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瞬时受体电位离子通道3在糖尿病肾病小鼠的表达及意义 被引量:1
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作者 于海霞 郭佳 +3 位作者 刘东伟 秦丽 余琦 刘章锁 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CSCD 北大核心 2017年第2期142-147,共6页
目的:研究瞬时受体电位离子通道3(TRPM3)在2型糖尿病肾病模型db/db小鼠肾组织的表达,以及高糖对人肾小管上皮细胞(HK2)和小鼠足细胞(MPC)TRPM3表达的影响。方法:(1)将20只雄性5周龄db/db小鼠随机分为两组,各10只。同窝出生的db/m小鼠作... 目的:研究瞬时受体电位离子通道3(TRPM3)在2型糖尿病肾病模型db/db小鼠肾组织的表达,以及高糖对人肾小管上皮细胞(HK2)和小鼠足细胞(MPC)TRPM3表达的影响。方法:(1)将20只雄性5周龄db/db小鼠随机分为两组,各10只。同窝出生的db/m小鼠作为正常对照组(n=20)。待db/db小鼠生长至10周龄和18周龄后取血、尿标本测定相关生化指标,留取肾组织。利用Western blot、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫组织化学方法,检测正常对照组(db/m小鼠)及不同周龄(10周、18周)db/db小鼠肾组织中TRPM3的表达水平及分布情况。(2)体外培养HK2和条件永生化MPC,分别按以下处理分组:对照组(D-葡萄糖5.6 mmol/L);甘露醇组(D-葡萄糖5.6 mmol/L+甘露醇24.4 mmol/L);高糖组(D-葡萄糖30 mmol/L),培养24h、48h、72h收获细胞,用Western blot和qRT-PCR检测细胞中TRPM3的表达。结果:(1)与db/m小鼠相比,db/db小鼠肾组织肾小管和肾小球中TRPM3的表达增多,差异有统计学意义(P<0.05);(2)与正常对照组相比,高糖组HK2和MPC中TRPM3的表达均增多,差异有统计学意义(P<0.05);结论:TRPM3可表达于糖尿病肾病小鼠肾脏组织的肾小管和肾小球中,且高血糖可诱导TRPM3在HK2细胞和MPC细胞的高表达;TRPM3可能参与了糖尿病肾病的发生发展。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 瞬时受体电位离子通道3 人肾小管上皮细胞 条件永生化的小鼠足细胞
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经典瞬时受体电位通道3在染料木黄酮抑制非小细胞肺癌H1299细胞增殖中的作用 被引量:1
2
作者 凌艺辉 王斌 +2 位作者 吴建军 蒋义国 杨巧媛 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期3220-3222,3223,共4页
目的旨在探讨经典瞬时受体电位(TRPC)通道(TRPC)3在染料木黄酮(Gen)抑制非小细胞肺癌细胞增殖中的作用。方法用MTT法检测癌细胞增殖活力,用荧光定量RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测TRPC通道表达水平,用1-油酰基-2-乙酰基-sn-丙三醇(OAG)诱... 目的旨在探讨经典瞬时受体电位(TRPC)通道(TRPC)3在染料木黄酮(Gen)抑制非小细胞肺癌细胞增殖中的作用。方法用MTT法检测癌细胞增殖活力,用荧光定量RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测TRPC通道表达水平,用1-油酰基-2-乙酰基-sn-丙三醇(OAG)诱导的钙内流实验检测TRPC3功能。结果在所有Gen给药浓度,H1299细胞增殖率均低于A549细胞(P<0.01)。H1299细胞的TRPC3 m RNA和蛋白表达都显著高于A549细胞(P<0.01)。用sh NC和sh C3i质粒转染H1299细胞,在Gen处理24、48、72 h三个时间点,sh C3i及Gen处理两个转染细胞的增殖率都低于sh NC细胞(P<0.01)。在24、48 h,sh C3i,sh NC+Gen和sh C3i+Gen三组间无差异,在72 h,sh C3i+Gen组低于sh C3i和sh NC+Gen组(P<0.05)。Gen对sh C3i细胞的增殖抑制率(9.9%)低于其对sh NC细胞的增殖抑制率(56%)。Gen处理不影响H1299细胞TRPC3蛋白表达,但在OAG诱导的钙内流检测,sh C3i细胞,Gen处理的sh NC及sh C3i细胞的瞬时钙内流均低于sh NC细胞,Gen对sh C3i细胞钙内流抑制作用低于其对sh NC细胞钙内流抑制作用。结论 Gen抑制TRPC3通道功能可能是其抑制H1299细胞增殖的作用机制。 展开更多
关键词 染料木黄酮 非小细胞肺癌 瞬时受体电位通道3 细胞增殖
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经典型瞬时受体电位通道与心肌肥厚 被引量:1
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作者 张静 武智晓 +2 位作者 易欣 马乐乐 黎明江 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2012年第2期165-167,共3页
经典型瞬时受体电位通道(TRPC)亚家族主要分布于心脏组织中,TRPC具有较小的电导,在多种物理和化学因素的刺激下,能传递长时程的钙信号。TRPC与心肌肥厚等心脏疾病的发展关系密切:TRPC1/3/6表达的增加可引起胞质内Ca2+浓度异常升高,进而... 经典型瞬时受体电位通道(TRPC)亚家族主要分布于心脏组织中,TRPC具有较小的电导,在多种物理和化学因素的刺激下,能传递长时程的钙信号。TRPC与心肌肥厚等心脏疾病的发展关系密切:TRPC1/3/6表达的增加可引起胞质内Ca2+浓度异常升高,进而激活钙调神经磷酸酶信号通路,从而介导心肌肥厚的发生、发展;TRPC3还参与心肌细胞凋亡等过程;心肌的兴奋-收缩藕联等活动也与TRPC4/5密切相关。干预TRPC活性的药物有可能成为新一代的抗心肌肥厚药物。 展开更多
