血管内皮生长因子、基质细胞衍生因子-1基因对人微血管内皮细胞增殖、迁移、凋亡的影响 被引量：18

1

作者 高静 李晓岚 +2 位作者 王敏哲 刘贯英 杨雪松 《安徽医药》 CAS 2019年第9期1784-1789,共6页

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子?1(SDF?1)基因对人微血管内皮细胞(HMEC?1)增殖、迁移、凋亡的影响。方法体外培养HMEC?1,以小干扰RNA(siRNA)介导低表达VEGF、SDF?1处理细胞,分组为Ⅰ组(空白对照组)、Ⅱ组(转染非特... 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子?1(SDF?1)基因对人微血管内皮细胞(HMEC?1)增殖、迁移、凋亡的影响。方法体外培养HMEC?1,以小干扰RNA(siRNA)介导低表达VEGF、SDF?1处理细胞,分组为Ⅰ组(空白对照组)、Ⅱ组(转染非特异性对照组)、Ⅲ组(转染si VEGF组)、Ⅳ组(转染si SDF?1组)。检测各组细胞增殖、迁移、凋亡的情况。West?ern Blot检测细胞中VEGF、SDF?1的表达情况,MTT和流式细胞分析检测HMEC?1增殖和凋亡能力的变化情况,划痕愈合实验检测HMEC?1迁移能力。结果转染了VEGF165?siRNA后,Ⅲ组VEGF165、SDF?1蛋白的表达强度(0.48±0.07)、(0.62±0.08)均明显弱于Ⅰ组(1.92±0.42)、(1.29±0.38)和Ⅱ组(1.87±0.35)、(1.32±0.47),差异有统计学意义(t=9.836,8.279,7.846,8.045,P<0.05);转染了SDF?1?siRNA后,Ⅳ组SDF?1蛋白的表达强度(0.37±0.05)均明显弱于Ⅰ组和Ⅱ组(t=7.381,7.984,P<0.05),差异有统计学意义,而VEGF165蛋白表达变化差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅰ组与Ⅱ组比较,VEGF165、SDF?1蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。经siRNA转染后,Ⅲ组、Ⅳ组细胞均出现增殖抑制率(42.37±1.25)%、(29.15±1.32)%和凋亡率(21.6±1.8)%、(16.8±1.6)%明显增高,与Ⅰ组、Ⅱ组增殖抑制率0.00%、(0.24±0.02)%和凋亡率(4.9±0.4)%、(5.2±0.5)%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。但Ⅲ组和Ⅳ组之间比较,Ⅲ组细胞增殖抑制率和凋亡率增高更显著,差异有统计学意义(t=6.217,5.487,P<0.05)。Ⅰ组与Ⅱ组比较,细胞增殖抑制率和凋亡率均差异无统计学意义(P>0.05)。细胞迁移实验中,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组迁移距离分别为(579.65±11.59)μm、(553.76±9.47)μm、(234.72±10.28)μm、(318.36±9.95)μm,Ⅲ组和Ⅳ组细胞明显少于Ⅰ组和Ⅱ组,差异有统计学意义(t=10.972,9.894,8.426,7.904,P<0.05),而Ⅰ组与Ⅱ组之间,差异无统计学意义(P>0.05),其中Ⅲ组和Ⅳ组之间比较,Ⅲ组细胞明显少于Ⅳ组,差异有统计学意义(t=5.907,P<0.05)。结论VEGF、SDF?1基因均参能促进HMEC?1的增殖和迁移能力,并抑制HMEC?1的凋亡水平,从而可能在糖尿病血管病变发生发展中发挥作用,且在此过程中VEGF对SDF?1表达具有调节机制。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 基质细胞衍生因子-1 糖尿病视网膜病变 人微血管内皮细胞 RNA干扰技术

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SDF-1通过PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路对人微血管内皮细胞功能产生影响 被引量：5

2

作者 高静 朱红霞 +2 位作者 王敏哲 苟静 张丽 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1205-1210,共6页

目的 :观察基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cell line-1,HMEC-1)功能的影响,并对相关机制进行初步探讨,从而明确SDF-1在糖尿病血管病变中的作用。方法:... 目的 :观察基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cell line-1,HMEC-1)功能的影响,并对相关机制进行初步探讨,从而明确SDF-1在糖尿病血管病变中的作用。方法:体外培养HMEC-1,分别在培养基中加入不同浓度的SDF-1(0、25、50、100μg/L),Western blot检测HMEC-1中PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路的活化情况,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况,划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力的变化情况。采用PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路抑制剂LY294002和U0126阻断HMEC-1中PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路后,再以SDF-1处理HMEC-1,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况;划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力的变化情况。结果:Western blot结果显示,25μg/L的SDF-1处理即可显著活化HMEC-1中的PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路,且随着SDF-1处理浓度的升高,PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路活化水平逐渐升高。同0μg/L的SDF-1处理组相比,25、50、100μg/L的SDF-1均可显著加强HMEC-1的增殖和迁移能力(P<0.01),并抑制HMEC-1的凋亡水平(P<0.01),且这种作用具有剂量依赖性。当采用LY294002和U0126阻断HMEC-1中的PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路后,SDF-1促HMEC-1增殖和迁移能力及抑制HMEC-1凋亡的能力均显著降低(P<0.01)。结论:SDF-1可通过活化PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路,进而促进HMEC-1的增殖和迁移,并抑制HMEC-1的凋亡水平,从而在糖尿病血管病变中发挥一定的作用。 展开更多

