人工核酸酶用于基因组定点编辑的研究进展 被引量：4

1

作者 张殿宝 施萍 庞希宁 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第12期1634-1637,共4页

人工核酸酶(EN)技术,是利用设计并构建的核酸内切酶与靶DNA序列特异性结合,形成双链断裂(DSB),启动DNA修复通路,进行基因组定点编辑,目前已成功应用于多种细胞和生物体。

关键词 人工核酸酶 基因组定点修饰 锌指核酸酶(ZFN) 类转录因子效应物核酸酶(TALEN) CRISPPR CAS 人工大范围核酸酶

下载PDF 职称材料

作物改良领域人工核酸酶技术全球专利布局分析

2

作者 何湘琼 赵永江 +4 位作者 谭永华 田野 田文文 朱宁 潘卫东 《安徽农业科学》 CAS 2016年第23期72-75,共4页

利用德温特世界专利索引数据库(DWPI),分析作物改良领域人工核酸酶技术专利布局,揭示关键技术发展方向和趋势、技术分布区域、专利申请人情况、竞争对手情况以及各技术方向对应的技术功效分布,以期为我国研究者的技术研发和专利布局提... 利用德温特世界专利索引数据库(DWPI),分析作物改良领域人工核酸酶技术专利布局,揭示关键技术发展方向和趋势、技术分布区域、专利申请人情况、竞争对手情况以及各技术方向对应的技术功效分布,以期为我国研究者的技术研发和专利布局提供参考。 展开更多

关键词 人工核酸酶 基因编辑技术 作物改良 专利 布局

下载PDF 职称材料

高液相色谱在研究人工核酸酶中的应用

3

作者 何执静 朱彤阳 +1 位作者 任蕤 叶春 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期381-383,共3页

目的:用反相高效液相色谱梯度洗脱法测定了用Cu（Ⅱ）组氨酸配合物切割DNA-二核苷酸2’-脱氧腺嘌吟（3’→5’）-2’-脱氧腺嘌呤核苷酸的产物。方法:色谱柱Hypersil　BDS　C18　150mm×4.6mm;流动相为C:0.2mol·L-1磷酸二氢铵... 目的:用反相高效液相色谱梯度洗脱法测定了用Cu（Ⅱ）组氨酸配合物切割DNA-二核苷酸2’-脱氧腺嘌吟（3’→5’）-2’-脱氧腺嘌呤核苷酸的产物。方法:色谱柱Hypersil　BDS　C18　150mm×4.6mm;流动相为C:0.2mol·L-1磷酸二氢铵溶液（pH5.5）,B:甲醇-水（3:2）;流速:0.85mL·min-1;梯度为B:0 0→5min;B:0→50％　5→17min;B,50％→100％17→18min;B:100％19min 停止。紫外检测波长260nm。结果:在本文中,用HPLC检测可得到直接有效的数据。结论:本方法准确、灵敏。 展开更多

关键词 Cu(Ⅱ)组氨酸配合物 2′-脱氧腺嘌呤(3′→5′)-2′-脱氧腺嘌呤核苷酸 反相高效液相色谱 人工核酸酶 测定

下载PDF 职称材料

水稻作物改良领域的人工核酸酶技术专利分析

4

作者 崔依同 高佳琪 《中国科技信息》 2022年第22期17-19,共3页

本文针对在国计民生中占据重要地位的水稻领域,以当前逐步发展且具有巨大应用潜力的人工核酸酶技术在水稻领域的应用为主题进行了专利分析。该专利分析以全球专利申请量趋势、全球专利申请分布、申请人申请量及其主要技术分支占比为线索... 本文针对在国计民生中占据重要地位的水稻领域,以当前逐步发展且具有巨大应用潜力的人工核酸酶技术在水稻领域的应用为主题进行了专利分析。该专利分析以全球专利申请量趋势、全球专利申请分布、申请人申请量及其主要技术分支占比为线索,为国内相关企业及研究机构在水稻作物改良领域的人工核酸酶技术的研发和优化提供参考。 展开更多

