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电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞的影响
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作者 蔡东轩 李毅 +3 位作者 王岚 张燕 李广文 张玉梅 《口腔疾病防治》 2024年第3期169-177,共9页
目的探讨电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)的影响,为种植基台表面改性设计提供实验依据。方法根据试样不同表面进行分组:NC组(阴性对照,光滑表面无其他处理)、NM-1组(纳米网-1,1 mol/L NaO... 目的探讨电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)的影响,为种植基台表面改性设计提供实验依据。方法根据试样不同表面进行分组:NC组(阴性对照,光滑表面无其他处理)、NM-1组(纳米网-1,1 mol/L NaOH电化学脱合金处理1 h,电压2 V)、NM-2组(纳米网-2,5 mol/L NaOH电化学脱合金处理1 h,电压2 V)。扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)观察不同试样表面形貌及HGFs在其表面的黏附状态,接触角测量仪测定试样表面亲水性。CCK-8评估HGFs在不同试样表面的增殖情况;qRT-PCR检测HGFs在不同试样表面Ⅰ型胶原(collagenⅠ,COL1A1)、Ⅲ型胶原(collagenⅢ,COL3A1)、纤连蛋白1(fibronectin 1,FN1)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、黏着斑蛋白(vinculin,VCL)、整合素α2(integrinα2,ITGA2)、整合素β1(integrinβ1,ITGB1)等黏附相关基因表达水平;免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)观察HGFs在不同试样表面vinculin蛋白表达情况;天狼猩红染色评价HGFs在不同试样表面胶原纤维分泌合成情况。结果SEM观察到NM-1组和NM-2组表面形成有序均一的三维网状结构,网格直径NM-1组约为30 nm,NM-2组约为150 nm;NM-1组和NM-2组对比NC组,水接触角显著下降(P<0.0001);NM-1组细胞增殖能力较NC组显著提高(P<0.01),NM-1组和NM-2组的水接触角及细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。SEM镜下可见HGFs黏附24 h后在各组试样表面均黏附良好,NM-1组和NM-2组细胞与NC组对比伸展面积更大,形态纤长,细胞伪足更发达。qRTPCR结果显示NM-1组中COL1A1、COL3A1、FN1、FAK、VCL等黏附相关基因表达水平显著高于NC组和NM-2组(P<0.01)。vinculin蛋白免疫荧光结果表明,NM-1组vinculin蛋白表达水平最高,单个细胞黏着斑数量最多(P<0.01)。天狼猩红染色结果显示NM-1组胶原纤维分泌合成量最高(P<0.0001)。结论Ti6Al4V经电化学脱合金改性后所构建的三维纳米网状结构有促进HGFs黏附增殖和胶原分泌合成的作用,其中网格直径约为30 nm的NM-1组对HGFs的促进作用明显。 展开更多
关键词 电化学脱合金 TI6AL4V 种植体基台 表面改性 三维网状结构 人牙龈成纤维细胞 细胞黏附 细胞增殖 黏着斑
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灯盏花素对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞损伤的影响
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作者 晁晓芹 赵国廷 +2 位作者 董振耀 马民英 姚毅章 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第1期63-68,共6页
目的探讨灯盏花素(breviscapine,BVP)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(porphyromonas gingivalis,Pg-LPS,简称LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)损伤的影响。方法体外培养HGFs细胞,分为对照组、LPS组、LPS+BVP低、... 目的探讨灯盏花素(breviscapine,BVP)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(porphyromonas gingivalis,Pg-LPS,简称LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)损伤的影响。方法体外培养HGFs细胞,分为对照组、LPS组、LPS+BVP低、中、高剂量组。