关键词 基质细胞衍生因子-1 信号通路 糖尿病 人微血管内皮细胞 PI3K/AKT MAPK/ERK

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水解南珠液能促进人微血管内皮细胞的增殖和迁移 被引量：7

3

作者 岑妍慧 林湧 +2 位作者 林江 贾微 赵静 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第16期2564-2569,共6页

背景:珍珠有镇静安神的药效,临床可应用于高血压病,但水解珍珠液对高血压病的防治作用及相关机制研究目前报道尚少。目的:观察水解南珠液对人微血管内皮细胞生物学行为和分泌功能的影响。方法:人微血管内皮细胞培养,传代。实验分为水解... 背景:珍珠有镇静安神的药效,临床可应用于高血压病,但水解珍珠液对高血压病的防治作用及相关机制研究目前报道尚少。目的:观察水解南珠液对人微血管内皮细胞生物学行为和分泌功能的影响。方法:人微血管内皮细胞培养,传代。实验分为水解南珠液高、中、低剂量组:分别加入含质量浓度为120,60,30 mg/L水解南珠液的培养基200μL;对照组:只加200μL的培养基。CCK8法检测人微血管内皮细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞的周期分布,TUNEL法了解细胞的凋亡情况,Transwell法检测细胞迁移情况,硝酸还原酶法检测细胞的NO分泌量及化学荧光法检测细胞活性氧的分泌情况。结果与结论:(1)与对照组相比,低、中、高剂量水解南珠液对人微血管内皮细胞均有促增殖作用,且浓度越高,对细胞的促增殖能力越强(P<0.05),因此确定120 mg/L水解南珠液为最佳作用浓度;(2)与对照组相比,水解南珠液组细胞S期和G2期百分比增加,而G1期的细胞比例则减少(P<0.05),提示水解南珠液可以促进血管内皮细胞的周期进展;(3)各组均未发现有细胞核被染成绿色的凋亡细胞;(4)水解南珠液组的迁移细胞数比对照组显著增加(P<0.05);(5)水解南珠液组细胞NO分泌量明显高于对照组(P<0.05),活性氧量显著低于对照组(P<0.05);(6)结果表明,水解南珠液能促进体外培养的人微血管内皮细胞的增殖和迁移,并具有促进其分泌NO及抑制其活性氧分泌的功能,在保护内皮细胞功能方面可能有积极的作用。 展开更多

关键词 高血压 内皮细胞 细胞运动 组织工程 合浦珍珠 南珠 水解 人微血管内皮细胞 增殖 迁移 TUNEL法 Transwell法 生物学行为

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柔毛水杨梅对人微血管内皮细胞增殖、迁移、成管能力的影响 被引量：5

4

作者 刘城 宋雨鸿 +3 位作者 王月刚 裴静娴 赖艳娴 申艳 《广州中医药大学学报》 CAS 2016年第4期551-555,共5页

【目的】研究柔毛水杨梅对人微血管内皮细胞增殖、迁移、成管能力的影响。【方法】将不同浓度（0~200 ng/m L）柔毛水杨梅作用于人微血管内皮细胞（HMVEC-Ls）,分别采用MTS法检测细胞的增殖活性,划痕法检测细胞的迁移能力,Matrigel法检... 【目的】研究柔毛水杨梅对人微血管内皮细胞增殖、迁移、成管能力的影响。【方法】将不同浓度（0~200 ng/m L）柔毛水杨梅作用于人微血管内皮细胞（HMVEC-Ls）,分别采用MTS法检测细胞的增殖活性,划痕法检测细胞的迁移能力,Matrigel法检测细胞的成管能力以及Western blot法验证低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）、端粒酶逆转录酶（TERT）的表达水平。【结果】MTS结果显示：柔毛水杨梅与HMVEC-Ls共同培养7 d,25~200 ng/m L不同浓度组均可促进HMVEC-Ls增殖,与对照组（0 ng/m L）比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）,以100 ng/m L组促进HMVEC-Ls增殖能力最显著（P〈0.05）。划痕实验结果显示：与对照组比较,50~150 ng/m L组HMVEC-Ls迁移率显著增大,差异均有统计学意义（P〈0.05）,以150 ng/m L组HMVEC-Ls迁移率最高。成管实验结果：与对照组比较,50~150 ng/m L组HMVECLs成管长度显著增加,差异均有统计学意义（P〈0.05）,亦以150 ng/m L组HMVEC-Ls成管长度最大。Western blot检测结果：与对照组比较,150 ng/m L柔毛水杨梅浓度组HIF-1α、TERT和VEGF表达均显著升高（P〈0.05）。【结论】柔毛水杨梅可通过促进人微血管内皮细胞增殖、迁移、管样形成而发挥促血管新生效应,其机制可能与HIF-1α-TERT-VEGF途径介导的血管新生有关。 展开更多

关键词 柔毛水杨梅 人微血管内皮细胞 血管新生 细胞培养

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姜黄素对人微血管内皮细胞增殖、迁移、成管以及凋亡的影响 被引量：2

