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多合一免疫磁珠全自动净化高效液相色谱法测定辣椒粉中5种真菌毒素
1
作者 李宗旺 叶金 +2 位作者 李丽 管骁 王松雪 《农产品质量与安全》 2024年第2期55-61,共7页
建立了一种基于多合一免疫磁珠自动净化,采用高效液相色谱同时测定辣椒粉中4种黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A含量的方法。样品经乙腈-水涡旋振荡提取后,经多合一免疫磁珠净化,利用高效液相色谱同时测定5种真菌毒素。复杂基质辣椒粉样品经多... 建立了一种基于多合一免疫磁珠自动净化,采用高效液相色谱同时测定辣椒粉中4种黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A含量的方法。样品经乙腈-水涡旋振荡提取后,经多合一免疫磁珠净化,利用高效液相色谱同时测定5种真菌毒素。复杂基质辣椒粉样品经多合一免疫磁珠对多种毒素同时净化,实现了前处理的自动化、步骤简化,提高了多毒素的检测效率。在优化条件下,辣椒粉阴性样品的不同水平的加标回收率在99.2%~119%,相对标准偏差≤4.75%。通过对本方法和免疫亲和柱净化法进行配对t检验差异分析及相关性拟合,结果表明这两种方法相关性良好,无显著差异。本方法的检出限为0.05~0.25μg/kg,定量限为0.16~0.84μg/kg,可满足辣椒粉中4种黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A的同时检测需求。 展开更多
关键词 免疫磁珠 自动净化 黄曲霉毒素 赭曲霉毒素A 辣椒粉
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基于全自动免疫磁珠净化技术快速测定中药材中4种黄曲霉毒素
2
作者 黄晓静 陈素云 +5 位作者 周恒 王江 果旗 王雄 胡青 季申 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期622-629,共8页
基于全自动免疫磁珠净化前处理技术,建立了适用于多种中药材基质中4种黄曲霉毒素的快速测定方法。中药材中的黄曲霉毒素经乙腈-水(9∶1)提取后,采用免疫磁珠自动富集净化后,由0.5%乙酸甲醇洗脱后定容;经Inertsil ODS-3 C18柱(250 mm... 基于全自动免疫磁珠净化前处理技术,建立了适用于多种中药材基质中4种黄曲霉毒素的快速测定方法。中药材中的黄曲霉毒素经乙腈-水(9∶1)提取后,采用免疫磁珠自动富集净化后,由0.5%乙酸甲醇洗脱后定容;经Inertsil ODS-3 C18柱(250 mm×4.6 mm,5µm)分离,以乙腈-甲醇-水为流动相等度洗脱,采用高效液相色谱-荧光检测器(HPLC-FLD)测定。以5种易污染黄曲霉毒素的中药材基质进行方法学验证。结果表明该方法的线性关系良好,相关系数(r^(2))均达到0.9999;检出限为0.06~0.2µg·kg^(-1),定量下限为0.12~0.40µg·kg^(-1);不同基质中的平均回收率为71.9%~116%,相对标准偏差为0.10%~6.9%;在18 min内可完成24批样品的净化,比免疫亲和柱法的检测效率提高近85%。该方法快速、准确,通用性强,可用于多种中药材中4种黄曲霉毒素的批量快速测定。 展开更多
关键词 全自动免疫磁珠 快速测定 中药材 黄曲霉毒素 高效液相色谱
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烟曲霉菌免疫磁珠富集方法建立研究
3
作者 周小合 谭红 +3 位作者 李宝花 张润玲 吴祥林 夏成静 《医学理论与实践》 2024年第7期1205-1208,共4页
目的:建立免疫磁珠富集烟曲霉菌的实施方案。方法:通过对免疫磁珠加入量、免疫磁珠和烟曲霉菌液孵育时间的探究,制定了免疫磁珠富集烟曲霉菌的最佳实施办法,同时对此富集技术方法学进行敏感性、特异性的验证。结果:当免疫磁珠加入量为10... 目的:建立免疫磁珠富集烟曲霉菌的实施方案。方法:通过对免疫磁珠加入量、免疫磁珠和烟曲霉菌液孵育时间的探究,制定了免疫磁珠富集烟曲霉菌的最佳实施办法,同时对此富集技术方法学进行敏感性、特异性的验证。结果:当免疫磁珠加入量为100μL、免疫磁珠与烟曲霉菌液孵育时间30min,免疫磁珠富集烟曲霉菌的效果最好,与常规检测方法比较,提高了检测敏感性,同时具有强的特异性。结论:经探究建立了免疫磁珠富集烟曲霉菌的最佳实验方案。 展开更多
关键词 免疫磁珠 烟曲霉菌 富集条件 敏感性 特异性
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免疫磁珠高通量自动净化-超高效液相色谱法快速测定饲料中玉米赤霉烯酮 被引量：1
4
作者 王蒙 陈金男 +5 位作者 叶金 李丽 王松雪 张颖 吴宇 刘洪美 《中国粮油学报》 CSCD 北大核心 2023年第9期29-34,共6页