关键词 作物改良 专利分析 人工核酸酶 申请量 全球专利 技术分支 申请人 国计民生

下载PDF 职称材料

人工核酸酶的设计和与核酸的相互作用 被引量：3

5

作者 张晶晶 邵莺 +4 位作者 韦丽 李英 盛欣 刘芳 陆国元 《中国科学（B辑）》 CSCD 北大核心 2009年第3期194-207,共14页

人工核酸酶在基因药物设计和分子生物学研究领域具有重要的科学意义,因此人工核酸酶的设计和酶模拟方面的研究引起了广泛关注并取得了重要进展.本文介绍近年来国内外学者和作者研究组在"双功能协同催化"、"双核协同催化&... 人工核酸酶在基因药物设计和分子生物学研究领域具有重要的科学意义,因此人工核酸酶的设计和酶模拟方面的研究引起了广泛关注并取得了重要进展.本文介绍近年来国内外学者和作者研究组在"双功能协同催化"、"双核协同催化"、"无金属催化"的人工核酸酶方面的研究进展,尤其是氮杂冠醚衍生物作为人工核酸酶与DNA相互作用的研究进展. 展开更多

关键词 人工核酸酶 DNA切割 无金属切割DNA 胍基 氮杂冠醚

原文传递

利用人工核酸酶构建基因编辑猪的研究进展 被引量：1

6

作者 金琴 王可品 赖良学 《生命科学》 CSCD 北大核心 2018年第9期955-966,共12页

猪不仅具有重要的农业生产价值,由于猪繁殖周期比灵长类动物短,产仔量多,以及猪器官大小、生理代谢过程和解剖结构,尤其是心血管系统及神经系统较啮齿类动物而言与人类更为接近,猪在生物医药领域也具有重要的用途。对猪基因组加以编辑,... 猪不仅具有重要的农业生产价值,由于猪繁殖周期比灵长类动物短,产仔量多,以及猪器官大小、生理代谢过程和解剖结构,尤其是心血管系统及神经系统较啮齿类动物而言与人类更为接近,猪在生物医药领域也具有重要的用途。对猪基因组加以编辑,在农业上可以加速高生产性能猪新品种的培育;在生命科学领域可用于基因功能、胚胎发育及代谢过程等基础研究;在医学上,可提供与人体更为匹配的异种移植器官,可作为更能准确模拟人类疾病的大动物模型,用于新的药物和治疗手段的开发。人工核酸酶的出现,使基因编辑效率得到大大提高,克服了原有的基因编辑猪制备困难、成功率极低的问题。人工核酸酶技术不仅在猪上实现了高效而又精确的基因编辑,并且使各种基因突变模式,如基因敲除、基因敲入、基因组无痕点突变、多基因编辑、体内直接基因编辑以及条件性基因编辑等都成为可能。现将对利用不同人工核酸酶技术结合不同的基因编辑策略建立基因编辑猪的研究新进展进行综述。 展开更多

关键词 基因编辑猪 大动物模型 人工核酸酶 条件性基因编辑

原文传递

光核酸酶-蒽醌衍生物的研究进展 被引量：3

7

作者 张胜梅 韩士田 刘彦钦 《河北师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2004年第3期289-292,共4页

蒽醌衍生物可以被设计成光核酸酶,与DNA作用时能在特定的位置裂解单链或双链DNA,在生物化学和生物药学上有许多重要的应用,可作结构探针和抗肿瘤试剂.介绍了蒽醌衍生物可作为光核酸酶的原因、与DNA作用的不同方式及其与DNA加合物的研究... 蒽醌衍生物可以被设计成光核酸酶,与DNA作用时能在特定的位置裂解单链或双链DNA,在生物化学和生物药学上有许多重要的应用,可作结构探针和抗肿瘤试剂.介绍了蒽醌衍生物可作为光核酸酶的原因、与DNA作用的不同方式及其与DNA加合物的研究方法. 展开更多

