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MUC5AC特异性siRNA对胆管癌细胞株HCCC-9810增殖及凋亡的影响
1
作者 黄强 任雪峰 +1 位作者 刘臣海 齐伟 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第6期566-572,共7页
目的:探讨黏蛋白5AC特异性siRNA对人肝内胆管癌细胞珠HCCC-9810体外增殖及凋亡能力的影响.方法:设计合成三对特异性siRNA,构建了三个可在哺乳动物细胞中表达siRNA的表达质粒,pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3,应用脂质体转染技术分别... 目的:探讨黏蛋白5AC特异性siRNA对人肝内胆管癌细胞珠HCCC-9810体外增殖及凋亡能力的影响.方法:设计合成三对特异性siRNA,构建了三个可在哺乳动物细胞中表达siRNA的表达质粒,pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3,应用脂质体转染技术分别将三个稳定表达的质粒和对照质粒(空质粒对照)转染HCCC-9810,应用有荧光标记的非特异性小分子的siRNA检测转染效率,RT-PCR检测黏蛋白5AC基因mRNA水平;SABC免疫组化染色技术检测黏蛋白5AC的表达;MTT检测细胞生长增殖情况;流式细胞仪分析细胞凋亡.结果:基因测序表明成功构建质粒;转染后荧光蛋白表达率28.57%;RT-PCR结果表明在mRNA水平,三个质粒都可抑制黏蛋白5AC基因的表达,并可使黏蛋白5AC的表达下降,MTT结果对细胞的生长有一定的抑制作用,流式细胞仪分析结果使肿瘤细胞凋亡增加.结论:构建pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3质粒明显抑制了黏蛋白5AC基因在mRNA水平及蛋白的表达,并可抑制肿瘤细胞的生长增殖和诱导其凋亡. 展开更多
关键词 hccc-9810细胞 胆管癌 黏蛋白5AC RNA干扰 细胞增殖 细胞凋亡
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三氧化二砷诱导人胆管癌细胞系HCCC-9810凋亡的初步研究 被引量：1
2
作者 高家森 刘斌 《徐州医学院学报》 CAS 2004年第3期215-217,共3页
目的　研究三氧化二砷 (As2 O3 )对胆管癌细胞的抑制作用及其机制。方法　用不同浓度的As2 O3 处理胆管癌细胞株HCCC - 9810 ,应用倒置显微镜、MTT法、流式细胞仪观察胆管癌细胞的变化。结果　As2 O3 在 0 .75、1.5、3.0、6 .0 μmol/L... 目的　研究三氧化二砷 (As2 O3 )对胆管癌细胞的抑制作用及其机制。方法　用不同浓度的As2 O3 处理胆管癌细胞株HCCC - 9810 ,应用倒置显微镜、MTT法、流式细胞仪观察胆管癌细胞的变化。结果　As2 O3 在 0 .75、1.5、3.0、6 .0 μmol/L的浓度对胆管癌细胞作用不同时间 ,作用 72h时生长抑制率分别为 2 2 .34%、4 3.2 5 %、5 9 6 8%、6 9.95 %。结论　适合浓度的As2 O3 在体外可诱导胆管癌细胞凋亡 ,有较明显的时间和剂量依赖性 ,其发生机制可能与细胞周期阻滞有关。 展开更多
关键词 三氧化二砷 胆管癌 癌细胞 hccc-9810 细胞凋亡 流式细胞仪
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siRNA沉默MUC5AC基因对胆管癌HCCC-9810细胞生长的影响 被引量：1
3
作者 任雪峰 黄强 《肝胆外科杂志》 2009年第2期143-146,共4页
目的探讨特异性MUC5AC-siRNA沉默MUC5AC基因后对人肝内胆管癌细胞株HCCC-9810生长能力的影响。方法设计合成三对特异性siRNA,构建了三个稳定表达质粒,pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3,应用脂质体转染技术分别将三个稳定表达的质粒和... 目的探讨特异性MUC5AC-siRNA沉默MUC5AC基因后对人肝内胆管癌细胞株HCCC-9810生长能力的影响。方法设计合成三对特异性siRNA,构建了三个稳定表达质粒,pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3,应用脂质体转染技术分别将三个稳定表达的质粒和对照质粒(空质粒对照)转染HCCC-9810,RT-PCR检测MUC5AC基因mRNA水平;SABC免疫组化染色技术检测MUC5AC粘蛋白的表达;MTT检测细胞生长增殖情况。