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微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白在皮肤屏障功能修复中的应用效果
1
作者 于文渊 耿栋芸 +3 位作者 庄卉如 陆蒋惠文 邱丹丹 赵天兰 《临床医学研究与实践》 2024年第7期102-105,共4页
目的探究微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白治疗因皮肤炎性衰老导致的皮肤屏障功能下降的有效性及安全性。方法选取2020年6月至2021年5月在本院接受面部皮肤治疗的30例患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组(重组Ⅲ型人源化胶... 目的探究微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白治疗因皮肤炎性衰老导致的皮肤屏障功能下降的有效性及安全性。方法选取2020年6月至2021年5月在本院接受面部皮肤治疗的30例患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组(重组Ⅲ型人源化胶原蛋白)与治疗组(微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白),各15例。治疗后定期对患者进行随访,分别进行主观疗效评价及客观疗效评价。结果治疗后4、8、12周,治疗组的满意度显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,治疗组的皮肤皱纹、纹理、红区、毛孔、弹性、皮肤经皮失水及皮肤含水量改善明显(P<0.05);对照组治疗后油脂改善明显(P<0.05)。治疗后12周,治疗组的总症状评分显著低于对照组(P<0.05)。结论微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白对皮肤修复有较好的疗效,可增强皮肤屏障功能,为改善皮肤屏障功能、治疗因皮肤屏障受损引起的炎性衰老提供了新选择。 展开更多
关键词 微针 重组Ⅲ型人源化胶原蛋白 炎性衰老 皮肤屏障功能
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重组Ⅰ型人源化胶原蛋白“福活因子”的生物合成及其结构表征研究
2
作者 全冰华 王勇 +4 位作者 邓宏鸿 庞晓明 滕永慧 李璐 方伟 《医药前沿》 2024年第1期1-3,7,共4页
目的:筛选获得含胶原蛋白保守序列hCol.1基因的重组人源化Ⅰ型胶原蛋白高效表达基因工程菌和高产创新融合蛋白,并通过检测其理化特征验证表达产物。方法:将His6-SUMO-hCol.1重组基因大肠杆菌高密度发酵后经镍亲和层析和离子交换层析两... 目的:筛选获得含胶原蛋白保守序列hCol.1基因的重组人源化Ⅰ型胶原蛋白高效表达基因工程菌和高产创新融合蛋白,并通过检测其理化特征验证表达产物。方法:将His6-SUMO-hCol.1重组基因大肠杆菌高密度发酵后经镍亲和层析和离子交换层析两步纯化浓缩获得重组蛋白,检测理化测试特征。结果:测序证明克隆基因与hCol.1序列高度一致,Blast比对蛋白序列与人Ⅰ型胶原蛋白高度同源,折叠结构与人Ⅲ型胶原蛋白高度类似。表观分子量55~60kD,产量36.4mg/L,纯度>95%。等电点检测、氨基酸组成和圆二色谱等实验结合高级结构预测分析,证明其理化性状与蛋白结构符合胶原蛋白特征。结论:成功将人Ⅰ型胶原蛋白保守功能结构域hCol.1与SUMO等肽段重组融合表达并命名为福活因子(FHTFF),筛选出基因工程菌pET21a(+)-FHTFF/BL21,纯化产物“福活因子”的理化特性、序列和结构与人Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白肽段高度相似,属于重组人源化胶原蛋白新生物材料。 展开更多
关键词 重组Ⅰ型人源化胶原蛋白 福活因子 基因工程菌
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重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶在老年萎缩性阴道炎患者中的效果观察
3
作者 修艳春 《中国科技期刊数据库 医药》 2024年第2期0054-0057,共4页
