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转基因克隆牛胎盘中印迹基因PEG10的DNA甲基化水平 被引量:8
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作者 苏建民 许文兵 +3 位作者 李艳艳 王丽君 王勇胜 张涌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期533-538,共6页
低效率的体细胞核移植技术显著制约着该技术在转基因动物生产上的广泛应用。目前认为供体细胞核不能被受体卵母细胞胞质完全的表观重编程是其效率低下的最主要原因,而DNA甲基化是基因表观修饰的主要方式之一。为了探求转基因克隆牛的死... 低效率的体细胞核移植技术显著制约着该技术在转基因动物生产上的广泛应用。目前认为供体细胞核不能被受体卵母细胞胞质完全的表观重编程是其效率低下的最主要原因,而DNA甲基化是基因表观修饰的主要方式之一。为了探求转基因克隆牛的死亡是否与其胎盘中印迹基因的甲基化的重编程程度相关,文章通过亚硫酸氢盐测序法(Bisulfite sequencing PCR,BSP)和亚硫酸氢盐联合限制性内切酶分析法(Combined bisulfite restriction analysis,COBRA),对印迹基因PEG10在围产期死亡且存在发育缺陷的转基因克隆牛的胎盘(死亡组)和存活的转基因克隆牛的胎盘(存活组)与正常对照牛胎盘(对照组)的DNA甲基化水平进行了详细的比较。结果发现,与对照组相比,PEG10基因在死亡组上表现出异常的超甲基化水平,而存活组与对照组相比无显著性差异。研究结果显示,胎盘中印迹基因的DNA甲基化表观重编程不彻底可能是导致转基因克隆牛发育异常进而死亡的主要原因之一。 展开更多
关键词 DNA甲基化 PEG10 体细胞核移植 转基因克隆牛
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应用负压气相培养系统生产体细胞克隆牛的研究 被引量:9
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作者 董雅娟 柏学进 +3 位作者 M.D.Varisanga N.R.Mtango 李建栋 铃木达行 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期988-994,T003-T004,共9页
以 - 35℃低温冷冻保存 3个月的Vari Fe 8mos和Fahru Fe 9mos死亡牛胎儿皮肤上皮细胞 ,为核供体细胞 ,应用点击去核方法 ,和 - 30 0mmHg、2 %CO2 、8%~ 10 %O2 、38.5℃和 10 0 %湿度负压气相培养系统 (负压组 ) ,进行了克隆牛试验研... 以 - 35℃低温冷冻保存 3个月的Vari Fe 8mos和Fahru Fe 9mos死亡牛胎儿皮肤上皮细胞 ,为核供体细胞 ,应用点击去核方法 ,和 - 30 0mmHg、2 %CO2 、8%~ 10 %O2 、38.5℃和 10 0 %湿度负压气相培养系统 (负压组 ) ,进行了克隆牛试验研究 ,并与吸引和挤压及常压培养法进行了比较。结果表明 ,采用点击去核法对体外成熟培养18h、2 2h、2 4h的卵母细胞进行去核 ,去核成功率分别为 90 .0 %、75 .8%和 5 5 .6 %,18h组显著高于 2 2h组 (P <0 .0 5 ) ,极显著高于 2 4h组 (P <0 .0 1) ;而且 ,点击去核法去核率为 90 .0 %,极显著地高于吸引法的 6 8.3%(P <0 .0 1) ,与挤压法去核率 88.3%差异不显著 ;采用点击去核法囊胚发育率达 34 .1%,显著高于吸引法的 18.0 %(P <0 .0 5 ) ,与挤压法的 2 0 .9%差异不显著。负压组重构胚的卵裂率达 70 .0 %,显著高于常压组的 6 3.8%(P <0 .0 5 ) ,负压组囊胚发育率达 35 .8%,极显著高于常压组的 2 3.2 %(P <0 .0 1) ,负压组克隆囊胚细胞数为 10 8± 3.3个 ,极显著多于常压组的 98± 3.3(P <0 .0 1)。将第 6天的克隆桑椹胚和囊胚每 2~ 3枚装入 1支 0 .2 5ml塑料细管中 ,移植给同期发情处理的 5头受体奶牛的黄体侧子宫角中 ,最终获得 2头牛妊娠 ,并于 2 0 0 1年 11月 3日和 11月 展开更多
