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特异性亲和吸附法纯化冬小麦麸皮抗冻蛋白 被引量:1
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作者 张超 赵晓燕 +3 位作者 马越 张晖 李冀新 姚惠源 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期12-15,20,共5页
抗冻蛋白是一种可以非依数性降低体系冰点的蛋白质,在生命体内具有非常重要的生理作用,广泛地应用于食品、医学和生物技术等领域。首先通过热重分析仪法和分配系数法研究证明冬小麦麸皮抗冻蛋白(TaAFP)具有较强的亲水性和亲冰性,进一步... 抗冻蛋白是一种可以非依数性降低体系冰点的蛋白质,在生命体内具有非常重要的生理作用,广泛地应用于食品、医学和生物技术等领域。首先通过热重分析仪法和分配系数法研究证明冬小麦麸皮抗冻蛋白(TaAFP)具有较强的亲水性和亲冰性,进一步使用特异性亲和吸附法对其纯化,产率1.64%,获得电泳纯TaAFP。纯化过程中充分利用其自身较强的亲水和亲冰的特性。该方法具有步骤少、耗时较短等优点,比传统的色谱方法更加快捷高效,但是对纯化过程的控制要求严格。 展开更多
关键词 冬小麦 麸皮 抗冻蛋白 异性亲和
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南极磷虾抗冻蛋白的特异性亲和吸附提取研究 被引量:3
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作者 马庆保 陈雪忠 +3 位作者 刘志东 曲映红 汪一红 王帅 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第23期183-188,共6页
本文以南极磷虾蛋白为原料,以南极磷虾抗冻蛋白(Antifreeze proteins,AFPs)的得率为指标,开展了特异性亲和吸附法提取南极磷虾AFPs的工艺研究。本文在单因素实验的基础上,通过响应面优化实验研究样品浓度、吸附温度、吸附时间、吸附次... 本文以南极磷虾蛋白为原料,以南极磷虾抗冻蛋白(Antifreeze proteins,AFPs)的得率为指标,开展了特异性亲和吸附法提取南极磷虾AFPs的工艺研究。本文在单因素实验的基础上,通过响应面优化实验研究样品浓度、吸附温度、吸附时间、吸附次数对南极磷虾AFPs得率和热滞活性(Thermal Hytersis Activity,THA)的影响。结果表明,南极磷虾AFPs的最优提取条件为:样品浓度1.0 mg/m L、吸附温度-1.70℃、吸附时间为11 h、吸附次数为2次。在上述条件下预测南极磷虾AFPs的得率为29.34%,THA为0.0805℃;验证值与预测值之间的误差分别为2.66%和1.86%。这表明该模型可以用于预测南极磷虾AFPs的提取优化。本文的研究结果为南极磷虾AFPs的深入研究提供技术支撑。 展开更多
关键词 南极磷虾 抗冻蛋白 异性亲和吸附 响应面法 优化
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高亲和力抗膀胱癌单链抗体筛选及亲和力测定
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作者 晁开 黄华樑 郭霭光 《甘肃科学学报》 2009年第2期69-72,共4页
以膀胱癌细胞系BIU-87膜抗原为亲和底物,从抗膀胱癌噬菌体人源化单链抗体库中筛选出4个高亲和力改形单链抗体.ELISA结果和NH4SCN洗脱法数据显示,它们对膀胱癌细胞膜抗原的亲和活性显著高于鼠源单链抗体.同时以多种蛋白检验了其亲和作用... 以膀胱癌细胞系BIU-87膜抗原为亲和底物,从抗膀胱癌噬菌体人源化单链抗体库中筛选出4个高亲和力改形单链抗体.ELISA结果和NH4SCN洗脱法数据显示,它们对膀胱癌细胞膜抗原的亲和活性显著高于鼠源单链抗体.同时以多种蛋白检验了其亲和作用的特异性. 展开更多
关键词 抗膀胱癌单链抗体 异性亲和 筛选
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基于核酸适配体的差减荧光法检测鳗弧菌(Vibrio anguillarum) 被引量:1
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作者 范云庭 郑江 +3 位作者 薄军 江兴龙 刘慧敏 黄将远 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期296-302,共7页
鳗弧菌(Vibrio anguillarum)可感染鳗鲡、虹鳟和大菱鲆等多种水产动物,是水产养殖中的一种重要病原菌,对其进行快速检测是病害防控的前提和基础。利用鳗弧菌与其核酸适配体之间有较强的亲和特异性,首次建立了一种基于核酸适配体的可定... 鳗弧菌(Vibrio anguillarum)可感染鳗鲡、虹鳟和大菱鲆等多种水产动物,是水产养殖中的一种重要病原菌,对其进行快速检测是病害防控的前提和基础。利用鳗弧菌与其核酸适配体之间有较强的亲和特异性,首次建立了一种基于核酸适配体的可定量检测鳗弧菌的差减荧光法。该方法对鳗弧菌有较好的特异性,对鳗弧菌的检测荧光值是其他菌(溶藻弧菌、哈维氏弧菌、铜绿假单胞菌、变形假单胞菌、嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌和大肠杆菌)的4~11倍,对鳗弧菌的最低检测限为102CFU/mL,可用于102~108CFU/mL的范围内的定量检测。通过对不同盐度海水和鱼体组织样品进行加标回收检测,结果表明,回收率和相对标准偏差等指标均符合相应的标准,说明该检测方法可用于海水样品和水产动物组织中鳗弧菌的检测。 展开更多
关键词 鳗弧菌 核酸适配体 亲和特异性 荧光强度
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基于核酸适配体的胶体金比色法检测鳗弧菌 被引量:1
