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1-甲基-4-苯基吡啶离子对人神经母细胞瘤细胞株哺乳动物雷帕霉素靶位信号通路的影响 被引量：1
1
作者 金虹艳 赵长振 +2 位作者 陈泽军 徐耑 孔岩 《临床神经病学杂志》 CAS 北大核心 2012年第3期208-210,共3页
目的研究1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)对人骨髓神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞哺乳动物雷帕霉素靶位(mTOR)信号通路相关蛋白表达的影响。方法体外培养的SH-SY5Y细胞分为正常对照组、MPP+0.25 mmol/L组、0.5 mmol/L组及1 mmol/L组,各MPP... 目的研究1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)对人骨髓神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞哺乳动物雷帕霉素靶位(mTOR)信号通路相关蛋白表达的影响。方法体外培养的SH-SY5Y细胞分为正常对照组、MPP+0.25 mmol/L组、0.5 mmol/L组及1 mmol/L组,各MPP+组细胞与含相应浓度的MPP+培养24 h。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞相对存活率;应用免疫印迹法检测各组细胞中mTOR蛋白、核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)、mTOR调控相关蛋白(Raptor)、雷帕霉素不敏感的mTOR伴侣蛋白(Rictor)以及与自噬相关的微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ)、Beclin1蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,各MPP+组细胞相对存活率显著降低(P<0.05～0.001);mTOR、p70S6K、Raptor、Rictor表达明显降低(P<0.05～0.001);LC3Ⅱ和Beclin1表达显著升高(P<0.05～0.001),均呈现出明显的量效关系。结论 MPP+通过抑制细胞中mTOR信号通路,诱导SH-SY5Y细胞自噬性死亡,并且与MPP+的浓度相关;这可能是MPP+导致PD动物模型发病的机制。 展开更多
关键词 1-甲基-4-苯基吡啶离子 哺乳动物雷帕霉素靶位 人神经母细胞瘤细胞株 自噬 帕金森病
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Caspase-3和Caspase-8在氟化钠致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡中的作用 被引量：8
2
作者 何卫红 徐八一 +4 位作者 徐志霞 夏涛 何平 高萍 王爱国 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期381-384,共4页
目的探讨半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)家族中的Caspase-3和Caspase-8对氟化钠(NaF)致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法先用不同浓度NaF(20、40、80μg/ml)对SH-SY5Y细胞进行染毒,24h后检测细胞存活率、凋亡率、Caspase-... 目的探讨半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)家族中的Caspase-3和Caspase-8对氟化钠(NaF)致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法先用不同浓度NaF(20、40、80μg/ml)对SH-SY5Y细胞进行染毒,24h后检测细胞存活率、凋亡率、Caspase-3活性以及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平;再选择适宜的40μg/mlNaF染毒剂量组,观察在Fas受体激动剂CH11或拮抗剂ZB4作用下其细胞凋亡率、Caspase-3活性及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平的改变。结果与对照组比较,40、80μg/ml染毒组细胞存活率降低,差异有统计学意义(P<0.01);细胞凋亡率随染毒剂量的升高呈上升趋势,且40、80μg/ml染毒组细胞凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);40、80μg/ml染毒组Caspase-3活性及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);激动剂CH11与NaF共培养对细胞凋亡显示出协同效应,拮抗剂ZB4可部分阻断NaF致SH-SY5Y细胞的凋亡。结论NaF可通过上调死亡受体Fas途径的关键酶Caspase-3和Caspase-8的表达,促进SH-SY5Y细胞凋亡。 展开更多