研究对老年萎缩性阴道炎患者采取重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶治疗后的效果。方法 摘取我院皮肤科收治的老年萎缩性阴道炎患者60例进行研究,摘取时间范围2022年11月至2023年5月,以电脑随机数字表法将摘取的患者分成参考组和凝胶组,... 研究对老年萎缩性阴道炎患者采取重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶治疗后的效果。方法 摘取我院皮肤科收治的老年萎缩性阴道炎患者60例进行研究,摘取时间范围2022年11月至2023年5月,以电脑随机数字表法将摘取的患者分成参考组和凝胶组,两组均有患者30例,参考组患者采取局部抗炎治疗。凝胶组在参考组的基础上实施重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶治疗,将两组的治疗效果、阴道pH值、阴道症状和体征评分相比较。结果 ①就治疗效果而言,参考组稍差,凝胶组更高,差异体现统计学差异(P<0.05)。②对比患者阴道pH值可知参考组更差,组间差异体现统计学(P<0.05)。③比较组间患者的体征以及相关症状,可知参考组更差,组间数据差异体现出统计学意义(P<0.05)。结论 老年萎缩性阴道炎患者采取重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶治疗后,患者的阴道pH值、阴道症状和体征评分均明显改善,治疗效果比较明显,可在临床上加大力度推广。 展开更多
关键词 萎缩性阴道炎 治疗效果 性激素 重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶
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重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料在激光术后创面修复中的疗效观察
4
作者 韩伟 《中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生》 2024年第2期0065-0068,共4页
分析重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料在激光术后创面修复中的疗效。方法 选取我院在2022年6月~2023年8月期间实施激光术治疗的78例患者,随机分为两组,即对照组和实验组。对照组仅接受激光术治疗、实验组在激光术治疗后外用重组Ⅲ型... 分析重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料在激光术后创面修复中的疗效。方法 选取我院在2022年6月~2023年8月期间实施激光术治疗的78例患者,随机分为两组,即对照组和实验组。对照组仅接受激光术治疗、实验组在激光术治疗后外用重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料,对其应用情况进行比较分析。结果 实验组治疗总有效率和对照组相比较高(P <0.05);干预后的面部症状评分低于对照组(P <0.05);创面愈合时间短于对照组(P <0.05)。结论 重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料对激光术后创面修复的效果较好,能减轻患者的不适症状,促进其创面更快愈合,患者的认可度较高,所以值得应用。 展开更多
关键词 重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料 激光术 创面修复
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hKDR^(+/+)人源化及Rag1^(-/-)基因缺陷新型双靶点遗传修饰荷瘤小鼠模型的建立
5
作者 刘甦苏 吴勇 +5 位作者 曹愿 赵皓阳 翟世杰 孙晓炜 李琳丽 范昌发 《实验动物与比较医学》 CAS 2023年第2期103-111,共9页
目的通过增强血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)人源化小鼠(hKDR^(+/+))接纳不同来源的小鼠肿瘤细胞系的潜力,建立能支持多种肿瘤细胞系成瘤的、可评价针对VEGFR靶点药物的新型荷瘤小鼠模型。... 目的通过增强血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)人源化小鼠(hKDR^(+/+))接纳不同来源的小鼠肿瘤细胞系的潜力,建立能支持多种肿瘤细胞系成瘤的、可评价针对VEGFR靶点药物的新型荷瘤小鼠模型。方法首先建立基于hKDR^(+/+)人源化小鼠模型评价针对VEGFR靶点抗体体内活性的方法,同时采用CRISPR/Cas9技术构建重组激活基因1(recombination activating gene 1,Rag1)敲除的C57BL/6N小鼠(命名为Rag1^(-/-)小鼠)。然后将Rag1^(-/-)小鼠与hKDR^(+/+)小鼠交配,筛选获得双基因纯合、双靶点基因修饰的hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠。最后在hKDR^(+/+)、Rag1^(-/-)、hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)和C57BL/6N小鼠上测试不同小鼠品系来源肿瘤细胞系的体内肿瘤生长差异。结果针对VEGFR靶点设计的抗体在hKDR^(+/+)小鼠体内表现出明显的抗肿瘤活性,与PBS组相比,肿瘤体积明显减小(P<0.01),肿瘤质量明显减轻(P<0.05)。Rag1^(-/-)小鼠、hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠的外周血B细胞和T细胞数量均明显减少(P<0.05,P<0.001)。C57BL/6小鼠来源的MC38细胞接种7 d后,在hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)、Rag1^(-/-)、C57BL/6N和hKDR^(+/+)四组小鼠体内均可见肿瘤生长。BALB/c小鼠来源的CT26细胞接种10 d后,仅在hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)和Rag1^(-/-)小鼠体内见到肿瘤生长,在C57BL/6N及hKDR^(+/+)小鼠中均未见肿瘤生长;接种后3周,hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠的成瘤体积明显大于Rag1^(-/-)小鼠(P<0.01)。结论获得了Rag1基因敲除小鼠,并进一步筛选获得新型hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)双靶点基因修饰小鼠模型;Rag1基因缺失时,不同品系小鼠来源的肿瘤细胞系更易成瘤。这提示可以通过降低hKDR^(+/+)人源化小鼠的免疫反应能力,增强或扩大该模型小鼠接纳肿瘤细胞系的范围,构建多种可用于评价VEGFR靶点药物的荷瘤小鼠模型。 展开更多
关键词 hKDR^(+/+)人源化小鼠 Rag1^(-/-)基因敲除小鼠 VEGFR靶点 抗体 肿瘤
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重组III型人源化胶原蛋白修护贴敷料联合光子嫩肤对不适症状以及肤质改善的研究
6
作者 张亚丽 《中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生》 2023年第6期0049-0052,共4页
评价重组III型人源化胶原蛋白修护贴敷料在光子嫩肤术后缓解不适症状以及对肤质改善的作用。方法 选择2022年7月—2023年2月于本医院门诊接受光子嫩肤治疗的120例患者,根据1:1简单随机分配原则把患者分为联合组与对照组各60例采用光子... 评价重组III型人源化胶原蛋白修护贴敷料在光子嫩肤术后缓解不适症状以及对肤质改善的作用。方法 选择2022年7月—2023年2月于本医院门诊接受光子嫩肤治疗的120例患者,根据1:1简单随机分配原则把患者分为联合组与对照组各60例采用光子嫩肤治疗。联合组给予重组III型人源化胶原蛋白修护贴敷料联合光子嫩肤治疗,对照组用保湿贴敷料代替重组III型人源化胶原蛋白修护贴敷料,同样联合光子嫩肤治疗,两组都治疗观察4周。结果 1、联合组和对照组在术后第2、6、10天的不适症状评分均呈逐渐下降趋势,其中联合组改善程度更为明显。对光子术后即刻与术后第8天评分差值对比,联合组相较对照组具有统计学差异。2、首次进行光子术前,第二次光子术前,第三次光子术前,第12周结束对肤质情况信息录取。联合组和对照组,肤质均有所改善。第12周较光子术前改善对比,联合组改善更为明显,且P<0.05,差异有统计学意义。结论 1、重组III型人源化胶原蛋白修护贴敷料可明显缓解光子术后面部皮肤产生的不适症状,有良好的辅助治疗作用。2、重组III型人源化胶原蛋白修护贴敷料联合光子嫩肤能更好的改善肤质,起到肤质改善的作用。 展开更多
关键词 重组III型人源化胶原蛋白修护贴敷料 光子嫩肤 不适症状 肤质改善
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用于乙型肝炎病毒相关研究的人源化嵌合肝脏小鼠模型应用进展
7
作者 沈磊 张思航 +1 位作者 周太成 韦嘉 《山东医药》 CAS 2023年第8期91-94,共4页
人源化嵌合肝脏小鼠模型是一类具有肝损伤及免疫缺陷特点的小鼠模型。该小鼠模型体内携带人肝细胞,成功攻克了由于乙型肝炎病毒(HBV)宿主范围狭窄导致的HBV易感动物模型缺乏问题。近年来,随着各种人源化嵌合肝脏小鼠模型的逐渐完善,使得... 人源化嵌合肝脏小鼠模型是一类具有肝损伤及免疫缺陷特点的小鼠模型。该小鼠模型体内携带人肝细胞,成功攻克了由于乙型肝炎病毒(HBV)宿主范围狭窄导致的HBV易感动物模型缺乏问题。近年来,随着各种人源化嵌合肝脏小鼠模型的逐渐完善,使得HBV相关动物研究的顺利开展成为可能。从Alb-uPA嵌合肝脏小鼠模型、Alb-rtTA/TRE-uPA嵌合肝脏小鼠模型、FRG嵌合小鼠模型到TK-NOG嵌合小鼠模型、人源化双嵌合小鼠模型逐渐克服了宿主物种限制和疾病建模方面的障碍。人源化双嵌合小鼠模型同时具备人免疫系统及人肝细胞,在HBV免疫机制研究及疫苗研发中具有极大的应用前景。了解不同人源化嵌合肝脏小鼠模型的制作情况、适用情况及优缺点,可为相关研究中HBV易感动物模型的选择提供参考。 展开更多