关键词 心血管病学 心肌肥厚 综述 信号通路 典型瞬时受体电位通道 钙离子
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瞬时受体电位通道3基因多态性与代谢综合征相关组分的关系
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作者 金婕 刘道燕 +3 位作者 钟健 曹廷兵 杨华 祝之明 《重庆医学》 CAS CSCD 2006年第9期778-779,793,共3页
目的研究瞬时受体电位通道3(TRPC3)基因多态性与代谢综合征(MS)相关组分的关系。方法收集临床病例246例,其中MS患者95例,高血压(EH)患者99例和糖尿病(DM)患者52例,进行体检和生化检测,用聚合酶链反应-限制性片段多态性方法鉴别TRPC3基因... 目的研究瞬时受体电位通道3(TRPC3)基因多态性与代谢综合征(MS)相关组分的关系。方法收集临床病例246例,其中MS患者95例,高血压(EH)患者99例和糖尿病(DM)患者52例,进行体检和生化检测,用聚合酶链反应-限制性片段多态性方法鉴别TRPC3基因型,分析TRPC3基因多态性在MS组、EH组和DM组中的分布及与代谢综合征相关组分的关系。结果(1)TRPC3基因多态性GG、AA、A/G型在MS组、EH组和DM组中的分布频数无明显差异;(2)246例患者中GG型的空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、游离脂肪酸(FFA)明显高于AA和A/G。结论TRPC3的基因多态性在3组代谢疾病中的分布频数无明显差异;其中GG型可能与空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、游离脂肪酸(FFA)有更密切的关系。 展开更多
关键词 TRPC3 基因多态性 代谢综合征 瞬时受体电位通道3
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新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型中TRPC3通路介导的神经自噬研究
5
作者 薛梅 杨丽 +2 位作者 樊晓艳 李玲 钱金明 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期978-985,共8页
目的:探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型中TRPC3通路介导的神经自噬作用。方法:7日龄Sprague-Dawley(SD)雄性幼鼠随机分为4组,每组20只,分别为Sham组、HIBD组、HIBD+Vector组和HIBD+TRPC3组。HIBD+Vector组和HIBD+TRPC3组在诱导HIBD模型... 目的:探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型中TRPC3通路介导的神经自噬作用。方法:7日龄Sprague-Dawley(SD)雄性幼鼠随机分为4组,每组20只,分别为Sham组、HIBD组、HIBD+Vector组和HIBD+TRPC3组。HIBD+Vector组和HIBD+TRPC3组在诱导HIBD模型前24 h,分别将Vector或TRPC3注射到左侧脑室中。评估各组幼鼠脑梗死面积、神经系统评分、脑水肿体积、神经元凋亡和线粒体自噬。体外将小鼠海马神经元细胞系(HT22)分为以下6组:Control组、OGD/R组、OGD/R+TRPC3组、OGD/R+NC组、OGD/R+si-Pink1组和OGD/R+TRPC3+si-Pink1组。除Control组外,其他组使用氧气-葡萄糖剥夺/再灌注(Oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)方法建立体外脑缺血再灌注模型。通过线粒体膜电位的检测线粒体损伤情况。结果:与Sham组相比,HIBD组和HIBD+Vector组显示出较大的梗死面积、脑含水量、神经学评分和神经元凋亡(P<0.05)。HIBD+TRPC3组的梗死面积、脑含水量、神经学评分和神经元凋亡较HIBD+Vector组明显降低(P<0.05)。与Sham组相比,HIBD组和HIBD+Vector组线粒体自噬相关蛋白PTEN诱导假定激酶1(PTEN induced putative kinase 1,Pink1)、E3泛素连接酶(Parkin RBR E3 ubiquitin protein ligase,Parkin)和微管相关蛋白轻链3(light chain 3,LC3)Ⅱ的表达水平增加(P<0.05)。与HIBD+Vector组相比,HIBD+TRPC3组Pink1、Parkin和Lc3Ⅱ的表达水平进一步增加(P<0.05)。体外实验显示,TRPC3上调可以强烈增加Pink1、Parkin的表达和Lc3Ⅱ/Lc3Ⅰ比值,以及减少选择性自噬接头蛋白(sequestosome-1,p62)的表达。Pink1沉默可以部分阻止TRPC3对线粒体自噬的影响。TRPC3上调增加了健康线粒体的数量,减少了受损线粒体的数量,提高了HT-22细胞的生存率。然而,Pink1沉默阻止了TRPC3对线粒体功能和增殖能力的恢复。结论:TRPC3通过激活Pink1/Parkin通路介导的线粒体自噬,在HIBD早期阶段中发挥了重要的保护作用。 展开更多
关键词 新生儿 缺血缺氧性脑病 典型的瞬时受体电位3 线粒体自噬
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瞬时感受器电位香草酸受体3促进胶质瘤U251细胞系增殖和侵袭
6
作者 李忠华 李慧峰 李晓蕾 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期394-397,共4页
