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β-受体激动剂类药物人工抗原合成方法研究进展
1
作者 孙晓亮 王晓茵 +4 位作者 方汉卿 宋翠平 赵思俊 曹旭敏 李木子 《中国动物检疫》 CAS 2024年第2期42-46,85,共6页
开展动物性食品中β-受体激动剂监测,对保障食品安全具有重要意义。免疫分析技术操作快速、灵敏度高、检测成本低,被广泛用于大批量畜禽产品的快速筛查。抗体特性是免疫检测的核心,而人工抗原合成的质量直接影响特异性抗体性能。本文主... 开展动物性食品中β-受体激动剂监测,对保障食品安全具有重要意义。免疫分析技术操作快速、灵敏度高、检测成本低,被广泛用于大批量畜禽产品的快速筛查。抗体特性是免疫检测的核心,而人工抗原合成的质量直接影响特异性抗体性能。本文主要综述了碳二亚胺法、活泼酯法、混合酸酐法、重氮化法、戊二醛法等β-受体激动剂类药物人工抗原合成方法,以及紫外光谱法、核磁共振法等人工抗原鉴定方法,以期为免疫分析等相关工作研究提供参考。 展开更多
关键词 β-受体激动剂 免疫分析 人工抗原 合成
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乙基香兰素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗体的制备
2
作者 赵银丽 陈盼盼 +2 位作者 王金荣 段二珍 甘丽平 《河南农业科学》 北大核心 2024年第6期173-180,共8页
为研究检测乙基香兰素(EV)的免疫学方法,采用活性酯(AE)和混合酸酐(MA)2种方法,将乙基香草酸(EVA)与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备乙基香兰素人工免疫抗原BSA-EV(AE)和BSA-EV(MA),并采用紫外扫描(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)对人工抗原进行... 为研究检测乙基香兰素(EV)的免疫学方法,采用活性酯(AE)和混合酸酐(MA)2种方法,将乙基香草酸(EVA)与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备乙基香兰素人工免疫抗原BSA-EV(AE)和BSA-EV(MA),并采用紫外扫描(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)对人工抗原进行鉴定。将BSA-EV(AE)和BSA-EV(MA)分别免疫BALB/c小鼠,3免后10 d断尾采血并分离血清制备鼠源多克隆抗体。采用间接ELISA法测定血清抗体效价,间接竞争ELISA法测定血清抗体敏感性和特异性。结果显示,乙基香兰素人工抗原制备成功,BSA-EV(AE)和BSA-EV(MA)的偶联比分别为1∶2.92和1∶37.95。BSA-EV(AE)免疫组3号血清效价最高为1∶51 200,对EV的半数抑制浓度(IC_(50))为173.78μg/L,线性范围为14.79~2 041.74μg/L。BSA-EV(MA)免疫组1号血清效价最高为1∶102 400,对EV的IC_(50)为617.00μg/L,线性范围为42.66~8 709.64μg/L。2个免疫组的血清抗体与香兰素、甲基香兰素、麦芽酚、乙基麦芽酚、BSA、鸡卵清蛋白(OVA)的交叉反应率均小于1%。综上,人工抗原BSA-EV合成成功,并成功制备了对EV灵敏特异的鼠源多克隆抗体。 展开更多
关键词 乙基香兰素 人工抗原 活性酯法 混合酸酐法 多克隆抗体 间接竞争ELISA
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抗球虫药的人工抗原合成及免疫分析方法研究进展
3
作者 吴佳蓓 田恒旗 +5 位作者 胡骁飞 孙亚宁 邢云瑞 王琳 王成宾 王耀 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期347-355,共9页