CCK-8法检测细胞增殖;ELISA法检测细胞上清液中IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、IL-6水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;蛋白质印迹法检测细胞中细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期素B1(Cyclin B1)及凋亡相关B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL-2相关X蛋白(BCL-2-associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平;TBA比色法检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;二氢荧光素二乙酸酯(dichloro-dihydro-fluorescein diacetate,DCFH-DA)法测定细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果与对照组比较,LPS组HGFs细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平及SOD活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平及MDA、ROS水平显著升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS+BVP低、中、高剂量组细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平及SOD活性显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平及MDA、ROS水平显著降低(P<0.05)。结论BVP可通过抗炎、抗氧化作用减轻LPS诱导的HGFs细胞损伤。 展开更多
关键词 灯盏花素 牙龈卟啉单胞菌脂多糖 人牙龈成纤维细胞 细胞损伤
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臭氧水对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性
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作者 徐超 何亚兰 +1 位作者 张娜娜 陈新民 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期655-660,共6页
目的:探讨不同浓度臭氧水(OW)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)的细胞毒性。方法:体外培养HGFs,按干预臭氧水浓度分为5组:1、2、4、6 mg/L和空白对照组,在作用的不同时点(1、5、10、20 min)采用倒置相差显微镜观察各组细胞的形态变化,MTT法测... 目的:探讨不同浓度臭氧水(OW)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)的细胞毒性。方法:体外培养HGFs,按干预臭氧水浓度分为5组:1、2、4、6 mg/L和空白对照组,在作用的不同时点(1、5、10、20 min)采用倒置相差显微镜观察各组细胞的形态变化,MTT法测定细胞的相对增殖率,采用SPSS软件进行统计分析。结果:浓度为1和2 mg/L的OW在20 min内对HGFs的细胞毒性为1级,4 mg/L作用1 min,细胞毒性为1级,作用5~20 min,细胞毒性为2级;6 mg/L作用1~20 min,细胞毒性为2~3级。结论:臭氧水的细胞毒性与其浓度和作用时间有关,低浓度臭氧水(≤2 mg/L)可应用于临床治疗和消毒中,在保证作用效果的情况下,应尽量减小臭氧水的作用时间和浓度。 展开更多
关键词 臭氧水 人牙龈成纤维细胞 四甲基偶氮唑盐 相对增殖率
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黄芪甲苷通过miR-126/NF-κB信号通路调控人牙龈成纤维细胞增殖及凋亡的分子机制
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作者 陈亚琼 高鹏 沈慧 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期921-925,共5页
目的 探讨黄芪甲苷对人牙龈成纤维细胞(HGFs)增殖、凋亡的影响及其对miR-126/核转录因子(NF)-κB信号通路的调控作用。方法 采用不同浓度的黄芪甲苷处理HGFs细胞,miR-NC、miR-126 mimics、anti-miR-NC、anti-miR-126转染入HGFs;anti-miR... 目的 探讨黄芪甲苷对人牙龈成纤维细胞(HGFs)增殖、凋亡的影响及其对miR-126/核转录因子(NF)-κB信号通路的调控作用。方法 采用不同浓度的黄芪甲苷处理HGFs细胞,miR-NC、miR-126 mimics、anti-miR-NC、anti-miR-126转染入HGFs;anti-miR-NC、anti-miR-126分别转染入HGFs后加入黄芪甲苷处理细胞;anti-miR-126转染入HGFs后加入NF-κB抑制剂PDTC与黄芪甲苷共同处理细胞;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-126的表达量;采用Western印迹检测p-p65、磷酸化抑制蛋白κBα(p-IкBα)蛋白表达量。结果 不同浓度的黄芪甲苷可明显提高细胞活力与周期素(Cyclin)D1蛋白水平及miR-126的表达水平明显降低凋亡率及Cleaved-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3蛋白水平(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-126组细胞活力明显升高,凋亡率明显降低(P<0.05),而转染anti-miR-126对细胞增殖与凋亡的作用与之相反;抑制miR-126表达可明显逆转黄芪甲苷对细胞增殖、凋亡及NF-κB信号通路的作用;添加PDTC处理后可明显提高细胞活力,明显降低凋亡率(P<0.05)。结论 黄芪甲苷可通过调控miR-126/NF-κB信号通路从而促进HGFs增殖及抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 MIR-126 核转录因子(NF)-κB信号通路 人牙龈成纤维细胞 增殖 凋亡
