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基于多酶恒温快速扩增-侧向流层析联用技术的肉制品真实性研究
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作者 尚柯 张彪 +5 位作者 张敏 杨华雨 叶梅 段庆梓 王巍 宫亚君 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1-12,共12页
目的:基于多酶恒温快速扩增(multienzyme isothermal rapid amplification,MIRA)与封闭式侧向流层析(lateral flow dipstick,LFD)联用技术,建立肉制品真实性快速检测方法,解决实验室方法不适于基层与现场快检需求的问题。方法:通过GenB... 目的:基于多酶恒温快速扩增(multienzyme isothermal rapid amplification,MIRA)与封闭式侧向流层析(lateral flow dipstick,LFD)联用技术,建立肉制品真实性快速检测方法,解决实验室方法不适于基层与现场快检需求的问题。方法:通过GenBank筛选猪、牛、羊、鸡、鸭线粒体基因的特异序列,使用DNAStar Megalign软件比对种内保守、种间特异的靶片段,依据MIRA引物探针设计原则设计靶基因引物探针组,通过阳性对照、阴性对照、空白对照等方式系统筛选引物探针,确定猪、牛、羊、鸡、鸭的专属性引物探针,并采用反应体系、反应温度、反应时间筛选,优化完善特异性检测方法。对方法进行系统的方法学考察,包括DNA提取、灵敏度、检出限、假阳性与假阴性考察等,验证方法的有效性。结果:使用建立的方法与实时荧光聚合酶链式反应检测进行比对分析,方法的平均假阳性率为3.49%、假阴性率为3.54%,符合现场快检方法的要求。结论:本研究建立了牛、羊、猪、鸡、鸭5种常见肉类的MIRA-LFD技术,并证实了其有效性和可行性,实现了肉制品真实性的现场快检。 展开更多
关键词 食品真实性 动物源性成分 多酶恒温快速扩增技术 侧向流层析技术 现场快检
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MIRA-LFD鉴别肉制品中鸭源性成分的 方法研究 被引量：1
2
作者 尚柯 张敏 +5 位作者 张彪 王巍 段庆梓 张玉 雍溶 叶梅 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2021年第19期179-186,共8页
传统的肉制品动物源性成分检测对检测人员操作水平及试验条件等方面要求较高,不适于基层检测需要。多酶恒温快速扩增技术(multienzyme isothermal rapid amplification,MIRA)是一种新型的核酸扩增方式,整个反应在37℃条件下即可完成,相... 传统的肉制品动物源性成分检测对检测人员操作水平及试验条件等方面要求较高,不适于基层检测需要。多酶恒温快速扩增技术(multienzyme isothermal rapid amplification,MIRA)是一种新型的核酸扩增方式,整个反应在37℃条件下即可完成,相比昂贵的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)仪器,检测成本以及试验条件要求明显降低。该研究通过结合多酶恒温快速扩增技术与侧向流层析技术(lateral flow dipstick,LFD),建立一种鸭源性成分多酶恒温侧流式扩增技术(MIRA-LFD)的快速检测方法,并对其特异性、检出性以及应用的可行性进行评价。 展开更多
关键词 物种鉴定 鸭源性成分 多酶恒温快速扩增技术 侧向流层析技术 方法考察
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