抗球虫药在畜禽业应用广泛,但不合理使用会导致其在动物性食品中残留超标,对人类健康造成威胁。近年来,食品安全监督抽检中抗球虫药残留超标时有发生,因此,实现动物性食品中抗球虫药残留的高效快速检测,有利于兽药残留的有效监管。在众... 抗球虫药在畜禽业应用广泛,但不合理使用会导致其在动物性食品中残留超标,对人类健康造成威胁。近年来,食品安全监督抽检中抗球虫药残留超标时有发生,因此,实现动物性食品中抗球虫药残留的高效快速检测,有利于兽药残留的有效监管。在众多残留检测方法中,免疫分析方法具有灵敏度高、特异性强,操作简单等优点,适用于大批量样品的现场快速检测。该文综述了抗球虫药人工抗原的合成方法,并对其免疫分析方法进行归纳总结,以期为开发更高效的抗球虫药残留分析方法提供参考。 展开更多
关键词 抗球虫药 人工抗原 免疫分析 研究进展
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多菌灵人工抗原的合成及其鼠源性多克隆抗体的制备 被引量：1
4
作者 张宇彤 李洋洋 +1 位作者 郑佳慧 艾金霞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期163-167,共5页
目的合成多菌灵人工抗原,制备多菌灵多克隆抗体并鉴定其特性。方法利用混合酸酐法引入羧基制备多菌灵半抗原。将小分子半抗原与大分子载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成多菌灵人工抗原和包被抗原,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SD... 目的合成多菌灵人工抗原,制备多菌灵多克隆抗体并鉴定其特性。方法利用混合酸酐法引入羧基制备多菌灵半抗原。将小分子半抗原与大分子载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成多菌灵人工抗原和包被抗原,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对人工抗原进行鉴定。用制备的人工抗原免疫小鼠获得抗多菌灵多克隆抗体,利用间接ELISA对抗体效价以及特异性进行测定。结果成功制备多菌灵人工抗原。免疫小鼠后获得的抗体效价可达1:12800。抗体对多菌灵的半数抑制剂量(IC_(50))为0.107μg/mL,且与苯菌灵、噻菌灵的交叉反应率均<1%。结论成功获得高敏感性、高特异性的多克隆抗体,为多菌灵残留快速检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 多菌灵 人工抗原 多克隆抗体
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十氯酮人工抗原的制备及鉴定
5
作者 邓湘波 曹滂 +2 位作者 贺伟 袁志鹰 贺燕云 《食品工程》 2023年第3期31-34,共4页
为制备及鉴定十氯酮(Chlordecone)的抗体,利用羰基二咪唑(CDI)法将十氯酮还原产物与血蓝蛋白(KLH)及牛血清白蛋白(BSA)的氨基偶联,制备出人工免疫原CD-KLH和人工检测抗原CDBSA,并采用傅里叶红外光谱对人工抗原进行鉴定。用CD-KLH以腹腔... 为制备及鉴定十氯酮(Chlordecone)的抗体,利用羰基二咪唑(CDI)法将十氯酮还原产物与血蓝蛋白(KLH)及牛血清白蛋白(BSA)的氨基偶联,制备出人工免疫原CD-KLH和人工检测抗原CDBSA,并采用傅里叶红外光谱对人工抗原进行鉴定。用CD-KLH以腹腔皮下多点免疫注射的方式免疫BALB/c小鼠,断尾采血制备鼠源多克隆抗体血清。ELISA测定血清效价,间接竞争ELISA测定血清敏感性及特异性。结果显示,十氯酮鼠源多克隆抗体效价达10 000。确定了ELISA方法包被抗原与十氯酮抗体的最佳质量浓度分别为10μg/mL和25μg/mL,十氯酮间接竞争ELISA试验结果表明,十氯酮最佳线性检测限为2.5μg/mL~40μg/mL,最低检测限达0.625μg/mL,与BSA、KLH交叉反应率均小于0.01%,低于常规气相色谱-电子捕获检测方法的检出限。 展开更多
关键词 十氯酮 抗体 人工抗原 酶联免疫
