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双抗体夹心酶联免疫吸附法检测鱼糜制品中鸡蛋卵白蛋白 被引量：3
1
作者 朱文嘉 陈江平 +3 位作者 秦智慧 朱文烨 王联珠 李振兴 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第6期190-197,共8页
目的建立双抗体夹心酶联免疫吸附(sandwich enzyme linked immunosorbent assay,sELISA)法检测鸡蛋卵白蛋白(ovalbumin,OVA)的方法,组装定量检测鱼糜制品中OVA含量的ELISA检测试剂盒。方法确定各步骤反应时间,使用棋盘法确定捕获抗体和... 目的建立双抗体夹心酶联免疫吸附(sandwich enzyme linked immunosorbent assay,sELISA)法检测鸡蛋卵白蛋白(ovalbumin,OVA)的方法,组装定量检测鱼糜制品中OVA含量的ELISA检测试剂盒。方法确定各步骤反应时间,使用棋盘法确定捕获抗体和检测抗体的最佳工作浓度,建立检测方法并对其性能进行评价。结果反应最佳条件为:抗原孵育20 min,检测抗体孵育20min,酶促反应显色10 min。兔抗OVA抗体为捕获抗体,工作质量浓度为1μg/mL,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记兔抗OVA抗体为检测抗体,1:5000(V:V)稀释。采用四参数逻辑曲线拟合标准曲线,所建立sELISA方法的检测范围为8.5~200.0 ng/mL,检出限为3.5 ng/mL,定量限为8.5 ng/mL。批次内和批次间的变异系数分别为2.31%~4.58%和6.06%~12.23%;鱼糜基质中的回收率为80%~130%;测得28种常见食物样品中4种样品的交叉反应率小于0.002%;试剂盒在4℃保存6个月期间,标准品检测结果的变异系数为4.29%~18.91%。结论建立的方法快速、灵敏、准确、稳定性好,可用于鱼糜制品中鸡蛋OVA的定量检测。 展开更多
关键词 鸡蛋 卵白蛋白 双抗体夹心酶联免疫吸附法 鱼糜制品
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胶体金免疫层析法与酶联免疫吸附试验在梅毒螺旋体特异性抗体检测中的应用分析 被引量：1
2
作者 颜娟娟 邹富梅 《现代诊断与治疗》 CAS 2024年第3期423-425,共3页
目的探究梅毒螺旋体特异性抗体检测中胶体金免疫层析法(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)的应用价值。方法选取2020年7月至2022年9月我院收治的80例疑似梅毒感染患者,均接受GICA、ELISA、TPPA检查。以TPPA结果为“金标准”,分析GICA、EL... 目的探究梅毒螺旋体特异性抗体检测中胶体金免疫层析法(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)的应用价值。方法选取2020年7月至2022年9月我院收治的80例疑似梅毒感染患者,均接受GICA、ELISA、TPPA检查。以TPPA结果为“金标准”,分析GICA、ELISA检查结果;分析GICA、ELISA诊断价值,并计算一致性进行;另对比GICA、ELISA检测满意度。结果相比于ELISA检测,GICA检测诊断灵敏度、准确度及阴性预测值均较高(P<0.05)。一致性检验,GICA诊断一致性尚可(kappa值=0.771,P=0.000),ELISA诊断一致性不佳(kappa值=0.385,P=0.000)。相比于ELISA检测,GICA检测满意度较高(P<0.05)。结论GICA与ELISA均可在梅毒螺旋体特异性抗体中进行检测,但GICA检测应用价值更高,一致性较强,且患者满意度较高,可将其作为首选检测方法。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体特异性抗体 胶体金免疫层析法 酶联免疫吸附法 明胶颗粒凝集试验
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酶联免疫法与胶体金层析法对HIV抗体检测结果的比较
3
作者 李莹莹 薜宇铭 +4 位作者 燕清丽 成艳 庞艺秀 于浩 杨鹏飞 《江苏卫生保健》 2024年第2期163-164,共2页
