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李氏5号方对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响 被引量：36
1
作者 张景艳 王蓉 +4 位作者 李子中 程浩然 李生海 刘梦霞 盛树力 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期258-260,共3页
目的:观察李氏5号方在细胞水平上对神经细胞生长的影响,寻找最佳药物浓度.方法:不同浓度的李氏5号方作用于人神经母细胞瘤株SY5Y,利用MTT测定细胞的存活率,制定浓度-药效曲线得出最佳药物浓度.以MTT代谢率、LDH漏出率、细胞轴突长度、... 目的:观察李氏5号方在细胞水平上对神经细胞生长的影响,寻找最佳药物浓度.方法:不同浓度的李氏5号方作用于人神经母细胞瘤株SY5Y,利用MTT测定细胞的存活率,制定浓度-药效曲线得出最佳药物浓度.以MTT代谢率、LDH漏出率、细胞轴突长度、胞体面积为观察指标.结果:李氏5号方在0.125～0.75 g*L-1浓度范围内均可增加SY5Y细胞的存活率.与正常对照组相比,加药组SY5Y细胞轴突长度和胞体面积均增加,MTT代谢率升高、LDH漏出率降低. 结论:李氏5号方具有营养神经细胞、促进神经细胞存活的作用. 展开更多
关键词 李氏5号方 神经细胞 中医病理 人神经母细胞瘤株sy5y 药理作用 精神病学
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救脑益智胶囊水提物对人神经母细胞瘤株SY5Y信号转导的影响 被引量：3
2
作者 孟艳 张景艳 +2 位作者 王蓉 姬志娟 盛树力 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1076-1078,共3页
目的 :通过观察救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株SY5Y信号转导的影响 ,探讨此药促进神经细胞生长的可能机理。方法 :以人神经母细胞瘤株SY5Y为细胞模型 ,分为正常对照组和加药组。收集对照组及加药组细胞裂解物 ,取上清用Lowry法进行蛋... 目的 :通过观察救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株SY5Y信号转导的影响 ,探讨此药促进神经细胞生长的可能机理。方法 :以人神经母细胞瘤株SY5Y为细胞模型 ,分为正常对照组和加药组。收集对照组及加药组细胞裂解物 ,取上清用Lowry法进行蛋白定量 ,将总蛋白量相等的样品进行免疫沉淀Westernblot分析。 结果 :与正常对照组比较 ,加药组SY5Y细胞蛋白激酶B(proteinkinaseB ,Akt/PKB) ,cAMP反应元件结合蛋白 (cAMPresponseelementbindingprotein ,CREB)、磷酸化的CREB (phosphorylatedCREB ,P CREB)表达增加 ,细胞色素C(cytochromeC ,cytC1)表达减少。结论 :救脑益智胶囊的生药水提取液能促进SY5Y神经母细胞存活信号通路中Akt/PKB ,P CREB的表达 。 展开更多
关键词 救脑益智胶囊 水提物 神经母细胞瘤株 sy5y 信号转导 中药
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叶酸和维生素B12对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的保护作用 被引量：5
3
作者 张景燕 陈娟 +2 位作者 王蓉 赵静姝 吴燕川 《首都医科大学学报》 CAS 2012年第6期776-778,共3页
目的通过观察叶酸和维生素B12对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长的影响,探讨叶酸和维生素B12对神经细胞的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组、叶酸组(1.875 mg/L)、维生素B12组(800μg/L)、叶酸(1.875 mg/L)+维生素B12(800... 目的通过观察叶酸和维生素B12对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长的影响,探讨叶酸和维生素B12对神经细胞的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组、叶酸组(1.875 mg/L)、维生素B12组(800μg/L)、叶酸(1.875 mg/L)+维生素B12(800μg/L)组,进行细胞形态观察、细胞计数分析以及测定各组细胞的噻唑蓝(thiazolyl blue,MTT)代谢率、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出率。结果与对照组相比,叶酸组、维生素B12组、叶酸+维生素B12组的细胞计数和MTT代谢率升高(P<0.05),LDH漏出率降低(P<0.05),在细胞形态上,叶酸组、维生素B12组、叶酸+维生素B12组明显好于对照组,表现为细胞胞体饱满、存活细胞数目增多、贴壁良好、突起延长。结论叶酸、维生素B12能促进神经细胞生长,降低神经细胞死亡率,从而达到保护神经元的作用。 展开更多
关键词 叶酸 维生素B12 人神经母细胞瘤株SH-sy5y
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不同能量的培养条件对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长的影响 被引量：2
4
作者 赵静姝 王蓉 +2 位作者 张景燕 吴燕川 姬志娟 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第2期66-69,I0003,共5页
