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原花青素对青春期前羔羊卵母细胞体外成熟的影响 被引量:1
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作者 李厚儒 白佳琛 +6 位作者 王晶晶 海桂萍 郝哨鹏 刘倩 刘昱成 万鹏程 傅祥伟 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期172-176,共5页
青春期前羔羊的卵母细胞发育能力低于成年母羊的卵母细胞,这限制了幼畜体外胚胎移植(Juvenile in vitro Embryo Transfer,JIVET)技术的广泛应用。为探讨原花青素B2(Procyanidin B2,PCB2)对提高青春期前羔羊卵母细胞发育能力的影响及其机... 青春期前羔羊的卵母细胞发育能力低于成年母羊的卵母细胞,这限制了幼畜体外胚胎移植(Juvenile in vitro Embryo Transfer,JIVET)技术的广泛应用。为探讨原花青素B2(Procyanidin B2,PCB2)对提高青春期前羔羊卵母细胞发育能力的影响及其机制,本研究收集了经促性腺激素刺激的4~8周龄羔羊卵母细胞,在体外成熟液中培养。在卵母细胞成熟液中添加5μg/mL PCB2作为PCB2组,未添加PCB2组为对照组,培养24 h后测定卵母细胞第一极体排出率、孤雌激活后的卵裂率和囊胚率,并进一步测定胞内活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)含量、线粒体活性和线粒体膜电位水平等。结果表明:PCB2组卵母细胞第一极体排出率高于对照组(36.76%vs 31.11%,P<0.05),但卵裂率(49.17%vs 49.68%)及囊胚率(47.47%vs 54.06%)与对照组无显著差异;进一步研究发现在IVM液中添加5μg/mL PCB2降低了卵母细胞ROS水平(P<0.01),并提高了GSH水平(P<0.05)、线粒体活性(P<0.01)以及线粒体膜电位水平(P<0.05)。由此可见,在IVM过程中添加5μg/mL PCB2能有效降低青春期前羔羊卵母细胞的氧化应激,提升线粒体功能和成熟效率。 展开更多
关键词 羔羊卵母细胞 体外成熟 原花青素B2
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不同培养基对小鼠卵母细胞体外成熟质量及发育潜能的影响 被引量:2
2
作者 田银 赵艳华 +1 位作者 黄国宁 李竞宇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第13期2024-2029,共6页
背景:近年,未成熟卵母细胞体外成熟技术的需求逐渐增加。卵母细胞成熟受多种因素影响,其中培养基的选择尤为重要,目前尚无统一方案。目的:用不同成熟培养基对生发泡期卵母细胞体外成熟,研究其对卵母细胞质量及发育潜能的影响。方法:用G-... 背景:近年,未成熟卵母细胞体外成熟技术的需求逐渐增加。卵母细胞成熟受多种因素影响,其中培养基的选择尤为重要,目前尚无统一方案。目的:用不同成熟培养基对生发泡期卵母细胞体外成熟,研究其对卵母细胞质量及发育潜能的影响。方法:用G-1^(TM)PLUS培养基、CZB培养基和M16培养基对生发泡期卵母细胞体外成熟,并以体内成熟卵母细胞为对照组,比较各组间的体外受精和早期胚胎发育能力。对于各组成熟后卵母细胞,采用免疫荧光方法评估线粒体功能,共聚焦显微镜实时成像系统检测钙震荡情况。结果与结论:①3组之间第一极体排出率无明显差异(P>0.05);②G-1^(TM)PLUS组体外受精率(52.86±11.24)%高于M16组(37.76±6.70)%和CZB组(30.62±5.51)%;CZB组的囊胚率(36.23±6.63)%低于对照组(78.16±4.17)%、G-1^(TM)PLUS组(55.75±7.63)%和M16组(53.36±6.33)%;③与对照组相比,仅CZB组的纺锤体长宽比增加;④CZB组线粒体功能差于对照组、G-1^(TM)PLUS组及M16组,并出现CZB组线粒体异常凝集现象;⑤受精后CZB组及M16组的钙震动频率显著高于G1组和对照组。综上所述,在小鼠卵母细胞体外成熟过程中,G-1^(TM)PLUS、CZB及M16培养基的体外成熟率无差异,但G-1^(TM)PLUS培养基有更高的受精率和囊胚形成率。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外成熟 培养基 钙震荡 受精 胚胎发育
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千金藤素对牛卵母细胞体外成熟中抗氧化能力的影响
3
作者 徐冰洁 王玉琪 +4 位作者 郑湘民 孙朝阳 高青山 方南洙 金庆国 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期245-250,共6页