关键词 氟化物 氟化钠 人神经母细胞瘤细胞株 细胞凋亡 CASPASE-3 CASPASE-8
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不同能量的培养条件对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长的影响 被引量：2
3
作者 赵静姝 王蓉 +2 位作者 张景燕 吴燕川 姬志娟 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第2期66-69,I0003,共5页
目的建立热量限制的体外模型,观察不同能量培养条件下对人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞生长代谢的影响。方法将人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞分别采用含有低浓度(2 g/L)、正常浓度(3.15g/L)或高浓度(4.5 g/L)葡萄糖的培养基进行常... 目的建立热量限制的体外模型,观察不同能量培养条件下对人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞生长代谢的影响。方法将人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞分别采用含有低浓度(2 g/L)、正常浓度(3.15g/L)或高浓度(4.5 g/L)葡萄糖的培养基进行常规传代培养,利用MTT代谢率、细胞生长曲线及LDH漏出率等指标观察各组细胞生长情况。结果与正常葡萄糖浓度培养条件下培养的对照组相比,高糖组细胞突起缩短,细胞胞体皱缩,MTT代谢率稍低(0.573±0.001),LDH漏出率高,细胞生长状态差;与对照组相比,低糖组细胞突起伸展,MTT代谢率较低(0.428±0.003),LDH漏出率低,细胞生长速度缓慢,但是形态良好。结论高糖培养对细胞有损伤作用,细胞代谢加速,更容易衰老死亡;而低糖培养起到保护作用,在热量限制允许范围内降低培养液的含糖量,不但不会对细胞造成损伤,反而对细胞的代谢及生长起到保护作用,延长细胞的总体寿命。 展开更多
关键词 热量限制 葡萄糖 细胞生长 细胞代谢 细胞培养 人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y
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DHRS4基因簇缺失型神经母细胞瘤细胞株的克隆和鉴定
4
作者 苏中静 刘戈飞 +3 位作者 宋旭红 陈海滨 常晓兰 黄东阳 《解剖学研究》 CAS 2011年第2期89-91,共3页
目的单克隆培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y-细胞株,并鉴定其在基因水平缺失DHRS4基因簇,包括DHRS4、DHRS4L2和DHRS4L1的基因序列。方法有限稀释法培养实验室偶得的低表达DHRS4基因的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,相差显微镜观察细胞的生长和增... 目的单克隆培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y-细胞株,并鉴定其在基因水平缺失DHRS4基因簇,包括DHRS4、DHRS4L2和DHRS4L1的基因序列。方法有限稀释法培养实验室偶得的低表达DHRS4基因的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,相差显微镜观察细胞的生长和增殖,PCR、RT-PCR检测DHRS4、DHRS4L2和DHRS4L1基因的DNA和RNA含量,Westernblotting检测DHRS4蛋白的表达。结果筛选得到单克隆神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,在DNA、RNA和蛋白水平均未检测到DHRS4基因簇的DNA序列及表达产物。结论经过克隆低表达DHRS4基因簇的SH-SY5Y细胞,得到纯系的DHRS4基因簇缺失的SH-SY5Y-细胞株,该细胞对于进一步研究DHRS4基因簇的功能和表达调控都是难得的细胞模型。 展开更多
关键词 DHRS4基因簇 人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株 基因缺失
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细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在SH-SY5Y细胞中的表达
5
作者 智孔亮 辛娜 +1 位作者 曹志红 卢丽敏 《神经损伤与功能重建》 2015年第6期474-476,共3页