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人参皂苷Rg1促进人牙龈成纤维细胞增殖、迁移及成骨分化的研究
5
作者 张昕 李长顺 +4 位作者 刘浩 朱绍跃 周猛 冯岩 张光东 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第5期812-819,共8页
目的探讨人参皂苷Rg1(GsRg1)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)增殖、迁移及成骨分化的影响及分子机制。方法采用组织块法分离培养HGFs,并进行形态学和免疫荧光鉴定;取第3代HGFs,CCK-8法检测6种浓度的GsRg1(0、6.25、12.5、25、50、100 mg/L)对H... 目的探讨人参皂苷Rg1(GsRg1)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)增殖、迁移及成骨分化的影响及分子机制。方法采用组织块法分离培养HGFs,并进行形态学和免疫荧光鉴定;取第3代HGFs,CCK-8法检测6种浓度的GsRg1(0、6.25、12.5、25、50、100 mg/L)对HGFs增殖的影响;Transwell实验检测不同浓度GsRg1对HGFs迁移能力的影响;碱性磷酸酶(ALP)染色检测成骨能力;茜素红染色观察并定量钙结节;qRT-PCR检测COL-Ⅰ、OCN和OPN成骨基因表达;Western blot检测OCN、OPN和COL-Ⅰ以及PI3K/AKT信号通路相关分子的蛋白表达情况。结果与对照组比较,浓度为12.5、25、50、100mg/L GsRg1可明显提高HGFs增殖能力(P<0.05),其中100 mg/L GsRg1促增殖作用最强,6.25 mg/L GsRg1组与对照组比较差异无统计学意义;GsRg1处理后HGFs迁移能力增强,且呈浓度依赖。与对照组比较,100 mg/L GsRg1组ALP活性明显增加(P<0.01);茜素红染色钙结节定量明显增多(P<0.01);成骨相关基因OCN、OPN和COL-Ⅰ的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05);p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平随时间上调明显(P<0.05),而PI3K、AKT蛋白表达水平无明显变化。结论GsRg1可以促进HGFs增殖和迁移,100 mg/L GsRg1能够促进HGFs的成骨分化,可能与激活PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 人牙龈成纤维细胞 人参皂苷RG1 细胞增殖 细胞迁移 骨分化
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LncRNA NEAT1调控miR-22-3p对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞生物学活性影响
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作者 范晶 高一曼 +3 位作者 郑圆 郭丹妮 胡金龙 雷小朋 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第6期506-511,共6页
目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)核富集转录本1(nuclear-enriched abundant transcript 1,Neat1)调控微小RNA miR-22-3p对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)... 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)核富集转录本1(nuclear-enriched abundant transcript 1,Neat1)调控微小RNA miR-22-3p对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)生物学活性的影响。方法取对数生长期的HGFs细胞分为对照组、LPS组、si-NC组、si-Neat1组、si-Neat1+inhibitor NC组、si-Neat1+miR-22-3p inhibitor组。RT-qPCR检测Neat1、miR-22-3p表达水平;双荧光素酶验证Neat1、miR-22-3p的靶向关系;流式细胞仪、CCK-8、ELISA法分别检测细胞凋亡、细胞活力及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平;蛋白质印迹检测Caspase-3、磷酸化核转录因子-κB(phosphorylated nuclear factor-κB,p-NF-κB)P65/NF-κB P65水平。结果与对照组比较,LPS组细胞活力、miR-22-3p表达显著降低,TNF-α、IL-1β、细胞凋亡率、p-NF-κB P65/NF-κB P65、Neat1、Caspase-3表达显著增加(P<0.05);与LPS组、si-NC组比较,si-Neat1组细胞活力、miR-22-3p表达显著增加,TNF-α、IL-1β、细胞凋亡率、p-NF-κB P65/NF-κB P65、Neat1、Caspase-3表达显著降低(P<0.05);下调miR-22-3p表达逆转了沉默Neat1对LPS诱导HGFs生物学活性的影响(P<0.05)。结论沉默Neat1可以抑制LPS诱导HGFs的细胞凋亡、炎症反应,可能与上调miR-22-3p表达有关。 展开更多
关键词 LncRNA Neat1 miR-22-3p 脂多糖 人牙龈成纤维细胞 生物学活性
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鸢尾苷元通过miR⁃449a调控JAK/STAT信号通路对人牙龈成纤维细胞增殖及凋亡的影响
