期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到177篇文章
< 1 2 … 9 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
川、鄂两地钉螺足肌蛋白质二维电泳图谱的比较研究 被引量：10
1
作者 朱昌亮 叶炳辉 +4 位作者 赵慰先 朱晓龙 赵学忠 张云 陶亮风 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期7-9,共3页
本文比较分析了川、鄂两地钉螺足肌蛋白质多肽图谱。结果:(川)光壳钉螺和(鄂)肋壳钉螺分别显示多肽点92和106个,其大部份为64KD以下的酸性蛋白。除了共有多肽外,两者差异点分别为12和21个,其中主要为对方未查见的特有多肽;此外,在光亮钉... 本文比较分析了川、鄂两地钉螺足肌蛋白质多肽图谱。结果:(川)光壳钉螺和(鄂)肋壳钉螺分别显示多肽点92和106个,其大部份为64KD以下的酸性蛋白。除了共有多肽外,两者差异点分别为12和21个,其中主要为对方未查见的特有多肽;此外,在光亮钉螺5号和9号多肽点位置,肋壳钉螺分别出现3个和2个多肽点,以上为质的差异。光壳钉螺3号和肋壳钉螺6号多肽均较对方相应位置的多肽明显增大,存在量的差别。两地钉螺平均差异为16.7％。 展开更多
关键词 钉螺 足肌蛋白质 二维电泳图谱
下载PDF
二维电泳分离牛精子蛋白技术 被引量：8
2
作者 王振玲 王栋 +5 位作者 朱化彬 程金华 李玉冰 郝海生 杜卫华 沙里金 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期61-66,共6页
二维电泳是蛋白质分离技术并可用于对精子蛋白的分离。旨在通过对双向电泳条件的研究摸索出一种适用于分离牛精子蛋白的二维电泳技术，并利用其对牛精子蛋白进行分离鉴定。在实验中，优化了等电聚焦程序，研究了精子蛋白的不同制备方法... 二维电泳是蛋白质分离技术并可用于对精子蛋白的分离。旨在通过对双向电泳条件的研究摸索出一种适用于分离牛精子蛋白的二维电泳技术，并利用其对牛精子蛋白进行分离鉴定。在实验中，优化了等电聚焦程序，研究了精子蛋白的不同制备方法、不同上样量、不同胶条长度对电泳结果的影响。结果表明，采用尿素-盐酸胍两步裂解法裂解精子细胞制备蛋白，使用13cm非线性胶条进行蛋白二维电泳，能获得较好的电泳图谱。图谱经二维电泳软件分析，可检测出约800多个蛋白质点，分子量基本分布在10～100kDa、等电点约为4～9的区域内。对精子蛋白二维电泳条件的摸索，为后续牛精子X、Y差异蛋白的检测和分析奠定了理论基础。 展开更多
关键词 牛 精子 二维电泳
下载PDF
二维电泳和iTRAQ的实验比较 被引量：11
3
作者 潘三强 宿宝贵 吕来清 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期538-542,共5页
对蛋白组学中的二维电泳和iTRAQ两种技术进行比较研究,为神经科学的蛋白组学研究提供选择参考。取生后1～3d C57Bl/6小鼠背根神经节进行培养,对照组加DMSO,实验组加JNJ460。分别用二维电泳和iTRAQ两种技术检测背根神经节细胞蛋白的变化,... 对蛋白组学中的二维电泳和iTRAQ两种技术进行比较研究,为神经科学的蛋白组学研究提供选择参考。取生后1～3d C57Bl/6小鼠背根神经节进行培养,对照组加DMSO,实验组加JNJ460。分别用二维电泳和iTRAQ两种技术检测背根神经节细胞蛋白的变化,用4700 TOF/TOF串联飞行质谱仪检测变化蛋白的肽片段质量,用GPS软件检索Mascot蛋白质数据库,鉴定出匹配的蛋白。