目的评估酶联免疫法与胶体金层析法对HIV抗体的检测性能。方法2021—2022年对3423份血液样本同时用酶联免疫法和胶体金层析法检测,以免疫印迹法为金标准确证结果。结果酶联免疫法检出有反应样本5份,胶体金层析法检出有反应样本9份,经免... 目的评估酶联免疫法与胶体金层析法对HIV抗体的检测性能。方法2021—2022年对3423份血液样本同时用酶联免疫法和胶体金层析法检测,以免疫印迹法为金标准确证结果。结果酶联免疫法检出有反应样本5份,胶体金层析法检出有反应样本9份,经免疫印迹实验确证阳性4份。酶联免疫法假阳性1份,假阳性率0.03%;胶体金层析法假阳性5份,假阳性率0.15%,2种方法差异无统计学意义(χ^(2)=2.64,P=0.26)。2种方法检测HIV抗体的灵敏度均为100%,酶联免疫法的特异度(99.97%)略高于胶体金层析法(99.85%),Kappa值均≥0.6,检测一致性较好。结论酶联免疫法和胶体金层析法均可用于HIV抗体检测,酶联免疫法的假阳性率更低,胶体金层析法操作更为简便,可结合实际需要选择合适的方式进行HIV筛查。 展开更多
关键词 酶联免疫法 胶体金层析法 HIV抗体检测
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胶体层析法与酶联免疫吸附试验筛查人类免疫缺陷病毒抗体在艾滋病诊断中应用价值分析
4
作者 袁小多 宋冬梅 +2 位作者 谢海珍 袁珊珊 饶海琴 《基层医学论坛》 2024年第5期107-109,共3页
目的 分析对比胶体层析法与酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)筛查人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)抗体在艾滋病中的诊断价值。方法 选取2019年1月—2022年12月于高安市疾病预防控制中心... 目的 分析对比胶体层析法与酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)筛查人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)抗体在艾滋病中的诊断价值。方法 选取2019年1月—2022年12月于高安市疾病预防控制中心行艾滋病筛查的13 777人为研究对象,采集研究对象的空腹静脉血,对空腹静脉血均施以胶体层析法、ELISA与免疫印迹法行HIV抗体检测,以免疫印迹法为检查的“金标准”,统计对比胶体层析法、ELISA在艾滋病中的诊断效能。结果 13 777名行艾滋病筛查检测人员中,免疫印迹法共检测出37例HIV抗体阳性,ELISA共检测出36例HIV抗体阳性,胶体层析法共检查出29例HIV抗体阳性;以免疫印迹法为检查的“金标准”,ELISA检测的灵敏度为94.59%(35/37)、准确度为99.98%[(35+13 739)/13 777]、阴性预测值为99.99%(13 739/13 741),高于胶体层析法的72.97%(27/37)、99.91%[(27+13 738)/13 777]、99.93%(13 738/13 748),差异有统计学意义(P<0.05);二者的特异度、阳性预测值相比,差异无统计学意义(P>0.05)。Kappa检验显示,ELISA检查艾滋病的结果与“金标准”检查结果的一致性极好(Kappa值=0.959,P<0.001)。结论 与胶体层析法相比,酶联免疫吸附试验能够更有效地检查出阳性HIV抗体,进而提高艾滋病的早期诊断率,临床应用价值较高,值得推广应用。 展开更多
关键词 艾滋病 人类免疫缺陷病毒抗体 胶体层析法 酶联免疫吸附试验
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人类免疫缺陷病毒抗体初筛中采取胶体层析法与酶联免疫吸附试验检测的价值对比
5
作者 刘小莲 《基层医学论坛》 2024年第4期115-117,共3页
目的 对比胶体层析法与酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)应用于人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)抗体初筛中的临床价值。方法 回顾性分析2019年6月—2022年6月信丰县疾病预防控制中心60... 目的 对比胶体层析法与酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)应用于人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)抗体初筛中的临床价值。方法 回顾性分析2019年6月—2022年6月信丰县疾病预防控制中心60例接受HIV感染筛查者的临床资料,所有入选病例均接受胶体层析法与ELISA法进行HIV抗体初筛,并经过免疫印迹法检测最终确认。