目的 研究瞬时感受器电位香草酸受体3(TRPV3)通道蛋白对胶质瘤U251细胞系增殖和侵袭的影响及分子机制。方法应用siRNA技术敲除U251细胞中TRPV3的表达,MTT方法检测细胞的增殖能力,Western blotting检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属... 目的 研究瞬时感受器电位香草酸受体3(TRPV3)通道蛋白对胶质瘤U251细胞系增殖和侵袭的影响及分子机制。方法应用siRNA技术敲除U251细胞中TRPV3的表达,MTT方法检测细胞的增殖能力,Western blotting检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达。结果 敲除TRPV3表达后U251细胞增殖和侵袭能力下降,磷酸化的CaMKⅡ和cyclin D1的表达也受到抑制。结论 TRPV3通道蛋白能够促进胶质瘤U251细胞的增殖和侵袭能力。其机制是TRPV3通道开放,细胞外Ca2^+内流,cyclin D1过表达促进细胞的增殖。 展开更多
关键词 瞬时感受器电位香草酸受体3 胶质瘤 增殖 侵袭 细胞周期蛋白D1
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瞬时受体电位通道C3/6与大电导钙激活钾通道在肾小球足细胞表面转运中的作用
7
作者 谢永玲 杨卓 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第2期148-148,共1页
由Slo1基因编码的大电导钙激活钾通道(BKca)与各种瞬时受体电位通道C(TRPCs)在许多细胞系上共表达,其中包括肾小球的足细胞(脏层上皮细胞)。在本实验中,通过免疫共沉淀和谷胱甘肽S-转移酶(GST)pull—down方法证实在分化的足... 由Slo1基因编码的大电导钙激活钾通道(BKca)与各种瞬时受体电位通道C(TRPCs)在许多细胞系上共表达,其中包括肾小球的足细胞(脏层上皮细胞)。在本实验中,通过免疫共沉淀和谷胱甘肽S-转移酶(GST)pull—down方法证实在分化的足细胞系上的BKCa通道与内源性的TRPC3/6通道相联系。 展开更多
关键词 大电导钙激活钾通道 瞬时受体电位通道 肾小球 细胞表面 谷胱甘肽S-转移酶 转运 C3 BKCA通道
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缬沙坦干预瞬时受体电位通道C亚族3亚型的表达对小鼠心肌纤维化的影响
8
作者 罗芳 江力勤 叶俏 《心脑血管病防治》 2021年第6期543-547,共5页
目的探讨瞬时受体电位通道C亚族3亚型(TRPC3)在心肌纤维化中所起作用,以及缬沙坦干预TRPC3的表达对心肌纤维化的影响。方法取50只昆明种小鼠,随机分为五组,分别为空白组,对照组,低、中、高剂量给药组,每组各10只。其中对照组,各给药组... 目的探讨瞬时受体电位通道C亚族3亚型(TRPC3)在心肌纤维化中所起作用,以及缬沙坦干预TRPC3的表达对心肌纤维化的影响。方法取50只昆明种小鼠,随机分为五组,分别为空白组,对照组,低、中、高剂量给药组,每组各10只。其中对照组,各给药组小鼠皮下注射异丙肾上腺素制造心肌纤维化模型,空白组小鼠皮下注射相同体积的0.9%氯化钠注射液。从造模第5天开始,低剂量给药组予以缬沙坦10 mg/(kg·d)灌胃,中剂量给药组予以缬沙坦20 mg/(kg·d),高剂量给药组予以缬沙坦30 mg/(kg·d),均连续灌胃20 d;空白组、对照组每天给予相同体积的0.9%氯化钠注射液灌胃,连续灌胃20 d。灌胃处理结束后,记录小鼠心电图,计算心脏质量指数(HWI),RT-PCR测定心肌组织TRPC3mRNA表达,免疫印迹法测心肌组织TRPC3蛋白、Ⅰ、Ⅲ型胶原表达量。结果五组间的HWI、心率(HR)、T波峰点到末端的间期(Tp-e)、Tp-e/校正Q波起点到T波终点间期(Q-Tc),Ⅰ与Ⅲ型胶原纤维相对表达量、TRPC3mRNA与TRPC3蛋白相对表达量比较,差异均有统计学意义(F=5.416、5.780、33.752、38.011、189.692、94.940、6.501、80.009,P <0.05)。与空白组比较,对照组HWI增大(P <0.05),对照组与低剂量给药组HR、Tp-e、Tp-e/Q-Tc升高(P <0.05),对照组、低剂量与中剂量给药组Ⅰ型与Ⅲ型胶原纤维相对表达量、Ⅰ型胶原纤维表达量/Ⅲ型胶原纤维表达量比值升高(P <0.05),对照组、低剂量与中剂量给药组TRPC3蛋白表达升高(P <0.05),对照组、低、中、高剂量给药组TRPC3mRNA表达升高(P <0.05)。与对照组比较,低、中、高剂量给药组HWI减小(P <0.05),中、高剂量给药组HR下降(P <0.05),低、中、高剂量给药组Tp-e、Tp-e/Q-Tc缩短(P <0.05),高剂量给药组Ⅰ型与Ⅲ型胶原纤维相对表达量、Ⅰ型胶原纤维表达量/Ⅲ型胶原纤维表达量比值、TRPC3蛋白与TRPC3mRNA表达水平下降(P <0.05)。与低剂量组比较,高剂量给药组HR下降(P <0.05),中剂量与高剂给药量组Tp-e、Tp-e/Q-Tc缩短(P <0.05),高剂量给药组Ⅰ型与Ⅲ型胶原纤维相对表达量、TRPC3蛋白表达水平下降(P <0.05)。与中剂量给药组比较,高剂量给药组Ⅰ型与Ⅲ型胶原纤维相对表达量、Ⅰ型胶原纤维表达量/Ⅲ型胶原纤维表达量比值、TRPC3蛋白表达水平下降(P <0.05)。结论缬沙坦可抑制TRPC3表达,改善心肌纤维化。 展开更多
关键词 缬沙坦 心肌纤维化 瞬时受体电位通道C亚族3亚型
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瞬时受体电位M7通道蛋白对大鼠肝星状细胞凋亡的影响 被引量:2
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作者 刘红 李俊 +2 位作者 黄成 黄艳 周德喜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期486-489,共4页
