利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中高效表达人胰岛素样生长因子-1的研究 被引量：10

1

作者 段宇 汪承亚 +3 位作者 赵红 陈家伟 张志芳 John S Sussenbach 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2001年第6期274-277,共4页

目的利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中研制有生物学活性的可溶性分泌型重组人胰岛素样生长因子 1(rhIGF 1)。方法将 15kD人IGF 1(hIGF 1)前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒 (BmNPV)转移载体pBak PAK8中 ,经与野生型病毒DNA共转染家蚕细胞... 目的利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中研制有生物学活性的可溶性分泌型重组人胰岛素样生长因子 1(rhIGF 1)。方法将 15kD人IGF 1(hIGF 1)前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒 (BmNPV)转移载体pBak PAK8中 ,经与野生型病毒DNA共转染家蚕细胞后 ,通过体内同源重组的方式获得重组病毒BmNPV/IGF 1。以Bm NPV/IGF 1感染 5龄家蚕幼虫 ,分别在感染后 2 4、48、72、96、10 8、12 0h提取家蚕血淋巴液 ,以ELISA法测定不同时象家蚕血中IGF 1浓度 ,采用Western blot分析鉴定IGF 1免疫学活性 ,MTT法观察其对NIH3T3细胞增殖的影响。结果ELISA测定显示 ,BmNPV/IGF 1感染家蚕幼虫后 ,72h起蚕血中IGF 1浓度随感染时间延长而逐渐增高 (19.0 9～ 2 3.36 μg/ml) ,12 0hIGF 1含量达到最高值 (2 3 .36 μg/ml) ,Western blot分析发现表达产物在蚕体内被加工成 7.5kD成熟hIGF 1,并对NIH3T3细胞具有良好促增殖效应 ,其促细胞增殖能力明显优于来源于E .coli的IGF 1标准品。结论具有免疫学活性和生物学活性的rhIGF 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 基因表达 重组家蚕核型多角体病毒 生物学活性

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人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达和活性检测 被引量：5

2

作者 岳凤鸣 赵焕英 +2 位作者 杨慧 高福禄 徐群渊 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期306-311,共6页

目的　克隆人胰岛素样生长因子Ⅰ型 (hIGF 1) ,构建真核表达载体并进行表达及活性检测 ,为IGF 1基因治疗糖尿病奠定基础。　方法　提取胎儿肝脏总RNA ,RT PCR法扩增IGF 1cDNA片段 ,重组于pUCM T载体 ,测序正确后构建表达载体 ,转染猴肾... 目的　克隆人胰岛素样生长因子Ⅰ型 (hIGF 1) ,构建真核表达载体并进行表达及活性检测 ,为IGF 1基因治疗糖尿病奠定基础。　方法　提取胎儿肝脏总RNA ,RT PCR法扩增IGF 1cDNA片段 ,重组于pUCM T载体 ,测序正确后构建表达载体 ,转染猴肾成纤维细胞系COS 7,用原位杂交和免疫组织化学检测表达 ,收集培养上清以胰岛素刺激释放实验进行活性测定。　结果　扩增得到 710bp带有Kozak序列的IGF 1cDNA片段 ;成功构建了真核表达载体pCI neo hIGF 1;IGF 1在COS 7细胞得到了表达 ,并具有刺激胰岛素分泌的活性。　结论　新构建的载体pCI neo hIGF 1能在COS 7细胞中表达、分泌 ,且所分泌的IGF 1具有生物活性。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 基因克隆 基因表达 检测 生物活性 糖尿病

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人胰岛素样生长因子-1甄核表达质粒的构建及其在成肌细胞中的表达 被引量：4

3

作者 张鹏 陈世益 +1 位作者 陈疾忤 卫宏图 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期9-12,20,共5页