为探究千金藤素(Cepharanthine,Ceph)对牛卵母细胞抗氧化能力的影响及作用机制,本实验在牛卵母细胞体外成熟培养基中添加0、10、100、500、1000μmol/L Ceph进行培养,统计第一极体排出率,筛选出Ceph的最佳浓度,根据浓度将分为对照组和C... 为探究千金藤素(Cepharanthine,Ceph)对牛卵母细胞抗氧化能力的影响及作用机制,本实验在牛卵母细胞体外成熟培养基中添加0、10、100、500、1000μmol/L Ceph进行培养,统计第一极体排出率,筛选出Ceph的最佳浓度,根据浓度将分为对照组和Ceph处理组,通过免疫荧光染色法检测活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)表达水平以及线粒体膜电位水平(JC-1);使用实时荧光定量PCR检测囊胚内抗氧化相关基因(SIRT-1、SOD-1、SOD-2)mRNA转录水平。结果表明:与对照组相比,添加500、1000μmol/L Ceph可显著提高牛卵母细胞第一极体排出率,而10、100μmol/L Ceph组第一极体排出率显著降低,后续采用500μmol/L Ceph用于实验;与对照组相比,添加500μmol/L Ceph显著降低了ROS水平,GSH及JC-1水平显著升高,SIRT-1、SOD-1、SOD-2 mRNA表达水平也显著升高。由此可知,在体外成熟培养基中添加500μmol/L Ceph可以缓解氧化应激损伤,维持线粒体膜电位,从而提高卵母细胞体外发育质量。 展开更多
关键词 千金藤素 卵母细胞 氧化应激 体外成熟
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玉米赤霉烯酮影响绵羊卵母细胞体外成熟的分子机制研究
4
作者 马甜 李宗帅 +4 位作者 张启冉 李怡娜 赵兴绪 胡俊杰 张勇 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期207-213,共7页
实验旨在研究玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)对绵羊卵母细胞体外成熟相关基因表达及活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)水平的影响。采集绵羊卵巢,收集卵母细胞,分为4组,包括对照组(CG组)和实验组(TG1、TG2和TG3组)。CG组不做任何处理... 实验旨在研究玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)对绵羊卵母细胞体外成熟相关基因表达及活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)水平的影响。采集绵羊卵巢,收集卵母细胞,分为4组,包括对照组(CG组)和实验组(TG1、TG2和TG3组)。CG组不做任何处理,TG1、TG2和TG3组分别在成熟液中添加10、20、30μmol/L ZEA进行体外成熟培养,qPCR技术检测减数分裂成熟和凋亡等相关基因mRNA的相对表达量,ROS检测试剂盒检测卵母细胞内ROS水平。结果表明:与CG组相比,当培养液中ZEA浓度达到20μmol/L时,卵母细胞成熟率显著降低,GPX、SOD1、SOD2、Caspase3、ATG3和ATG7的mRNA表达水平显著升高,而CDC20、GDF9和BMP15的mRNA表达水平显著降低,但LC3、BAX和BCL-2的mRNA表达水平在统计学上没有显著差异;与CG组相比,添加ZEA后卵母细胞内ROS含量极显著升高。以上结果提示,ZEA能通过诱导绵羊卵母细胞发生凋亡和氧化应激,抑制细胞分裂从而影响卵母细胞的体外成熟。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 绵羊 卵母细胞 体外成熟
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哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟的研究进展
5
作者 李有为 程亚倬 +2 位作者 商继勇 张廷龙 孙铭菊 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1171-1182,共12页
体外成熟是哺乳动物胚胎工程获得成熟卵母细胞的主要途径,卵母细胞质量直接影响早期胚胎发育,妊娠的建立及维持,胎儿的发育等。哺乳动物卵巢表面数量众多的小卵泡可以作为胚胎工程卵母细胞的来源,但从哺乳动物卵巢获取的卵母细胞成熟差... 体外成熟是哺乳动物胚胎工程获得成熟卵母细胞的主要途径,卵母细胞质量直接影响早期胚胎发育,妊娠的建立及维持,胎儿的发育等。哺乳动物卵巢表面数量众多的小卵泡可以作为胚胎工程卵母细胞的来源,但从哺乳动物卵巢获取的卵母细胞成熟差异较大,存在处于发育各个时期的卵母细胞,小卵泡卵母细胞体外成熟质量差,发育能力不足。如何提高小卵泡卵母细胞体外成熟的发育能力以充分挖掘优良母畜的遗传资源,提高胚胎工程效率成为研究热点。基于此,文章概述哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟的研究进展,比较大、小卵泡卵母细胞物质积累差异、卵泡的卵泡液成分及含量差异以及卵泡颗粒细胞和卵丘细胞的差异,分析哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟质量差的原因,分析总结提高哺乳动物小卵泡体外成熟卵母细胞发育能力的措施,包括抑制核成熟、成熟前培养、颗粒细胞及卵丘细胞与卵母细胞共培养,期望能够为小卵泡卵母细胞发育调控机制的研究及发育能力的提高提供理论指导。 展开更多