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作者 黄将远 郑江 +2 位作者 薄军 徐晓津 谭英 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第9期2195-2204,共10页
目的鳗弧菌(Vibrio anguillarum)可引起鲑鱼、鳗鲡、鲈鱼和牙鲆等多种水产养殖动物的疾病,是水产养殖中的一种重要病原菌,对其进行快速检测是确保水产养殖安全和食品安全所必需的。方法本文利用鳗弧菌与其核酸适配体之间较强的亲和力,... 目的鳗弧菌(Vibrio anguillarum)可引起鲑鱼、鳗鲡、鲈鱼和牙鲆等多种水产养殖动物的疾病,是水产养殖中的一种重要病原菌,对其进行快速检测是确保水产养殖安全和食品安全所必需的。方法本文利用鳗弧菌与其核酸适配体之间较强的亲和力,通过鳗弧菌夺取胶体金颗粒表面的核酸适配体,使胶体金溶液的吸光度发生变化,从而建立一种可定量检测鳗弧菌的方法。结果该方法对鳗弧菌的吸光度值显著高于对溶藻弧菌、铜绿假单胞菌、变形假单胞菌、嗜水气单胞菌和迟钝爱德华氏菌等非目标菌的吸光度值(P<0.01),并在1~105CFU/ml的检测范围内呈现较好的线性关系。用该方法对不同盐度和鱼体组织样品进行加标回收检测,结果显示回收率和相对标准偏差等指标都符合相应检测标准。结论该检测方法对鳗弧菌有较好的特异性,可用于水产品或食品中鳗弧菌的定量检测。 展开更多
关键词 鳗弧菌 核酸适配体 亲和特异性 吸光度
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人骨肉瘤组织血管特异性亲和肽的筛选和测序分析
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作者 李中齐 史占军 +1 位作者 吕海 金大地 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期627-627,共1页
关键词 人骨肉瘤组织血管异性亲和 筛选 测序
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Recent advances in identification of male specificity determinant and its function in S-RNase-mediated gametophytic self-incompatibility
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作者 张琳 谭晓风 乌云塔娜 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2006年第2期124-128,共5页
S-RNase-mediated gametophytic self-incompatibility (GSI) is controlled by a multiallelic S-locus at which two separate genes, the female (pistil) and male (pollen) specificity determinants, are tightly linked. T... S-RNase-mediated gametophytic self-incompatibility (GSI) is controlled by a multiallelic S-locus at which two separate genes, the female (pistil) and male (pollen) specificity determinants, are tightly linked. This review described both the identification of pollen specific F-box genes, SLF/SFBs, in Antirrhinum, Petunia and Prunus species and the demonstration of SLF/SFB as pollen determinant together with their functions in GSI response. Recent studies of how the pollen determinant functions in pollination reaction revealed that pollen determinant interacted with S-RNases in a non-allele-specific manner. It targeted all of the non-self S-RNases for ubiquitination through a functional SCF complex and subsequent degradation via 26S proteasome pathway in compatible reaction. It allows pollen tube to reach into the embryo sac and to finish double fertilization. In incompatible response, the intact self S-RNases were left to function as a cytotoxin that degrades self-pollen tube RNA, resulting in the cessation of pollen tube growth. 展开更多
关键词 Gametophytic self-incompatibility Pollen specific F-box genes Male determinant SCF complex 26S proteasome pathway
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Test on Indica-compatibility of Candidate Indicacompatible Japonica Lines in Rice