目的 :构建人胰岛素样生长因子 - 1(hIGF - 1)真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1并通过转染成肌细胞来验证其生物活性。方法 :应用DNA重组方法将编码hIGF - 1cDNA克隆于真核表达载体pcDNA3.1(- )中 ,构建pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1真核... 目的 :构建人胰岛素样生长因子 - 1(hIGF - 1)真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1并通过转染成肌细胞来验证其生物活性。方法 :应用DNA重组方法将编码hIGF - 1cDNA克隆于真核表达载体pcDNA3.1(- )中 ,构建pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1真核表达质粒 ;应用阳性脂质体介导的基因转染技术 ,将真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1瞬时转染C2C12成肌细胞中 ;采用RT -PCR及免疫组化染色等方法检测hIGF - 1基因在成肌细胞中的表达情况 ;应用MTT法检测转染后细胞上清液中hIGF - 1的生物活性。结果 :将构建好的真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1转染成肌细胞后 ,hIGF - 1mRNA及蛋白表达水平明显增高 ;转染后的成肌细胞培养上清液具有促使成纤维细胞增殖的生物活性。结论 :成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1,其转染成肌细胞后可获得较高水平hIGF - 1蛋白的表达 ,所表达出hIGF - 1蛋白具有生物学活性。 展开更多

关键词 IGF-1 成肌细胞 真核表达质粒 转染 PCDNA3 人胰岛素样生长因子-1 蛋白 DNA重组 cDNA克隆 IGF—1

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人胰岛素样生长因子-1真核表达载体的构建及在神经干细胞中的表达 被引量：3

4

作者 朱登纳 王军 +3 位作者 贾延劼 牛国辉 张博爱 吴值荣 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第2期156-159,共4页

目的:构建人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)真核表达载体,并在人脐血神经干细胞(NSCs)中表达。方法:采用RT-PCR法从人胎肝中克隆IGF-1基因,将其导入真核表达载体pcDNA3.1中,用脂质体转染法将重组质粒转染人脐血NSCs。分别采用RT-PCR和免疫... 目的:构建人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)真核表达载体,并在人脐血神经干细胞(NSCs)中表达。方法:采用RT-PCR法从人胎肝中克隆IGF-1基因,将其导入真核表达载体pcDNA3.1中,用脂质体转染法将重组质粒转染人脐血NSCs。分别采用RT-PCR和免疫荧光细胞化学法检测转基因NSCs中IGF-1mRNA和蛋白的表达。结果:琼脂糖电泳显示RT-PCR扩增出462bp的条带;重组载体pcDNA3.1-IGF-1经HindⅢ与BamHⅠ双酶切后,得到5428bp和462bp的两个条带;目的基因转染的NSCs经RT-PCR扩增出一条与目的基因一致的条带;免疫荧光细胞化学检测到IGF-1蛋白的表达。结论:成功构建了人IGF-1基因的真核表达载体,转染后IGF-1重组蛋白在人脐血NSCs中能成功表达。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 基因转染 人脐带血 神经干细胞

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人胰岛素样生长因子-1基因转染对软骨细胞增殖的影响(英文) 被引量：2

5

作者 黄宗强 刘尚礼 +4 位作者 郑召民 黄建荣 沈慧勇 黄东生 崔力扬 《中国临床康复》 CSCD 2004年第26期5723-5725,共3页

背景:各种生长因子对体外培养的软骨细胞均有不同程度的促增值作用,但半衰期较短,很难达到软骨缺陷治疗所要求的时效。目的:探讨自行构建携带人胰岛素样生长因子腺病毒载体(Ad/CMV-hIGF-1)对软骨细胞增殖的影响。设计:设立对照的实验研... 背景:各种生长因子对体外培养的软骨细胞均有不同程度的促增值作用,但半衰期较短,很难达到软骨缺陷治疗所要求的时效。目的:探讨自行构建携带人胰岛素样生长因子腺病毒载体(Ad/CMV-hIGF-1)对软骨细胞增殖的影响。设计:设立对照的实验研究。地点和对象:实验在中山大学林百欣医学研究中心进行。体外培养人胚胎软骨细胞,采用对数增长期的第3代软骨细胞进行实验。干预:自行构建携带hIGF-1基因的重组腺病毒并进行PCR,Westernblot鉴定。采用1,10,100及500不同感染复数单位(multiplicityofinfection,MOI)的Ad/CMV-hIGF-1分别转染第3代软骨细胞,用磷酸盐PBS)做(阴性对照,hIGF-1生长因子(100μg/L)做阳性对照。主要观察指标:采用四氮甲基唑蓝(methylthiazolyltetrazolium,MTT)法检测不同时间、不同组别软骨细胞吸光度。结果:第2代重组腺病毒上清液中PCR鉴定含有hIGF-1基因,Westernblot证实Ad/CMV-hIGF-1表达成熟的hIGF-1生长因子。不同病毒滴度转染对软骨细胞增殖的影响存在量效依赖关系,在1～100MOI之间,软骨细胞吸光度随着病毒滴度增加逐渐升高,100MOI软骨细胞吸光度约为PBS组的3倍;500MOIAd/CMV-hIGF-1时,软骨细胞吸光度较100MOI下降,与1MOI与10MOI对软骨细胞增殖的影响近似。PBS组随着细胞体外培养时间延长,? 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 基因转染 软骨细胞增殖 促增值作用 软骨缺陷

