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乌苏酸对人胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响
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作者 金俊华 赵承伟 +1 位作者 付佳 郑桂茹 《中国药业》 CAS 2024年第2期46-51,共6页
目的探讨乌苏酸对人胰腺癌细胞PANC-1增殖、凋亡的影响。方法以1.25,2.5,5,10,25,50μmol/L乌苏酸培养PANC-1细胞24,48,72 h,采用四氮唑盐(MTT)法测定细胞活性。实验分为对照1组(等体积二甲基亚砜)及乌苏酸低、中、高剂量组(5,10,20μmo... 目的探讨乌苏酸对人胰腺癌细胞PANC-1增殖、凋亡的影响。方法以1.25,2.5,5,10,25,50μmol/L乌苏酸培养PANC-1细胞24,48,72 h,采用四氮唑盐(MTT)法测定细胞活性。实验分为对照1组(等体积二甲基亚砜)及乌苏酸低、中、高剂量组(5,10,20μmol/L乌苏酸),显微镜下观察细胞形态,采用Western blot法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K),磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt),磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR),活化半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2关联X蛋白(Bax)的蛋白表达水平,采用细胞集落形成实验观察细胞增殖情况。实验分为对照2组(等体积二甲基亚砜)和乌苏酸组(10μmol/L乌苏酸),采用细胞划痕实验观察细胞培养48,72 h的迁移情况。利用分子对接实验模拟乌苏酸与PI3K和Akt2的相互作用。结果随着乌苏酸浓度的升高,PANC-1细胞活性逐渐减弱,24,48,72 h时的半数抑制浓度(IC50)分别为7.89,6.26,5.06μmol/L。与对照1组比较,乌苏酸各剂量组细胞逐渐失去原有形态,且随着浓度的增加,变形细胞数目随之增加,且细胞边界模糊不清;细胞数量显著减少(P<0.05);乌苏酸各剂量组细胞Cleaved Caspase-3、Bax蛋白的表达水平均显著升高,乌苏酸中、高剂量组细胞Bcl-2蛋白表达水平显著降低,乌苏酸各剂量组细胞p-m TOR,中、高剂量组细胞p-Akt,高剂量组细胞PI3K蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。与对照2组比较,乌苏酸组细胞48 h,72 h的迁移距离缩短。乌苏酸的乌苏烷型三萜类结构可进入PI3K与Akt2中的三磷酸腺苷(ATP)结合位点竞争性结合疏水口袋,从而影响PI3K和Akt2与ATP的结合,抑制其激活。结论乌苏酸可通过抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路的激活而抑制PANC-1细胞的增殖,促进其凋亡。 展开更多
关键词 乌苏酸 人胰腺癌细胞PANC-1 PI3K/Akt/mTOR信号通路 细胞凋亡
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二十二碳六烯酸对人胰腺癌细胞生长抑制作用的分析
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作者 黎文涛 伍小琼 王正根 《当代医药论丛》 2023年第2期97-99,共3页
目的:分析二十二碳六烯酸对人胰腺癌细胞生长的抑制作用。方法:行细胞培养后运用噻唑蓝比色(MTT)法检测人胰腺癌细胞的增殖,采用流式细胞术检测人胰腺癌细胞的凋亡、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、环氧合酶-2(COX-2)的表达,统计分析不同浓... 目的:分析二十二碳六烯酸对人胰腺癌细胞生长的抑制作用。方法:行细胞培养后运用噻唑蓝比色(MTT)法检测人胰腺癌细胞的增殖,采用流式细胞术检测人胰腺癌细胞的凋亡、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、环氧合酶-2(COX-2)的表达,统计分析不同浓度的DHA培养液培养24 h、48 h、72 h人胰腺癌细胞的存活率、凋亡率,并统计分析不同浓度的DHA培养液培养48 h人胰腺癌细胞的细胞周期分布及不同浓度的DHA培养液培养24 h人胰腺癌细胞Bcl-2、COX-2的表达。结果:0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的DHA培养液培养24 h、48 h、72 h人胰腺癌SW1990、Patu8988细胞的存活率均随DHA培养液浓度的升高而逐渐降低(P<0.05),0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的DHA培养液培养24 h、48 h、72 h人胰腺癌SW1990、Patu8988细胞的凋亡率均随DHA培养液浓度的升高而逐渐升高(P<0.05)。0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的DHA培养液培养48 h人胰腺癌SW1990、Patu8988细胞的G_(0)~G_(1)期、G_(2)~M期细胞占比均随DHA培养液浓度的升高而逐渐升高(P<0.05),S期细胞占比均随DHA培养液浓度的升高而逐渐降低(P<0.05)。0μg/mL的DHA培养液培养24 h人胰腺癌SW1990、Patu8988细胞Bcl-2、COX-2的表达水平、蛋白荧光值均高于50μg/mL(P<0.05)。结论:DHA可抑制人胰腺癌细胞的生长,途径可能为下调人胰腺癌细胞中的Bcl-2、COX-2表达。 展开更多
