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催乳素受体的研究进展 被引量:6
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作者 张芬芬 王长法 +2 位作者 黄金明 仲跻峰 石放雄 《家畜生态学报》 2009年第3期6-9,共4页
介绍催乳素受体的结构、功能,催乳素受体基因的定位、表达及调节,催乳素受体基因的多态性与生产性状和疾病的关系等。提示催乳素受体基因可作为生产性状及疾病的一个候选基因。
关键词 催乳素受体 催乳素受体基因 生产性状 疾病
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催乳素受体基因外显子10多态性及其与济宁青山羊高繁殖力关系的研究 被引量:27
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作者 张跟喜 储明星 +2 位作者 王金玉 方丽 叶素成 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期329-336,共8页
设计5对引物,采用PCR-SSCP技术检测催乳素受体(prolactin receptor,PRLR)基因外显子10及部分3′非翻译区在高繁殖力山羊品种(济宁青山羊)和低繁殖力山羊品种(辽宁绒山羊、波尔山羊和安哥拉山羊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对济... 设计5对引物,采用PCR-SSCP技术检测催乳素受体(prolactin receptor,PRLR)基因外显子10及部分3′非翻译区在高繁殖力山羊品种(济宁青山羊)和低繁殖力山羊品种(辽宁绒山羊、波尔山羊和安哥拉山羊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对济宁青山羊高繁殖力的影响。结果表明:首次拼接出的山羊PRLR基因外显子10及部分3′非翻译区的核苷酸序列长度为1,118bp,与已公布的绵羊、牛、人PRLR基因mRNA相应序列的同源性分别为98.33%、93.92%、74.52%,与已公布的羊驼PRLR基因部分序列的同源性为78.29%。引物P1、P2与P4扩增片段具有多态性,其余2对引物的扩增片段不存在多态性。对于P1扩增片段,在济宁青山羊和辽宁绒山羊中检测到AA型和AB型,在安哥拉山羊中检测到AA型和AC型,在波尔山羊中只检测到AA型;克隆测序表明AB型与AA型相比有两处突变(186G→A和220T→C),分别导致氨基酸由天冬氨酸变为天冬酰胺、亮氨酸变为脯氨酸;AC型与AA型相比有1处突变(140A→G),该突变没有导致氨基酸变化;济宁青山羊AA和AB基因型之间产羔数的最小二乘均值差异不显著(P>0.05)。对于P2扩增片段,在济宁青山羊、辽宁绒山羊和波尔山羊中都检测到DD型和DE型,而在安哥拉山羊中只检测到DD型;克隆测序表明DE型和DD型相比有两处突变(52G→A和122G→A),其中122bp处的突变导致氨基酸由精氨酸变为甘氨酸;济宁青山羊DD和DE基因型之间产羔数的最小二乘均值差异不显著(P>0.05)。对于P4扩增片段,在济宁青山羊中检测到FF型和FG型,在辽宁绒山羊中检测到FF型和GG型,在波尔山羊中只检测到FF型,在安哥拉山羊中检测到FF型、FG型和GG型;克隆测序表明GG型和FF型相比在扩增片段的143bp处发生1处碱基突变(A→G),并导致氨基酸由蛋氨酸变为缬氨酸;FG基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比FF基因型的多0.76只(P<0.05)。研究结果初步表明:PRLR基因可能是控制济宁青山羊多胎性能的一个主效基因或是与之存在紧密遗传连锁的一个标记。 展开更多
关键词 山羊 高繁殖力 催乳素受体基因 PCR-SSCP
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绵羊催乳素受体基因PCR-SSCP分析 被引量:16
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作者 牟玉莲 储明星 +2 位作者 孙少华 方丽 叶素成 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期956-960,共5页