目的建立热量限制的体外模型,观察不同能量培养条件下对人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞生长代谢的影响。方法将人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞分别采用含有低浓度(2 g/L)、正常浓度(3.15g/L)或高浓度(4.5 g/L)葡萄糖的培养基进行常... 目的建立热量限制的体外模型,观察不同能量培养条件下对人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞生长代谢的影响。方法将人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞分别采用含有低浓度(2 g/L)、正常浓度(3.15g/L)或高浓度(4.5 g/L)葡萄糖的培养基进行常规传代培养,利用MTT代谢率、细胞生长曲线及LDH漏出率等指标观察各组细胞生长情况。结果与正常葡萄糖浓度培养条件下培养的对照组相比,高糖组细胞突起缩短,细胞胞体皱缩,MTT代谢率稍低(0.573±0.001),LDH漏出率高,细胞生长状态差;与对照组相比,低糖组细胞突起伸展,MTT代谢率较低(0.428±0.003),LDH漏出率低,细胞生长速度缓慢,但是形态良好。结论高糖培养对细胞有损伤作用,细胞代谢加速,更容易衰老死亡;而低糖培养起到保护作用,在热量限制允许范围内降低培养液的含糖量,不但不会对细胞造成损伤,反而对细胞的代谢及生长起到保护作用,延长细胞的总体寿命。 展开更多
关键词 热量限制 葡萄糖 细胞生长 细胞代谢 细胞培养 人神经母细胞瘤细胞株SH-sy5y
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救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的保护作用
5
作者 张景燕 张静爽 +5 位作者 曹子青 赵志炜 张旭 吴燕川 王玉兰 王蓉 《中国比较医学杂志》 北大核心 2015年第4期58-60,I0005,共4页
目的通过观察复方中药救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长以及胰岛素信号通路的影响,探讨其对神经细胞保护作用的机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组(C组)、救脑益智1号方组和3号方组,每组药物剂量分别为0.062... 目的通过观察复方中药救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长以及胰岛素信号通路的影响,探讨其对神经细胞保护作用的机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组(C组)、救脑益智1号方组和3号方组,每组药物剂量分别为0.0625 mg/m L、0.125 mg/m L、0.25 mg/m L、0.5 mg/m L和1 mg/m L,测定各组细胞的噻唑蓝(MTT)代谢率,选定0.125 mg/m L进行细胞免疫荧光染色,观察细胞形态和胰岛素受体底物-1(IRS-1)、c AMP反应元件结合蛋白(CREB)表达的变化。结果与对照组相比,救脑益智组MTT代谢率升高(P<0.05),细胞形态好,表现为细胞胞体饱满、贴壁良好、突起延长,IRS-1和CREB表达增加。结论复方中药救脑益智水提液能促进神经细胞生长,提高神经元胰岛素信号通路相关因子IRS-1和CREB表达,推测其神经保护作用机制与胰岛素信号通路有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 复方中药 救脑益智方剂 人神经母细胞瘤株SH-sy5y
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活性氧对神经母细胞株SH-SY5Y细胞L型钙通道电流的影响 被引量：6
6
作者 杜怡峰 孙兆林 +2 位作者 李泱 韩仲岩 盛树力 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期73-75,共3页
目的　探讨氧自由基导致神经元钙超载的发生机制。方法　在神经母细胞株 SH- SY5 Y细胞体外培养的基础上 ,采用全细胞膜片钳技术 ,观察 H2 O2 对 SH- SY5 Y细胞 L 型钙电流 (ICa,L)的影响。结果　 (1) H2 O2 能够明显增加峰值 ICa,L,且... 目的　探讨氧自由基导致神经元钙超载的发生机制。方法　在神经母细胞株 SH- SY5 Y细胞体外培养的基础上 ,采用全细胞膜片钳技术 ,观察 H2 O2 对 SH- SY5 Y细胞 L 型钙电流 (ICa,L)的影响。结果　 (1) H2 O2 能够明显增加峰值 ICa,L,且该作用具有浓度依赖性。 (2 ) H2 O2 使 ICa,L的 I- V相关曲线下移 ,但对其形状和最大激活电位无明显影响。结论　 H2 O2 对 L 型钙通道有明显的增强作用 ,此可能是其导致神经元钙超载的机制之一。 展开更多
关键词 H2O2 膜片钳 神经母细胞瘤细胞 钙通道 SH-sy5y细胞 脑缺血
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2,3-吲哚醌诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡及周期阻滞 被引量：4
7
作者 宋金莲 岳旺 +1 位作者 侯琳 葛银林 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第3期283-288,共6页