关键词 人胰腺癌细胞 生长 二十二碳六烯酸 抑制 存活率 凋亡率 细胞周期
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灵菌红素对人胰腺癌细胞增殖抑制的实验研究 被引量:10
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作者 沈亚领 刘建文 +3 位作者 魏东芝 陶金莉 李柯 张靖 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第5期504-509,共6页
目的 :观察从生物工程技术得到的灵菌红素对人胰腺癌 8898细胞增殖抑制的药效学作用 ,并探讨其作用的部分机理。方法 :用MTT法测定 8898细胞的存活率和抑制率 ,用流式细胞仪分析细胞的周期变化和凋亡细胞的百分比 ,用HPLC检测人胰腺癌 8... 目的 :观察从生物工程技术得到的灵菌红素对人胰腺癌 8898细胞增殖抑制的药效学作用 ,并探讨其作用的部分机理。方法 :用MTT法测定 8898细胞的存活率和抑制率 ,用流式细胞仪分析细胞的周期变化和凋亡细胞的百分比 ,用HPLC检测人胰腺癌 8898细胞内灵菌红素的浓度 ,用琼脂糖凝胶电泳对DNA段片化进行分析。结果 :灵菌红素5mg·L-1的培养液中 8898细胞出现凋亡早期的形态学特征 ,半数抑制浓度 (IC50 )为 30mg·L-1。而3T3细胞却未显示出该作用。研究表明灵菌红素抑制细胞的增殖 ,与抑制S期细胞的DNA复制及调控细胞的增殖周期相关。同时 ,细胞凋亡的产生与实验药物呈正相关。HPLC结果显示 ,灵菌红素的药理学作用与细胞内药物浓度相关。结论 :灵菌红素能有效的进入细胞内 ,抑制细胞的增殖 ,其机理与诱导细胞凋亡和调控细胞的增殖周期相关。 展开更多
关键词 灵菌红素 人胰腺 细胞凋亡 增殖周期 流式细胞分析术
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盐酸去氢骆驼蓬碱诱导人胰腺癌AsPC-1细胞凋亡 被引量:10
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作者 张晓凯 曹明溶 +3 位作者 张鹏 李强 刘志龙 蒋建伟 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期160-164,175,共6页
目的:探讨盐酸去氢骆驼蓬碱对人胰腺癌AsPC-1细胞的增殖抑制作用及其可能的作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)法及克隆形成抑制实验观察盐酸去氢骆驼蓬碱对胰腺癌AsPC-1细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,Western blotting... 目的:探讨盐酸去氢骆驼蓬碱对人胰腺癌AsPC-1细胞的增殖抑制作用及其可能的作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)法及克隆形成抑制实验观察盐酸去氢骆驼蓬碱对胰腺癌AsPC-1细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,Western blotting检测细胞凋亡及自噬相关蛋白的表达水平。结果:盐酸去氢骆驼蓬碱作用人胰腺癌AsPC-1细胞后,不同浓度的药物对其生长均有抑制作用,且呈剂量-效应关系(P<0.01),24、48及72h的IC50分别约为116.5、66、22.3μmol.L-1;与对照组相比随着盐酸去氢骆驼蓬碱浓度的增加,细胞克隆逐渐减少;不同浓度盐酸去氢骆驼蓬碱作用后,均出现明显的晚期凋亡及坏死细胞群,且呈剂量-效应关系;盐酸去氢骆驼蓬碱作用后,胰腺癌AsPC-1细胞出现Caspase-3、PARP酶切活化,同时自噬标记性蛋白LC3Ⅱ增加,P62减少。结论:盐酸去氢骆驼蓬碱通过诱导细胞凋亡及自噬的方式抑制人胰腺癌AsPC-1细胞的生长。 展开更多
关键词 盐酸去氢骆驼蓬碱 人胰腺癌AsPC-1细胞 凋亡 自噬
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龙胆苦苷对人胰腺癌细胞PANC-1凋亡及IL-6/JAK2/STAT3信号通路的影响 被引量:16
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作者 孟松 周耀柱 +2 位作者 马永超 徐松涛 金少举 《中国药房》 CAS 北大核心 2020年第15期1836-1841,共6页
