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人工免疫系统中人工抗原提呈细胞的设计 被引量：1
1
作者 杨鹤 郑幸 梁意文 《小型微型计算机系统》 CSCD 北大核心 2012年第5期1121-1125,共5页
反向选择模型是人工免疫系统中的经典模型,但存在训练代价高、覆盖率低的问题.危险理论模型是人工免疫系统中新引进的模型,在降低训练代价,提高覆盖率上具有优势.建立人工免疫危险理论模型必须解决的关键问题之一是:在保持人工免疫系统... 反向选择模型是人工免疫系统中的经典模型,但存在训练代价高、覆盖率低的问题.危险理论模型是人工免疫系统中新引进的模型,在降低训练代价,提高覆盖率上具有优势.建立人工免疫危险理论模型必须解决的关键问题之一是:在保持人工免疫系统自适应特征的前提下,设计人工抗原提呈细胞.本文从抗原提呈细胞的生物学原理出发,设计了人工免疫系统中的人工抗原提呈细胞,给出单个人工抗原提呈细胞的结构、细胞上Toll样受体的结构,以及人工抗原提呈细胞群体的结构;设计了人工抗原提呈细胞群体的生命周期.初步的实验结果证明所设计的人工抗原提呈细胞具有自适应发现恶意软件的能力. 展开更多
关键词 人工免疫系统 危险理论 人工抗原提呈细胞 恶意软件检测
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杀伤性人工抗原提呈细胞治疗小鼠皮肤移植排斥及其对治疗鼠整体免疫功能的影响 被引量：2
2
作者 李妙晨 王伟 +4 位作者 李晓娥 房坤 吴优 顾宁 沈传来 《东南大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第4期496-501,共6页
目的:研究杀伤性人工抗原提呈细胞(Ka APC)治疗小鼠皮肤移植排斥的效果及其对治疗鼠整体免疫功能的影响。方法:利用可生物降解的聚乳酸-羟基乙酸共聚物微米球做载体,共价吸附H-2Kb抗原和anti-Fas等负性调节分子,制备针对同种反应性T细... 目的:研究杀伤性人工抗原提呈细胞(Ka APC)治疗小鼠皮肤移植排斥的效果及其对治疗鼠整体免疫功能的影响。方法:利用可生物降解的聚乳酸-羟基乙酸共聚物微米球做载体,共价吸附H-2Kb抗原和anti-Fas等负性调节分子,制备针对同种反应性T细胞的特异性Ka APC,治疗以C57BL/6和BALB/c为供受对的小鼠皮肤移植排斥,并利用混合淋巴细胞培养观察治疗鼠对第三方供体的同种反应能力以及通过载瘤实验观察治疗鼠的抗肿瘤能力等,以论证Ka APC治疗对机体整体免疫功能的影响,帮助筛选有效治疗方案。结果:成功制备Ka APC,FACS验证其有正确的表型;Ka APC输注使皮肤移植物的存活时间明显延长,P<0.000 1,但并未显著损伤治疗鼠T细胞对第三方供体鼠脾细胞的同种增殖能力,也并未显著损伤治疗鼠的抗肿瘤能力。结论:Ka APC可以抑制小鼠皮肤移植排斥并对治疗鼠的整体免疫功能无明显损伤。 展开更多
关键词 杀伤性人工抗原提呈细胞 聚乳酸-羟基乙酸 同种反应性T细胞 小鼠
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人工抗原提呈细胞体外激活肝癌CD8^+T细胞 被引量：1
3
作者 夏士珊 向晓星 龚卫娟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期148-153,共6页
目的:探讨人工抗原提呈细胞(artificial antigen presenting cell,aAPC)K32/4-IBBL/CD86对肝癌CD8+T细胞的活化作用。方法:磁珠法分选HLA-A 2阳性肝癌患者外周血CD8+T细胞,aAPC与CD8+T细胞按不同比例(1∶1、1∶2、1∶3)混合培养,诱导CT... 目的:探讨人工抗原提呈细胞(artificial antigen presenting cell,aAPC)K32/4-IBBL/CD86对肝癌CD8+T细胞的活化作用。方法:磁珠法分选HLA-A 2阳性肝癌患者外周血CD8+T细胞,aAPC与CD8+T细胞按不同比例(1∶1、1∶2、1∶3)混合培养,诱导CTL。锥虫蓝拒染法测定CTL的生长曲线,MTS/PMS法检测CTL的增殖,流式细胞术检测CTL分泌IFN-γ的能力,MTT法检测CTL对人肝癌细胞株BEL7402和自体肝癌细胞的杀伤作用。