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晚期糖基化终末产物受体在波动性高糖致人冠状动脉内皮细胞凋亡中的作用
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作者 庄微 孔娜娜 +1 位作者 刘挺松 王磊 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第5期482-487,共6页
目的研究持续性高糖(CHG)和波动性高糖(IHG)环境下,人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)的细胞凋亡情况,并探索HCAECs细胞凋亡是否由晚期糖基化终末产物受体(RAGE)介导发生。方法取对数生长期的HCAECs分为4组:①正常血糖组(CNG组,5 mmol/L葡萄... 目的研究持续性高糖(CHG)和波动性高糖(IHG)环境下,人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)的细胞凋亡情况,并探索HCAECs细胞凋亡是否由晚期糖基化终末产物受体(RAGE)介导发生。方法取对数生长期的HCAECs分为4组:①正常血糖组(CNG组,5 mmol/L葡萄糖);②持续性高糖组(CHG组,20 mmol/L葡萄糖);③波动性高糖组(IHG组,5 mmol/L和20 mmol/L葡萄糖每8 h波动1次);④波动性甘露醇对照组(IM组,5 mmol/L和20 mmol/L甘露醇每8小时波动1次,保持与波动性高糖相同的波动性渗透压环境)。不同条件处理后的HCAECs,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞活力,流式细胞术检测HCAECs细胞凋亡情况,Westernblot检测Caspase-3、RAGE的蛋白表达水平变化,qRT-PCR检测RAGE的转录水平变化情况。用靶向RAGE的shRNA慢病毒敲低HCAECs中RAGE的表达量,观察IHG中Caspase-3的活化表达情况。结果与CNG组相比,CHG组和IHG组细胞活力均降低(P<0.05),但IHG组细胞活力更低(P=0.035);IHG组细胞凋亡率增加(P=0.028),Caspase-3活化状态(P=0.037)和RAGE表达量显著增加(P<0.05)。用靶向RAGE的shRNA慢病毒敲低RAGE表达水平,发现波动性高糖导致的细胞凋亡情况得到明显改善(P<0.05)。结论波动性高糖可通过增强RAGE表达,促进细胞凋亡,引起HCAECs损伤。 展开更多
关键词 波动性高糖 晚期糖基化终末产物受体 冠状动脉内皮细胞 细胞凋亡
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川芎嗪通过miR-34a对氧化型低密度脂蛋白诱导的冠状动脉内皮细胞损伤的保护作用 被引量:2
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作者 顾民华 顾勇 《陕西中医》 CAS 2023年第9期1169-1172,共4页
目的:探讨川芎嗪是否通过miR-34a影响氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)损伤。方法:正常培养人HCAECs,作为Con组;用50 mg/L的ox-LDL干预HCAECs,建立细胞损伤模型,作为ox-LDL组。并设立1、10、100 mmol/L组(HC... 目的:探讨川芎嗪是否通过miR-34a影响氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)损伤。方法:正常培养人HCAECs,作为Con组;用50 mg/L的ox-LDL干预HCAECs,建立细胞损伤模型,作为ox-LDL组。并设立1、10、100 mmol/L组(HCAECs用1、10、100 mmol/L川芎嗪处理+ox-LDL干预),ox-LDL+anti-miR-NC组、ox-LDL+anti-miR-34a组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-34a组、ox-LDL+miR-NC+100 mmol/L组、ox-LDL+miR-34a+100 mmol/L组。分别采用试剂盒、酶联免疫吸附法(ELISA)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测HCAECs中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平和微小核糖核酸34a(miR-34a)表达。结果:ox-LDL组HCAECs的MDA含量、TNF-α、IL-1β水平、miR-34a表达水平比Con组显著升高,SOD活力比Con组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与ox-LDL组比较,川芎嗪显著降低细胞MDA含量、TNF-α、IL-1β水平以及miR-34a表达水平,显著升高SOD活力,差异有统计学意义(P<0.05)。与ox-LDL+anti-miR-NC组比较,ox-LDL+anti-miR-34a组细胞MDA含量以及TNF-α、IL-1β水平显著降低,SOD活力显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。ox-LDL+miR-34a+100 mmol/L组HCAECs的MDA含量以及TNF-α、IL-1β水平显著高于ox-LDL+miR-NC+100 mmol/L组,SOD活力显著低于ox-LDL+miR-NC+100 mmol/L组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:川芎嗪通过抑制miR-34a降低ox-LDL诱导的人HCAECs炎症反应和氧化应激。 展开更多