目的通过转染特异性siRNA,下调瞬时受体电位M7通道蛋白(TRPM7)在大鼠肝星状细胞系HSC-T6中的表达,研究其对HSC-T6凋亡的影响及内在机制。方法利用Li-pofectamineTM2000将特异性TRPM7-siRNA转染到HSC-T6内,分别运用流式细胞术检测HSCs凋... 目的通过转染特异性siRNA,下调瞬时受体电位M7通道蛋白(TRPM7)在大鼠肝星状细胞系HSC-T6中的表达,研究其对HSC-T6凋亡的影响及内在机制。方法利用Li-pofectamineTM2000将特异性TRPM7-siRNA转染到HSC-T6内,分别运用流式细胞术检测HSCs凋亡变化;Western blot检测TRPM7、Caspase-3蛋白的表达;RT-PCR检测TRPM7,Caspase-3、Bid mRNA的表达。结果 TRPM7-siRNA明显抑制TRPM7 mRNA和蛋白的表达。与正常组或对照组相比,转染组细胞凋亡率、凋亡蛋白Caspase-3及凋亡基因Bid的表达均明显上调。结论特异性TRPM7-siRNA能明显抑制TRPM7表达,诱导HSCs凋亡,其机制可能与其诱导凋亡基因Bid表达上调有关。 展开更多
关键词 瞬时受体电位M7通道 肝星状细胞 细胞凋亡 SIRNA CASPASE-3 BID
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基于NGF/PI3K/TRPV1信号通路探究参苓白术散对腹泻型肠易激综合征小鼠的干预机制
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作者 朱卫 翦闽涛 曾婷婷 《现代消化及介入诊疗》 2024年第5期547-551,共5页
目的研究基于神经生长因子/磷脂酰肌醇3-激酶/瞬时受体电位香草酸受体1(NGF/PI3K/TRPV1)信号通路探究参苓白术散对腹泻型肠易激综合征小鼠的干预机制。方法选取40只SPF级SD雄性大鼠,其中空白组10只,模型组13只、研究1组7只、研究2组9只... 目的研究基于神经生长因子/磷脂酰肌醇3-激酶/瞬时受体电位香草酸受体1(NGF/PI3K/TRPV1)信号通路探究参苓白术散对腹泻型肠易激综合征小鼠的干预机制。方法选取40只SPF级SD雄性大鼠,其中空白组10只,模型组13只、研究1组7只、研究2组9只。对照组、模型组只进行生理盐水灌胃,不做其他任何处理。研究1组给予匹维溴铵片20mg/kg水溶液进行灌胃,研究2组给予参苓白术散4g/kg进行灌胃。评估Bristol评分情况;分析脾脏系数、胸腺系数情况;检测IgA、IgG、IgM、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平及NGF/PI3K/TRPV1蛋白表达情况。结果相比于空白组,模型组、研究1组、研究2组Bristol评分、脾脏系数、胸腺系数、IgA、IgG、IgM、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及NGF、PI3K、TRPV1蛋白表达均上升(P<0.05);相比于模型组、研究1组,研究2组Bristol评分、脾脏系数、胸腺系数、IgA、IgG、IgM、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及NGF、PI3K、TRPV1蛋白表达均下降(P<0.05)。结论参苓白术散抑制NGF/PI3K/TRPV1通路,改善大鼠胃肠功能及大便状态,减轻炎症反应,提高免疫功能稳态情况,干预效果显著。 展开更多
关键词 参苓白术散 神经生长因子/磷脂酰肌醇3-激酶/瞬时受体电位香草酸受体1 腹泻型肠易激综合征 炎症反应
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瞬时受体电位M2抑制剂A10对缺糖缺氧后复糖复氧细胞的保护作用 被引量:1
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作者 黄卓群 余夏飞 +5 位作者 刘星宇 马康 黄敏华 李芳芳 杨巍 牛建国 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期106-112,共7页
目的:探讨瞬时受体电位M2(TRPM2)抑制剂A10对缺糖缺氧后复糖复氧(OGD/R)细胞模型的保护作用。方法:采用SH-SY5Y细胞系制备OGD/R损伤模型。将细胞随机分为空白对照组、模型对照组和A10组。细胞计数试剂盒8检测细胞存活率;活性氧检测试剂... 目的:探讨瞬时受体电位M2(TRPM2)抑制剂A10对缺糖缺氧后复糖复氧(OGD/R)细胞模型的保护作用。方法:采用SH-SY5Y细胞系制备OGD/R损伤模型。将细胞随机分为空白对照组、模型对照组和A10组。细胞计数试剂盒8检测细胞存活率;活性氧检测试剂盒检测细胞活性氧水平;四甲基罗丹明甲酯法检测线粒体膜电位;一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测凋亡细胞数量;蛋白质印迹法测定cleaved caspase 3蛋白表达。结果:相对于3、20、30、50和100μmol/L,10μmol/L浓度的A10具有较低的细胞毒性及较好的通道活性抑制作用。与模型对照组比较,A10组活性氧水平降低(P<0.05),线粒体膜电位降低程度改善(P<0.05),凋亡细胞数减少(P<0.05),凋亡相关蛋白cleaved caspase 3表达减少(P<0.05)。结论:A10可以通过抑制TRPM2通道功能、减少细胞外钙离子内流、降低细胞活性氧水平、稳定线粒体膜电位水平和减少细胞凋亡缓解OGD/R后细胞的损伤。 展开更多
关键词 瞬时受体电位M2通道 缺糖缺氧/复糖复氧 活性氧 线粒体膜电位 细胞凋亡 Cleaved caspase 3 SH-SY5Y细胞
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TRPC3对OIR小鼠视网膜和人视网膜血管内皮细胞生物学行为的调控作用
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作者 张越 刘晓静 +10 位作者 甄宇涵 姚瑶 邵斌 徐嫚鸿 王艳辉 刘志强 王伟 毛爱玲 张宝月 张铭连 陈志敏 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期331-338,共8页