结果:肝癌患者外周血CD8+T细胞经aAPC作用后,增殖能力明显增强,按1∶1、1∶2、1∶3比例混合培养后第8天分别为(21.2±2.5)×105、(17.6±3.2)×105、(15.3±2.8)×105,明显高于对照组的(8.5±0.15)×105(P<0.01),混合培养后分泌IFN-γ的CTL比例分别为(26.2±1.91)%、(21.3±1.38)%、(18.6±1.20)%,明显高于对照组的(0.1±0.02)%(P<0.01)。aAPC活化的CTL对BEL7402细胞和自体肝癌细胞的杀伤率较对照组显著增强,按1∶3混合培养后得到的CTL对BEL7402细胞和自体肝癌细胞的杀伤率分别为(21.8±4.3)%和(25.6±3.6)%,明显高于对照组的(3.8±1.8)%和(3.8±2.0)%(P<0.01);效靶比为50∶1时,1∶1混合培养组CTL对BEL7402细胞的杀伤率(56.8±3.0)%和对自体肝癌细胞的杀伤率(64.8±4.2)%明显高于1∶2混合培养组的(44.3±2.6)%、(56.1±3.4)%和1∶3混合培养组的(38.9±4.7)%、(46.2±4.7)%(P<0.05)。结论:aAPC在体外可高效活化肝癌患者CD8+T细胞,诱导CTL分泌IFN-γ,且CTL对人肝癌细胞株BEL7402和自体肝癌细胞具有明显的杀伤作用。 展开更多
关键词 人工抗原提呈细胞 肝癌 CD8+T细胞 CTL IFN-Γ
原文传递
人工抗原提呈细胞联合香菇多糖诱导抗肿瘤免疫反应的研究 被引量：1
4
作者 汪礼敏 钱姝桐 +5 位作者 蔡玉星 马丽 万昕 宋世龙 裴纬亚 沈传来 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2019年第2期203-213,共11页
目的:探讨以生物材料为载体的多功能人工抗原提呈细胞(aAPCs)与香菇多糖联合应用在小鼠抗肿瘤中的协同效应。方法:用可生物降解的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)微球作载体,表面负载H-2Kb/TRP2二聚体以及CD28单抗,内部包裹IL-2以及CTLA-4... 目的:探讨以生物材料为载体的多功能人工抗原提呈细胞(aAPCs)与香菇多糖联合应用在小鼠抗肿瘤中的协同效应。方法:用可生物降解的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)微球作载体,表面负载H-2Kb/TRP2二聚体以及CD28单抗,内部包裹IL-2以及CTLA-4封闭性抗体,制备表面提呈与旁分泌功能相结合的aAPCs。对黑色素皮下瘤鼠进行3次aAPCs与中药免疫调节剂香菇多糖的联合给药,观察肿瘤生长和免疫反应。结果:该aAPCs与香菇多糖的联合应用能明显抑制移植瘤的生长,延长载瘤鼠的中位生存期,并使外周血、脾脏和肿瘤组织局部的T细胞和TRP2180-188表位特异性CTL细胞大量扩增,同时明显增强了治疗鼠体内NK细胞的杀瘤活性,并降低了Treg细胞的频率。与香菇多糖和aAPCs单独给药组相比,aAPCs与香菇多糖联合应用具有明显的协同作用,即中药的非特异性免疫辅助作用能协助和增强aAPCs的特异性主动免疫反应。结论:本研究首次提示了aAPCs与香菇多糖联合应用在抗肿瘤中的潜在价值,为肿瘤提供了新的免疫治疗策略。 展开更多
关键词 人工抗原提呈细胞 聚乳酸-羟基乙酸共聚物 香菇多糖 黑色素瘤 免疫治疗 小鼠
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特异性人工抗原提呈细胞体外激活CD19嵌合抗原受体T细胞的构建
5
作者 彭耀军 吴其艳 +2 位作者 刘鸿宇 赵健 危华锋 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期581-587,共7页