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半抗原的设计、修饰及人工抗原的制备 被引量：59
6
作者 宋娟 王榕妹 +2 位作者 王悦秋 唐雨榕 邓安平 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1211-1218,共8页
制备具有良好免疫原性的人工抗原是建立测定小分子化合物的免疫分析方法的最关键步骤。本文对半抗原的设计、修饰(修饰位点的选择、修饰物的制备、连接臂的选择)、载体的选择、半抗原与载体的偶联(偶联方式、偶联条件、最佳偶联率)、人... 制备具有良好免疫原性的人工抗原是建立测定小分子化合物的免疫分析方法的最关键步骤。本文对半抗原的设计、修饰(修饰位点的选择、修饰物的制备、连接臂的选择)、载体的选择、半抗原与载体的偶联(偶联方式、偶联条件、最佳偶联率)、人工抗原的纯化与鉴定等方面作了详细的介绍。 展开更多
关键词 半抗原 人工抗原 设计 修饰 免疫分析 评述
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农药甲胺磷人工抗原的光谱鉴定研究 被引量：13
7
作者 赵肃清 蔡燕飞 +4 位作者 雷红涛 孙远明 黄晓钰 张厚瑞 朱振宇 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期207-209,共3页
对农药甲胺磷人工抗原BSAM的光谱进行了鉴定 ,鉴定结果表明 :人工抗原BSAM的紫外光谱图与原载体和半抗原的紫外光谱相比均发生变化 ;人工抗原BSAM的红外光谱图上具有与甲胺磷分子相似的P—O—C和PO特征吸收峰 ;人工抗原BSAM具有与标准... 对农药甲胺磷人工抗原BSAM的光谱进行了鉴定 ,鉴定结果表明 :人工抗原BSAM的紫外光谱图与原载体和半抗原的紫外光谱相比均发生变化 ;人工抗原BSAM的红外光谱图上具有与甲胺磷分子相似的P—O—C和PO特征吸收峰 ;人工抗原BSAM具有与标准甲胺磷一致的3 1 PNMR化学位移峰 ,磷钼蓝分光光度法测定人工抗原BSAM中的磷浓度后计算出人工抗原BSAM的偶联率为 1 1。4种光谱方法测定结果综合表明甲胺磷人工抗原BSAM合成成功。 展开更多
关键词 农药 甲胺磷 人工抗原 光谱法 鉴定 残留分析 免疫分析
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2甲4氯人工抗原的合成与鉴定 被引量：26
8
作者 施海燕 吴慧明 +1 位作者 程敬丽 朱国念 《农药学学报》 CAS CSCD 2004年第2期20-24,共5页
以除草剂2甲4氯(MCPA,简写为M)、氯化亚砜、氨基己酸和氨基丁酸等为起始原料,经两步化学反应分别合成了两种MCPA半抗原:6-(2-甲基-4-氯苯氧乙酰基)氨基己酸(MC)和4-(2-甲基-4-氯苯氧乙酰基)氨基丁酸(MB)。并通过碳二亚胺法和混合酸酐法... 以除草剂2甲4氯(MCPA,简写为M)、氯化亚砜、氨基己酸和氨基丁酸等为起始原料,经两步化学反应分别合成了两种MCPA半抗原:6-(2-甲基-4-氯苯氧乙酰基)氨基己酸(MC)和4-(2-甲基-4-氯苯氧乙酰基)氨基丁酸(MB)。并通过碳二亚胺法和混合酸酐法将MCPA、MC和MB分别与载体蛋白(BSA、OVA)偶联制备了2甲4氯的免疫抗原和包被抗原。再将M-BSA、MC-BSA和MB-BSA分别免疫新西兰大白兔获得了3种抗2甲4氯的多克隆抗体:抗M-BSA抗体(M-Ab)、抗MC-BSA抗体(MC-Ab)和抗MB-BSA抗体(MB-Ab),当相应的包被抗原浓度均为4μg/mL时,相应的冻干粉效价分别为1.0×106,1.2×106和2.0×106。在同源反应中,仅M-Ab适用于2甲4氯的残留检测,其线性浓度范围为0.01～10mg/L(IC50为1.3mg/L,MC-Ab和MB-Ab均大于50mg/L),最低检测限为0.01mg/L。研究结果为进一步研制2甲4氯快速检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 2甲4氯 半抗原 人工抗原 合成
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甲基对硫磷人工抗原的合成与鉴定 被引量：32