关键词 哺乳动物 小卵泡 卵母细胞 体外成熟
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丹皮酚对大鼠卵母细胞体外成熟体系氧化应激的调控
6
作者 张春强 田荆华 +7 位作者 王守福 赵辉 李岩 郭新庆 韦岩 王海蓉 刘胜 薛兰 《菏泽医学专科学校学报》 2024年第1期11-16,共6页
目的 研究中药提取物丹皮酚对大鼠卵母细胞体外培养体系氧化应激的改善作用,旨在确定丹皮酚改善氧化应激作用的最佳浓度,以期优化卵母细胞的体外培养体系,提高生产效率。方法 在卵母细胞的体外培养体系中分别添加2 mmol/L、4 mmol/L、6 ... 目的 研究中药提取物丹皮酚对大鼠卵母细胞体外培养体系氧化应激的改善作用,旨在确定丹皮酚改善氧化应激作用的最佳浓度,以期优化卵母细胞的体外培养体系,提高生产效率。方法 在卵母细胞的体外培养体系中分别添加2 mmol/L、4 mmol/L、6 mmol/L、8 mmol/L、10 mmol/L的丹皮酚,研究体外成熟后卵母细胞的成熟质量和氧化应激水平。结果 添加丹皮酚均能提高卵母细胞的成熟率(P<0.05)。添加8 mmol/L的丹皮酚获得卵母细胞的GVBD率、受精率和囊胚率高于其他组(P<0.05);添加6 mmol/L、8 mmol/L和10 mmol/L组的活性氧水平较低,与2 mmol/L、4 mmol/L组具有极显著差异(P <0.01)。添加丹皮酚能够显著提高成熟卵母细胞BCL-2基因和蛋白的表达水平,降低BAX基因和Caspase-3基因和蛋白的表达水平(P<0.01)。添加8 mmol/L、10 mmol/L组较其它组差异极显著(P<0.01)。结论 在大鼠卵母细胞体外成熟液中添加8 mmol/L的丹皮酚可以提高卵母细胞的体外成熟的生产效率和质量,且能够有效改善氧化应激水平、降低卵母细胞的凋亡。 展开更多
关键词 丹皮酚 大鼠 卵母细胞 体外成熟 氧化应激
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不同组分体外成熟培养基对绵羊卵母细胞成熟、代谢及孤雌胚胎发育的影响
7
作者 张楠 宋宇琨 +4 位作者 岱红艳 白雪 王俊兰 韩僖彤 张家新 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第8期46-53,59,共9页
为了探究不同组分体外成熟培养基对绵羊卵母细胞体外成熟的影响,试验从健康绵羊卵巢中分离卵丘-卵母细胞复合体(COCs),将分离的COCs分为V-FSH+LH+E_(2)+FBS组、V-FSH+FBS组、V-FSH+LH+E_(2)+BSA组、P-FSH+LH+E_(2)+FBS组、P-FSH+FBS组、... 为了探究不同组分体外成熟培养基对绵羊卵母细胞体外成熟的影响,试验从健康绵羊卵巢中分离卵丘-卵母细胞复合体(COCs),将分离的COCs分为V-FSH+LH+E_(2)+FBS组、V-FSH+FBS组、V-FSH+LH+E_(2)+BSA组、P-FSH+LH+E_(2)+FBS组、P-FSH+FBS组、P-FSH+LH+E_(2)+BSA组,每组分别添加以V-促卵泡素(FSH,垂体中提纯的FSH)和P-FSH(体外基因重组表达的FSH)为基础设计的体外成熟培养基以进行体外成熟试验,即各组依次添加V-FSH+促黄体素(LH)+雌激素(E_(2))+胎牛血清(FBS)、V-FSH+FBS、V-FSH+LH+E_(2)+牛血清白蛋白(BSA)、P-FSH+LH+E_(2)+FBS、P-FSH+FBS、P-FSH+LH+E_(2)+BSA体外成熟培养基,体外成熟后检测各组卵丘扩展指数(CEI)、第一极体排出率、卵母细胞氧化还原态、乳酸生成量、葡萄糖消耗量、ATP生成量;统计孤雌胚胎的卵裂率、囊胚率、囊胚细胞数,比较不同组分体外成熟培养基对卵母细胞成熟、代谢及孤雌胚胎发育的影响。结果表明:V-FSH+LH+E_(2)+FBS组CEI最高,除与P-FSH+FBS组差异不显著外(P>0.05),与其他组均差异显著(P<0.05)。V-FSH+LH+E_(2)+FBS组和P-FSH+FBS组卵母细胞的第一极体排出率较其他组高,但各组间均差异不显著(P>0.05)。V-FSH+LH+E_(2)+FBS组、P-FSH+FBS组、P-FSH+LH+E_(2)+BSA组的相对氧化还原比均接近1且差异不显著(P>0.05),但均显著低于其他组(P<0.05)。P-FSH+FBS组的COCs乳酸生成量/COCs葡萄糖消耗量最高,除与V-FSH+LH+E_(2)+FBS组、P-FSH+LH+E_(2)+FBS组差异不显著(P>0.05)外,显著高于其他组(P<0.05)。V-FSH+LH+E_(2)+FBS组与P-FSH+FBS组的COCs ATP生成量差异不显著(P>0.05),但均显著高于其他组(P<0.05)。V-FSH+LH+E_(2)+BSA组、P-FSH+LH+E_(2)+BSA组卵裂率差异不显著(P>0.05),但均显著低于其他组(P<0.05)。V-FSH+LH+E_(2)+FBS组与P-FSH+FBS组囊胚率均显著高于其他组(P>0.05),但各组的囊胚细胞数差异不显著(P>0.05)。说明不同来源的FSH与不同组分协同作用会对绵羊卵母细胞的成熟、代谢及孤雌胚胎发育产生不同的效果,并影响了其后续胚胎的发育能力。 展开更多