采用PCR-SSCP技术分析了催乳素受体基因(PRLR)在小尾寒羊、萨福克羊、多赛特羊、多赛特公羊×小尾寒羊母羊F1代杂种羊4个绵羊群体中的多态性。结果表明:PRLR基因在3对引物扩增片段中均存在PCR-SS-CP多态性。对于引物1,4个绵羊群体... 采用PCR-SSCP技术分析了催乳素受体基因(PRLR)在小尾寒羊、萨福克羊、多赛特羊、多赛特公羊×小尾寒羊母羊F1代杂种羊4个绵羊群体中的多态性。结果表明:PRLR基因在3对引物扩增片段中均存在PCR-SS-CP多态性。对于引物1,4个绵羊群体均检测到AA基因型,AB基因型只出现在小尾寒羊、多赛特羊和萨福克羊中,仅在多赛特羊中检测到BB基因型。对于引物2,4个绵羊群体均检测到AA和AB基因型,只有萨福克羊没有BB型。对于引物3,4个绵羊群体均检测到AA、AB和BB基因型。在4个绵羊群体中,A等位基因频率均明显高于B等位基因频率。 展开更多
关键词 绵羊 催乳素受体基因 PCR-SSCP
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母猪哺乳初期的母性行为与催乳素受体基因多态性关系的初探 被引量:22
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作者 崔世泉 李剑虹 +1 位作者 崔卫国 包军 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期47-51,共5页
应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对民猪和长白猪的催乳素受体(Prolactinreceptor,简称PRLR)基因进行了单核苷酸多态性分析,以研究PRLR基因影响母猪母性行为性状的可能性。结果发现在PRLR基因的cDNA第1620位点处... 应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对民猪和长白猪的催乳素受体(Prolactinreceptor,简称PRLR)基因进行了单核苷酸多态性分析,以研究PRLR基因影响母猪母性行为性状的可能性。结果发现在PRLR基因的cDNA第1620位点处存在NaeⅠ多态性。测序表明,该点存在一个T→C的单碱基突变,属沉默突变。对3种基因型与部分行为性状进行最小二乘分析,结果表明,AB型母猪与其他两种基因型母猪相比,表现出较低的侧卧转为其他姿势的频率以及由母猪结束哺乳的频率(P<0.05),其他行为性状在基因型间不显著。因此,推测等位基因A可能是影响母猪母性行为的不良基因。 展开更多
关键词 催乳素受体基因 单核苷酸多态性 母性行为 PCR-RFLP
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湖羊催乳素受体基因外显子10多态性及与其母性行为性状的关联分析 被引量:6
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作者 孙伟 张向楠 +6 位作者 左其生 倪蓉 王兰萍 张有法 陈玲 吴文忠 周洪 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期673-680,共8页
旨在研究催乳素受体(PRLR)基因在湖羊群体中的遗传多样性,以探讨其影响湖羊母性行为性状的可能性,为评价绵羊母性提供遗传学分析方法。以81只分娩母羊为研究对象(其中63只进行母性行为观察),采用PCR-SSCP技术检测湖羊PRLR基因外显子10... 旨在研究催乳素受体(PRLR)基因在湖羊群体中的遗传多样性,以探讨其影响湖羊母性行为性状的可能性,为评价绵羊母性提供遗传学分析方法。以81只分娩母羊为研究对象(其中63只进行母性行为观察),采用PCR-SSCP技术检测湖羊PRLR基因外显子10基因序列的单链核苷酸多态性。运用正态分布检验、聚类分析及非参数检验法,研究湖羊母性行为分布规律和不同基因型的湖羊母性行为的差异性。结果显示,仅P3引物扩增片段存在多态性,所对应的基因型分别定义为AA、AB和BB,各基因型在群体中符合Hardy-Weinberg平衡;选取的4种母性行为:舔舐、哺乳、踩踏和拒绝哺乳的统计数据均不符合正态分布;各基因型与4种母性行为间的多个独立样本的非参数检验结果表明:舔舐、哺乳和踩踏3个母性行为在不同基因型个体间存在极显著差异(P<0.01),拒绝哺乳行为在不同基因型间则不存在显著性差异(P>0.05)。结果提示,PRLR基因外显子10部分序列存在多态性,且其与湖羊母性行为部分性状间存在一定的关联性。初步推断PRLR基因可作为湖羊母性行为的候选基因。 展开更多
关键词 湖羊 催乳素受体基因 多态性 母性行为
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猪催乳素受体(PRLR)基因AluⅠ多态性与产仔数关系的研究 被引量:27
6
作者 曹果清 李步高 +1 位作者 刘建华 杨文平 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第3期253-255,共3页