9
作者 贾明宏 钱传范 +2 位作者 韩丽君 李成文 张冰 《农药学学报》 CAS CSCD 2003年第2期22-32,共11页
根据甲基对硫磷的结构特征 ,分别从甲基对硫磷的硝基一端或磷酸酯基甲氧基一端引入一定长度的间隔臂和活性基团 ,设计并合成了 4种结构的半抗原 ;针对各种半抗原所带活性基团的性质 ,通过多种方法制备了与不同的载体蛋白偶联的人工抗原... 根据甲基对硫磷的结构特征 ,分别从甲基对硫磷的硝基一端或磷酸酯基甲氧基一端引入一定长度的间隔臂和活性基团 ,设计并合成了 4种结构的半抗原 ;针对各种半抗原所带活性基团的性质 ,通过多种方法制备了与不同的载体蛋白偶联的人工抗原。进行动物免疫后 。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附分析 甲基对硫磷 人工抗原
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克百威人工抗原的合成与鉴定 被引量：34
10
作者 朱国念 吴银良 程敬丽 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期47-53,共7页
以 2 ,3-二氢 - 2 ,2 -二甲基 - 7-苯并呋喃酚为反应原料 ,在通光条件下合成了 2 ,3-二氢 - 2 ,2 -二甲基 - 7-苯并呋喃基氯甲酸酯 .然后 ,以其作为反应原料与氨基已酸或氨基丁酸反应 ,在不同条件下合成了具有羧基的两种活性半抗原 6- [... 以 2 ,3-二氢 - 2 ,2 -二甲基 - 7-苯并呋喃酚为反应原料 ,在通光条件下合成了 2 ,3-二氢 - 2 ,2 -二甲基 - 7-苯并呋喃基氯甲酸酯 .然后 ,以其作为反应原料与氨基已酸或氨基丁酸反应 ,在不同条件下合成了具有羧基的两种活性半抗原 6- [〔(2 ,3-二氢 - 2 ,2 -二甲基 - 7-苯并呋喃基氧 )羰基〕氨基 ]已酸 (BFNH)和4 - [〔(2 ,3-二氢 - 2 ,2 -二甲基 - 7-苯并呋喃基氧 )羰基〕氨基 ]丁酸 (BFNB) .半抗原和牛血清蛋白 (BSA)经碳二亚胺法偶联得到了其免疫原 ,BFNH- BSA和 BFNB- BSA的结合比分别为 10∶ 1和 13∶ 1,同时利用混合酸酐法和卵清蛋白经偶联得到包被抗原 ,BFNH- OVA和 BFNB- OVA的结合比分别为 4∶ 1和3∶ 展开更多
关键词 克百威 半抗原 人工抗原 合成 鉴定 免疫分析 农药残留
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农药人工抗原合成的研究进展 被引量：40
11
作者 赵肃清 孙远明 +1 位作者 乐学义 黄晓钰 《农药》 CAS 北大核心 2002年第3期9-11,共3页
综述了农药人工抗原合成、鉴定。
关键词 研究进展 农药 人工抗原 合成
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甲基对硫磷人工抗原的合成及鉴定 被引量：19
12
作者 王刚垛 马兆扬 +1 位作者 鱼涛 何凤生 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期69-70,共2页
为了合成甲基对硫磷(M1605)人工抗原,用醋酸-锌粉-盐酸还原甲基对硫磷,制备氨基甲基对硫磷,重氮化法使氨基甲基对硫磷与牛血清白蛋白(BSA)及中国鲎血蓝蛋白(TTH)偶合,合成人工抗原M1605-BSA、M1605-TTH。M1605-BSA免疫新西兰兔10周后,... 为了合成甲基对硫磷(M1605)人工抗原,用醋酸-锌粉-盐酸还原甲基对硫磷,制备氨基甲基对硫磷,重氮化法使氨基甲基对硫磷与牛血清白蛋白(BSA)及中国鲎血蓝蛋白(TTH)偶合,合成人工抗原M1605-BSA、M1605-TTH。M1605-BSA免疫新西兰兔10周后,双向琼脂扩散试验和间接ELISA检测,证明得到了高价且具有较好特异性的多抗血清,成功地合成了甲基对硫磷人工抗原,为其免疫分析方法的建立提供了条件。 展开更多