采用免疫磁珠净化饲料原料及其产品中的玉米赤霉烯酮,实现玉米赤霉烯酮的自动富集、清洗和洗脱,结合超高效液相色谱对玉米赤霉烯酮进行分析测试。本文对饲料样品稀释液进行了优化。根据3倍信噪比的峰响应值,本方法玉米赤霉烯酮的检出限... 采用免疫磁珠净化饲料原料及其产品中的玉米赤霉烯酮,实现玉米赤霉烯酮的自动富集、清洗和洗脱,结合超高效液相色谱对玉米赤霉烯酮进行分析测试。本文对饲料样品稀释液进行了优化。根据3倍信噪比的峰响应值,本方法玉米赤霉烯酮的检出限为4.5μg/kg,定量限为15.0μg/kg,在10~500 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数(R^(2))为0.99993。玉米赤霉烯酮在鸡饲料和猪饲料样品中的加标回收率为92.6%~112.9%,相对标准偏差为1.0%~8.8%。对同一饲料基质进行连续4 d同一浓度的加标实验,回收率为97.0%~98.9%,日间精密度在5.7%~5.9%。与免疫亲和柱法进行比较,检测了19种饲料样品,t检验显示方法与免疫亲和柱法无显著性差异。免疫磁珠自动净化法可同时净化24个样品,无需人员手动操作,减少实验误差,提高检测效率。 展开更多
关键词 免疫磁珠 自动净化 超高效液相色谱 饲料 玉米赤霉烯酮
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沙门菌PhoN蛋白单克隆抗体及其免疫磁珠的制备
5
作者 孟闯 高杨 +5 位作者 刘钧 徐双媛 丁睿清 康喜龙 潘志明 焦新安 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期287-294,共8页
为制备针对沙门菌Pho N蛋白的单克隆抗体(MAb),并以其制备沙门菌的免疫磁珠,本研究构建了重组原核表达质粒p Cold I-pho N和p GEX-6P-1-pho N,利用大肠杆菌系统表达并通过亲和层析纯化了鼠伤寒沙门菌重组蛋白His-Pho N和GST-Pho N,分别... 为制备针对沙门菌Pho N蛋白的单克隆抗体(MAb),并以其制备沙门菌的免疫磁珠,本研究构建了重组原核表达质粒p Cold I-pho N和p GEX-6P-1-pho N,利用大肠杆菌系统表达并通过亲和层析纯化了鼠伤寒沙门菌重组蛋白His-Pho N和GST-Pho N,分别作为免疫原和筛选抗原,利用B淋巴细胞杂交瘤技术,经间接ELISA方法筛选获得5株能稳定分泌Pho N蛋白MAb的杂交瘤细胞株,分别为8H2、11E5、4B2、8F2、3B2。采用亚类鉴定试剂盒、间接ELISA和western blot方法分别鉴定各MAb的亚型、效价及特异性结合沙门菌Pho N蛋白的能力,结果显示,5株MAb的亚型均为Ig G2a,测定其效价达1∶4096000以上,均能特异性结合His-PhoN和GST-Pho N,而不与His-OmpC、His-OmpF蛋白反应,表明MAb特异性较好。选取4B2 MAb进一步分析其对不同血清型沙门菌和非沙门菌的特异性,western blot结果显示4B2 MAb仅特异性识别不同血清型沙门菌,而不与大肠杆菌、志贺杆菌、空肠弯曲菌和单核细胞增生李斯特菌反应;以全菌作为包被抗原的间接ELISA检测结果也显示4B2 MAb可特异性结合沙门菌。将4B2 MAb偶联Fe3O4羧基磁性纳米微球制备免疫磁珠,通过菌落计数分析其对不同血清型沙门菌和非沙门菌的捕获效率,结果显示该免疫磁珠对鼠伤寒等5种不同血清型沙门菌的捕获率达70%以上,对非沙门菌捕获率低于7%。本研究制备了可特异性识别不同血清型沙门菌的Pho N蛋白MAb及其免疫富集磁珠,为样品的快速预处理和沙门菌检测提供了重要生物材料。 展开更多
关键词 沙门菌 Pho N蛋白 单克隆抗体 特异性 免疫磁珠
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免疫磁珠荧光染色法在痰液结核分枝杆菌检测中的应用
6
作者 吴殿水 王新芳 +3 位作者 朱妍妍 袁相恋 党光辉 王嘉 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第2期96-101,共6页
目的建立免疫磁珠(immunomagnetic beads,IMB)荧光染色法并评估其在临床痰液标本结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)检测的应用价值。方法利用IMB富集纯化结核分枝杆菌,利用自动染色机和自动显微镜智能软件扫描系统进行荧光... 目的建立免疫磁珠(immunomagnetic beads,IMB)荧光染色法并评估其在临床痰液标本结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)检测的应用价值。方法利用IMB富集纯化结核分枝杆菌,利用自动染色机和自动显微镜智能软件扫描系统进行荧光染色及结果分析,建立结核分枝杆菌IMB荧光染色法。