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苜蓿组织培养及农杆菌介导的遗传转化研究进展
1
作者 郭玉朋 黄小捷 +2 位作者 韦丽思 冶乙不拉 马志明 《中文科技期刊数据库（全文版）自然科学》 2024年第1期0135-0140,共6页
苜蓿是重要的豆科牧草,苜蓿品种的改良对畜牧业的发展有重要意义。转基因育种是利用现代生物技术改良作物性状的重要手段。而农杆菌介导的遗传转化被认为是最有效的转基因方法。对大多数植物,组织培养再生体系的建立是遗传转化的基础。... 苜蓿是重要的豆科牧草,苜蓿品种的改良对畜牧业的发展有重要意义。转基因育种是利用现代生物技术改良作物性状的重要手段。而农杆菌介导的遗传转化被认为是最有效的转基因方法。对大多数植物,组织培养再生体系的建立是遗传转化的基础。本文通过在以往苜蓿组织培养及农杆菌介导的遗传转化相关研究的基础上,对这一领域的进展做了综述。 展开更多
关键词 苜蓿 组织培养 农杆菌 遗传转化
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大豆体细胞胚胎发生与农杆菌介导的遗传转化 被引量：15
2
作者 王萍 王罡 +4 位作者 季静 曾凡亭 黄彬城 曹江 吴颖 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期695-700,共6页
以55个大豆基因型未成熟子叶为外植体,用高浓度2,4 D诱导大豆体细胞胚胎发生与植株再生,并对生产上种植面积大、体细胞胚胎发生率高的大豆基因型用农杆菌介导法进行遗传转化。结果表明,东北地区主栽的大豆基因型中有14个基因型体细胞胚... 以55个大豆基因型未成熟子叶为外植体,用高浓度2,4 D诱导大豆体细胞胚胎发生与植株再生,并对生产上种植面积大、体细胞胚胎发生率高的大豆基因型用农杆菌介导法进行遗传转化。结果表明,东北地区主栽的大豆基因型中有14个基因型体细胞胚胎发生率超过40%。用含有pGBI121S4ABC质粒的LBA4404农杆菌侵染5个东北地区主栽大豆基因型的2147个未成熟子叶,经卡那霉素筛选得到17株抗性株。经PCR、PCR Southern检测,有12株呈阳性反应,证明Bt基因已导入到大豆中。 展开更多
关键词 大豆 体细胞胚胎发生 农杆菌 遗传转化
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百合农杆菌介导的遗传转化受体系统的建立 被引量：12
3
作者 余桂红 马鸿翔 +2 位作者 周淼平 黄益洪 陆维忠 《江西农业学报》 CAS 2004年第2期15-19,共5页
以东方百合品种"西伯利亚"作为研究材料建立了百合农杆菌介导的受体系统。鳞片块不定芽的分化以MS培养基中添加0.5mg/L2,4-D和0.5mg/LBA为最好;试管苗小叶块和小鳞茎块的不定芽分化均以MS培养基中添加1.0mg/LBA和0.05mg/LIAA... 以东方百合品种"西伯利亚"作为研究材料建立了百合农杆菌介导的受体系统。鳞片块不定芽的分化以MS培养基中添加0.5mg/L2,4-D和0.5mg/LBA为最好;试管苗小叶块和小鳞茎块的不定芽分化均以MS培养基中添加1.0mg/LBA和0.05mg/LIAA为最好;卡那霉素的筛选浓度小叶块确定为100mg/L,而小鳞茎块确定为125mg/L;羧苄青霉素抑菌浓度确定为300～400mg/L。 展开更多
关键词 百合 农杆菌介导 遗传转化 受体系统
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思茅松成熟胚无菌萌发及农杆菌介导的遗传转化 被引量：4
4
作者 吴涛 陈少瑜 +3 位作者 陈芳 王寅冰 易善军 陈善娜 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期10-12,15,共4页