结果基因测序表明成功构建质粒;转染后RT-PCR结果表明在mRNA水平,三个质粒都可抑制MUC5AC基因的表达,并可使MUC5AC的表达下降,MTT结果对细胞的生长有一定的抑制作用。结论构建pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3质粒明显抑制了MUC5AC基因在mRNA水平及蛋白的表达,并可抑制肿瘤细胞的生长增殖,为探讨MUC5AC在MUC5AC相关肿瘤的基因治疗方面奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 hccc-9810胆管癌细胞 MUC5AC RNAI 细胞增殖
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肝内胆管癌细胞9810凋亡和bcl-2基因表达关系研究
4
作者 夏光涛 张尚忠 史朝晖 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2004年第3期170-171,共2页
应用阿霉素诱导肝内胆管癌细胞 9810凋亡 ,研究其凋亡与bcl- 2基因表达之间的关系。应用流式细胞仪检测肝内胆管癌细胞凋亡的情况 ,并同时检测bcl- 2基因表达。随着阿霉素浓度的增加 ,细胞凋亡率逐步上升 ,同时bcl- 2基因表达下调。bcl... 应用阿霉素诱导肝内胆管癌细胞 9810凋亡 ,研究其凋亡与bcl- 2基因表达之间的关系。应用流式细胞仪检测肝内胆管癌细胞凋亡的情况 ,并同时检测bcl- 2基因表达。随着阿霉素浓度的增加 ,细胞凋亡率逐步上升 ,同时bcl- 2基因表达下调。bcl- 2基因表达下调是阿霉素诱导肝内胆管癌细胞凋亡机制之一。 展开更多
关键词 肝内胆管癌 细胞凋亡 BCL-2 基因表达 癌细胞9810 胆管型肝癌
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隐丹参酮对人胆管癌HCCC-9810细胞中Survivin基因表达的影响 被引量：10
5
作者 陈春雷 弓建华 +2 位作者 缪辉来 林晖 林俊琼 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第23期3028-3031,共4页
目的探讨隐丹参酮(CTS)对人胆管癌HCCC-9810细胞作用的敏感性并研究隐丹参酮对人胆管癌细胞周期及细胞凋亡率的影响,初步探讨隐丹参酮对人胆管癌细胞凋亡抑制基因Survivin表达的影响。方法体外培养胆管癌细胞HCCC-9810,采用不同浓度隐... 目的探讨隐丹参酮(CTS)对人胆管癌HCCC-9810细胞作用的敏感性并研究隐丹参酮对人胆管癌细胞周期及细胞凋亡率的影响,初步探讨隐丹参酮对人胆管癌细胞凋亡抑制基因Survivin表达的影响。方法体外培养胆管癌细胞HCCC-9810,采用不同浓度隐丹参酮予以干预,通过细胞形态观察及MTT实验,初步研究隐丹参酮对人胆管癌细胞HCCC-9810的敏感性;应用流式细胞仪检测隐丹参酮诱导人胆管癌细胞周期的变化;Hochest染色法检测诱导细胞凋亡;RT-PCR检测人胆管癌HCCC-9810细胞Survivin基因mRNA表达变化。结果隐丹参酮可明显抑制胆管癌HCCC-9810细胞株的增殖且该抑制效应随药物剂量的增加和作用时间的延长而增强;随着最适药物浓度作用时间的延长,胆管癌细胞明显被阻滞在G0/G1期,使S期细胞比例降低,细胞凋亡数目逐渐增加,Survivin基因mRNA表达逐渐降低。结论隐丹参酮对人胆管癌HCCC-9810细胞增殖抑制作用呈剂量和时间依赖效应;隐丹参酮能诱导人胆管癌HCCC-9810细胞凋亡,其机制可能是通过影响肿瘤细胞的细胞周期、抑制Survivin基因表达有关。 展开更多
关键词 人胆管癌细胞(hccc-9810) SURVIVIN基因 隐丹参酮
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荜茇酰胺对人胆管癌HCCC-9810细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1
6
作者 陈宙 陈春雷 +2 位作者 林晖 何琳 韩卓兴 《广东医学院学报》 2016年第5期484-486,490,共4页