用实验室培养的标准菌株评估该方法的检测灵敏度和特异度。同时选取2021年5月~2022年2月在山东省第二人民医院就诊的145例疑似肺结核患者作为临床研究对象,取每例患者的痰液标本,选用萋-尼氏(Ziehl-Neelsen,Z-N)抗酸染色法、IMB荧光染色法和BACTEC 960系统培养法检测结核分枝杆菌感染情况,比较三种方法的阳性检出率、灵敏度、特异度和准确率,验证IMB荧光染色法在诊断结核分枝杆菌感染中的优势和临床应用价值。结果IMB荧光染色法的最低结核分枝杆菌检测量是30 CFU/ml,在标本含菌量≥30 CFU/ml时,该方法学的敏感度为100%;而在10 CFU/ml时则降到56%,该方法检测的特异度为100%。在利用临床标本检测中,IMB荧光染色法、Z-N抗酸染色法和培养法对于结核分枝杆菌的阳性检出率分别为73.10%,40.69%和78.62%;IMB荧光染色法的阳性率明显高于传统Z-N抗酸染色法的阳性率,差异具有统计学意义(χ^(2)=31.0599,P<0.05);略低于培养法,差异无统计学意义(χ^(2)=1.2052,P>0.05)。IMB荧光染色法在临床标本检测中的灵敏度、特异度和准确率分别为92.98%,100.00%和94.48%,明显高于Z-N抗酸染色法的灵敏度、特异度和准确率(47.37%,83.87%和55.17%),差异具有统计学意义(χ^(2)=56.6647,5.4386,P<0.05;59.4792,均P<0.05)。结论研究建立的IMB荧光染色法优于目前应用的其他染色法,可为结核病早期诊断提供新方法。 展开更多
关键词 免疫磁珠 免疫磁珠荧光染色法 萋-尼氏抗酸染色法 结核分枝杆菌
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高通量自动化免疫磁珠净化-超高效液相色谱法检测饲料中4种黄曲霉毒素 被引量：3
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作者 陈金男 王蒙 +5 位作者 董泽民 叶金 李丽 吴宇 刘洪美 王松雪 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期504-512,共9页
黄曲霉毒素(AFT)是一种毒性极强的剧毒物质,具有致癌性。饲料原料及产品在生产、运输和储藏等过程存在被黄曲霉毒素污染的风险。该文建立了高通量自动化免疫磁珠净化-超高效液相色谱法测定饲料中4种黄曲霉毒素(黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1)... 黄曲霉毒素(AFT)是一种毒性极强的剧毒物质,具有致癌性。饲料原料及产品在生产、运输和储藏等过程存在被黄曲霉毒素污染的风险。该文建立了高通量自动化免疫磁珠净化-超高效液相色谱法测定饲料中4种黄曲霉毒素(黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))、黄曲霉毒素B_( 2)(AFB_(2))、黄曲霉毒素G_(1)(AFG_(1))和黄曲霉毒素G 2(AFG_(2)))的分析方法。饲料样品用乙腈-水(70∶30,v/v)提取,经免疫磁珠自动净化后,使用超高效液相色谱进行分析测试。对磁珠与抗体的偶联比例、免疫磁珠与黄曲霉毒素的反应时间、样品提取液和稀释液等关键实验条件进行了优化,考察了不同饲料样品的净化效果。在优化条件下,豆粕、玉米干酒糟及其可溶物、猪饲料和鸡饲料等4种常见饲料样品在3个水平(5、20和40μ[g/kg,以AFB_(1)计)下的加标回收率在91.1%~119.4%之间,相对标准偏差小于6.9%;日间精密度为4.5%~7.5%,该方法具有良好的重复性。采用该法检测质量控制样品中AFB_(1)的含量,平均值为18.6μ[g/kg(n=3),准确度为110.3%,测试结果满意。使用该法测试了21种随机购买的饲料样品,其中有4份样品测出含有AFB_(1)。本方法所使用的自动净化系统能够自动净化饲料中的4种黄曲霉毒素,并实现样品的批量处理,每批可最多同时净化24个样品,批处理总用时约为30 min;超高效液相色谱法分析速度快,准确性高,可用于检测饲料中黄曲霉毒素的含量。 展开更多
关键词 免疫磁珠 自动净化 超高效液相色谱 黄曲霉毒素 饲料
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基于免疫磁珠净化间接竞争酶联免疫吸附试验检测氟喹诺酮类药物 被引量：1
8
作者 黄婧洁 李苗 +4 位作者 陈莹娴 钟雅兰 张婷婷 姜廷超男 李建成 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期766-778,共13页