以思茅松成熟胚为外植体,研究其适宜的萌发培养基,并对其根癌农杆菌介导的遗传转化进行初步研究。结果表明:适宜成熟胚萌发的培养基为1/2MS培养基;卡那霉素的质量浓度为40mg·L-1,抑菌剂羧苄青霉素的质量浓度为800mg·L-1;遗传... 以思茅松成熟胚为外植体,研究其适宜的萌发培养基,并对其根癌农杆菌介导的遗传转化进行初步研究。结果表明:适宜成熟胚萌发的培养基为1/2MS培养基;卡那霉素的质量浓度为40mg·L-1,抑菌剂羧苄青霉素的质量浓度为800mg·L-1;遗传转化的适宜条件为:菌液比色浓度的OD600为0.8,浸染时间15～30min,共培养时间1～2d;组织化学染色检测到了GUS瞬时表达。 展开更多
关键词 思茅松 成熟胚 无菌萌发 根癌农杆菌 遗传转化
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水稻转座子Pong RNAi载体的构建和农杆菌介导的遗传转化 被引量：2
5
作者 高立宏 路云侠 +2 位作者 柴娜 刘宝 刘立侠 《东北师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期117-123,共7页
为探讨水稻转座子Pong的功能及其对水稻基因组甲基化的影响,构建了水稻转座子Pong的RNAi表达载体TPAⅠ和TPAⅡ,并利用这两个载体采用农杆菌介导法转化水稻（品种松前）的成熟胚愈伤组织,获得PCR结果阳性的再生植株.同时通过不同的农杆... 为探讨水稻转座子Pong的功能及其对水稻基因组甲基化的影响,构建了水稻转座子Pong的RNAi表达载体TPAⅠ和TPAⅡ,并利用这两个载体采用农杆菌介导法转化水稻（品种松前）的成熟胚愈伤组织,获得PCR结果阳性的再生植株.同时通过不同的农杆菌侵染途径、侵染浓度和侵染时间等,建立并优化了水稻的遗传转化程序.结果表明：农杆菌侵染成熟胚愈伤组织3 min,共培养24 d,预培养7 d为最佳的遗传转化方式. 展开更多
关键词 水稻 转座子 RNAI 农杆菌介导 遗传转化
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果蔗‘拔地拉’植株再生与农杆菌介导的遗传转化研究 被引量：4
6
作者 李瑞美 何炎森 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期567-570,共4页
以果蔗(Saccharum officenarum L.)‘拔地拉’的幼嫩叶鞘为材料,以MS+2,4-D2.0mgL-1为诱导培养基,MS+2,4-D2.0mgL-1+6-BA1.0mgL-1为分化培养基,MS+IAA2.0mgL-1为生根培养基,建立了高效的果蔗再生体系。利用农杆菌介导法将含有cryIA基因... 以果蔗(Saccharum officenarum L.)‘拔地拉’的幼嫩叶鞘为材料,以MS+2,4-D2.0mgL-1为诱导培养基,MS+2,4-D2.0mgL-1+6-BA1.0mgL-1为分化培养基,MS+IAA2.0mgL-1为生根培养基,建立了高效的果蔗再生体系。利用农杆菌介导法将含有cryIA基因和CPTI基因的植物表达载体导入果蔗愈伤组织,经潮霉素筛选、PCR以及Southern杂交分析表明,cryIAc基因已整合进果蔗基因组中。 展开更多
关键词 果蔗 农杆菌介导 cryIAc基因 遗传转化
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巴戟天离体再生及农杆菌介导的遗传转化 被引量：6
7
作者 贺红 徐鸿华 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期733-735,共3页
目的 :在巴戟天离体再生的基础上 ,建立一套根癌农杆菌转化的有效方法 ,为巴戟天新品种选育、引入外源目的基因奠定基础。方法 :以巴戟天带节茎为材料 ,农杆菌菌株为EHA10 1,含有质粒载体pGA4 82GG ,质粒上插入了GUS、NPTⅡ基因。结果 ... 目的 :在巴戟天离体再生的基础上 ,建立一套根癌农杆菌转化的有效方法 ,为巴戟天新品种选育、引入外源目的基因奠定基础。方法 :以巴戟天带节茎为材料 ,农杆菌菌株为EHA10 1,含有质粒载体pGA4 82GG ,质粒上插入了GUS、NPTⅡ基因。结果 :MT基本培养基附加BA 1mg·L-1,外植体出芽率最高 (97.8% ) ,BA浓度升高 ,出芽率下降。外植体在培养基上的接种方式 ,以竖放为好 ,出芽所需的时间短且出芽率高。根的诱导 ,以MT附加 0 .2～ 0 .5mg·L-1NAA效果较好 ,生根率可达 80 .0 %以上。巴戟天带节茎进行遗传转化 ,卡那霉素作为选择试剂 ,浓度为 5 0mg·L-1。头孢霉素用作抑菌剂 ,浓度为 30 0mg·L-1。经感染的外植体 ,在选择培养基上筛选 1.5个月后 ,抗性芽发生率为 14 .8% ,GUS基因表达检测结果 ,抗性植株中 ,GUS反应呈阳性所占比例为 2 2 .2 %。结论 :通过探讨巴戟天的离体培养及根癌农杆菌介导的遗传转化 ,获得了较高的离体再生频率 ,建立了有效的遗传转化系统。 展开更多