研究采用PCR-RFLP方法检测了猪PRLR基因exon10多态性,结果显示,除马身猪中只有A基因存在外,其他品种中,均有A和B两个等位基因存在。利用最小二乘分析研究了该多态位点对猪初产和经产的总产仔数和活产仔数的影响,结果表明不同基因型母猪... 研究采用PCR-RFLP方法检测了猪PRLR基因exon10多态性,结果显示,除马身猪中只有A基因存在外,其他品种中,均有A和B两个等位基因存在。利用最小二乘分析研究了该多态位点对猪初产和经产的总产仔数和活产仔数的影响,结果表明不同基因型母猪的总产仔数和活产仔数的差异均未达到显著水平,但呈现出AA>AB>BB的趋势。对于头胎总产仔数、经产总产仔数和活产仔数,A基因的加性效应分别为0 29头/胎、0 38头/胎和0 39头/胎,显性效应分别为0 21头/胎、0 19头/胎和0 19头/胎,对于头胎活产仔数来说,A基因的加性效应和显性效应分别为-0 4头/胎和0 2头/胎。 展开更多
关键词 催乳素受体 PRLR 受体基因 AluⅠ多态性 产仔数
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牛催乳素受体基因遗传多态性及其与部分精液品质性状的关联分析 被引量:9
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作者 宋永利 刘畅 +3 位作者 秦丽红 张金玉 赵玉民 赵志辉 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期195-199,208,共6页
采用PCR-SSCP方法对种公牛群体的催乳素受体基因(PRLR)所有外显子及5′UTR多态性进行检测。结果表明:外显子1及外显子8分别检测到了2种等位基因A、B和C、D,其中A、C为群体中优势基因,其他外显子及5′UTR没有遗传多态性;相关性分析表明,... 采用PCR-SSCP方法对种公牛群体的催乳素受体基因(PRLR)所有外显子及5′UTR多态性进行检测。结果表明:外显子1及外显子8分别检测到了2种等位基因A、B和C、D,其中A、C为群体中优势基因,其他外显子及5′UTR没有遗传多态性;相关性分析表明,第1外显子位点AA型鲜精顶体完整率显著高于AB型(P=0.012),第8外显子位点CD型冻精活力显著高于CC型和DD型(P=0.004)。初步推断PRLR为影响种公牛繁殖性状的一个候选基因。 展开更多
关键词 种公牛 催乳素受体 生产性状
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浙东白鹅催乳素受体基因的克隆及其表达特点的研究 被引量:8
8
作者 褚晓红 胡锦平 +3 位作者 卢立志 王亚琴 陈维虎 徐宁迎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期823-826,共4页
本研究克隆了浙东白鹅催乳素受体基因(PRLR)的部分序列,并应用荧光定量PCR技术研究了浙东白鹅在产蛋期、就巢期和恢复期时PRLR基因在下丘脑、垂体和卵巢中的表达特点,结果表明,浙东白鹅PRLR基因的表达量在产蛋期、就巢期和恢复期差异显... 本研究克隆了浙东白鹅催乳素受体基因(PRLR)的部分序列,并应用荧光定量PCR技术研究了浙东白鹅在产蛋期、就巢期和恢复期时PRLR基因在下丘脑、垂体和卵巢中的表达特点,结果表明,浙东白鹅PRLR基因的表达量在产蛋期、就巢期和恢复期差异显著(P<0.05),就巢期表达量最高,产蛋期次之,恢复期表达量最低。对不同组织PRLR的表达量分析,垂体最多,其次是下丘脑,卵巢中的表达量最低,垂体与卵巢中的表达量、卵巢与下丘脑的表达量均有极显著的差异(P<0.01),垂体与下丘脑中的表达量差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 催乳素受体基因 浙东白鹅 繁殖时期 荧光定量PCR
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催乳素受体研究 被引量:23
9
作者 谭敦勇 彭湘萍 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期17-23,共7页
催乳素(PRL)由脑垂体及某些垂体外组织器官如乳腺、泪腺、子宫、胸腺和脾脏等所分泌。由于其与生长激素(GH)及胎盘泌乳素(PL)等的结构及功能近似,因而多数意见认为PRL、GH及PL的基因由同一个祖基因复制而来。PRL以内分泌、旁分泌及自分... 催乳素(PRL)由脑垂体及某些垂体外组织器官如乳腺、泪腺、子宫、胸腺和脾脏等所分泌。由于其与生长激素(GH)及胎盘泌乳素(PL)等的结构及功能近似,因而多数意见认为PRL、GH及PL的基因由同一个祖基因复制而来。PRL以内分泌、旁分泌及自分泌的方式与靶细胞膜表面的催乳素受体(PRL receptor,PRLR)结合而发挥非常广泛的生物学作用。催乳素受体分为长受体(LF)、中受体(IF)及短受体(SF1a及SF1b)。不同催乳素受体由同一基因编码,经转录后选择性剪接而生成。由于膜内区不同,不同催乳素受体所介导的生物学作用不同。大量证据表明,催乳素受体的异常,如长、短比例失调或受体的氨基酸序列变异与某些肿瘤尤其是乳腺癌的发病及预后等有密切的关联。设计催乳素受体拮抗剂以阻断催乳素的某些生物学作用对治疗与催乳素有关的肿瘤如乳腺癌等具有重要的临床应用前景。 展开更多