本研究旨在建立一种基于免疫磁珠进行分离、富集和净化前处理,检测鸡肉、鸡肝和鱼肉中氟喹诺酮类药物残留的间接竞争酶免疫吸附试验(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,icELISA)的研究方法。通过对合成免疫磁珠... 本研究旨在建立一种基于免疫磁珠进行分离、富集和净化前处理,检测鸡肉、鸡肝和鱼肉中氟喹诺酮类药物残留的间接竞争酶免疫吸附试验(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,icELISA)的研究方法。通过对合成免疫磁珠及免疫磁珠净化过程中单克隆抗体添加量、偶联时间、缓冲液pH、抗原添加量、抗原捕获时间、温度及包被条件等进行优化,初步建立了基于免疫磁珠净化的icELISA检测方法。结果显示:1)在1 mg的磁珠中,沙拉沙星(sarafloxacin,SAR)单克隆抗体最佳偶联量为15μg,偶联时间60 min,pH为4.4;2)最佳抗原添加量为1 ng·mL^(-1),捕获时间40 min,缓冲液为0.01 mol·L^(-1)PBS,IC50为0.73 ng·mL^(-1),线性范围为1.0~3.2 ng·mL^(-1);3)氟喹诺酮类药物在鸡肉、鸡肝、鱼肉的检测限均不超过1.33、2.17、2.31μg·kg^(-1),回收率为76.83%~98.70%,批内变异系数批间变异系数均不超过15%,经验证,鸡肉样本检测结果与高效液相色谱法(HPLC)结果一致。结果表明,与传统仪器检测方法相比,该方法提高了检测氟喹诺酮类药物的简便性、选择性以及检测效率,为氟喹诺酮类药物的残留检测提供了新思路。 展开更多
关键词 免疫磁珠富集 氟喹诺酮类药物 单克隆抗体 间接竞争酶联免疫吸附试验(icELISA)
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单增李斯特菌单克隆抗体制备及免疫磁珠分离方法的建立
9
作者 叶方钰 谢雨芮 +4 位作者 王权 刘爽 张海洋 韩先干 蒋蔚 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第9期93-99,共7页
免疫磁珠技术操作简单、快速高效,目前已广泛应用于细菌的快速分离纯化等领域,本研究旨在建立一种捕获率高、特异性好的单增李斯特菌免疫磁珠分离方法。首先通过杂交瘤技术制备出8株抗单增李斯特菌单克隆抗体,效价均达到1∶1024000,且... 免疫磁珠技术操作简单、快速高效,目前已广泛应用于细菌的快速分离纯化等领域,本研究旨在建立一种捕获率高、特异性好的单增李斯特菌免疫磁珠分离方法。首先通过杂交瘤技术制备出8株抗单增李斯特菌单克隆抗体,效价均达到1∶1024000,且特异性较好。利用效价最高的腹水6-E6制备单增李斯特菌免疫磁珠,并对单增李斯特菌免疫磁珠最适条件进行优化,结果选择MEST(7.0)为偶联缓冲液、磁珠直径为750 nm、免疫磁珠添加量为0.4 mg、捕获时间45 min、单增李斯特菌含量在1×10^(4)CFU/mL时,免疫磁珠捕获率最高可达76.29%。在模拟牛奶样品中免疫磁珠特异性捕获率可达到67.71%。该分离方法可快速且特异地分离单增李斯特菌,操作简便,为快速分离食品中的单增李斯特菌并实现快速检测提供了技术支持。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 单克隆抗体 免疫磁珠 捕获率
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全自动免疫磁珠法与免疫亲和柱法测定食用油中黄曲霉毒素B1的对比研究 被引量：1
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作者 曹晶晶 刘莹 +3 位作者 王雅楠 赵胜男 毋修远 高海军 《粮油食品科技》 CAS CSCD 2023年第3期153-158,共6页
采用全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化的前处理方法,结合超高效液相色谱法对不同食用油中黄曲霉毒素B1进行定量检测,并对两种前处理方法结果准确性、加标回收率、检测时间进行了对比。结果表明:全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化... 采用全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化的前处理方法,结合超高效液相色谱法对不同食用油中黄曲霉毒素B1进行定量检测,并对两种前处理方法结果准确性、加标回收率、检测时间进行了对比。结果表明:全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化测定植物油标准物质,结果分别为15.59μg/kg和14.64μg/kg,均在标准值范围内;对不同种类食用油添加不同量的黄曲霉毒素B1标准物质,加标回收率均在88%~110%之间,相对标准偏差均在5%以内。采用Bland-Altman法对全自动免疫磁珠净化法和免疫亲和柱净化法进行差异分析,结果显示这两种净化方法的差异在可接受范围内。两种方法在净化和富集食用油中黄曲霉毒素B1均可满足实验要求,可以互相代替使用。通过检测时间对比,全自动免疫磁珠净化搭配使用真菌毒素全自动净化仪前处理方法可同时处理多个样品,平均一个样品净化时间小于3 min,处理时间短、实验效率更高。 展开更多