关键词 人源化嵌合肝脏小鼠模型 乙型肝炎病毒 动物模型
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重组人源化抗人IL-6R单克隆抗体对类风湿关节炎临床疗效及骨保护的影响
8
作者 葛洪亮 柳毓文 胡建康 《中国医学创新》 CAS 2023年第24期134-137,共4页
目的:观察重组人源化抗人IL-6R单克隆抗体对类风湿关节炎临床疗效、骨保护的影响,为类风湿关节炎治疗提供更多、更积极手段。方法:选取2019年9月—2020年9月萍乡市人民医院门诊及住院就诊、确诊类风湿关节炎患者120例,按照随机数字表法... 目的:观察重组人源化抗人IL-6R单克隆抗体对类风湿关节炎临床疗效、骨保护的影响,为类风湿关节炎治疗提供更多、更积极手段。方法:选取2019年9月—2020年9月萍乡市人民医院门诊及住院就诊、确诊类风湿关节炎患者120例,按照随机数字表法分组,分为对照组和观察组。对照组为安慰剂(淀粉)+甲氨蝶呤+稳定剂量泼尼松≤10 mg/d;观察组为重组人源化抗人IL-6R单克隆抗体注射液+甲氨蝶呤+稳定剂量泼尼松≤10 mg/d,对比疗效、关节肿胀、关节压痛、骨密度、骨钙素等成果。结果:治疗3个月后,观察组的临床总有效率高于对照组(P<0.05),红细胞沉降率、类风湿因子均低于对照组(P<0.05),观察组骨密度T值、骨钙素均优于对照组(P<0.05)。观察组关节肿胀、关节压痛个数均少于对照组,观察组VAS评分及DAS28均低于对照组(P<0.05)。在治疗期间不良反应发生率上,观察组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在甲氨蝶呤及稳定剂量泼尼松≤10 mg/d基础上,采用重组人源化抗人IL-6R单克隆抗体对类风湿关节炎具有良好的临床疗效,还有助于改善骨保护、骨密度指标,同时不良反应较少。 展开更多
关键词 重组人源化抗人IL-6R 单克隆抗体 类风湿关节炎 骨保护
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重组人源化抗白介素-6受体单克隆抗体对类风湿关节炎临床疗效及骨代谢的影响
9
作者 葛洪亮 谢洁 +1 位作者 柳毓文 胡建康 《中国医学创新》 CAS 2023年第26期19-23,共5页
目的:探讨重组人源化抗白介素-6受体单克隆抗体对类风湿关节炎(RA)临床疗效及骨代谢的影响。方法:选取2019年8月—2022年3月于萍乡市人民医院就诊并确诊RA患者60例,按随机数字表法将患者分为治疗组和对照组,各30例。治疗组采用重组人源... 目的:探讨重组人源化抗白介素-6受体单克隆抗体对类风湿关节炎(RA)临床疗效及骨代谢的影响。方法:选取2019年8月—2022年3月于萍乡市人民医院就诊并确诊RA患者60例,按随机数字表法将患者分为治疗组和对照组,各30例。治疗组采用重组人源化抗白介素-6受体单克隆抗体+甲氨蝶呤+稳定剂量泼尼松治疗,对照组采用甲氨蝶呤+稳定剂量泼尼松治疗。于治疗前和治疗3、6个月检测两组患者机体的C反应蛋白、类风湿因子、血沉、骨钙素(OC)、骨密度,评估两组患者的视觉模拟评分法(VAS)评分、Sharp评分及安全性。结果:两组治疗3、6个月的C反应蛋白、类风湿因子、血沉、VAS评分均明显低于治疗前(P<0.05),且治疗组治疗3、6个月上述指标均明显低于对照组(P<0.05)。两组治疗3、6个月的OC均高于治疗前(P<0.05),且治疗组治疗3、6个月OC均高于对照组(P<0.05);两组治疗前后股骨颈骨密度组间和组内比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组治疗3、6个月的Sharp评分均低于治疗前(P<0.05),且治疗组治疗3、6个月的Sharp评分均低于对照组(P<0.05)。治疗组不良事件发生率虽高于对照组,但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:重组人源化抗白介素-6受体单克隆抗体可有效降低RA患者的C反应蛋白、类风湿因子及血沉水平,缓解其疼痛,升高OC,降低Sharp评分,且不会增加不良事件的发生,安全性较高。 展开更多
关键词 重组人源化抗白介素-6受体单克隆抗体 类风湿关节炎 骨代谢
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人源化小鼠模型的构建及其相关医学应用