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作者 杜姣 张梦婕 黄联杰 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3073-3076,共4页
目的探讨鸢尾苷元对人牙龈成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法原代培养人牙龈成纤维细胞(HGFs),使用不同浓度(50、100、200μmol/L)鸢尾苷元处理HGFs细胞,分别将miR-449a寡核苷酸模拟物(miR-449a mimics)及其阴性对照mimic NC序列(miR-NC... 目的探讨鸢尾苷元对人牙龈成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法原代培养人牙龈成纤维细胞(HGFs),使用不同浓度(50、100、200μmol/L)鸢尾苷元处理HGFs细胞,分别将miR-449a寡核苷酸模拟物(miR-449a mimics)及其阴性对照mimic NC序列(miR-NC)、miR-449a特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-449a)及其阴性对照(anti-miR-NC)转染至HGFs细胞。采用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-qPCR法检测miR-449a表达,Western blot法检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、磷酸化Janus激酶(p-JAK)、磷酸化信号转导子和转录激活子(p-STAT)蛋白表达量。结果与对照组比较,鸢尾苷元可降低细胞活力及Cyclin D1、p-JAK、p-STAT蛋白表达(P<0.05),提高凋亡率、cleaved caspase-3蛋白表达及miR-449a表达(P<0.05)。与miR-NC组比较,转染miR-449a mimics可降低细胞活力及Cyclin D1蛋白表达(P<0.05),提高凋亡率及cleaved caspase-3蛋白表达(P<0.05)。与anti-miR-NC组比较,转染anti-miR-449a可逆转鸢尾苷元对HGFs细胞增殖、凋亡及JAK/STAT信号通路的作用(P<0.05)。结论鸢尾苷元可通过上调miR-449a表达抑制JAK/STAT信号通路的活化,从而抑制牙龈成纤维细胞增殖及促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 鸢尾苷元 人牙龈成纤维细胞 增殖 凋亡 miR-449a JAK/STAT信号通路
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岩黄连总碱下调miR-223表达调控人牙龈成纤维细胞增殖与凋亡的分子机制研究
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作者 谢陆莉 李鲲 邓琳 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第11期1493-1497,共5页
目的:探讨岩黄连总碱对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞增殖与凋亡的影响及其可能作用机制。方法:体外培养人牙龈成纤维细胞,分为对照组(NC组)、Pg-LPS组、5μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS组、10μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS... 目的:探讨岩黄连总碱对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞增殖与凋亡的影响及其可能作用机制。方法:体外培养人牙龈成纤维细胞,分为对照组(NC组)、Pg-LPS组、5μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS组、10μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS组、20μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS组、miR-NC+Pg-LPS组、miR-223+Pg-LPS组、anti-miR-NC+Pg-LPS组、anti-miR-223+Pg-LPS组、20μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS+miR-NC组、20μg/ml岩黄连总碱+Pg-LPS+miR-223组。采用EDU、流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡;RT-qPCR法检测miR-223的表达量;ELISA法检测白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western blot检测剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase-3)、pro-caspase-3、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)蛋白表达。结果:岩黄连总碱(5、10、20μg/ml)和下调miR-223表达可显著升高Pg-LPS诱导的人牙龈成纤维细胞增殖活力和pro-caspase-3蛋白表达水平,降低细胞凋亡率、IL-1β和TNF-α水平以及Cleaved-caspase-3、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达水平(均P<0.05)。过表达miR-223可逆转岩黄连总碱对Pg-LPS诱导的人牙龈成纤维细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT通路的作用。结论:岩黄连总碱可通过下调miR-223表达而抑制PI3K/AKT信号通路从而促进Pg-LPS诱导的人牙龈成纤维细胞增殖,并抑制细胞凋亡和炎性反应。 展开更多