关键词 离体再生 农杆菌 巴戟天 离体培养 遗传转化
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农杆菌介导的遗传转化在水稻基因工程中的应用 被引量：4
8
作者 潘素君 戴良英 +1 位作者 刘雄伦 王国梁 《中国稻米》 2007年第3期10-14,共5页
农杆菌作为一种天然的遗传转化系统,在水稻基因工程中倍受重视。本文概述了农杆菌介导转化水稻的原理、影响因素、遗传改良上的应用及存在的问题。
关键词 农杆菌转化系统 原理 影响因素 遗传改良
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水稻植株再生与农杆菌介导的遗传转化研究 被引量：1
9
作者 向阳 赵德刚 +1 位作者 朱冬雪 余显权 《分子植物育种》 CAS CSCD 2003年第5期827-828,共2页
本研究以不同籼稻品种的成熟胚为材料 ,研究了不同培养基对愈伤组织诱导、分化和植株再生的影响 ,并研究了利用农杆菌介导bar基因和ipt基因的遗传转化技术。结果表明 ,采用NBD (N6 salts +B5Vitamin +casaminoacids 5 0 0mg/L +proline ... 本研究以不同籼稻品种的成熟胚为材料 ,研究了不同培养基对愈伤组织诱导、分化和植株再生的影响 ,并研究了利用农杆菌介导bar基因和ipt基因的遗传转化技术。结果表明 ,采用NBD (N6 salts +B5Vitamin +casaminoacids 5 0 0mg/L +proline 5 0 0mg/L +glutamine 30 0mg/L +mannitol 36 4 g/L +su crose 30 g/L +2 ,4 -D 2mg/L +6 -BA 0 2mg/L +phytagel 2 5 g/L ,pH 5 8)为诱导培养基 ,MSD(MS +casaminoacids 5 0 0mg/L +proline 5 0 0mg/L +glutamine 30 0mg/L +mannitol 36 4 g/L +sucrose30 g/L +2 ,4 -D 2mg/L +6 -BA 0 2mg/L +phytagel 2 5 g/L ,pH 5 8)与NBD培养基交替继代培养 ,籼稻愈伤组织诱导率高、质量较好 ;采用MSR3c (MS +casaminoacids 5 0 0mg/L +glutamine 30 0mg/L +proline 5 0 0mg/L +mannitol 36 4 g/L +maltose 30 g/L +TDZ 0 2mg/L +phytagel 5 g/LpH5 8)为分化培养基 ,愈伤组织分化率均在 90 %以上。本研究利用农杆菌介导 ,将Act启动子驱动的抗除草剂基因 (bar)和异戊烯基转移酶基因 (ipt)构建的融合基因表达载体对水稻进行遗传转化。初步确定了愈伤组织筛选及分化培养基附加除草剂(glufosinateammoniun) 4mg/L、头孢霉素 30 0mg/L ,愈伤组织预培养 2 - 3天 。 展开更多
关键词 水稻 植株再生 农杆菌介导 遗传转化 培养基
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水稻转座子Pong特异性RNAi载体TPAS的构建和农杆菌介导的遗传转化条件的优化
10
作者 高立宏 张春玉 +3 位作者 柴娜 路云侠 刘宝 刘立侠 《东北师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期122-127,共6页