10
作者 侯宗昊 王馨 +1 位作者 陈姝彤 张若文 《中兽医学杂志》 2023年第8期82-84,共3页
在过去近四十年中,在生物医学研究中,人源化小鼠模型的发展和普遍应用,极大地加速了将基础研究成果转化为临床潜在诊断和治疗策略的速度。人源化免疫系统重建的技术发展随着人源化小鼠模型的进步而得以提高,并且构建模型的技术手段也日... 在过去近四十年中,在生物医学研究中,人源化小鼠模型的发展和普遍应用,极大地加速了将基础研究成果转化为临床潜在诊断和治疗策略的速度。人源化免疫系统重建的技术发展随着人源化小鼠模型的进步而得以提高,并且构建模型的技术手段也日趋成熟。肿瘤免疫治疗已经迎来了新时代,人源化小鼠模型已经成为了有效的研究工具,主要应用在评估新疗法、指导免疫治疗以及研究组合疗法中,并且其在肿瘤免疫治疗研究中应用有望推进临床治疗的发展,为临床治疗前的研究提供有效的研究工具。 展开更多
关键词 人源化小鼠 肿瘤 免疫系统 小鼠模型
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消毒剂对重组Ⅲ型人源化胶原蛋白促细胞黏附活性的影响
11
作者 李怡桐 孙艳艳 +3 位作者 乔绍俊 侯丽莉 李熳琴 于玉凤 《日用化学工业（中英文）》 CAS 北大核心 2023年第7期789-795,共7页
通过CCK8实验探究75%乙醇、碘伏、葡萄糖酸洗必泰、苯扎氯铵、苯扎溴铵对细胞的毒性以及对重组Ⅲ型人源化胶原蛋白(rhColⅢ)促细胞的黏附活性的影响,预测消毒剂的使用在面部填充时对胶原蛋白活性的影响,为临床应用提供指导。结果显示:... 通过CCK8实验探究75%乙醇、碘伏、葡萄糖酸洗必泰、苯扎氯铵、苯扎溴铵对细胞的毒性以及对重组Ⅲ型人源化胶原蛋白(rhColⅢ)促细胞的黏附活性的影响,预测消毒剂的使用在面部填充时对胶原蛋白活性的影响,为临床应用提供指导。结果显示:各消毒剂对NIH/3T3小鼠胚胎成纤维细胞和HFB人皮肤成纤维细胞均表现出细胞毒性,比较结果为:葡萄糖酸洗必泰<苯扎氯铵、苯扎溴铵<75%乙醇、碘伏,该结果也间接提示75%乙醇、碘伏消毒效果较佳;将各消毒剂原液稀释100倍后,其对rhColⅢ促细胞黏附活性影响比较为:葡萄糖酸洗必泰、苯扎氯铵<75%乙醇<碘伏、苯扎溴铵。碘伏和苯扎溴铵工作液直接接触rhColⅢ均显著降低其促细胞黏附活性,碘伏、葡萄糖酸洗必泰、苯扎溴铵工作液直接接触rhColⅢ可导致其发生聚集。 展开更多
关键词 重组人源化胶原蛋白 填充 消毒剂 细胞毒性 细胞黏附活性
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应用CRISPR/Cas9技术构建Tet-on调控表达uPA的人源化肝细胞嵌合小鼠
12
作者 白家驷 毛青 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第13期1405-1412,共8页
目的构建Tet-on调控小鼠肝脏特异性表达uPA基因的NOD-SCID背景的转基因小鼠,并通过人肝癌细胞移植修复小鼠亚急性肝损伤进而构建人源化肝细胞嵌合小鼠。方法采用CRISPR/Cas9技术,在gRNA引导下,Cas9核酸内切酶于Rosa26基因位点切割并编辑... 目的构建Tet-on调控小鼠肝脏特异性表达uPA基因的NOD-SCID背景的转基因小鼠,并通过人肝癌细胞移植修复小鼠亚急性肝损伤进而构建人源化肝细胞嵌合小鼠。方法采用CRISPR/Cas9技术,在gRNA引导下,Cas9核酸内切酶于Rosa26基因位点切割并编辑,插入目的基因pTight-uPA-pA-Alb promoter-rtTA-pA表达框。使目的基因能跟随染色体稳定遗传,生物学功能保持稳定。新培育的转基因小鼠分为4组:诱导组(n=17)、移植组(n=16)、未诱导组(n=5)和空白对照组(n=5)。诱导组经强力霉素诱导3周,肝脏中表达的uPA能造成小鼠肝脏亚急性损伤;再通过人肝癌细胞移植修复。移植4周后,通过小鼠血清生化学、组织病理学,评估该人源化肝细胞嵌合小鼠的效果。结果诱导组小鼠血清中uPA、丙氨酸氨基转移酶(ALT)均高于未诱导组和空白对照组(P<0.01);移植组人白蛋白含量显著高于未移植组(P<0.01)。组织病理学HE染色发现人肝癌细胞参与小鼠肝组织的修复,激光共聚焦显微镜观察显示鼠肝脏中有人肝癌细胞聚集并表达人白蛋白,组化染色人角质蛋白(CK18)表达成阳性。结论新构建的转基因小鼠能通过强力霉素诱导小鼠肝脏中uPA表达,造成肝脏亚急性损伤,并通过人源肝癌细胞移植修复进而构建人源化肝细胞嵌合小鼠。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9技术 Rosa26基因位点 人源化 嵌合肝 转基因小鼠 尿激酶纤溶酶原激活物
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人源化更年期抑郁小鼠模型构建及评价