5

作者 刘城 吴平生 +2 位作者 王月刚 裴静娴 赖艳娴 《广州中医药大学学报》 CAS 北大核心 2013年第5期681-684,773,共5页

【目的】研究姜黄素对人微血管内皮细胞(HMVEC-L)增殖、迁移、成管以及凋亡的影响。【方法】将姜黄素分为0、20、40、80μmol/L 4个实验组,分别用非放射性细胞增殖检测(MTS)法、划痕实验、成管实验以及Hoechst 33258与TUNEL双重荧光法... 【目的】研究姜黄素对人微血管内皮细胞(HMVEC-L)增殖、迁移、成管以及凋亡的影响。【方法】将姜黄素分为0、20、40、80μmol/L 4个实验组,分别用非放射性细胞增殖检测(MTS)法、划痕实验、成管实验以及Hoechst 33258与TUNEL双重荧光法检测姜黄素对HMVEC-L增殖、迁移、成管以及凋亡的影响。【结果】MTS结果显示:从姜黄素与HMVEC-L共同培养的第1天开始,20～80μmol/L浓度组均可抑制HMVEC-L增殖,与对照组(0μmol/L)比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),尤以80μmol/L组抑制HMVEC-L增殖能力最显著(P<0.05或P<0.01)。划痕实验结果显示:20～80μmol/L姜黄素浓度组HMVEC-L迁移率均显著降低,各组HMVEC-L迁移率比较差异有统计学意义(P<0.05),其中尤以80μmol/L组HMVEC-L迁移率最低。成管实验结果显示:20～80μmol/L姜黄素浓度组HMVEC-L成管长度均显著降低,各组HMVEC-L成管长度比较差异有统计学意义(P<0.05),其中尤以80μmol/L组HMVEC-L成管长度最小。Hoechst 33258与TUNEL双重荧光染色结果显示:在姜黄素与HMVEC-L共同培养过程中HMVEC-L发生了凋亡。【结论】姜黄素可通过抑制HMVEC-L增殖、迁移、管样形成并诱导其发生凋亡,从而有效抑制肿瘤血管形成。 展开更多

关键词 姜黄素 药理学 人微血管内皮细胞 肿瘤 中药疗法 血管内皮细胞 病理学 细胞培养

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加味犀角地黄汤对人微血管内皮细胞侵袭的影响及其作用机制研究 被引量：5

6

作者 高峰 滕凤猛 +1 位作者 王佳 杨学文 《吉林中医药》 2017年第5期501-504,共4页

目的探讨加味犀角地黄汤对人微血管内皮细胞(h MVECs)侵袭的影响及其作用机制的研究。方法利用Transwell小室检测h MVECs细胞迁移能力,ELISA法检测其对MMP2、MMP-9的表达影响;荧光定量PCR检测VEGF,Ang1、TGF-β等相关基因的表达。结果... 目的探讨加味犀角地黄汤对人微血管内皮细胞(h MVECs)侵袭的影响及其作用机制的研究。方法利用Transwell小室检测h MVECs细胞迁移能力,ELISA法检测其对MMP2、MMP-9的表达影响;荧光定量PCR检测VEGF,Ang1、TGF-β等相关基因的表达。结果加味犀角地黄汤能够抑制人微血管内皮细胞的侵袭,随着药物浓度的增加抑制作用逐渐明显。加味犀角地黄汤能有抑制人微血管内皮细胞中MMP2、MMP-9的表达,且能够抑制VEGF,Ang1、TGF-β等相关基因的表达。结论加味犀角地黄汤可能的机制是通过抑制VEGF、Ang1、TGF-β相关基因的表达和MMP2、MMP-9蛋白水平的表达,来调控以人血管微内皮细胞的侵袭,从而到达治疗类风湿关节炎的目的。 展开更多

关键词 犀角地黄汤 人微血管内皮细胞 侵袭 基质金属蛋白酶

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转录因子Bach1对人微血管内皮细胞的作用研究 被引量：3

7

作者 刘俊许 蒋丽 +3 位作者 魏香香 牛琮 陈思锋 孟丹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2195-2200,共6页

目的:研究转录因子Bach1对人微血管内皮细胞功能的影响。方法:利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)细胞转染技术下调内皮细胞Bach1表达;用Matrigel管腔形成实验检测内皮细胞体外血管新生的能力;用Transwell小室法检测细胞迁移;... 目的:研究转录因子Bach1对人微血管内皮细胞功能的影响。方法:利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)细胞转染技术下调内皮细胞Bach1表达;用Matrigel管腔形成实验检测内皮细胞体外血管新生的能力;用Transwell小室法检测细胞迁移;用CCK-8法测定细胞增殖;用实时荧光定量PCR、Western blotting和ELISA法检测细胞中血红素氧合酶1(heme oxygenase 1,HO-1)和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA和蛋白的表达情况;用转染报告基因的方法检测VEGF基因的转录活性。结果:下调内皮细胞Bach1表达明显促进人微血管内皮细胞迁移和管腔形成能力,对内皮细胞增殖能力无明显影响;抑制Bach1表达促进内皮细胞HO-1 mRNA和蛋白的表达,增加VEGF转录活性及mRNA和蛋白的表达。结论:抑制转录因子Bach1表达可增加内皮细胞HO-1和VEGF的表达,促进人微血管内皮细胞迁移和管腔形成,提示Bach1是负性调控血管新生的因子。 展开更多