目的探讨瞬时受体电位阳离子通道亚家族C成员3(TRPC3)对氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜和人视网膜血管内皮细胞(HREC)生物学行为的调控作用。方法选取健康SPF级7日龄C57BL/6小鼠32只,采用随机数字表法分为对照组和OIR组,每组16只,其... 目的探讨瞬时受体电位阳离子通道亚家族C成员3(TRPC3)对氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜和人视网膜血管内皮细胞(HREC)生物学行为的调控作用。方法选取健康SPF级7日龄C57BL/6小鼠32只,采用随机数字表法分为对照组和OIR组,每组16只,其中对照组不做特殊处理,OIR组小鼠诱导OIR模型。出生后第17天(PN17)采用视网膜铺片免疫荧光染色验证模型构建是否成功。将体外培养HREC分为正常对照组、转染试剂组和si-TRPC3组,其中正常对照组不做特殊处理,转染试剂组和si-TRPC3组分别采用转染试剂和转染试剂+si-TRPC3转染。采用实时荧光定量PCR法检测TRPC3 mRNA相对表达量;采用Western blot法检测TRPC3、转录因子NF-E2相关因子(Nrf2)和超氧化物歧化酶(SOD)蛋白相对表达量。另将HREC分为正常对照组、血管内皮生长因子(VEGF)组、si-TRPC3组和Pyr3(TRPC3通道抑制剂)组,分别用完全培养基、含有20 ng/ml VEGF重组蛋白的培养基、含有20 ng/ml VEGF重组蛋白的培养基(si-TRPC3转染72 h)和含有20 ng/ml VEGF重组蛋白+1μmol/L Pyr3的培养基培养48 h,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测HREC增生能力;分别采用细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞横向和纵向迁移能力。结果PN17时OIR组小鼠视网膜出现病理性新生血管团簇强荧光染色。OIR组小鼠视网膜TRPC3 mRNA和蛋白相对表达量分别为2.057±0.244和1.517±0.290,明显高于对照组的0.983±0.033和0.874±0.052,差异均有统计学意义(t=6.165、3.094,均P<0.05)。si-TRPC3组TRPC3 mRNA和蛋白相对表达量明显低于正常对照组和转染试剂组,Nrf2和SOD蛋白相对表达量明显高于正常对照组和转染试剂组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。CCK-8实验结果显示,VEGF组细胞吸光度(A)值明显高于正常对照组,si-TRPC3组和Pyr3组细胞A值明显低于VEGF组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,VEGF组细胞横向迁移率高于正常对照组,si-TRPC3组和Pyr3组细胞横向迁移率低于VEGF组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Transwell实验结果显示,VEGF组染色细胞数明显多于正常对照组,si-TRPC3组和Pyr3组染色细胞数明显少于VEGF组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论OIR模型小鼠视网膜中TRPC3表达水平升高,下调TRPC3可抑制HREC增生和迁移能力,其机制与Nrf2氧化应激通路激活有关。 展开更多
关键词 视网膜疾病 氧化应激 瞬时受体电位阳离子通道亚家族C成员3 人视网膜血管内皮细胞
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麻杏石甘汤对咳嗽变异型哮喘大鼠IL-6/STAT3信号通路及TRPV1感受器的影响 被引量:1
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作者 杨倩 江波 +3 位作者 孙勤国 吕琨 罗蒙 黄天慧 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第3期729-735,共7页
【目的】探讨麻杏石甘汤对咳嗽变异型哮喘(CVA)大鼠的治疗作用及机制。【方法】将60只大鼠随机分为正常组,模型组,麻杏石甘汤低、高剂量组,麻杏石甘汤高剂量+信号转导和转录激活因子3(STAT3)激活剂Colivelin(Col)组,每组12只。除正常组... 【目的】探讨麻杏石甘汤对咳嗽变异型哮喘(CVA)大鼠的治疗作用及机制。【方法】将60只大鼠随机分为正常组,模型组,麻杏石甘汤低、高剂量组,麻杏石甘汤高剂量+信号转导和转录激活因子3(STAT3)激活剂Colivelin(Col)组,每组12只。除正常组外,其他各组大鼠采用腹腔注射卵清蛋白结合艾条熏蒸法构建CVA模型。对应治疗后,观察大鼠体征和咳嗽次数,肺功能仪检测气道阻力(RE),Diff-Quik染色计数嗜酸性粒细胞(EOS),苏木素-伊红(HE)染色法观察肺、支气管组织病理学特征,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测肺组织单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,Western Blot法检测肺组织白细胞介素6(IL-6)、STAT3、瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)蛋白表达水平。【结果】与正常组比较,模型组大鼠出现明显哮喘症状,肺组织可见炎性细胞浸润严重,支气管上皮细胞坏死、纤毛粘连、黏液多,RE,EOS数目,MCP-1、TNF-α含量,以及IL-6、STAT3、TRPV1蛋白表达水平均升高(P<0.05);与模型组比较,麻杏石甘汤低、高剂量组大鼠哮喘症状明显改善,肺及支气管损伤减轻,RE,EOS数目,MCP-1、TNF-α含量以及IL-6、STAT3、TRPV1蛋白表达水平呈剂量依赖性降低(P<0.05);与麻杏石甘汤高剂量组比较,麻杏石甘汤高剂量+Col组大鼠哮喘加重,肺及支气管损伤加重,RE,EOS数目,MCP-1、TNF-α含量以及IL-6、STAT3、TRPV1蛋白表达水平升高(P<0.05)。【结论】麻杏石甘汤可有效改善CVA大鼠症状,其机制与抑制IL-6/STAT3信号通路及TRPV1高表达有关。 展开更多