关键词 负压相培养系统 体细胞克隆牛 核移植
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克隆牛过程中电融合条件对附植前胚胎发育的影响 被引量:6
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作者 张利生 毕春明 +8 位作者 李劲松 吴昱琪 寇朝辉 姜岩 蒋满喜 吕自力 王小宁 孙青原 陈大元 《自然科学进展》 北大核心 2004年第5期581-584,共4页
实验比较了克隆牛过程中电融合条件的改善对附殖前胚胎发育的影响.电融合强度为140V/mm,10μs/次对的效率要较100V/mm,20μs/次和180V/mm,10μs/次时高,可以降低融合后重构胚死亡率,提高克隆牛囊胚发育率.施加直流电脉冲前先给予5V交流... 实验比较了克隆牛过程中电融合条件的改善对附殖前胚胎发育的影响.电融合强度为140V/mm,10μs/次对的效率要较100V/mm,20μs/次和180V/mm,10μs/次时高,可以降低融合后重构胚死亡率,提高克隆牛囊胚发育率.施加直流电脉冲前先给予5V交流电场预处理数秒钟,然后在电极之间通以两个直流脉冲(140 V/mm,10μs/次,间隔0.1 s)与不用交流电预处理对融合率和重构胚的发育率无显著差异.另外实验比较了甘露醇和山梨醇两种融合液对融合及重构胚发育的影响,结果表明囊胚发育率差异不显著,但山梨醇较甘露醇融合液更容易操作.实验生出的4头克隆牛存活至今. 展开更多
关键词 克隆牛 电融合 胚胎发育 核移植 卵母细胞
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新生犊牛的关键护理提高克隆牛存活率 被引量:2
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作者 程磊 康峰 +6 位作者 张立 董树华 焦泽华 苏广华 刘扬 薛利强 李光鹏 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期442-448,共7页
对犊牛生产过程与产后护理方面做了大量细致的观察、管理、护理,使体细胞克隆牛出生率以及犊牛出生后存活率大大提高,新生克隆犊牛存活率高达83%.
关键词 克隆牛 出生 护理 管理 存活率
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内蒙古首例体细胞克隆牛2日龄死亡后的病理学观察 被引量:5
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作者 顾玉芳 李善姬 吴素清 《长江大学学报(自科版)(中旬)》 CAS 2007年第4期30-32,共3页
为了查明内蒙古首例克隆牛死亡的原因,对其进行了尸体剖检和病理组织学观察。结果表明:该犊牛心脏肥大,质度变软,色彩不均,卵圆孔未闭合;局部肺小叶不张或呈气肿状态;皱胃粘膜出血、水肿,瘤胃、网胃、瓣胃粘膜为角化的复层扁平上皮,发... 为了查明内蒙古首例克隆牛死亡的原因,对其进行了尸体剖检和病理组织学观察。结果表明:该犊牛心脏肥大,质度变软,色彩不均,卵圆孔未闭合;局部肺小叶不张或呈气肿状态;皱胃粘膜出血、水肿,瘤胃、网胃、瓣胃粘膜为角化的复层扁平上皮,发育与成年牛相似。其他实质器官肝、脾、淋巴结等实质细胞明显变性、坏死、细胞溶解。 展开更多
关键词 体细胞克隆牛 病理学 死因
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免疫荧光染色检测克隆牛X染色体组蛋白H3Lys4二甲基化修饰 被引量:1
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作者 曹更生 张洪 +1 位作者 周文平 李宁 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期611-614,共4页
利用免疫荧光染色,检测胎儿成纤维细胞(FFB)和输卵管上皮细胞(FOV)来源的克隆牛X中期染色体组蛋白H3K4m2修饰状况。结果发现,这两种细胞系来源的克隆牛耳组织细胞系X染色体H3K4m2修饰与供体核FFB细胞系和常规繁殖牛耳组织细胞系的修饰... 利用免疫荧光染色,检测胎儿成纤维细胞(FFB)和输卵管上皮细胞(FOV)来源的克隆牛X中期染色体组蛋白H3K4m2修饰状况。结果发现,这两种细胞系来源的克隆牛耳组织细胞系X染色体H3K4m2修饰与供体核FFB细胞系和常规繁殖牛耳组织细胞系的修饰基本一致,而与供体核FOV细胞系有较大差异。 展开更多
