目的研究糖化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)对人结肠癌HCT116细胞中碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate responsive element binding protein,ChREBP)表达的影响。方法采用RTPCR检测AGEs处理的人结肠癌HCT116...目的研究糖化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)对人结肠癌HCT116细胞中碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate responsive element binding protein,ChREBP)表达的影响。方法采用RTPCR检测AGEs处理的人结肠癌HCT116细胞中ChREBP及其下游基因的表达;使用N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预氧化应激状态;运用Western印迹法观察在HCT116细胞中AGEs诱导对ChREBP表达的影响;运用MTS比色法观察AGEs诱导对HCT116细胞增殖的影响。结果 AGEs刺激后人结肠癌HCT116细胞中转录因子ChREBP表达增加(P<0.05);细胞经抗氧化剂NAC处理后,AGEs刺激所致ChREBP表达增加和HCT116细胞增殖均被明显抑制(P<0.05)。结论 AGEs通过激活氧化应激反应来上调人结肠癌HCT116细胞中的ChREBP表达。展开更多
目的:研究藤黄对人结肠癌HCT116细胞建立的裸鼠外科原位移植瘤生长及转移的抑制作用.方法:通过外科原位移植能表达绿色荧光蛋白人结肠癌HCT116细胞的方法建立裸鼠结肠癌模型.40只模型裸鼠随机分为对照组(G1),5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,...目的:研究藤黄对人结肠癌HCT116细胞建立的裸鼠外科原位移植瘤生长及转移的抑制作用.方法:通过外科原位移植能表达绿色荧光蛋白人结肠癌HCT116细胞的方法建立裸鼠结肠癌模型.40只模型裸鼠随机分为对照组(G1),5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组(G2),10、20 mg/kg藤黄组(G3、G4),每组10只.G1组采用生理盐水灌胃,1次/d;G2组用25 mg/kg的5-FU进行腹腔灌注,3次/wk;G3、G4组分别予相应剂量的藤黄提取物灌胃,1次/d.每天观察受试裸鼠的并发症及死亡情况,2次/wk在体外荧光影像系统下观察移植肿瘤大小并测量裸鼠体质量,实验终点处死所有受试裸鼠在开放荧光系统下观察肿瘤生长及转移情况,切除移植肿瘤进行称体质量.结果:药物干预后,20 mg/kg藤黄组各观察点的平均肿瘤体积(mm3)均小于对照组(d4:104.5±35.5 vs 164.1±66.1;d7:102.6±53.8vs 286.2±132.0;d11:137.6±70.5 vs 324.4±115.8;d14:207.2±101.7 vs 434.2±169.3;d21:229.8±99.8 vs 480.4±165.5),差异有统计学意义(P<0.05).实验终点20 mg/kg藤黄组的平均肿瘤质量轻于对照组(0.58 g±0.26 g vs 0.92 g±0.26 g),差异有统计学意义(P<0.05).20 mg/kg藤黄组与5-FU组之间比较,10 mg/kg藤黄组与对照组比较,无论是各观察点平均肿瘤体积还是实验终点肿瘤重量差异无统计学意义(P>0.05).实验终点开放体内荧光成像显示各组均出现了不同程度的胰腺及淋巴结转移,比较组间淋巴结及胰腺转移率的差异无统计学意义(P>0.05).实验过程中各组实验动物均未出现药物相关的不良反应,各组荷瘤裸鼠的平均体质量未出现明显波动.结论:藤黄在达到一定干预剂量(20 mg/kg)后能安全有效地抑制人结肠癌HCT116细胞裸鼠原位移植瘤的生长,可能具有潜在的临床抗结直肠癌作用.展开更多