关键词 麻杏石甘汤 咳嗽变异型哮喘 白细胞介素6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路 瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1) 大鼠
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子宫内膜息肉患者TRPC3和TRPC6蛋白表达的临床意义及与孕酮抵抗的相关性研究
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作者 赵会娟 申林林 +2 位作者 张亚琴 李晓梅 王春香 《中国性科学》 2024年第7期75-79,共5页
目的探究子宫内膜息肉中瞬时受体电位通道C亚族3(TRPC3)、瞬时受体电位通道C亚族6(TRPC6)蛋白表达与孕酮抵抗的相关性。方法选取石家庄市第六医院2021年2月至2023年2月期间收治的65例子宫内膜息肉患者作为子宫内膜息肉组,于同期同一医... 目的探究子宫内膜息肉中瞬时受体电位通道C亚族3(TRPC3)、瞬时受体电位通道C亚族6(TRPC6)蛋白表达与孕酮抵抗的相关性。方法选取石家庄市第六医院2021年2月至2023年2月期间收治的65例子宫内膜息肉患者作为子宫内膜息肉组,于同期同一医院选取65例因不孕症进行宫腔镜检查的患者作为正常子宫内膜对照组。采用免疫组化法检测正常子宫内膜组织和子宫内膜息肉组织中TRPC3、TRPC6、孕酮受体(PR)蛋白表达情况;采用Spearman等级相关分析探究子宫内膜息肉组织中TRPC3、TRPC6与PR的相关性;采用Logistic回归分析子宫内膜息肉发生的影响因素。结果子宫内膜息肉组和正常子宫内膜对照组慢性子宫内膜炎、肥胖所占比例比较,差异具有统计学意义(P<0.05);与正常子宫内膜组织相比,子宫内膜息肉组织中TRPC3蛋白(56.92%vs.84.46%,χ^(2)=12.048,P=0.001)、TRPC6蛋白(53.85%vs.83.08%,χ^(2)=12.861,P<0.001)阳性表达率升高,PR蛋白(86.15%vs.46.15%,χ^(2)=23.224,P<0.001)阳性表达率降低。Spearman等级相关性分析显示,子宫内膜息肉组织中TRPC3、TRPC6与PR表达呈负相关(r=-0.289、-0.323,P<0.05);TRPC3、TRPC6、慢性子宫内膜炎、肥胖是影响子宫内膜息肉发生的相关因素(P<0.05)。结论子宫内膜息肉组织中TRPC3、TRPC6与PR表达呈负相关,且是发生子宫内膜息肉的影响因素。 展开更多
关键词 子宫内膜息肉 瞬时受体电位通道C亚族3 瞬时受体电位通道C亚族6 孕酮抵抗 相关性
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TRPV3调节剂研究进展
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作者 张杰 王雨晶 +1 位作者 唐青莲 曹征宇 《山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报》 CAS 2024年第8期496-506,共11页
瞬时受体电位通道香草素亚族3(transient receptor potential vanilloid 3,TRPV3)是一种定位于细胞质膜的Ca^(2+)渗透性离子通道,除了温热(≥32℃)这一物理调控方式,TRPV3的活性受各种内源性和外源性的化学物质调控。利用这些化学调控,... 瞬时受体电位通道香草素亚族3(transient receptor potential vanilloid 3,TRPV3)是一种定位于细胞质膜的Ca^(2+)渗透性离子通道,除了温热(≥32℃)这一物理调控方式,TRPV3的活性受各种内源性和外源性的化学物质调控。利用这些化学调控,研究揭示了TRPV3的生理(温度感知、毛发生长)和病理(疼痛转导、皮肤炎症)功能,也提示TRPV3是具有潜力的药物开发靶点。本文综述了TRPV3调节剂的研究进展,以期为TRPV3的后续研究提供参考。 展开更多
关键词 瞬时受体电位通道香草素亚族3 激动剂 抑制剂
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温度敏感Ca^(2+)通透TRPV3通道的结构与功能 被引量:2
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作者 孙嘉 蘧雅璇 王克威 《生理科学进展》 CAS 2023年第1期4-12,共9页
瞬时受体电位香草酸3(transient receptor potential vanilloid 3,TRPV3)是Ca^(2+)通透的非选择阳离子通道,可被>33℃温度激活。TRPV3在皮肤屏障修复、瘙痒和炎症等疾病的发展过程中扮演重要的角色,其点突变导致以过度角化、瘙痒和... 瞬时受体电位香草酸3(transient receptor potential vanilloid 3,TRPV3)是Ca^(2+)通透的非选择阳离子通道,可被>33℃温度激活。TRPV3在皮肤屏障修复、瘙痒和炎症等疾病的发展过程中扮演重要的角色,其点突变导致以过度角化、瘙痒和脱发为特征的罕见人类遗传病—Olmsted综合征。研究表明,TRPV3是瘙痒和皮肤疾病的潜在治疗靶点,特异性抑制TRPV3可能具有应用前景。本文就TRPV3结构与功能及其病理特别是皮肤疾病相关病理的最新研究进展作一综述。 展开更多
关键词 瞬时受体电位香草酸3 瘙痒 奥姆斯特综合征 2-氨基乙氧基二苯硼酸盐 香芹酚
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重症龋患儿唾液TRPA1、NLRP3的表达水平及临床意义
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作者 李姣 郭战坤 +2 位作者 魏鹏 李雪莉 李燕 《分子诊断与治疗杂志》 2023年第10期1833-1836,1850,共5页