背景与目的:2,3-吲哚醌(isatin,ISA)是存在于哺乳动物体液及组织中的一种天然物质,已发现其对肿瘤细胞的生长有抑制作用,但具体作用机制尚不明。本研究以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y为靶细胞,观察ISA对SH-SY5Y细胞的作用及其机制。方法:... 背景与目的:2,3-吲哚醌(isatin,ISA)是存在于哺乳动物体液及组织中的一种天然物质,已发现其对肿瘤细胞的生长有抑制作用,但具体作用机制尚不明。本研究以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y为靶细胞,观察ISA对SH-SY5Y细胞的作用及其机制。方法:采用荧光染色、流式细胞术(flow cytometry,FCM)及Western blot等方法检测不同浓度ISA(0、100、200、400μmol/L)诱导SH-SY5Y细胞凋亡及细胞周期阻滞的作用机制。结果:400μmol/L ISA作用48h后,在荧光显微镜下观察到SH-SY5Y细胞出现核固缩、DNA断裂等典型的凋亡形态学改变。Western blot结果显示,随ISA浓度的增加,Bcl-2蛋白表达下降、Bax蛋白表达无明显改变,Bcl-2/Bax下降。100、200、400μmol/L ISA处理SH-SY5Y细胞48h,活化Caspase-3的表达率分别为19.28%、25.88%、33.43%,明显高于对照组(P<0.05)。Western blot进一步检测到其下游底物Caspase激活的脱氧核糖核酸酶抑制剂(inhibitor of caspase-activated DNase,ICAD)被降解。细胞周期分析表明,经100、200、400μmol/L ISA处理48h后,G1期SH-SY5Y细胞数明显增加,呈明显的G1期阻滞;磷酸化的ERK蛋白及Cyclin D1(CDK1)蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论:ISA能明显诱导SH-SY5Y细胞凋亡和细胞周期G1期阻滞,该作用可能与Bcl-2/Bax降低、Caspase-3激活,以及下调磷酸化ERK和细胞周期因子CDK1表达有关。 展开更多
关键词 2 3-吲哚醌 神经母细胞瘤 SH-sy5y细胞 BCL-2/BAX CASPASE-3 凋亡 细胞周期阻滞
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微波辐射诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的可能机制 被引量：2
8
作者 王程 李琴 +5 位作者 刘微 闫岗林 徐冶 于洋 刘师兵 潘文干 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期422-426,I0002,共6页
目的:观察微波辐射对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用10、30和50 mW.cm-2辐射强度的微波辐射SH-SY5Y细胞5 min,以假辐射组(0 mW.cm-2)为对照,光镜下观察细胞形态变化;荧光显微镜下观察DAPI染色细胞核的形... 目的:观察微波辐射对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用10、30和50 mW.cm-2辐射强度的微波辐射SH-SY5Y细胞5 min,以假辐射组(0 mW.cm-2)为对照,光镜下观察细胞形态变化;荧光显微镜下观察DAPI染色细胞核的形态;CTAB法提取细胞基因组DNA,电泳观察DNAladder;台盼蓝拒染法检测细胞存活率;AnnexinV-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率;MTT法检测细胞相对活性;蛋白质印迹检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:微波辐射后SH-SY5Y细胞形态即刻改变,胞核、胞质结构欠清,细胞皱缩甚至脱壁;细胞核内的染色质出现不规则凝集,碎裂成2～5个微核;细胞DNA出现明显的梯状条带;细胞存活率随微波辐射强度增大逐渐降低,10 mW.cm-2辐射组与假辐射组比较,细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05),但30、50 mW.cm-2辐射组细胞存活率明显低于假辐射组(P<0.05);微波辐射后6 h的细胞凋亡率随辐射强度的增加逐渐升高,各辐射组细胞凋亡率均明显高于假辐射组(P<0.05);微波辐射后24和48 h,细胞相对活力随辐射强度的增加明显降低,各辐射组的细胞相对活力均明显低于假辐射组(P<0.05)。微波辐射后,细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、survivin表达水平逐渐下降,Bax、caspase-3和caspase-7表达水平逐渐升高,caspase-8和-9表达水平无明显变化。结论:微波辐射可诱导SH-SY5Y细胞凋亡,其作用机制可能与survivin、Bcl-2蛋白表达水平下调、Bax蛋白表达水平上调及caspase-3和caspase-7的作用有关,而与caspase-8和caspase-9介导的caspase-3活化这一作用无密切关系。 展开更多
关键词 微波辐射 人神经母细胞瘤 SH-sy5y细胞 细胞凋亡
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环境雌激素双酚AF诱导神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系增殖与侵袭的体外实验 被引量：3
9
作者 王常丽 贾辉 +8 位作者 王涛 梁尔光 王一仁 马宏达 赵庆春 王莉莉 叶棋浓 侯明晓 冯帆 《解放军医学院学报》 CAS 2016年第3期251-255,共5页