关键词 甲基对硫磷 人工抗原 多抗血清 合成 鉴定
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西马特罗人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备 被引量：16
13
作者 职爱民 刘庆堂 +5 位作者 李青梅 杨苏珍 胡骁飞 柴书军 邓瑞广 张改平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期97-101,共5页
拟合成并鉴定西马特罗(Cimaterol,CIM)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源CIM多克隆抗血清。通过重氮化方法将西马特罗偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫抗原BSA-CIM和包被抗原OVA-CIM,并采用紫外分光光度法和SDS-... 拟合成并鉴定西马特罗(Cimaterol,CIM)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源CIM多克隆抗血清。通过重氮化方法将西马特罗偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫抗原BSA-CIM和包被抗原OVA-CIM,并采用紫外分光光度法和SDS-PAGE进行了鉴定。结果表明,半抗原CIM和载体蛋白偶联成功。动物免疫试验结果显示,6只小鼠效价均达1×10-3以上,且4号小鼠多抗血清抗CIM的IC50为86.9ng/mL,表明成功获得了高效价、特异性好、亲和力高的的鼠源抗CIM多抗血清。 展开更多
关键词 西马特罗 人工抗原 合成 多抗血情
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甲胺磷人工抗原的合成和鉴定(英文) 被引量：12
14
作者 孙远明 赵肃清 +2 位作者 黄晓钰 雷红涛 张春艳 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期163-166,共4页
目的 合成和鉴定甲胺磷人工抗原。方法 用磷酸化方法偶联氧、硫二甲基硫代磷酚氯到牛血清蛋白上,然后做一系列的实验,如:测定磷、紫外、31P核磁共振光谱和兔疫小鼠等。结果 人工抗原的偶联比是16,人工抗原的紫外光谱图与牛血清蛋白质相... 目的 合成和鉴定甲胺磷人工抗原。方法 用磷酸化方法偶联氧、硫二甲基硫代磷酚氯到牛血清蛋白上,然后做一系列的实验,如:测定磷、紫外、31P核磁共振光谱和兔疫小鼠等。结果 人工抗原的偶联比是16,人工抗原的紫外光谱图与牛血清蛋白质相比发生改变,人工抗原和标准甲胺磷的31P核磁共振光谱具有相同的化学位移峰,被免疫的小鼠产生了抗甲胺磷的抗体。结论 甲胺磷人工抗原合成成功,为其免疫测定方法的建立提供了条件。 展开更多
关键词 甲胺磷 人工抗原 合成 鉴定 免疫测定方法
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EDC法制备黄曲霉毒素B_1人工抗原的研究 被引量：21
15
作者 江湖 熊勇华 +1 位作者 许杨 黄增德 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第7期125-128,共4页
本研究采用EDC法制备了黄曲霉毒素B1人工抗原,通过TLC与ELISA对制备过程监控,确定了最佳的肟化反应时间与偶联反应时间。同时,就黄曲霉毒B1与牛血清白蛋白的起始摩尔比对偶联产物中这两物质摩尔比的影响进行了研究。结果显示,在25℃肟... 本研究采用EDC法制备了黄曲霉毒素B1人工抗原,通过TLC与ELISA对制备过程监控,确定了最佳的肟化反应时间与偶联反应时间。同时,就黄曲霉毒B1与牛血清白蛋白的起始摩尔比对偶联产物中这两物质摩尔比的影响进行了研究。结果显示,在25℃肟化反应24h、偶联反应24h,当黄曲霉毒素B1与牛血清白蛋白的起始摩尔比为30:1时,得到了黄曲霉毒素B1与牛血清白蛋白的摩尔比为5:1的黄曲霉毒素B1人工抗原。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 人工抗原 EDC 肟化