关键词 全自动免疫磁珠 免疫亲和柱 超高效液相色谱法 黄曲霉毒素B1 食用油
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基于免疫磁珠法的不同筛选方案对胎儿有核红细胞富集效果的比较 被引量：1
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作者 唐苗苗 宾雅棣 +2 位作者 赵蓝波 李奇灵 孙超 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期155-161,共7页
目的:将密度梯度离心(density gradient centrifugation,DGC)与免疫磁珠法(magnetic-activated cell sorting,MACS)相结合,应用4种不同的筛选方案,对脐血中的胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells,FNRBC)进行分离,评估不同... 目的:将密度梯度离心(density gradient centrifugation,DGC)与免疫磁珠法(magnetic-activated cell sorting,MACS)相结合,应用4种不同的筛选方案,对脐血中的胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells,FNRBC)进行分离,评估不同策略富集FNRBC的效果。方法:对10例脐血标本(12 mL/例)按4种不同方案进行筛选:DGC;DGC+MACS阴性筛选(CD45^(-));DGC+MACS阳性筛选(CD71^(+));DGC+MACS阴性/阳性筛选(CD45^(-)/CD71^(+))。通过细胞计数板计数,K-B染色后显微镜下人工FNRBC计数,从获得总细胞量、FNRBC量和FNRBC比例经t检验后评估不同方案富集FNRBC的效果。结果:(1)与其他3组相比,DGC方案可获得的总细胞量(0.95×10^(7)/mL)最多,FNRBC数量(39.87/mL)最多,FNRBC比例最低(0.004‰),差异均具有统计学意义(均P=0.000);(2)与其他3组相比,DGC+MACS阴性/阳性筛选(CD45^(-)/CD71^(+))组合法所获得的总细胞量最少(0.81×10^(6)/mL),获得FNRBC数量也最少(7.47/mL),差异均具有统计学意义(均P=0.000);(3)DGC+MACS单种抗体筛选方案中,DGC+MACS阳性筛选(CD71^(+))所获得总细胞量为1.99×10^(6)/mL,较DGC+MACS阴性筛选(CD45^(-))(2.56×10^(6)/mL)低,差异有统计学意义(P=0.000),而两方案所得FNRBC数量之间差异无统计学意义(P=0.910);(4)DGC+MACS阴性筛选(CD45^(-)),DGC+MACS阳性筛选(CD71^(+)),DGC+MACS阴性/阳性筛选(CD45^(-)/CD71^(+))所得FNRBC比例之间差异无统计学意义(P=0.030、0.050、0.210)。结论:DGC方案获得FNRBC数量最多;DGC+MACS阴性/阳性筛选(CD45^(-)/CD71^(+))方案去除混杂细胞能力最强。在不降低获取目标细胞数量基础上,DGC+MACS阳性筛选(CD71^(+))方案富集FNRBC效果最好。 展开更多
关键词 胎儿有核红细胞 密度梯度离心 免疫磁珠筛选
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微小免疫磁珠法制备神经干细胞治疗脊髓损伤的动物实验研究
12
作者 田振 吴文涛 +1 位作者 陈锦鸿 娄朝晖 《河南医学研究》 CAS 2023年第3期424-430,共7页
目的 通过微小免疫磁珠法制备神经干细胞(NSC),观察其治疗脊髓损伤(SCI)大鼠的效果。方法 将微小免疫磁珠分离纯化出神经巢蛋白(nestin)阳性的NSC移植到SCI的大鼠模型中。将30只Wister雌性大鼠随机分为实验组、空白对照组、培养液组,每... 目的 通过微小免疫磁珠法制备神经干细胞(NSC),观察其治疗脊髓损伤(SCI)大鼠的效果。方法 将微小免疫磁珠分离纯化出神经巢蛋白(nestin)阳性的NSC移植到SCI的大鼠模型中。将30只Wister雌性大鼠随机分为实验组、空白对照组、培养液组,每组10只。实验组接受NSC移植,培养液组接受培养液注射,空白对照组接受生理盐水注射。采用运动能力评定量表(BBB)系统评估SCI后、NSC移植后大鼠运动能力。结果 术后10周取材,肉眼可见对照组损伤节段脊髓及其周围组织破坏程度高于实验组,空白对照组和培养液组肉眼下观察无明显区别。SCI模型构建14 d后3组大鼠的BBB评分符合SCI。实验组28~70 d的BBB评分高于空白对照组、培养液组(P<0.05);空白对照组和培养液组BBB评分全程组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组大鼠28~70 d在斜板上停留5 s的平均最大角度均大于空白对照组和培养液组(P<0.05);空白对照组和培养液组大鼠28~70 d在斜板上停留5 s的平均最大角度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 采用微小免疫磁珠法制成的NSC移植到SCI大鼠内,可促进大鼠运动能力恢复。 展开更多