目的:研究龙胆苦苷对人胰腺癌细胞PANC-1凋亡的影响,并从白细胞介素6(IL-6)/Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路角度研究其作用机制。方法:以PANC-1细胞为研究模型,采用MTT法测定0(阴性对照)、2、4、8、16、32、6... 目的:研究龙胆苦苷对人胰腺癌细胞PANC-1凋亡的影响,并从白细胞介素6(IL-6)/Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路角度研究其作用机制。方法:以PANC-1细胞为研究模型,采用MTT法测定0(阴性对照)、2、4、8、16、32、64、128 mg/L龙胆苦苷作用于细胞72 h后的增殖抑制率,并计算其半数抑制浓度(IC50)。分别将细胞分为阴性对照组、吉西他滨组(阳性对照,4 mg/L)和龙胆苦苷低、中、高浓度组(15、30、60 mg/L)。分别于培养1、3、5、7 d后,采用台盼蓝拒染法进行活细胞计数,考察各组细胞的生长情况;培养72 h后,采用克隆形成试验考察细胞的克隆形成率,采用Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡率,采用逆转录-聚合酶链式反应法和Western blotting法分别测定细胞中IL-6、JAK2、STAT3 mRNA及其蛋白表达水平。结果:4~28 mg/L龙胆苦苷均可显著抑制细胞的增殖(P<0.05或P<0.01),并具有一定的浓度依赖性趋势,IC50为9.54 mg/L。与阴性对照组比较,吉西他滨组和龙胆苦苷中、高浓度组活细胞计数(作用3、5、7 d)和细胞中IL-6、JAK2、STAT3 mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率均显著升高(P<0.01);吉西他滨组和龙胆苦苷高浓度组细胞的克隆形成率均显著降低(P<0.01)。与吉西他滨组比较,龙胆苦苷高浓度组细胞中上述指标水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:30、60 mg/L龙胆苦苷可显著抑制PANC-1细胞的增殖、诱导其凋亡,60 mg/L龙胆苦苷的作用与吉西他滨相当;其作用机制可能与抑制细胞中IL-6/JAK2/STAT3信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 龙胆苦苷 人胰腺癌细胞PANC-1 凋亡 白细胞介素6 JANUS激酶2 信号转导与转录激活因子3 机制
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康莱特联合5-Fu治疗人胰腺癌PC-3裸鼠皮下移植瘤的实验研究 被引量:12
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作者 王伟 金建光 秦兆寅 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期473-476,共4页
目的通过研究胰腺癌Bcl-2、Bax和血管内皮生长因子((VEGF)的变化情况与细胞凋亡的关系,探讨康莱特和5-Fu治疗胰腺癌的机制。方法建立人胰腺癌PC-3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax和VEGF在胰腺癌移植瘤中的表... 目的通过研究胰腺癌Bcl-2、Bax和血管内皮生长因子((VEGF)的变化情况与细胞凋亡的关系,探讨康莱特和5-Fu治疗胰腺癌的机制。方法建立人胰腺癌PC-3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax和VEGF在胰腺癌移植瘤中的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡比率,测量肿瘤体积。结果康莱特和5-Fu都可明显提高胰腺癌细胞凋亡率,降低细胞Bcl-2在蛋白水平上的表达,两者对Bax在蛋白水平上的表达无影响;康莱特明显降低移植瘤VEGF蛋白的表达;康莱特和5-Fu联合组,胰腺癌细胞凋亡比率显著高于单药组,而Bcl-2蛋白表达率显著低于单药组;康莱特和联合用药组VEGF蛋白表达率低于5-Fu组;联合用药组肿瘤体积小于单药组。结论康莱特联合5-Fu治疗胰腺癌的效果明显优于两药单独使用的效果。 展开更多
关键词 人胰腺 PC-3细胞 裸鼠 皮下移植瘤 细胞凋亡 免疫组织化学 Bcl-2 Bax VEGF
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人胰腺癌荷瘤裸鼠的^(99)Tc^m-HL91乏氧显像研究 被引量:15
7
作者 姚稚明 屈婉莹 +2 位作者 周颖 朱明 朱霖 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期220-221,共2页
关键词 胰腺 人胰腺癌荷瘤裸鼠 ^99TC^M-HL91乏氧显像
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酵母双杂交技术对人胰腺cDNA文库中HBcAg结合蛋白基因的筛选 被引量:10
8
作者 张维燕 张锦前 +5 位作者 王琦 李国力 王晓春 张晨宇 杨涤 成军 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第16期1746-1750,共5页
目的:应用酵母双杂交技术,筛选人胰腺cDNA文库中与HBV核心抗原结合的蛋白的基因.方法:扩增人胰腺cDNA文库并纯化鉴定,将其转化至酵母菌Y187;诱饵质粒pGBKT7-HBcAg转化酵母菌AH109并筛选鉴定.应用酵母双杂交系统3进行配合,在SD/-Trp/-Leu... 目的:应用酵母双杂交技术,筛选人胰腺cDNA文库中与HBV核心抗原结合的蛋白的基因.方法:扩增人胰腺cDNA文库并纯化鉴定,将其转化至酵母菌Y187;诱饵质粒pGBKT7-HBcAg转化酵母菌AH109并筛选鉴定.应用酵母双杂交系统3进行配合,在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade培养基和含X-gal的SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade培养基上进行双重筛选,提取阳性酵母菌落的质粒转化大肠埃希菌DH5α,提取质粒并测序,对测序结果进行生物信息学分析.结果:人胰腺cDNA文库的构建以及pGBKT7-HBcAg质粒转化AH109酵母菌株均获成功,并从人胰腺cDNA文库中筛选出9个与HBcAg蛋白相结合的蛋白基因,分别与以下已知的9种编码蛋白基因序列同源:人胰脂肪酶(PNLIP)、人胆盐刺激酯酶(CEL)、人胰凝乳蛋白C(CTRC)、人胰蛋白酶原、人羧肽酶B1(CPB1)、人线粒体全基因组、人胰弹性酶2A、人辅脂肪酶(CLPS)和人核糖体蛋白(RPL10A).结论:筛选出的与HBcAg蛋白相结合的蛋白基因主要与胰腺外分泌功能相关,HBV感染可能通过与胰腺所分泌的糖、脂类代谢相关的酶类结合,而引发代谢性疾病. 展开更多