关键词 川芎嗪 MIR-34A 冠状动脉内皮细胞 炎症反应 氧化应激 氧化型低密度脂蛋白
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动力相关蛋白1促进高糖诱导的冠状动脉内皮细胞线粒体损伤 被引量:2
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作者 郑曦 何蔺 +1 位作者 窦晓涛 蒲明玉 《解剖学研究》 CAS 2023年第4期379-383,共5页
目的探讨动力相关蛋白1(Drp1)在高糖诱导的冠状动脉内皮细胞中的表达水平、生物学功能及其对线粒体功能的影响。方法通过实时荧光定量PCR和Western blot实验检测高糖诱导的冠状动脉内皮细胞中Drp1、OPA1及MFN1的表达水平;通过转染Drp1 s... 目的探讨动力相关蛋白1(Drp1)在高糖诱导的冠状动脉内皮细胞中的表达水平、生物学功能及其对线粒体功能的影响。方法通过实时荧光定量PCR和Western blot实验检测高糖诱导的冠状动脉内皮细胞中Drp1、OPA1及MFN1的表达水平;通过转染Drp1 shRNA表达质粒敲低Drp1的表达,用CCK⁃8实验检测细胞活力,用Annexin V染色实验检测细胞凋亡水平,并通过JC⁃1荧光染色实验和Calcein⁃AM荧光染色实验分别检测线粒体膜电位和线粒体通透性转换孔。结果高浓度葡萄糖处理的冠状动脉内皮细胞中Drp1 mRNA和蛋白的表达显著升高(均P<0.05),细胞活力显著下降(P<0.05),凋亡细胞比例显著升高(P<0.05),线粒体膜电位降低(P<0.05),线粒体通透性转换孔活性升高(P<0.05);敲低Drp1可以增强细胞活力(P<0.05),并显著抑制高糖诱导的细胞凋亡(P<0.05)、线粒体膜电位下降(P<0.05)和线粒体通透性转换孔活性的升高(P<0.05)。结论Drp1在高糖诱导的冠状动脉内皮细胞损伤中表达水平升高,敲低Drp1可以缓解高糖诱导的冠状动脉内皮细胞损伤和线粒体功能损伤。 展开更多
关键词 糖尿病 冠心病 动力相关蛋白1 线粒体 冠状动脉内皮细胞
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川崎病中性粒细胞高表达CD100促进冠状动脉内皮细胞迁移和炎症反应
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作者 黄君华 谢小娟 +1 位作者 赵传梅 张书婉 《标记免疫分析与临床》 CAS 2023年第11期1831-1835,共5页
目的探讨川崎病(KD)患者中性粒细胞条件培养基对冠状动脉内皮细胞(HCAECs)生物学功能的影响。方法以健康儿童(HC)外周血中性粒细胞为对照组,KD患儿外周血中性粒细胞为实验组,KD中性粒细胞通过siRNA沉默CD100为si-CD100组,无效siRNA转染... 目的探讨川崎病(KD)患者中性粒细胞条件培养基对冠状动脉内皮细胞(HCAECs)生物学功能的影响。方法以健康儿童(HC)外周血中性粒细胞为对照组,KD患儿外周血中性粒细胞为实验组,KD中性粒细胞通过siRNA沉默CD100为si-CD100组,无效siRNA转染为si-NC组,RT-PCR检测siRNA敲减效率及CD100 mRNA表达;体外培养各组中性粒细胞并收集条件培养基,ELISA法检测各组条件培养基中CD100的水平;Transwell实验检测各组中性粒细胞条件培养基对HCAECs迁移能力的影响;RT-PCR检测各组中性粒细胞条件培养基对HCAECs细胞因子IL-1β和IL-18表达水平的影响。结果RT-PCR显示KD中性粒细胞CD100 mRNA表达较HC组明显升高(t=11.92,P<0.05),验证si-CD100组CD100 mRNA的表达较si-NC组明显降低(t=13.40,P<0.05);ELISA实验结果显示,KD中性粒细胞条件培养基中CD100水平较HC组明显增高(t=12.01,P<0.05),si-CD100组较si-NC组明显降低(t=11.53,P<0.05);Transwell实验结果显示,与HC相比,经KD中性粒细胞条件培养基处理的HCAECs的迁移能力明显增加(t=12.63,P<0.05),而si-CD100组较si-NC组明显下降(t=4.09,P<0.05);RT-PCR实验结果显示,与HC相比,经KD中性粒细胞条件培养基处理的HCAECs中IL-1β和IL-18的mRNA表达明显升高(t=14.11和18.40,P<0.05),而si-CD100组较si-NC组明显减低(t=11.88和9.21,P<0.05)。结论川崎病患者中性粒细胞高表达并分泌CD100,CD100促进冠状动脉内皮细胞迁移和炎症反应。 展开更多
关键词 CD100 川崎病 中性粒细胞 冠状动脉内皮细胞 儿童
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LY294002对类脂A诱导的人冠状动脉内皮细胞缝隙连接蛋白43表达的影响
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作者 孔海全 李明远 巫相宏 《现代医药卫生》 2023年第10期1621-1625,共5页