13
作者 曹晓静 武国富 +2 位作者 侯佳睿 宋雷 王小云 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期576-582,共7页
目的通过粪菌移植技术构建人源化抑郁小鼠模型,并对模型进行评价。方法将更年期抑郁人群和健康人群的粪便移植给“模拟无菌”小鼠,先将60只C57BL/6小鼠分为空白组、抑郁粪菌移植FMT-P组和健康粪菌移植FMT-H组。空白组(n=20)仅予普通饲... 目的通过粪菌移植技术构建人源化抑郁小鼠模型,并对模型进行评价。方法将更年期抑郁人群和健康人群的粪便移植给“模拟无菌”小鼠,先将60只C57BL/6小鼠分为空白组、抑郁粪菌移植FMT-P组和健康粪菌移植FMT-H组。空白组(n=20)仅予普通饲料喂养;FMT-P组(n=20)采用抗生素鸡尾酒疗法预处理,再进行抑郁人群粪菌移植制作模型;FMT-H组(n=20)则给予抗生素鸡尾酒疗法,再进行健康人群粪菌移植制作模型,均持续28 d。观察大鼠的一般情况和行为学检测(悬尾实验、新环境进食实验、糖水偏爱实验),ELISA测定血清多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、γ氨基丁酸(GABA)的水平,HE染色观察结肠组织病理。结果与空白组及FMT-H组相比,FMT-P组小鼠体重增长较慢,绝望时间明显延长,摄食时间及糖水偏好率明显下降,并伴有活动减少、毛发蓬乱发黄无泽、易掉落、精神萎靡倦怠等抑郁症状;其血清GABA含量、5-HT含量、DA含量显著降低,镜下可见结肠组织排列紊乱,腺体增多,局部炎性细胞浸润。结论抗生素鸡尾酒疗法结合粪菌移植技术可建立人源化抑郁小鼠模型。 展开更多
关键词 粪菌移植 抗生素鸡尾酒疗法 人源化抑郁模型 模型评价
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绿色荧光蛋白-荧光素酶标记的人源化非小细胞肺癌原位动物模型建立方法
14
作者 续畅 刘泽洲 +3 位作者 张灿 白玥 安志静 钟晓松 《广西医学》 CAS 2023年第18期2223-2227,2243,共6页
目的采用绿色荧光蛋白-荧光素酶(GL)标记的人类非小细胞肺癌(NSCLC)细胞建立人源化NSCLC原位动物模型。方法制备GL逆转录病毒液。将上述病毒液转染至处于对数生长期的人类NSCLC细胞株(H460细胞)后进行流式分选,从而构建稳定的GL阳性H46... 目的采用绿色荧光蛋白-荧光素酶(GL)标记的人类非小细胞肺癌(NSCLC)细胞建立人源化NSCLC原位动物模型。方法制备GL逆转录病毒液。将上述病毒液转染至处于对数生长期的人类NSCLC细胞株(H460细胞)后进行流式分选,从而构建稳定的GL阳性H460细胞(H460-GL细胞)。将15只Nod-Scid小鼠随机分为低剂量组(n=5)、中剂量组(n=5)、高剂量组(n=5),分别以H460-GL细胞1.0×10^(4)个/20μL、1.0×10^(6)个/20μL、1.0×10^(8)个/20μL的密度进行小鼠肺组织原位注射。实验期间观察各组小鼠的一般情况及存活情况。每周通过荧光活体成像观察各组小鼠体内肿瘤的成活、生长情况。造模后第35天处死成瘤小鼠,取肺组织进行病理组织学观察。结果(1)大部分小鼠出现呼吸系统肿瘤相关症状;濒死期小鼠胸腔内均出现不规则形状的白色肿瘤组织,且其与周围肺组织及心脏粘连严重。(2)造模后第22天开始各组小鼠逐渐死亡,于造模后第35天低剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠的存活率分别为80%(4/5)、20%(1/5)、0。(3)在低剂量组中,于造模后第14天仅有1只小鼠出现H460-GL细胞荧光,造模第28天的成瘤率为60%(3/5),且成瘤小鼠体内的荧光强度大小不一;在中剂量组、高剂量组中,所有小鼠在造模后第7天均出现H460-GL细胞荧光,且荧光均逐渐增强,在造模后第14天、第21天成瘤小鼠体内的荧光强度相似且较为均匀。结论该造模方法可获得稳定的人源化NSCLC原位动物模型,且操作简便、易于复制,可在动物体内模拟人类NSCLC发生、发展、转移过程,并能实时观察肿瘤大小与转移路径。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 原位动物模型 人源化 绿色荧光蛋白-荧光素酶 逆转录病毒 荧光活体成像
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PD-1人源化小鼠构建繁殖与基因型鉴定
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作者 李晓娟 孙岩峰 +2 位作者 修叶 李兴杰 李瑞生 《实验动物科学》 2023年第4期34-38,共5页