关键词 岩黄连总碱 微小RNA-223 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路 人牙龈成纤维细胞 牙龈卟啉单胞菌 脂多糖
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新型牙髓治疗材料iRoot BP Plus对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性 被引量:15
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作者 史爽 包志凡 +1 位作者 陈旭 张丹丹 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期681-684,共4页
目的:比较新型牙髓治疗材料i Root BP Plus与矿物三氧化物凝聚体(mineral trioxide aggregate,MTA)对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性。方法:采用四甲基偶氮唑盐(methyl-thiazol-tetrazolium,MTT)法测定上述2种材料不同浸提时间(1、3... 目的:比较新型牙髓治疗材料i Root BP Plus与矿物三氧化物凝聚体(mineral trioxide aggregate,MTA)对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性。方法:采用四甲基偶氮唑盐(methyl-thiazol-tetrazolium,MTT)法测定上述2种材料不同浸提时间(1、3、7 d)的浸提液原液及不同浓度稀(1:2、1:5)释液对体外培养的人牙龈成纤维细胞增殖的影响。细胞增殖率以x±s表示,采用SPSS20.0软件包对数据进行析因设计的方差分析。结果:i Root BP Plus和MTA的浸提液原液及不同浓度稀释液作用后的细胞增殖率界于77.31%~113.82%,细胞毒性分级为0或1级,评价结果为无细胞毒性。不同时间点、不同稀释度下,2种材料对体外培养的人牙龈成纤维细胞增殖率的影响无显著差异(F浓度*时间*材料=1.393,P=0.256)。结论 :i Root BP Plus与MTA均对体外培养的人牙龈成纤维细胞无细胞毒性。 展开更多
关键词 iRoot BP PLUS 矿物三氧化物凝聚体 细胞毒性 人牙龈成纤维细胞
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人牙龈成纤维细胞和牙周膜成纤维细胞的培养和生物学特征 被引量:19
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作者 徐燕 李颂 +2 位作者 程继光 胡勇 王明丽 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2002年第6期375-377,共3页
目的 :探讨采用不同方法建立体外培养人牙龈成纤维细胞和人牙周膜成纤维细胞并对其生物学特性作初步探讨。方法 :分别采用消化培养法和组织块培养法培养人的牙龈和牙周膜成纤维细胞。通过倒置显微镜活体观察 ,以及光镜、透射电镜、免疫... 目的 :探讨采用不同方法建立体外培养人牙龈成纤维细胞和人牙周膜成纤维细胞并对其生物学特性作初步探讨。方法 :分别采用消化培养法和组织块培养法培养人的牙龈和牙周膜成纤维细胞。通过倒置显微镜活体观察 ,以及光镜、透射电镜、免疫组化和生长曲线等方法对其生物学特性作初步观察。结果 :消化培养法成功率低于组织块培养法。光镜下和透射电镜下观察两种细胞在形态和结构上相似。免疫组化染色证实此两种细胞均来源于中胚层的纤维母细胞。生长曲线表明牙龈成纤维细胞的倍增时间比牙周膜成纤维细胞稍短 ,而牙周膜成纤维细胞的增殖活性比牙龈成纤维细胞高。结论 :组织块培养法适用于此二种细胞的培养。细胞生物学特征方面有许多相似形 。 展开更多
关键词 人牙龈成纤维细胞 牙周膜纤维细胞 培养 生物学特征
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一氧化碳对肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β共同诱导的人牙龈成纤维细胞黏附分子表达的影响 被引量:5
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作者 赵华强 魏玲玲 +4 位作者 侯萌 穆萍萍 魏奉才 宋晖 杨丕山 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期304-307,313,共5页
目的研究一氧化碳对炎性环境下人牙龈成纤维细胞黏附分子表达的影响。方法以50 ng.mL-1的肿瘤坏死因子(TNF)-α和10 ng.mL-1的白细胞介素(IL)-1β刺激加入或不加入500μmol.L-1一氧化碳释放分子(CORM)的人牙龈成纤维细胞,用Western blo... 目的研究一氧化碳对炎性环境下人牙龈成纤维细胞黏附分子表达的影响。方法以50 ng.mL-1的肿瘤坏死因子(TNF)-α和10 ng.mL-1的白细胞介素(IL)-1β刺激加入或不加入500μmol.L-1一氧化碳释放分子(CORM)的人牙龈成纤维细胞,用Western blot法检测细胞间黏附分子(ICAM)-1、血管细胞黏附分子(VCAM)-1的蛋白表达,用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测黏附分子的mRNA表达,用瞬时转染和报告基因测定法分析NF-κB的活性。结果TNF-α和IL-1β共同刺激后,人牙龈成纤维细胞ICAM-1和VCAM-1的mRNA表达和蛋白表达均显著增强。CORM的加入可显著抑制ICAM-1和VCAM-1的表达。CORM可显著降低ICAM-1和VCAM-1诱导的NF-κB的活性。结论一氧化碳有可能成为牙周病治疗的一种极具潜力的新物质。 展开更多