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人胰岛素样生长因子-1的真核表达及其生物学功能研究(英文) 被引量：4

6

作者 周海斌 郑祖根 董启榕 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2004年第23期21-23,27,共4页

目的构建人胰岛素样生长因子1(IGF-1)分泌型真核表达载体,并检测表达产物的生物活性。方法从人肝细胞克隆IGF-1基因,并将其连入Psec Tag/FRT/V5-His载体,用脂质体法转染CHO细胞,将转染细胞上清培养骨髓基质干细胞,用MTT法测定骨髓基质... 目的构建人胰岛素样生长因子1(IGF-1)分泌型真核表达载体,并检测表达产物的生物活性。方法从人肝细胞克隆IGF-1基因,并将其连入Psec Tag/FRT/V5-His载体,用脂质体法转染CHO细胞,将转染细胞上清培养骨髓基质干细胞,用MTT法测定骨髓基质干细胞的增殖情况。结果成功扩增210bp的IGF-1基因,表达产物经SDS-PAGE分析及Western bolt检测具有7.7KD特异性条带。骨髓基质干细胞的增殖随转染细胞上清的浓度、转染细胞上清培养时间的增加而增加。结论成功构建分泌型IGF-1真核表达载体,其表达产物对骨髓基质干细胞具有促增殖作用。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 真核表达 生物学功能 脂质体法 转染 骨髓基质干细胞

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携人胰岛素样生长因子-1基因的成肌细胞移植后在体存活及产物表达的研究 被引量：1

7

作者 李宏云 陈世益 +3 位作者 陈疾忤 卫宏图 张鹏 李云霞 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期151-155,共5页

目的：观察并探讨携人胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）基因的成肌细胞移植入雄性C3H小鼠体内后的存活、转归以及移植后hIGF-1基因的表达.方法：84只雄性C3H小鼠随机（20～30g,7～11w）分为A组（正常小鼠转基因细胞移植组）、B组（正常小... 目的：观察并探讨携人胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）基因的成肌细胞移植入雄性C3H小鼠体内后的存活、转归以及移植后hIGF-1基因的表达.方法：84只雄性C3H小鼠随机（20～30g,7～11w）分为A组（正常小鼠转基因细胞移植组）、B组（正常小鼠空白成肌细胞移植组）、C组（受伤小鼠转基因细胞移植组）和D组（受伤小鼠空白成肌细胞移植组）,每组20只,另4只作正常对照.A、B两组分别于右侧腓肠肌中段注射转基因成肌细胞或空白成肌细胞;C、D两组以重力打击造成小鼠右侧腓肠肌中段钝挫伤,伤后第3天分别于致伤局部注射转基因成肌细胞或空白成肌细胞.注射细胞后第2、5、10、20、30天,各组随机抽取4只小鼠处死,取右侧腓肠肌中段检测,Br-dU免疫组化染色检测外源细胞在体内的存活情况;4组另行hIGF-1免疫组化染色及实时PCR检测外源转基因细胞在体内表达hIGF-1情况.结果：各组小鼠均有BrdU免疫组化阳性染色,A、C两组均有hIGF-1 mRNA表达及hIGF-1分泌,B、D两组未检测到hIGF-1 mRNA表达及hIGF-1分泌.结论：携hIGF-1基因的成肌细胞移植入正常及钝挫伤小鼠体内后,可存活一段时间,并能稳定地分泌hIGF-1因子. 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子-1 成肌细胞 骨骼肌 损伤 修复 溴脱氧尿嘧啶核苷 携人胰岛素样生长因子-1基因

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利用杆状病毒载体高效表达人胰岛素样生长因子-1及其纯化的研究 被引量：1

8

作者 段宇 汪承亚 +1 位作者 赵红 陈家伟 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期173-177,共5页