关键词 HBCAG 人胰腺cDNA文库 酵母双杂交技术
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薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响 被引量:17
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作者 鲍英 夏璐 +4 位作者 姜华 章永平 乔敏敏 张学军 袁耀宗 《胃肠病学》 2005年第2期75-78,共4页
背景:薏苡仁提取液目前已广泛应用于临床抗肿瘤治疗,但至今尚未见其单独应用于胰腺癌的报道。目的:观察薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响,以探索胰腺癌治疗的新途径。方法:以不同浓度薏苡仁提取液处理人胰腺癌细胞系PaTu... 背景:薏苡仁提取液目前已广泛应用于临床抗肿瘤治疗,但至今尚未见其单独应用于胰腺癌的报道。目的:观察薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响,以探索胰腺癌治疗的新途径。方法:以不同浓度薏苡仁提取液处理人胰腺癌细胞系PaTu-8988后,分别通过光镜观察、Hoechst33258荧光染色、末端脱氧核苷酸转移酶原位标记(TUNEL法)和流式细胞术检测细胞凋亡,应用透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果:经10μl/ml和20μl/ml薏苡仁提取液作用72h后,PaTu-8988细胞的增殖能力明显下降,其作用呈剂量依赖性;光镜观察显示凋亡细胞变圆、体积缩小,Hoechst33258荧光强染,TUNEL标记阳性。20μl/ml薏苡仁提取液作用24、48和72h后,流式细胞仪DNA直方图上出现亚二倍体凋亡峰,细胞凋亡率呈时间依赖性,分别为7.1%±0.6%、11.3%±0.3%和15.1%±2.9%,显著高于对照组的2.4%±1.1%(P<0.01)。透射电镜观察显示,凋亡早期主要是线粒体结构的改变,后期则出现典型的凋亡征象,如核固缩、染色质凝集靠近核膜和凋亡小体形成。结论:薏苡仁提取液可诱导人胰腺癌细胞凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性,线粒体可能在早期细胞凋亡中起重要作用。 展开更多
关键词 薏苡仁提取液 癌细胞凋亡 PaTu-8988 末端脱氧核苷酸转移酶 Hoechst 33258荧光染色 透射电镜观察 临床抗肿瘤治疗 人胰腺癌细胞系 流式细胞术检测 TUNEL标记 时间依赖性 TUNEL法 细胞超微结构 光镜观察 剂量依赖性 流式细胞仪
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二甲双胍对人胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响 被引量:6
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作者 唐曦平 唐国都 方春芸 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期801-807,共7页
背景与目的:近年研究发现二甲双胍对多种肿瘤具有抑制作用,部分临床研究也发现二甲双胍可以降低糖尿病并发胰腺癌的风险和降低胰腺癌的死亡危险。本研究从细胞水平着手研究二甲双胍对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能机制... 背景与目的:近年研究发现二甲双胍对多种肿瘤具有抑制作用,部分临床研究也发现二甲双胍可以降低糖尿病并发胰腺癌的风险和降低胰腺癌的死亡危险。本研究从细胞水平着手研究二甲双胍对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能机制。方法:体外培养人胰腺癌细胞株Bxpc-3,予二甲双胍进行干预作为二甲双胍干预组,无药物组作为对照组。以MTT检测二甲双胍对Bxpc-3细胞存活率的影响,流式细胞术检测二甲双胍对Bxpc-3细胞周期的影响,流式细胞术及Hoechst 33258荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR检测AMPKα1、Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cyclin D1 mRNA的表达。蛋白质印迹法(Western blot)检测Cyclin D1、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达。