关键词 人牙龈成纤维细胞 牙周炎 黏附分子 一氧化碳
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人牙龈成纤维细胞原代培养及冻存和复苏 被引量:4
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作者 惠敏 倪莹 +3 位作者 郑静 刘健 王帅 张晓明 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第46期8620-8624,共5页
背景:牙龈成纤维细胞是牙龈固有结缔组织层中主要的细胞,在许多生理和病理过程中起着重要作用。目的:对人牙龈成纤维细胞进行原代培养、鉴定、冻存及复苏。方法:采用组织块培养法培养人牙龈成纤维细胞,并进行形态学和免疫学鉴定。对人... 背景:牙龈成纤维细胞是牙龈固有结缔组织层中主要的细胞,在许多生理和病理过程中起着重要作用。目的:对人牙龈成纤维细胞进行原代培养、鉴定、冻存及复苏。方法:采用组织块培养法培养人牙龈成纤维细胞,并进行形态学和免疫学鉴定。对人牙龈成纤维细胞进行冻存与复苏,倒置显微镜下观察细胞形态变化。结果与结论:人牙龈成纤维细胞原代培养成功率为86.7%,细胞呈梭形或纺锤形。免疫组织化学鉴定抗波性蛋白抗体染色阳性,抗角蛋白抗体染色阴性,为中胚层来源的成纤维细胞。牙龈成纤维细胞冻存与复苏成功,细胞经2次传代后生物学性状与原代相似。提示采用组织块培养法培养原代人牙龈成纤维细胞及冻存与复苏方法可行。 展开更多
关键词 人牙龈成纤维细胞 细胞培养 冻存 复苏 鉴定 组织构建
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排龈药物对体外培养人牙龈成纤维细胞的毒性比较 被引量:7
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作者 刘健 张晓明 +2 位作者 郝鹏杰 惠敏 于焕英 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期202-205,共4页
目的评价6种常用的排龈药物对人牙龈成纤维细胞(HGF)毒性作用的大小,以指导临床选择最佳排龈药物。方法将6种不同体积分数的排龈药物(20%硫酸铝、5%硫酸铝、15.5%硫酸铁、13.3%硫酸铁、0.1%盐酸肾上腺素、0.01%盐酸肾上腺素)分别作用于... 目的评价6种常用的排龈药物对人牙龈成纤维细胞(HGF)毒性作用的大小,以指导临床选择最佳排龈药物。方法将6种不同体积分数的排龈药物(20%硫酸铝、5%硫酸铝、15.5%硫酸铁、13.3%硫酸铁、0.1%盐酸肾上腺素、0.01%盐酸肾上腺素)分别作用于体外培养的HGF,MTT比色法测定细胞的损伤与增殖,透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果所有实验药物均能引起细胞的直接损伤与增殖抑制,细胞毒性由小到大分别是0.01%盐酸肾上腺素、0.1%盐酸肾上腺素、5%硫酸铝、20%硫酸铝、硫酸铁,2种体积分数的硫酸铁毒性比较差异无统计学意义(P>0.01)。透射电镜显示2种体积分数的盐酸肾上腺素及5%硫酸铝可引起细胞器数量减少,线粒体及内质网肿胀;20%硫酸铝造成细胞水肿明显,细胞核和染色质分布不均匀;硫酸铁可导致细胞变性。结论0.01%盐酸肾上腺素细胞毒性作用最小,硫酸铁毒性最大。 展开更多
关键词 排龈药物 细胞毒性 人牙龈成纤维细胞
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人牙龈成纤维细胞对甲硝唑的跨膜转运 被引量:13
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作者 冷斌 刘洪臣 +3 位作者 鄂玲玲 刘宇 吴霞 吕燕 《中华老年口腔医学杂志》 2007年第2期100-103,共4页
目的:研究人牙龈成纤维细胞对甲硝唑的跨膜转运,并初步探讨转运的影响因素及牙周局部给药和人工种植牙给药的可行性。方法:将人牙龈成纤维细胞与甲硝唑共同孵育1、5、10、15min后,弃去细胞外药液,收集各时间点细胞,用高效液相色谱法测... 目的:研究人牙龈成纤维细胞对甲硝唑的跨膜转运,并初步探讨转运的影响因素及牙周局部给药和人工种植牙给药的可行性。方法:将人牙龈成纤维细胞与甲硝唑共同孵育1、5、10、15min后,弃去细胞外药液,收集各时间点细胞,用高效液相色谱法测定细胞内药物含量,用考马斯亮蓝法测定细胞蛋白总量。结果:(1)人牙龈成纤维细胞内甲硝唑含量分别为0.940±0.408ng/μg(药物浓度:20ug/ml)和1.977±0.266ng/μg(药物浓度:40μg/ml)。不同加药浓度和孵育时间下,甲硝唑的转运量差异有显著性(P<0.01)。(2)高效液相色谱法可以准确测定细胞内甲硝唑的含量。结论:(1)人牙龈成纤维细胞具有转运甲硝唑的能力,药物浓度和药物孵育时间会影响转运量,这证实了牙周局部给药和人工种植牙给药的可行性。(2)高效液相色谱法可以准确,灵敏地测定细胞内药物的含量。 展开更多
关键词 人牙龈成纤维细胞 转运 甲硝唑 给药系统 种植 高效液相色谱法
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全冠修复材料对人牙龈成纤维细胞的毒性 被引量:5
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作者 马红 刘梅 +1 位作者 章非敏 王娟 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2008年第5期510-514,共5页
