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题名用脉冲场电泳法分离环状DNA分子的研究
被引量:1
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作者
李志祥
谢桂岚
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机构
首都医科大学附属北京友谊医院
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出处
《临床和实验医学杂志》
2003年第3期138-141,共4页
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文摘
目的 探讨用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分离大分子环状DNA。方法 使用脉冲场凝胶电泳仪器,设定不同电泳条件,以已知分子大小的环状DNA作为标准参照物,对不同环状DNA分子进行分离。结果 使用倒转电场凝胶电泳(FIGE)方式,用0.6%或0.5%琼脂糖凝胶,正向电压梯度9V/cm,脉冲时间2.0s,反向电压梯度9V/cm,脉冲时间1.0s,缓冲溶液温度14℃,电泳时间8h,适宜分离2~33kb环状DNA分子。结论 脉冲场凝胶电泳是分离大分子DNA的必须技术。然而,电泳时的条件设定,对是否能有效分离影响很大。为了有效分离大分子DNA,需要摸索实验,建立最适设定条件。
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关键词
分离
环状DNA分子
脉冲场凝胶电泳
倒转电场凝胶电泳
脉冲时间
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Keywords
Pulsed-field
Pulse time
FIGE (Field Inversion Gel Electrophoresis)
CHEF (Contour-clamped Homoge-neous Electric Field Gel Electrophoresis)
Closed circular DNA
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分类号
Q503
[生物学—生物化学]
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