关键词 免疫荧光染色 X染色体 H3 K4m2 表观遗传修饰 克隆牛
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5头经玻璃化冷冻保存后移植的成年体细胞克隆牛降生 被引量:9
7
作者 谭世俭 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2003年第4期334-334,共1页
Batch production of bovine adult somatic cell cloned embryos by zona-free 2-half cytoplast manipulation technique resulted in the following rates(36 replicates): fusion 95 7% (3678/3842), cleavage 87 2% (3180/3645), b... Batch production of bovine adult somatic cell cloned embryos by zona-free 2-half cytoplast manipulation technique resulted in the following rates(36 replicates): fusion 95 7% (3678/3842), cleavage 87 2% (3180/3645), blastocyst 42 2%(1540/3645), freezable embryos 31 4%(1145/3645), 30 days pregnancy after transfer of vitrified/thawed embryos 28 1% (48/171) Five live calves were born at term from 19th of July until 26th of October 2003 Four of the calves were delivered by cesarean section, and three died within 1 h and another at 5 days after delivery The only calf delivered naturally is still alive and 展开更多
关键词 体细胞 核移植 玻璃化冷冻 产犊 克隆牛
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体细胞克隆牛超排胚胎玻璃化冷冻及移植试验
8
作者 董雅娟 柏学进 +1 位作者 李建栋 程明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1550-1554,共5页
对体细胞克隆牛进行了超数排卵、胚胎玻璃化冷冻及胚胎移植试验。首先对体外受精卵进行了玻璃化冷冻保存试验,结果表明,体外受精囊胚经过EPS10和EPS20的TCM-199液玻璃化冷冻-解冻后胚胎形态正常率和发育率各组间差异不显著,囊胚孵出率EP... 对体细胞克隆牛进行了超数排卵、胚胎玻璃化冷冻及胚胎移植试验。首先对体外受精卵进行了玻璃化冷冻保存试验,结果表明,体外受精囊胚经过EPS10和EPS20的TCM-199液玻璃化冷冻-解冻后胚胎形态正常率和发育率各组间差异不显著,囊胚孵出率EPS20组为31.3%(35/112)极显著高于EPS10组的12.2%(13/107)(P<0.01),选择玻璃化冷冻液EPS20作为体细胞克隆牛超排采卵获得胚胎的冷冻保存液。本试验对体细胞克隆牛“康康”和“双双”进行了超排试验,分别获得6枚(4枚可用胚)和10枚(9枚可用胚)胚胎,各取2枚1级胚胎应用EPS20玻璃化液进行玻璃化冷冻,解冻后分别移植到4头同期发情处理的中国荷斯坦奶牛的黄体侧子宫角内,结果为1头9908号受体母牛妊娠,并且产下1头健康的体细胞克隆牛“双双”的胚胎移植后代。试验结果表明,①体细胞克隆牛与正常牛一样对外源激素(FSH)具有较好的应答能力和超数排卵的能力;②体细胞克隆牛的胚胎可用于玻璃化冷冻保存。 展开更多
关键词 体细胞克隆牛 玻璃化冷冻 移植试验 超数排卵 胚胎 超排 采卵 正常 精囊 囊胚