目的探讨环境雌激素双酚AF(bisphenol AF,BPAF)对神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y增殖,及雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)转录活性的影响。方法 SH-SY5Y细胞转染ERE-Luc或Cat D-Luc荧光素酶报告基因后,使用0.01μmol/L、0.03μmol/L... 目的探讨环境雌激素双酚AF(bisphenol AF,BPAF)对神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y增殖,及雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)转录活性的影响。方法 SH-SY5Y细胞转染ERE-Luc或Cat D-Luc荧光素酶报告基因后,使用0.01μmol/L、0.03μmol/L、0.1μmol/L、0.3μmol/L、1μmol/L、3μmol/L和10μmol/L浓度梯度的BPAF处理SH-SY5Y细胞,采用荧光素酶报告基因实验(luciferase)检测BPAF对ERα转录活性的影响;使用BPAF作用诱导ERα转录活性的EC_(max)浓度处理SH-SY5Y细胞,采用CCK-8实验检测细胞样品在450 nm波长的吸光度值;在ERα表达阴性的三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞系MDA-MB-231中转染ERα表达载体;在SH-SY5Y细胞中转染ERα的小干扰RNA(si RNA)或使用ERα的拮抗剂ICI-182780(100 nmol/L)预处理SH-SY5Y细胞后,检测BPAF对ERα转录活性的诱导作用或对SH-SY5Y细胞增殖/侵袭的促进作用。结果 BPAF能够剂量依赖性地(R^2=0.94,P=0.007 6)在SH-SY5Y细胞中提高ERα的转录活性,其EC_(50)值为(0.44±0.09)μmol/L,EC_(max)值为3μmol/L;在SH-SY5Y细胞中转染ERα的si RNA载体,或使用ERα的拮抗剂(100 nmol/L ICI-182780)处理SH-SY5Y细胞能够显著下调BPAF诱导的ERα转录活性(抑制率分别为76.97%和77.75%),及其对SH-SY5Y细胞增殖(抑制率分别为77.42%和86.76%)、侵袭的促进作用(抑制率分别为95.87%和105.56%)。结论 BPAF可能通过诱导ERα的转录活性,促进神经母细胞瘤细胞系的增殖与侵袭。 展开更多
关键词 环境雌激素 双酚AF 神经母细胞瘤 SH-sy5y细胞系 雌激素受体Α 转录活性 增殖与侵袭
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锰化合物对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y脂质过氧化的作用 被引量：2
10
作者 刘祯 吴萍 +3 位作者 张杰 李卫红 张辉 李国君 《劳动医学》 北大核心 2004年第2期90-93,共4页
[目的 ]通过锰染毒神经母细胞瘤细胞 (SH SY5Y) ,观察脂质过氧化及其相关酶水平的改变 ,探讨锰对SH SY5Y的脂质过氧化及相关酶活性的影响 ,为进一步研究锰神经毒作用的机制提供科学依据。 [方法 ]采用浓度为 0 .2 5、0 .5 0、0 .75mmol/... [目的 ]通过锰染毒神经母细胞瘤细胞 (SH SY5Y) ,观察脂质过氧化及其相关酶水平的改变 ,探讨锰对SH SY5Y的脂质过氧化及相关酶活性的影响 ,为进一步研究锰神经毒作用的机制提供科学依据。 [方法 ]采用浓度为 0 .2 5、0 .5 0、0 .75mmol/L的二价锰和三价锰 ,分别对体外培养的SH -SY5Y细胞染毒 2 4h ,测定超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽 (GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)和过氧化氢酶 (CAT)的活性。 [结果 ]二价锰和三价锰均可引起SOD、MDA、GSH、GSH Px和CAT活性的改变 ,其中SOD、GSH、GSH Px和CAT活性与对照组比较差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,且存在剂量 效应关系。而MDA含量则较对照组升高 (P <0 .0 1) ,且随染毒浓度增高而上升。 [结论 ]一定浓度的锰化合物可使SH SY5Y细胞脂质过氧化反应增强 ,引起相关酶活性的改变。提示这种变化很可能是锰对神经细胞发挥毒作用的重要途径之一。 展开更多
关键词 锰化合物 神经母细胞瘤 细胞SH-sy5y 脂质过氧化 自由基
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外源性Bax基因过表达对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株Smac蛋白表达的影响
11
作者 何运松 赵洪洋 项炜 《中国临床神经外科杂志》 2014年第9期535-538,共4页
目的观察Bcl-2相关X蛋白(Bax)基因过表达对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞第二个线粒体来源的半胱氨酸酶的激活剂(Smac)蛋白表达的影响。方法采用脂质体Lipofectamine 2000将携带人Bax基因的过表达质粒转入SH-SY5Y细胞(转染组),同时设空载... 目的观察Bcl-2相关X蛋白(Bax)基因过表达对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞第二个线粒体来源的半胱氨酸酶的激活剂(Smac)蛋白表达的影响。方法采用脂质体Lipofectamine 2000将携带人Bax基因的过表达质粒转入SH-SY5Y细胞(转染组),同时设空载体组和未转染组。通过G-418筛选后获得转入目的基因的细胞克隆。Hoechst33258染色观察凋亡细胞,免疫印迹法法检测细胞中Bax、Smac蛋白表达,免疫荧光染色检测Bax、Smac蛋白在细胞中的分布。结果转染后用G-418持续筛选2周可获得G418抗性的细胞克隆。Smac主要分布于胞质,Bax主要位于细胞核。转染组SH-SY5Y细胞Bax蛋白表达水平(1.067±0.036)较空载体组(0.436±0.035)和未转染组(0.444±0.046)显著增高(P<0.05);转染组Smac蛋白表达水平(1.408±0.044)相比空载体组(0.708±0.021)和未转染组(0.748±0.041)显著增高(P<0.05);空载体和未转染组细胞Bax和Snac蛋白表达均无显著差异(P>0.05)。转染组较未转染组细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。结论外源性Bax基因转入人神经母细胞瘤细胞中并稳定过表达,能够上调Smac蛋白表达,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 SH-sy5y细胞 BAX SMAC 细胞凋亡