目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在SH-SY5Y细胞中的表达及其与泛素表达的定位关系。方法:采用不同浓度的MG-132蛋白酶体抑制剂(0、0.5、1、2.5和5μmol/L)处理体外培养人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞。处理24 h后,采用In-cell ... 目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在SH-SY5Y细胞中的表达及其与泛素表达的定位关系。方法:采用不同浓度的MG-132蛋白酶体抑制剂(0、0.5、1、2.5和5μmol/L)处理体外培养人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞。处理24 h后,采用In-cell Western法和Western Blot法检测SH-SY5Y细胞中CD147蛋白的表达,采用免疫荧光双标法检测CD147和泛素的共表达。结果:不同浓度的MG-132蛋白酶体抑制剂处理SH-SY5Y细胞,CD147蛋白的含量呈浓度依赖性增加。当抑制剂浓度为5μmol/L时,CD147的含量明显高于抑制剂浓度为0μmol/L组,差异有统计学意义(P<0.05)。SH-SY5Y细胞中同时存在CD147和泛素的表达,而且存在共表达部位。结论:CD147可能通过泛素-蛋白酶体途径降解。 展开更多
关键词 细胞外基质金属蛋白酶诱导因子 人神经母细胞瘤细胞株 泛素-蛋白酶体
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吗啡对SH-SY5Y细胞中HSP70蛋白的调控作用 被引量：3
6
作者 杨海玉 《南昌大学学报（医学版）》 CAS 2014年第11期15-18,共4页
目的观察吗啡对人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞中热休克蛋白70(HSP70)的调控作用。方法将维甲酸诱导分化的SH-SY5Y细胞随机分为4组:正常对照组(Con组),给予PBS作用48h;吗啡组(Mor组),给予吗啡10μmol作用48h;吗啡+纳络酮组(Mor+Nal组),给... 目的观察吗啡对人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞中热休克蛋白70(HSP70)的调控作用。方法将维甲酸诱导分化的SH-SY5Y细胞随机分为4组:正常对照组(Con组),给予PBS作用48h;吗啡组(Mor组),给予吗啡10μmol作用48h;吗啡+纳络酮组(Mor+Nal组),给予纳洛酮100μmol作用30min,之后给予吗啡10μmol作用48h;纳络酮组(Nal组),给予纳洛酮100μmol作用48h。采用免疫印迹方法检测各组HSP70蛋白表达水平。结果与Con组比较,Mor组SH-SY5Y细胞中HSP70蛋白表达水平显著升高(P<0.001);与Mor组比较,Mor+Nal组、Nal组SH-SY5Y细胞中HSP70蛋白表达水平均明显抑制(P<0.01或P<0.001)。结论吗啡对HSP70蛋白表达具有促进作用。 展开更多
关键词 吗啡 热休克蛋白70 人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株 调控作用
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氟化钠诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡及其机制研究 被引量：2
7
作者 徐八一 王普生 +3 位作者 黄建云 徐志霞 夏涛 王爱国 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期944-946,共3页
目的研究氟化钠(NaF)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的损伤及致凋亡作用,并初步探讨NaF致神经毒性的作用机制。方法取对数生长期的SH-SY5Y细胞(1×107/ml),先加入0(对照)、20、40、80 mg/L的NaF溶液对SH-SY5Y细胞染毒24 h;再选择40 m... 目的研究氟化钠(NaF)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的损伤及致凋亡作用,并初步探讨NaF致神经毒性的作用机制。方法取对数生长期的SH-SY5Y细胞(1×107/ml),先加入0(对照)、20、40、80 mg/L的NaF溶液对SH-SY5Y细胞染毒24 h;再选择40 mg/L的NaF溶液与380.40 mg/L的乙二醇双(2-氨基乙醚)四乙酸(EGTA)溶液或38.23 mg/L的胞内钙离子螯合剂(BAPTA-AM)溶液(提前30 min加入)联合染毒24 h。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率和胞内钙离子([Ca2+]i)水平,并用激光共聚焦(laser scanningconfocal microscopy,LSCM)技术,从单个细胞水平检测NaF对胞内游离Ca2+瞬间动态变化的影响。结果与对照组比较,40、80 mg/L NaF染毒组SH-SY5Y细胞的存活率较低,凋亡率较高,差异均有统计学意义(P<0.05);各NaF染毒组SH-SY5Y细胞的[Ca2+]i水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。