利用二维电泳技术观察到4种表达上调的蛋白,2种是结构蛋白,2种是信号转导蛋白。利用iTRAQ技术观察到22种表达上调的蛋白,其中10种是结构蛋白,3种是信号蛋白,2种是代谢蛋白,2种是降解蛋白化,2种是细胞基质蛋白及3种其它蛋白。利用二维电泳技术观察到发生表达变化的蛋白都位于胞浆内,而利用iTRAQ技术观察到的表达变化的蛋白有胞浆蛋白外,还有线粒体蛋白、膜蛋白和核蛋白。同时,利用二维电泳技术观察到的蛋白变化都在2倍以上,而利用iTRAQ技术计算出的蛋白变化在1.3至1.6倍之间。另,iTRAQ技术在鉴定大分子和小分子蛋白方面也有优势。结果表明iTRAQ技术比二维电泳技术能发现更多数量和更多种类的蛋白,但在比较胞浆蛋白的变化及蛋白量的变化方面二维电泳技术有一定的长处,对iTRAQ的实验结果有互补作用。 展开更多
关键词 二维电泳 ITRAQ 蛋白组学 背根神经节
原文传递
人肺巨细胞癌蛋白质组的二维电泳和计算机图象分析 被引量：8
4
作者 万晶宏 罗凌 +4 位作者 钱小红 郭尧君 邱宗荫 陆应麟 贺福初 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第6期820-826,共7页
为优化用于蛋白质组研究的二维电泳技术和计算机图象分析技术 ,以及初步分析比较与肿瘤细胞转移相关的蛋白质 ,以人肺巨细胞癌 (PLA- 80 1 - D、C)高、低转移株作为研究对象 ,应用 IPG-phor进行第一向等电聚焦 ,随后 ,在 Protein IPG c... 为优化用于蛋白质组研究的二维电泳技术和计算机图象分析技术 ,以及初步分析比较与肿瘤细胞转移相关的蛋白质 ,以人肺巨细胞癌 (PLA- 80 1 - D、C)高、低转移株作为研究对象 ,应用 IPG-phor进行第一向等电聚焦 ,随后 ,在 Protein IPG conversion Kit上进行垂直 SDS- PAGE的分离 .利用光密度仪对银染的凝胶扫描 ,通过 PDQuest软件进行蛋白斑点检测和配比 .结果表明 :(1 )应用 IPGphor,采用样品直接加入重泡胀溶液的形式 ,增大了溶解性 ,缩短聚焦时间、增大样品负荷量 (分析型 ) ,提高了分辨率 .(2 )比较宽 (p H=3～ 1 0 L)、窄 (p H=4～ 7L)范围 IPG胶条 ,窄 p H范围的 IPG胶条具有较高的分辨率 .(3)比较 PLA- 80 1 - C、D细胞蛋白图谱之间的差异 ,其相关系数为 0 .7339± 0 .0 2 91 ;仅在 PLA- 80 1 - C株出现的蛋白为 1 79个 . 展开更多
关键词 蛋白质组 二维电泳 图象分析 人肺巨细胞癌
下载PDF
富集低丰度蛋白的人类精子全蛋白二维电泳整合图的建立 被引量：5
5
作者 孙波澜 范立青 +2 位作者 李凌伟 朱文兵 卢光琇 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期295-299,共5页
目的:运用二维电泳(2-DE)技术分离人类正常精子低丰度蛋白并建立全精子蛋白的2-DE整合图。方法:30例精子标本混匀后一次性进行蛋白提取,分别使用0.8、0.6、0.5、0.3 mg的蛋白上样量进行2-DE。运用MALD I-TOF法对确定2个恒定蛋白点的等位... 目的:运用二维电泳(2-DE)技术分离人类正常精子低丰度蛋白并建立全精子蛋白的2-DE整合图。方法:30例精子标本混匀后一次性进行蛋白提取,分别使用0.8、0.6、0.5、0.3 mg的蛋白上样量进行2-DE。运用MALD I-TOF法对确定2个恒定蛋白点的等位点(PI)和相对分子质量(Mr)作为图像的内参照点,对不同上样量的2-DE图进行比较分析,最后合成1张富集低丰度蛋白的整合图。结果:在0.5 mg图中分离出(1 080±23)个蛋白点,并合成具889个匹配点的整合图A。在上样量为0.8、0.6及0.3 mg的2-DE图中,分别新检测到381、50、32个在0.5 mg图中未检测到的蛋白点。最后合成具1 352个蛋白点的整合图B。结论:通过改变上样量的方法促进低丰度蛋白分离并合成具1 352个蛋白点富集低丰度蛋白的2-DE整合图。 展开更多
