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骨碎补UPLC指纹图谱与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶活性的谱效关系研究
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作者 陈香丽 张慧敏 张紫佳 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期293-302,共10页
建立骨碎补生品和砂烫品提取物的UPLC指纹图谱,并研究骨碎补提取物与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶(ALP)活性之间的谱效关系。采用UPLC法建立骨碎补生品和烫品的指纹图谱并通过UPLC-Q-TOF MS法对其化学成分进行鉴别;通过测定MG63细胞中... 建立骨碎补生品和砂烫品提取物的UPLC指纹图谱,并研究骨碎补提取物与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶(ALP)活性之间的谱效关系。采用UPLC法建立骨碎补生品和烫品的指纹图谱并通过UPLC-Q-TOF MS法对其化学成分进行鉴别;通过测定MG63细胞中ALP活性检测骨碎补提取物对MG63细胞成骨分化的影响;采用灰色关联度分析、双变量相关性分析以及偏最小二乘回归分析法分析骨碎补生品和烫品的UPLC特征指纹峰与其促ALP活性之间的谱效关系。在标定的12个共有峰中,确定了4、5、12号峰与ALP活性呈正相关,其对应的物质依次是咖啡酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、儿茶素7-葡糖苷、柚皮苷,为深入研究骨碎补的促成骨分化活性物质基础提供依据。 展开更多
关键词 骨碎补 UPLC指纹图谱 碱性磷酸酶活性 谱效关系 人骨肉瘤细胞mg63
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BMP2对骨肉瘤细胞株MG63的作用机制 被引量:1
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作者 陈英华 李星星 周兰 《科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期64-67,共4页
为探讨骨形态发生蛋白2(BMP2)在体外抑制人骨肉瘤细胞株MG63的增殖和迁移并促使其凋亡的作用机制,分别用绿色荧光蛋白重组腺病毒(AdGFP)、骨形态发生蛋白2重组腺病毒(AdBMP2)感染人骨肉瘤细胞MG63,用RT-PCR和免疫细胞化学法检测核录因子... 为探讨骨形态发生蛋白2(BMP2)在体外抑制人骨肉瘤细胞株MG63的增殖和迁移并促使其凋亡的作用机制,分别用绿色荧光蛋白重组腺病毒(AdGFP)、骨形态发生蛋白2重组腺病毒(AdBMP2)感染人骨肉瘤细胞MG63,用RT-PCR和免疫细胞化学法检测核录因子κB(NF-κB)、有丝分裂素激活蛋白激酶激酶4(MKK-4)的mRNA和蛋白水平变化。结果发现,AdBMP2降低MG63中NF-κB的mRNA水平和蛋白表达,分别为对照组的38.2%和42.5%(P<0.05);但未能检测到对MKK-4表达的影响。研究表明,BMP2可以显著降低细胞中NF-κB的mRNA水平和蛋白水平,这可能是其抑制细胞增殖和迁移、促进凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白2 人骨肉瘤细胞mg63 有丝分裂素激活蛋白激酶激酶4 核录因子κB
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虫草素对人骨肉瘤细胞株MG63增殖及凋亡的影响 被引量:6
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作者 孔俊超 陈祝明 +4 位作者 吕贵何 黄帅 王朝军 赵名艳 楚佳奇 《广东医学》 CAS 2018年第4期506-510,共5页
目的研究不同浓度虫草素对人骨肉瘤细胞株MG63增殖与凋亡的影响。方法不同浓度虫草素作用于MG63细胞48 h后,倒置显微镜观察细胞形态变化,MTS法检测虫草素对MG63细胞增殖活性的影响,流式细胞术检测虫草素对MG63细胞周期和凋亡的作用,Hoec... 目的研究不同浓度虫草素对人骨肉瘤细胞株MG63增殖与凋亡的影响。方法不同浓度虫草素作用于MG63细胞48 h后,倒置显微镜观察细胞形态变化,MTS法检测虫草素对MG63细胞增殖活性的影响,流式细胞术检测虫草素对MG63细胞周期和凋亡的作用,Hoechst 33342染色和Western blot检测虫草素对骨肉瘤细胞凋亡的影响。结果虫草素对人骨肉瘤细胞增殖有显著抑制作用,且呈浓度和时间依赖性。流式细胞术结果显示该细胞被阻滞在S期和G_2/M期(P<0.05),同时虫草素可引起MG63细胞早期凋亡(P<0.05)。Western blot结果显示,随虫草素浓度增加,Bcl-2蛋白表达下调,而Bax蛋白表达上调,且各实验组均出现蛋白分子量为89 k D的PARP裂解条带。结论虫草素通过下调MG63细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2并上调促凋亡蛋白Bax表达,同时阻滞细胞周期进展,促进早期凋亡。 展开更多
关键词 人骨肉瘤细胞mg63 虫草素 凋亡 BCL-2
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β-catenin基因在人骨肉瘤MG63细胞系的表达变化
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作者 赵小军 于军 +2 位作者 赵海康 张兵 陶绍辉 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第31期6031-6034,共4页