目的 :利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中研制有生物学活性的重组人胰岛素样生长因子 1(rhIGF 1)。方法 :将 15kDhIGF 1前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒 (BmNPV)转移载体pBakPAK8中 ,构建重组病毒BmNPV/IGF 1。用BmNPV/IGF 1感染家蚕幼... 目的 :利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中研制有生物学活性的重组人胰岛素样生长因子 1(rhIGF 1)。方法 :将 15kDhIGF 1前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒 (BmNPV)转移载体pBakPAK8中 ,构建重组病毒BmNPV/IGF 1。用BmNPV/IGF 1感染家蚕幼虫 ,提取家蚕血淋巴液 ,采用亲和层析法纯化rhIGF 1,ELISA法测定rhIGF 1含量 ,用SDS PAGE和Western blot分析鉴定rhIGF 1纯度及免疫学活性 ,MTT法观察其对MCF 7细胞增殖的影响。结果 :ELISA测定显示 ,BmNPV/IGF 1感染家蚕幼虫 12 0hrhIGF 1含量达最高值 ( 2 3 36 μg/ml)。rhIGF 1纯度为 4 0 % ,Western blot分析发现主要纯化产物为 7 5kD成熟hIGF 1。细胞活性刺激实验显示 ,纯化后rhIGF 1对MCF 7细胞促增殖能力明显优于来源于大肠杆菌的rhIGF 1产品。结论 :实现了具有免疫学活性及生物学活性rhIGF 1在杆状病毒表达系统的高效表达 ,并使rhIGF 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 基因表达 重组家蚕核型多角体病毒 亲和层析 生物学活性

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重组人胰岛素样生长因子-1大肠杆菌高密度发酵研究 被引量：5

9

作者 陈理 杨渐 俞昌喜 《福建医科大学学报》 2013年第1期6-10,共5页

目的建立重组人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)在大肠杆菌高密度发酵中表达的工艺。方法以工程菌DH5α/pET32a(IGF-1)为对象,通过分批发酵培养优化溶解氧浓度、pH及温度等发酵条件,在此基础上以甘油为限制性基质进行分批补料发酵,考察不同... 目的建立重组人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)在大肠杆菌高密度发酵中表达的工艺。方法以工程菌DH5α/pET32a(IGF-1)为对象,通过分批发酵培养优化溶解氧浓度、pH及温度等发酵条件,在此基础上以甘油为限制性基质进行分批补料发酵,考察不同补料方式对发酵的影响。结果适合重组hIGF-1在工程菌高密度发酵中表达的条件:在菌株活化与初始培养后,诱导时控制发酵系统溶解氧浓度为20%,温度为30℃,pH为7.2并以恒定pH反馈补料,发酵12h菌体密度OD600达44.53,得菌体干质量17.49g/L,平均生产强度为1.458g.L-1.h-1,其中重组hIGF-1的相对表达量为32.5%。结论研究为工业化生产hIGF-1奠定了基础。 展开更多

关键词 高密度发酵 重组大肠杆菌 人胰岛素样生长因子-1

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抗人胰岛素样生长因子-1单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：1

10

作者 毕立清 刘莉 +3 位作者 程蕴琳 施有为 仇镇宁 姜苏蓉 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期712-716,741,共6页

目的:制备稳定分泌抗人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞系,并对其分泌的mAb进行鉴定。方法:用纯化后的hIGF-1重组蛋白免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤细胞融合技术制备抗hIGF-1的mAb,用Western blot法鉴定mAb的特异性... 目的:制备稳定分泌抗人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞系,并对其分泌的mAb进行鉴定。方法:用纯化后的hIGF-1重组蛋白免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤细胞融合技术制备抗hIGF-1的mAb,用Western blot法鉴定mAb的特异性,用间接ELISA法检测mAb腹水效价及mAb的亲和力,杂交瘤细胞染色体分析,鉴定Ig亚类。结果:获得2株能稳定分泌抗hIGF-1的mAb杂交瘤细胞系,Western blot分析显示,该mAb能与具有生物学活性的成熟IGF-1蛋白结合。腹水mAb效价可达6×104。mAb相对亲和力为2.1×109/mol～7.8×109/mol。2株单抗属IgM亚类。染色体分析符合杂交瘤细胞特征。结论:成功制备出抗hIGF-1的2株mAb杂交瘤细胞,为进一步用于hIGF-1的临床检测和实验研究创造了条件。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 单克隆抗体 重组蛋白

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人胰岛素样生长因子-1基因的克隆及在真核细胞的表达 被引量：2