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作者 陈跃进 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第4期520-523,共4页
[Objective] The aim was to breed the indica-compatible japonica lines(ICJLs).[Method] The indica-compatibility of 5 candidate ICJLs were tested based on the pollen fertility and spikelet fertility of F1 hybrids with... [Objective] The aim was to breed the indica-compatible japonica lines(ICJLs).[Method] The indica-compatibility of 5 candidate ICJLs were tested based on the pollen fertility and spikelet fertility of F1 hybrids with 6 indica testers,6 japonica testers and 6 middle testers.[Result] Candidate ICJL G2123,G2417,G2410 and G3005 were grouped into the exceptionally(Specific)indica-compatible lines based on their high indica-compatibility and low japonica-compatibility.Candidate ICJL G2615 was grouped into the non-compatible lines on their low indica-compatibility and low japonica-compatibility.[Conclusion] The testers,fertility identification standards,test methods of pollen fertility and spikelet fertility were discussed when the compatibility of CICJLs was tested.The reason of the indica-compatibility in G2417 was analyzed. 展开更多
关键词 indica-compatible japonica lines indica-compatibility Pollen fertility Spikelet fertility Exceptionally indica-compatible genes
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一种基于配体肽的CRP荧光检测探针的研制
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作者 王思雅 韩雨灏 +4 位作者 李针保 张婷婷 梁佳欣 林卉丰 张淑华 《生物技术进展》 2022年第3期405-410,共6页
C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)是反映机体炎症的有效标志物,早期检测是判断炎症相关疾病的关键,因此,研制CRP新型检测制剂具有重要意义。利用噬菌体表面展示技术对CRP特异性亲和配体进行了筛选,采用固相肽合成技术对目标配体进行... C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)是反映机体炎症的有效标志物,早期检测是判断炎症相关疾病的关键,因此,研制CRP新型检测制剂具有重要意义。利用噬菌体表面展示技术对CRP特异性亲和配体进行了筛选,采用固相肽合成技术对目标配体进行了合成,并经生物标记、高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析及质谱(mass spectrometry,MS)鉴定,成功制得检测CRP的荧光探针。经3轮筛选、ELISA检测、重组噬菌体测序及序列比对后得到1个目标配体肽:S-P-H-N-R-S-N-L-V-Q-E-L;经肽合成及生物标记获得1种CRP荧光探针:FITC-(Acp)-S-P-H-N-R-S-N-L-V-Q-E-L。研究结果为CRP的有效检测提供了一种新型制剂。 展开更多
关键词 C反应蛋白 噬菌体表面展示技术 异性亲和配体 酶联免疫测定分析 荧光探针
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基于磁性纳米颗粒和金纳米粒子构建DNA电化学生物传感技术 被引量:3
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作者 王小兰 郑静 +3 位作者 陈琛 汤亚泥 张帆 何品刚 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期477-480,共4页
本文构建了一种基于纳米粒子、茎环DNA和丝网印刷电极(SPCE)的电化学生物传感技术用于乳腺癌基因的快速、灵敏检测。该传感技术中,探针DNA的两端分别标记了巯基和生物素,巯基用于与金纳米粒子(AuNPs)作用,生物素用于与磁性纳米颗粒(MNPs... 本文构建了一种基于纳米粒子、茎环DNA和丝网印刷电极(SPCE)的电化学生物传感技术用于乳腺癌基因的快速、灵敏检测。该传感技术中,探针DNA的两端分别标记了巯基和生物素,巯基用于与金纳米粒子(AuNPs)作用,生物素用于与磁性纳米颗粒(MNPs)表面修饰的链酶亲和素作用以达到富集的目的,之后利用SPCE进行电化学检测。无目标DNA存在时,双标记DNA保持茎环结构,使得生物素分子很难和MNPs上的亲和素接触。一旦加入目标DNA,茎环结构打开,生物素得以与MNPs上的链霉亲和素发生特异性结合,形成的复合物(MNPs-DNA-AuNPs)通过磁性富集到SPCE表面,从而获得AuNPs的电化学信号。该DNA电化学生物传感对单碱基错配有良好的分辨能力,完全互补DNA的检出限为8.0×10-13 mol/L。 展开更多