比较2种方法检测HIV抗体的效能。结果 60例筛查者经免疫印迹法确认HIV抗体阳性25例(41.67%),HIV抗体阴性35例(58.33%)。胶体层析法检测HIV抗体的符合率为83.33%、灵敏度为76.00%、特异度为88.57%、阳性预测值为82.61%、阴性预测值为83.78%;ELISA法检测HIV抗体的符合率为91.67%、灵敏度为92.00%、特异度为91.43%、阳性预测值为88.46%、阴性预测值为94.12%;胶体层析法与ELISA法比较,ELISA法检测HIV抗体的灵敏度、阴性预测值均高于胶体层析法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ELISA法检测HIV抗体的效能高于胶体层析法,主要表现在ELISA法具有更高的灵敏度与阴性预测值,有助于提高HIV感染筛查准确率。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 抗体初筛胶体层析法 酶联免疫吸附试验
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电化学发光法和胶体金免疫层析法检测梅毒抗体的价值分析
6
作者 杨佳莉 《中外医药研究》 2024年第6期153-155,共3页
目的:分析电化学发光法和胶体金免疫层析法检测梅毒抗体的价值。方法:选取2021年4月—2022年5月于常州市德安医院行梅毒抗体检测的检查者100例作为研究对象。所有检查者行电化学发光法、胶体金免疫层析法检测以及梅毒螺旋体抗体明胶颗... 目的:分析电化学发光法和胶体金免疫层析法检测梅毒抗体的价值。方法:选取2021年4月—2022年5月于常州市德安医院行梅毒抗体检测的检查者100例作为研究对象。所有检查者行电化学发光法、胶体金免疫层析法检测以及梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验。将梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验结果作为“金标准”,比较电化学发光法、胶体金免疫层析法的诊断准确性、敏感度、特异度。结果:100例检测者中有77例梅毒抗体阳性。电化学发光法检测梅毒抗体的准确性、敏感度、特异度高于胶体金免疫层析法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:电化学发光法检测梅毒抗体的价值更高,适合应用于临床。 展开更多
关键词 梅毒抗体 电化学发光法 胶体金免疫层析法
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HIV-Ⅰ/Ⅱ型抗体双抗原夹心乳胶免疫层析测定方法的建立及应用
7
作者 王拥军 黄伯里 +2 位作者 朱立苇 徐霄勤 李葆华 《临床输血与检验》 CAS 2002年第2期20-21,共2页
关键词 HIV-Ⅰ/Ⅱ抗体 双抗原夹心乳胶免疫层析法 艾滋病 抗体检测 干扰试验
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有机磷农药胶体金免疫层析竞争法快速检测方法的建立 被引量：1
8
作者 李洋洋 崔琳 +2 位作者 张宇彤 郑佳慧 艾金霞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期428-434,共7页
目的建立检测蔬果及饮用水等样本中的氧乐果、辛硫磷、敌百虫、对硫磷等有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法并研制检测试纸条。方法N-羟基琥珀酰亚法合成有机磷人工抗原;制备乙酰胆碱酯酶抗原及纯化及其抗血清制备、纯化与标记;优化试... 目的建立检测蔬果及饮用水等样本中的氧乐果、辛硫磷、敌百虫、对硫磷等有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法并研制检测试纸条。方法N-羟基琥珀酰亚法合成有机磷人工抗原;制备乙酰胆碱酯酶抗原及纯化及其抗血清制备、纯化与标记;优化试纸条工作参数,并进行性能测试。结果抗血清效价在1∶32~1∶64之间,蛋白含量约为2 mg/mL。纯化后的多克隆抗体在相对分子质量(M r)25000和55000处出现目的条带,纯度较好;试纸条反应时间在5~10 min,样本检测限为200 ng/mL,特异性及准确性良好,试纸条有效期为6个月。结论建立了简便快速检测多种有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法,适合大量样本的现场初筛。 展开更多