11

作者 周海斌 郑祖根 董启榕 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期127-128,共2页

目的　构建人胰岛素样生长因子 1(IGF1)真核表达载体 ,并在成纤维细胞NIH3T3细胞内进行表达。方法　用RT PCR法从人肝细胞中克隆人IGF1的基因 ,将其连入真核表达载体pSecTag/FRT/V5 His,PCR法及测序鉴定阳性克隆 ;用脂质体法将阳性克... 目的　构建人胰岛素样生长因子 1(IGF1)真核表达载体 ,并在成纤维细胞NIH3T3细胞内进行表达。方法　用RT PCR法从人肝细胞中克隆人IGF1的基因 ,将其连入真核表达载体pSecTag/FRT/V5 His,PCR法及测序鉴定阳性克隆 ;用脂质体法将阳性克隆转染NIH3T3细胞 ;收集转染后的细胞上清 ,用Westernblot进行检测。结果　琼脂糖电泳显示RT PCR扩增出 315bp的条带 ;与载体连接后的克隆进行测序得到一个阳性克隆 ;Westernblot检测显示转染后细胞上清出现与预计值相符的特异性条带。结论　成功克隆并构建人IGF1基因的真核表达载体 。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 克隆 真核表达载体 RT-PCR法 基因转染 成纤维细胞 骨损伤

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人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达及生物活性分析 被引量：1

12

作者 祁雅慧 王雅梅 +4 位作者 孙丽翠 司杨 闫豫东 张静宜 邴国英 《首都医科大学学报》 CAS 2004年第2期154-158,共5页

采用RT PCR方法 ,从人扁桃体组织中扩增得到人胰岛素样生长因子 1 (IGF 1 )cDNA ,利用基因重组技术将该基因片段重组于pcDNA3 .1 ( +)真核表达载体上 ,成功构建了 pcDNA/I重组表达载体。应用脂质体介导的基因转移技术将重组质粒体外转... 采用RT PCR方法 ,从人扁桃体组织中扩增得到人胰岛素样生长因子 1 (IGF 1 )cDNA ,利用基因重组技术将该基因片段重组于pcDNA3 .1 ( +)真核表达载体上 ,成功构建了 pcDNA/I重组表达载体。应用脂质体介导的基因转移技术将重组质粒体外转染至人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)。MTT法检测结果表明 :重组质粒转染能明显促进内皮细胞的分裂增生。将重组质粒通过脂质体介导 ,体外转染至人肾细胞 2 93细胞系进行表达 ,经G41 8筛选获得稳定表达的重组质粒细胞克隆 ,表达产物经鸡胚绒毛尿囊膜试验表明有促血管生成活性。此结果为研究IGF 1对血管内皮细胞作用的分子机制 ,以及利用IGF 1基因治疗肢体及冠状动脉缺血性疾病等的研究奠定了实验基础。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1基因 克隆 表达 生物活性

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重组人胰岛素样生长因子-1工程菌发酵培养基的优化 被引量：1

13

作者 杨渐 陈理 俞昌喜 《化学与生物工程》 CAS 2013年第4期36-40,共5页

在摇瓶条件下,以M9培养基为基础,采用单因素实验和正交实验,对适合于表达重组人胰岛素样生长因子-1工程菌生长的高密度发酵培养基进行了优化。确定最佳培养基配方为:葡萄糖0.4%、甘油1.5%、酵母粉3%、胰蛋白胨3%、Na2HPO41.2%、KH2PO40... 在摇瓶条件下,以M9培养基为基础,采用单因素实验和正交实验,对适合于表达重组人胰岛素样生长因子-1工程菌生长的高密度发酵培养基进行了优化。确定最佳培养基配方为:葡萄糖0.4%、甘油1.5%、酵母粉3%、胰蛋白胨3%、Na2HPO41.2%、KH2PO40.6%、NH4Cl 0.1%、NaCl 0.20%、MgSO40.048%,在此优化培养基中培养14h,工程菌菌体密度OD600达7.5。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 大肠杆菌 发酵培养基 优化

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人胰岛素样生长因子-1在急性损伤肩袖腱-骨愈合过程中的组织学研究 被引量：2