关键词 催乳素 催乳素受体 乳腺癌 拮抗剂
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鹅催乳素受体基因克隆与表达 被引量:4
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作者 邢光东 刘铁铮 +2 位作者 刘庆华 傅泽红 王根林 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期97-101,共5页
应用RACE-PCR技术,克隆了全长3159 bp鹅催乳素受体基因(gPRLR)cDNA。序列分析表明,cDNA含443 bp5-′UTR、2496 bp编码区(含终止密码子TAA)和220 bp 3-′UTR。比对鸡催乳素受体基因并将前330 bp看作第1外显子,则gPRLR基因可划分为14个外... 应用RACE-PCR技术,克隆了全长3159 bp鹅催乳素受体基因(gPRLR)cDNA。序列分析表明,cDNA含443 bp5-′UTR、2496 bp编码区(含终止密码子TAA)和220 bp 3-′UTR。比对鸡催乳素受体基因并将前330 bp看作第1外显子,则gPRLR基因可划分为14个外显子。推导的蛋白序列含831个氨基酸,与鸡、鸽及火鸡PRLR的同源性分别为87.7%、85.2%和84.8%,其N末端含24个氨基酸的信号肽,成熟蛋白含807个氨基酸。gPRLR mRNA在成年鹅睾丸、输精管、卵巢、输卵管、肾、大肠、小肠、脾组织中均有表达,其中以肾、睾丸、大肠及小肠中表达最为丰富。 展开更多
关键词 催乳素受体基因 RACE
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猪催乳素受体基因对繁殖性能的影响 被引量:5
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作者 曹果清 李步高 +1 位作者 刘建华 周忠孝 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2006年第13期45-46,60,共3页
催乳素受体(PRLR)是细胞分裂素受体超家族的一个成员,与催乳素一起参与动物的繁殖过程。本文主要介绍催乳素受体基因对猪繁殖性能的影响。
关键词 畜牧学 催乳素受体基因 综述 繁殖性能
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大白猪、长白猪和杜洛克猪催乳素受体基因多态性及其与繁殖性能的关系 被引量:5
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作者 苏先敏 赵乔辉 +4 位作者 朱世平 霍永久 梁永晔 包文斌 吴圣龙 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第8期146-150,共5页
本试验通过PCR-RFLP技术对大白猪、长白猪和杜洛克猪的催乳素受体(prolactin receptor,PRLR)基因第10外显子AluⅠ酶切位点进行多态性分析,并对各基因型母猪的第1至第3胎次产仔数、产活仔数、断奶仔猪数、初生窝重、21日龄窝重及断奶成... 本试验通过PCR-RFLP技术对大白猪、长白猪和杜洛克猪的催乳素受体(prolactin receptor,PRLR)基因第10外显子AluⅠ酶切位点进行多态性分析,并对各基因型母猪的第1至第3胎次产仔数、产活仔数、断奶仔猪数、初生窝重、21日龄窝重及断奶成活率进行测定,进而分析PRLR基因多态性与繁殖性能的关系。结果表明,PRLR基因在3个品种中均存在多态位点,且AA基因型都是其优势基因型。关联分析结果表明,大白猪AA基因型个体第1、2和3胎各繁殖性状均呈现出高于AB和BB基因型的趋势。在繁殖性能已经稳定的第3胎次AA基因型个体产仔数、产活仔数、断奶仔猪数、初生窝重及断奶成活率比BB基因型个体平均分别高出0.31头、0.63头、0.02头、0.65kg和0.43%,但差异均不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 催乳素受体基因 繁殖性能 大白猪 长白猪 杜洛克猪