关键词 乙酰胆碱酯酶 多克隆抗体 有机磷农药 胶体金试纸条 免疫层析法
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胶体金免疫层析试验在梅毒抗体检测中的价值及适用范围研究 被引量：1
9
作者 石杜娟 《安徽医学》 2024年第2期185-190,共6页
目的 通过比较胶体金免疫层析试验(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)、光激化学发光法(LICA)、化学发光免疫分析法(CLIA)对梅毒螺旋体抗体检测的性能指标,探寻GICA法在检测梅毒螺旋体抗体的价值以及患者自检的可能。方法 选取2022年2~5... 目的 通过比较胶体金免疫层析试验(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)、光激化学发光法(LICA)、化学发光免疫分析法(CLIA)对梅毒螺旋体抗体检测的性能指标,探寻GICA法在检测梅毒螺旋体抗体的价值以及患者自检的可能。方法 选取2022年2~5月收集的合肥市滨湖医院住院患者、门诊就诊者以及体检者共143人份血清标本,同时采用GICA、LICA、ELISA、CLIA、梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)进行梅毒螺旋体抗体检测。以TPPA结果为金标准,分析GICA与LICA、ELISA、CLIA的灵敏度、特异度、阴性预测值、阳性预测值,并与TPPA比较得出一致性以及符合率;通过绘制出GICA、LICA、ELISA、CLIA的受试者工作特征(ROC)曲线并对曲线下面积进行比较;根据计算所得最佳临界值进行分区,比较不同区间的TPPA符合率与GICA的TPPA符合率大小。结果GICA的特异度与ELISA、LICA比较,差异有统计学意义(P<0.05);GICA的特异度和阳性预测值均高于CLIA,差异有统计学意义(P<0.05)。GICA与TPPA的符合率均高于ELISA、LICA、CLIA,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA和LICA与GICA的符合率均高于CLIA与GICA的符合率,差异有统计学意义(P<0.05)。通过交叉示意图可见,GICA阳性时至少伴有其他2种方法同时阳性。GICA的ROC曲线下面积与ELISA、LICA、CLIA相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。分区后发现ELISA、LICA和CLIA的S/CO值(样本吸光值/临界值)分别在1.00~12.00、1.00~10.00、1.00~4.00时的TPPA符合率与GICA的TPPA符合率存在统计学差异(P<0.05)。结论 GICA作为快速诊断梅毒的重要手段,其各项指标均优于ELISA、LICA、CLIA,还能作为此3种方法初筛梅毒抗体阳性后的复检方法,为日后患者自检模式的实现也提供了可能性。 展开更多
关键词 梅毒 梅毒螺旋体抗体 胶体金免疫层析试验 化学发光免疫分析法 光激化学发光法 酶联免疫吸附试验
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基于反向荧光增强双信号通道免疫层析方法检测动物源食品中克百威残留 被引量：2
10
作者 孙晨晨 陈浩 +6 位作者 罗磊 胡荣荣 李盼 王玉龙 刘鹏琰 杨剑婷 张存政 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期656-664,共9页
本研究建立了可视化-反向荧光增强双信号通道免疫层析技术(V-rFICTs),通过观察多巴胺包金的显色减弱以及量子点荧光的反向增强,实现对克百威的双信号、半定量检测。通过设计合成半抗原制备获得特异性单克隆抗体,以多巴胺包金核壳纳米材... 本研究建立了可视化-反向荧光增强双信号通道免疫层析技术(V-rFICTs),通过观察多巴胺包金的显色减弱以及量子点荧光的反向增强,实现对克百威的双信号、半定量检测。通过设计合成半抗原制备获得特异性单克隆抗体,以多巴胺包金核壳纳米材料标记抗体作为检测探针,将量子点(QDs-OVA)与包被原(CAR-OVA)喷涂于硝酸纤维膜(NC膜)上作为检测线(T线),同时喷涂兔抗鼠IgG抗体作为质控线(C线),组装成免疫层析试纸条。当样品不含克百威时,标记抗体结合在T线,裸眼可见明显紫红色条带,荧光猝灭,当克百威存在时,T线紫红色条带变弱或消失,而紫外下绿色荧光显现并随着克百威浓度的升高而增强。方法研究结果显示,V-rFICTs在可见光检测模式下的检测限为50 ng/mL,在荧光模式下的检测限为3.13 ng/mL,灵敏度提升15倍以上,15 min内可完成检测,与其他结构类似物无交叉反应。经方法验证,检测结果与液相色谱-串联质谱方法一致,具有较好的应用潜力。 展开更多