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微波辐射对人成神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖与分化的影响
12
作者 王程 隋春红 +5 位作者 刘微 徐冶 于洋 刘师兵 吕士杰 潘文干 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期671-675,共5页
目的观察微波辐射对人成神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖与分化的影响。方法采用10、30、50 mW/cm2辐射强度的微波辐射SH-SY5Y细胞5 min,0mW/cm2为对照组,锥虫蓝拒染法进行细胞计数并计算增殖率;20μmol/L全反式维甲酸黑暗下诱导分化72 h后... 目的观察微波辐射对人成神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖与分化的影响。方法采用10、30、50 mW/cm2辐射强度的微波辐射SH-SY5Y细胞5 min,0mW/cm2为对照组,锥虫蓝拒染法进行细胞计数并计算增殖率;20μmol/L全反式维甲酸黑暗下诱导分化72 h后,在光学显微镜下观察细胞分化的形态并计算分化细胞率;流式细胞仪检测细胞周期;蛋白质印迹检测细胞神经纤丝重链亚基的蛋白表达。结果微波辐射后随辐射强度增加,细胞增殖率在各时间点上均出现不同程度的梯度抑制,与对照组(0mW/cm2)相比,10 mW/cm2辐射组在72 h时出现明显抑制;30 mW/cm2辐射组在48 h时出现明显抑制;50 mW/cm2辐射组在辐射12 h时就出现明显抑制;20μmol/L全反式维甲酸黑暗下诱导分化72 h后,30、50 mW/cm2微波辐射组细胞分化的数量少于对照组细胞,而且细胞轴突长度短于对照组细胞;随着辐射强度的增加,G0/G1期的SH-SY5Y细胞比例逐渐增加,S期细胞比例逐渐减少,G2+M期细胞比例变化相对较小;微波辐射后,SH-SY5Y细胞总NF-H蛋白表达无明显变化,但磷酸化的NF-H蛋白表达随辐射强度的增加逐渐降低。结论微波辐射可同时抑制SH-SY5Y细胞增殖与分化并呈现明显的剂量依赖性抑制作用;细胞周期呈G0/G1期阻滞;对NF-H的表达无影响,但明显抑制了NF-H的磷酸化。 展开更多
关键词 微波辐射 人成神经母细胞瘤SH-sy5y细胞 增殖 分化
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反义bcl-2 mRNA对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y生长和凋亡的作用
13
作者 关健 陈杰 +1 位作者 高洁 罗玉凤 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期243-246,I002,共5页
目的 研究反义bcl-2 mRNA对人神经母细胞瘤（NB）细胞株SH-SY5Y的生长和凋亡的作用。方法采用定向克隆构建携带反义bcl-2 cDNA片段的逆转录病毒载体PBabe-puro/Asbcl-2；应用脂质体Lipofectamine转染SH-SY5Y，经嘌呤霉素筛选，应用RT-PC... 目的 研究反义bcl-2 mRNA对人神经母细胞瘤（NB）细胞株SH-SY5Y的生长和凋亡的作用。方法采用定向克隆构建携带反义bcl-2 cDNA片段的逆转录病毒载体PBabe-puro/Asbcl-2；应用脂质体Lipofectamine转染SH-SY5Y，经嘌呤霉素筛选，应用RT-PCR证实外源性反义bcl-2 mRNA的表达，建立细胞株SH-SY5Y/Asbcl-2；应用免疫组化和Western印迹分析Bcl-2蛋白的表达变化；MTT法做细胞的生长曲线观察细胞的生长情况；通过提取基因组DNA检测顺式氯铂（CP）诱导的细胞凋亡所形成的DNA 梯带。结果RT-PCR证实转染细胞SH-SY5Y/Asbcl-2中有外源性反义bcl-2 mRNA的表达；免疫组化及Western印迹分析显示SH-SY5Y/Asbcl-2细胞的Bcl-2蛋白表达明显降低；生长曲线显示SH-SY5Y/Asbcl-2细胞生长缓慢;加入CP相同时间后，SH-SY5Y/Asbcl-2细胞凋亡形成的DNA 梯带更明显。结论脂质体方法转染携带反义bcl-2 cDNA片段的逆转录病毒载体能够获得稳定转染和表达反义bcl-2 mRNA的细胞；反义bcl-2 mRNA可抑制内源性Bcl-2蛋白的表达，抑制SH-SY5Y细胞的生长，增加SH-SY5Y细胞对CP的敏感性，促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 反义bcl-2mRNA SH-sy5y 细胞生长 细胞凋亡
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多柔比星联合蛋氨酸脑啡肽对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的生长抑制及Tau蛋白磷酸化的调节作用 被引量：2
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作者 曹振杰 《肿瘤基础与临床》 2018年第4期283-286,共4页