关键词 绵羊 卵母细胞 促卵泡素(FSH) 体外成熟 细胞代谢
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体外成熟卵母细胞质量和胚胎发育潜能影响因素的研究进展
8
作者 黄鲜菊 王肖 《医药前沿》 2024年第27期56-59,共4页
随着生殖医学的迅速发展,卵母细胞体外成熟(IVM)技术取得了显著进步,但目前IVM卵母细胞仍然面临成熟率低、受精率低和受精后胚胎发育潜力低等挑战。本文总结影响IVM卵母细胞质量、受精及胚胎发育潜能的因素,旨在为增强卵母细胞IVM能力... 随着生殖医学的迅速发展,卵母细胞体外成熟(IVM)技术取得了显著进步,但目前IVM卵母细胞仍然面临成熟率低、受精率低和受精后胚胎发育潜力低等挑战。本文总结影响IVM卵母细胞质量、受精及胚胎发育潜能的因素,旨在为增强卵母细胞IVM能力和胚胎发育潜能提供创新思路。 展开更多
关键词 体外成熟 卵母细胞质量 胚胎发育潜能 文献综述
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未成熟卵母细胞体外成熟不同培养结局的多因素分析
9
作者 关艺青 邓泽桦 +3 位作者 赵晋 梁燕芳 陈悦洲 叶云 《生殖医学杂志》 CAS 2024年第8期1029-1037,共9页
目的应用多因素分析探讨人未成熟卵母细胞进行体外成熟(IVM)培养后不同培养结局(卵母细胞成熟和D3可利用胚胎)的影响因素。方法收集2020年6月至2023年6月于中山市人民医院生殖中心进行常规助孕治疗、有未成熟卵母细胞剩余患者的临床资... 目的应用多因素分析探讨人未成熟卵母细胞进行体外成熟(IVM)培养后不同培养结局(卵母细胞成熟和D3可利用胚胎)的影响因素。方法收集2020年6月至2023年6月于中山市人民医院生殖中心进行常规助孕治疗、有未成熟卵母细胞剩余患者的临床资料。按照纳排标准共纳入45例患者的207枚未成熟卵母细胞,使用商品化IVM培养液和自配IVM培养液进行IVM培养。培养24 h和48 h后,观察卵母细胞成熟情况。当卵母细胞成熟后,行常规卵胞浆内单精子注射(ICSI)、胚胎培养和胚胎观察,记录D3可用胚胎数。并采用Logistic回归分析不同培养液、女性年龄、不孕因素、体质量指数(BMI)等因素对卵母细胞成熟率和D3可用胚胎率的影响。结果纳入研究的207枚未成熟卵母细胞进行IVM培养后,获得成熟卵母细胞159个,成熟率为76.81%;获得D3可用胚胎73个,D3可用胚胎率为35.27%。不同IVM培养液、女方年龄、促排卵方案、BMI、基础FSH(bFSH)、基础LH(bLH)、FSH/LH比值、抗苗勒管激素(AMH)、不孕年限、不孕类型、不孕因素及未成熟卵状态的卵母细胞成熟率无显著性差异(P>0.05)。使用商品化IVM培养液的D3可用胚胎率为42.86%,显著高于使用自配IVM培养液的27.45%(P<0.05);不同女方年龄、促排卵方案、BMI等因素的D3可用胚胎率无显著性差异(P>0.05)。多因素Logistic回归分析显示,IVM培养液、女方年龄等都不是卵母细胞成熟的独立影响因素;而IVM培养液和女方年龄是D3可用胚胎率的独立影响因素(P<0.05)。结论经HCG刺激的未成熟卵母细胞进行IVM培养时,使用商品化IVM培养液比使用自制培养液可能更有利于后续D3可利用胚胎的形成;且随着女方年龄增加,IVM成熟卵母细胞来源的D3可用胚胎率下降。 展开更多
关键词 成熟卵母细胞 体外成熟 培养基 女方年龄
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未成熟卵母细胞的体外成熟技术研究进展
10
作者 黄芷怡 邓春雷 《医学新知》 CAS 2024年第9期1049-1056,共8页
随着我国人口出生率显著下降,辅助生殖技术在缓解生育力低下方面的作用日益显著。未成熟卵母细胞体外成熟技术作为辅助生殖技术的一部分,临床应用逐渐增多。本文介绍了未成熟卵母细胞体外成熟技术的发展历史,总结了双相培养体系、培养... 随着我国人口出生率显著下降,辅助生殖技术在缓解生育力低下方面的作用日益显著。未成熟卵母细胞体外成熟技术作为辅助生殖技术的一部分,临床应用逐渐增多。本文介绍了未成熟卵母细胞体外成熟技术的发展历史,总结了双相培养体系、培养体系添加剂、3D培养体系等未成熟卵母细胞体外成熟现有培养体系技术,并对未成熟卵母细胞体外成熟培养在多囊卵巢综合征、卵巢抵抗综合征、女性生育力保存、常规取卵过多的补救等方面的临床应用进行概述,以期为未成熟卵母细胞体外成熟培养的相关研究和临床应用提供理论依据。 展开更多