目的研究姜黄素抑制结直肠癌HCT116细胞增殖的分子机制。方法体外培养HCT116细胞,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测不同浓度姜黄素(0、10、20、50、100、200μmol/L)对HCT116细胞增殖率的影响,实验分空白对照组、EGF组(单独加入20 ng/m L ...目的研究姜黄素抑制结直肠癌HCT116细胞增殖的分子机制。方法体外培养HCT116细胞,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测不同浓度姜黄素(0、10、20、50、100、200μmol/L)对HCT116细胞增殖率的影响,实验分空白对照组、EGF组(单独加入20 ng/m L EGF)、EGF+姜黄素组;细胞锚定增殖实验检测药物对HCT116细胞增殖的抑制作用;体外结合及体外激酶实验检测姜黄素对磷酸化酶b激酶(PBK)活性的影响;Western blotting及免疫组织化学方法检测姜黄素对PBK下游信号通路的影响。结果当姜黄素浓度<50μmol/L时,对HCT116细胞影响较小;而当浓度达到100μmol/L时,HCT116细胞凋亡明显增加。HCT116细胞在软琼脂内锚定增殖的结果显示:与EGF组比较,EGF+姜黄素组细胞克隆小且克隆数量少,具有药物浓度依赖性。体外结合及体外激酶实验结果显示姜黄素可以结合PBK,并抑制PBK的活性。Western blotting及免疫组织化学结果显示姜黄素明显下调PBK下游信号通路ERK1/2及H3的磷酸化水平,具有时间和浓度依赖性。结论在结直肠癌HCT116细胞中,姜黄素可能通过抑制PBK的活性,起到抗HCT116细胞增殖的作用。展开更多
目的:探讨可溶性Tie2(soluble Tie 2,sTie2)对结肠癌HCT116细胞血管生成拟态(vascular mimicry,VM)形成、增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:将重组质粒pBLAST49-hsTie2及对照质粒pBLAST49通过脂质体转染至HCT116细胞,分别形成hsTie2-HC...目的:探讨可溶性Tie2(soluble Tie 2,sTie2)对结肠癌HCT116细胞血管生成拟态(vascular mimicry,VM)形成、增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:将重组质粒pBLAST49-hsTie2及对照质粒pBLAST49通过脂质体转染至HCT116细胞,分别形成hsTie2-HCT116细胞和Ctrl-HCT116细胞。通过3D模型培养、SRB法、细胞划痕实验及Transwell法分别检测HCT116细胞的VM形成、增殖、迁移及侵袭能力,采用Western blotting法检测HCT116细胞中VE-cadherin蛋白的表达。结果:pBLAST49-hsTie2重组质粒成功转染至结肠癌HCT116细胞。与Ctrl-HCT116细胞相比,hsTie2-HCT116细胞中VM的形成[(0.75±0.45)vs(7.50±0.52)个/视野,P<0.01]及VE-cadherin蛋白的表达[(1.23±0.08)vs(1.73±0.02),P<0.05]显著降低;细胞增殖率也显著降低[(32.57±4.57)%vs(88.24±21.94)%,P<0.01];细胞迁移能力[(0.37±0.07)vs(0.80±0.03)mm,P<0.01]及侵袭能力[(57.25±3.17)vs(127.25±6.25)个/视野,P<0.01]均显著减弱。结论:sTie2通过阻抑VM形成抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,有望成为既抗血管生成又抗VM形成的双靶向治疗结肠癌的药物。展开更多
文摘目的研究糖化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)对人结肠癌HCT116细胞中碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate responsive element binding protein,ChREBP)表达的影响。方法采用RTPCR检测AGEs处理的人结肠癌HCT116细胞中ChREBP及其下游基因的表达;使用N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预氧化应激状态;运用Western印迹法观察在HCT116细胞中AGEs诱导对ChREBP表达的影响;运用MTS比色法观察AGEs诱导对HCT116细胞增殖的影响。结果 AGEs刺激后人结肠癌HCT116细胞中转录因子ChREBP表达增加(P<0.05);细胞经抗氧化剂NAC处理后,AGEs刺激所致ChREBP表达增加和HCT116细胞增殖均被明显抑制(P<0.05)。结论 AGEs通过激活氧化应激反应来上调人结肠癌HCT116细胞中的ChREBP表达。