目的探讨LY294002对类脂A(KLA)诱导的人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法用CCK8法检测0、0.01、0.05、0.10、0.20 mg/L KLA和0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L磷酸肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂——LY294002... 目的探讨LY294002对类脂A(KLA)诱导的人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法用CCK8法检测0、0.01、0.05、0.10、0.20 mg/L KLA和0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L磷酸肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂——LY294002对HCAEC活力的影响。将HCAEC采用简单随机分组法分为空白对照组(Con组)、Toll样受体4(TLR4)激动组(KLA组)、PI3K抑制组(LY组)和KLA+LY组,采用Western Blot法检测各组HCAEC TLR4、PI3K、Cx43蛋白表达水平。结果0.01、0.05 mg/L KLA HCAEC存活率与0 mg/L比较,2.5μmol/L LY294002 HCAEC存活率与0μmol/L比较,差异均无统计学意义(P>0.05);0.10、0.20 mg/L KLA HCAEC存活率均明显低于0 mg/L,5.0、10.0、20.0μmol/L LY294002 HCAEC存活率均明显低于0μmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。KLA组HCAEC TLR4、PI3K、Cx43蛋白表达水平明显高于Con组,LY组HCAEC PI3K蛋白表达水平明显低于Con组,KLA+LY组HCAEC TLR4、PI3K、Cx43蛋白表达水平均低于KLA组,差异均有统计学意义(P<0.05);LY组HCAEC TLR4、Cx43蛋白表达水平与Con组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论LY294002对正常培养状态下HCAEC TLR4、Cx43蛋白表达无显著影响。LY294002可抑制由KLA诱导的HCAEC Cx43高表达。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 磷脂酰肌醇3激酶 缝隙连接蛋白43 冠状动脉内皮细胞
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黄连素对波动性高糖导致的人冠状动脉内皮细胞炎症反应的影响
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作者 庄微 李言明 王磊 《中西医结合心脑血管病杂志》 2023年第2期260-264,共5页
目的:研究黄连素(BBR)对波动性高糖导致的人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)炎症反应的作用。方法:分离、培养HCAECs,将HCAECs分为5组。正常血糖组(NG组)加入5.5 mmol/L葡萄糖;持续性高糖组(PHG组)加入25 mmol/L葡萄糖;波动性高糖组(IHG组)加... 目的:研究黄连素(BBR)对波动性高糖导致的人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)炎症反应的作用。方法:分离、培养HCAECs,将HCAECs分为5组。正常血糖组(NG组)加入5.5 mmol/L葡萄糖;持续性高糖组(PHG组)加入25 mmol/L葡萄糖;波动性高糖组(IHG组)加入5.5 mmol/L葡萄糖和25 mmol/L葡萄糖24 h波动1次;对照组(OC组)加入5.5 mmol/L和25 mmol/L甘露醇24 h波动1次,为波动性高渗环境;波动性高糖+黄连素组(IHG+BBR组):5.5 mmol/L葡萄糖和25 mmol/L葡萄糖+50μmol/L黄连素24 h波动1次。以上5组HCAECs培养7 d。用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白细胞介素-10(IL-10)等炎症指标的蛋白水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定IL-1β、TNF-α、MCP-1和IL-10的mRNA表达。结果:PHG组和IHG组IL-1β、TNF-α、MCP-1水平较NG组和OC组明显升高,IL-10表达水平较NG组和OC组明显降低(P<0.05)。IHG组IL-1β、TNF-α、MCP-1较PHG组升高明显,IL-10较PHG组降低明显(P<0.05)。IHG+BBR组IL-1β、TNF-α、MCP-1表达水平较IHG组降低,IL-10表达水平较IHG组升高(P<0.05)。结论:波动性高糖比持续性高糖更易引起HCAECs的炎症反应,黄连素对波动性高糖导致的HCAECs的炎症反应具有明显的保护作用。 展开更多
关键词 波动性高糖 黄连素 冠状动脉内皮细胞 炎症反应 实验研究
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氧化低密度脂蛋白刺激人冠状动脉内皮细胞可诱导共刺激分子配体的表达 被引量:3
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作者 徐琳 李志梁 +6 位作者 朱肖星 马骏 洪长江 何建新 向定成 潘春梅 邱健 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期819-821,共3页
