目的活血通络方对5/6肾切除大鼠Hippo/Yes相关蛋白(YAP)通路及血管内膜增生的影响。方法将60只雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、活血通络方低、中、高剂量组〔10、20、40 g/(kg·d)〕,每组12只。采用5/6肾切除术及套管法构建慢...目的活血通络方对5/6肾切除大鼠Hippo/Yes相关蛋白(YAP)通路及血管内膜增生的影响。方法将60只雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、活血通络方低、中、高剂量组〔10、20、40 g/(kg·d)〕,每组12只。采用5/6肾切除术及套管法构建慢性肾衰竭(CRF)伴自体动静脉内瘘大鼠模型。造模完成后,活血通络方各剂量组灌胃相应剂量的药物干预4 w。观察并记录大鼠的一般状态;给药结束后代谢笼收集24 h尿量测定大鼠24 h尿蛋白(24 h UAlb)水平;检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理学变化;弹力和胶原纤维的双重组合染色(VVG)染色测量颈动脉组织的管腔面积、内膜(I)和中膜(M)面积并计算内膜与中膜的比值(I/M);免疫组化检测肾脏YAP、动脉组织增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;Western印迹检测肾脏组织YAP、大抑癌基因(LATs)、结缔组织生长因子(CTGF)相关蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠精神倦怠、毛色枯黄、尿量增加,体重、肾脏p-LATs/LATs表达明显降低,24 h UAlb、血清Scr、BUN水平、颈动脉内膜PCNA、肾脏组织YAP、p-YAP/YAP、CTGF表达显著升高(P<0.05),肾组织损伤严重,颈动脉内膜结构紊乱,血管腔狭窄,内膜面积、I/M比值明显增加(P<0.05);与模型组相比,活血通络方高、中剂量组大鼠精神、毛色及活跃度明显好转,体重、p-LATs/LATs的表达明显增加,24 h UAlb、血清Scr、BUN水平、颈动脉内膜PCNA、肾脏组织YAP、p-YAP/YAP、CTGF的表达明显降低(P<0.05),肾脏病变程度减轻,颈动脉内膜形态有不同程度的改善,内膜面积、I/M比值明显降低(P<0.05),血管腔增大,且呈一定的剂量依赖性。结论活血通络方可有效改善5/6肾切除大鼠的肾功能,抑制自体动静脉内瘘后CRF大鼠血管内膜增生;其作用机制可能与抑制Hippo/YAP通路的激活有关。展开更多
文摘目的活血通络方对5/6肾切除大鼠Hippo/Yes相关蛋白(YAP)通路及血管内膜增生的影响。方法将60只雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、活血通络方低、中、高剂量组〔10、20、40 g/(kg·d)〕,每组12只。采用5/6肾切除术及套管法构建慢性肾衰竭(CRF)伴自体动静脉内瘘大鼠模型。造模完成后,活血通络方各剂量组灌胃相应剂量的药物干预4 w。观察并记录大鼠的一般状态;给药结束后代谢笼收集24 h尿量测定大鼠24 h尿蛋白(24 h UAlb)水平;检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理学变化;弹力和胶原纤维的双重组合染色(VVG)染色测量颈动脉组织的管腔面积、内膜(I)和中膜(M)面积并计算内膜与中膜的比值(I/M);免疫组化检测肾脏YAP、动脉组织增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;Western印迹检测肾脏组织YAP、大抑癌基因(LATs)、结缔组织生长因子(CTGF)相关蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠精神倦怠、毛色枯黄、尿量增加,体重、肾脏p-LATs/LATs表达明显降低,24 h UAlb、血清Scr、BUN水平、颈动脉内膜PCNA、肾脏组织YAP、p-YAP/YAP、CTGF表达显著升高(P<0.05),肾组织损伤严重,颈动脉内膜结构紊乱,血管腔狭窄,内膜面积、I/M比值明显增加(P<0.05);与模型组相比,活血通络方高、中剂量组大鼠精神、毛色及活跃度明显好转,体重、p-LATs/LATs的表达明显增加,24 h UAlb、血清Scr、BUN水平、颈动脉内膜PCNA、肾脏组织YAP、p-YAP/YAP、CTGF的表达明显降低(P<0.05),肾脏病变程度减轻,颈动脉内膜形态有不同程度的改善,内膜面积、I/M比值明显降低(P<0.05),血管腔增大,且呈一定的剂量依赖性。结论活血通络方可有效改善5/6肾切除大鼠的肾功能,抑制自体动静脉内瘘后CRF大鼠血管内膜增生;其作用机制可能与抑制Hippo/YAP通路的激活有关。