关键词 微小免疫磁珠 脊髓损伤 神经干细胞 移植
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免疫磁珠分离技术对白色念珠菌所致阴道炎的检测价值分析
13
作者 姚琼 徐岷 《国际医药卫生导报》 2023年第14期1958-1961,共4页
目的分析免疫磁珠分离技术对白色念珠菌所致阴道炎的临床检测价值。方法选取2021年6月至2023年1月于郑州人民医院接受阴道分泌物检查的190名女性作为研究对象,将102例白色念珠菌阴道炎患者列为病例组,其余88例行常规妇科检查的健康志愿... 目的分析免疫磁珠分离技术对白色念珠菌所致阴道炎的临床检测价值。方法选取2021年6月至2023年1月于郑州人民医院接受阴道分泌物检查的190名女性作为研究对象,将102例白色念珠菌阴道炎患者列为病例组,其余88例行常规妇科检查的健康志愿者列为对照组。以阴道分泌物培养结果为金标准,采用湿片镜检法及免疫磁珠分离技术检测研究对象阴道分泌物,比较不同检测技术的检出情况及诊断效能。采用χ^(2)检验。结果免疫磁珠分离技术对于白色念珠菌所致阴道炎的检出率、诊断准确率、灵敏度、特异度均高于湿片镜检法[86.27%(88/102)比68.63%(70/102)、95.26%(181/190)比81.58%(155/190)、86.27%(88/102)比68.63%(70/102)、94.32%(83/88)比85.23%(75/88);χ^(2)=8.908、9.139、8.908、4.501,P=0.003、0.003、0.003、0.034]。结论免疫磁珠分离技术可有效检测阴道炎患者感染类型,对提升白色念珠菌所致阴道炎的诊断准确率和指导临床治疗均有重要意义。 展开更多
关键词 白色念珠菌 阴道炎 湿片镜检法 免疫磁珠分离技术 检测价值
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鼠伤寒沙门菌免疫磁珠的构建及应用效果评价
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作者 李享 李磊 +2 位作者 肖爽 左润楠 王真 《北京农学院学报》 2023年第1期72-75,81,共5页
【目的】制备鼠伤寒沙门菌高免血清并纯化抗体,构建免疫磁珠,进行吸附效果评价,为建立鼠伤寒沙门菌快速检测方法奠定基础。【方法】利用试验兔制备高免血清,检测效价后纯化提取IgG抗体,纯化后的抗体采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二... 【目的】制备鼠伤寒沙门菌高免血清并纯化抗体,构建免疫磁珠,进行吸附效果评价,为建立鼠伤寒沙门菌快速检测方法奠定基础。【方法】利用试验兔制备高免血清,检测效价后纯化提取IgG抗体,纯化后的抗体采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺方法与四氧化三铁磁性纳米颗粒偶联,制备出鼠伤寒沙门菌免疫磁珠。利用抗原抗体反应原理,通过免疫磁珠对样品中的鼠伤寒沙门菌进行富集分离,将鼠伤寒沙门菌捕获到磁珠表面,达到检测鼠伤寒沙门菌的目的。【结果】制备出的血清效价达1∶51 200,纯化后的抗体特异性强,仅与鼠伤寒沙门菌有凝集反应,与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌均无凝集反应;制备的免疫磁珠能够富集奶样样品、肉样样品与蛋黄样品中的鼠伤寒沙门菌,灵敏度为101CFU/mL。【结论】该研究制备的鼠伤寒沙门菌免疫磁珠,能够有效富集各种样品基质中的鼠伤寒沙门菌,有望用于鼠伤寒沙门菌快速检测方法的建立。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 免疫磁珠 检测方法
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免疫磁珠结合显色平板快速检测婴儿配方奶粉中阪崎克罗诺杆菌
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作者 王磊 张洁 +1 位作者 张文馨 崔晓雅 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2023年第14期187-191,204,共6页