关键词 光核酸酶 蒽醌衍生物 分子生物学 抗肿瘤试剂 人工核酸酶

下载PDF 职称材料

基于Cyclam衍生物的单核金属配合物的结构及核酸酶活性

8

作者 李志喜 胡明 +1 位作者 刘超 杨晓亮 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第1期127-132,共6页

以1,8-二甲基-1,4,8,11-四氮杂环十四烷为原料,以N,N′-二叔丁氧羰基-2-甲璜酰氧基-1,3-二氨基丙烷为烷基化试剂,合成了cyclam衍生物:1,8-二(N,N′-二叔丁氧羰基-1,3-二氨基异丙基)-4,11-二甲基-1,4,8,11-四氮杂环十四烷(L1);及其对应... 以1,8-二甲基-1,4,8,11-四氮杂环十四烷为原料,以N,N′-二叔丁氧羰基-2-甲璜酰氧基-1,3-二氨基丙烷为烷基化试剂,合成了cyclam衍生物:1,8-二(N,N′-二叔丁氧羰基-1,3-二氨基异丙基)-4,11-二甲基-1,4,8,11-四氮杂环十四烷(L1);及其对应的系列单核金属配合物,Zn(L1)Cl2(1),Ni(L1)Cl2(2)和Cu(L1)Cl2(3);核磁结果表明,L1为C2对称结构,且cyclam环上每一个亚甲基碳上的2个氢化学不等价;利用2D[1H,15N]HSQC对比配体配位前后N-H化学位移的变化,确定配合物的结构是金属与配体cyclam环上的4个氮原子配位;利用变温核磁1H NMR和13C NMR,结合2D[1H,15N]HSQC核磁共振波谱表明,配合物1在溶液中主要以两种构型并存,并主要以trans-Ⅲ构型存在。此外,用凝胶电泳研究了配体与单核金属配合物对超螺旋p BR322质粒DNA切割活性;实验结果表明,配合物3在抗坏血酸存在的条件下具有核酸酶活性,而配体(L1),配合物1和配合物2在实验条件下,无论是氧化切割还是水解切割都显阴性。 展开更多

关键词 Cyclam衍生物 单核金属配合物 构型 人工核酸酶

下载PDF 职称材料

英国HorizonDiscovery公司用rAAV基因编辑技术与核酸酶技术抗衡

9

作者 增田智子 《生物产业技术》 2014年第3期52-52,共1页

基因组编辑技术是指在基因组的特定位点改造基因的技术。可供选择的并非只有人工核酸酶。英国HorizonDiscovery公司就拥有利用病毒的基因编辑技术“GENESIS”。

关键词 人工核酸酶 编辑技术 基因组 酶技术 英国 GENESIS 定位点

下载PDF 职称材料

稀土及其配合物对核酸的断裂作用 被引量：30

10

作者 朱兵 赵大庆 倪嘉缵 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 1998年第4期395-404,共10页

人工核酸酶是一类具有限制性内切酶的功能、能高效高选择性地催化水解ＤＮＡ或ＲＮＡ的断裂工具。它们一般由核酸结构识别系统及催化断裂系统组成，将两种功能有效地结合起来，可模拟核酸的酶切反应。本文综述了稀土及其配合物对核酸的... 人工核酸酶是一类具有限制性内切酶的功能、能高效高选择性地催化水解ＤＮＡ或ＲＮＡ的断裂工具。它们一般由核酸结构识别系统及催化断裂系统组成，将两种功能有效地结合起来，可模拟核酸的酶切反应。本文综述了稀土及其配合物对核酸的断裂作用。 展开更多

关键词 人工核酸酶 稀土配合物 断裂作用 核酸 切割

下载PDF 职称材料

错配核酸识别修复的研究进展 被引量：7

11

作者 陈绘丽 杨频 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 2002年第4期239-245,共7页

综述了当前发展起来的识别修复错配核酸的化学模型的最新进展。此项研究会对阐明生物体内 DNA的识别修复机理。

关键词 研究进展 化学模型系统 结构 损伤 电子转移 DNA 人工核酸酶 错配核酸 识别 修复

下载PDF 职称材料

人工锌指核酸酶突变EGFP基因的功能分析 被引量：1

12

作者 袁玉国 于宝利 +5 位作者 宋绍征 周峰 张利清 顾迎迎 禹明慧 成勇 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1573-1580,共8页