目的 研究重症龋患儿唾液瞬时电位受体离子通道A1(TRPA1)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)的表达水平及临床意义。方法 选择2021年1月至2022年6月期间在保定市妇幼保健院接受治疗的142例龋齿患儿,根据龋失补指数(DMFT)分为重症组(n=46)和非重症... 目的 研究重症龋患儿唾液瞬时电位受体离子通道A1(TRPA1)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)的表达水平及临床意义。方法 选择2021年1月至2022年6月期间在保定市妇幼保健院接受治疗的142例龋齿患儿,根据龋失补指数(DMFT)分为重症组(n=46)和非重症组(n=96);另取同期体检的70名无龋齿健康儿童作为对照组(n=70)。检测并比较三组受试儿童唾液TRPA1、NLRP3表达水平的差异,采用Pearson检验分析TRPA1、NLRP3表达水平与DMFT的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析唾液TRPA1、NLRP3表达水平对重症龋的诊断价值,采用单因素分析和多因素logistic分析探讨重症龋的影响因素。结果 三组唾液TRPA1、NLRP3表达水平比较为:重症组>非重症组>对照组,差异均有统计学意义(F=75.482,91.391,P<0.05);重症组患儿唾液TRPA1、NLRP3的表达水平与DMFT呈正相关(r=0.351、0.384,P<0.05);唾液TRPA1、NLRP3的表达水平对重症龋具有诊断价值,截断值分别为1.41 pg/mL、2.54 pg/mL,灵敏度分别为76.09%、89.13%,特异度分别为83.33%、82.29%;吃甜食频率≥2次/d、唾液TRPA1表达水平≥1.41 pg/mL、唾液NLRP3表达水平≥2.54 pg/mL是发生重症龋的危险因素,刷牙频率≥2次/天、家长监督刷牙是发生重症龋的保护因素(P<0.05)。结论 重症龋发病可能与TRPA1、NLRP3表达增加介导的生物学效应相关。 展开更多
关键词 重症龋 瞬时电位受体离子通道A1 Nod样受体蛋白3 龋失补指数
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线粒体氧化应激及m6A表观遗传调控TRPC6钙通道在肾病综合征发病中的作用研究
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作者 姜丽娜 孔玮晶 丁瑛雪 《临床和实验医学杂志》 2024年第8期785-789,共5页
目的 初步探讨N6-甲基腺嘌呤(m6A)表观遗传修饰瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)通道失调在肾病综合征发病中的作用及潜在机理。方法 按照随机数字表法将小鼠足细胞分为4组:对照组、叔丁基对苯二酚(TBHQ)组、嘌呤霉素氨基核苷(PAN)处理组... 目的 初步探讨N6-甲基腺嘌呤(m6A)表观遗传修饰瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)通道失调在肾病综合征发病中的作用及潜在机理。方法 按照随机数字表法将小鼠足细胞分为4组:对照组、叔丁基对苯二酚(TBHQ)组、嘌呤霉素氨基核苷(PAN)处理组、TBHQ+PAN处理组。对照组为正常完全培养液,TBHQ组培养液中加入10 nmol/L TBHQ,PAN处理组培养液中加入PAN 50μg/mL,TBHQ+PAN处理组培养液中加入10 nmol/L TBHQ以及PAN 50μg/mL,刺激24 h收集细胞。应用膜片钳证实PAN损伤诱导TRPC6通道激活机理及1,4,5-肌醇三磷酸(IP3)受体拮抗剂TBHQ对电流的影响,检测对照组、PAN处理组、TBHQ组和TBHQ+PAN处理组细胞TRPC6通道电流变化。通过葡萄糖氧化酶(GO)建立足细胞氧化应激模型。另外按照随机数字表法将足细胞分为4组:空白对照组、GO组、姜黄素组、姜黄素+GO组。GO组给予GO 3.5 kU/L,姜黄素组给予Nrf2激动剂(姜黄素)40μmol/L,姜黄素+GO组给予姜黄素40μmol/L和GO 3.5 kU/L处理,给药处理8~12 h后收集细胞。检测各组Nrf2和特异性调控蛋白NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO-1)、TRPC6及Transgelin蛋白和线粒体调控蛋白表达变化。通过SRAMP对TRPC6通道m6A位点进行精准预测,对PAN诱导足细胞损伤模型公共数据库GSE124622进行2次生物信息学分析。结果 对照组与TBHQ组电流比较,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,PAN处理组电流升高,而TBHQ+PAN组电流减小,差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,GO组Nrf2、NQO-1、TRPC6及Transgelin蛋白表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.01);与GO组比较,姜黄素+GO组Nrf2、NQO-1、TRPC6及Transgelin蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,GO组线粒体调控蛋白Mfn2、Opa1蛋白表达均降低,Drp1蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与GO组比较,姜黄素+GO组粒体调控蛋白Mfn2、Opa1蛋白表达升高,Drp1蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05);空白对照组与姜黄素组TRPC6/Transgelin及线粒体调控蛋白表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。TRPC6通道序列存在多个m6A修饰位点,均具有被甲基转移酶(METTL)3、METTL14、肾母细胞肿瘤1相关蛋白(WTAP)和去甲基化酶ALKB同源蛋白(ALKBH)、m6A去甲基化酶(FTO)调控的潜在可能。对12个m6A调节基因进行表达分析,发现m6A调节基因的表达在PAN诱导足细胞损伤中发生显著差异。结论 TRPC6介导钙离子内流可被氧化应激激活参与足细胞损伤,激活Nrf2可以减少钙过负荷所致线粒体损伤而保护足细胞。TRPC6序列中存在多个高m6A修饰靶点,肾病综合征发病机理可能通过m6A修饰足细胞TRPC6离子通道,m6A相关调控基因在肾病足细胞损伤中发生明显变化。 展开更多