目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人冠状动脉内皮细胞表达可诱导共刺激分子配体(ICOSL)的影响。方法:以人冠状动脉内皮细胞为研究对象,通过间接免疫荧光、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot等方法,观察ICOSL在人冠状动脉内... 目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人冠状动脉内皮细胞表达可诱导共刺激分子配体(ICOSL)的影响。方法:以人冠状动脉内皮细胞为研究对象,通过间接免疫荧光、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot等方法,观察ICOSL在人冠状动脉内皮细胞的表达及ox-LDL的干预作用。结果:对照组和ox-LDL刺激组ICOSL mRNA的平均光密度OD值分别为0.071±0.035和0.186±0.044(n=6),ICOSL Western blot吸光度A值分别为10.88±1.53和16.03±4.08(n=6),ox-LDL(100mg/L)可增加ICOSL在人冠状动脉内皮细胞中mRNA和蛋白的表达,并具有统计学意义(P<0.05)。结论:ox-LDL可上调人冠状动脉内皮细胞表达ICOSL。 展开更多
关键词 ICOSL OX-LDL 冠状动脉内皮细胞 动脉粥样硬化 免疫
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重楼皂苷I对体外抑制冠状动脉内皮细胞增殖的影响 被引量:6
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作者 王娓娓 吴雪松 +4 位作者 张红苗 张雯 张莹 叶宏 鲍天昊 《昆明医科大学学报》 CAS 2016年第11期37-40,共4页
目的观察重楼皂苷I对冠状动脉内皮细胞增殖的影响.方法重楼皂苷I处理冠状动脉内皮细胞后,通过细胞计数法计算冠状动脉内皮细胞的生长速度,MTT法测定冠状动脉内皮细胞活性,RT-PCR测定钙粘蛋白和Caspase3mRNA表达.结果重楼皂苷I减慢冠状... 目的观察重楼皂苷I对冠状动脉内皮细胞增殖的影响.方法重楼皂苷I处理冠状动脉内皮细胞后,通过细胞计数法计算冠状动脉内皮细胞的生长速度,MTT法测定冠状动脉内皮细胞活性,RT-PCR测定钙粘蛋白和Caspase3mRNA表达.结果重楼皂苷I减慢冠状动脉内皮细胞的生长速度,降低冠状动脉内皮细胞活力,降低冠状动脉内皮细胞的钙粘蛋白mRNA表达,增加Caspase3 mRNA表达.结论重楼皂苷I抑制冠状动脉内皮细胞增殖,诱导冠状动脉内皮细胞凋亡. 展开更多
关键词 重楼皂苷I 冠心病 冠状动脉内皮细胞 钙粘蛋白 增殖
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高同型半胱氨酸血症大鼠冠状动脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白1的表达 被引量:7
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作者 袁征 王晓燕 +3 位作者 曾玉梅 董伟 陈多恩 王国平 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2008年第3期177-180,共4页
目的观察高同型半胱氨酸血症对大鼠冠状动脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1的影响,以明了冠状动脉粥样硬化性心脏病的发病机制。方法24只大鼠随机分成正常饮食对照组、高蛋氨酸饮食组、高蛋氨酸+叶酸饮食组、高半胱氨酸饮食组。每组6只... 目的观察高同型半胱氨酸血症对大鼠冠状动脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1的影响,以明了冠状动脉粥样硬化性心脏病的发病机制。方法24只大鼠随机分成正常饮食对照组、高蛋氨酸饮食组、高蛋氨酸+叶酸饮食组、高半胱氨酸饮食组。每组6只,分别给予普通饲料;普通饲料加1.7%蛋氨酸;普通饲料加1.7%蛋氨酸和0.006%叶酸;普通饲料加1.2%半胱氨酸。饲养6周,采用高效液相色谱荧光检测法测定血浆总同型半胱氨酸浓度,免疫组织化学染色法检测大鼠冠状动脉左主干和左前降支内皮细胞单核细胞趋化蛋白1的表达。结果喂以高蛋氨酸饲料6周,可诱导大鼠高同型半胱氨酸血症。与正常饮食对照组比较,高蛋氨酸饮食组大鼠血浆总同型半胱氨酸浓度显著升高(P<0.01),冠状动脉内皮单核细胞趋化蛋白1的表达水平明显增强;高蛋氨酸+叶酸饮食组大鼠血浆总同型半胱氨酸水平较高蛋氨酸饮食组显著降低(P<0.01),其冠状动脉内皮单核细胞趋化蛋白1的表达水平也降低;高半胱氨酸饮食组大鼠血浆总同型半胱氨酸浓度,以及冠状动脉内皮单核细胞趋化蛋白1的表达水平与正常饮食对照组比较差异无显著性。结论高同型半胱氨酸血症促进了大鼠冠状动脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1,在冠状动脉粥样硬化性心脏病的发生和发展中起着重要的作用。 展开更多
关键词 病理学 高同型半胱氨酸血症 动脉粥样硬化 冠状动脉内皮细胞 单核细胞趋化蛋白1 叶酸
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在体评价犬和猪冠状动脉内皮细胞的功能 被引量:2