关键词 全精子蛋白 上样量 低丰度蛋白 二维电泳 整合图
下载PDF
人精子膜蛋白的二维电泳实验研究 被引量：9
6
作者 王浩飞 向祖琼 王益鑫 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2003年第7期504-506,共3页
目的 :利用二维电泳技术对人精子膜蛋白进行分离 ,为建立正常人精子膜蛋白的蛋白质图谱打下基础。　方法 :使用Percoll密度梯度离心筛选精子 ,用等电聚焦结合聚丙烯酰胺凝胶电泳对人精子膜蛋白进行二维电泳分析。　结果 :图像分析软件... 目的 :利用二维电泳技术对人精子膜蛋白进行分离 ,为建立正常人精子膜蛋白的蛋白质图谱打下基础。　方法 :使用Percoll密度梯度离心筛选精子 ,用等电聚焦结合聚丙烯酰胺凝胶电泳对人精子膜蛋白进行二维电泳分析。　结果 :图像分析软件共可识别出约 80 0个蛋白质斑点 ,绝大多数蛋白的相对分子质量为 2 0 0 0 0～ 10 0 0 0 0 ,等电点为 3.0～ 7.0。　结论 :精子膜上至少有 80 0种蛋白 。 展开更多
关键词 精子 膜蛋白 二维电泳
下载PDF
人APL细胞株NB4不同二维电泳条件对电泳结果的影响 被引量：4
7
作者 张群业 黄秋花 +3 位作者 沈树红 王海红 陈赛娟 陈竺 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第4期401-405,共5页
本研究探讨不同二维电泳条件对人急性早幼粒细胞性白血病 (APL)细胞株NB4二维电泳结果的影响。选用 2 4cm ,pH3- 10L的固定 pH梯度 (immobilizedpHgradient,IPG)胶条 ,用IPGphor进行第一相等电聚焦 ,然后用EttanDaltII垂直电泳系统进行... 本研究探讨不同二维电泳条件对人急性早幼粒细胞性白血病 (APL)细胞株NB4二维电泳结果的影响。选用 2 4cm ,pH3- 10L的固定 pH梯度 (immobilizedpHgradient,IPG)胶条 ,用IPGphor进行第一相等电聚焦 ,然后用EttanDaltII垂直电泳系统进行第二相SDS PAGE ,银染后用ImageMaster 2DElite软件进行分析。结果表明 :采用低离子强度的缓冲液冲洗收集样品可以提高等电聚焦效果。裂解液中 7mol/L尿素、4 0mmol/LDTT能溶解NB4细胞大部分蛋白质 ,而水化液中硫脲与尿素合用可以明显增加碱性端中低分子量区可分辨的蛋白质点。NB4细胞用 2 4cm ,pH3- 10L的IPG胶条进行二维电泳时 ,10 0 μg左右的上样量、6 32 0 0V小时左右的等电聚焦时间是恰当的。结论 :APL细胞的蛋白质种类繁多 ,受多种因素影响 ,正确选择样品制备方法和二维电泳条件十分重要。 展开更多
关键词 急性早幼粒细胞白血病 蛋白质组 NB4细胞株 二维电泳 IPG
下载PDF
DF-1细胞二维电泳方法的建立 被引量：3
8
作者 范忠军 胡序明 +2 位作者 郁川 秦爱建 王欢莉 《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2015年第2期83-87,7,共5页