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水牛催乳素受体基因克隆及序列分析 被引量:4
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作者 朱佳杰 何荆洲 +6 位作者 王新平 蒋钦杨 冯雪萍 郭亚芬 兰干球 韦英明 蒋和生 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2008年第4期320-324,共5页
扩增出广西本地沼泽型水牛(Bubalus bubalis)催乳素受体(PRLR)基因部分保守序列,用于下一步实验检测体外培养的水牛乳腺上皮细胞中催乳素受体基因的表达水平。根据已报道的奶牛催乳素受体基因cDNA序列的保守区,设计一对特异性引物。提... 扩增出广西本地沼泽型水牛(Bubalus bubalis)催乳素受体(PRLR)基因部分保守序列,用于下一步实验检测体外培养的水牛乳腺上皮细胞中催乳素受体基因的表达水平。根据已报道的奶牛催乳素受体基因cDNA序列的保守区,设计一对特异性引物。提取广西本地水牛的乳腺组织总RNA,并以其为模板,以下游特异性引物为反转录引物,在反转录酶(AMV)作用下合成cDNA;用Ex-Taq酶进行PCR扩增,得到催乳素受体基因的保守序列,长度为571 bp。该扩增产物经纯化后,连接到pMD18-T载体上扩增。经序列分析结果表明:序列较保守,与GenBank上发表的奶牛催乳素受体基因的同源性达到98.9%,与绵羊的同源性达到96.5%,与猪、小鼠、人的同源性分别为86.5%、78.9%、77.1%。催乳素受体基因与奶牛相比,共有6个碱基发生了突变,其中1个为同义突变,其他5个均为错义突变,形成4个氨基酸发生变异。 展开更多
关键词 水牛 催乳素 催乳素受体
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催乳素受体基因与羊驼繁殖性能关系的初探 被引量:5
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作者 张巧灵 姜俊兵 +3 位作者 贺俊平 赫晓燕 耿建军 董常生 《激光生物学报》 CAS CSCD 2007年第1期18-21,共4页
通过氯仿/异戊醇法制备羊驼血液基因组DNA,采用PCR方法首次扩增出羊驼催乳素受体基因(prolactin receptor gene,PRLR)exon8-exon9序列(GenBank登录号为DQ198164),该片段长度为622bp。通过NCBI blast(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/... 通过氯仿/异戊醇法制备羊驼血液基因组DNA,采用PCR方法首次扩增出羊驼催乳素受体基因(prolactin receptor gene,PRLR)exon8-exon9序列(GenBank登录号为DQ198164),该片段长度为622bp。通过NCBI blast(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)比较,结果表明:该序列包括exon8的82bp、intron8全序列472bp和exon9的68bp。同源性比较发现,羊驼PRLR基因exon8和exon9核苷酸序列与其它哺乳动物的相应区域的同源性特高,均≥92%;同时还发现羊驼exon8引物后第19个碱基为G,而其它哺乳动物(猪除外)均为A,猪则是在羊驼exon8引物后的第34个碱基处由G变为A,通过推导氨基酸序列分析发现,这种单碱基的突变使得羊驼与其它哺乳动物相比,该处的氨基酸由亮氨酸取代了异亮氨酸;在羊驼exon9引物前第22个碱基处也发生了A-G碱基替换现象,但这个碱基的突变发生在密码子的第3个碱基上,编码的氨基酸均为脯氨酸。在这些动物中只有羊驼为单胎动物,羊驼exon8核苷酸序列中A-G的碱基替换并引起编码氨基酸序列发生改变是否与羊驼繁殖性能有关还有待进一步研究。 展开更多
关键词 羊驼 催乳素受体基因 繁殖性能 单碱基突变
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鹅催乳素受体基因cDNA5′端序列克隆 被引量:6
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作者 傅泽红 邢光东 +1 位作者 刘铁铮 孔鸽萍 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2007年第3期213-217,共5页