14

作者 陈先武 叶如卿 濮玉琴 《浙江创伤外科》 2019年第1期1-5,共5页

目的应用大鼠建立急性肩袖损伤模型,观察人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1)在腱-骨愈合过程中的作用。方法取16只成年雄性SD大鼠,均行右侧冈上肌切断术,建立急性肩袖损伤模型。随机分为2组:空白组(生理盐水)、实验组(rhIGF-1/IGFBP-3 4.0mg... 目的应用大鼠建立急性肩袖损伤模型,观察人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1)在腱-骨愈合过程中的作用。方法取16只成年雄性SD大鼠,均行右侧冈上肌切断术,建立急性肩袖损伤模型。随机分为2组:空白组(生理盐水)、实验组(rhIGF-1/IGFBP-3 4.0mg/kg/day),术后第1天开始,连续14天于腹部皮下注射。术后1周和4周,各组取4只大鼠以冈上肌腱的重建止点为中心取材。经苏木精-伊红染色和免疫组化定位增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen、 PCNA)和Ⅷ因子(FactorⅧ)定性评估细胞增殖和新生血管形成;应用苦味酸天狼猩红染色,采用偏光显微镜半定量分析在腱-骨插入位点的胶原纤维组织的连续性和排列规律性。结果术后1周时,苏木精-伊红染色光学显微镜下观察,实验组较对照组在腱-骨插入位点和肌腱腱实质部均显示较多细胞增殖和血管生成。实验组较对照组增殖细胞核抗原免疫组化提示有更积极的细胞分裂,内皮细胞Ⅷ因子免疫组化提示局部有更丰富内皮细胞;术后4周苏木精-伊红染色,实验组局部出现了不成熟的类软骨细胞。苦味酸天狼猩红染色,实验组较对照组更可见排列规则的兰染的软骨基质,且和骨质连接紧密,其间可见少量纤维软骨细胞,骨质和纤维软骨带界限更清晰。结论人胰岛素样生长因子-1能促使细胞增殖,形成类似于肩袖天然纤维软骨插入点,为临床促进腱骨愈合提供了一种思路。 展开更多

关键词 腱-骨愈合 肩袖 人胰岛素样生长因子-1 修复外科手术

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人胰岛素样生长因子-1与肠外营养

15

作者 顾岩 《肠外与肠内营养》 CAS 2000年第2期110-113,共4页

人胰岛素样生长因子 - 1是一种对机体生长和代谢具有广泛作用的分泌蛋白 ,与机体的营养调节密切相关。本文综述其对机体代谢的作用、作用机制 。

关键词 肠外营养 人胰岛素样生长因子-1 辅助治疗作用

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Sonic hedgehog参与人胰岛素样生长因子-1信号通路促使下颌骨髁突过度生长的实验研究 被引量：3

16

作者 陈宇翔 黄群 +2 位作者 张武阳 马秦 龙星 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第8期866-869,共4页

目的:通过活体动物实验观察人胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor,IGF-1)与Sonic hedgehogxinh(Shh)介导的信号通路促进了髁突过度生长的作用。方法:制备IGF-1高表达表型转基因小鼠模型。将转基因鼠随机分为为5组:Cyclopam... 目的:通过活体动物实验观察人胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor,IGF-1)与Sonic hedgehogxinh(Shh)介导的信号通路促进了髁突过度生长的作用。方法:制备IGF-1高表达表型转基因小鼠模型。将转基因鼠随机分为为5组:Cyclopamine刺激组;NVP-AEW541刺激组;IGF-1刺激组;Cyclopamine+IGF-1刺激组;生理盐水刺激组:空白对照,每组3只。随机选取一侧关节腔自31d起隔天连续进行上述药物注射,共14d,注射结束后收获实验侧髁突,固定,比较两侧髁突大小,分析差异性。结果:Cyclopamine刺激组及生理盐水刺激组实验侧与对照侧髁突大小比较差异无统计学意义。NVP-AEW541刺激组、IGF-1刺激组以及Cyclopamine+IGF-1刺激组实验侧髁突小于对照侧髁突(P<0.05)。结论:IGF-1介导的信号通路促进了髁突肥大髁突的过度生长。 展开更多

关键词 髁突肥大 音猬因子 人胰岛素样生长因子-1

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重组人胰岛素样生长因子-1对急性心肌缺血大鼠血管内皮细胞分泌功能的影响

17

作者 郑娟娟 芮家亮 +1 位作者 杨斌 曹蘅 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2007年第9期637-637,共1页