结果:与对照组相比,MTT检测结果显示,二甲双胍可以抑制人胰腺癌细胞株Bxpc-3的增殖,并呈时间-浓度依赖性(F=8.99、124和114.61,P<0.01);流式细胞术检测结果显示,二甲双胍干预组与对照组相比,G0/G1期细胞所占百分比增加(t=-8.71,P<0.01),S期(t=7.54,P<0.01)及G2/M期(t=7.00,P<0.01)细胞所占百分比减少;流式细胞术(早期凋亡率t=-2.68,晚期凋亡率t=1.29,总凋亡率t=-0.85)及Hoechst 33258荧光染色法(t=-0.46)结果显示,两组细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);RT-PCR结果显示,二甲双胍干预组Cyclin D1 mRNA表达明显降低(t=4.96,P<0.01),AMPKα1、Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达与对照组相比,差异无统计学意义(t=1.68、-0.56、-1.80、0.67,P>0.05);Westernblot结果显示,二甲双胍干预组Cyclin D1蛋白表达明显降低(t=7.02,P<0.01),Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达与对照组相比,差异无统计学意义(t=-0.11、-0.20,0.11,P>0.05)。结论:二甲双胍能显著抑制人胰腺癌细胞株Bxpc-3的增殖,机制主要与其阻滞细胞周期、下调Cyclin D1表达有关;二甲双胍对Bxpc-3细胞的凋亡无明显诱导作用。 展开更多
关键词 二甲双胍 人胰腺癌细胞株Bxpc-3 增殖 凋亡
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榄香烯乳对人胰腺癌移植瘤组织中凋亡相关蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 张莉娜 陈恳 +4 位作者 钱俐 胡迎青 许丽娜 周国雄 张弘 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第17期2385-2392,共8页
目的:了解榄香烯乳干预治疗后人胰腺癌裸鼠移植瘤组织中PTEN、P53、Bcl-2蛋白的表达情况,初步探讨榄香烯乳对胰腺癌凋亡的影响.方法:构建人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为阴性对照组、榄香烯乳小剂量组、榄香烯乳大剂量组、吉西他滨阳... 目的:了解榄香烯乳干预治疗后人胰腺癌裸鼠移植瘤组织中PTEN、P53、Bcl-2蛋白的表达情况,初步探讨榄香烯乳对胰腺癌凋亡的影响.方法:构建人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为阴性对照组、榄香烯乳小剂量组、榄香烯乳大剂量组、吉西他滨阳性对照组和联合用药组五组,分别干预处理;采用Western blot和免疫组织化学的方法检测榄香烯乳干预治疗后人胰腺癌移植瘤组织细胞中PTEN、P53、Bcl-2蛋白表达情况.结果:Western blot结果显示榄香烯乳干预治疗后人胰腺癌移植瘤细胞中PTEN和P53蛋白表达均有升高趋势,而Bcl-2蛋白表达有下降的趋势.榄香烯乳大剂量组与阴性对照组相比,P53蛋白表达显著升高(P<0.01)而Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.01).联合用药组与吉西他滨阳性对照组相比,P53蛋白表达显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白表达降低不明显(P=0.985).免疫组织化学结果显示与Western blot结果大致相同的变化趋势.结论:一定剂量的榄香烯乳可以增强胰腺癌裸鼠移植瘤组织中P53蛋白的表达而降低Bcl-2蛋白的表达,从而起到促进胰腺癌细胞凋亡的作用. 展开更多
关键词 榄香烯乳 人胰腺癌移植瘤组织 凋亡 蛋白
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反义hTR抑制人胰腺癌P3细胞系端粒酶活性和增殖的研究 被引量:2
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作者 张红梅 张丽珊 +2 位作者 杨德同 周家华 洪泽辉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期237-241,共5页
设计针对端粒酶RNA模板序列并经硫代磷酸修饰的正义、反义和随机序列寡核苷酸 ,以正常人成纤维细胞作对照 ,观察其对人胰腺癌细胞端粒酶活性和细胞生长增殖的影响作用以及对正常细胞是否有毒副作用。结果表明 :针对hTR模板区的反义寡核... 设计针对端粒酶RNA模板序列并经硫代磷酸修饰的正义、反义和随机序列寡核苷酸 ,以正常人成纤维细胞作对照 ,观察其对人胰腺癌细胞端粒酶活性和细胞生长增殖的影响作用以及对正常细胞是否有毒副作用。结果表明 :针对hTR模板区的反义寡核苷酸能降低胰腺癌P3细胞端粒酶活性 ,抑制细胞生长 ,促进细胞周期改变并诱导细胞发生凋亡 ,而且对正常细胞没有明显的毒副作用。因此我们认为利用反义技术封闭hTR基因很可能成为治疗肿瘤的安全、有效手段之一。 展开更多
关键词 反义HTR 抑制 人胰腺癌P3细胞系 端粒酶活性 细胞周期 细胞增殖
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人胰腺组织Toll样受体4表达的研究 被引量:3
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作者 高宏凯 周总光 +1 位作者 李园 王存 《华西医学》 CAS 2004年第2期241-242,共2页