为寻找鹅就巢性相关基因,从洪泽湖性成熟公鹅睾丸组织分离并合成鹅cDNA第一链;利用RACE克隆了鹅催乳素受体基因(gPRLR)5′端序列。所克隆的499 bp 5′端序列可划分为348 bp的5′-UTR、151 bp的以ATG作为起始密码子的阅读开放框。与鸡催... 为寻找鹅就巢性相关基因,从洪泽湖性成熟公鹅睾丸组织分离并合成鹅cDNA第一链;利用RACE克隆了鹅催乳素受体基因(gPRLR)5′端序列。所克隆的499 bp 5′端序列可划分为348 bp的5′-UTR、151 bp的以ATG作为起始密码子的阅读开放框。与鸡催乳素受体基因(cPRLR)cDNA序列作比对,此499 bp序列可划分为238 bp的第1外显子、69 bp的第2外显子、114 bp的第3外显子及81 bp的部分第4外显子,起始密码子位于第3外显子45 bp处。阅读开放框核苷酸序列与cPRLR cDNA同源部位的阅读开放框同源性达到88%,推导的氨基酸序列同源性达到84%。 展开更多
关键词 催乳素受体 5’端序列 克隆
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皖西白鹅催乳素受体基因表达特点的研究 被引量:5
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作者 陈兴勇 朱盼 +1 位作者 姜润深 耿照玉 《中国家禽》 北大核心 2010年第21期17-19,共3页
采用荧光定量PCR法,研究了皖西白鹅催乳素受体基因(prolactin receptor,PRLR)在产蛋不同时期及生殖轴不同组织mRNA的表达特点。结果表明,在垂体、下丘脑和卵巢组织中,皖西白鹅产蛋前期PRLR表达水平较低,至产蛋期降至最低,抱窝期上升至... 采用荧光定量PCR法,研究了皖西白鹅催乳素受体基因(prolactin receptor,PRLR)在产蛋不同时期及生殖轴不同组织mRNA的表达特点。结果表明,在垂体、下丘脑和卵巢组织中,皖西白鹅产蛋前期PRLR表达水平较低,至产蛋期降至最低,抱窝期上升至极高水平,休产期再次下降至较低水平,且各组织均表现出相似的规律,但卵巢中的表达量相对较高;就巢期间,在就巢前、中、后期,PRLR mRNA表达量在各组织呈现不同的变化规律,垂体组织中表达量呈"V"形变化,在中期前下丘脑中PRLR mRNA维持稳定,到后期有所下降,卵巢中表达量呈梯形下降。PRLR mRNA表达量在不同周期及不同组织中的变化规律反应了PRLR对皖西白鹅就巢的影响,PRLR对鹅就巢的调控可能在转录时期已经开始。 展开更多
关键词 皖西白鹅 催乳素受体基因 表达 生殖轴
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鸡催乳素受体胞外域的分子克隆及原核表达 被引量:2
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作者 刘颖 黎敏义 +2 位作者 刘志 李孝伟 施振旦 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期73-77,共5页
根据家鸡催乳素受体基因胞外域序列(GenBank号:D13154)设计并合成1对覆盖编码区58~1249位核苷酸的引物,以家鸡垂体总RNA为模板,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得了特异性片断,将该片断克隆入pMD18-T载体并转化感受态细菌... 根据家鸡催乳素受体基因胞外域序列(GenBank号:D13154)设计并合成1对覆盖编码区58~1249位核苷酸的引物,以家鸡垂体总RNA为模板,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得了特异性片断,将该片断克隆入pMD18-T载体并转化感受态细菌Ecoli DH5α永久保存.通过设计第2对引物扩增PRLR胞外域cDNA片段,该片段经酶切后克隆到表达载体pRSETA的EcoRⅠ和HindⅢ两酶切位点之间,构建重组质粒pR-PRLR.该质粒在转化感受态细菌E.coli B121(DF.3)后,在IPTG诱导下促使重组菌表达了相对分子质量为53640左右的重组融合蛋白,表达量在0.1mmol/L IPTG诱导5h时达到最高,约占总菌体蛋白的17.6%左右.表达产物可经体积分数为50%的Ni-NTA凝胶纯化,说明重组蛋白中具有正确的His-tag标签及之后的鸡催乳素受体编码区胞外域序列. 展开更多
关键词 催乳素受体基因 胞外域 克隆 表达 纯化
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猪催乳素受体基因第8内含子多态性及其对产仔性能的影响 被引量:5
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作者 石建中 李步高 曹果清 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第7期179-183,共5页
