛋白(GP)Ibβ抗体衍生物对3种储存温度下血小板的标记效果,以期找出1种受温度因素影响小的血小板荧光标记物。方法:取C57小鼠的全血制备富血小板血浆,分3组(室温组、4℃组和冷冻组)保存。保存24 h后,每组血小板分成3等份,分别用CMFDA、DiOC_(6)(3)以及抗GPIbβ抗体衍生物标记,流式细胞术检测各标记物的阳性率以及平均荧光强度(MFI);同时用流式细胞术检测血小板表面Annexin V和CD62P以评估血小板的凋亡和活化情况。结果:冷冻组血小板的CMFDA和DiOC_(6)(3)的阳性率以及MFI均低于室温组及4℃组。冷冻组血小板的Annexin V和CD62P阳性率均高于室温组和4℃组。抗GPIbβ抗体衍生物对3组血小板标记的阳性率以及MFI无明显差异。结论:CMFDA和DiOC_(6)(3)对冷冻组血小板的标记效果差于室温组和4℃组,考虑与冷冻组血小板的凋亡率和活化率高有关;抗GPIbβ抗体衍生物对3组血小板标记效果无明显差异,可以考虑作为荧光标记物应用于比较室温、4℃和冷冻保存血小板功能的相关实验。 展开更多
关键词 5-氯甲基荧光乙酸 碘代3 3'-己氧基羰花青 糖蛋白Ibβ 血小板
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氧化苦参碱抑制二硝基氟苯所致小鼠接触性皮炎及淋巴细胞增殖(英文) 被引量:6
11
作者 陈明亮 伍斌 +4 位作者 谢红付 张江林 杜乾君 李建国 李罗丝 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第24期3685-3689,3693,共6页
目的探讨氧化苦参碱(OMT)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用及小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法建立DNFB所致小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射,检测小鼠耳廓肿胀度变化;利用羧基... 目的探讨氧化苦参碱(OMT)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用及小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法建立DNFB所致小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射,检测小鼠耳廓肿胀度变化;利用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色,流式细胞术检测OMT对小鼠淋巴细胞增殖的影响。结果OMT对DNFB所致小鼠ACD呈剂量依赖性抑制作用,且与同等剂量HCT作用效果相似,但副作用明显减小;体外实验证明,在500、125和31μg/mL组OMT对小鼠淋巴细胞增殖呈剂量依赖性抑制。结论OMT对DNFB所致小鼠ACD有显著的抑制作用,而且抑制小鼠淋巴细胞增殖;OMT是一种免疫抑制剂。 展开更多
关键词 硝基氟苯变应性接触性皮炎 氧化苦参碱 羧基荧光乙酰乙酸 淋巴细胞 增殖
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在动物模型脏器中动态追踪荧光染料标记的目标细胞 被引量:1
12
作者 袁璐萍 马炬明 《浙江临床医学》 2015年第10期1703-1705,共3页
目的 利用染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记细胞,通过测定荧光信号强度计算细胞数量,作为追踪移植细胞进入模型动物体内后分布情况的方法.方法 采用CFDA-SE标记不同类细胞,荧光显微镜计数染色率,台盼蓝计数存活率,酶... 目的 利用染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记细胞,通过测定荧光信号强度计算细胞数量,作为追踪移植细胞进入模型动物体内后分布情况的方法.方法 采用CFDA-SE标记不同类细胞,荧光显微镜计数染色率,台盼蓝计数存活率,酶标仪检测荧光信号,确定不同种类、同种细胞不同状态下及模拟动物体内细胞数与荧光信号之间的线性关系,制作标准曲线,确定利用该染料作细胞计数的可行性.将CFDA-SE标记细胞经脾脏注入小鼠体内,于3h、6h、12h、24h处死小鼠,检测肝脏信号,根据标准曲线定量计算肝脏内该细胞动力学特征.结果 CFDA SE括记细胞后,荧光信号与细胞数相关性较好,24h内随时间增加荧光信号有所增高,但与细胞数相关性不受影响.加入小鼠内脏组织匀浆后,荧光信号值有所降低,但与细胞数的相关性不受影响.结论 CFDA-SE可标记活细胞,操作简单,标记率高,注入体内后,通过严格制作标准曲线,检测脏器荧光信号,可定量确定细胞在体内脏器的的动态分布,方法简单可靠. 展开更多
关键词 细胞示踪 羧基荧光乙酸盐琥珀酰亚胺酯 荧光信号