目的探讨多柔比星联合蛋氨酸脑啡肽(Met-ENK)对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的生长抑制及Tau蛋白磷酸化的调节作用。方法阳性对照组SH-SY5Y细胞以1. 25 mg·L^(-1)的多柔比星处理,低、中、高剂量实验组SH-SY5Y细胞分别以1. 25 mg·L... 目的探讨多柔比星联合蛋氨酸脑啡肽(Met-ENK)对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的生长抑制及Tau蛋白磷酸化的调节作用。方法阳性对照组SH-SY5Y细胞以1. 25 mg·L^(-1)的多柔比星处理,低、中、高剂量实验组SH-SY5Y细胞分别以1. 25 mg·L^(-1)的多柔比星+10-7、10-5、10-3mol·mL^(-1)Met-ENK处理,阴性对照组细胞以等量生理盐水处理。MTT法检测各组SH-SY5Y细胞存活率,流式细胞术和Hoeschest 33258细胞核染色检测各组SH-SY5Y细胞凋亡情况,Western Blot法检测各组SH-SY5Y细胞p-Tau蛋白表达情况。结果与阴性对照组比较,干预24、48、72 h后,阳性对照组和各实验组细胞存活率降低,且实验组低于阳性对照组,实验组细胞存活率随着Met-ENK浓度的增大逐渐降低(P <0. 05)。与阴性对照组比较,阳性对照组和各实验组细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例显著升高,中、高剂量实验组高于阳性对照组(P <0. 05);阳性对照组和各实验组S期细胞比例显著降低,中、高剂量实验组低于阳性对照组(P <0. 05)。与阴性对照组比较,阳性对照组和各实验组细胞p-Tau蛋白相对表达量明显升高,中、高剂量实验组高于阳性对照组(P <0. 05)。结论多柔比星联合Met-ENK可抑制神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞生长,并促进其凋亡,这可能与上调Tau蛋白磷酸化水平有关。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 蛋氨酸脑啡肽 多柔比星 SH-sy5y细胞 增殖 凋亡 TAU蛋白磷酸化
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细胞色素C1对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y增殖作用的研究
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作者 金雅琼 韩炜 +5 位作者 鲁洁 杨慧 伏利兵 王焕民 倪鑫 郭永丽 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2015年第1期10-13,共4页
目的 分析细胞色素C1（CYC1）在神经母细胞瘤（NB）增殖中的作用,探讨神经母细胞瘤增殖的分子机制。方法 首先采用在SH-SY5Y细胞系中慢病毒介导敲减CYC1基因方法,建立神经母细胞瘤CYC1敲减模型,并利用实时定量RT-PCR方法验证敲减效率;... 目的 分析细胞色素C1（CYC1）在神经母细胞瘤（NB）增殖中的作用,探讨神经母细胞瘤增殖的分子机制。方法 首先采用在SH-SY5Y细胞系中慢病毒介导敲减CYC1基因方法,建立神经母细胞瘤CYC1敲减模型,并利用实时定量RT-PCR方法验证敲减效率;随后利用荧光显微镜观察及细胞分析系统连续检测慢病毒感染SH-SY5Y细胞后连续5 d细胞增殖数。结果 慢病毒介导的SH-SY5Y细胞中CYC1基因敲减效率达77.0%±4%,具极显著差异（P〈0.01）;通过细胞分析系统连续检测SH-SY5Y细胞慢病毒感染敲减CYC1后0～5 d细胞数发现细胞增殖速度明显降低,对照组/敲减CYC1组细胞数1～5 d比值分别为（1.00±0.11）、（1.61±0.16）、（1.58±0.17）、（1.97±0.13）、（1.44±0.13）,具极显著差异（P〈0.01）。结论 CYC1基因沉默可抑制神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y增殖,CYC1在调节神经母细胞瘤生长增殖方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 细胞色素C1 神经母细胞瘤 SH-sy5y 细胞增殖
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活性氧对神经母细胞株SH-SY5Y细胞L型钙通道电流的影响
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作者 孙兆林 杜怡峰 +1 位作者 韩仲岩 李泱 《齐鲁医学杂志》 2004年第1期6-8,共3页
①目的　探讨氧自由基导致神经元钙超载的发生机制。②方法　在神经母细胞SH SY5Y细胞体外培养的基础上 ,采用全细胞膜片钳技术 ,观察H2 O2 对SH SY5Y细胞L型钙通道电流 (ICa ,L)的影响。③结果H2 O2 能够明显增加峰值ICa,L,且该作用具... ①目的　探讨氧自由基导致神经元钙超载的发生机制。②方法　在神经母细胞SH SY5Y细胞体外培养的基础上 ,采用全细胞膜片钳技术 ,观察H2 O2 对SH SY5Y细胞L型钙通道电流 (ICa ,L)的影响。③结果H2 O2 能够明显增加峰值ICa,L,且该作用具有浓度依赖性。H2 O2 使ICa ,L的I V相关曲线下移 ,但对其形状和最大激活电位无明显影响。④结论H2 O2 对L型钙通道有明显增强作用 ,此可能是其导致神经元钙超载的机制之一。 展开更多
关键词 活性氧 神经母细胞株 SH-sy5y细胞L型 钙通道电流 神经元
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反义P38cDNA抑制胆红素诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡
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作者 韩张 胡萍 倪道凤 《中国民康医学》 2003年第10期577-580,587,共5页
目的 :观察P3 8激酶特异性抑制剂SB2 0 3 580及反义P3 8激酶cDNA对胆红素诱导人神经母细胞瘤SH -SY 5Y细胞凋亡的影响 ,探讨P3 8激酶信号转导通路在胆红素诱导SH -SY5Y细胞凋亡中的作用及高胆红素血症损伤中枢神经细胞的分子机制及在听... 目的 :观察P3 8激酶特异性抑制剂SB2 0 3 580及反义P3 8激酶cDNA对胆红素诱导人神经母细胞瘤SH -SY 5Y细胞凋亡的影响 ,探讨P3 8激酶信号转导通路在胆红素诱导SH -SY5Y细胞凋亡中的作用及高胆红素血症损伤中枢神经细胞的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法 :分别经SB2 0 3 580和二甲基亚砜预处理的SH -SY5Y细胞在胆红素作用 3h和 5h后 ,在倒置光显微镜下观察细胞形态的变化及存活情况 ;流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。采用脂质体法将含人反义P3 8cDNA的真核表达载体 pcDNA 3 0 -antiP3 8导入SH -SY5Y细胞 ,建立稳定低表达P3 8蛋白的细胞株 ,经Westernblotting鉴定后命名为SH -SY5Y -antiP3 8,而转染空载体pcD NA3 0的SH -SY5Y细胞株则命名为SH -SY5Y -pcDNA3 0 ;SH -SY5Y -antiP3 8细胞和SH -SY5Y -pcD NA3 0细胞分别经胆红素作用 3h和 5h ,在倒置光显微镜下观察细胞形态的变化及存活情况 ;流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。结果 :在 0 0 2 g/L胆红素作用下 ,流式细胞仪显示与对照相比SB2 0 3 580预处理的SH -SY5Y细胞在胆红素作用 3h后 ,其凋亡细胞由 19 4%下降到 12 1% ,5h后由 66 2 %降到 3 9 3 % ;与SH -SY5Y -pcDNA3 0细胞相比 ,SH -SY5Y -antiP3 8细胞在胆红素作用 3h后 。 展开更多
关键词 反义P38cDNA 胆红素 诱导 神经母细胞瘤 SH-sy5y 细胞凋亡
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MALAT1抑制Aβ_(25-35)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖并促进细胞凋亡及其机制 被引量：4
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作者 杨蔚蔚 张胜 +1 位作者 李彪 张尧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期434-441,共8页
目的探讨长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)对Aβ_(25-35)诱导的阿尔茨海默病(AD)神经细胞的细胞周期、细胞增殖凋亡的影响。方法利用β淀粉样肽25-35(Aβ_(25-35))处理人神经母细胞瘤细胞SHSY5Y建立AD细胞模型。将AD SH-SY5... 目的探讨长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)对Aβ_(25-35)诱导的阿尔茨海默病(AD)神经细胞的细胞周期、细胞增殖凋亡的影响。方法利用β淀粉样肽25-35(Aβ_(25-35))处理人神经母细胞瘤细胞SHSY5Y建立AD细胞模型。将AD SH-SY5Y细胞随机分为对照组、p CDH空载体(p CDH-EV)组、MALAT1过表达(p CDH-MALAT1)组、抑制表达空载体(p SICOR-EV)组、抑制MALAT1表达(p SICOR-sh MALAT1)组。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测转染48 h后的细胞周期和细胞凋亡率,Western blot法检测细胞BAX、Bcl2、胱天蛋白酶3(caspase-3)以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化的PI3K(p-PI3K)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和磷酸化的mTOR(p-mTOR)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、磷酸化的GSK3β(p-GSK3β)蛋白水平。结果成功构建AD细胞模型和过表达及敲低MALAT1的表达载体。敲低MALAT1水平后,显著抑制AD模型细胞的增殖、细胞阻滞于G1期、促进细胞凋亡。同时上调BAX、caspase-3蛋白水平,下调Bcl2、p-PI3K、p-mTOR、p-GSK3β蛋白水平。过表达MALAT1则可逆转以上作用。结论敲低MALAT1水平可阻断PI3K/mTOR/GSK3β通路抑制Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1) SHsy5y人神经母细胞瘤细胞 阿尔茨海默病 细胞周期 细胞增殖 细胞凋亡 PI3K/mTOR/GSK3β通路
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P2X_7受体阻断剂对三磷腺苷诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞内Ca^(2+)水平的影响
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作者 李秀娟 王国红 +6 位作者 张利彬 杨坤丽 李超堃 王璐 宋景贵 赵红岗 李东亮 《新乡医学院学报》 CAS 2017年第7期555-559,共5页