关键词 体外成熟 成熟卵母细胞 辅助生殖技术 多囊卵巢综合征 卵巢抵抗综合征
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熊果苷对小鼠卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育潜能的影响机制
11
作者 辛晶 吕跃 《系统医学》 2024年第14期27-30,共4页
目的探究熊果苷对小鼠卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响。方法使用含有不同剂量的熊果苷(0、10、20、40µmol/L,分别设为对照组、10µM组、20µM组、40µM组)培养基对生发泡(germinal vesicle,GV)期小鼠的卵母细... 目的探究熊果苷对小鼠卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响。方法使用含有不同剂量的熊果苷(0、10、20、40µmol/L,分别设为对照组、10µM组、20µM组、40µM组)培养基对生发泡(germinal vesicle,GV)期小鼠的卵母细胞进行16 h体外培养,监测卵母细胞成熟率和活性氧物质(reactive oxygenspecies,ROS)含量。体外受精后将受精卵转移到相同的培养基中,观察卵裂率和囊胚率的变化。结果补充熊果苷培养基的卵母细胞的体外卵母细胞成熟度高于对照卵母细胞,其中40µM组(100%)明显高于对照组(50%),差异有统计学意义(χ^(2)=10.526,P=0.001)。4组的第一极体排出率比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。10µM组、20µM组、40µM组卵母细胞内的ROS荧光强度均低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。4组囊胚率比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。结论在成熟液中添加适量熊果苷能降低卵母细胞中的ROS水平,但对小鼠胚胎发育无明显影响。 展开更多
关键词 小鼠 体外成熟 氧化应激 熊果苷
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OPU卵母细胞体外成熟体系的优化研究进展 被引量:3
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作者 张培培 郝海生 +4 位作者 杜卫华 朱化彬 李树静 余文莉 赵学明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1359-1369,共11页
近年来,体外胚胎生产(in vitro embryo production,IVP)技术取得了很大进步,尤其是卵母细胞活体采卵(ovum pick-up,OPU)技术得到广泛应用。OPU是20世纪90年代发展起来的一项新型的能获得优秀种母牛卵母细胞的技术,该技术在动物胚胎生产... 近年来,体外胚胎生产(in vitro embryo production,IVP)技术取得了很大进步,尤其是卵母细胞活体采卵(ovum pick-up,OPU)技术得到广泛应用。OPU是20世纪90年代发展起来的一项新型的能获得优秀种母牛卵母细胞的技术,该技术在动物胚胎生产和发育机理研究及人类辅助生育技术临床实践中有着广阔的应用前景。可以提高种母畜和珍贵野生动物的资源保护效率,提高优良母畜的遗传潜力,为奶牛生物技术发展提供必要的支撑技术。卵母细胞的质量是IVP系统取得成功的关键,卵母细胞的体外成熟(in vitro maturation,IVM)是成功受精和胚胎发育必不可少的步骤。卵母细胞IVM完成了卵母细胞的细胞质和核成熟,准备了发育至胚胎基因组激活所必需的所有必要成分。但体外成熟的卵母细胞发育能力低于体内成熟卵母细胞,卵母细胞减数分裂和细胞核质成熟不同步,氧化应激损伤等对卵母细胞成功受精和胚胎发育非常重要,因此,需要进一步提高卵母细胞体外成熟能力,以改善牛体外胚胎生产系统。本文从卵母细胞体外成熟面临的核质成熟不同步,氧化应激等问题进行概述,同时,叙述C型钠肽、褪黑素、FLI等物质对卵母细胞IVM的改善作用,以期为OPU卵母细胞体外成熟体系的优化提供一定的参考。 展开更多
关键词 OPU 卵母细胞 体外成熟
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哺乳动物体外成熟卵母细胞的线粒体调控机制研究进展 被引量:4
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作者 孙立晨 许晓玲 +3 位作者 白佳桦 秦玉圣 刘彦 郭凯军 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第10期116-120,共5页