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荧光测定法体外快速筛选抗肿瘤活性物质的研究
13
作者 叶松华 王晓燕 +2 位作者 董晓丽 冯夏珍 杨莹莹 《山西中医学院学报》 2017年第6期31-33,36,共4页
目的:建立一种基于FDA荧光信号的体外快速筛选抗肿瘤活性物质的方法。方法:通过筛选合适的FDA浓度,建立了荧光测定法,并对该方法进行了线性范围和精密度的考察以及可靠性验证。应用本方法对两种药用植物的抗肿瘤活性部位进行了初筛。结... 目的:建立一种基于FDA荧光信号的体外快速筛选抗肿瘤活性物质的方法。方法:通过筛选合适的FDA浓度,建立了荧光测定法,并对该方法进行了线性范围和精密度的考察以及可靠性验证。应用本方法对两种药用植物的抗肿瘤活性部位进行了初筛。结果:该方法在68~1.5×10~4个/孔的范围内,荧光信号强度与细胞数之间具有良好的线性关系(R^2=0.996 7),板内精密度为10.9%。应用本方法检测得到盐酸阿霉素抑制MCF-7细胞增殖的IC_(50)值为3.04μg/mL,说明本方法用于抗肿瘤活性物质筛选是准确可靠的。经过本方法的筛选,获得了沙煲暗罗茎乙酸乙酯部位、沙煲暗罗茎石油醚部位和海南染木树石油醚部位抑制MCF-7细胞增殖的IC_(50)值分别为134.1μg/mL、78.46μg/mL和86.87μg/mL。结论:本方法快速、灵敏、细胞线性范围宽,可用于天然产物抗肿瘤活性物质的体外快速高通量筛选。 展开更多
关键词 荧光 抗肿瘤 乙酸荧光 天然产物
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三种漱口液对早期原位菌斑生物膜形成的影响 被引量:12
14
作者 鲁纯 李松 +3 位作者 李谨 王娟 胡凡 陈武 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期372-375,共4页
目的:应用口内牙菌斑生物膜模型评估替硝唑漱口液、西吡氯铵漱口液与氯己定漱口液对早期原位牙菌斑生物膜形成的影响。方法:在专业洁治后,志愿者佩戴一种上颌装置,6个玻璃片置于装置内以形成口内菌斑生物膜。志愿者用指定漱口液每天漱口... 目的:应用口内牙菌斑生物膜模型评估替硝唑漱口液、西吡氯铵漱口液与氯己定漱口液对早期原位牙菌斑生物膜形成的影响。方法:在专业洁治后,志愿者佩戴一种上颌装置,6个玻璃片置于装置内以形成口内菌斑生物膜。志愿者用指定漱口液每天漱口2次,每次15ml含漱1min。48h后样本从装置中移出,立即用2种荧光染料染色,分别将死菌染成红色,活菌染成绿色,在激光共聚焦显微镜下观察,进行三维扫描,评估菌斑生物膜的厚度和活菌比率。在14d洗脱期后,再应用另一种漱口液。结果:与清水相比,3种漱口液作用下的48h菌斑生物膜平均厚度及平均活菌比率均有显著降低(P<0.001),且3组之间有显著差异(P<0.05)。结论:对于早期原位菌斑生物膜,3种漱口液均显示有抑制菌斑形成及抗菌的作用。 展开更多
关键词 菌斑生物膜 替硝唑 西吡氯铵 氯己定 激光共聚焦显微镜 二乙酸荧光素/溴化乙锭
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适合海洋微藻活体染色的方法评价 被引量:6
15
作者 王帅 张波 +4 位作者 赵昔龙 程明娇 曹为 徐希媛 郑立 《海洋科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期321-330,共10页
为了评估一种快速简单用以确定海洋微藻细胞活性的技术,针对船舶压载水中常见的3个门类中11种10~50μm单细胞微藻用中性红(NR)、5-氯甲基荧光素二乙酸酯(CMFDA)、荧光素二乙酸酯(FDA)三种染料进行染色,通过光镜和荧光显微镜对染色结果... 为了评估一种快速简单用以确定海洋微藻细胞活性的技术,针对船舶压载水中常见的3个门类中11种10~50μm单细胞微藻用中性红(NR)、5-氯甲基荧光素二乙酸酯(CMFDA)、荧光素二乙酸酯(FDA)三种染料进行染色,通过光镜和荧光显微镜对染色结果进行测定。结果表明,NR(中性红)是检测本实验中全部海洋微藻藻株细胞活性的最佳染料,染色最佳浓度为1/10 000,染色时间为30min;5-氯甲基荧光素二乙酸酯(CMFDA)、荧光素二乙酸酯(FDA)和双荧光染色对海洋微藻藻株活细胞着色时间短,染色效果明显,但其应用具有局限性,适用于检测本实验中甲藻门(塔玛亚历山大藻、链状亚历山大藻、微小原甲藻、利玛原甲藻、东海原甲藻、米氏凯伦藻)和绿藻门(青岛大扁藻和杜氏盐藻)的活性,染色最佳浓度为5μmol/L FDA+2.5μmol/L CMFDA,染色时间为10min,但不适用于检测硅藻门的细胞活性。因此,中性红更适合检测船舶压载水中微藻活细胞,根据光镜下微藻细胞着色情况而判断细胞活性。 展开更多
关键词 海洋微藻 活体着色 中性红 5-氯甲基荧光乙酸 荧光乙酸 船舶压载水
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黑松菌根共生体中真菌液泡形态构架及其活力 被引量:9