关键词 克百威 单克隆抗体 可视化-反向荧光增强双通道信号免疫层析法 动物源食品
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双抗体夹心酶联免疫检测法测定蓖麻毒素 被引量：10
11
作者 杨运云 牟德海 +2 位作者 童朝阳 穆唏惠 郝兰群 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期439-442,共4页
建立了双抗体夹心酶联免疫法检测蓖麻毒素的方法。优化了最佳蓖麻毒素多克隆抗体包被浓度和包被方法、蓖麻毒素单克隆抗体工作浓度、酶标记二抗体工作浓度和显色时间等实验条件。方法的线性范围在1.2-10.0μg/L之间,线性回归方程y=0.05x... 建立了双抗体夹心酶联免疫法检测蓖麻毒素的方法。优化了最佳蓖麻毒素多克隆抗体包被浓度和包被方法、蓖麻毒素单克隆抗体工作浓度、酶标记二抗体工作浓度和显色时间等实验条件。方法的线性范围在1.2-10.0μg/L之间,线性回归方程y=0.05x＋0.42,相关系数为0.9962,检出限为0.2μg/L。将该方法用于检测实际水样蓖麻毒素加标样品,回收率为91.7%-104.0%;检测实际土壤加标样品,回收率为83.3%-98.0%;检测奶粉加标样品,回收率为83.3%~94.0%;检测实际血液加标样品,回收率为75.0%-82.0%。 展开更多
关键词 蓖麻毒素 酶联免疫 双抗体夹心
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双抗体夹心酶联免疫法检测不同样品中的蓖麻毒素 被引量：6
12
作者 郎立伟 王玉霞 +3 位作者 王晨宇 赵宇 贾培媛 傅风华 《国际药学研究杂志》 CAS 2009年第1期12-16,共5页
目的应用酶联免疫吸附分析方法(ELISA)检测待测样品中的蓖麻毒素。方法用蛋白G亲和层析柱纯化蓖麻毒素单克隆抗体(4C13,3D74,5E4和5H6),以3D74及辣根过氧化物酶(HRP)标记的4C13建立的双抗体夹心ELISA对含有蓖麻毒素的多种样品进行检测... 目的应用酶联免疫吸附分析方法(ELISA)检测待测样品中的蓖麻毒素。方法用蛋白G亲和层析柱纯化蓖麻毒素单克隆抗体(4C13,3D74,5E4和5H6),以3D74及辣根过氧化物酶(HRP)标记的4C13建立的双抗体夹心ELISA对含有蓖麻毒素的多种样品进行检测。结果抗蓖麻毒素的单克隆抗体经亲和层析纯化后具有较高的蛋白纯度,应用HRP标记的4C13与3D74建立双抗体夹心ELISA,对于溶解于磷酸缓冲液中的蓖麻毒素标准品的检测灵敏度可达2.5μg·L-1;对于土壤、面粉、牛奶、咸菜汁、雪碧、可乐和腐乳汁中的蓖麻毒素样品检测的灵敏度为2.5～5.0μg·L-1;与磷酸缓冲液样品相比较,含有相同浓度蓖麻毒素的小鼠和人血清样品ELISA的阳性结果明显减弱。结论双抗体夹心酶联免疫法能够有效用于含有蓖麻毒素样品的检测分析。 展开更多
关键词 蓖麻毒素 双抗体夹心 酶联免疫吸附分析
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酶联免疫双抗体夹心法检测牛初乳素中免疫球蛋白IgG 被引量：14
13
作者 项新华 尹香君 +1 位作者 赵丹慧 李成文 《中国卫生检验杂志》 CAS 2002年第2期137-138,共2页
〔目的〕建立检测牛初乳素为原料的保健食品中免疫球蛋白IgG的常用酶联免疫双抗体夹心法。〔方法〕分离纯化小牛血清中IgG,以牛IgG免疫新西兰兔,获得抗牛IgG的血清,分离纯化,制备兔抗牛IgG。〔结果〕1000ng/孔兔抗牛IgG饮被酶联板,3倍... 〔目的〕建立检测牛初乳素为原料的保健食品中免疫球蛋白IgG的常用酶联免疫双抗体夹心法。〔方法〕分离纯化小牛血清中IgG,以牛IgG免疫新西兰兔,获得抗牛IgG的血清,分离纯化,制备兔抗牛IgG。〔结果〕1000ng/孔兔抗牛IgG饮被酶联板,3倍比稀释牛IgG,夹心法检测。〔结果〕在牛IgG0.031mg/ml-2.50mg/ml范围,浓度与吸光度值线性相关,方程为:y=0.358+0.767x,相关系数为r=0.995,当添加50mmIgG时,回收率为88.4％,变异系数为6.1％。〔结论〕该方法具有特异性强、快速、灵敏和分析成本低等特点。 展开更多