目的 :研究人胰腺组织Toll样受体 4 (TLR4 )的表达分布。方法 :采用免疫组化方法观察 2 0例正常人胰腺组织冰冻切片TLR4的表达分布情况。结果 :正常人胰腺主胰管上皮、血管内皮、胰岛和胰腺腺泡细胞可见TLR4的表达 ,其中胰管上皮和血管... 目的 :研究人胰腺组织Toll样受体 4 (TLR4 )的表达分布。方法 :采用免疫组化方法观察 2 0例正常人胰腺组织冰冻切片TLR4的表达分布情况。结果 :正常人胰腺主胰管上皮、血管内皮、胰岛和胰腺腺泡细胞可见TLR4的表达 ,其中胰管上皮和血管内皮表达尤为明显。结论 :正常人胰腺胰管上皮及血管上皮存在TLR4的表达分布 ,此结果提示TLR4可能参与胰腺感染时识别和清除入侵病原体的免疫防御反应。 展开更多
关键词 人胰腺组织Toll样受体4 胰腺疾病 免疫组化 免疫反应 胰腺感染
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吉西他滨与培美曲塞对人胰腺癌细胞BXPC-3及PANC-1生长的体外作用 被引量:2
14
作者 朱志霞 张为民 +1 位作者 贾刚 周娟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期149-152,156,共5页
目的探讨吉西他滨与培美曲塞不同用药次序联合应用对人胰腺癌细胞BXPC-3及PANC-1生长的影响及可能的细胞学机制。方法MTT法测细胞增殖;流式细胞术测细胞周期。结果吉西他滨(10-7-10mg/ml)和培美曲塞(10-7-10mg/ml)均明显抑制2株细胞生长... 目的探讨吉西他滨与培美曲塞不同用药次序联合应用对人胰腺癌细胞BXPC-3及PANC-1生长的影响及可能的细胞学机制。方法MTT法测细胞增殖;流式细胞术测细胞周期。结果吉西他滨(10-7-10mg/ml)和培美曲塞(10-7-10mg/ml)均明显抑制2株细胞生长,作用呈现浓度依赖性和时间依赖性。二者联合对2株细胞生长的影响与给药次序有关:先用培美曲塞24h后序贯用吉西他滨对2株细胞的抑制作用明显强于同时给药(P<0.05)和先用吉西他滨24h后序贯用培美曲塞(P<0.05)。吉西他滨联合培美曲塞对BXPC-3细胞周期结果显示:与对照组相比,吉西他滨与培美曲塞分别将细胞周期阻断在G1期和S期(P<0.05);同时给药G2期比例减少(P<0.05);先用吉西他滨后用培美曲塞将细胞周期阻断在G1期(P<0.05);先用培美曲塞后用吉西他滨将细胞周期阻断在S期(P<0.05)。结论吉西他滨与培美曲塞均能抑制人胰腺癌细胞BXPC-3及PANC-1生长,二者联合具协同作用,先用培美曲塞24h后用吉西他滨对2株细胞的抑制作用最强,其协同作用与他们对细胞周期的影响无关。 展开更多
关键词 吉西他滨 培美曲塞 人胰腺癌细胞 细胞增殖 细胞周期
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人胰腺癌细胞株HPAC和BxPC-3中Src/MAPK信号转导途径中pp60c-Src和pERK1/2表达的差异 被引量:2
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作者 孔璐 张玉祥 +4 位作者 孙林 马慧苹 贺旭 谢千池 李宝红 《首都医科大学学报》 CAS 2008年第5期589-592,共4页
目的研究人胰腺癌细胞株HPAC和BxPC-3中Src/MAPK信号转导系统,探寻不同类型胰腺癌信号转导通路的差异,为研究靶点药物提供基础。方法将1640培养的HPAC和BxPC-3经细胞计数相同后各分为4组,分别为对照组、TGF-α组、TGF-α+PP2组和TGF-α... 目的研究人胰腺癌细胞株HPAC和BxPC-3中Src/MAPK信号转导系统,探寻不同类型胰腺癌信号转导通路的差异,为研究靶点药物提供基础。方法将1640培养的HPAC和BxPC-3经细胞计数相同后各分为4组,分别为对照组、TGF-α组、TGF-α+PP2组和TGF-α+PD组。细胞贴壁并达70%融合后,换无血清培养48h。无血清处理作对照,用无血清培养基溶解终浓度为7nmol/L的TGF-α刺激TGF-α组2h,TGF-α+PP2组先加入终浓度为10μmol/L的PP2刺激细胞20min后加入7nmol/L的TGF-α刺激2h,TGF-α+PD组先加入30μmol/L的PD98059刺激细胞20min后加入终浓度为7nmol/L的TGF-α刺激2h。用蛋白印迹方法分析HPAC和BxPC-3的4组细胞pp60c-Src和pERK1/2的表达。结果HPAC细胞pp60c-Src的表达:对照组显著高于TGF-α组、TGF-α+PD组(P<0.05)和TGF-α+PP2组(P<0.01);HPAC细胞pERK1/2的表达:TGF-α组显著高于对照组和TGF-α+PD组(P<0.01),与TGF-α+PP2组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。BxPC-3细胞pp60c-Src的表达:TGF-α组显著高于对照组(P<0.05)和TGF-α+PP2组(P<0.01),与TGF-α+PD组相比较差异无统计学意义(P>0.05);BxPC-3细胞pERK1/2的表达:TGF-α组显著高于对照组、TGF-α+PD组和TGF-α+PP2组(P<0.01)。结论HPAC和BxPC-3细胞中Src/MAPK信号途径存在差异。推测在BxPC-3细胞株中c-Src是活化Ras/Raf/MAPK途径的关键信号分子,应进一步研究在HPAC细胞株中c-Src的作用。 展开更多