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作者 柳俊 马虹 +5 位作者 何建桂 靳亚非 刘磊 戴刚 钱月桃 郑振声 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期408-412,共5页
【目的】在体观察缺血再灌注对犬冠状动脉内皮细胞功能的影响以及猪冠状动脉对血管活性药物的反应性。【方法】动脉麻醉后开胸、心包吊床,之后分离冠状动脉左前降支。犬作第一对角支插管,猪作冠状动脉左回旋支插管。犬冠状动脉左前降支... 【目的】在体观察缺血再灌注对犬冠状动脉内皮细胞功能的影响以及猪冠状动脉对血管活性药物的反应性。【方法】动脉麻醉后开胸、心包吊床,之后分离冠状动脉左前降支。犬作第一对角支插管,猪作冠状动脉左回旋支插管。犬冠状动脉左前降支缺血30min后再灌注60min,猪不作缺血再灌注。分别向冠状动脉内注射乙酰胆碱和硝酸甘油,以注药后平均冠状动脉血流量变化的百分率来评价冠状动脉内皮细胞依赖性和非依赖性的舒张功能。【结果】注乙酰胆碱后,基线状态下犬平均冠状动脉血流量从(17±4)mL/min升至(41±12)mL/min(P<0.05);但缺血再灌注后舒血管反应幅度降低,其中再灌注15min时间点平均冠状动脉血流量增幅水平明显低于基线增幅水平(142%±54%vs87%±57%,P<0.05)。注乙酰胆碱后,基线状态下猪平均冠状动脉血流量在(11±3)s内从(21±11)mL/min迅速降至(12±8)mL/min,在(42±10)s内又回升至(23±13)mL/min。硝酸甘油使基线状态下犬平均冠状动脉血流量从(18±5)mL/min升至(40±22)mL/min(P<0.05),猪的冠状动脉也呈类似反应。【结论】乙酰胆碱引起犬冠状动脉呈舒血管反应,缺血再灌注使犬冠状动脉内皮细胞功能明显受损。猪冠状动脉对乙酰胆碱呈先收缩后舒张的“双向反应”。硝酸甘油则引起犬或猪的冠状动脉均呈舒张反? 展开更多
关键词 冠状动脉内皮细胞 冠状动脉血流量 乙酰胆碱 缺血再灌注 硝酸甘油 血管反应 插管 反应性 状态 降低
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急性缺氧对冠状动脉内皮细胞释放ET-1、NO、PGI_2的影响 被引量:2
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作者 廖卫公 万强 +2 位作者 许蜀闽 周玉峰 谢增柱 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期309-311,共3页
关键词 急性缺氧 冠状动脉内皮细胞 释放 ET-1 NO PGI2
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B7相关蛋白-1在人冠状动脉内皮细胞的表达及临床意义 被引量:2
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作者 徐琳 李志梁 +6 位作者 洪长江 何建新 马骏 向定成 张洁 潘春梅 邱健 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1623-1625,共3页
目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人冠状动脉内皮细胞表达B7相关蛋白-1(B7RP-1)的影响及其临床意义。方法体外培养人冠状动脉内皮细胞,通过间接免疫荧光法、RT-PCR和Western blotting等方法,观察B7RP-1在人冠状动脉内皮细胞表达及ox-... 目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人冠状动脉内皮细胞表达B7相关蛋白-1(B7RP-1)的影响及其临床意义。方法体外培养人冠状动脉内皮细胞,通过间接免疫荧光法、RT-PCR和Western blotting等方法,观察B7RP-1在人冠状动脉内皮细胞表达及ox-LDL的干预作用。结果(1)B7RP-1表达于人冠状动脉内皮细胞,荧光信号呈点状,散在分布于细胞表面;RT-PCR显示B7RP-1的mRNA扩增产物片段位于相当于Marker 469bp的位置,Western blotting检测B7RP-1的相对分子质量大小约为70000。(2)ox-LDL刺激组B7RP-1的平均光密度OD值和吸光度A值均分别高于空白对照组,ox-LDL可增加B7RP-1在人冠状动脉内皮细胞中的mRNA和蛋白表达,并具有统计学意义(均P<0.05)。结论B7RP-1表达于人冠状动脉内皮细胞表面,具有慢性致炎症作用的ox-LDL可上调共刺激分子B7RP-1 mRNA和蛋白表达,这可能是动脉粥样硬化的免疫学发病机制之一。 展开更多
关键词 B7相关蛋白-1 氧化低密度脂蛋白 冠状动脉内皮细胞 动脉粥样硬化
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褪黑素减轻同型半胱氨酸诱导的冠状动脉内皮细胞损伤及机制探讨 被引量:4
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作者 关信民 郭壮波 +3 位作者 邓鹏程 汤穆浛 朱孟杰 赵强 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2020年第1期25-30,共6页