卵母细胞体外成熟作为体外胚胎生产的关键技术环节,对畜牧业生产和人类辅助生殖具有重要意义。目前,该技术在生产上和临床上应用广泛,但是卵母细胞体外成熟率、受精率、优质胚胎发育率及移植后妊娠率低等问题限制了此项技术的利用效率,... 卵母细胞体外成熟作为体外胚胎生产的关键技术环节,对畜牧业生产和人类辅助生殖具有重要意义。目前,该技术在生产上和临床上应用广泛,但是卵母细胞体外成熟率、受精率、优质胚胎发育率及移植后妊娠率低等问题限制了此项技术的利用效率,其中线粒体的动态分布、mtDNA拷贝数、膜电位等指标与卵母细胞发育成熟密切相关。本文简要介绍了卵母细胞成熟机制和体内外成熟差异,概括了线粒体在卵母细胞成熟过程中的调控机制以及外源线粒体调节剂在卵母细胞体外成熟体系中的应用情况和效果,以期为提高体外胚胎生产技术效率提供有力的理论依据和技术支撑。 展开更多
关键词 线粒 能量代谢 体外成熟 卵母细胞 哺乳动物
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N-乙酰半胱氨酸对不同直径卵泡来源猪卵母细胞体外成熟效果的影响 被引量:1
14
作者 肖十雨 卢畅 +3 位作者 马娟 王闯 亓美玉 姚玉昌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1046-1057,共12页
旨在在猪卵母细胞体外成熟培养液中添加N-乙酰半胱氨酸(NAC),揭示NAC对不同直径卵泡来源卵母细胞体外成熟效果的影响,解析其对氧化还原平衡的调控作用。本研究收集猪卵巢上大腔(4~6 mm)、中腔(2~4 mm)、小腔(1~2 mm)卵泡中的卵母细胞,... 旨在在猪卵母细胞体外成熟培养液中添加N-乙酰半胱氨酸(NAC),揭示NAC对不同直径卵泡来源卵母细胞体外成熟效果的影响,解析其对氧化还原平衡的调控作用。本研究收集猪卵巢上大腔(4~6 mm)、中腔(2~4 mm)、小腔(1~2 mm)卵泡中的卵母细胞,在以上3种卵泡来源猪卵母细胞的体外成熟培养液中,均分别添加0、1、2、4 mmol·L^(-1)浓度的NAC处理,评价卵丘扩展指数、第一极体排出率等成熟指标,检测卵母细胞中ROS水平、谷胱甘肽(GSH)含量和抗氧化基因的表达水平。结果表明,NAC处理对大腔卵泡来源卵母细胞的卵丘扩展指数和ROS水平无显著影响(P>0.05),对大、中腔卵泡来源卵母细胞的第一极体排出率无显著作用(P>0.05);而适量浓度的NAC(2 mmol·L^(-1))处理可显著提高中、小腔卵泡来源卵母细胞的卵丘扩展指数(P<0.05),降低ROS水平(P<0.05),提升小腔卵泡来源卵母细胞的第一极体排出率(P<0.05)。同时,NAC处理对大、中腔卵泡来源卵母细胞中的GSH含量和抗氧化基因SOD、CAT、Prdx2、Prdx6的表达水平无显著影响(P>0.05),而适量浓度的NAC(2 mmol·L^(-1))处理可显著提高小腔卵泡来源卵母细胞中的GSH含量(P<0.05),上调抗氧化基因SOD、CAT的表达水平(P<0.05)。综上所述,适当浓度的NAC(2 mmol·L^(-1))处理可以通过缓解氧化应激提高小腔卵泡来源卵母细胞的体外成熟效果。 展开更多
关键词 N-乙酰半胱氨酸 不同直径卵泡 猪卵母细胞 体外成熟 氧化应激
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纳米顺铂对小鼠卵母细胞体外成熟的影响 被引量:1
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作者 黄竹涛 袁玉国 朱家桥 《动物医学进展》 北大核心 2023年第11期47-52,共6页
纳米顺铂通过纳米载体包载顺铂进而发挥抗肿瘤作用,但纳米顺铂在杀死肿瘤细胞的同时,其对动物生殖细胞的影响尚不明确,试验通过在卵母细胞成熟培养液中添加顺铂及纳米顺铂对比了二者对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。采集ICR小鼠未成熟卵... 纳米顺铂通过纳米载体包载顺铂进而发挥抗肿瘤作用,但纳米顺铂在杀死肿瘤细胞的同时,其对动物生殖细胞的影响尚不明确,试验通过在卵母细胞成熟培养液中添加顺铂及纳米顺铂对比了二者对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。采集ICR小鼠未成熟卵母细胞并随机分为对照组、顺铂组和纳米顺铂组,体外培养16 h后统计卵母细胞成熟率;并对比卵丘卵母细胞复合体和裸卵经顺铂和纳米顺铂处理后减数分裂进程的差异,以探究颗粒细胞对纳米顺铂影响卵母细胞减数分裂的作用。通过免疫荧光染色检测染色体、纺锤体及肌动蛋白帽的形态变化以确定纳米顺铂对卵母细胞体外成熟过程中细胞骨架的影响。结果显示,顺铂组卵母细胞成熟率显著低于对照组,纳米顺铂组卵母细胞成熟率显著高于高浓度顺铂组,去除颗粒细胞后,纳米顺铂组停滞于GV期卵母细胞比例显著低于高浓度顺铂组。与对照组相比,顺铂组和纳米顺铂组的染色体排列正常率和细胞骨架形态正常率均显著降低,但纳米顺铂组染色体排列正常率显著高于顺铂组,两组之间细胞骨架正常率无显著性差异。结果提示,纳米顺铂通过增加减数分裂的完成性及维持核染色体的正常排布来减弱对小鼠卵母细胞的毒性作用,但不能改善顺铂对卵母细胞骨架的损伤,颗粒细胞能够在一定程度上降低纳米顺铂对卵母细胞减数分裂恢复的抑制作用。 展开更多