关键词 重组人胰岛素样生长因子-1 血管内皮细胞功能紊乱 心肌缺血大鼠 细胞分泌功能 急性 病理生理表现 动脉粥样硬化 血管活性物质

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人胰岛素样生长因子-1基因表达载体的构建 被引量：9

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作者 吴建平 蒲小勇 +8 位作者 周云峰 王行环 吴一龙 韩雪 王怀鹏 胡礼泉 叶林柏 徐战平 陈浩阳 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1396-1397,共2页

目的构建人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)基因的表达载体。方法通过聚合酶链反应(PCR)方法从PCDB-MGF-1质粒中扩增出392 bp的靶片段,将其黏端克隆至pET-His表达质粒,然后应用限制性酶切、PCR扩增及序列测定等技术进行鉴定。结果成功构建了... 目的构建人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)基因的表达载体。方法通过聚合酶链反应(PCR)方法从PCDB-MGF-1质粒中扩增出392 bp的靶片段,将其黏端克隆至pET-His表达质粒,然后应用限制性酶切、PCR扩增及序列测定等技术进行鉴定。结果成功构建了hIGF-1表达片段,酶切及测序证实读码框正确。结论成功克隆hIGF-1表达载体,为体外表达蛋白和行免疫治疗勃起功能障碍奠定基础。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 克隆

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人胰岛素样生长因子-1逆转录病毒载体的构建及其在骨髓基质干细胞中的表达 被引量：3

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作者 周海斌 郑祖根 +1 位作者 董启榕 周晓中 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第2期212-215,共4页

目的构建人胰岛素样生长因子-1的逆转录表达载体,建立逆病毒介导的IGF-1基因转移系统。方法用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)从人肝细胞克隆IGF-1的基因;经DNA测序分析证实后将目的基因插入逆转录病毒载体LXSN,制备pLXSN-IGF-1表达载体;... 目的构建人胰岛素样生长因子-1的逆转录表达载体,建立逆病毒介导的IGF-1基因转移系统。方法用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)从人肝细胞克隆IGF-1的基因;经DNA测序分析证实后将目的基因插入逆转录病毒载体LXSN,制备pLXSN-IGF-1表达载体;借助阳离子脂质体转染包装细胞PA317,G418筛选阳性克隆,获取病毒上清;培养人骨髓基质干细胞,用病毒上清感染骨髓基质干细胞;采用RT-PCR及Western blot法检测目的基因在靶细胞的表达。结果经酶切电泳和DNA测序表明成功构建了IGF-1逆转录病毒表达载体,转染包装细胞后可以产生IGF-1逆转录病毒,病毒感染人骨髓基质干细胞后能够表达IGF1-1重组蛋白。结论成功建立逆转录病毒载体介导的IGF-1体外表达体系,能够快速、稳定地将IGF-1基因转入骨髓基质干细胞。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 逆转录病毒 骨髓基质干细胞

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第二代WHO 重组人胰岛素样生长因子-1(IGF-1) 国际对照品的国际协作标定

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作者 丁晓丽 李懿 +2 位作者 张慧 李晶 梁成罡 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1173-1178,共6页

英国国家生物制品检定所(NIBSC)组织国际协作标定以建立世界卫生组织(WHO)第二代重组人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的国际对照品。标定分2个阶段,中国食品药品检定研究院参加了第1阶段的标定工作。以初级校准物(PS01)为对照品,采用高效... 英国国家生物制品检定所(NIBSC)组织国际协作标定以建立世界卫生组织(WHO)第二代重组人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的国际对照品。标定分2个阶段,中国食品药品检定研究院参加了第1阶段的标定工作。以初级校准物(PS01)为对照品,采用高效液相色谱法进行试验,以标准曲线法对IGF-1待标品的含量进行计算。结果显示,本实验室系统适用性试验结果均符合要求,平行3次试验结果(分别为每安瓿32.874、33.099及33.042μg)均被采纳,平均值为每安瓿33.005μg,与待标品(19/166)的最终赋值(每安瓿33.0μg)基本一致。目前IGF-1待标品(19/166)已作为第二代IGF-1国际对照品在NIBSC网站进行公布使用。本研究对我国国家对照品的建立与标定有良好的示范及借鉴意义。 展开更多

关键词 重组人胰岛素样生长因子-1 国际对照品 国际协作标定 高效液相色谱法 标准曲线法 含量测定

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