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转人α-乳清蛋白基因克隆牛及其胚胎移植受体血常规和血清生化指标的研究
9
作者 马腾 刘岩 +8 位作者 郝海生 杜卫华 戴蕴平 赵学明 王栋 秦彤 朱化彬 李发弟 王宗礼 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1-6,共6页
分别选择转人α-乳清蛋白基因牛(转基因组)及其胚胎移植受体(受体组)和普通牛(对照组)各5头,对3组试验牛进行颈静脉跟踪采血3次,每次间隔14d,分析血常规和血清生化指标.结果表明:在血常规指标中,转基因组牛的红细胞数和血小板显著低于... 分别选择转人α-乳清蛋白基因牛(转基因组)及其胚胎移植受体(受体组)和普通牛(对照组)各5头,对3组试验牛进行颈静脉跟踪采血3次,每次间隔14d,分析血常规和血清生化指标.结果表明:在血常规指标中,转基因组牛的红细胞数和血小板显著低于对照组(P<0.05),红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白量显著高于对照组(P<0.05);受体组牛的红细胞数、血红蛋白浓度和红细胞比积均显著低于对照组(P<0.05).在血清生化指标中,转基因组和受体组牛的血清电解质K和P含量均显著小于对照组(P<0.05).转基因组牛的血脂浓度、肌酸激酶活性、天冬氨酸氨基转移酶活性和尿素氮浓度均显著低于对照组(P<0.05),而血肌肝浓度显著高于对照组(P<0.05);受体组牛的血糖浓度、总蛋白浓度和尿素氮浓度等指标均显著低于对照组(P<0.05),而天冬氨酸氨基转移酶活性显著高于对照组(P<0.05).尽管转人α-乳清蛋白基因克隆牛及其胚胎移植受体在某些血常规和血清生化指标上与对照牛存在显著差异,但所有指标均处在健康牛正常值范围内. 展开更多
关键词 转基因克隆牛 人α-乳清蛋白 胚胎移植受体 血常规 血清生化指标
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对克隆牛助产和新生犊牛护理的体会
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作者 刘翠艳 韩春杨 李建基 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第5期23-24,共2页
关键词 克隆牛 助产 新生犊牛 护理 母牛 分娩
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双荧光标记法定量检测Igf-2r在克隆牛组织中的表达
11
作者 蔡霞 龙健儿 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期734-738,共5页
目的建立克隆牛Igf-2rmRNA实时定量PCR的检测方法,并探讨Igf-2rmRNA的表达在克隆牛发育中的作用。方法用Trizol抽提正常及克隆牛的脑、肺、心、肝组织RNA,运用本研究建立的实时荧光定量PCR方法检测各组织中Igf-2rmRNA的表达情况。结果... 目的建立克隆牛Igf-2rmRNA实时定量PCR的检测方法,并探讨Igf-2rmRNA的表达在克隆牛发育中的作用。方法用Trizol抽提正常及克隆牛的脑、肺、心、肝组织RNA,运用本研究建立的实时荧光定量PCR方法检测各组织中Igf-2rmRNA的表达情况。结果正常牛各组织中每μg总RNA中含Igf-2rmRNA拷贝数分别为107.39(脑)、108.04(肺)、107.25(心)、107.99(肝)。克隆牛中,每μg总RNA中含Igf-2rmRNA表达水平变化较大。与正常牛相比,克隆牛不同组织中Igf-2rmRNA的表达水平变化较大,在同一克隆牛的不同组织以及不同克隆牛的同一组织中Igf-2rmRNA的表达水平相差较大,提示在克隆牛不同组织中Igf-2rmRNA的表达水平不一。结论Igf-2rmRNA的表达水平与动物的生长发育有一定的关系,Igf-2r基因的表达异常可能与胎牛过度肥大和围产期死亡等现象有一定的关系。对克隆牛各组织中Igf-2rmRNA的表达的精确定量有助于进一步研究Igf-2r基因在动物生长发育中所起的作用。 展开更多
关键词 Igf-2r 克隆牛 实时荧光定量PCR
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日本克隆牛技术的研究进展