目的探讨PD-1人源化小鼠的繁育与基因型鉴定,为进一步研究相关小分子抑制剂的体内药效评价提供动物模型。方法通过构建PD-1人源化小鼠,获得F1代鼠4只,雌雄交配进行培育繁殖。对每窝仔鼠的数量,存活率等进行记录观察,随后对仔鼠剪尾提取... 目的探讨PD-1人源化小鼠的繁育与基因型鉴定,为进一步研究相关小分子抑制剂的体内药效评价提供动物模型。方法通过构建PD-1人源化小鼠,获得F1代鼠4只,雌雄交配进行培育繁殖。对每窝仔鼠的数量,存活率等进行记录观察,随后对仔鼠剪尾提取基因组DNA,用PCR法扩增目的基因,然后进行核酸电泳,鉴定基因型。选用F2代纯合型与纯合型雌雄交配,野生型与野生型雌雄交配。结果鉴定的F2代小鼠有野生型、纯合型和杂合型3种基因型。纯合型与纯合型交配获得F3代仔鼠基因型全部为纯合型。野生型与野生型交配获得F3代仔鼠基因型全部为野生型。结论成功筛选出PD-1人源化小鼠纯合子基因型,并有效地进行扩群保种,为今后应用该小鼠模型提供实验保障。 展开更多
关键词 PD-1 人源化小鼠 基因型
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实时荧光定量PCR法检测外源性DNA在重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中的残留
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作者 梁凯歌 孙丹丹 《中国医药生物技术》 2023年第1期30-34,共5页
目的对实时荧光定量PCR(qPCR)法检测重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中的外源性DNA残留量进行探究和分析,确定该方法用于DNA质量控制的可行性。方法采用宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒(磁珠法)提取DNA,利用E.coli残留DNA检测试剂盒(P... 目的对实时荧光定量PCR(qPCR)法检测重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中的外源性DNA残留量进行探究和分析,确定该方法用于DNA质量控制的可行性。方法采用宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒(磁珠法)提取DNA,利用E.coli残留DNA检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行扩增反应,绘制标准曲线,建立重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中外源性DNA残留量的qPCR检测方法。结果对8批重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维进行测定,外源性DNA残留量在0.03~300 pg/μl内,重复性良好,均远低于每剂10 ng,线性良好(R^(2)>0.99),回收率均在50%~150%之间。结论该方法可用于重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中外源性DNA残留量的定量测定。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR 重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维 外源性DNA残留
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重组人源化胶原蛋白促进创面修复研究及其医用敷料应用
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作者 何杜鹃 马旭 +2 位作者 刘盛 徐剑南 毛小华 《生物化工》 CAS 2023年第4期46-51,共6页
目的:探究重组人源化胶原蛋白促进创面修复及其医用敷料应用价值。方法:通过细胞、动物试验研究重组人源化胶原蛋白对创面的修复作用,对贴敷料开展性能、生物学评价,收集文献概述重组胶原蛋白临床应用。结果:重组人源化胶原蛋白可显著... 目的:探究重组人源化胶原蛋白促进创面修复及其医用敷料应用价值。方法:通过细胞、动物试验研究重组人源化胶原蛋白对创面的修复作用,对贴敷料开展性能、生物学评价,收集文献概述重组胶原蛋白临床应用。结果:重组人源化胶原蛋白可显著促进表皮和成纤维细胞的增殖和迁移速率,显著改善豚鼠皮炎损伤后的病理学变化(P <0.01);敷料表皮应用无透皮吸收,性能、生物学评价良好(细胞活性73.99%,无刺激,无致敏反应),临床使用广泛,疗效显著,无不良反应。结论:重组人源化胶原蛋白可有效促进创面修复,医用敷料产品应用安全、有效,可大力开发。 展开更多