为研究水稻转座子Pong的功能,构建了Pong的特异RNAi表达载体TPAS,并利用农杆菌介导法将这个载体转化到水稻的成熟胚愈伤组织,获得了PCR阳性的再生植株.同时通过对农杆菌侵染途径、侵染浓度和侵染时间等的研究,建立并优化了水稻的遗传转... 为研究水稻转座子Pong的功能,构建了Pong的特异RNAi表达载体TPAS,并利用农杆菌介导法将这个载体转化到水稻的成熟胚愈伤组织,获得了PCR阳性的再生植株.同时通过对农杆菌侵染途径、侵染浓度和侵染时间等的研究,建立并优化了水稻的遗传转化程序.结果表明:在农杆菌侵染成熟胚愈伤组织的时间为3min,共培养2～4d,预培养7d,G418质量浓度为150～200mg/L条件下筛选7d,转化率可达到30%,为最佳的遗传转化参数.研究结果为今后水稻转座子Pong功能的进一步研究提供了一定的基础和参考. 展开更多
关键词 水稻 转座子 RNAI 农杆菌介导 遗传转化
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鱼腥草离体再生及农杆菌介导的遗传转化
11
作者 董燕 来慧丽 +2 位作者 张雅明 周联 王培训 《广州中医药大学学报》 CAS 2010年第1期53-56,共4页
【目的】建立鱼腥草离体再生系统和农杆菌介导的遗传转化方法。【方法】以鱼腥草叶片为外植体置于不同激素配比的MS培养基上,进行愈伤组织诱导和分化再生。以根癌农杆菌EHA105/pCAMB IA1305.2进行转化,将外源GUS(β-葡萄糖醛糖苷酶)基... 【目的】建立鱼腥草离体再生系统和农杆菌介导的遗传转化方法。【方法】以鱼腥草叶片为外植体置于不同激素配比的MS培养基上,进行愈伤组织诱导和分化再生。以根癌农杆菌EHA105/pCAMB IA1305.2进行转化,将外源GUS(β-葡萄糖醛糖苷酶)基因、潮霉素抗性基因转入鱼腥草,以组织化学染色法检测GUS活性,以聚合酶链反应(PCR)法鉴定基因组中的GUS基因。【结果】MS培养基中添加0.1 mg/Lα-奈乙酸(NAA)、2.0 mg/L 6-苄基腺嘌呤(6-BA)、0.5 mg/L呋喃氨基嘌呤(KT)适于以鱼腥草叶片为外植体进行离体再生,出芽率达96.7%。潮霉素作为筛选试剂,使用浓度为2.5 mg/L;头孢霉素作为抑菌剂,使用浓度为250 mg/L。经感染的外植体中GUS反应呈阳性的占75.0%,8周统计抗性芽比率5.5%,PCR分析表明GUS基因已整合到鱼腥草基因组中。【结论】通过鱼腥草离体培养条件的研究及根癌农杆菌介导的遗传转化,获得了较高的离体再生率,实现了鱼腥草的遗传转化。 展开更多
关键词 鱼腥草/生长和发育 离体再生 遗传转化 根癌农杆菌
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农杆菌介导的遗传转化籼稻Kasalath的条件优化 被引量：4
12
作者 周艳 黄亚萍 +3 位作者 周遥 吴亚先 周兰英 姜孝成 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期471-477,共7页
Kasalath是目前用于水稻转基因研究的籼稻模式材料。运用组织培养和农杆菌介导的遗传转化技术,对水稻Kasalath愈伤组织诱导和遗传转化体系进行了优化。结果表明:以Kasalash的幼嫩种子或新鲜的成熟种子为外植体诱导愈伤组织的效果优于贮... Kasalath是目前用于水稻转基因研究的籼稻模式材料。运用组织培养和农杆菌介导的遗传转化技术,对水稻Kasalath愈伤组织诱导和遗传转化体系进行了优化。结果表明:以Kasalash的幼嫩种子或新鲜的成熟种子为外植体诱导愈伤组织的效果优于贮藏1年的种子;用0.5、1、1.5、2、2.5、3、10、20、30 mg/L的2,4–D诱导愈伤组织,以2.5 mg/L的2,4–D诱导效果最佳;用菌液OD600 nm为0.05、0.1、0.15、0.2、0.3、0.4的农杆菌Ag10和EHA105与愈伤组织共培养介导遗传转化,皆以OD600 nm为0.15的农杆菌溶液效果最好,且EHA105的介导效果比Ag10更佳,其抗性愈伤率可达82.0%;EHA105的介导(共培养)时间以3 d为宜;分化培养前对愈伤组织进行6～8 h快速干燥或48～72 h慢速干燥处理,可以明显提高愈伤组织的再生成苗率,并缩短分化时间;在对愈伤组织侵染处理前的预培养处理和对抗性愈伤进行分化培养前的预分化培养处理对Kasalath的遗传转化效率影响不大,可省略以缩短遗传转化时间。遵循以上优化条件,从愈伤组织诱导至遗传转化获得再生植株全过程的时间只需57～60 d(已报道的遗传转化全过程需70 d以上),遗传转化效率可达到已报道的最高值65%。 展开更多