目的:观察分析β-catenin基因在人骨肉瘤MG63细胞系的表达变化。方法:培养MG63细胞株,用不同浓度的Wnt3a蛋白或相同浓度、不同时间段的Wnt3a蛋白刺激液MG63细胞生长,用FQ-PCR在m RNA水平检测β-catenin在MG63细胞系的表达变化。培养MG6... 目的:观察分析β-catenin基因在人骨肉瘤MG63细胞系的表达变化。方法:培养MG63细胞株,用不同浓度的Wnt3a蛋白或相同浓度、不同时间段的Wnt3a蛋白刺激液MG63细胞生长,用FQ-PCR在m RNA水平检测β-catenin在MG63细胞系的表达变化。培养MG63细胞株,用相同浓度的Wnt3a蛋白刺激,比较刺激组与空白对照组的细胞数目的差别。结果:在细胞生长的第0,1天两组的MG63细胞数量对比没有统计学差异(P>0.05);而在第2,3,4天对照组细胞增殖速度较刺激组缓缓,经比较(t=4.109,3.892,5.215,均P<0.05)。β-catenin基因表达不会因为Wnt3a的浓度增加而增加。100 ng/m L的Wnt3a蛋白刺激β-catenin基因表达最高,其他几个浓度的β-catenin基因表达对比没有统计学差异(P>0.05)。在100 ng/m L的Wnt3a蛋白刺激下,β-catenin基因表达会随时间延长而增加,6 h时β-catenin基因表达最高(P<0.05),随后β-catenin基因表达则没有统计学差异(P>0.005)。结论:Wnt蛋白对MG63细胞有正向增加增殖作用。激活Wnt/β-catenin信号通路能促进MG63的细胞增殖。 展开更多
关键词 FQ-PCR 人骨肉瘤mg63细胞 β-catenin基因表达 WNT3A
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丹参酮ⅡA与阿霉素联合应用对人骨肉瘤MG63细胞增殖体外抑制作用 被引量:3
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作者 董视师 周逸驰 +1 位作者 查圆瑜 金伟 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2015年第3期374-377,共4页
目的:研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)与阿霉素(ADM)联合应用对人骨肉瘤MG63细胞增殖的抑制作用及机理。方法:不同浓度的TanⅡA与ADM联合处理MG63细胞后,MTT比色分析法检测细胞的增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞的凋亡率,蛋白质印记法(Western bl... 目的:研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)与阿霉素(ADM)联合应用对人骨肉瘤MG63细胞增殖的抑制作用及机理。方法:不同浓度的TanⅡA与ADM联合处理MG63细胞后,MTT比色分析法检测细胞的增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞的凋亡率,蛋白质印记法(Western blot)检测细胞Bcl-2,Bax和Caspase-3的蛋白表达水平改变。结果:处理48hADM+低浓度TanⅡA组与ADM+高浓度TanⅡA组的抑制率分别为62.35%±1.58%、76.38%±2.01%,明显高于ADM组(32.67%±1.65%)、低浓度TanⅡA组(18.55%±0.77%)和高浓度TanⅡA组(44.25%±1.01%);流式结果显示空白对照组、ADM组、低浓度TanⅡA组、高浓度TanⅡA组、ADM+低浓度TanⅡA组、ADM+高浓度TanⅡA组48h细胞凋亡率分别为0.03%,10.24%,4.47%,13.06%,13.23%,21.36%;联合用药组Bcl-2蛋白表达明显较单一用药组下调,而Bax和Caspase-3的蛋白表达较单一用药组明显上调。结论:TanⅡA与ADM联合应用对人骨肉瘤MG63细胞有显著的抑制作用,其作用可能与干预Bcl-2,Bax和Caspase-3等癌基因表达从而诱导细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 阿霉素 人骨肉瘤mg63细胞 增殖抑制
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黄芩苷对人骨肉瘤MG63细胞凋亡及MMPs表达的影响 被引量:4
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作者 沈志华 郭菁菁 《中国药房》 CAS 北大核心 2016年第4期488-490,共3页
目的:研究黄芩苷对人骨肉瘤MG63细胞凋亡及基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响。方法:以0(空白对照)、5、10、20、40、80、160、320μg/ml黄芩苷处理MG63细胞24 h后,检测细胞存活率和细胞中MMP-2、MMP-9的表达量,计算半数抑制浓度(IC50),... 目的:研究黄芩苷对人骨肉瘤MG63细胞凋亡及基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响。方法:以0(空白对照)、5、10、20、40、80、160、320μg/ml黄芩苷处理MG63细胞24 h后,检测细胞存活率和细胞中MMP-2、MMP-9的表达量,计算半数抑制浓度(IC50),观察细胞凋亡情况。结果:与空白对照比较,黄芩苷处理MG63细胞后细胞存活率降低,凋亡细胞数量增加,细胞中MMP-2和MMP-9表达量降低,并以320μg/ml黄芩苷处理时细胞中MMP-2和MMP-9表达量下降具有统计学意义(P<0.05);IC50为(40.21±9.20)μg/ml,各作用效应均呈浓度依赖性。结论:黄芩苷可抑制MG63细胞增殖,诱导其凋亡,较高质量浓度时可抑制细胞中MMP-2、MMP-9的表达。 展开更多
关键词 黄芩苷 人骨肉瘤mg63细胞 基质金属蛋白酶 细胞凋亡
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