目的研究褪黑素(MT)减轻同型半胱氨酸(Hcy)诱导冠状动脉内皮细胞损伤的作用,并探讨其机制是否与激活蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路有关。方法培养人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)并分组,对照组用不含药物的DMEM处理,Hcy... 目的研究褪黑素(MT)减轻同型半胱氨酸(Hcy)诱导冠状动脉内皮细胞损伤的作用,并探讨其机制是否与激活蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路有关。方法培养人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)并分组,对照组用不含药物的DMEM处理,Hcy组用含有1 mmol/L Hcy的DMEM处理,MT组用含有1 mmol/L Hcy及500μmol/L MT的DMEM处理,MT+LY组用含有1 mmol/L Hcy、500μmol/L MT及10μmol/L LY294002(Akt抑制剂)的DMEM处理。检测细胞活力、细胞凋亡、细胞周期及p-Akt、p-mTOR的含量。结果Hcy组的细胞活力、S期及G2/M期比例、细胞中Bcl-2、CyclinD1、p-Akt、p-mTOR的含量低于对照组,细胞凋亡率、G0/G1期比例、细胞中Bax、cleaved Caspase-3的含量高于对照组;MT组的细胞活力、S期及G2/M期比例、细胞中Bcl-2、CyclinD1、p-Akt、p-mTOR的含量高于Hcy组,细胞凋亡率、G0/G1期比例、细胞中Bax、cleaved Caspase-3的含量低于Hcy组;MT+LY组的细胞活力、S期及G2/M期比例、细胞中Bcl-2、CyclinD1、p-Akt、p-mTOR的含量低于MT组,细胞凋亡率、G0/G1期比例、细胞中Bax、cleaved Caspase-3的含量高于MT组。结论MT能够减轻Hcy诱导的HCAEC损伤,调控Akt/mTOR通路是MT减轻HCAEC损伤的相关机制之一。 展开更多
关键词 冠心病 冠状动脉内皮细胞 同型半胱氨酸 细胞凋亡 Akt/mTOR通路
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高钾溶液对猪冠状动脉内皮细胞功能影响的实验研究 被引量:3
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作者 李世康 龙村 +1 位作者 程邦昌 史世勇 《微循环学杂志》 2002年第4期6-8,共3页
目的 :探讨高钾溶液对猪冠状动脉内皮细胞功能的影响及其机制。方法 :取新鲜猪心外膜下冠状动脉前降支下三分之一 ,切成 3mm长的血管环。采用器官槽法 ,分别用Krebs Henseleit重碳酸盐缓冲液 (KH)、2 0mmol/L的高钾溶液、50mmol/L的高... 目的 :探讨高钾溶液对猪冠状动脉内皮细胞功能的影响及其机制。方法 :取新鲜猪心外膜下冠状动脉前降支下三分之一 ,切成 3mm长的血管环。采用器官槽法 ,分别用Krebs Henseleit重碳酸盐缓冲液 (KH)、2 0mmol/L的高钾溶液、50mmol/L的高钾溶液浸泡血管环 1h后 ,检测在 7μmol/L环加氧酶阻断剂消炎痛、3 0 0 μmol/L一氧化氮合成酶阻断剂N 硝基 L 精氨酸、1mmol/L钙激动性钾通道阻断剂四乙胺、或 3μmol/LATP敏感性钾通道阻断剂优降糖的作用下 ,3 0nmol/L前列腺素F2α引发的预收缩强度和非受体介导钙离子载体 ( 10 -1 0 ~ 10 -6mol/L)引发的内皮源性舒张反应。结果 :与单纯浸泡于KH的冠状动脉相比 ,内皮源性超极化因子 (EDHF)介导的内皮源性舒张反应 ,经 2 0mmol/L、50mmol/L高钾溶液及四乙胺作用后显著降低 ,但加入优降糖后改变不明显。结论 :EDHF在冠状动脉内皮源性舒张中起重要的作用 ,高浓度钾离子抑制EDHF的作用。 展开更多
关键词 钾通道阻滞剂 围手术期 内皮源性舒张 高钾溶液 冠状动脉内皮细胞功能影响 实验研究
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脑源性神经营养因子对人冠状动脉内皮细胞增殖和克隆的影响 被引量:2
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作者 孔继昌 王恩艳 +4 位作者 张巍 戴坤鹏 刘少云 付永杰 郭志强 《实用老年医学》 CAS 2020年第5期430-433,共4页
目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)对人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery ebditgekuak cells,HCAEC)功能的影响及其作用机制。方法将HCAEC分为2组,其中一组添加BDNF(50 ng/μL)作为实验组,另一组不做其他处理作为对照组。采用CCK... 目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)对人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery ebditgekuak cells,HCAEC)功能的影响及其作用机制。方法将HCAEC分为2组,其中一组添加BDNF(50 ng/μL)作为实验组,另一组不做其他处理作为对照组。采用CCK8法和平板克隆形成实验分别检测2组细胞的增殖能力和克隆能力,采用Western blot检测2组细胞中PI3K/Akt/mTOR信号通路、ERK信号通路及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白水平。