目的:观察镍铬合金、金合金、铸造陶瓷对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast cells,HGFC)的毒性。方法:制备镍铬合金、金合金、铸造陶瓷的细胞培养基浸提液,采用四唑盐比色分析法(methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT法)... 目的:观察镍铬合金、金合金、铸造陶瓷对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast cells,HGFC)的毒性。方法:制备镍铬合金、金合金、铸造陶瓷的细胞培养基浸提液,采用四唑盐比色分析法(methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT法)测定材料对HGFC生长的影响;在材料周围接种HGFC,观察细胞的生长情况。采用Stata9.1软件对实验结果进行析因分析。结果:金合金的细胞相对增殖率为1.016、1.014、0.824、0.796,镍铬合金的细胞相对增殖率为1.028、1.079、0.903、0.809,铸造陶瓷的细胞相对增殖率为1.018、1.030、0.924、0.818。金合金和镍铬合金对细胞相对增殖率的影响有统计学差异(P=0.021),但金合金与铸造陶瓷、镍铬合金与铸造陶瓷之间无统计学差异(P>0.05)。金合金、镍铬合金和铸造陶瓷的细胞毒性级别(cytotoxical grade,CG)为0-1级。倒置显微镜观察3种材料周围均有细胞生长,镍铬合金周围有细胞坏死带产生。结论:镍铬合金与HGFC直接接触引起的细胞损伤比析出的金属离子对细胞损伤大。金合金和铸造陶瓷具有良好的生物相容性。 展开更多
关键词 人牙龈成纤维细胞 四唑盐比色分析法 镍铬合金 金合金 铸造陶瓷
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体外诱导人牙龈成纤维细胞多向分化潜能的实验研究 被引量:3
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作者 蒋少云 陶玉飞 +3 位作者 李阳 宋立婷 朱东望 邓嘉胤 《天津医药》 CAS 2015年第7期713-716,共4页
目的探索人牙龈成纤维细胞(h GFs)是否具有多向分化潜能,为组织工程学提供新的细胞来源。方法经志愿者知情同意后收集健康牙龈组织,组织块法培养h GFs。取第3代h GFs进行成骨、成软骨和成脂诱导,未分化诱导的细胞为对照组。分别用碱性... 目的探索人牙龈成纤维细胞(h GFs)是否具有多向分化潜能,为组织工程学提供新的细胞来源。方法经志愿者知情同意后收集健康牙龈组织,组织块法培养h GFs。取第3代h GFs进行成骨、成软骨和成脂诱导,未分化诱导的细胞为对照组。分别用碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色、阿利新蓝染色、油红O染色检测细胞成骨、成软骨和成脂能力。实时定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞中成骨分化标志基因ALP、runt相关转录因子2(Runx2)、成软骨分化标志基因聚集蛋白聚糖(AGR)和成脂分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)的表达。结果成骨诱导组培养至7 d时ALP染色可见大量的蓝紫色沉淀,28 d时细胞周围有大量红染的钙结节沉积,而对照组无钙结节,培养至14 d细胞中ALP和Runx2表达明显高于对照组(P<0.01)。14 d时成软骨诱导组阿利新蓝阳性,成脂诱导组可见红色的脂肪滴,而对照组2种染色为阴性,AGR、PPARγ2表达均明显高于对照组(P<0.01)。结论 h GFs具有成骨、成软骨和成脂分化的多向分化潜能。 展开更多
关键词 牙龈 纤维细胞 脂分化 细胞分化 人牙龈成纤维细胞 骨分化 软骨分化
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一氧化碳对炎症环境下人牙龈成纤维细胞黏附分子表达影响的机制研究 被引量:3
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作者 赵华强 侯萌 +3 位作者 魏玲玲 穆萍萍 宋晖 杨丕山 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期420-424,共5页
目的研究一氧化碳对炎症环境下人牙龈成纤维细胞(HGF)黏附分子表达影响的分子机制。方法体外培养HGF,以50 ng.mL-1的TNF-α和10 ng.mL-1的IL-1β刺激加入或不加入500μmol.L-1一氧化碳释放分子-3(CORM-3)的HGF;分别在刺激10、20 min后... 目的研究一氧化碳对炎症环境下人牙龈成纤维细胞(HGF)黏附分子表达影响的分子机制。方法体外培养HGF,以50 ng.mL-1的TNF-α和10 ng.mL-1的IL-1β刺激加入或不加入500μmol.L-1一氧化碳释放分子-3(CORM-3)的HGF;分别在刺激10、20 min后收集部分细胞,用Western blot法检测丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)通路中细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38的磷酸化水平;在刺激4 h后用Western blot法检测核转录因子-κB(NF-κB)的核内表达;在部分实验中,HGF在TNF-α、IL-1β及CORM-3刺激前以鸟苷酸环化酶特异性抑制剂1H-[1,2,4]噁二唑[4,3-α]喹喔啉-1-酮(ODQ)预处理8 h,刺激24 h后用Western blot法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达。结果在TNF-α和IL-1β刺激细胞10min后,MAPK通路中p38、ERK和JNK的磷酸化水平即有明显升高,CORM-3能够明显抑制p38的磷酸化,而对ERK和JNK的磷酸化水平无明显影响;4 h后,CORM-3可明显抑制NF-κB-p65的核内表达。ODQ不能改变CORM-3对TNF-α和IL-1β共同刺激下ICAM-1表达水平的影响,说明CORM-3的作用并非通过鸟苷酸环化酶系统实现。结论一氧化碳对炎症环境下HGF黏附分子表达的抑制作用可能是通过对NF-κB的活性抑制和对MAPK p38磷酸化水平的抑制作用来实现的。 展开更多