关键词 转录因子Bach1 人微血管内皮细胞 血管内皮细胞生长因子 血红素氧合酶1 细胞迁移

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合欢皮总皂苷对人微血管内皮细胞增殖的影响 被引量：1

8

作者 冯磊 谭莹 +2 位作者 陈爽 邱丽颖 金坚 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1667-1670,共4页

目的:研究合欢皮总皂苷对人微血管内皮细胞(HMEC-1)增殖的影响。方法:采用人脐静脉微血管内皮细胞作为研究模型,经不同剂量合欢皮总皂苷作用24、48 h后,应用SRB法、HE染色法观察合欢皮总皂苷对HMEC-1细胞增殖、形态的影响;应用Hoechst... 目的:研究合欢皮总皂苷对人微血管内皮细胞(HMEC-1)增殖的影响。方法:采用人脐静脉微血管内皮细胞作为研究模型,经不同剂量合欢皮总皂苷作用24、48 h后,应用SRB法、HE染色法观察合欢皮总皂苷对HMEC-1细胞增殖、形态的影响;应用Hoechst染色法、扫描电镜、流式细胞仪PI单染方法分析合欢皮总皂苷对HMEC-1细胞生长的影响。结果:合欢皮总皂苷提取物具有抑制血管内皮细胞增殖的作用,其与时间、剂量均存在依赖关系,作用48 h的IC50为1.5μg/mL;合欢皮总皂苷使HMEC-1细胞周期阻滞在亚G0/G1期,高剂量作用48 h后可能引起细胞产生坏死。结论:合欢皮总皂苷通过影响细胞周期,部分引起细胞坏死,从而抑制人微血管内皮细胞增殖及血管形成。 展开更多

关键词 合欢皮总皂苷 人微血管内皮细胞 抑制增殖 细胞周期

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缺氧对人微血管内皮细胞HIF-VEGF-Notch信号通路的影响 被引量：4

9

作者 黄萍 左荣 熊欢 《江西医药》 CAS 2014年第9期815-818,共4页

目的观察缺氧对人微血管内皮细胞(HMVEC)中HIF-VEGF-Notch信号通路相关分子表达的影响。方法常规方法培养HMVEC细胞,低氧培养箱制备HMVEC缺氧模型,正常细胞作为对照组。采用Western Blot法检测HMVEC中HIF-1α及Notch-1的蛋白表达,ELISA... 目的观察缺氧对人微血管内皮细胞(HMVEC)中HIF-VEGF-Notch信号通路相关分子表达的影响。方法常规方法培养HMVEC细胞,低氧培养箱制备HMVEC缺氧模型,正常细胞作为对照组。采用Western Blot法检测HMVEC中HIF-1α及Notch-1的蛋白表达,ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF蛋白表达水平。结果缺氧组和对照组细胞中Notch1蛋白表达分别为2.07±0.16和0.91±0.04,两者差异有显著意义(P<0.05);HIF-1α蛋白表达缺氧组为2.53±0.19,对照组为0.67±0.08,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组上清液中VEGF表达量为50.04±5.92 ng/L,缺氧组上清液中VEGF表达量为238.04±19.29 ng/L,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论缺氧可上调HMVEC细胞中HIF-VEGF-Notch信号通路相关分子的表达,此可能与重要脏器缺血缺氧性损伤后诱导的血管新生有关。 展开更多

关键词 缺氧 人微血管内皮细胞 缺氧诱导因子 血管内皮生长因子 NOTCH

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合欢皮总皂苷对人微血管内皮细胞体外增殖的影响 被引量：1

10

作者 冯磊 谭莹 +2 位作者 陈爽 邱丽颖 金坚 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1272-1275,共4页

研究合欢皮总皂苷对人微血管内皮细胞增殖的药效学影响。采用人脐静脉微血管内皮细胞HMEC-1作为研究模型,经不同剂量合欢皮总皂苷作用48、72 h后,应用SRB法、光学显微镜观察合欢皮总皂苷对HMEC-1细胞增殖、形态的影响;应用台盼蓝染色法... 研究合欢皮总皂苷对人微血管内皮细胞增殖的药效学影响。采用人脐静脉微血管内皮细胞HMEC-1作为研究模型,经不同剂量合欢皮总皂苷作用48、72 h后,应用SRB法、光学显微镜观察合欢皮总皂苷对HMEC-1细胞增殖、形态的影响;应用台盼蓝染色法、DNA梯形条带法、流式细胞仪PI单染方法分析合欢皮总皂苷对HMEC-1细胞生长的影响。实验结果发现合欢皮总皂苷提取物具有抑制血管内皮细胞增殖的作用,其与时间、剂量均存在依赖关系,作用48 h的IC50为1.5μg/mL;合欢皮总皂苷使HMEC-1细胞周期阻滞在亚G0/G1期,高剂量作用48 h后可能引起细胞产生坏死。因此,合欢皮总皂苷可能通过改变细胞周期,部分引起细胞坏死,从而抑制人微血管内皮细胞的增殖。 展开更多

关键词 合欢皮总皂苷 人微血管内皮细胞 抑制增殖 细胞周期

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加味犀角地黄汤含药血清对人微血管内皮细胞增殖的影响 被引量：2