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作者 和占星 文际坤 杨志民 《黄牛杂志》 2000年第4期68-72,共5页
本文通过考察日本从事新生殖生物技术的研究单位 ,并参阅有关试验研究的资料 ,着重介绍了日本近几年来克隆牛技术的研究现状与发展趋势 ,并对胚胎细胞和体细胞的克隆牛技术、存在问题和今后研究方向等作了阐述。
关键词 日本 克隆牛 动物克隆技术 核移植
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人α-乳清蛋白转基因克隆牛外源基因拷贝数的分析 被引量:2
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作者 王洁雯 王敬姣 +3 位作者 赵姝君 李宁 李世杰 张萃 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第9期183-187,共5页
为了探讨转基因克隆动物外源基因拷贝数及拷贝数在传代过程中的变化,本研究应用实时荧光定量PCR检测人α-乳清蛋白(human alpha-lactalbumin,HLA)转基因克隆牛及其子代共5头牛中外源基因的拷贝数,其中K060923为亲代,172、081、189、隆... 为了探讨转基因克隆动物外源基因拷贝数及拷贝数在传代过程中的变化,本研究应用实时荧光定量PCR检测人α-乳清蛋白(human alpha-lactalbumin,HLA)转基因克隆牛及其子代共5头牛中外源基因的拷贝数,其中K060923为亲代,172、081、189、隆娃为子代。HLA基因在亲代转基因克隆牛K060923中的拷贝数为1.145,在子代转基因克隆牛172、081、189和隆娃中分别为0.998、1.107、0.891和0.842。结果表明,5头牛中外源基因拷贝数都在1左右,说明人α-乳清蛋白基本以单拷贝形式整合到宿主基因组中,且稳定遗传。 展开更多
关键词 人α-乳清蛋白基因 转基因克隆牛 实时荧光定量PCR 拷贝数
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1例转基因克隆牛脑和免疫器官组织形态观察报告 被引量:1
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作者 徐金霞 张羽 +3 位作者 王勇胜 边珍 卿素珠 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2012年第6期35-40,46,共7页
【目的】对1例新生死亡的转基因克隆牛的脑和免疫器官进行观察,分析和评价克隆牛脑和免疫器官的发育状况。【方法】采用病理解剖、组织学常规石蜡切片-HE染色技术,对转基因克隆牛的脑部和免疫器官的组织结构进行系统观察与分析。【结果... 【目的】对1例新生死亡的转基因克隆牛的脑和免疫器官进行观察,分析和评价克隆牛脑和免疫器官的发育状况。【方法】采用病理解剖、组织学常规石蜡切片-HE染色技术,对转基因克隆牛的脑部和免疫器官的组织结构进行系统观察与分析。【结果】该克隆牛体格偏大,头颅骨质较一般犊牛坚硬,免疫器官外观无明显变化。镜下观察显示,大脑皮质层次清晰,有轻度充血和1处明显的点状出血;小脑皮质可分为明显的3层结构,蛛网膜有轻度充血;脾脏红髓轻度淤血并有散在含铁血黄素沉着;白髓中央动脉周围淋巴鞘清晰可见,脾小体数量较多,但脾小体和动脉周围淋巴鞘内淋巴细胞数量较少;淋巴结被膜薄,小梁不发达,皮质淋巴细胞多而密集,但典型的具有生发中心的淋巴小结较少;髓索不明显,髓质部毛细血管扩张充血;胸腺被膜和小梁上血管可见充血现象;皮质部淋巴细胞丰富,可见散布的胸腺细胞;髓质淋巴细胞密集,细胞间可见数量较多的巨噬细胞;嗜酸性胸腺小体易于辨认,但发育不完全。【结论】该例克隆牛脑发育较为成熟,但免疫器官发育不均衡。 展开更多
关键词 转基因克隆牛 免疫器官 组织学
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克隆牛的肉可放心食用
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作者 成训妍 《四川草原》 2003年第2期3-3,共1页
自克隆牛问世以来,不少人担心食用克隆牛的肉是否安全的问题.不久前,日本鹿儿岛县的肉用牛改良研究所,对体细胞克隆牛的最新解剖结果表明,克隆牛的肉质无异常之处,与一般菜牛的肉质没有什么两样,人们可以放心地食用,不必相心.