16
作者 郑玲 吴小芹 《植物生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期932-937,共6页
为探讨菌根共生体中菌根菌液泡结构及其活力变化对宿主生长的影响,对3种外生菌根菌黄色须腹菌(Rhizopogen luteous,简称Rl)、彩色豆马勃(Pisolithus tinctorius,简称Pt2)、美味牛肝菌(Boletus edulis,简称Be)离体菌丝及与黑松(Pinus thu... 为探讨菌根共生体中菌根菌液泡结构及其活力变化对宿主生长的影响,对3种外生菌根菌黄色须腹菌(Rhizopogen luteous,简称Rl)、彩色豆马勃(Pisolithus tinctorius,简称Pt2)、美味牛肝菌(Boletus edulis,简称Be)离体菌丝及与黑松(Pinus thunbergii)形成菌根共生体的冰冻切片进行6-羧基二乙酸荧光素(6-CFDA)染色,观察了真菌液泡形态构架及其活力的变化。结果表明,在Pt2与Rl离体菌丝中既可见单个分散的大液泡,又可见相邻液泡间由细管状连接而成的管状液泡系统,Be离体菌丝的液泡则呈细小颗粒状,密集分布于菌丝体的各个部分;Be离体菌丝的活性强于Pt2和Rl。上述3种菌根菌与黑松形成菌根共生体后,Pt2与Rl对黑松的促生效果好于Be,菌根共生体中菌套和哈氏网菌丝的活性明显强于Be,且仍可见数个液泡连接成管状系统;而在Be菌根中菌丝液泡系统不形成管状,活性较低。结果暗示,菌根共生体中真菌的管状液泡系统及其活力与对黑松的促生作用似存在一定的相关性。该研究对于进一步了解菌根的促生作用机理及菌根真菌与宿主植物的协同进化具有一定的意义。 展开更多
关键词 黑松 外生菌根 管状液泡 菌丝活力 6-羧基乙酸荧光
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干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393在鼠消化道内定植能力及分布规律的研究 被引量:4
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作者 徐义刚 崔丽春 +2 位作者 唐丽杰 赵丽丽 李一经 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2007年第4期20-22,共3页
研究了干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393在小鼠肠道中定植能力及分布规律。利用羧基荧光素二乙酸琥珀酰亚胺酯分子探针对干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393进行标记,以每只1010mL-1的量,口服途径喂给BALB/c鼠,分别于口服后的第1,3,5,... 研究了干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393在小鼠肠道中定植能力及分布规律。利用羧基荧光素二乙酸琥珀酰亚胺酯分子探针对干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393进行标记,以每只1010mL-1的量,口服途径喂给BALB/c鼠,分别于口服后的第1,3,5,6 d取其十二指肠、空肠、回肠、结肠等肠段,通过流式细胞仪检测肠内的标记阳性菌。实验结果显示:经口服后第5 d,干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393开始在BALB/c鼠肠道中定植,在十二指肠、空肠、回肠、结肠的定植率分别为28.70%,29.77%,15.63%,26.17%,第6 d标记的阳性菌出现明显的生长趋势,阳性检出率分别为71.77%,57.31%,65.44%,53.13%。研究表明干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393具有良好的肠道定植能力。 展开更多
关键词 干酪乳杆菌 定植能力 羧基荧光乙酸琥珀酰亚胺酯
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羧基荧光素琥珀酰亚胺酯标记肿瘤细胞及其在细胞毒检测中的价值 被引量:2
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作者 段秀梅 谭岩 +5 位作者 方艳秋 杨广民 王晓祺 刘晓琳 刘力华 许淑芬 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期935-938,共4页