目的构建CD19特异性人工抗原提呈细胞(aAPC)用于体外激活扩增CD19嵌合抗原受体(CAR)修饰T细胞(CD19-CAR-T),并考察其杀伤效应。方法通过慢病毒介导的方法制备以NIH3T3为细胞骨架、表达共刺激分子CD86和/或CD137L的CD19特异性a APC(NIH3T... 目的构建CD19特异性人工抗原提呈细胞(aAPC)用于体外激活扩增CD19嵌合抗原受体(CAR)修饰T细胞(CD19-CAR-T),并考察其杀伤效应。方法通过慢病毒介导的方法制备以NIH3T3为细胞骨架、表达共刺激分子CD86和/或CD137L的CD19特异性a APC(NIH3T3-CD19/86、NIH3T3-CD19/86/137L)。采用照射的CD19特异性a APC与CD19-CAR-T细胞按一定比例混合培养激活扩增CD19-CAR-T细胞,台盼蓝染色法检测并绘制CD19-CAR-T细胞生长曲线;流式细胞术检测CD19-CAR-T细胞CAR表达变化及分化表型;生物发光细胞毒性法检测扩增的CD19-CAR-T细胞体外靶特异杀伤效应。结果流式检测结果显示NIH3T3-CD19/86和NIH3T3-CD19/86/137L细胞表面分别高表达CD19、CD86和/或CD137L分子;NIH3T3-CD19/86和NIH3T3-CD19/86/137L细胞都能够高效扩增CD19-CAR-T细胞,NIH3T3-CD19/86/137L细胞具有更好的扩增效应,其与CD19-CAR-T细胞混合培养14 d后,扩增的T细胞数量明显高于NIH3T3-CD19/86细胞组(P<0.05);同时,与刺激前相比NIH3T3-CD19/86和NIH3T3-CD19/86/137L细胞刺激扩增的T细胞中CD19-CAR-T细胞比例显著增加(P<0.05);扩增的CD19-CAR-T细胞具有靶特异杀伤效应,能够特异性杀伤CD19阳性靶细胞;流式检测显示NIH3T3-CD19/86/137L扩增的CD19-CAR-T细胞含有约20%作用中心记忆性T细胞。结论成功制备CD19特异性a APC,其可在体外特异性扩增功能性CD19-CAR-T细胞,为初步建立制备高质量临床级CD19-CART细胞的方法提供了技术支撑。 展开更多
关键词 人工抗原提呈细胞 CD19 嵌合抗原受体修饰T细胞 增殖 杀伤
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K562细胞为基础的人工抗原提呈细胞用于过继性免疫治疗的研究进展
6
作者 彭耀军 危华锋 赵健 《内蒙古医科大学学报》 2017年第2期185-190,共6页
过继性T细胞治疗是目前肿瘤免疫疗法中最具发展潜力的治疗方法之一。过继性T细胞治疗须首先在体外制备抗肿瘤T细胞,并选择性地扩增理想的T细胞亚群,其目的是在癌症病人体内重建针对肿瘤的特异性免疫反应,从而建立终身持久的免疫记忆。... 过继性T细胞治疗是目前肿瘤免疫疗法中最具发展潜力的治疗方法之一。过继性T细胞治疗须首先在体外制备抗肿瘤T细胞,并选择性地扩增理想的T细胞亚群,其目的是在癌症病人体内重建针对肿瘤的特异性免疫反应,从而建立终身持久的免疫记忆。本文就K562细胞为基础的aAPCs及其应用于过继性T细胞治疗的研究现状和前景进行综述。 展开更多
关键词 人工抗原提呈细胞 K562 过继性疗法 表型 扩增
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制备人工抗原提呈细胞促进NK细胞增殖和抗肿瘤效应的研究
7
作者 吴凌娟 张磊 +1 位作者 蔺广义 沈磊 《标记免疫分析与临床》 CAS 2018年第10期1556-1561,共6页
目的制备双表达CD86和4-1BBL的人工抗原提呈细胞,建立在体外大量的扩增具有较高杀伤活性的人NK细胞的有效方法。方法将表达CD86和4-1BBL的慢病毒感染K562细胞,制备成人工抗原提呈细胞(a APC),与人外周血单个核细胞(PBMC)共培养,使NK细... 目的制备双表达CD86和4-1BBL的人工抗原提呈细胞,建立在体外大量的扩增具有较高杀伤活性的人NK细胞的有效方法。方法将表达CD86和4-1BBL的慢病毒感染K562细胞,制备成人工抗原提呈细胞(a APC),与人外周血单个核细胞(PBMC)共培养,使NK细胞在体外大量扩增。结果在培养d15天时,细胞数量达到2. 7×1010个,CD3-CD56+细胞纯度达到99. 4%,细胞体外杀伤活性为96. 27±1. 27%;在小鼠肺癌模型中,治疗组比对照组肿瘤体积明显减小。结论成功制备了有效扩增NK细胞的人工抗原提呈细胞(a APC),建立了在体外高效扩增具有较高杀伤活性的NK细胞的有效方法,为肿瘤和慢性感染性疾病的过继细胞免疫治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 人工抗原提呈细胞(aAPC) CD86 4-1BBL NK细胞 高效扩增 杀伤活性
