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人破骨细胞分化因子(ODF)的克隆和序列分析 被引量：2
1
作者 张勇 杨彤涛 +2 位作者 黄立军 李存孝 马保安 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2006年第3期269-270,共2页
目的克隆人破骨细胞分化因子(ODF)基因并进行序列分析。方法以人骨肉瘤细胞系MG63的mRNA为模板,采用RT-PCR方法得到人ODF的编码区cDNA,克隆至载体pUC19中,酶切鉴定后进行序列分析。结果获得人ODF编码区基因和重组质粒pUC19-ODF,DNA序列... 目的克隆人破骨细胞分化因子(ODF)基因并进行序列分析。方法以人骨肉瘤细胞系MG63的mRNA为模板,采用RT-PCR方法得到人ODF的编码区cDNA,克隆至载体pUC19中,酶切鉴定后进行序列分析。结果获得人ODF编码区基因和重组质粒pUC19-ODF,DNA序列分析证实获得了ODF基因,其序列和文献报道一致。结论采用基因克隆的方法得到人OPG基因,为进一步进行其结构和功能研究打下了基础。 展开更多
关键词 人破骨细胞分化因子 克隆 生物序列分析 RNA骨肉瘤/免疫学
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人破骨细胞分化因子基因的克隆及在COS-7细胞中的表达
2
作者 杨彤涛 杨辉 +5 位作者 范清宇 刘继中 马保安 张勇 纪宗玲 陈苏民 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2003年第12期731-734,共4页
目的　克隆人破骨细胞分化因子 (ODF)基因并在真核细胞中表达。方法　以人骨肉瘤细胞系MG6 3的总RNA为模板 ,采用反转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法得到ODF的编码区cDNA ,构建真核表达载体pcDNA 3 1(+) ODF ,在脂质体介导下转染非洲绿猴... 目的　克隆人破骨细胞分化因子 (ODF)基因并在真核细胞中表达。方法　以人骨肉瘤细胞系MG6 3的总RNA为模板 ,采用反转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法得到ODF的编码区cDNA ,构建真核表达载体pcDNA 3 1(+) ODF ,在脂质体介导下转染非洲绿猴肾细胞系 (COS) 7,经G4 18压力筛选建立稳定转染人ODF的细胞系 ,Western印迹检测其在COS 7细胞中的表达。结果　获得的人ODFcDNA序列与文献报道的核苷酸序列一致 ,Western印迹证实稳定转染人ODF的COS 7细胞系中有ODF的表达。结论　构建了人破骨细胞分化因子 (ODF)的真核表达载体 ,并在COS 7细胞中获得稳定表达。 展开更多
关键词 人破骨细胞分化因子 基因克隆 COS—7细胞 基因表达 骨保护素 类风湿关节炎
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