关键词 克隆牛 牛肉 肉质 食品安全
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DNA甲基化对牛Igf-2r表达的影响及其在克隆牛发育中的作用 被引量:2
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作者 蔡霞 龙健儿 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期470-476,共7页
目前认为克隆效率低的主要原因是供体核的不完全重编程导致发育过程中一些重要的基因异常表达。运用DNA甲基化转移酶抑制剂5′-脱氧胞苷(5′-azacytidine,5′-aza)处理MDBK细胞(牛肾上皮细胞),并通过实时荧光定量PCR方法对Igf-2r基因的... 目前认为克隆效率低的主要原因是供体核的不完全重编程导致发育过程中一些重要的基因异常表达。运用DNA甲基化转移酶抑制剂5′-脱氧胞苷(5′-azacytidine,5′-aza)处理MDBK细胞(牛肾上皮细胞),并通过实时荧光定量PCR方法对Igf-2r基因的表达进行了定量分析;在此基础上,应用亚硫酸盐甲基化测序法检测正常牛及克隆牛脑、肺、心、肝组织Igf-2r印迹调控区DMR2(DNA differentially methylated region,DMR)及非印迹调控区3′-UTR(3′-untranslated region,UTR)的DNA甲基化水平。研究发现,5′-aza处理MDBK细胞后,Igf-2r基因的表达上调。正常牛各组织中Igf-2r DMR2区的DNA甲基化程度差异较大,3′-UTR区较稳定;与正常牛相比,克隆牛DMR2区的甲基化程度变化较大,3′-UTR区无显著性变化。结果表明,DNA甲基化修饰影响Igf-2r基因的表达。正常牛不同组织中Igf-2r基因DMR2区的DNA甲基化程度不同,提示Igf-2r基因的印迹调控方式在不同组织中可能不同。克隆牛发育过程中,调控Igf-2r基因印迹的DMR2表观结构被明显改变,而非印迹调控区3′-UTR则无明显变化,提示Igf-2r基因印迹调控区被破坏,很可能是导致克隆牛发育异常的一个重要原因。 展开更多
关键词 lgf-2r 表观遗传 克隆牛 DNA甲基化 基因印迹
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整合社会资源促克隆牛技术产业化
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作者 朱江 《中国科技投资》 2003年第12期61-61,共1页
科研成果在走向市场成为成熟的产品之前往往需要经历一段比较艰难的发展历程。降低风险和整合社会资源决定着研究所科研成果转化的进程甚至成败,在这一方面,中国科学院动物研究所进行了一些有益的尝试。
关键词 整合社会资源 成年体细胞克隆牛 高技术产业 奶牛胚胎 动物研究所 科研人员 中国科学院 科技投资 管理队伍 研究院
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转FABP基因克隆牛外源基因的稳定性及其粪便对蚯蚓的影响
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作者 马珊珊 《饲料广角》 2016年第15期30-33,50,共5页
(上接第14期)第二部分转A-FABP基因牛与非转基因牛生物学特性比较与转基因动植物研究的迅速发展相比,转基因牛的安全性评价相对落后。本试验通过定期测量体重、体斜长、体直长、体高、胸围,临床观察两头转基因牛精神状态、反刍是否正常... (上接第14期)第二部分转A-FABP基因牛与非转基因牛生物学特性比较与转基因动植物研究的迅速发展相比,转基因牛的安全性评价相对落后。本试验通过定期测量体重、体斜长、体直长、体高、胸围,临床观察两头转基因牛精神状态、反刍是否正常、排泄物状态,粪便寄生虫检查,血液生理生化检验,判断两头转基因牛生物学特性是否发生改变。 展开更多