目的探讨荜茇酰胺(PL)对人胆管癌HCCC-9810细胞增殖、凋亡和生长迁移的影响。方法用MTT法检测不同浓度(0、5、20μmol/L)的PL干预后的人胆管癌HCCC-9810细胞增殖活力,并用Hochest33258试验和细胞划痕试验分别检测HCCC-9810细胞的凋亡和... 目的探讨荜茇酰胺(PL)对人胆管癌HCCC-9810细胞增殖、凋亡和生长迁移的影响。方法用MTT法检测不同浓度(0、5、20μmol/L)的PL干预后的人胆管癌HCCC-9810细胞增殖活力,并用Hochest33258试验和细胞划痕试验分别检测HCCC-9810细胞的凋亡和生长迁移情况。结果人胆管癌HCCC-9810细胞经不同浓度(0、5、20μmol/L)的PL处理后,其PL浓度越高,细胞增值率越降低(P<0.01),核变形细胞比例越高(P<0.01)。结论 PL能明显抑制人胆管癌HCCC-9810细胞的增殖,且具有明显的浓度依赖性;PL且可诱导人胆管癌HCCC-9810细胞的凋亡,并明显抑制人胆管癌HCCC-9810细胞生长迁移。 展开更多
关键词 荜茇酰胺 胆管癌 hccc-9810细胞凋亡
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siRNA对胆管癌细胞自分泌运动因子表达的影响 被引量：3
7
作者 刘斌 寇昌华 +4 位作者 谢应海 王人颢 李文美 任泽强 李向农 《肝胆胰外科杂志》 CAS 2006年第5期291-293,共3页
目的研究针对自分泌运动因子(autotaxin,ATX)的小干扰RNA(siRNA)对人胆管癌细胞ATX基因表达的影响,探讨RNA干扰技术治疗胆管癌的前景。方法参考人黑色素瘤ENPP2基因序列,设计合成ATX-siRNA及随机阴性对照。在阳离子脂质体的介导下转染... 目的研究针对自分泌运动因子(autotaxin,ATX)的小干扰RNA(siRNA)对人胆管癌细胞ATX基因表达的影响,探讨RNA干扰技术治疗胆管癌的前景。方法参考人黑色素瘤ENPP2基因序列,设计合成ATX-siRNA及随机阴性对照。在阳离子脂质体的介导下转染人胆管癌细胞HCCC-9810。分别于转染后24,48,72h收集细胞,用半定量RT-PCR方法检测转染后ATXmRNA表达的变化,并与对照组及ATX表达抑制剂IL-1β的作用进行比较。结果体外合成的siRNA在转染胆管癌细胞24h后ATXmRNA的表达降低,48h抑制作用最为明显,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01),并明显强于IL-1β(P<0.01)。结论siRNA可有效地抑制胆管癌细胞ATX的表达,从而有可能阻断ATX对肿瘤细胞运动的促进作用。 展开更多
关键词 SIRNA 人hccc-9810胆管癌细胞 ATX 胆管肿瘤
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逆转录病毒介导的双自杀基因对肝内胆管癌细胞杀伤作用的实验研究 被引量：2
8
作者 李志伟 王占民 +4 位作者 刘博 刘军 刘春生 马道新 吴小鹏 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2004年第11期769-772,共4页
目的观察逆转录病毒介导的双自杀基因对肝内胆管癌细胞HCCC9810的杀伤作用,探讨肝内胆管癌的基因治疗方法。方法在脂质体的介导下将含有双自杀基因的逆转录病毒载体PwzlneoCDglytk导入包装细胞PA317,经G418筛选后大量培养产病毒的阳性克... 目的观察逆转录病毒介导的双自杀基因对肝内胆管癌细胞HCCC9810的杀伤作用,探讨肝内胆管癌的基因治疗方法。方法在脂质体的介导下将含有双自杀基因的逆转录病毒载体PwzlneoCDglytk导入包装细胞PA317,经G418筛选后大量培养产病毒的阳性克隆PA317/CD+tk细胞株,收集病毒上清,转染HCCC9810细胞,再次经G418筛选,获得稳定表达双自杀基因的HCCC9810/CD+tk细胞株。用RTPCR检测双自杀基因的表达。给予前体药物5氟胞嘧啶(5flourocytosine,5FC)和(或)无环鸟苷(ganciciovir,GCV)后,用MTT法测定转基因组及未转基因组HCCC9810细胞的存活率。结果双自杀基因在HCCC9810细胞中可稳定表达,联合使用5FC和GCV对细胞增殖的杀伤作用及旁杀伤效应高于单独使用5FC或GCV。结论逆转录病毒介导自杀基因可有效杀死肝内胆管癌细胞,双自杀基因较单一自杀基因具有更强的抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 逆转录病毒介导 双自杀基因 肝内胆管癌 hccc-9810 基因治疗
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