目的探讨化学染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记肿瘤细胞的最佳条件及其在细胞毒检测中的价值。方法用不同浓度的CFDA-SE标记K562(人红白血病细胞)、YAC-1(小鼠淋巴瘤细胞)、A375(人乳腺癌细胞)、MCF-7(人黑色... 目的探讨化学染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记肿瘤细胞的最佳条件及其在细胞毒检测中的价值。方法用不同浓度的CFDA-SE标记K562(人红白血病细胞)、YAC-1(小鼠淋巴瘤细胞)、A375(人乳腺癌细胞)、MCF-7(人黑色素瘤细胞)不同肿瘤细胞系,并检测其0—24h的荧光强度,观察荧光强度变化的时间动力学,选择CFDA-SE标记细胞的最佳浓度;CFDA-SE标记细胞后孵育时间为1—6h,再用DNA染料碘化丙啶(PI)标记,流式细胞仪分析CFDA-SE和PI双标记细胞,并计算细胞死亡率,研究CFDA-SE对细胞的毒性。CFDA-SE标记时间分别为5、6、7、8、10、15min,测定标记不同时间的荧光强度和细胞的死亡率,选择最佳标记时间;用CFSE在最佳条件下标记靶细胞进行细胞毒检测实验。结果对于不同肿瘤细胞系,CFDA-SE标记的最佳浓度不同;CFDA-SE对细胞没有毒性,死亡率低于5%;最佳标记时间为8min。人外周血单个核细胞和BALB/c鼠脾淋巴细胞对肿瘤细胞K562、YAC-1均表现出杀伤活性,杀伤百分率随效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为50:1—25:1,共孵育时间为2—4h。结论CFDA-SE具有标记细胞稳定,能用于细胞培养时间较长的研究,不影响细胞功能,适用于流式细胞仪检测细胞毒实验的优点,是一种很好的标记细胞的荧光素染料。 展开更多
关键词 流式细胞术 细胞毒 羧基荧光乙酸盐琥珀酰亚胺酯
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长期施肥土壤的FDA水解酶活性 被引量:20
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作者 马星竹 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期451-455,共5页
以长期不同施肥处理土壤为研究对象,运用荧光素二乙酸酯(FDA)为底物,采用分光光度法测定土壤FDA水解酶活性.结果表明:在黑土和棕壤上有机肥配施化肥处理的FDA水解酶活性增幅较大,相对于不施肥处理分别增加68.8%和72.4%,也显著高于单施... 以长期不同施肥处理土壤为研究对象,运用荧光素二乙酸酯(FDA)为底物,采用分光光度法测定土壤FDA水解酶活性.结果表明:在黑土和棕壤上有机肥配施化肥处理的FDA水解酶活性增幅较大,相对于不施肥处理分别增加68.8%和72.4%,也显著高于单施化肥处理;土壤FDA水解酶活性与土壤微生物量碳具有极显著的正相关关系,在黑土和棕壤中相关系数分别为0.912**和0.871**;FDA水解酶活性能较好地反映微生物活性,可以作为评价土壤微生物量和活性的重要指标;同时,土壤FDA水解酶与参与C、N、P、S等重要养分循环的酶活性关系密切,均达到极显著水平. 展开更多
关键词 长期施肥 荧光乙酸酯(FDA) FDA水解酶 微生物量碳
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豚鼠耳蜗外毛细胞的一氧化氮定量分析 被引量:2
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作者 孙建和 李兴启 +1 位作者 沙淑花 JochenSchach 《中国体视学与图像分析》 2002年第4期244-247,共4页
目的:为了观察一氧化氮底物左旋精氨酸(L-arginie)和一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对豚鼠耳蜗外毛细胞一氧化氮的影响。方法:应用新的荧光染料4,5二氨基乙酰乙酸荧光素(4,5-diaminofluorescein diacetate,DAF-2DA)测定... 目的:为了观察一氧化氮底物左旋精氨酸(L-arginie)和一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对豚鼠耳蜗外毛细胞一氧化氮的影响。方法:应用新的荧光染料4,5二氨基乙酰乙酸荧光素(4,5-diaminofluorescein diacetate,DAF-2DA)测定豚鼠耳蜗外毛细胞内一氧化氮的含量。结果:发现加左旋精氨酸后外毛细胞的荧光灰度值比正常外毛细胞的灰度值升高。而加左旋硝基精氨酸甲酯后,外毛细胞的荧光灰度值比正常外毛细胞的灰度值降低。结论:进一步证明豚鼠耳蜗外毛细胞内存在一氧化氮。 展开更多
关键词 一氧化氮(NO) 4 5氨基乙酰乙酸荧光(4 5-diaminofluorescein DIACETATE DAF-2DA) 外毛细胞(OHC) 左旋精氨酸(L-arginine) 左旋硝基精氨酸甲酯(NG-monomethyl-L-arginine monoacetate L-NMMA)
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