采用PCR-SSCP技术检测了大白猪、长白猪、杜洛克猪、马身猪、山西黑猪和山西白猪等6个品种364头个体催乳素受体基因(prolactin,PRLR)第8内含子的多态性,并分析了多态位点对猪头胎产仔性能的影响。结果表明,猪PRLR基因第8内含子存在多态... 采用PCR-SSCP技术检测了大白猪、长白猪、杜洛克猪、马身猪、山西黑猪和山西白猪等6个品种364头个体催乳素受体基因(prolactin,PRLR)第8内含子的多态性,并分析了多态位点对猪头胎产仔性能的影响。结果表明,猪PRLR基因第8内含子存在多态性,共检测到A、B、C 3个等位基因和AA、AB、AC、BB、BC和CC 6种基因型。在杜洛克猪、长白猪、山西黑猪和山西白猪群体中,A等位基因的频率最高,分别为0.8276、0.5439、0.5345和0.7669;而在大白猪和马身猪群体中,B等位基因的频率最高,分别为0.6894和0.7000;仅在大白猪、山西黑猪和山西白猪中检测到C等位基因,且频率较低,在0.0379~0.1385之间。PRLR基因型对母猪头胎产仔数有显著影响(P<0.05),对产活仔数的影响未达显著水平。AC基因型母猪的头胎产仔数和产活仔数显著高于BC基因型个体,而与AA、AB和BB基因型个体差异不显著。含有A等位基因的母猪的产仔性能优于不带有A等位基因的个体,表明A等位基因是有利于母猪产仔性能提高的等位基因,可应用于标记辅助选择来提高母猪的繁殖性能。 展开更多
关键词 产仔数 催乳素受体基因 多态性 PCR-SSCP
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牦牛催乳素受体基因部分片段的克隆与序列分析 被引量:3
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作者 陈达文 字向东 +2 位作者 徐华伟 黄磊 穆晓琨 《西南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2010年第1期80-83,共4页
扩增出牦牛催乳素受体(PRLR)基因部分保守序列,为研究牦牛乳腺组织中PRLR基因表达水平奠定基础.提取牦牛乳腺组织总RNA,根据NCBI的奶牛PRLR基因cDNA序列的保守区设计特异性引物,采用RT-PCR技术扩增牦牛PRLR基因,结果获得577 bp的片段,... 扩增出牦牛催乳素受体(PRLR)基因部分保守序列,为研究牦牛乳腺组织中PRLR基因表达水平奠定基础.提取牦牛乳腺组织总RNA,根据NCBI的奶牛PRLR基因cDNA序列的保守区设计特异性引物,采用RT-PCR技术扩增牦牛PRLR基因,结果获得577 bp的片段,将该片段连接于pMD18-Simple质粒中,转化大肠杆菌,菌液PCR鉴定阳性克隆子,测序并分析氨基酸序列.分析序列与氨基酸与其他物种同源性,结果表明该序列与水牛、奶牛、绵羊、人、小鼠的PRLR基因mRNA的对应序列的同源性分别为97.40%、99.13%、93.41%、71.07%、60.20%,编码的氨基酸同源性分别为97.40%、100%、95.83%、82.38%、72.22%. 展开更多
关键词 牦牛 催乳素受体 克隆
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鹅催乳素受体多克隆抗体制备及组织表达分析 被引量:2
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作者 邢光东 杨廷桂 +3 位作者 段修军 宦海琳 闫俊书 王根林 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期105-108,共4页
为深入研究鹅催乳素受体(PRLR)的功能,构建了含鹅PRLR胞外域编码序列exPRLR的原核表达质粒exPRLR-pET-28a(+),通过转化E.coli Roster建立了稳定的原核表达系统,在IPTG诱导下获得了PRLR胞外域的重组exPRLR。以重组exPRLR为抗原免疫家兔,... 为深入研究鹅催乳素受体(PRLR)的功能,构建了含鹅PRLR胞外域编码序列exPRLR的原核表达质粒exPRLR-pET-28a(+),通过转化E.coli Roster建立了稳定的原核表达系统,在IPTG诱导下获得了PRLR胞外域的重组exPRLR。以重组exPRLR为抗原免疫家兔,获得了兔抗鹅exPRLR的抗血清。Western blot分析证明该抗血清可特异识别由原核生物表达的重组exPRLR。进一步分析成年母鹅的组织蛋白,发现成年鹅中可能至少存在3种相对分子质量不同的PRLR蛋白异形体。 展开更多
关键词 催乳素受体 胞外域 原核表达 多克隆抗体 组织表达
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