为了建立和优化DF-1细胞二维电泳方法,对5种细胞裂解液进行了比较;同时,还对提取的蛋白在不同的等电聚焦条件、水化条件、蛋白上样量、SDS-聚丙烯酰胺凝胶浓度条件下的二维电泳图谱进行分析比较,并用PDQuest软件分析优化选择。建立了DF-... 为了建立和优化DF-1细胞二维电泳方法,对5种细胞裂解液进行了比较;同时,还对提取的蛋白在不同的等电聚焦条件、水化条件、蛋白上样量、SDS-聚丙烯酰胺凝胶浓度条件下的二维电泳图谱进行分析比较,并用PDQuest软件分析优化选择。建立了DF-1细胞的二维电泳方法,获得分辨率和重复性均可满足分析要求的DF-1细胞的二维电泳图谱。 展开更多
关键词 DF-1 细胞 二维电泳 裂解液 蛋白质组学
下载PDF
一维和二维电泳分析斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原 被引量：3
9
作者 陈文碧 张锡林 +4 位作者 王光西 许颖 张跃辉 杨兴友 毛樱逾 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期317-317,共1页
关键词 成虫可溶性抗原 斯氏狸殖吸虫 二维电泳 电泳分析 免疫学诊断方法 并殖吸虫病 特异抗原 检测效果 免疫印迹技术
下载PDF
尿道下裂大鼠与正常大鼠睾丸蛋白质二维电泳图谱分析 被引量：3
10
作者 蒋荣江 沈华 +2 位作者 沈百欣 徐子程 张炜 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1363-1365,1413,共4页
目的:探讨二维电泳技术在尿道下裂大鼠与正常大鼠睾丸差异表达蛋白研究中的应用。方法:孕SD大鼠10只,随机分为2组,妊娠12～19天,实验组和对照组分别予邻苯二甲酸二丁酯(DBP)500mg/(kg·d)、大豆油5ml/d灌胃,第21天取出仔鼠睾丸,提... 目的:探讨二维电泳技术在尿道下裂大鼠与正常大鼠睾丸差异表达蛋白研究中的应用。方法:孕SD大鼠10只,随机分为2组,妊娠12～19天,实验组和对照组分别予邻苯二甲酸二丁酯(DBP)500mg/(kg·d)、大豆油5ml/d灌胃,第21天取出仔鼠睾丸,提取总蛋白,进行二维凝胶电泳分离和图像分析。结果:按照5倍的表达量计算,发现有差异表达的蛋白质点9个,5个点在尿道下裂大鼠睾丸中高表达,而在正常大鼠睾丸为低表达;相反,在正常大鼠睾丸中高表达的4个点,在尿道下裂者为低表达。结论:初步建立了正常和尿道下裂大鼠睾丸的二维电泳图谱,并发现两者之间存在一些差异表达蛋白,为进一步进行尿道下裂大鼠睾丸差异表达蛋白的分离及鉴定奠定了良好基础。 展开更多
关键词 尿道下裂 大鼠 睾丸 二维电泳
下载PDF
二维电泳和质谱技术鉴定肝细胞癌相关N-连接糖蛋白 被引量：2
11
作者 王明丽 韩大正 +4 位作者 晁玮霞 刘瑞敏 赵云岗 张天 齐义军 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期495-502,共8页
目的鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达N-连接糖蛋白。方法采用刀豆凝集素A(Con A)、晶状体凝集素(LCH)、雪花凝集素(GNA)等3种植物凝集素组成的亲和层析柱,分别从肝永生化细胞系L02和HCC细胞系Huh7、PLC5、SNU449中纯化N-连... 目的鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达N-连接糖蛋白。