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吡虫啉人工抗原的合成与鉴定 被引量：15
16
作者 朱国念 桂文君 +2 位作者 郑尊涛 程敬丽 吴刚 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期511-515,共5页
以吡虫啉原药与β-巯基丙酸为起始原料,在碱性条件下反应,合成了半抗原{1-[6-(2-羧基乙硫基)-3-吡啶基甲基]-N-硝基亚咪唑烷-2-叉胺}。利用该半抗原与牛血清蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联得到了人工抗原,经免疫动物后,获得了高效价的... 以吡虫啉原药与β-巯基丙酸为起始原料,在碱性条件下反应,合成了半抗原{1-[6-(2-羧基乙硫基)-3-吡啶基甲基]-N-硝基亚咪唑烷-2-叉胺}。利用该半抗原与牛血清蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联得到了人工抗原,经免疫动物后,获得了高效价的特异性多克隆抗体,抗血清效价为 2.56×104。经酶联免疫反应(ELISA)测定,吡虫啉对抗体的抑制中浓度(IC50)为 20.7 μg·L-1,最低检测限(IC20 )为 1.1 μg·L-1,检测范围在 1～1 000 μg·L-1内线性关系较好,吡虫啉结构类似物交叉反应率均小于 1.4%。 展开更多
关键词 效价 酶联免疫反应 卵清白蛋白 交叉反应 ELISA 抗体 特异性 吡虫啉 人工抗原 免疫动物
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甲胺磷衍生物的合成及人工抗原的制备 被引量：8
17
作者 肖治理 孙远明 +2 位作者 张木明 吴青 雷红涛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第12期377-380,共4页
O,S-二甲基硫代磷酰氯与β-丙氨酸反应,得到一种甲胺磷的结构衍生物,经薄层层析和1HNMR鉴定,推测预期产物生成。分别采用活泼酯法和混合酸酐法将产物与BSA、OVA偶联制备了人工抗原MZB和MGO,通过紫外光谱鉴定证明偶联成功。用TNBS比色法... O,S-二甲基硫代磷酰氯与β-丙氨酸反应,得到一种甲胺磷的结构衍生物,经薄层层析和1HNMR鉴定,推测预期产物生成。分别采用活泼酯法和混合酸酐法将产物与BSA、OVA偶联制备了人工抗原MZB和MGO,通过紫外光谱鉴定证明偶联成功。用TNBS比色法测定了MZB、MGO与载体蛋白的克分子结合比,分别为16:1和9:1。以MZB为免疫原免疫Balb/c小鼠,以MGO为包被抗原对小鼠血清进行间接竞争ELISA分析表明,小鼠经免疫后产生了针对甲胺磷的特异性抗体,抗血清效价为51:200,从而进一步证明抗原合成成功。本方法简便易行,为研究建立甲胺磷的免疫分析方法奠定了基础。 展开更多
关键词 甲胺磷 衍生 人工抗原 抗血清 免疫分析
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二氯喹啉酸人工抗原的合成与鉴定 被引量：9
18
作者 朱国念 毛黎娟 +2 位作者 施海燕 黄雅丽 程敬丽 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期86-90,共5页