目的观察三磷腺苷(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞内Ca^(2+)水平变化的特点,并探讨P2X_7受体阻断剂对其的影响。方法取对数生长期的SH-SY5Y细胞接种于含体积分数10%胎牛血清高糖达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)中,在37℃、体积分... 目的观察三磷腺苷(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞内Ca^(2+)水平变化的特点,并探讨P2X_7受体阻断剂对其的影响。方法取对数生长期的SH-SY5Y细胞接种于含体积分数10%胎牛血清高糖达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)中,在37℃、体积分数5%CO_2培养箱中培养24 h,随机分为4组,分别加入含0、1、3、5 mmol·L^(-1)ATP的培养液,每孔100μL,各组均分别作用15、30、60 min,然后用Hank's溶液洗涤细胞3次,Fluo-3/AM染细胞内Ca^(2+),Hoechst 33258染细胞核。荧光显微镜下观察细胞内荧光发射强度。另取对数生长期的SH-SY5Y细胞悬液接种于含体积分数10%胎牛血清高糖DMEM的96孔板中,在37℃、体积分数5%CO_2培养箱中培养24 h,随机分为正常对照组、ATP组及KN-62低、中、高剂量组,正常对照组细胞在每孔100μL培养液中常规培养,ATP组细胞在每孔100μL含5 mmol·L^(-1)ATP的培养液中培养,KN-62低、中、高剂量组细胞分别每孔先用100μL含100、500、1 000 nmol·L^(-1)KN-62的培养液孵育30 min,每孔再用100μL的5 mmol·L^(-1)ATP培养液处理1 h,用Hank's溶液洗涤细胞3次,Fluro-3/AM染色细胞内Ca^(2+),Hoechst 33258染色细胞核。荧光显微镜下观察细胞内荧光发射强度变化,图像分析软件记录结果,测每组细胞中Ca^(2+)的平均荧光强度。每次实验每组设3个平行复孔,实验重复3次。结果0 mmol·L^(-1)ATP组呈现荧光的细胞数量少,荧光强度弱;1、3、5 mmol·L^(-1)ATP组随着ATP剂量增加,呈现荧光的细胞数量逐渐增多,荧光强度逐渐增强;若ATP剂量相同,则随着ATP作用时间的延长,呈现荧光的细胞数量逐渐增多,荧光强度逐渐增强。正常对照组、ATP组、KN-62低、中、高剂量组细胞荧光强度分别为468.24±45.67、3 292.35±159.64、3 013.27±321.42、2 515.77±320.98、2 486.32±318.31,ATP组细胞平均荧光强度显著强于正常对照组(P<0.05);KN-62低、中、高剂量组细胞平均荧光强度均低于ATP组(P<0.05)。结论 ATP诱导SH-SY5Y细胞内Ca^(2+)升高具有浓度和时间依赖性,KN-62可部分阻断ATP的这一作用。 展开更多
关键词 三磷腺苷 人神经母细胞瘤 SH-sy5y细胞 Ca^2+ P2X7受体
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2,3-吲哚醌对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y侵袭转移的影响及机制
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作者 魏尧悦 侯琳 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第45期23-26,共4页
目的探讨2,3-吲哚醌对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y侵袭转移的影响及机制。方法体外培养SHSY5Y细胞,用不同浓度(50、100、200、300μmol/L)的2,3-吲哚醌处理细胞48 h,并设不加药物处理的细胞作为对照组,CCK-8法检测细胞活性,筛选合适的2,3-... 目的探讨2,3-吲哚醌对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y侵袭转移的影响及机制。方法体外培养SHSY5Y细胞,用不同浓度(50、100、200、300μmol/L)的2,3-吲哚醌处理细胞48 h,并设不加药物处理的细胞作为对照组,CCK-8法检测细胞活性,筛选合适的2,3-吲哚醌浓度;用吖啶橙染色法检测对照组和200μmol/L 2,3-吲哚醌处理组(加药组)的自噬溶酶体细胞数量;将细胞分别用50、100、200、300μmol/L 2,3-吲哚醌处理(加药组),并设空白对照,48 h后用Western blotting法检测自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ的表达水平,Transwell小室试验检测细胞的侵袭能力,划痕试验检测细胞迁移能力。结果与对照组相比,随着2,3-吲哚醌浓度的升高,细胞A450值降低,药物对细胞的抑制率升高(P<0.05或<0.01)。吖啶橙染色结果显示,与对照组相比,加药组产生自噬溶酶体的细胞数增多(P<0.01)。Western blotting结果显示,与空白对照比较,随着药物浓度增加,加药组LC3-Ⅱ表达增多(P<0.05或<0.01);Transwell小室试验和划痕试验表明,随着2,3-吲哚醌浓度的增加,SH-SY5Y细胞侵袭转移能力逐渐减弱(P均<0.05)。结论 2,3-吲哚醌可能通过诱导神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y自噬,从而抑制其侵袭转移。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 SH-sy5y细胞 2 3-吲哚醌 侵袭 转移
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