关键词 牛初乳素 IGG 酶联免疫双抗体夹心法 兔抗牛IgG
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用单克隆抗体酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测红内期恶性疟原虫抗原 被引量：6
14
作者 高琪 杨仲炎 张炜琪 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1990年第2期43-45,共3页
本文介绍了以兔抗恶性疟原虫（p、f）多克隆抗体包被,用混合的二种单克隆抗体进行反应酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心法检测人体红细胞内的恶性疟原虫抗原。恶性疟（镜检确诊）和非疟疾患者的滤纸血样本测定符合率分别为91.5％（4... 本文介绍了以兔抗恶性疟原虫（p、f）多克隆抗体包被,用混合的二种单克隆抗体进行反应酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心法检测人体红细胞内的恶性疟原虫抗原。恶性疟（镜检确诊）和非疟疾患者的滤纸血样本测定符合率分别为91.5％（43/47）和96％（24/25）。检测敏感度为5个疟原虫/10~6红细胞,对恶性疟原虫的海南和江苏地理株的测定结果显示,两者的符合率无显著差异。但对间日疟样本测定结果不理想。 展开更多
关键词 疟原虫抗原 双抗体夹心法 恶性疟原虫 红内期 单克隆抗体 疟疾患者 间日疟 疟疾病人 滤纸血 符合率
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双抗体夹心斑点金免疫渗滤法检测血吸虫循环抗原的现场应用 被引量：2
15
作者 张素娥 汤益 +1 位作者 施晓华 蒋健敏 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2002年第1期44-45,共2页
目的　探讨双抗体夹心斑点金免疫渗滤法 (S- DIGFA)在现场的应用价值。方法　在原已建立的以抗 2 6 k Da GST基因重组蛋白多克隆抗体为捕获抗体兼测示抗体的 S- DIGFA的基础上 ,应用该法检测血吸虫病中度流行区和传播阻断地区人群的血清... 目的　探讨双抗体夹心斑点金免疫渗滤法 (S- DIGFA)在现场的应用价值。方法　在原已建立的以抗 2 6 k Da GST基因重组蛋白多克隆抗体为捕获抗体兼测示抗体的 S- DIGFA的基础上 ,应用该法检测血吸虫病中度流行区和传播阻断地区人群的血清共 1388份 ,并以双抗体夹心EL ISA(S- EL ISA)作对照。结果　用 S- DIGFA和 S- EL ISA平行检测血吸虫病中度流行区人群血清30 0份 ,阳性检出率分别为 15 .7%和 17.3% ;两法检测血吸虫病传播阻断地区人群血清 10 88份 ,阳性检出率分别为 3.9%和 3.7%。结论　 S- DIGFA检测循环抗原可在现场扩大应用和作血清流行病学调查。 展开更多
关键词 26kDaGST 双抗体夹心斑点金免疫渗滤法 双抗体夹心酶联免疫吸附试验 日本血吸虫 循环抗原
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犬粪便棘球绦虫抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测法建立与应用 被引量：22
16
作者 黄燕 Heath D David +2 位作者 Antone J Christine 邱加闽 王谦 《预防医学情报杂志》 CAS 2008年第6期407-411,共5页
目的研究双抗体夹心酶联免疫吸附检测犬粪便棘球绦虫虫体抗原的方法并评价其在实际工作中的应用价值。方法实验犬12只，分实验组和对照组，实验组用活化绵羊源原头蚴（G1型）作人工感染；感染后0～8周内收集粪便，56d宰杀实验犬，收集... 目的研究双抗体夹心酶联免疫吸附检测犬粪便棘球绦虫虫体抗原的方法并评价其在实际工作中的应用价值。方法实验犬12只，分实验组和对照组，实验组用活化绵羊源原头蚴（G1型）作人工感染；感染后0～8周内收集粪便，56d宰杀实验犬，收集成虫；制备成虫抗原和虫体代谢／分泌抗原，蛋白酶K处理抗原并分别免疫成年绵羊和新西兰白兔；绵羊抗血清用80％饱和硫酸铵沉淀、透析，兔抗血清过IgG亲和层析柱，分别获得纯化抗体；观察犬粪便在PBS液中-80℃冷冻3d或在含1％Formalin的PBS液中70℃～80℃加热8h的处理方法对检出结果的影响。运用该方法对四川省甘孜县达通玛区4个乡的580只家犬吡喹酮每6月一次驱虫前后的粪抗原进行监测。结果试验系统的敏感性为92．3％，特异性为80％；粪抗原从感染后的第2～3周可检出；两种样品处理方法都可以灭活虫卵但不影响检出效果；检测方法可同时用于对细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫感染的诊断；达通玛区家犬粪抗原阳性率从2000年的50％下降到2005年的17％。结论检测方法具有较高的特异性和敏感性；推荐粪便用加热的方法处理可以灭活虫卵以防止生物污染；该方法可以在基层推广应用。 展开更多