结果与对照组相比,实验组细胞的增殖能力和克隆能力均显著提高(P <0. 05)。Western blot结果表明,实验组细胞中的磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)水平显著升高(P <0. 05),并且Wnt蛋白家族1(Wnt1)、跨膜受体卷曲蛋白1(Frizzled1)和胞浆调节散乱蛋白1(Dsh)的表达水平也明显增加(P <0. 05),磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK1/2)水平升高(P <0. 05)。结论BDNF促进了HCAEC的细胞增殖和克隆形成能力,PI3K/Akt/mTOR信号通路、ERK信号通路和Wnt/β-catenin信号通路可能参与其中。 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子 动脉粥样硬化 冠状动脉内皮细胞 细胞增殖
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糖尿病大鼠冠状动脉内皮细胞凋亡的研究 被引量:2
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作者 樊勇 谢自敬 严利君 《中华糖尿病杂志(1006-6187)》 CSCD 北大核心 2005年第1期57-60,共4页
目的 探讨糖尿病大鼠冠状动脉内皮细胞(下称内皮细胞)凋亡的机制,以及凋亡与Fas基因、bcl-2基因表达之间的关系。 方法 实验大鼠分为未治疗组、胰岛素治疗组和正常对照组,每组8只,分别于第0周和第16周时处死检测一般指标,并观察内皮... 目的 探讨糖尿病大鼠冠状动脉内皮细胞(下称内皮细胞)凋亡的机制,以及凋亡与Fas基因、bcl-2基因表达之间的关系。 方法 实验大鼠分为未治疗组、胰岛素治疗组和正常对照组,每组8只,分别于第0周和第16周时处死检测一般指标,并观察内皮细胞的凋亡百分数(TUNEL法)、bcl-2基因、Fas基因的表达(免疫组化法)、内皮细胞超微结构的改变(电镜)。 结果 (1)16 周时,未治疗组比治疗组、正常对照组大鼠体重减轻,差异有统计学意义(P<0.05);血糖及糖化血红蛋白(HbA1c)显著高于后两组(P<0.05),内皮细胞凋亡数目明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。未治疗组Fas基因表达增加,而 bcl-2 基因表达降低,差异有统计学意义(P<0.01)。未治疗组可观察到较明显的内皮细胞凋亡的形态学改变。 结论 高血糖是实验大鼠内皮细胞凋亡强烈相关因素,凋亡的发生与Fas基因表达上调、bcl-2基因表达降低相关。 展开更多
关键词 内皮细胞凋亡 表达 治疗组 FAS基因 BCL-2基因 糖尿病大鼠 冠状动脉内皮细胞 对照组 正常 观察
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延迟预适应对缺血再灌注损伤冠状动脉内皮细胞的保护作用 被引量:1
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作者 张静 张新金 +2 位作者 肖践明 曹晶茗 刘健 《微循环学杂志》 2006年第1期23-25,F0004,共4页
目的:研究延迟缺血预适应(IPC)对缺血再灌注(I/R)冠状动脉内皮细胞的保护作用。方法:所有动物随机分为三组:假手术组(CON组,n=6),缺血再灌注组(I/R组,n=6),预适应组(IPC组,n=6)。I/R组及IPC组分别于不同时间段抽血检测NO、丙二醛(MDA)... 目的:研究延迟缺血预适应(IPC)对缺血再灌注(I/R)冠状动脉内皮细胞的保护作用。方法:所有动物随机分为三组:假手术组(CON组,n=6),缺血再灌注组(I/R组,n=6),预适应组(IPC组,n=6)。I/R组及IPC组分别于不同时间段抽血检测NO、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的含量。实验结束后,取心脏左前降支(LAD)所支配的心肌组织一小块,行免疫组化染色。结果:IPC组NO缺血前明显高于开胸后,缺血前IPC组高于I/R组;MDA含量缺血前及再灌注后IPC组均低于I/R组;SOD的活性,再灌注后两组差异显著。IPC组内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)的表达明显高于I/R组。结论:延迟预适应早期内皮细胞生成NO的量增加,自由基减少,且保护后期的再灌注中NO、自由基的量处于相对稳定,同时使内皮中SOD的活性及eNOS的表达增加。 展开更多
关键词 缺血再灌注损伤 延迟预适应 保护作用 冠状动脉内皮细胞 心脏缺血再灌注 缺血预适应 早期预适应 生理现象 I/R 时间段
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miR-155-5p靶向c-SKI对冠状动脉内皮细胞增殖及胶原合成的影响 被引量:1
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作者 吕忠英 巴·巴音斯勒玛 +1 位作者 张岳 王娟 《医学研究杂志》 2021年第2期57-62,共6页