关键词 顺铂 纳米顺铂 小鼠 卵母细胞 体外成熟
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半胱胺对羔羊卵母细胞体外成熟及胚胎发育的影响
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作者 汪保 王晶晶 +7 位作者 刘昱成 张振良 倪建宏 刘长彬 傅祥伟 石国庆 万鹏程 崔炳灿 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期259-263,共5页
实验旨在研究半胱胺对4~8周龄哈萨克羔羊卵母细胞体外成熟和发育能力的影响。在体外成熟培养基中添加不同浓度的半胱胺(0、50、100、200μmol/L),统计卵母细胞卵裂率、囊胚率、成熟率、正常受精率及卵裂和胚泡率,并用SPSS 17.0进行方差... 实验旨在研究半胱胺对4~8周龄哈萨克羔羊卵母细胞体外成熟和发育能力的影响。在体外成熟培养基中添加不同浓度的半胱胺(0、50、100、200μmol/L),统计卵母细胞卵裂率、囊胚率、成熟率、正常受精率及卵裂和胚泡率,并用SPSS 17.0进行方差分析。结果表明:与空白组相比,添加100μmol/L半胱胺可提高羔羊卵母细胞卵裂率、囊胚率、成熟率、正常受精率、卵裂率及胚泡率(P<0.05),添加100μmol/L半胱胺可提高卵母细胞的正常受精率和滋养层细胞数(P<0.05)。可见,100μmol/L半胱胺可显著改善羔羊卵母细胞的体外成熟、受精和发育能力。 展开更多
关键词 半胱胺 体外成熟 羔羊卵母细胞
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α-硫辛酸对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响
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作者 高悦悦 顾浩 +5 位作者 陈矾 任红艳 张立苹 毕延震 方桂杰 华再东 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期204-209,共6页
为探究α-硫辛酸(ALA)对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响,本实验将不同浓度的ALA(0、10、25、50μmol/L)添加至体外成熟培养液(IVM)和胚胎发育培养基(PZM-3)中培养,体外成熟培养42 h后检测卵母细胞第一极体排出率,统计卵母细胞... 为探究α-硫辛酸(ALA)对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响,本实验将不同浓度的ALA(0、10、25、50μmol/L)添加至体外成熟培养液(IVM)和胚胎发育培养基(PZM-3)中培养,体外成熟培养42 h后检测卵母细胞第一极体排出率,统计卵母细胞孤雌激活胚胎48 h和168 h卵裂率和囊胚率,筛选出ALA最佳添加浓度,并通过检测成熟卵母细胞内活性氧(ROS)水平、谷胱甘肽(GSH)含量、体外成熟卵母细胞内的促凋亡基因Bax的mRNA以及抗氧化基因SOD1、CAT的mRNA表达量,分析ALA在卵母细胞成熟中的作用。结果表明:与对照组相比,25μmol/L ALA组提高了猪卵母细胞第一极体排出率(P<0.05),随着ALA浓度增加,卵母细胞的第一极体排出率呈下降趋势,50μmol/L ALA组降低了卵母细胞第一极体排出率(P<0.05);孤雌胚胎发育能力检测显示,25μmol/L ALA组卵母细胞的卵裂率和囊胚率高于对照组(P<0.05);与对照组相比,25μmol/L ALA孵育组卵母细胞内ROS水平降低(P<0.05),细胞内GSH含量提高(P<0.05),促凋亡基因Bax表达降低(P<0.05)以及抗氧化基因SOD1、CAT表达升高(P<0.05)。由此可见,25μmol/L ALA可以显著增加第一极体排出率,降低卵母细胞ROS含量、提高卵母细胞GSH含量,改善猪卵母细胞成熟质量,提高孤雌胚胎的发育能力。 展开更多
关键词 Α-硫辛酸 卵母细胞 体外成熟 活性氧 早期胚胎发育
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GPR50在小鼠卵母细胞体外成熟进程中的表达及亚细胞定位
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作者 王甜 黄显朋 +4 位作者 朱洪阳 吉文汇 付伟 殷实 兰道亮 《西南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第3期245-254,共10页