方法采用刀豆凝集素A(Con A)、晶状体凝集素(LCH)、雪花凝集素(GNA)等3种植物凝集素组成的亲和层析柱,分别从肝永生化细胞系L02和HCC细胞系Huh7、PLC5、SNU449中纯化N-连接糖蛋白、二维电泳分析差异表达的蛋白质斑点,质谱、生物信息学等技术鉴定差异表达蛋白,Western blotting验证了转录调控肿瘤蛋白(TCTP)、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)和膜联蛋白A2(annexin A2)在肝永生化及HCC细胞和HCC及癌旁组织中的表达规律,体外侵袭实验检测TCTP沉默后对SNU449的侵袭力影响。结果质谱、生物信息学等技术共鉴定出42个差异表达的蛋白质分子/异质体(HCC细胞中高、低表达的蛋白/异质体分别为14个、28个),代表32个蛋白质分子,其中的22个蛋白含有至少1个N糖基化位点(Net NGlyc 1.0预测)。这些差异表达的蛋白主要参与氧化还原内稳态维系、碳水化合物/能量代谢、糖酵解、抗凋亡等生物学过程。Western blotting检测表明,TCTP、Ep CAM和annexin A2在6个肝癌细胞系PLC5、Hep G2、SNU449、Huh7、HCC7721和SNU473及肝癌组织中表达显著升高,siRNA介导的TCTP沉默明显抑制了HCC细胞系SNU449的体外侵袭能力。结论 TCTP、Ep CAM和annexin可能参与了HCC发生发展过程,TCTP可能成为HCC靶向治疗的分子靶点之一。 展开更多
关键词 肝细胞癌 N-连接糖蛋白 植物凝集素 质谱 二维电泳
原文传递
斯氏按蚊黑化包被约氏疟原虫卵囊时血淋巴蛋白的二维电泳分析 被引量：2
12
作者 杨松 黄复生 +3 位作者 吴玉章 况明书 牟芝蓉 魏斌 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期29-31,共3页
目的　以斯氏按蚊 约氏疟原虫为模型 ,用二维电泳技术分析比较约氏疟原虫感染后雌性斯氏按蚊吸饲硝喹蔗糖水和蔗糖水蚊血淋巴蛋白差异。方法　用挤压法分别收集吸硝喹糖水 3d、吸感染血和吸蔗糖水雌斯氏按蚊成蚊血淋巴 ,Bradford法检... 目的　以斯氏按蚊 约氏疟原虫为模型 ,用二维电泳技术分析比较约氏疟原虫感染后雌性斯氏按蚊吸饲硝喹蔗糖水和蔗糖水蚊血淋巴蛋白差异。方法　用挤压法分别收集吸硝喹糖水 3d、吸感染血和吸蔗糖水雌斯氏按蚊成蚊血淋巴 ,Bradford法检测血淋巴蛋白浓度 ,继而对血淋巴进行双向电泳 ,凝胶考马斯亮蓝染色 ,ImageMasterVDS CL对二维电泳凝胶蛋白斑点扫描和用ImageMaster 2DElite软件进行蛋白质斑点自动分析。结果　用药组血淋巴蛋白浓度总是低于吸感染血组和吸糖水组 ,用药组蚊血淋巴蛋白点有 10 1个 ,对照组有 115个 ,有 5 1个蛋白点相同。 5 0个仅在用药组中检测到 ,64个仅在对照组中检测到 ;蛋白点的分子量和等电点主要位于 ( 4 0～ 60 )× 10 3 和碱性端。结论　二维电泳技术可直接反映蛋白质的差异 ,其蛋白浓度和白点的差异与硝喹诱导疟原虫卵囊黑化有关。 展开更多
关键词 二维电泳 硝喹 斯氏按蚊 血淋巴 约氏疟原虫
下载PDF
成年与幼年Long Evans大鼠视皮层蛋白的二维电泳分析 被引量：4
13
作者 姚军平 阴正勤 +1 位作者 牛建军 王仕军 《眼科新进展》 CAS 2005年第1期8-10,共3页
目的　利用双向电泳技术比较正常成、幼年LongEvans大鼠初级视皮层蛋白质组表达差异 ,探索蛋白质组学技术在视觉发育研究中应用的可能性。方法　 2 2d龄和10 0d龄LongEvans大鼠各 3只 ,过量戊巴比妥钠处死 ,切取其初级视皮层的灰质 ,裂... 目的　利用双向电泳技术比较正常成、幼年LongEvans大鼠初级视皮层蛋白质组表达差异 ,探索蛋白质组学技术在视觉发育研究中应用的可能性。方法　 2 2d龄和10 0d龄LongEvans大鼠各 3只 ,过量戊巴比妥钠处死 ,切取其初级视皮层的灰质 ,裂解抽提总蛋白 ,双向电泳分离总蛋白 ,比较 2组大鼠初级视皮层蛋白质表达差异。结果　胶图差异分析发现幼年鼠初级视皮层中有 12个蛋白质点表达较丰富 ,成年鼠初级视皮层中有 16个蛋白质点表达较丰富。结论　正常成、幼年LongEvans大鼠初级视皮层蛋白质组存在明显差异 ,蛋白质组学技术可以应用于视觉发育方面的研究。 展开更多