关键词 籼稻 2 4-D 农杆菌介导 遗传转化 影响因素
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农杆菌介导的遗传转化在花生上的应用及前景
13
作者 吴丽萍 吴祖建 《福建农业科技》 2001年第2期16-18,共3页
农杆菌介导的遗传转化已广泛应用于各种植物。本文综述了农杆菌介导的遗传转化在花生上的应用及其前景。
关键词 花生 农杆菌介导 遗传转化 器官发生 萌动种胚 转基因育种
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利用GUS基因的瞬时表达优化大豆根癌农杆菌介导的遗传转化 被引量：4
14
作者 杨明明 高海京 +5 位作者 马啸燕 孙英楠 邵宇鹏 包格格 李文滨 王志坤 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期353-359,共7页
高转化效率是分子育种的重要前提,根癌农杆菌介导的遗传转化由于其有较高的遗传效率和较低的拷贝数成为目前优选方法。为优化大豆遗传转化体系,以本实验室已有转化体系为基础,利用pCAMBIA3301中35S∶GUS基因瞬时表达体系,从萌发时间、... 高转化效率是分子育种的重要前提,根癌农杆菌介导的遗传转化由于其有较高的遗传效率和较低的拷贝数成为目前优选方法。为优化大豆遗传转化体系,以本实验室已有转化体系为基础,利用pCAMBIA3301中35S∶GUS基因瞬时表达体系,从萌发时间、切豆方法、侵染时间、共培养方式以及共培养时间等方面对东农47、垦农18和B12088大豆栽培品种的遗传转化体系进行优化。结果表明:东农47萌发1 d,侵染30 min;垦农18和B12088萌发12 h,侵染30 min,GUS基因瞬时表达率最高。在其它的处理上,3个品种表现结果一致,即蘸取菌液切豆,共培养中子叶伤口朝下摆放,黑暗条件下共培养3～5 d,GUS基因瞬时表达最高。3个品种在最适条件下,GUS染色效率均达到90%以上,垦农18遗传转化效率较高。本研究为大豆农杆菌介导子叶节转化方法提供了一个改进的方案,并且为拓宽可利用于大豆遗传转化的种质资源奠定基础。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 大豆遗传转化 转化率 GUS基因瞬时表达
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根癌农杆菌介导的遗传转化及其在稻瘟病菌中的应用 被引量：7
15
作者 何丽云 张树林 +3 位作者 崔百元 朱庆锋 刘圣杰 刘文华 《广东农业科学》 CAS 2019年第3期93-100,共8页
根癌农杆菌介导的遗传转化(ATMT)技术是近20年发展起来的真菌研究中最具变革性的技术之一,它作为一种转化工具已被广泛应用于真菌基因功能研究中,使人们对真菌基因组学的理解有了很大的改变。利用ATMT获得随机的T-DNA插入突变体库,结合... 根癌农杆菌介导的遗传转化(ATMT)技术是近20年发展起来的真菌研究中最具变革性的技术之一,它作为一种转化工具已被广泛应用于真菌基因功能研究中,使人们对真菌基因组学的理解有了很大的改变。利用ATMT获得随机的T-DNA插入突变体库,结合突变体菌株表型筛选,使许多过程的遗传基础得到阐明。ATMT法具有操作简单,转化受体广泛,转化效率高以及转化子遗传稳定性高等优势。稻瘟病菌是植物十大重要真菌之一,是引发水稻稻瘟病的病原真菌。目前,培育水稻抗病品种是控制稻瘟病最经济和环保的方法。通过克隆稻瘟病菌相关致病基因并研究其功能,在解释致病机理和生理特性,以及培育抗病品种方面具有重要的理论和实践意义。以根癌农杆菌为介导的遗传转化为稻瘟病菌的插入突变、基因敲除和标记克隆等方面研究提供了一个重要工具。针对根癌农杆菌介导的遗传转化原理、特点、步骤、影响因素以及该技术在稻瘟病菌功能基因组学研究中的应用进行综述,以期能够为稻瘟病菌等真菌的遗传转化方面研究提供相关的参考。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 遗传转化 稻瘟病菌 功能基因 突变体库