文摘目的:研究藤黄对人结肠癌HCT116细胞建立的裸鼠外科原位移植瘤生长及转移的抑制作用.方法:通过外科原位移植能表达绿色荧光蛋白人结肠癌HCT116细胞的方法建立裸鼠结肠癌模型.40只模型裸鼠随机分为对照组(G1),5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组(G2),10、20 mg/kg藤黄组(G3、G4),每组10只.G1组采用生理盐水灌胃,1次/d;G2组用25 mg/kg的5-FU进行腹腔灌注,3次/wk;G3、G4组分别予相应剂量的藤黄提取物灌胃,1次/d.每天观察受试裸鼠的并发症及死亡情况,2次/wk在体外荧光影像系统下观察移植肿瘤大小并测量裸鼠体质量,实验终点处死所有受试裸鼠在开放荧光系统下观察肿瘤生长及转移情况,切除移植肿瘤进行称体质量.结果:药物干预后,20 mg/kg藤黄组各观察点的平均肿瘤体积(mm3)均小于对照组(d4:104.5±35.5 vs 164.1±66.1;d7:102.6±53.8vs 286.2±132.0;d11:137.6±70.5 vs 324.4±115.8;d14:207.2±101.7 vs 434.2±169.3;d21:229.8±99.8 vs 480.4±165.5),差异有统计学意义(P<0.05).实验终点20 mg/kg藤黄组的平均肿瘤质量轻于对照组(0.58 g±0.26 g vs 0.92 g±0.26 g),差异有统计学意义(P<0.05).20 mg/kg藤黄组与5-FU组之间比较,10 mg/kg藤黄组与对照组比较,无论是各观察点平均肿瘤体积还是实验终点肿瘤重量差异无统计学意义(P>0.05).实验终点开放体内荧光成像显示各组均出现了不同程度的胰腺及淋巴结转移,比较组间淋巴结及胰腺转移率的差异无统计学意义(P>0.05).实验过程中各组实验动物均未出现药物相关的不良反应,各组荷瘤裸鼠的平均体质量未出现明显波动.结论:藤黄在达到一定干预剂量(20 mg/kg)后能安全有效地抑制人结肠癌HCT116细胞裸鼠原位移植瘤的生长,可能具有潜在的临床抗结直肠癌作用.
文摘目的:探讨可溶性Tie2(soluble Tie 2,sTie2)对结肠癌HCT116细胞血管生成拟态(vascular mimicry,VM)形成、增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:将重组质粒pBLAST49-hsTie2及对照质粒pBLAST49通过脂质体转染至HCT116细胞,分别形成hsTie2-HCT116细胞和Ctrl-HCT116细胞。通过3D模型培养、SRB法、细胞划痕实验及Transwell法分别检测HCT116细胞的VM形成、增殖、迁移及侵袭能力,采用Western blotting法检测HCT116细胞中VE-cadherin蛋白的表达。结果:pBLAST49-hsTie2重组质粒成功转染至结肠癌HCT116细胞。与Ctrl-HCT116细胞相比,hsTie2-HCT116细胞中VM的形成[(0.75±0.45)vs(7.50±0.52)个/视野,P<0.01]及VE-cadherin蛋白的表达[(1.23±0.08)vs(1.73±0.02),P<0.05]显著降低;细胞增殖率也显著降低[(32.57±4.57)%vs(88.24±21.94)%,P<0.01];细胞迁移能力[(0.37±0.07)vs(0.80±0.03)mm,P<0.01]及侵袭能力[(57.25±3.17)vs(127.25±6.25)个/视野,P<0.01]均显著减弱。结论:sTie2通过阻抑VM形成抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,有望成为既抗血管生成又抗VM形成的双靶向治疗结肠癌的药物。