旨在探究GPR50在小鼠卵母细胞体外成熟进程中的表达规律及亚细胞定位.通过卵母细胞体外培养技术、qPCR技术及免疫荧光技术测定GPR50在小鼠不同时期卵母细胞的转录水平及亚细胞定位.结果表明,所建立的qPCR方法敏感性高、特异性强、重复... 旨在探究GPR50在小鼠卵母细胞体外成熟进程中的表达规律及亚细胞定位.通过卵母细胞体外培养技术、qPCR技术及免疫荧光技术测定GPR50在小鼠不同时期卵母细胞的转录水平及亚细胞定位.结果表明,所建立的qPCR方法敏感性高、特异性强、重复性好且检测效率高,可用于测定GPR50在小鼠卵母细胞中转录水平的表达;GPR50在不同阶段小鼠卵母细胞中均有表达,生发泡破裂(GVBD)后,GPR50的表达量显著高于GV期(P<0.05);随着卵母细胞的发育,其表达量不断增高,到MII期达到顶峰,极显著高于GV、GVBD及MI期(P<0.01).随着卵母细胞的发育,GPR50大量表达于细胞质和细胞膜,但在成熟卵母细胞中,GPR50主要集中分布于细胞膜.以上结果说明,GPR50在小鼠卵母细胞体外成熟中发挥重要的作用,为解析GPR50在哺乳动物卵母细胞体外成熟进程的分子机制奠定了基础. 展开更多
关键词 GPR50 小鼠卵母细胞 体外成熟 转录水平表达 亚细胞定位
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羔羊不同超排方法的筛选及其对卵母细胞体外成熟的影响
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作者 刘昱成 王晶晶 +6 位作者 张振良 倪建宏 刘长彬 傅祥伟 石国庆 万鹏程 崔炳灿 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第12期8-12,共5页
旨在比较不同超排方案对羔羊超数效果及其对卵母细胞体外成熟的效果,筛选最佳幼畜超排方案。试验以1~2月龄绵羔羊为研究对象,分为3组,其中2组(方案I和方案II注射激素)为试验超排组,1组为对照组(未注射激素),探究不同超排方法对绵羔羊卵... 旨在比较不同超排方案对羔羊超数效果及其对卵母细胞体外成熟的效果,筛选最佳幼畜超排方案。试验以1~2月龄绵羔羊为研究对象,分为3组,其中2组(方案I和方案II注射激素)为试验超排组,1组为对照组(未注射激素),探究不同超排方法对绵羔羊卵巢的反应性、卵巢的大小及卵母细胞体外成熟的影响。结果表明,6次×12 h间隔、注射总剂量180 U促卵泡素(FSH)的超排方案Ⅱ效果优于4次×12 h间隔、注射总剂量200 U FSH的超排方案Ⅰ,超排方案Ⅱ获得发育卵泡数(348.00±8.25)枚/只优于超排方案Ⅰ发育卵泡数(265.00±6.32)枚/只;体外培养卵母细胞24 h后,超排方案Ⅱ卵母细胞成熟率45.4%优于超排方案Ⅰ卵母细胞成熟率32.2%。研究筛选出6次×12 h间隔、注射总剂量180 U FSH,第1次注射FSH时同时肌内注射330 U PMSG的超排方案为最佳幼畜超排方案。本试验结果为绵羔羊扩展体外受精所需卵子的来源,缩短世代间隔,产生大量优秀后代,加速育种进程等方向的研究奠定一定的理论基础。 展开更多
关键词 绵羔羊 体外成熟 卵母细胞 超数排卵
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褪黑素对猪卵巢在不同时间和温度条件下保存后卵母细胞体外成熟的影响
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作者 陈书萍 朱天奇 +5 位作者 张仁祖 宋玉坤 王立凯 衣红芝 阿布力孜•吾斯曼 刘国世 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期185-189,共5页
本研究旨在探讨不同温度和时间保存猪卵巢后对猪卵母细胞体外成熟的影响,通过培养液中添加不同浓度褪黑素,探索褪黑素对卵母细胞体成熟的最佳浓度,为远距离运输卵巢最适温度和时间条件的研究提供理论依据,进而改善胚胎体外生产效率。本... 本研究旨在探讨不同温度和时间保存猪卵巢后对猪卵母细胞体外成熟的影响,通过培养液中添加不同浓度褪黑素,探索褪黑素对卵母细胞体成熟的最佳浓度,为远距离运输卵巢最适温度和时间条件的研究提供理论依据,进而改善胚胎体外生产效率。本实验将卵巢分别在4、17、25、37℃保温杯内保存0、4、8、10 h,筛出最适温度与时间后,在卵母细胞体外培养液中分别添加10-5、10-7、10-9mol/L浓度褪黑素,体外成熟44 h,采用孤雌激活的方式发育为胚胎,统计极体排出率、卵裂率、囊胚率。结果显示:卵巢37℃保存10 h,4℃保存4 h后卵母细胞均未达到MII期;与37℃和4℃相比,17℃、25℃保存卵巢后卵母细胞成熟质量得到大幅度提升(P<0.01);卵巢在25℃随着保存时间的延长,卵母细胞成熟率无显著差异,囊胚率高于17℃(P<0.01),且25℃保存卵巢8 h与4 h囊胚率无显著差异;25℃保存8 h后培养液中添加褪黑素,发现卵母细胞发育能力不受损伤,添加10-7mol/L褪黑素对卵母细胞体外发育有促进作用。结果证明,25℃保存8 h是保存猪卵巢较适合的条件,培养液中添加10-7mol/L褪黑素可以极显著提高卵母细胞囊胚形成率、猪卵母细胞质量和胚胎发育潜力。 展开更多
关键词 猪卵巢 保存温度 保存时间 褪黑素 卵母细胞 体外成熟
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