该研究利用羧基化磁珠偶联兔多克隆抗体,制备特异性免疫磁珠,并优化制备条件,然后与显色培养基联用,建立免疫磁珠-显色平板检测方法,用于富集分离婴儿奶粉中的阪崎克罗诺杆菌。结果表明,磁珠与抗体的最佳偶联温度37℃、偶联时间2.0 h,1... 该研究利用羧基化磁珠偶联兔多克隆抗体,制备特异性免疫磁珠,并优化制备条件,然后与显色培养基联用,建立免疫磁珠-显色平板检测方法,用于富集分离婴儿奶粉中的阪崎克罗诺杆菌。结果表明,磁珠与抗体的最佳偶联温度37℃、偶联时间2.0 h,1 mg磁珠的最佳抗体添加量为200μg,饱和偶联量为182.77μg。制得的免疫磁珠,捕获目标菌的浓度范围为10~2~10~7 CFU/mL,捕获率为68.4%~82.4%,与非目标菌反应率低于10%。检测方法应用于模拟污染样品,在目标菌浓度10~2~10~5 CFU/mL时,捕获率为66.2%~71.5%。相比传统方法,该方法的检测周期缩短了2~3 d。 展开更多
关键词 阪崎克罗诺杆菌 免疫磁珠 显色培养基 快速检测 婴儿配方食品
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免疫磁珠法分离培养小鼠原代骨骼肌微血管内皮细胞及鉴定
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作者 刘美杰 张佳欣 +6 位作者 周嘉恒 安冏 白浩淼 胡旭晖 李沛凌 杨红燕 李嘉 《心脏杂志》 CAS 2023年第2期136-140,共5页
目的旨在建立一种有效分离、培养、扩增小鼠原代骨骼肌微血管内皮细胞(MMECs)的方法。方法采用胶原酶消化法、差速贴壁法以及免疫磁珠法分离纯化骨骼肌微血管内皮细胞,贴壁培养进行体外扩增。利用相差显微镜观察培养细胞的形态、MTT法... 目的旨在建立一种有效分离、培养、扩增小鼠原代骨骼肌微血管内皮细胞(MMECs)的方法。方法采用胶原酶消化法、差速贴壁法以及免疫磁珠法分离纯化骨骼肌微血管内皮细胞,贴壁培养进行体外扩增。利用相差显微镜观察培养细胞的形态、MTT法测定细胞的生长情况、CD31免疫荧光染色对其表型进行鉴定、流式细胞术鉴定细胞纯度。结果实验成功获取小鼠骨骼肌微血管内皮细胞,小鼠原代骨骼肌微血管内皮细胞在培养24 h后迅速贴壁,(3~6)d内迅速生长,呈梭形,单层排列,培养(6~8)d可长满培养皿底,呈铺路石样排布。MTT法测得培养第2代小鼠骨骼肌微血管内皮细胞的生长曲线呈倒“S”形。流式细胞术检测经差速贴壁联合磁珠纯化的CD31+的MMECs细胞可达97%以上。结论成功建立了一种简单、高效的分离小鼠骨骼肌微血管内皮细胞的方法,为开展与骨骼肌微血管内皮细胞相关研究提供了良好的实验方法和技术手段。 展开更多
关键词 细胞分离 原代培养 骨骼肌微血管内皮细胞 肌病 免疫磁珠
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全自动免疫磁珠法与免疫亲和柱法测定玉米粉中黄曲霉毒素B_(1)的对比研究
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作者 顾雨熹 刘金阳 +5 位作者 刘冬雨 张学峰 张宇冲 廖子龙 王锦 陈晋莹 《粮食储藏》 2023年第5期31-35,共5页
采用全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化的前处理方法,结合超高效液相色谱法对玉米粉中黄曲霉毒素B_(1)进行定量检测,并对两种前处理方法结果准确性、加标回收率、检测时间进行了对比。结果表明:对玉米粉中添加不同量的黄曲霉毒素B_(1... 采用全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化的前处理方法,结合超高效液相色谱法对玉米粉中黄曲霉毒素B_(1)进行定量检测,并对两种前处理方法结果准确性、加标回收率、检测时间进行了对比。结果表明:对玉米粉中添加不同量的黄曲霉毒素B_(1)标准物质,使用免疫亲和柱净化法的加标回收率在80.96%~100.42%之间,平均回收率为88.04%,标准偏差为0.052,变异系数为5.90%;使用全自动免疫磁珠净化法的加标回收率在90.00%~108.33%之间,平均回收率为100.20%,标准偏差为0.046,变异系数为4.57%。采用配对t检验评价两种净化方式对检测结果一致性的影响,结果显示t值小于理论t_(0.05(32))的值,P>0.05,结果显示这两种净化方法的差异在可接受范围内。两种方法在净化玉米粉中黄曲霉毒素B_(1)中可以满足实验要求。全自动免疫磁珠净化搭配使用真菌毒素全自动净化仪前处理方法可同时处理多个样品,平均一个样品净化时间小于3 min,处理时间短、实验效率更高。 展开更多
关键词 全自动免疫磁珠 免疫亲和柱 超高效液相色谱法 黄曲霉毒素B_(1) 玉米粉