以除草剂二氯喹啉酸(quinclorac,Q)、氯化亚砜、氨基己酸和氨基丁酸等为起始原料,经2步化学反应分别合成了2种二氯喹啉酸半抗原:6-(3,7-二氯-8-喹啉甲酰基)氨基己酸(QC)和4-(3,7-二氯-8-喹啉甲酰基)氨基丁酸(QB)。并通过碳化二亚胺法和... 以除草剂二氯喹啉酸(quinclorac,Q)、氯化亚砜、氨基己酸和氨基丁酸等为起始原料,经2步化学反应分别合成了2种二氯喹啉酸半抗原:6-(3,7-二氯-8-喹啉甲酰基)氨基己酸(QC)和4-(3,7-二氯-8-喹啉甲酰基)氨基丁酸(QB)。并通过碳化二亚胺法和混合酸酐法将Q、QC和QB分别与载体蛋白(BSA、OVA)偶联制备了二氯喹啉酸的免疫抗原和包被抗原。再将Q-BSA、QC-BSA和QB-BSA分别免疫新西兰大白兔获得了3种抗二氯喹啉酸的多克隆抗体:抗Q-BSA抗体(Q-Ab)、抗QC-BSA抗体(QC-Ab)和抗QB-BSA抗体(QB-Ab),当相应的包被抗原浓度均为4μg·ml-1时,相应的冻干粉效价分别为2×103,1.2×106和1.6×106。由于Q-Ab效价偏低,不适合用于检测。采用同源间接ELISA竞争法测定时,其他2种抗体(QC-Ab、QB-Ab)的抑制中浓度(IC50)均大于50mg·L-1,检测灵敏度也较低。因此本文对异源间接竞争ELISA法进行了研究,结果表明,异源反应的检测灵敏度高于同源反应,其中QB-Ab的IC50为0.4mg·L-1;最低检测限为0.006mg·L-1。 展开更多
关键词 QC OC 人工抗原 抗体 效价 二氯喹啉酸 氨基丁酸 BSA 间接ELISA 浓度
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鬼臼毒素人工抗原的合成与鉴定(英文) 被引量：9
19
作者 徐敦明 余向阳 +4 位作者 刘映前 冯俊涛 马俊卿 刘贤进 张兴 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期518-524,共7页
目的　合成和鉴定鬼臼毒素人工抗原,以获取具有特异性和高度亲和性的鬼臼毒素多克隆抗体。方法通过酯化反应合成半抗原鬼臼毒素半琥珀酰酯;利用活泼酯法和混合酸酐法偶联成免疫和包被所需的人工抗原;按常规免疫法,从免疫的兔血清中获取... 目的　合成和鉴定鬼臼毒素人工抗原,以获取具有特异性和高度亲和性的鬼臼毒素多克隆抗体。方法通过酯化反应合成半抗原鬼臼毒素半琥珀酰酯;利用活泼酯法和混合酸酐法偶联成免疫和包被所需的人工抗原;按常规免疫法,从免疫的兔血清中获取高效的抗鬼臼毒素抗体。结果　质谱、核磁共振和红外分析表明两种不同方法均成功地合成了半抗原鬼臼毒素半琥珀酰酯。人工抗原的偶联比因载体蛋白和合成方法的不同而有所不同,Hapten- BSA1为88. 6,Hapten BSA2为40. 3,Hapten OVA1为17 8和Hapten- OVA2为54 2。利用兔M4440产生的抗血清建立的ELISA方法对鬼臼毒素的最低检测浓度为0 .12μg·mL-1,半数抑制浓度为2. 21μg·mL-1。结论　成功地合成了鬼臼毒素人工抗原,并获得了抗鬼臼毒素抗体,为鬼臼毒素免疫分析方法的进一步研究提供了条件。 展开更多
关键词 鬼臼毒素 人工抗原 半抗原 酶联免疫吸附分析 酯化反应 鉴定方法 抗体
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有机磷杀虫剂毒死蜱人工抗原的合成与鉴定 被引量：25
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作者 朱国念 吴刚 吴慧明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期657-662,共6页
以杀虫剂毒死蜱为起始原料 ,在碱性条件下与 3 巯基丙酸反应 ,合成了半抗原O ,O 二乙基 O [3,5 二氯 6 (2 羧乙基 )硫代 2 吡啶基 ]硫逐磷酸酯 (简称AR) ,然后分别与牛血清白蛋白 (BSA)和卵清白蛋白 (OVA) ,经过碳二亚胺法和混合酸... 以杀虫剂毒死蜱为起始原料 ,在碱性条件下与 3 巯基丙酸反应 ,合成了半抗原O ,O 二乙基 O [3,5 二氯 6 (2 羧乙基 )硫代 2 吡啶基 ]硫逐磷酸酯 (简称AR) ,然后分别与牛血清白蛋白 (BSA)和卵清白蛋白 (OVA) ,经过碳二亚胺法和混合酸酐法偶联反应得到了免疫抗原和包被抗原 ,其结合比分别为 39∶1和 13∶1。用所得的免疫抗原免疫兔子获得了效价较高的多克隆抗体。 展开更多
关键词 有机磷杀虫剂 毒死蜱 人工抗原 合成鉴定 免疫抗原 包被抗原 结合比 多克隆抗体
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