锌指核酸酶技术在基因定点修饰中具有效率高和特异性好等特点,并成功应用于数十种生物。目前,该技术是否能应用羊上尚未报道。为了敲除转基因山羊标记基因(EGFP),构建了一对针对EGFP外显子上的锌指核酸酶表达载体,将其电转染至转EGFP基... 锌指核酸酶技术在基因定点修饰中具有效率高和特异性好等特点,并成功应用于数十种生物。目前,该技术是否能应用羊上尚未报道。为了敲除转基因山羊标记基因(EGFP),构建了一对针对EGFP外显子上的锌指核酸酶表达载体,将其电转染至转EGFP基因胎儿成纤维细胞中,研究了锌指核酸酶突变EGFP基因的效率和方式,利用基因显微注射单细胞获得获得的转基因(EGFP)细胞系作为锌指核酸酶的靶细胞。结果显示,通过锌指核酸酶的突变作用,转染后的细胞发绿色荧光比例下降,测序结果显示在EGFP外显子中插入1个碱基G,导致编码EGFP基因的阅读框改变,从而起到基因突变的作用。结果表明,文中构建的锌指核酸酶对EGFP基因有突变作用,可以为以后获得无标记基因供核细胞进行体细胞核移植生产克隆羊奠定基础。 展开更多

关键词 人工锌指核酸酶 核移植 EGFP 基因打靶 细胞显微注射 山羊体细胞

原文传递

两种新稀土双核配合物的合成、表征及其对磷酸二酯键模型物(BDNPP)和DNA的作用研究 被引量：28

13

作者 杨频 周春琼 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第9期1455-1460,共6页

合成和表征了两种新的双核配合物 [Eu2 (bbimp) (CH3 COO) (CH3 CH2 O) 2 (CH3 CH2 OH ) ] (ClO4) 2 (A)和 [Nd2 (bbimp) (CH3 COO) (CH3 CH2 O) 2 (CH3 CH2 OH) ] (ClO4) 2 (B) .用紫外光谱法分别研究了磷酸二酯键模型物双 (2 ,4 二... 合成和表征了两种新的双核配合物 [Eu2 (bbimp) (CH3 COO) (CH3 CH2 O) 2 (CH3 CH2 OH ) ] (ClO4) 2 (A)和 [Nd2 (bbimp) (CH3 COO) (CH3 CH2 O) 2 (CH3 CH2 OH) ] (ClO4) 2 (B) .用紫外光谱法分别研究了磷酸二酯键模型物双 (2 ,4 二硝基苯基 )磷酸盐(BDNPP)与配合物 (A ,B)的水解动力学反应 .当BDNPP与A ,B的浓度均为 2 .5× 10 -5mol/L时 ,反应为二级反应 ;在 2 5℃ ,pH 7.2 6时 ,二级水解速率常数分别为 2 479(mol/L) -1·min-1,1678(mol/L) -1·min-1,半衰期分别为 16.1min和 2 3 .8min ,比单独的Eu3 + ,Nd3 + 水解BDNPP的速率均快得多 ,3 7℃时反应更快 ;在 2 5℃ ,pH 6.5 0～ 8.5 0时 ,两个反应的水解速率常数的lgK与pH值均呈正的线性关系 .两种配合物与小牛胸腺 (CT)DNA作用 ,使CTDNA最大吸收峰发生减色和红移 ,使溴化乙锭 (EB) DNA复合物体系荧光强度减弱 .两种配合物对超螺旋质粒pBR3 2 2DNA的断裂在 5 0℃ ,pH 8.0时 ,效果最好 . 展开更多