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根癌农杆菌介导的紫花苜蓿遗传转化体系的优化
16
作者 王之杰 李明序 张万军 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1665-1671,共7页
为进一步提高根癌农杆菌介导的紫花苜蓿遗传转化效率,本试验以紫花苜蓿(Medicago sativa L.)品种‘中苜1号’为试验材料,通过筛选高效再生的植株,以筛选出的植株叶片为外植体,并通过调节培养基激素配比,在农杆菌侵染过程中添加谷氨酰胺... 为进一步提高根癌农杆菌介导的紫花苜蓿遗传转化效率,本试验以紫花苜蓿(Medicago sativa L.)品种‘中苜1号’为试验材料,通过筛选高效再生的植株,以筛选出的植株叶片为外植体,并通过调节培养基激素配比,在农杆菌侵染过程中添加谷氨酰胺、进行冷处理等措施优化苜蓿由农杆菌介导的遗传转化体系。试验结果表明:转化过程中以嫩叶作为外植体,菌液和重悬液中添加150μmol·L^(-1)乙酰丁香酮,侵染过程中使用300μmol·L^(-1)的谷氨酰胺将瞬时转化效率从32%提高至92%,转化效率提高到31%。研究紫花苜蓿的遗传转化体系可为紫花苜蓿高效遗传改良及基因功能研究提供了技术支持。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 根癌农杆菌 遗传转化 体系优化
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根癌农杆菌介导彩色马蹄莲遗传转化体系的建立及优化
17
作者 李菲 曹永琼 +3 位作者 王纲 郭彦兵 李紫薇 吴红芝 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1692-1699,共8页
【目的】建立及优化根癌农杆菌介导的彩色马蹄莲(Zantedeschia hybrida)遗传转化体系,为提高彩色马蹄莲遗传转化效率及培育彩色马蹄莲抗性品种提供理论参考依据。【方法】将不同外植体(茎基、叶、不定芽)和不同浓度噻苯隆(TDZ)(0.001、0... 【目的】建立及优化根癌农杆菌介导的彩色马蹄莲(Zantedeschia hybrida)遗传转化体系,为提高彩色马蹄莲遗传转化效率及培育彩色马蹄莲抗性品种提供理论参考依据。【方法】将不同外植体(茎基、叶、不定芽)和不同浓度噻苯隆(TDZ)(0.001、0.002和0.005 g/L)进行正交试验筛选外植体和丛生芽增殖培养基;液氮冻融法将pCAM BIA2301和pBI121质粒转入农杆菌LBA4404感受态细胞。以β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因作为农杆菌介导转化测定的报告基因,对彩色马蹄莲的丛生芽进行遗传转化,阳性苗经PCR扩增验证转化结果。通过不同硫酸卡那霉素(Kan)浓度(50、100和150 mg/L)、侵染时间(25、30和40 min)及共培养时间(2和3 d)3因素正交试验筛选最佳转化条件。【结果】外植体为不定芽的丛生芽诱导率极显著高于茎基和叶(P<0.01),当不定芽为外植体、TDZ浓度为0.002 mg/L时,丛生芽增殖倍数(5.12倍)显著高于0.001和0.005 mg/L TDZ处理(P<0.05),筛选出M6培养基+0.002 mg/L TDZ+30 g/L蔗糖+6.25 g/L琼脂为丛生芽增殖培养基;影响阳性频率因素排序为:侵染时间>Kan浓度>共培养时间。当Kan浓度为50 mg/L、侵染时间25 min及共培养时间为3 d为最优侵染条件,此时,GUS+丛生芽出芽频率和PCR阳性频率最高,分别为54.0%和15.27%。【结论】成功优化彩色马蹄莲遗传转化体系,最佳外植体为不定芽,转化体系最佳组合为Kan浓度为50 mg/L、侵染时间为25 min及共培养时间为3 d。 展开更多
关键词 彩色马蹄莲 根癌农杆菌 遗传转化 优化