11

作者 王佳 高峰 杨学文 《中医药导报》 2016年第16期18-21,共4页

目的:探讨加味犀角地黄汤含药血清对人微血管内皮细胞(h MVECs)增殖的影响。方法:利用CCK-8检测h MVECs细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的改变。结果:加味犀角地黄汤含药血清能够抑制人微血管内皮细胞的增殖,随着浓度的增加... 目的:探讨加味犀角地黄汤含药血清对人微血管内皮细胞(h MVECs)增殖的影响。方法:利用CCK-8检测h MVECs细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的改变。结果:加味犀角地黄汤含药血清能够抑制人微血管内皮细胞的增殖,随着浓度的增加抑制作用逐渐明显,加味犀角地黄汤含药血清能使人微血管内皮细胞阻滞在S期,含药血清组明显高于正常对照组;且能够促进其细胞的凋亡。结论:加味犀角地黄汤含药血清可以抑制人血管微内皮细胞的增殖,且能够引起细胞周期的改变,诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 加味犀角地黄汤 人微血管内皮细胞 细胞凋亡 增殖

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山楂活性成分对氧化低密度脂蛋白损伤人微血管内皮细胞的防治作用 被引量：6

12

作者 何秋艳 翁新楚 《上海大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期751-756,共6页

对山楂中有效成分进行分离提取，并研究其保护人微血管内皮细胞（HMEC）抑制氧化低密度脂蛋白（oxLDL）损伤和对损伤的修复作用．对山楂石油醚和氯仿提取物，经过反复硅胶柱层析，分离得到3种化合物，经理化性质和波谱分析，鉴定为：（... 对山楂中有效成分进行分离提取，并研究其保护人微血管内皮细胞（HMEC）抑制氧化低密度脂蛋白（oxLDL）损伤和对损伤的修复作用．对山楂石油醚和氯仿提取物，经过反复硅胶柱层析，分离得到3种化合物，经理化性质和波谱分析，鉴定为：（1）胡萝卜苷（Daucosterol）、（Ⅱ）熊果酸（Ursolicacid）、（Ⅲ）β-谷甾醇（β—sitoster01）．实验以山楂依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、95％乙醇提取的各种提取物和化合物Ⅰ～Ⅲ为研究对象，以洛伐他汀（Lovastatin）作为阳性对照，MTT法考察样品对保护HMEC抑制oxLDL损伤和对损伤的修复作用．结果表明：山楂各种溶剂提取物和洛伐他汀在3．12～25μg／mL时，保护细胞抑制氧化损伤；乙酸乙酯、95％乙醇提取物在浓度6．25～25μg/mL时对氧化损伤细胞有修复作用，效果好于洛伐他汀；胡萝卜苷、β-谷甾醇在0．39～12．5μg／mL下有保护作用；熊果酸在0．39～1．56μg／mL下有保护作用；胡萝卜苷在浓度6．25～12．5μg／mL下表现出很强的修复作用，熊果酸在浓度0．39～3．12μg／mL时表现出的修复作用和洛伐他汀相当． 展开更多

关键词 山楂 胡萝卜苷 熊果酸 Β-谷甾醇 人微血管内皮细胞 氧化损伤

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石斛酚对同型半胱氨酸诱导的人微血管内皮细胞NLRP3炎性体激活的影响 被引量：4

13

作者 王伟 陈亚军 +2 位作者 耿明 徐忠东 戴敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1089-1094,共6页

目的观察石斛酚(gigantol)对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的人微血管内皮细胞(HMEC-1)NLRP3炎性体激活的影响,分析石斛酚对血管内皮细胞炎症反应的抑制作用及机制。方法采用形态学观察和MTT法检测细胞活性;采用ELISA法检测白细... 目的观察石斛酚(gigantol)对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的人微血管内皮细胞(HMEC-1)NLRP3炎性体激活的影响,分析石斛酚对血管内皮细胞炎症反应的抑制作用及机制。方法采用形态学观察和MTT法检测细胞活性;采用ELISA法检测白细胞介素-1β(IL^-1β)浓度;采用Western blot法分析NLRP3、ASC、Caspase-1和TXNIP蛋白表达;采用流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平。结果Hcy(100μmol·L^-1)、石斛酚(1~10μmol·L^-1)对HMEC-1细胞活性未观察到明显影响;Hcy可明显增加细胞ROS水平,诱导TXNIP、NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白表达,促进HMEC-1细胞IL^-1β分泌;石斛酚能明显逆转Hcy上调的HMEC-1细胞ROS和上清液IL^-1β水平,抑制Hcy诱导的TXNIP蛋白过表达和NLRP3炎性体激活。结论石斛酚能逆转Hcy激活的HMEC-1细胞NLRP3炎性体,抑制血管内皮细胞炎症反应,ROS/TXNIP通路可能参与石斛酚对Hcy诱导的NLRP3炎性体激活的抑制作用。 展开更多

关键词 石斛酚 同型半胱氨酸 人微血管内皮细胞 NLRP3炎性体 活性氧物质 硫氧还蛋白互作蛋白

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线粒体凋亡参与EV-71感染致人微血管内皮细胞损伤的机制 被引量：1

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作者 李爽 梁若楠 +3 位作者 朱培育 纪望全 晋乐飞 段广才 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期357-364,共8页

肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)是一种嗜神经性肠道病毒,主要通过粪-口途径传播。然而,EV71感染导致微血管内皮细胞凋亡的机制尚未完全阐明。本研究使用临床分离的EV71毒株体外感染人微血管内皮细胞(Human microvascular endothelia... 肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)是一种嗜神经性肠道病毒,主要通过粪-口途径传播。然而,EV71感染导致微血管内皮细胞凋亡的机制尚未完全阐明。本研究使用临床分离的EV71毒株体外感染人微血管内皮细胞(Human microvascular endothelial cells,HMEC-1),探讨线粒体损伤在EV71感染损伤HMEC-1的作用机制。MTT法检测结果发现,HMEC-1感染EV71 24 h后细胞活力下降到47%(P <0.01);透射电子显微镜观察到EV71感染后的HMEC-1胞质中出现大量空泡,并且可观察到HMEC-1线粒体肿胀、变性并明显空泡化,部分线粒体嵴断裂、减少,少量胞质内可见散在或游离的病毒颗粒;JC-1染色结果显示EV71感染32 h后,HMEC-1线粒体膜电位明显下降;荧光探针DCFH-DA检测到病毒感染后的细胞线粒体活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平明显升高;随着EV71感染时间的增加,EV71-VP1、Cleaved-caspase 3、Cleaved-caspase 8、Cleaved-caspase 9、Bax蛋白水平逐渐升高,并且细胞中的Cyt C蛋白从线粒体转移到了细胞质;此外,实时荧光定量PCR法结果显示,随着感染时间增加,HMEC-1表达TNF-α、IL-6、IL-1β的mRNA表达水平逐渐升高。而通过N-乙酰半胱胺酸干预后,可显著降低病毒感染诱导内皮细胞促凋亡蛋白和TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA的表达(P <0.01)。因此,本研究发现EV71感染通过线粒体途径诱导HMEC-1凋亡,且这一过程受ROS介导。 展开更多

关键词 肠道病毒71型 人微血管内皮细胞 凋亡 线粒体 膜电位 活性氧

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水解南珠液通过Wnt/β-catenin通路调节细胞自噬对人微血管内皮细胞氧化应激损伤的影响

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作者 岑妍慧 高月 +7 位作者 林江 刘鹏 贾微 杨瑞 黄威 刘鑫 黄泽萍 宁志莹 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 北大核心 2023年第1期72-79,共8页

目的以人微血管内皮细胞(HMEC-1)为研究对象,采用H_(2)O_(2)诱导人微血管内皮细胞氧化应激损伤,探讨水解南珠液调节细胞自噬从而抑制氧化应激损伤的机制。方法采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法和活性氧荧光探针(DCFH-DA)法建立人微血管内... 目的以人微血管内皮细胞(HMEC-1)为研究对象,采用H_(2)O_(2)诱导人微血管内皮细胞氧化应激损伤,探讨水解南珠液调节细胞自噬从而抑制氧化应激损伤的机制。方法采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法和活性氧荧光探针(DCFH-DA)法建立人微血管内皮细胞氧化应激损伤模型。采用Western blot法检测氧化应激损伤模型细胞自噬情况和Wnt/β-catenin通路变化情况。水解南珠液作用后,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Wnt信号通路关键蛋白Wnt3a和β-catenin基因的mRNA水平和透射电镜观察细胞自噬小体含量。通过Western blot法检测不同时间点Wnt3a、β-catenin和LC3-Ⅱ蛋白表达的时序性改变。采用WST-1法检测细胞培养液中超氧化物歧化酶活性;采用硝酸还原酶法测定细胞NO分泌量。最后采用TUNEL法检测水解南珠液对氧化应激损伤细胞凋亡情况的影响。结果使用200μmol/L浓度的H_(2)O_(2)作用HMEC-16 h,成功建立了内皮细胞氧化应激损伤模型。与对照组相比,氧化应激损伤组细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达上扬,但Wnt3a和β-catenin蛋白表达却下降(均P<0.05)。经透射电镜观察,氧化应激损伤组细胞内还可见较多明显的双层膜结构的自噬小体。水解南珠液处理后,随着作用时间延长,细胞内自噬小体的含量越来越少且Wnt3a和β-catenin mRNA表达水平越来越高(均P<0.05)。且在Wnt3a和β-catenin呈时序性表达上扬的同时,LC3-Ⅱ蛋白表达则呈相对应的时序性减少。经水解南珠液处理后,细胞SOD活性与氧化应激损伤组相比,呈显著增加趋势。水解南珠液组细胞NO分泌量为(121.78±0.17)μmol/L,明显高于氧化应激损伤组的(70.43±0.74)μmol/L(P<0.05)。氧化应激损伤组的TUNEL阳性细胞为20.3±2.8,水解南珠液作用组则减少为10.4±2.3(P<0.05)。结论水解南珠液能促进氧化损伤HMEC-1细胞的SOD活性、NO分泌和减少氧化损伤引起的细胞凋亡率,从而抑制氧化应激损伤程度,这些作用与水解南珠液能激活Wnt/β-catenin信号通路从而减轻细胞自噬有关。 展开更多

关键词 水解南珠液 WNT/Β-CATENIN 细胞自噬 人微血管内皮细胞 氧化应激

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血府逐瘀胶囊含药血清对人微血管内皮细胞KLF2表达的影响 被引量：4