关键词 稀土双核配合物 合成 表征 对磷酸二酯键模型物 BDNPP DNA 动力学 人工核酸酶

下载PDF 职称材料

人工核酸内切酶介导的新一代基因组编辑技术进展 被引量：5

14

作者 肖安 张博 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期917-928,共12页

对基因组特定位置进行针对性修饰的实验方法称为基因组编辑技术。近年出现的ZFN、TALEN、CRISPR/Cas等一系列人工核酸内切酶逐渐形成了新一代基因组编辑技术,极大地促进了基因组靶向修饰技术的发展,并在基因功能研究、基因治疗等领域开... 对基因组特定位置进行针对性修饰的实验方法称为基因组编辑技术。近年出现的ZFN、TALEN、CRISPR/Cas等一系列人工核酸内切酶逐渐形成了新一代基因组编辑技术,极大地促进了基因组靶向修饰技术的发展,并在基因功能研究、基因治疗等领域开始发挥巨大作用。文中对这一技术的基本原理、发展历程和应用方式进行了简要总结。 展开更多

关键词 人工核酸酶 基因组定点修饰 基因突变 基因打靶 CRISPR/Cas TALEN EEN 反向遗传学

原文传递

金属配合物-寡聚核苷酸定位断裂剂研究进展 被引量：5

15

作者 袁彩霞 杨频 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第1期78-84,共7页

核酸切割试剂与寡聚核苷酸 (ODN)偶联制得的人工核酸酶能在特定位点断裂DNA或RNA ,为人工核酸酶的分子设计提供了一种新方法。本文综述了金属配合物 ODN识别切割试剂的偶联方式及其与靶分子的作用机制 ,并指出了今后的研究方向。

关键词 金属配合物 寡聚核苷酸 偶联 人工核酸酶 定点断裂

下载PDF 职称材料

TALEN技术研究进展 被引量：3

16

作者 严爱芬 刘婉霞 +1 位作者 刘芳 唐冬生 《广东农业科学》 CAS 2015年第23期145-150,共6页

类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)是近年来新兴的分子生物学工具。该技术可高效地介导DNA编辑修饰,如基因敲除、基因敲入、碱基替换、点突变等。近年来,随着人们对TALEN系统研究的不... 类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)是近年来新兴的分子生物学工具。该技术可高效地介导DNA编辑修饰,如基因敲除、基因敲入、碱基替换、点突变等。近年来,随着人们对TALEN系统研究的不断深入和改造,TALEN已成功地应用于人类细胞、鼠、斑马鱼等物种中,成为一项具有广阔应用前景的基因编辑技术。对TALEN的来源、构建及应用情况进行阐述,并对其未来发展进行展望。 展开更多

关键词 人工核酸酶 类转录激活因子效应物核酸酶 基因组编辑

下载PDF 职称材料

CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术及其在作物品种改良中的应用 被引量：4

17

作者 平文丽 李雪君 +3 位作者 林娟 丁燕芳 孙焕 孙计平 《中国农学通报》 2016年第5期16-22,共7页

基因组编辑技术是用特殊的核酸酶对基因组进行精准修饰的一种新兴技术。2013年研究人员发现了CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)系统,将其中的CRISPR/Cas9系统成功改造成RNA引导的核酸内切酶,发展了CR... 基因组编辑技术是用特殊的核酸酶对基因组进行精准修饰的一种新兴技术。2013年研究人员发现了CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)系统,将其中的CRISPR/Cas9系统成功改造成RNA引导的核酸内切酶,发展了CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术。该技术能够对包括植物在内的几乎所有物种的基因组进行高效、精准的定点修饰,而且程序简易、操作方便灵活,加速了遗传工程、功能基因组学的研究,给生命科学的各个领域带来了革命性变化。本综述回顾了CRISPR/Cas9的出现、改进与发展,简述了CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术的作用机理,归纳总结了CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术在作物品种改良、提高作物品质和产量中的应用,最后,分析了该技术在作物品种改良中的发展前景及应用价值,以期为合理利用该技术进行种质创新、品种改良提供理论依据。 展开更多