关键词 棘球属 粪抗原 双抗体夹心酶联免疫吸附试验 犬 诊断 控制
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酶联免疫吸附双抗原夹心法检测人畜布氏菌抗体的研究 被引量：14
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作者 刘淑平 郭支喜 +3 位作者 王曾良 胡学斌 张伟 鲁齐发 《中国地方病防治》 2002年第4期214-216,共3页
目的为人畜布氏菌病血清学诊断、监测及流行病学调查提供实用和简便的一种酶免疫试验技术。方法在制备高滴度布氏菌抗原辣根过氧化物酶结合物及其冻干制品基础上,应用酶联免疫吸附双抗原夹心法即双抗原夹心酶联免疫吸附试验(DAgS-ELISA... 目的为人畜布氏菌病血清学诊断、监测及流行病学调查提供实用和简便的一种酶免疫试验技术。方法在制备高滴度布氏菌抗原辣根过氧化物酶结合物及其冻干制品基础上,应用酶联免疫吸附双抗原夹心法即双抗原夹心酶联免疫吸附试验(DAgS-ELISA)、试管凝集试验(SAT)及虎红平板凝集试验(RBPT)对从山西省布氏菌病疫区收集的布氏菌病患者、布氏菌感染羊、牛、猪以及健康人、羊、牛、猪共计290份血清进行对比检测。结果上述3种试验对健康人、羊、牛、猪共计140份血清检查均为阴性反应,用DAgS-ELISA对布氏菌感染人、羊、牛、猪共计150份血清检查,其阳性率分别为91.4%、74.6%、66.7%及66.7%,从总体而言,检查的特异性及敏感性,以DAgS-ELISA优于SAT及RBPT。结论双抗原夹心酶联免疫吸附试验检测人畜布氏菌抗体,不仅特异、敏感、简便,而且制备一种布氏菌抗原酶结合物及其冻干制品,可用于人及各种动物布氏菌抗体的检测,值得推广应用。 展开更多
关键词 布氏菌病 双抗原夹心酶联免疫吸附试验 抗体
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鸭血管紧张素转换酶2(ACE2)双抗体夹心ELISA检测方法的建立与应用
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作者 陈雨涛 纪晓霞 +2 位作者 李帅 伍钢 张源淑 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS 北大核心 2023年第1期75-85,共11页
为建立鸭血管紧张素转换酶2 (angiotensin converting enzyme 2, ACE2)双抗体夹心酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)定量检测方法,首先利用纯化的鸭ACE2重组蛋白,成功制备了兔抗鸭ACE2多克隆抗体,间接ELISA... 为建立鸭血管紧张素转换酶2 (angiotensin converting enzyme 2, ACE2)双抗体夹心酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)定量检测方法,首先利用纯化的鸭ACE2重组蛋白,成功制备了兔抗鸭ACE2多克隆抗体,间接ELISA法确定抗体效价为1∶800;然后利用制备的鼠抗鸭ACE2多克隆抗体作为捕获抗体,通过戊二醛二步法对兔抗鸭ACE2多克隆抗体进行HRP标记,并将HRP标记的兔抗鸭ACE2多克隆抗体作为检测抗体,纯化获得的鸭ACE2重组蛋白作为标准品,建立鸭ACE2双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对抗体浓度、捕获抗体最适包被条件、孵育条件、封闭条件及显色条件等进行优化;通过Western blot法检测正常白鸭与患传染性浆膜炎的病鸭不同组织间ACE2表达的变化;利用RT-qPCR方法检测正常鸭与患传染性浆膜炎的病鸭不同组织中ACE2基因的相对表达量。结果表明:所建立的双抗体夹心ELISA方法最低检测浓度为5 ng·mL^(-1),最佳线性范围为25~1 600 ng·mL^(-1),批内变异系数为1.65%~5.62%,批间变异系数为3.66%~6.81%,可检测出麻鸭各组织中ACE2含量。传染性浆膜炎组白鸭以及健康鸭心脏、肝脏等组织样品ACE2含量或表达存在差异,心脏组织中显著升高或上调;鸭传染性浆膜炎组心脏中ACE2 mRNA水平显著上调,肝脏组织中ACE2 mRNA水平升高不明显。采用该ELISA方法对不同畜(大鼠、猪、羊)、禽(鸭、鸡、鹅)的不同组织中ACE2进行了定量测定,证实该方法在不同畜禽上存在较大种属差异,仅适用于家禽ACE2的定量检测。综上,该研究成功建立了鸭ACE2检测的双抗体夹心ELISA方法,可用于禽类样品中ACE2的快速定量检测。 展开更多