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作者 王一铮 王鹤 +2 位作者 蔡飞 林凡 高冬 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2021年第15期1356-1361,共6页

目的探讨血府逐瘀胶囊调控血管新生的可能作用机制。方法制备血府逐瘀胶囊含药血清和空白血清。分别以1.25%、2.5%、5%血府逐瘀胶囊含药血清或空白血清处理人微血管内皮细胞(HMEC-1,2.5×10^(5)个/孔)24h、48h和72h,每组设3个复孔... 目的探讨血府逐瘀胶囊调控血管新生的可能作用机制。方法制备血府逐瘀胶囊含药血清和空白血清。分别以1.25%、2.5%、5%血府逐瘀胶囊含药血清或空白血清处理人微血管内皮细胞(HMEC-1,2.5×10^(5)个/孔)24h、48h和72h,每组设3个复孔。通过体外成血管试验检测各组细胞管腔形成情况,选择对管腔数先促进后抑制的最佳浓度血府逐瘀胶囊含药血清进行后续试验。HMEC-1细胞2.5×10^(5)个/孔分为血府逐瘀胶囊含药血清组和空白血清组,分别用2.5%血府逐瘀胶囊含药血清或空白血清处理12h、24h、48h。采用实时定量PCR和Wesstern Blot法检测Krüppel样因子2(KLF2)蛋白及mRNA水平。结果 1.25%和2.5%血府逐瘀胶囊含药血清干预HMEC-1细胞48h管腔数均显著增多(P<0.05或P<0.01);干预HMEC-1细胞72h, 1.25%血府逐瘀胶囊含药血清组管腔数显著增多,2.5%血府逐瘀胶囊含药血清组管腔数显著减少(P<0.01)。与同浓度血府逐瘀胶囊含药血清干预24h比较,1.25%血府逐瘀胶囊含药血清干预48、72h, 2.5%血府逐瘀胶囊含药血清干预48h,管腔数均显著增多(P<0.01);与同浓度血府逐瘀胶囊含药血清干预48h比较,仅2.5%血府逐瘀胶囊含药血清干预72h管腔数显著减少(P<0.01)。因此,选择2.5%血府逐瘀胶囊含药血清进行后续试验。与空白血清组比较,血府逐瘀胶囊含药血清组12、24h KLF2蛋白及mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05),48h KLF2蛋白水平显著下降、KLF2 mRNA水平显著提高(P<0.05或P<0.01)。与干预12h和24h血府逐瘀含药血清组比较,干预48h血府逐瘀胶囊含药血清组KLF2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),KLF2 mRNA水平均显著提高(P<0.05)。结论血府逐瘀胶囊可通过下调KLF2表达短时促进血管新生。 展开更多

关键词 血府逐瘀胶囊 血管新生 血清药理学 人微血管内皮细胞 Krüppel样因子2

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猪松弛素对人肺微血管内皮细胞产生一氧化氮的影响 被引量：2

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作者 傅锐斌 邱健 +4 位作者 向定成 马骏 何建新 洪长江 张金霞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1606-1609,共4页

目的观察猪松弛素(pRLX)对人肺微血管内皮细胞(HMVECs)产生一氧化氮(NO)的影响,探讨这种效应的可能机制。方法Western blotting检测不同浓度pRLX作用下HMVECs诱生型一氧化氮合成酶(iNOS)和原生型一氧化氮合成酶(cNOS)蛋白表达;Griess法... 目的观察猪松弛素(pRLX)对人肺微血管内皮细胞(HMVECs)产生一氧化氮(NO)的影响,探讨这种效应的可能机制。方法Western blotting检测不同浓度pRLX作用下HMVECs诱生型一氧化氮合成酶(iNOS)和原生型一氧化氮合成酶(cNOS)蛋白表达;Griess法检测不同浓度pRLX分别在不同的作用时间下对HMVECs NO产量的影响;Griess法检测选择性iNOS抑制剂氨基胍、非选择性NOS抑制剂L-单甲基精氨酸和NF-κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸对pRLX刺激HMVECs产生NO效应的影响。结果pRLX促进HMVECs iNOS蛋白表达,但对cNOS表达影响不显著;pRLX呈浓度依赖性促进HMVECs NO产量,但24 h至96 h范围内各pRLX作用时间组之间NO产量无显著差异;氨基胍、L-单甲基精氨酸和吡咯烷二硫氨基甲酸均能阻断pRLX促进HMVECs产生NO的效应。结论pRLX促进HMVECs iNOS表达和NO生成。 展开更多

关键词 猪松弛素 人微血管内皮细胞 诱生型一氧化氮合成酶 一氧化氮

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晚期糖基化终产物引起的RhoA和ROCK在人皮肤微血管内皮细胞的分布变化 被引量：2

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作者 王吉萍 陈波 +3 位作者 李强 郭晓华 王陵军 黄巧冰 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期341-344,共4页