关键词 基因组编辑 人工核酸酶 CRISPR/Cas Cas9 作物育种

下载PDF 职称材料

逆转录病毒载体介导的转基因鸡研究进展 被引量：3

18

作者 王令 张涛 尹亚军 《中国家禽》 北大核心 2015年第14期44-48,共5页

转基因鸡作为重要的经济动物和理想的生物反应器,具有广阔的应用前景。鸡基因组测序的完成加快了转基因鸡的研究和发展。病毒载体法是转基因鸡制备的主导方法之一,具有效率高和遗传稳定性良好的优势。本文对逆转录病毒载体特征、复制缺... 转基因鸡作为重要的经济动物和理想的生物反应器,具有广阔的应用前景。鸡基因组测序的完成加快了转基因鸡的研究和发展。病毒载体法是转基因鸡制备的主导方法之一,具有效率高和遗传稳定性良好的优势。本文对逆转录病毒载体特征、复制缺陷型病毒载体和复制整合双缺陷型病毒载体的优缺点及其介导的转基因鸡研究进行综述,展望人工核酸酶技术结合复制整合双缺陷型逆转录病毒载体在转基因鸡研究领域的应用前景。 展开更多

关键词 转基因鸡 逆转录病毒载体 复制整合双缺陷型病毒载体 人工核酸酶技术

原文传递

哺乳动物基因组靶向修饰阳性细胞富集的报告载体系统研究进展 被引量：1

19

作者 白义春 徐坤 +2 位作者 魏泽辉 马琤 张智英 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期28-39,共12页

基因组靶向修饰技术对基因功能研究、基因治疗以及转基因育种研究都具有重要的意义和价值。近年来发展起来的人工核酸酶如ZFNs、TALENs和CRISPR/Cas9等的应用大大提高了基因组靶向修饰的效率。但是由于核酸酶表达载体转染效率、核酸酶... 基因组靶向修饰技术对基因功能研究、基因治疗以及转基因育种研究都具有重要的意义和价值。近年来发展起来的人工核酸酶如ZFNs、TALENs和CRISPR/Cas9等的应用大大提高了基因组靶向修饰的效率。但是由于核酸酶表达载体转染效率、核酸酶表达效率及活性以及基因组被打靶后的修复效率等因素在一定程度上制约着基因组靶向修饰阳性细胞的获得。因此富集和筛选基因组靶向修饰阳性细胞是一个亟待解决的问题。报告载体系统可以间接地反映核酸酶的工作效率并有效富集核酸酶修饰的阳性细胞,进而提高基因组靶向修饰阳性细胞的富集和筛选效率。本文主要针对由非同源末端连接(Non-homologous end joining,NHEJ)和单链退火(Single-strand annealing,SSA)两种修复机制分别介导的报告载体系统的原理和应用进行了详细的介绍,以期为以后的相关研究提供借鉴和参考。 展开更多

关键词 基因组靶向修饰 人工核酸酶 报告载体系统 阳性细胞富集

下载PDF 职称材料

2,6-二甲基-3,5-吡啶二甲酰腙衍生物的合成及与DNA的作用

20

作者 李志芬 乔俊 +2 位作者 陆均 王君玲 许琳 《山西大同大学学报（自然科学版）》 2016年第1期38-40,44,共4页

本文以2,6-二甲基-1,4-二氢吡啶-3,5-二甲酸二乙酯为原料,通过氧化、肼解得到2,6-二甲基-3,5-吡啶二甲酰肼,该甲酰肼和芳香醛反应合成了4个2,6-二甲基-3,5-吡啶二甲酰腙衍生物,合成路线设计合理,反应条件温和,产率高,目标化合物的结构... 本文以2,6-二甲基-1,4-二氢吡啶-3,5-二甲酸二乙酯为原料,通过氧化、肼解得到2,6-二甲基-3,5-吡啶二甲酰肼,该甲酰肼和芳香醛反应合成了4个2,6-二甲基-3,5-吡啶二甲酰腙衍生物,合成路线设计合理,反应条件温和,产率高,目标化合物的结构用氢谱和质谱进行了表征,通过EB竞争实验测定了它们与DNA的结合常数约为104左右,表明该类酰腙化合物可以与DNA发生作用。 展开更多

关键词 吡啶 酰腙 人工核酸酶 DNA

下载PDF 职称材料