关键词 二维电泳 视皮层 LONG EVANS大鼠
下载PDF
二维电泳联合质谱技术鉴定水溶性晶状体蛋白 被引量：3
14
作者 柳夏林 郭莉 +2 位作者 黄强 吴明星 吴开力 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第2期129-132,共4页
目的　应用二维电泳结合质谱分析分离鉴定水溶性晶状体蛋白及观察乙酰化修饰后的γ晶状体蛋白的变化。方法　分别从小鼠及小牛晶状体获得水溶性晶状体蛋白质 ,并经凝胶过滤层析分离出牛γ晶状体蛋白 ,进行体外乙酰化 ;将各晶状体蛋白样... 目的　应用二维电泳结合质谱分析分离鉴定水溶性晶状体蛋白及观察乙酰化修饰后的γ晶状体蛋白的变化。方法　分别从小鼠及小牛晶状体获得水溶性晶状体蛋白质 ,并经凝胶过滤层析分离出牛γ晶状体蛋白 ,进行体外乙酰化 ;将各晶状体蛋白样品进行二维电泳 (2DE) ,经染色、照相和图像分析 ,进一步用胰蛋白酶消化、基质辅助激光解吸电离质谱分析鉴定各晶状体蛋白。结果　在 2DE电泳图谱上 ,小鼠水溶性晶状体蛋白有 2 0余个斑点 ,各晶状体蛋白的相对分子质量多位于 180 0 0～ 3 0 0 0 0D范围。主要已鉴定的α、β和γ晶状体蛋白 ,分别占 19%、43 %和 3 6%。来自小牛的γ晶状体蛋白主要有 5个斑点 ,其中 3个大的点 (γB、γD和γs)占总量的 90 %。体外乙酰化后 ,带负电荷的斑点数明显增多。结论　 2DE结合生物质谱技术是分离鉴定晶状体蛋白的有效手段 。 展开更多
关键词 晶状体蛋白 二维电泳 质谱
下载PDF
微流控芯片二维电泳研究进展 被引量：3
15
作者 石晓强 梁恒 范军 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期735-739,共5页
综述了微流控芯片二维电泳技术及其在生命科学中的应用,包括胶束电动力学毛细管色谱(MEKC)与毛细管区带电泳(CZE)、等电聚焦(IEF)与CZE、开管电色谱(OCEC)与CZE耦联等模式的二维微流控芯片。展望了二维微流控芯片的应用前景。
关键词 微流控芯片 二维电泳技术 蛋白质 分离技术 等电聚焦技术
下载PDF
二维电泳-质谱分析斯氏按蚊中约氏疟原虫卵囊黑化相关的差异表达蛋白 被引量：2
16
作者 杨松 黄复生 +1 位作者 吴玉章 况明书 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期501-505,共5页
目的　用 2 DE和PMF分离和鉴定约氏疟原虫卵囊黑化相关的斯氏按蚊中肠和血淋巴差异表达蛋白。方法　用固相pH梯度二维电泳分离中肠和血淋巴差异表达蛋白 ,考马斯亮蓝染色 ,ImageMasterVDS CL凝胶扫描和PDQuest2DElite软件分析 ,差异蛋... 目的　用 2 DE和PMF分离和鉴定约氏疟原虫卵囊黑化相关的斯氏按蚊中肠和血淋巴差异表达蛋白。方法　用固相pH梯度二维电泳分离中肠和血淋巴差异表达蛋白 ,考马斯亮蓝染色 ,ImageMasterVDS CL凝胶扫描和PDQuest2DElite软件分析 ,差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定其胶内酶解后的肽质指纹图谱 ,用PeptIdent软件查询SWISS PROT数据库。