目的观察在晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白作用下,小G蛋白RhoA及其激活的激酶ROCK在人微血管内皮细胞中分布的变化。方法培养人皮肤微血管内皮细胞株,分别以糖基化修饰的人血清白蛋白(AGE-HSA)处理不同的浓度和时间,用免疫荧光染... 目的观察在晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白作用下,小G蛋白RhoA及其激活的激酶ROCK在人微血管内皮细胞中分布的变化。方法培养人皮肤微血管内皮细胞株,分别以糖基化修饰的人血清白蛋白(AGE-HSA)处理不同的浓度和时间,用免疫荧光染色法、激光共聚焦显微镜观察RhoA和磷酸化ROCK在细胞中的分布变化;并用活性型RhoA L63或失活型的RhoA N19转染细胞后再给予AGE-HSA刺激,观察磷酸化ROCK细胞内分布的变化。结果 AGE-HSA刺激可以导致RhoA在胞浆中分布增多,其变化随着AGE-HSA作用时间的延长和剂量的增加更加明显。RhoA的下游激酶被活化的磷酸化ROCK在人微血管内皮细胞中的分布与RhoA类似;用失活型RhoAN19先处理细胞后,AGE-HSA介导的ROCK分布变化被抑制。结论晚期糖基化终产物刺激引起小G蛋白RhoA在细胞内分布变化,并导致其下游激酶ROCK磷酸化和定位变化。 展开更多

关键词 晚期糖基化终产物 人微血管内皮细胞 RHOA ROCK

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小鼠脊髓背根神经节细胞与人微血管内皮细胞共培养对细胞增殖的影响 被引量：1

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作者 原泉 程扬 +2 位作者 杨亚帆 孙立 郭金明 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期135-138,共4页

目的 观察小鼠脊髓背根神经节细胞（DRGC）与人微血管内皮细胞（HMVEC）共培养对细胞增殖的影响,并探讨其机制.方法 分离培养小鼠DRGC,并与HMVEC进行共培养,设为DRGC组、HMVEC组、DRGC＋ HMVEC组.噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖,实时定量... 目的 观察小鼠脊髓背根神经节细胞（DRGC）与人微血管内皮细胞（HMVEC）共培养对细胞增殖的影响,并探讨其机制.方法 分离培养小鼠DRGC,并与HMVEC进行共培养,设为DRGC组、HMVEC组、DRGC＋ HMVEC组.噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖,实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）及Western blot检测血管内皮生长因子（VEGF）、神经生长因子（NGF）、增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞周期蛋白D1（Cyclin Dl） mRNA及蛋白的表达.结果 细胞培养24h后,DRGC＋ HMVEC组相对于DRGC组和HMVEC组的细胞增殖率分别为136.29％和137.45％,细胞增殖能力显著提高（P＜0.05）.VEGF、NGF、PCNA和Cyclin Dl mRNA和蛋白的表达在DRGC＋HMVEC组中最高,与其他两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 共培养DRGC和HMVEC能够促进VEGF和NGF的表达,并可能通过调控PCNA和Cyclin D1的表达促进共培养体系细胞增殖能力. 展开更多

关键词 小鼠脊髓背根神经节细胞 人微血管内皮细胞 神经生长因子 血管内皮细胞生长因子 增殖

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人微血管内皮细胞促进背根神经节细胞增殖的机制

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作者 原泉 程扬 +1 位作者 杨亚帆 孙立 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1547-1551,共5页

目的 探讨共培养条件下人微血管内皮细胞（HMVEC）对背根神经节细胞（DRGC）增殖的调控机制.方法 分离培养小鼠DRGC,采用Transwell半透膜建立双层细胞共培养体系,实验设DRGC单独培养组、DRGC与HMVEC共培养组、SU5416组和二甲基亚砜（DMS... 目的 探讨共培养条件下人微血管内皮细胞（HMVEC）对背根神经节细胞（DRGC）增殖的调控机制.方法 分离培养小鼠DRGC,采用Transwell半透膜建立双层细胞共培养体系,实验设DRGC单独培养组、DRGC与HMVEC共培养组、SU5416组和二甲基亚砜（DMSO）组.SU5416组预先用血管内皮生长因子受体2（Flk-1）抑制剂SU5416处理HMVEC 6 h后再与DRGC共培养.相差显微镜观察各组DRGC生长情况;噻唑蓝（MTT）检测DRGC细胞增殖;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测共培养细胞上清液中血管内皮生长因子（VEGF）、神经生长因子（NGF）的表达;Western blot检测磷酸化Flk-1（p-Flk-1）、增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期素（Cyclin） D1细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）、磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）的表达.结果 与DRGC单独培养组比较,HMVEC共培养组DRGC增殖率显著增加,在培养12h后最为明显,增加39.07％ （P ＜0.01）,VEGF、NGF、PCNA、Cyclin D1、p-Flk-1、p-ERK1/2表达量明显增加（P＜0.05）.DMSO组与共培养组差异无统计学意义（P＞0.05）.与DMSO组比较,SU5416组DRGC增殖率显著降低,于培养12 h后下降最明显,降低23.93％（P＜0.01）.VEGF、NGF、PCNA、Cyclin D1表达量减少,Flk-1与ERK1/2磷酸化水平降低,p-Flk-1和p-ERK1/2相对表达量分别降低50.69％和23.12％ （P ＜0.01）.结论 Flk-1抑制剂可阻断HMVEC共培养对DRGC增殖促进作用,HMVEC共培养可能通过VEGF/Flk-1途径激活ERK/丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路,进而促进DRGC增殖. 展开更多

关键词 人微血管内皮细胞 背根神经节细胞 共培养 增殖

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