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农杆菌介导的黄瓜遗传转化体系优化研究
18
作者 陈梅 陈露倩 +2 位作者 陈思 杜长霞 樊怀福 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期540-545,571,共7页
【目的】筛选适用于农杆菌介导的黄瓜遗传转化体系,为通过生物技术进行黄瓜新品种培育奠定基础。【方法】以华北型黄瓜品种‘9930’子叶为试材,探讨卡那霉素浓度(kanamycin, Kan)、预培养时间、预培养基添加乙酰丁香酮(acetosyringone, ... 【目的】筛选适用于农杆菌介导的黄瓜遗传转化体系,为通过生物技术进行黄瓜新品种培育奠定基础。【方法】以华北型黄瓜品种‘9930’子叶为试材,探讨卡那霉素浓度(kanamycin, Kan)、预培养时间、预培养基添加乙酰丁香酮(acetosyringone, AS)、分化培养基pH及生根培养基中添加不同外源物质对黄瓜遗传转化的影响。【结果】不定芽分化、生根阶段的Kan临界浓度为150 mg/L;不进行预培养的黄瓜不定芽诱导率最高,为77.17%;当分化培养基pH为5.6时不定芽诱导率最高,为75.26%;外植体在添加0.5 mg/L的IBA生根培养基上生根率达100%,根长也显著增加。【结论】在以黄瓜品种‘9930’子叶节为外植体的遗传转化体系中,150 mg/L Kan可作为不定芽分化和生根阶段的筛选选择压;不进行预培养更有利于其抗性芽诱导;适合不定芽诱导的分化培养基pH为5.6;0.5 mg/L的IBA为诱导外植体生根最佳激素浓度。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 黄瓜 遗传转化
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农杆菌介导辣椒遗传转化的影响因素
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作者 许晴 张宏冠 +4 位作者 赵红杰 龙醌 吴明秋 刘震桦 胡博文 《辣椒杂志》 2024年第1期38-46,共9页
再生体系遗传转化是现代生物技术的一个重要手段,该技术转化基因稳定、成本低效益高。但基因依赖型和顽抗性植物辣椒对农杆菌不敏感,导致辣椒再生体系遗传转化效率低,且存在基因转移整合或目的基因脱靶等问题。为此,综述了农杆菌介导辣... 再生体系遗传转化是现代生物技术的一个重要手段,该技术转化基因稳定、成本低效益高。但基因依赖型和顽抗性植物辣椒对农杆菌不敏感,导致辣椒再生体系遗传转化效率低,且存在基因转移整合或目的基因脱靶等问题。为此,综述了农杆菌介导辣椒遗传转化的基因型、受体、外源添加物、发育调节因子、编辑器、接种物、预培养、侵染时间、共培养以及褐化等影响因素,以期降低辣椒遗传转化风险,提高辣椒再生体系遗传转化效率。 展开更多
关键词 辣椒 再生体系 遗传转化 农杆菌
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农杆菌介导的桑树遗传转化研究进展
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作者 何骥 梁思思 +10 位作者 韦炳佩 莫愁 何清 虞崇江 黄梅梅 白雪 邱长玉 黄胜 王平阳 刘丹 莫荣利 《中国蚕业》 2024年第2期57-63,共7页
农杆菌介导的遗传转化法是目前植物应用最为广泛的转基因技术。介绍了农杆菌介导的植物遗传转化机理,分别对根癌农杆菌和发根农杆菌介导的桑树遗传转化发展状况、研究进展进行了综述,并对桑树遗传转化研究进行了展望,以期为桑树后基因... 农杆菌介导的遗传转化法是目前植物应用最为广泛的转基因技术。介绍了农杆菌介导的植物遗传转化机理,分别对根癌农杆菌和发根农杆菌介导的桑树遗传转化发展状况、研究进展进行了综述,并对桑树遗传转化研究进行了展望,以期为桑树后基因组时代遗传转化研究提供参考。 展开更多
关键词 桑树 根癌农杆菌 发根农杆菌 遗传转化 转基因植株 组织培养 阳性率
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