关键词 鸭 血管紧张素转换酶2(ACE2) 抗体制备 双抗体夹心酶联免疫吸附试验 定量检测
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匹拉米洞半定量检测法与双抗体夹心法检测粪便隐血的比较
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作者 陈剑 张大莲 +2 位作者 张毅 周利 叶丹 《云南医药》 CAS 2023年第2期77-79,共3页
目的探讨FOBpsm和IFOB两种方法检测粪便隐血的灵敏度和特异性及抗干扰能力。方法分别采用两种方法分别对512例消化科患者标本进行隐血检测,同时测定已知Hemoglobin,Hb的红细胞悬液以及在粪便中加入动物血、菠菜、铁剂、铋剂、维生素C等... 目的探讨FOBpsm和IFOB两种方法检测粪便隐血的灵敏度和特异性及抗干扰能力。方法分别采用两种方法分别对512例消化科患者标本进行隐血检测,同时测定已知Hemoglobin,Hb的红细胞悬液以及在粪便中加入动物血、菠菜、铁剂、铋剂、维生素C等干扰物质对两种方法检测的灵敏度、特异性、检测上、下限以及抗干扰能力进行分析。结果FOBpsm的阳性率为44.1%,IFOB的阳性率为77.7%,P<0.005,差异具有统计学意义。FOBpsm检测Hb的浓度范围:20μg/mL>100mg/mL。IFOB检测Hb的浓度范围:1μg/mL~10mg/mL。IFOB检测加入各种干扰物质的粪便标本时均能准确排除干扰,FOBpsm则出现假阳性或假阴性结果。结论IFOB的灵敏度、特异性及抗干扰能力均优于FOBpsm。但是,FOBpsm能够避免钩状效应,两种方法应互相应用弥补方法学的不足。 展开更多
关键词 匹拉米洞半定量检测法 双抗体夹心法 粪便隐血
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双抗原夹心法与间接酶联免疫吸附试验法检测丙型肝炎病毒抗体的应用效果分析 被引量：3
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作者 胡瑞 《实用医技杂志》 2020年第3期315-317,共3页
目的探讨双抗原夹心法与间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测丙型肝炎病毒抗体的应用效果,旨在分析两种检测方法的灵敏度及特异度,为血液筛查提供参考。方法选取2016年3月至2018年3月我县无偿献血者血液标本1200例作为研究对象,其中抗丙... 目的探讨双抗原夹心法与间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测丙型肝炎病毒抗体的应用效果,旨在分析两种检测方法的灵敏度及特异度,为血液筛查提供参考。方法选取2016年3月至2018年3月我县无偿献血者血液标本1200例作为研究对象,其中抗丙型肝炎抗体(抗-HCV)阴性标本1123例,抗-HCV阳性标本77例。采用双抗原夹心法与间接ELISA法分别进行检测,记录检测结果与丙型肝炎病毒核酸符合率,并进行统计学分析。结果77例抗-HCV阳性标本中,双抗原夹心法阳性检出率96.1%(74/77)高于间接ELISA法87.0%(67/77),差异具有统计学意义(P<0.05),双抗原夹心法检测及间接ELISA法分别有3份和10份假阴性样本出现;双抗原夹心法检测准确度、灵敏度、特异度均高于间接ELISA法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在检测丙型肝炎病毒抗体的方法中,相比于间接ELISA法,双抗原夹心ELISA法的检测结果较为理想,能够有效提高其阳性检出率、准确度、灵敏度及特异度。 展开更多
关键词 肝炎病毒 肝炎 抗体 丙型 双抗原夹心法 酶联免疫吸附测定法
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