关键词 人胰腺癌细胞系 HPAC BXPC-3 SRC MAPK
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舒林酸对人胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响及机制探讨 被引量:3
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作者 卞保祥 宋子琰 熊光苏 《中国生化药物杂志》 CAS 北大核心 2014年第7期23-26,共4页
目的以人胰腺癌细胞系PANC-1为研究对象,利用不同浓度舒林酸处理PANC-1细胞,观察其对PANC-1细胞增殖、凋亡影响,并探讨舒林酸通过抑制Wnt/β-catenin信号通路杀伤PANC-1细胞的可能机制。方法实验分为阴性对照组(加入不含舒林酸的DMSO)... 目的以人胰腺癌细胞系PANC-1为研究对象,利用不同浓度舒林酸处理PANC-1细胞,观察其对PANC-1细胞增殖、凋亡影响,并探讨舒林酸通过抑制Wnt/β-catenin信号通路杀伤PANC-1细胞的可能机制。方法实验分为阴性对照组(加入不含舒林酸的DMSO)和实验组(分别加入舒林酸浓度为0.25、0.5、1、1.5、2 mM的培养液,分别为:阴性对照组、0.25 mM组、0.5 mM组、1.0mM组、1.5 mM组、2.0 mM组,总计6组)。MTT法检测PANC-1细胞生长抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR和免疫细胞化学技术检测细胞内β-Catenin的表达。结果 MTT结果显示:PANC-1细胞经舒林酸干预后生长均受到不同程度抑制,且随着舒林酸浓度增加,抑制作用越强。流式细胞术检测凋亡结果显示PANC-1细胞早期凋亡率干预后均有不同程度增加,与对照组相比,0.5、1.0 mM组早期凋亡率差异无统计学意义,而1.5、2.0 mM组差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示可见各组β-catenin mRNA表达量随着舒林酸浓度增加而降低,0.5、1.0 mM组与对照组相比差异无统计学意义,而1.5及2.0 mM组差异有统计学意义(P<0.05);应用2.0 mM的舒林酸处理PANC-1细胞0、12、24、48、72 h,随着处理时间延长,β-catenin mRNA表达量逐渐降低,各处理组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。ICC结果证实干预后PANC-1细胞内β-catenin表达量及核聚集降低,与对照组相比,0.25、0.5 mM组差异无统计学意义,而1.0、1.5、2.0 mM组差异有统计学意义(P<0.05)。结论舒林酸对PANC-1细胞具有生长抑制及促凋亡作用,这种作用具有浓度-时间依赖性,舒林酸抑制Wnt/β-catenin信号通路可能是其杀伤PANC-1细胞的可能机制之一。 展开更多
关键词 舒林酸 人胰腺癌细胞PANC-1 WNT/Β-CATENIN信号通路 增殖及凋亡
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利用基因芯片技术研究人胰腺癌相关基因 被引量:1
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作者 金钢 胡先贵 +6 位作者 应康 唐岩 刘瑞 张怡杰 景在平 谢毅 毛裕民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期80-83,共4页
目的 :观察人胰腺癌基因表达谱的变化 ,研究胰腺癌发生、发展过程中的相关基因 ,并探讨基因表达谱芯片技术在筛查肿瘤相关基因中的应用价值。 方法 :应用含有 4 0 96条人类全长基因的 c DNA表达谱芯片 ,对 9例临床切除的胰头导管腺癌标... 目的 :观察人胰腺癌基因表达谱的变化 ,研究胰腺癌发生、发展过程中的相关基因 ,并探讨基因表达谱芯片技术在筛查肿瘤相关基因中的应用价值。 方法 :应用含有 4 0 96条人类全长基因的 c DNA表达谱芯片 ,对 9例临床切除的胰头导管腺癌标本组织抽提及纯化的 m RNA进行芯片杂交 ,并对基因表达谱进行分析研究。 结果 :按差异显著阳性标准 ,从 4 0 96个基因中筛选出在胰腺癌组织中共同差异表达基因 1 84条 ,其中 87条表达上调 ,97条表达下调 ,包括原癌及抑癌基因、细胞周期、信号转导、细胞外基质、细胞骨架和运动蛋白、转录因子、DNA损伤修复基因、凋亡相关蛋白以及核糖体蛋白等相关编码基因。其中有 1 1条为尚未在 Gen Bank登录的人类新基因。 结论 :运用 c DNA表达谱芯片分析基因表达谱 ,能够快速筛查出新的肿瘤相关基因 。 展开更多
关键词 基因芯片 人胰腺 基因表达谱 肿瘤相关基因 基因筛查
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双氢青蒿素抑制人胰腺癌细胞SW-1990的实验研究 被引量:4
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作者 吴伟林 杜章 +2 位作者 鲍贤俊 陈玲玲 蔡振寨 《中华中医药学刊》 CAS 2012年第7期1595-1598,I0012,共5页