且随着NaF染毒浓度的升高,SH-SY5Y细胞的存活率呈下降趋势,凋亡率和[Ca2+]i水平均呈上升趋势。LSCM连续扫描显示,40和80 mg/L NaF染毒组SH-SY5Y细胞[Ca2+]i的FI值达到峰值的时间分别为6 000～7 000 s和1 000～2 000 s,20 mg/L NaF染毒组未见明显的峰值;且NaF的浓度越高,[Ca2+]i达到峰值的时间越短。析因分析表明,胞内钙离子螯合剂(BAPTA-AM)与NaF对SH-SY5Y细胞凋亡和[Ca2+]i升高存在交互作用(F值分别为10.69、366.14,均P<0.05),BAPTA-AM可拮抗NaF对SH-SY5Y细胞的损伤作用;胞外钙离子螯合剂乙二醇双四乙酸(EGTA)与NaF对SH-SY5Y细胞凋亡和[Ca2+]i升高无交互作用(F值分别为0.02、0.03,均P>0.05)。结论 NaF对SH-SY5Y细胞的升钙作用可能参与了NaF的致细胞损伤和诱导凋亡作用,[Ca2+]i的升高可能与胞内钙库的释放有关。 展开更多
关键词 氟化钠 人神经母细胞瘤细胞株 细胞凋亡 钙离子
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蕨麻醇提取物对缺氧诱发的神经母细胞瘤细胞损伤效应的拮抗作用 被引量：5
8
作者 黄菲 高宏生 +2 位作者 何文彤 唐琼琳 李素平 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1066-1069,F0003,共5页
目的探讨蕨麻醇提取物对硫代硫酸钠(Na2S2O4)诱发的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞株缺氧损伤的拮抗作用。方法取处于生长对数期的SH-SY5Y细胞,分别设空白对照(D-Hank液)组、缺氧模型(1 mmol/L连二亚硫酸钠)组及1、0.25、0.062 5 g/L蕨麻... 目的探讨蕨麻醇提取物对硫代硫酸钠(Na2S2O4)诱发的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞株缺氧损伤的拮抗作用。方法取处于生长对数期的SH-SY5Y细胞,分别设空白对照(D-Hank液)组、缺氧模型(1 mmol/L连二亚硫酸钠)组及1、0.25、0.062 5 g/L蕨麻醇提取物拮抗缺氧(1 mmol/L连二亚硫酸钠)组,于5%CO2、37℃孵育4 h后,采用MTT试验检测细胞活性,测定上清液乳酸脱氢酶(LDH)活力,采用悬浮芯片蛋白法测定细胞内单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-10、γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)水平7种细胞因子水平。结果与空白对照组比较,缺氧模型组和各剂量蕨麻醇提取物拮抗缺氧组SH-SY5Y细胞活性下降,LDH外漏量和空泡细胞率增大,MCP-1、IL-1β、IFN-γ和TNF-α水平升高,VEGF、IL-6和IL-10含量下降。与缺氧模型组比较,各剂量蕨麻醇提取物拮抗缺氧组细胞活性升高,LDH外漏量和空泡细胞率减少,细胞因子水平发生逆转,其中,MCP-1、IL-6、IFN-γ的改变以1 g/L组最为明显,IL-1β、IL-10、TNF-α、VEGF的变化以0.062 5 g/L组明显。结论蕨麻醇提取物可拮抗连二亚硫酸钠所致SH-SY5Y细胞缺氧损伤效应。 展开更多
关键词 蕨麻醇提取物 硫代硫酸钠 人神经母细胞瘤细胞株 乳酸脱氢酶 缺氧 细胞因子
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葡萄内酯对SH-SY5Y神经细胞损伤模型保护作用的研究 被引量：2
9
作者 罗小泉 陈海芳 +1 位作者 李中炼 杨武亮 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第12期156-158,共3页
为了研究葡萄内酯对人神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)损伤模型的保护作用,试验应用硫代硫酸钠(Na2S2O4)及L-谷氨酸分别建立缺氧缺糖细胞损伤模型及L-谷氨酸诱导细胞损伤模型,于37℃、5%CO2、饱和湿度的条件下培养和孵育4 h,采用MTT法检测... 为了研究葡萄内酯对人神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)损伤模型的保护作用,试验应用硫代硫酸钠(Na2S2O4)及L-谷氨酸分别建立缺氧缺糖细胞损伤模型及L-谷氨酸诱导细胞损伤模型,于37℃、5%CO2、饱和湿度的条件下培养和孵育4 h,采用MTT法检测细胞活性。结果表明:葡萄内酯可增加Na2S2O4诱导的缺糖缺氧细胞损伤模型及L-谷氨酸诱导的细胞损伤模型细胞的存活率。说明葡萄内酯对神经细胞损伤有保护作用。 展开更多
关键词 葡萄内酯 硫代硫酸钠(Na2S2O4) L-谷氨酸 人神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y) 缺氧
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