目的探讨miR-155-5p靶向c-SKI对TGF-β1诱导的人冠状动脉内皮细胞增殖及胶原合成的影响。方法不同浓度TGF-β1处理人冠状动脉内皮细胞48h, MTT法检测细胞增殖情况,Western blot法和RT-PCR法检测细胞中胶原蛋白、miR-155-5p和c-SKI的表... 目的探讨miR-155-5p靶向c-SKI对TGF-β1诱导的人冠状动脉内皮细胞增殖及胶原合成的影响。方法不同浓度TGF-β1处理人冠状动脉内皮细胞48h, MTT法检测细胞增殖情况,Western blot法和RT-PCR法检测细胞中胶原蛋白、miR-155-5p和c-SKI的表达。转染miR-155-5p抑制剂后,MTT法检测细胞增殖能力,Western blot法检测胶原蛋白表达。生物信息学软件预测miR-155-5p的靶基因,荧光素酶活性分析、Western blot法和RT-PCR法进行靶向关系验证。结果TGF-β1呈剂量依赖性诱导冠状动脉内皮细胞胶原合成,促进细胞增殖,抑制细胞中c-SKI的表达,促进miR-155-5p mRNA表达。在TGF-β1诱导的冠状动脉内皮细胞中,抑制miR-155-5p表达后可抑制冠状动脉内皮细胞增殖和胶原蛋白合成。miR-155-5p可靶向结合c-SKI 3′UTR,抑制miR-155-5p的表达可促进冠状动脉内皮细胞中c-SKI的表达。结论 miR-155-5p可能通过负向调控c-SKI的表达影响冠状动脉内皮细胞增殖和胶原的合成。 展开更多
关键词 miR-155-5p c-SKI 冠状动脉内皮细胞 增殖 胶原合成
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体外培养的新生小牛冠状动脉内皮细胞释放NO、ET-1和PGI_2的实验研究
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作者 廖卫公 许蜀闽 +2 位作者 严俊 万强 谢增柱 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1249-1251,共3页
目的 建立新生小牛冠状动脉内皮细胞体外培养模型 ,并观测其对NO、ET 1和PGI2 的分泌。方法 采用机械分离方法 ,通过内皮细胞Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色和其在倒置相差显微镜下的形态进行鉴别。用放免法和比色法测定培养液中ET 1、PG... 目的 建立新生小牛冠状动脉内皮细胞体外培养模型 ,并观测其对NO、ET 1和PGI2 的分泌。方法 采用机械分离方法 ,通过内皮细胞Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色和其在倒置相差显微镜下的形态进行鉴别。用放免法和比色法测定培养液中ET 1、PGI2 、NO浓度。结果 新生小牛冠状动脉内皮细胞在体外生长曲线呈“S”形 ,并能分泌ET 1、PGI2 和NO。结论 新生小牛冠状动脉内皮细胞能够进行体外培养 ,并能分泌ET 1、PGI2 和NO。 展开更多
关键词 冠状动脉内皮细胞 一氧化氮 内皮素-1 前列环素 NO ET-1 PGI2
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纳米银对人冠状动脉内皮细胞凋亡的影响及其机制
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作者 孔立茶 刘少云 +2 位作者 杨雪佳 崔慎情 孔继昌 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第44期48-50,共3页
目的探讨纳米银对人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)凋亡的影响及其可能的机制。方法取生长状态良好并处于对数生长期的HCAEC,分别加入浓度为0、2.5、5、10、20、40、80μg/m L的纳米银溶液,作用24 h。采用MTT法检测HCAEC凋亡率,ELISA法检测培... 目的探讨纳米银对人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)凋亡的影响及其可能的机制。方法取生长状态良好并处于对数生长期的HCAEC,分别加入浓度为0、2.5、5、10、20、40、80μg/m L的纳米银溶液,作用24 h。采用MTT法检测HCAEC凋亡率,ELISA法检测培养液上清血红素氧合酶1(HO-1)、血小板内皮细胞黏附分子1(PECAM-1)表达,火焰原子吸收光谱法检测细胞内、外银含量。结果加入2.5、5、10、20、40、80μg/m L纳米银溶液的HCAEC凋亡率分别为8.51%、21.03%、42.38%、64.62%、78.35%、74.83%。随着加入纳米银溶液浓度升高,HCAEC培养液上清HO-1表达逐渐升高,各浓度间比较P均<0.05;加入40、80μg/m L纳米银溶液的HCAEC培养液上清HO-1表达比较P>0.05。HCAEC加入10、20、40、80μg/m L纳米银溶液后细胞培养液上清PECAM-1表达均高于0、2.5、5μg/m L纳米银溶液,且加入40、80μg/m L纳米银溶液后PECAM-1表达升高更明显(P均<0.05)。加入2.5、5、10、20μg/m L纳米银溶液的HCAEC细胞内银含量低于细胞外(P均<0.01),加入40、80μg/m L纳米银溶液的HCAEC细胞内、外银含量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论纳米银可促进HCAEC凋亡,其细胞毒性作用呈浓度依赖性;通过上调HO-1、PECAM-1表达造成细胞损伤可能是其作用机制。 展开更多
关键词 纳米银 冠状动脉内皮细胞 细胞凋亡 血红素氧合酶1 血小板内皮细胞黏附分子1
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