结果　获得了分辨率和重复性均较好的 2 DE考马斯亮蓝图谱 ,吸硝喹糖水组蚊血淋巴和中肠蛋白点分别有 10 1个和 10 4个 ,感染组分别有 115个和 162个 ,匹配点分别为 5 1个和 44个。斯氏按蚊血淋巴和中肠蛋白质组中蛋白点分别主要分布于酸性端和碱性端 ,血淋巴和中肠差异蛋白也分别主要分布于酸性端和碱性端。随机取2 5个差异蛋白点进行胶内原位酶解 肽质指纹图谱分析得到了 16个蛋白质肽质指纹图 ,查询数据库初步鉴定了 8个蛋白质 ,分别为与抗疟免疫、黑化、结构、糖代谢、细胞通讯等相关蛋白。结论　建立了一套重复性和分辨率较好的斯氏按蚊蛋白质分离和鉴定的二维凝胶电泳 肽质谱指纹分析法 ,约氏疟原虫卵囊黑化前后 ,斯氏按蚊血淋巴和中肠伴随大量差异表达蛋白 ,部分蛋白可能与黑化有关。 展开更多
关键词 斯氏按蚊 蛋白质组 二维电泳 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 黑化
下载PDF
基于荧光差异二维电泳技术的临床尿液蛋白质组学研究方法探讨 被引量：3
17
作者 王玲 倪兆慧 +3 位作者 牟姗 严玉澄 顾乐怡 李稻 《中国血液净化》 2009年第7期382-385,共4页
目的探讨尿液蛋白质组学研究中样本留取、尿样储存、蛋白浓缩、荧光标记以及二维电泳过程中的关键问题和具体方法,以期为临床开展相关研究奠定方法学基础。方法选取尿蛋白<0.15g/24h的糖尿病和高血压男性患者,床边留取新鲜尿液。尿... 目的探讨尿液蛋白质组学研究中样本留取、尿样储存、蛋白浓缩、荧光标记以及二维电泳过程中的关键问题和具体方法,以期为临床开展相关研究奠定方法学基础。方法选取尿蛋白<0.15g/24h的糖尿病和高血压男性患者,床边留取新鲜尿液。尿液混合后根据是否添加蛋白酶抑制剂、长期保存温度、蛋白除盐方法和一向固相PH梯度等电聚焦胶条的不同,分为7组,所有样本都进行了双向电泳分析比较,部分标本进行了荧光差异电泳分析。结果从双向电泳结果可以明显看出加入蛋白酶抑制剂、-80℃冰箱保存、反复超滤离心所得到的尿液蛋白点数最多;胶条以11cm,PH4-7和PH3-1024cm的非线性胶条比较合适尿液二维电泳分析。通过不同Cydye荧光染料标记后,尿液荧光差异二维电泳(2D-DIGE)分析可以得到重复性好、便于临床和实验室开展的结果。结论基于2D-DIGE的临床尿液蛋白质组学研究方法具有可行性,采取合适的方法可以得到良好的研究结果。 展开更多
关键词 蛋白质组学 尿液 荧光差异二维电泳 方法学
下载PDF
胰胆合流异常胆汁和血清淀粉酶的二维电泳 被引量：1
18
作者 龚振华 肖现民 +1 位作者 徐绍英 张祥民 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期79-82,共4页
目的 通过二维电泳分析胰胆合流异常(PBM)患者的胆汁和血清淀粉酶的等电点和相对分子质量 (Mr)。方法 通过醋酸纤维素薄膜电泳,将正常人血清和PBM患者胆汁和血清中淀粉酶初步分离提纯,继经 等电聚焦和SDS-PAGE二维电泳,测定淀粉酶同工酶... 目的 通过二维电泳分析胰胆合流异常(PBM)患者的胆汁和血清淀粉酶的等电点和相对分子质量 (Mr)。方法 通过醋酸纤维素薄膜电泳,将正常人血清和PBM患者胆汁和血清中淀粉酶初步分离提纯,继经 等电聚焦和SDS-PAGE二维电泳,测定淀粉酶同工酶的Mr和等电点。结果 在醋酸纤维素薄膜电泳中,淀粉 酶泳动在γ球蛋白负极侧,显示出2条谱带。在二维电泳中,正常人血清淀粉酶的2个同工酶分别是等电点 p16.4(Mr≈54×103)和等电点p16.7(Mr≈55×103)的两个点:PBM患者胆汁和血清中,存在6个淀粉酶同工酶 点,除了上述正常人血清淀粉酶的两个主要点之外,在p16.8和p17.2分别出现Mr≈55×103两个新点,在p16. 0和p16.2分别出现Mr≈53×103-54×103的两个新点。结论 在PBM患者胆汁和血清中,淀粉酶存在6种 同工酶,这一系列同工酶的Mr都接近正常的55×103,而等电点分布在p16.0到p17.2之间的6个点上,而正常 人血清淀粉酶只存在两种同工酶。 展开更多