关键词 肾病综合征 嘌呤霉素 氨基核苷 瞬时受体电位阳离子通道6 线粒体功能异常 N6-甲基腺嘌呤 m6A转移酶样3抑制剂
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活性维生素D_3通过抑制TRPC6表达发挥糖尿病肾病的保护作用 被引量:12
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作者 宋志霞 郭银凤 +1 位作者 周敏 张晓良 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2014年第6期683-690,共8页
目的:探讨活性维生素D3对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病(DN)大鼠的肾保护作用是否与抑制瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)有关。方法:30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、DN组及DN加活性维生素D3干预组(DN+VD组)3组各10只。... 目的:探讨活性维生素D3对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病(DN)大鼠的肾保护作用是否与抑制瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)有关。方法:30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、DN组及DN加活性维生素D3干预组(DN+VD组)3组各10只。造模成功后6、12、18周检测大鼠体重、24 h尿蛋白量;造模成功后18周末处死大鼠,检测血样及肾组织指标变化。结果:DN+VD组与DN组相比蛋白尿显著减少,肾脏病理损伤改善。DN组与NC组比较,Podocin、Nephrin蛋白表达量均明显降低(均P<0.05),Desmin和TRPC6蛋白表达量均显著升高(均P<0.05),活性维生素D3干预后上述改变明显改善,差异有统计学意义。相关性分析显示:TRPC6与Podocin(r=-0.808,P<0.05)、Nephrin(r=-0.791,P<0.05)呈负相关,而与24 h尿蛋白(r=0.886,P<0.05)、Desmin(r=0.929,P<0.05)呈正相关。结论:活性维生素D3显著抑制STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏损伤,其作用机制与调节足细胞TRPC6的表达有关。 展开更多
关键词 活性维生素D3 糖尿病肾病 足细胞 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6 大鼠
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PI3K/Akt通路介导TRPV1抑制离体小鼠心脏缺血再灌注后的细胞凋亡 被引量:9
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作者 姜小雪 刘关羽 +3 位作者 雷寒 张羿 冯清平 黄玮 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第9期1187-1192,共6页
目的研究瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)对离体小鼠心脏缺血/再灌注(I/R)后心肌细胞凋亡的影响及与PI3K/Akt通路的关系。方法 TRPV1基因敲除(TRPV1^(-/-))和野生型(WT)小鼠各54只,均各随机分为假手术组(sham)、缺血再灌注组(I/R)和LY29... 目的研究瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)对离体小鼠心脏缺血/再灌注(I/R)后心肌细胞凋亡的影响及与PI3K/Akt通路的关系。方法 TRPV1基因敲除(TRPV1^(-/-))和野生型(WT)小鼠各54只,均各随机分为假手术组(sham)、缺血再灌注组(I/R)和LY294002处理组(LY)。建立Langendorff离体心脏灌注模型,检测心功能;灌注结束后,TTC染色法检测心肌梗死面积;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、Bax、Akt和p-Akt的蛋白表达水平。结果 I/R后,TRPV1^(-/-)小鼠较WT小鼠的LVDP明显降低(P<0.001),LVEDP明显升高(P<0.001),同时心肌梗死面积和心肌凋亡细胞明显增加(P<0.01),Bcl-2/Bax和p-Akt表达水平下降(P<0.001)。LY294002阻断PI3K后,与相应的I/R组相比,WT小鼠心肌梗死面积明显扩大(P<0.001),心肌凋亡细胞明显增加(P<0.01),Bcl-2/Bax和p-Akt蛋白表达水平降低(P<0.001)。结论 TRPV1可能通过PI3K/Akt通路抑制离体小鼠心脏缺血/再灌注所致的心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 心肌缺血/再灌注损伤 瞬时受体电位香草酸通道 PI3K/AKT 凋亡
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