猪脑心肌炎病毒结构蛋白VP1基因的克隆与原核表达 被引量：5

1

作者 盖新娜 杨汉春 +2 位作者 郭鑫 陈艳红 查振林 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第11期9-11,共3页

关键词 脑心肌炎病毒 克隆与原核表达 病毒结构蛋白 VP1基因 仔猪 急性死亡 virus 病毒性疾病

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传染性法氏囊病病毒结构蛋白VP3基因的克隆与原核表达 被引量：4

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作者 彭志伟 王笑梅 +4 位作者 高宏雷 付朝阳 张厚双 包晓玮 冉多良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期124-127,共4页

利用PCR技术扩增出IBDV的结构蛋白VP3基因,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,获得重组质粒命名为VP3/PA,经PCR、酶切和序列分析鉴定表明,插入的位置、大小和读码框均正确。SDS-PAGE检测表明,经重组质粒VP3/PA转化、诱导的受体菌E.coliDH... 利用PCR技术扩增出IBDV的结构蛋白VP3基因,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,获得重组质粒命名为VP3/PA,经PCR、酶切和序列分析鉴定表明,插入的位置、大小和读码框均正确。SDS-PAGE检测表明,经重组质粒VP3/PA转化、诱导的受体菌E.coliDH5α能表达结构蛋白VP3基因,约33Ku,表达量达到了菌体总蛋白的33.9%,经Westernblot等检测表明,诱导表达的抗原蛋白能与vvIBDV阳性血清发生特异性反应。这为IBDV血清学诊断方法的建立打下了基础。 展开更多

关键词 传染性法氏囊病病毒 结构蛋白VP3基因 克隆与原核表达

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鸡传染性法氏囊病病毒VP3基因的克隆与原核表达 被引量：3

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作者 宋铁彬 白江 +2 位作者 马博 王连江 陈福勇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第11期29-30,共2页

关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 VP3基因 克隆与原核表达 RNA病毒 IBDV A节段 基因组 VP2

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牛肌生成抑制素功能基因的克隆与原核表达

4

作者 倪宏波 宋丽 +3 位作者 崔玉东 邵红 李冬野 王喆 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2007年第9期28-30,共3页

关键词 肌生成抑制素 克隆与原核表达 双肌牛 TGF-Β超家族 功能基因 转化生长因子-Β 基因组DNA 生长分化因子

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鸡毒霉形体HS株TM-1基因的克隆与原核表达

5

作者 郝卫芳 石德时 +4 位作者 张改文 李奎 张进良 田文霞 毕丁仁 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第11期84-86,共3页

关键词 TM-1基因 克隆与原核表达 鸡毒霉形体 HS株 鸡慢性呼吸道病 病原性大肠杆菌 传染性支气管炎 鸡败血霉形体

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犬IL-29基因的克隆与原核表达

6

作者 郑拓 吴长德 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第12期240-242,共3页

干扰素（interferon，IFN）作为细胞因子超家族中的一员，具有抗病毒感染、抑制肿瘤生长、调节机体免疫功能、抗细菌和寄生虫等作用，成为当今分子生物学、免疫学研究中非常活跃的领域之一。

关键词 克隆与原核表达 基因 机体免疫功能 抗病毒感染 分子生物学 细胞因子 肿瘤生长 犬

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牛瑟氏泰勒虫热休克蛋白70的克隆与原核表达重组质粒的构建

7

作者 王轶男 《中国畜牧兽医文摘》 2014年第9期152-152,共1页

为了构建牛瑟氏泰勒虫热休克蛋白70（HSP70）基因片段原核重组表达质粒，本试验根据Gen-Bank上登录的牛瑟氏泰勒虫热休克蛋870基因序列（D12692．1），应用PrimerPremier5．O软件设计合成一对特异性引物，以牛瑟氏泰勒虫DNA为模板，扩... 为了构建牛瑟氏泰勒虫热休克蛋白70（HSP70）基因片段原核重组表达质粒，本试验根据Gen-Bank上登录的牛瑟氏泰勒虫热休克蛋870基因序列（D12692．1），应用PrimerPremier5．O软件设计合成一对特异性引物，以牛瑟氏泰勒虫DNA为模板，扩增片段大小为1692bp，与参考序列的同源性为99％。将该基因与pET-28a（＋）载体进行连接， 展开更多

关键词 热休克蛋白70 克隆与原核表达 瑟氏泰勒虫 重组质粒 牛 重组表达质粒 基因片段 特异性引物

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弓形虫SAGI基因的克隆与原核表达

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作者 秦春圃 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第2期32-32,共1页