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PLGA人工抗原提呈细胞载体的制备 被引量：1
8
作者 邱俊 朱建明 +2 位作者 朱彤 郭晓东 杨美 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第13期2460-2462,共3页
目的:目前常用的载体材料,在体内很难降解,限制了其在体内的应用,本文通过用PLGA微球制备人工抗原提呈细胞(AAPC)载体,对其功能进行验证。希望此方法能弥补传统方法的不足。方法:将软脂酸偶联到亲和素上,然后按照传统的复乳法来制备PLG... 目的:目前常用的载体材料,在体内很难降解,限制了其在体内的应用,本文通过用PLGA微球制备人工抗原提呈细胞(AAPC)载体,对其功能进行验证。希望此方法能弥补传统方法的不足。方法:将软脂酸偶联到亲和素上,然后按照传统的复乳法来制备PLGA微球,并且通过使用荧光素(FITC)标记、生物素化的牛血清蛋白(BSA)对其功能进行验证。结果:通过该方法可以得到表面固定生物素的PLGA微球,并且证明软脂酸修饰并未影响到亲和素分子和生物素的结合,生物素化的BSA分子可以有效的结合到微球的表面。结论:PLGA微球表面很难引进合适的化学基团,导致其不能像聚苯乙烯微球那样通过化学反应来将亲和素分子固定在微球的表面上,通过将软脂酸偶联到亲和素分子上,可改变其表面很难引进合适的化学基团的不足,用其微球可用于制备AAPC载体。人工抗原提呈细胞是免疫学研究领域的新思路,可在基础免疫研究和临床治疗方面发挥较大的作用,但作为一门新兴技术,在制备、效果评价及应用方面需要逐渐完善和成熟,用PLGA微球为载体构建,弥补了磁珠、聚苯乙烯不能在体内降解的不足,且安全无毒,可供参考。 展开更多
关键词 PLGA 微球 人工抗原提呈细胞载体
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人MR1/IgG1Fc二聚体融合蛋白的构建、表达及功能检测
9
作者 赵桂华 龚业莉 翁秀芳 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期649-655,共7页
目的构建MR1/IgG1Fc融合蛋白杆状病毒表达载体并使其在昆虫细胞内表达获得MR1/IgG1Fc二聚体,制备人工抗原提呈细胞用于黏膜相关恒定T细胞(MAIT)反应性代谢物及MAIT细胞功能调控研究。方法从人外周血单个核细胞中扩增β2m编码基因。商业... 目的构建MR1/IgG1Fc融合蛋白杆状病毒表达载体并使其在昆虫细胞内表达获得MR1/IgG1Fc二聚体,制备人工抗原提呈细胞用于黏膜相关恒定T细胞(MAIT)反应性代谢物及MAIT细胞功能调控研究。方法从人外周血单个核细胞中扩增β2m编码基因。商业化合成MR1胞外段和IgG1Fc融合基因的全序列基因MR1/IgG1Fc,与β2m基因重组构建pFastBac^(TM)Dual+[β2m+MR1/IgG1Fc]表达载体;利用Bac-to-Bac昆虫表达系统表达MR1/IgG1Fc二聚体融合蛋白,并通过双抗体夹心ELISA、Western blot及流式细胞术进行检测。建立MR1/IgG1Fc二聚体加载的人工抗原提呈细胞(artificial antigen presenting cells,aAPCs),即MR1aAPCs,提呈大肠埃希菌(DH5α)来源的代谢物,与人外周血单个核细胞共培养,检测MAIT细胞的活化和增殖水平。结果经PCR及测序鉴定证实pFastBac^(TM)Dual+[β2m+MR1/IgG1Fc]载体中MR1/IgG1Fc与β2m具有正确序列。ELISA、Western blot及流式细胞术检测结果表明MR1/IgG1Fc二聚体在重组杆粒感染的Sf9细胞培养上清富集,具有正确构象。加载DH5α来源代谢物的MR1aAPCs能够促进MAIT细胞活化和增殖。结论成功构建pFastBac^(TM)Dual+[β2m+MR1/IgG1Fc]重组质粒,并在Sf9细胞中表达MR1/IgG1Fc二聚体,制备获得MR1aAPCs,为研究MAIT细胞反应性代谢物及MAIT细胞功能提供了新的工具。 展开更多
关键词 黏膜相关恒定T细胞 MR1/IgG1Fc二聚体 人工抗原提呈细胞 反应性代谢物
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