关键词 FABP 转基因牛 外源基因 转基因动植物 生化检验 参考范围 秦川牛 克隆牛 非转基因 寄生虫检查
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人转铁蛋白转基因克隆牛整合位点检测 被引量:1
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作者 刘宇 朱怡文 +1 位作者 许淼 黄英 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第2期60-63,共4页
为检测外源基因整合在转基因克隆牛染色体上的定位情况,通过优化染色体荧光原位杂交技术,成功对4头人转铁蛋白转基因克隆牛的整合位点进行定位。每头牛分析中期分裂相40个以上,杂交率在53.1%~86.8%之间,且杂交信号分别位于转基因克隆牛... 为检测外源基因整合在转基因克隆牛染色体上的定位情况,通过优化染色体荧光原位杂交技术,成功对4头人转铁蛋白转基因克隆牛的整合位点进行定位。每头牛分析中期分裂相40个以上,杂交率在53.1%~86.8%之间,且杂交信号分别位于转基因克隆牛的11号、15号和19号染色体的相应位置;另外采用定量PCR方法对杂交信号强弱不同的转基因克隆牛个体进行整合位点拷贝数的检测,结果显示拷贝数的多少与杂交信号强弱直接有关。 展开更多
关键词 荧光原位杂交 人转铁蛋白转基因克隆牛 整合位点 拷贝数
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转FABP基因克隆牛外源基因的稳定性及其粪便对蚯蚓的影响
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作者 马珊珊 《饲料广角》 2016年第14期31-33,共3页
转基因动物安全性问题,已成为世界各国科学家及公众关注的内容。因此,对转基因动物进行安全性评价已成为转基因研究不可缺少的一环,特别是其转入基因的稳定性、其自身生长发育情况,以及排泄物对周围环境是否产生影响等。本试验以在北京... 转基因动物安全性问题,已成为世界各国科学家及公众关注的内容。因此,对转基因动物进行安全性评价已成为转基因研究不可缺少的一环,特别是其转入基因的稳定性、其自身生长发育情况,以及排泄物对周围环境是否产生影响等。本试验以在北京农学院出生的两头转A-FABP基因克隆牛为研究对象,定期分别测定两转基因牛的体型、外貌、发育情况,并检测两转基因牛、受体母牛、同饲养条件健康普通秦川牛粪便中寄生虫卵的数目;采用一定间隔时间持续采血,检验其外源基因是否有漂移现象;持续采集同一条件下饲喂的转基因牛与非转基因牛血液,检测其血常规、血生化指标差异;检测转基因牛与非转基因牛粪便虫卵的数量,比较两种粪便对蚯蚓生长、生殖及SOD活性的影响。试验结果表示,转基因牛的体重、体斜长、体直长、体高、胸围、血常规、血生化、粪便寄生虫卵基本生物学特性与普通牛基本一致。其血液、粪便、土壤、口腔拭子PCR检测中,只有转基因牛的血液中出现特异性目标基因,非转基因牛均未出现。分析转基因牛粪便和普通牛粪便饲养蚯蚓的情况得出:在体重上,转基因牛组饲喂的蚯蚓体重有低于普通牛组的趋势,在第70、84、98d时,转基因牛2组显著低于普通牛组;在产茧率上,转基因牛组饲喂的蚯蚓有低于普通牛组的趋势,在42d时转基因牛组显著低于普通牛组,56、70d时转基因牛2组显著低于普通牛组;在SOD活性上,70d时转基因牛1组显著高于普通牛组。由以上试验得出,转入脂肪性脂肪酸结合蛋白(A-FABP)基因的克隆牛外源基因稳定,且其粪便可致蚯蚓重量、产茧数下降,SOD活性增高。 展开更多
关键词 转基因牛 FABP基因 外源基因 克隆牛 转基因动物 非转基因 脂肪酸结合蛋白 秦川牛 安全性评价 生长发育情况
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