关键词 重组人源化胶原蛋白 创面修复 透皮 敷料 临床应用
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PD-1/PD-L1/C5ar1基因人源化小鼠模型的构建及其在免疫治疗中的应用
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作者 井红艳 聂琰晖 +2 位作者 于兴艳 谢秀龙 杨毅 《中南药学》 2023年第7期1763-1768,共6页
目的构建一种验证C5AR1靶点抑制剂或与免疫检查点抑制剂联用治疗肿瘤的药效及毒性的人源化小鼠模型,以加快人C5AR1靶点药的开发。方法首先通过基因编辑技术构建PD-1/PD-L1/C5AR1人源化(hPD-1/hPD-L1/hC5AR1)小鼠模型。接下来,分析hPD-1/... 目的构建一种验证C5AR1靶点抑制剂或与免疫检查点抑制剂联用治疗肿瘤的药效及毒性的人源化小鼠模型,以加快人C5AR1靶点药的开发。方法首先通过基因编辑技术构建PD-1/PD-L1/C5AR1人源化(hPD-1/hPD-L1/hC5AR1)小鼠模型。接下来,分析hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠人源化基因的表达及人源化对免疫系统的影响。最后基于hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠建立肿瘤模型来评价抗人C5AR1抗体的药效。结果在hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠中只检测到人源PD-1、PD-L1、C5AR1蛋白,且各免疫细胞比例与野生鼠相比无明显差异。在小鼠肿瘤模型中发现,与单药相比,联合使用抗人PD-1抗体和抗人C5AR1抗体能更有效地抑制肿瘤的生长。结论hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠模型可以用于抗人C5AR1抗体和抗人PD-1抗体的临床前药效验证研究。 展开更多
关键词 C5AR1 程序性死亡受体-1 人源化小鼠模型 抗体 免疫治疗
原文传递
重组Ⅲ型人源化胶原蛋白水光注射技术的操作规范
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作者 严蕾 杜娟 +1 位作者 余凡 瞿绍军 《中国医疗美容》 2023年第3期56-60,共5页
胶原蛋白是细胞外基质的主要组成成分,是动物体内分布最多、含量最广的蛋白质。在真皮层注射胶原蛋白后,即刻补充皮肤中的胶原蛋白含量,改善肤质、减少静态纹,改善皮肤松弛、增强皮肤弹性,同时刺激了新的胶原蛋白合成及组织的修复重塑... 胶原蛋白是细胞外基质的主要组成成分,是动物体内分布最多、含量最广的蛋白质。在真皮层注射胶原蛋白后,即刻补充皮肤中的胶原蛋白含量,改善肤质、减少静态纹,改善皮肤松弛、增强皮肤弹性,同时刺激了新的胶原蛋白合成及组织的修复重塑。本文对重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维的产品特点、有效性和安全性、适应证、禁忌证、术中操作、注意事项、联合治疗等多个方面进行分析,为使用重组Ⅲ型人源化胶原蛋白的专业医师提供规范化的操作建议和参考资料,从而使治疗更加有效,同时尽可能降低治疗过程中不良反应的发生率。 展开更多
关键词 皮肤美容 人源化Ⅲ型胶原蛋白 水光注射
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基于公共信息资源的p185抗体人源化设计 被引量：5
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作者 程联胜 邢毅 刘兢 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期591-600,共10页
通过计算机辅助分子设计的手段 ,综合序列分析和结构分析的结果对抗体的结构完成了计算机模拟 ,并对其进行了人源化的模建和改造 ,从而建立了一套快速可行的抗体人源化设计方案 .对一株抗p1 85neu/Her 2 单克隆抗体进行了克隆测序 ,并... 通过计算机辅助分子设计的手段 ,综合序列分析和结构分析的结果对抗体的结构完成了计算机模拟 ,并对其进行了人源化的模建和改造 ,从而建立了一套快速可行的抗体人源化设计方案 .对一株抗p1 85neu/Her 2 单克隆抗体进行了克隆测序 ,并采用此方案进行了人源化设计 .此设计方案完全使用可公共访问的生物信息学工具和数据库 ,具有良好的实用性和推广价值 . 展开更多
关键词 公共信息资源 P185 人源化设计 基因工程抗体 计算机模拟 抗体人源化 计算机辅助分子设计
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