关键词 胆汁 正常人 患者 人血清 血清淀粉酶 淀粉酶同工酶 二维电泳 等电点 等电聚焦 SDS-PAGE
下载PDF
不同条件对鸭瘟病毒感染细胞蛋白质组二维电泳分析结果的影响 被引量：1
19
作者 贾仁勇 程安春 +9 位作者 汪铭书 郭宇飞 徐超 齐雪峰 袁桂萍 朱德康 丁轲 龚永强 杨梅 陈孝跃 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期272-276,共5页
本研究以鸭瘟病毒感染鸭胚成纤维细胞为材料,围绕影响二维电泳因素进行全面探讨,以建立和优化鸭瘟病毒感染细胞蛋白质组二维电泳模型。结果表明,样品经过冷丙酮处理,水化液DTT浓度为30 mmol/L都有利于等电聚焦;采用pH5～8 IPG窄胶条和... 本研究以鸭瘟病毒感染鸭胚成纤维细胞为材料,围绕影响二维电泳因素进行全面探讨,以建立和优化鸭瘟病毒感染细胞蛋白质组二维电泳模型。结果表明,样品经过冷丙酮处理,水化液DTT浓度为30 mmol/L都有利于等电聚焦;采用pH5～8 IPG窄胶条和混合两性载体电解质pH3～10/pH5～8为2/1比pH3～10 IPG宽胶条和单一两性载体电解质pH3～10分离蛋白时,各蛋白点间距较大,分辨率高,更有利于显示低丰度蛋白点;1.5 mg的蛋白上样量偏大,2～DE图像出现拖尾和水平条纹,部分相邻高丰度的蛋白重叠,且还掩盖了低丰度蛋白点。PDQuest7.40软件分析显示:17 cmpH5～8 IPG胶条电泳鸭瘟病毒感染细胞蛋白质组,银染可获得1 253个蛋白点,而考染却检测到388个蛋白点;重复试验仍获得清晰、稳定的2-DE图像,同一样本不同时期,考染可获得约348、331个蛋白点,蛋白点匹配率达88%,表明了鸭瘟病毒感染细胞蛋白质组二维电泳模型稳定、分辨率高、重复性好,为鸭瘟病毒蛋白组的进一步研究和新蛋白的发现提供了重要的研究方法。 展开更多
关键词 蛋白质组 二维电泳 鸭瘟病毒 成纤维细胞
下载PDF
微流控二维电泳芯片的电压控制优化 被引量：1
20
作者 梁恒 范军 +1 位作者 李涓 沈燕 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1409-1414,共6页
基于微流控二维电泳芯片(2D-EMC)的流路特点,建立等效电阻模型,以便给出各端电压的合理取值范围,成功实现微流控芯片二维电泳分离。经实验测定各微通道电阻,在各端电压合理取值范围内,通过电流测量调整(优化)电压,得到了一组优化的电压... 基于微流控二维电泳芯片(2D-EMC)的流路特点,建立等效电阻模型,以便给出各端电压的合理取值范围,成功实现微流控芯片二维电泳分离。经实验测定各微通道电阻,在各端电压合理取值范围内,通过电流测量调整(优化)电压,得到了一组优化的电压控制方案,在化学发光-2D-EMC系统中成功实现了精氨酸和甘氨酸衍生物的二维分离。本方法显著减小了实现微流控芯片二维电泳分离的实验次数。 展开更多
关键词 微流控二维电泳芯片 等效电阻模型 电压控制
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 9 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部