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不同粒径的免疫磁珠对食源性致病菌捕获效率的影响 被引量：3
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作者 李静雯 杜美红 +3 位作者 杨寅 陈婷 陈尔凝 赵瑞雪 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期46-52,共7页
粒径是影响免疫磁珠捕获效率的关键因素。选取微米级(1μm)和亚微米级(300 nm)超顺磁珠,偶联沙门氏菌多克隆抗体制备免疫磁珠。通过流式细胞仪、分光光度计分别测定抗体偶联量和磁回收率。结果表明,与微米级免疫磁珠相比,亚微米级免疫... 粒径是影响免疫磁珠捕获效率的关键因素。选取微米级(1μm)和亚微米级(300 nm)超顺磁珠,偶联沙门氏菌多克隆抗体制备免疫磁珠。通过流式细胞仪、分光光度计分别测定抗体偶联量和磁回收率。结果表明,与微米级免疫磁珠相比,亚微米级免疫磁珠抗体偶联量较高,在缓冲液中磁回收率较高,因此捕获率较高(300 nm:55%,1μm:41%);在牛奶中磁回收率较低,导致捕获率明显降低(300 nm:15%,1μm:26%)。因此,需根据待测样本的体积与黏度来确定免疫磁珠的粒径。 展开更多
关键词 微米级免疫磁珠 亚微米级免疫磁珠 粒径 食源性致病菌 捕获效率 磁回收率
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集成免疫磁珠富集和免疫层析的黄曲霉毒素M_1快速检测法 被引量：28
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作者 黄艳梅 刘道峰 +4 位作者 赖卫华 熊勇华 杨万春 刘坤 王树颖 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期654-659,共6页
以喷涂了检测抗原黄曲霉毒素M1-BSA和驴抗鼠二抗形成检测线和质控线的硝酸纤维膜制备免疫层析试纸条,采用EDC/NHS法制备偶联了抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的免疫磁珠。免疫磁珠与待检样本混合,经捕获、磁分离后,浓缩重悬液直接用免疫层析... 以喷涂了检测抗原黄曲霉毒素M1-BSA和驴抗鼠二抗形成检测线和质控线的硝酸纤维膜制备免疫层析试纸条,采用EDC/NHS法制备偶联了抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的免疫磁珠。免疫磁珠与待检样本混合,经捕获、磁分离后,浓缩重悬液直接用免疫层析试纸条检测,首次建立了集浓缩样本与免疫层析于一体的黄曲霉毒素M1快速检测法。该方法用于检测原料乳中黄曲霉毒素M1,检出限为0.1μg/L,低于我国制定的黄曲霉毒素M1限量标准(0.5μg/L),与其它真菌毒素和原料乳中常检违法添加物无交叉反应,分析结果与酶联免疫吸附法(ELISA)结果一致。本方法适合现场快速检测原料乳中黄曲霉毒素M1。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素M1 免疫磁珠 富集 免疫层析 原料乳
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免疫磁珠富集结合酶联免疫吸附法检测酱油中黄曲霉毒素B_1 被引量：19
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作者 谢芳 赖卫华 +3 位作者 史爱武 邓省亮 熊勇华 余扬帆 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第18期165-169,共5页
将活泼酯法活化后的羧基化超顺磁珠与辛酸一硫酸铵法纯化的抗黄曲霉毒素B，单克隆抗体偶联，获得黄曲霉毒素B，（AFB。）免疫磁珠。比较不同粒径大小的免疫磁珠的富集效率，优化磁珠偶联抗体的条件以及富集AFB。的反应条件，初步建立了... 将活泼酯法活化后的羧基化超顺磁珠与辛酸一硫酸铵法纯化的抗黄曲霉毒素B，单克隆抗体偶联，获得黄曲霉毒素B，（AFB。）免疫磁珠。比较不同粒径大小的免疫磁珠的富集效率，优化磁珠偶联抗体的条件以及富集AFB。的反应条件，初步建立了以免疫磁珠富集结合酶联免疫吸附法检测酱油基质中的AFB，的方法。结果表明：酶联免疫吸附法在0．05～0．3gg／kg范围内具有良好的线性关系，相关系数为0．9842。在酱油中添加加1-7μg／kgAFB，的平均加标回收率为83．6％～104％，相对标准偏差为7．2％～13．7％。该方法具有快速简便、设备简单、灵敏度高、准确性好等优点，可很好地应用于酱油中的AFB，的快速检测。 展开更多
关键词 免疫磁珠 酱油 黄曲霉毒素B1 酶联免疫吸附法
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