目的:研究双氢青蒿素对人胰腺癌细胞株SW-1990增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:采用细胞增殖/毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测不同浓度双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人胰腺癌细胞株SW-1990增殖的影响;... 目的:研究双氢青蒿素对人胰腺癌细胞株SW-1990增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:采用细胞增殖/毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测不同浓度双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人胰腺癌细胞株SW-1990增殖的影响;流式细胞术Annexin V-FITC和PI双标染色法检测不同浓度DHA对其凋亡的影响;并且用激光共聚焦显微镜观察在Hoechst 33342/PI荧光双染色下胰腺癌细胞SW-1990形态学变化;RT-PCR检测DHA对胰腺癌细胞SW-1990中端粒酶催化亚单位hTERT mRNA表达的影响。结果:DHA在体外可以明显的抑制SW-1990的增殖,并且具有浓度-时间依赖性;DHA在体外能明显诱导SW-1990细胞的凋亡;DHA可以抑制胰腺癌细胞SW-1990中hTERT mRNA的表达,并且与浓度呈正相关。结论:DHA在体外抑制胰人腺癌细胞SW-1990的增殖、诱导其凋亡,其作用机制可能是抑制了肿瘤细胞中端粒酶催化亚单位hTERT mRNA的表达。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 人胰腺癌细胞 增殖 凋亡 HTERT
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羟基喜树碱对人胰腺癌细胞PANC-1生长的抑制作用 被引量:2
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作者 赖日勇 李小波 +1 位作者 许春鹃 叶金花 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期2039-2040,共2页
目的研究羟基喜树碱对人胰腺癌PANC-1细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法MTT法测定羟基喜树碱对PANC-1细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测羟基喜树碱对PANC-1细胞周期、凋亡率和Caspase-3活性的影响。结果羟基喜树碱能抑制PANC-1细... 目的研究羟基喜树碱对人胰腺癌PANC-1细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法MTT法测定羟基喜树碱对PANC-1细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测羟基喜树碱对PANC-1细胞周期、凋亡率和Caspase-3活性的影响。结果羟基喜树碱能抑制PANC-1细胞生长,并呈剂量依赖关系,其半数抑制浓度(IC50)为51.52μg/ml;流式细胞仪检测显示低浓度羟基喜树碱处理后可将细胞先后阻滞于S期和G2/M期,高浓度的羟基喜树碱则诱导细胞凋亡;细胞凋亡率和Caspase-3活性随药物浓度升高和处理时间延长而逐渐递增。结论羟基喜树碱能抑制人胰腺癌PANC-1细胞的生长,其抗肿瘤作用机制与阻断细胞周期、诱导细胞凋亡和激活Caspase-3活性有关。 展开更多
关键词 羟基喜树碱 人胰腺癌细胞PANC-1 抗肿瘤作用
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瑞芝清对人胰腺癌细胞COX-2和VEGF影响 被引量:2
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作者 褚美芬 吴怡春 章燕丽 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期910-912,共3页
目的观察瑞芝清对人胰腺癌PANC-1细胞环氧合酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨瑞芝清抑制肿瘤血管生成机制。方法对人胰腺癌PANC-1细胞进行培养,不同浓度瑞芝清处理细胞后,用免疫组织化学染色检测COX-2和VEGF蛋白表... 目的观察瑞芝清对人胰腺癌PANC-1细胞环氧合酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨瑞芝清抑制肿瘤血管生成机制。方法对人胰腺癌PANC-1细胞进行培养,不同浓度瑞芝清处理细胞后,用免疫组织化学染色检测COX-2和VEGF蛋白表达的变化。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2mRNA和VEGFmRNA表达的变化。结果100,200,400μmol/L瑞芝清作用胰腺癌PANC-1细胞48h后,COX-2和VEGF蛋白表达率与对照组比较明显降低(P<0.05),并且COX-2与VEGF之间具有良好的相关性(r=0.785,P<0.05);RT-PCR结果也显示,随着药物浓度的增大,COX-2mRNA和VEGFmRNA表达逐渐减弱。结论抑制COX-2表达及由此引起的VEGF表达降低,在非甾体类抗炎药抑制肿瘤血管生成机制中可能具有一定作用。 展开更多
关键词 瑞芝清 人胰腺癌PANC-1细胞 环氧合酶-2 血管内皮生长因子
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