关键词 本文构建了一种基于纳米粒子、茎环DNA和丝网印刷电极(SPCE)的电化学生物传感技术用于乳腺癌基因的快速、灵敏检测.该传感技术中 探针DNA的两端分别标记了巯基和生物素 巯基用于与金纳米粒子(AuNPs)作用 生物素用于与磁性纳米颗粒(MNPs)表面修饰的链酶亲和素作用以达到富集的目的 之后利用SPCE进行电化学检测.无目标DNA存在时 双标记DNA保持茎环结构 使得生物素分子很难和MNPs上的亲和素接触.一旦加入目标DNA 茎环结构打开 生物素得以与MNPs上的链霉亲和素发生异性结合 形成的复合物(MNPs-DNA-AuNPs)通过磁性富集到SPCE表面 从而获得AuNPs的电化学信号.该DNA电化学生物传感对单碱基错配有良好的分辨能力 完全互补DNA的检出限为8 0×10-13 mol L.本文构建了一种基于纳米粒子、茎环DNA和丝网印刷电极(SPCE)的电化学生物传感技术用于乳腺癌基因的快速、灵敏检测.该传感技术中 探针DNA的两端分别标记了巯基和生物素 巯基用于与金纳米粒子(AuNPs)作用 生物素用于与磁性纳米颗粒(MNPs)表面修饰的链酶亲和素作用以达到富集的目的 之后利用SPCE进行电化学检测.无目标DNA存在时 双标记DNA保持茎环结构 使得生物素分子很难和MNPs上的亲和素接触.一旦加入目标DNA 茎环结构打开 生物素得以与MNPs上的链霉亲和素发生异性结合 形成的复合物(MNPs-DNA-AuNPs)通过磁性富集到SPCE表面 从而获得AuNPs的电化学信号.该DNA电化学生物传感对单碱基错配有良好的分辨能力 完全互补DNA的检出限为8 0×10-13 mol L.磁性纳米颗粒 金纳米粒子 DNA 丝网印刷电极
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Affinity chromatography-dependent selection (ACDS)of genomic DNA fragments bound specifically to bacterial synthesized Myc/Myn proteins
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作者 SHI CAN PEI WANG +1 位作者 YONGJUN HU LIAN XU. (Oncogene Group, Laboratory of Molecular and Cellular Oncology, Shanghai Institute of Cell Biology, Chinese Academy of Sciences, 320 Yue-Yang Road, Shanghai 200031, China) 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 1995年第1期25-34,共10页
This paper describes an approach to seek for mouse c-Myc/Myn proteins-bound specific sequences among ge-nomic DNA. cDNA fragment of myn gene was obtained through RT-PCR technique from RNA of NIH3T3 cells. DNA fragment... This paper describes an approach to seek for mouse c-Myc/Myn proteins-bound specific sequences among ge-nomic DNA. cDNA fragment of myn gene was obtained through RT-PCR technique from RNA of NIH3T3 cells. DNA fragments encoding BR/HLH/LZ structure of Myc and Myn proteins were cloned in frame into pGEX-2T vec-tor respectively Fusion GST-Myc and GST-Myn synthe-sized in E.coli hosts showed affinity to CACGTG E-boxDNA and subsequently interacted with genomic fragments prepared through whole-genome-PCR. A PCR-assisted procedure which combines protein-DNA interaction and affinity chromatography was designed to enrich Myc/Myn bound DNA. At least two genomic DNA fragments ob- tained exhibit specifical binding capacity to Myc/Myn complex but not to GST alone. Significance of the work and of the technique itself as well as identification of the DNAs are discussed. 展开更多
关键词 Myc/Myn proteins ACDS genomic DNA binding
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