华中农业大学农业微生物学国家重点实验室和该校动物医学院的王金苹、赵俊龙、江涛等7位科学工作者利用PCR技术从弓形虫RH株基因组中扩增出SAGI部分基因片段．亚克隆入表达载体pGEXKG，将重组质粒导入大肠杆菌BL21．IPTG诱导表达．SDS-P... 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室和该校动物医学院的王金苹、赵俊龙、江涛等7位科学工作者利用PCR技术从弓形虫RH株基因组中扩增出SAGI部分基因片段．亚克隆入表达载体pGEXKG，将重组质粒导入大肠杆菌BL21．IPTG诱导表达．SDS-PAGE电泳显示表达的重组蛋白的分子量为56ku。免疫印迹分析显示此表达产物能被猪抗弓形虫阳性血清所识别，表明该重组蛋白具有免疫反应结果的活性。为进一步进行弓形虫病的免疫预防和诊断研究奠定了基础。目前诊断试剂盒所包被的抗原纯度或抗原活性不够，故用基因工程技术来成功地表达具有抗原活性的SAGI蛋白，圆满地解决弓形虫SAGI基因序列，为其体外重组SAGI奠定了基础。 展开更多

关键词 弓形虫病 克隆与原核表达 GI基因 SDS-PAGE电泳 国家重点实验室 诊断试剂盒 抗原活性 SA

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微小牛蜱Bin86基因的克隆与原核表达

9

作者 秦春圃 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第4期172-172,共1页

甘肃农业大学动物医学院杨孝林、中国农科院兰州兽医研究所刘志杰、党志胜等11位动物医学研究者根据已发表的Bm86基因系列，设计表达型引物，利用RT-PCR技术，从微小牛蜱饥饿幼蜱的研磨物中扩增Bm86基因，将PCR产物连入pGEM-TEasy载体... 甘肃农业大学动物医学院杨孝林、中国农科院兰州兽医研究所刘志杰、党志胜等11位动物医学研究者根据已发表的Bm86基因系列，设计表达型引物，利用RT-PCR技术，从微小牛蜱饥饿幼蜱的研磨物中扩增Bm86基因，将PCR产物连入pGEM-TEasy载体，构建重组克隆载体pGEM-Teasy-Bm86。 展开更多

关键词 微小牛蜱 克隆与原核表达 基因系 RT-PCR技术 甘肃农业大学 动物医学 克隆载体 中国农科院

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鹦鹉幼雏病毒结构蛋白VP1基因的克隆及原核表达 被引量：1

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作者 寇铮 陈绳亮 +2 位作者 钟靖 李天宪 喻子牛 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期593-596,共4页

采用湖北省云梦县患鹦鹉幼雏病死亡的虎皮鹦鹉体内分离得到的鹦鹉幼雏病毒 (budgerigarfledglingdiseasevirus,BFDV) ,应用PCR方法获得BFDV主要结构蛋白基因 (VP1) ,克隆到 pMD18 T载体 ,构建重组质粒 pMD18T VP1并进行测序 ,结果显示 ... 采用湖北省云梦县患鹦鹉幼雏病死亡的虎皮鹦鹉体内分离得到的鹦鹉幼雏病毒 (budgerigarfledglingdiseasevirus,BFDV) ,应用PCR方法获得BFDV主要结构蛋白基因 (VP1) ,克隆到 pMD18 T载体 ,构建重组质粒 pMD18T VP1并进行测序 ,结果显示 ,结构蛋白基因 (VP1)与BFDV欧美分离株的同源性为 96 %～ 99% ,表明VP1是BFDV保守基因 ;将VP1亚克隆到原核表达载体pET32 (+)b ,构建重组质粒 pET32 (+)b VP1,转化菌株BL2 1(DE3) ,诱导表达 ,经SDS PAGE和Western blot分析 ,克隆在his tag下游的结构蛋白基因获得了高效融合表达 ,表达的融合蛋白分子量约为 5 5kD。为建立快速、灵敏的鹦鹉幼雏病毒血清学检测方法以及研制基因工程疫苗提供了科学依据。 展开更多

关键词 鹦鹉幼雏病病毒(BFDV) 结构蛋白(VP1) 克隆与原核表达

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猪A组轮状病毒VP4全基因在大肠杆菌中的表达与检测 被引量：2

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作者 王春凤 沈明浩 +1 位作者 王会岩 刘尚高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期344-347,共4页

以猪轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT_PCR)技术,扩增了2331bp的VP4全基因,通过T_A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM_T Vector中,成功地构建出克隆质粒pGEM_T_VP4。以BamHI和SalI双酶切pGEM_T_VP4和pGEX_6P_1,并将纯化的VP... 以猪轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT_PCR)技术,扩增了2331bp的VP4全基因,通过T_A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM_T Vector中,成功地构建出克隆质粒pGEM_T_VP4。以BamHI和SalI双酶切pGEM_T_VP4和pGEX_6P_1,并将纯化的VP4基因亚克隆至融合型表达载体pGEX_6P_1中,构建出原核表达质粒pGEX_6P_VP4。将pGEX_6P_VP4转化至感受态E.coliBL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS_PAGE分析,可见约111.47 ku融合蛋白带。Western blot分析发现,该蛋白具有轮状病毒抗原性,从而为进一步研究轮状病毒的亚单位疫苗及DNA疫苗奠定基础。 展开更多

关键词 轮状病毒 VP4基因 克隆与原核表达

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