关键词 人牙龈成纤维细胞 核转录因子-ΚB 一氧化碳释放分子 丝裂原激活蛋白激酶
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骨形态发生蛋白2联合地塞米松对人牙龈成纤维细胞增殖及成骨分化的影响 被引量:2
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作者 陶玉飞 蒋少云 +2 位作者 严志敏 甄珍 邓嘉胤 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第51期8248-8253,共6页
背景:利用人牙龈成纤维细胞和细胞因子相结合是修复牙周组织缺损的一个新的研究热点。目的:观察骨形态发生蛋白2联合地塞米松对体外培养的人牙龈成纤维细胞的细胞增殖及成骨分化的影响。方法:培养至第3代的人牙龈成纤维细胞分5组培养:D... 背景:利用人牙龈成纤维细胞和细胞因子相结合是修复牙周组织缺损的一个新的研究热点。目的:观察骨形态发生蛋白2联合地塞米松对体外培养的人牙龈成纤维细胞的细胞增殖及成骨分化的影响。方法:培养至第3代的人牙龈成纤维细胞分5组培养:DMEM组、基础骨诱导组、基础骨诱导+地塞米松组、骨诱导+骨形态发生蛋白2组,骨诱导+地塞米松+骨形态发生蛋白2组。MTT法检测各组细胞增殖情况,碱性磷酸酶染色、茜素红染色及反转录多聚酶链反应检测各组细胞的成骨分化情况。结果和结论:人牙龈成纤维细胞具有成骨分化的潜能,骨形态发生蛋白2、地塞米松对人牙龈成纤维细胞的细胞增殖无明显影响,单独及联合应用地塞米松、骨形态发生蛋白2能够促进人牙龈成纤维细胞的碱性磷酸酶活性和钙结节的形成,其中两者联合的作用更强,而且后者能明显促进成骨相关基因的表达,提示两者联合更有效地促进人牙龈成纤维细胞成骨分化。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白质类 地塞米松 纤维细胞 组织构建 骨形态发生蛋白2 人牙龈成纤维细胞 细胞增殖 骨分化
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白细胞介素-10对人牙龈成纤维细胞分泌白细胞介素-1β的抑制作用 被引量:3
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作者 于新波 杨丕山 葛少华 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期238-240,共3页
目的 :探讨白细胞介素_10 (IL_10 )在牙周炎症反应中的抑制作用。方法 :用细胞培养法、酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测细胞培养液上清中的IL_1β浓度 ;用MTT法检测人牙龈成纤维细胞 (HGF)对细菌脂多糖 (LPS)、IL_10的增殖反应。结果 :LP... 目的 :探讨白细胞介素_10 (IL_10 )在牙周炎症反应中的抑制作用。方法 :用细胞培养法、酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测细胞培养液上清中的IL_1β浓度 ;用MTT法检测人牙龈成纤维细胞 (HGF)对细菌脂多糖 (LPS)、IL_10的增殖反应。结果 :LPS以剂量依赖方式诱导HGF产生IL_1β,6h达最大分泌量 ;IL_1β的分泌可被IL_10抑制 ,10ng/mlIL_10作用 2 4h抑制效应达最大 ;LPS对HGF具有促增殖作用 ,而IL_10对HGF的增殖无影响。结论 :IL_10是一种抑制牙周炎症反应的细胞因子。 展开更多
关键词 抑制作用 细胞介素类 人牙龈成纤维细胞 牙周炎
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富血小板血浆对人牙龈成纤维细胞增殖和迁移的影响 被引量:3
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作者 施六霞 狄昌萍 +1 位作者 徐艳 金岳龙 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期942-945,共4页
目的:体外研究不同浓度的机采富血小板血浆(PRP)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)的增殖和迁移的影响。方法:不同浓度PRP(1%、5%、10%、20%、30%、50%),加入到原代培养的人牙龈成纤维细胞,无血清培养液为阴性对照,10%新生小牛血清为阳性对照,... 目的:体外研究不同浓度的机采富血小板血浆(PRP)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)的增殖和迁移的影响。方法:不同浓度PRP(1%、5%、10%、20%、30%、50%),加入到原代培养的人牙龈成纤维细胞,无血清培养液为阴性对照,10%新生小牛血清为阳性对照,培养时间为3、5、7天,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖效果,Transwell系统测定细胞迁移效果。结果:PRP有明显促进增殖作用,不同浓度PRP与阴性对照组均有明显差异(P<0.01),且随着时间递增,增殖效果也明显增强(P<0.01)。在细胞迁移效果中,各浓度组均比阴性对照组效果好。结论:PRP对HGFs功能有明显促进效果,在一定浓度范围有浓度依赖性。 展开更多
关键词 人牙龈成纤维细胞 富血小板血浆 TRANSWELL
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