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溶藻弧菌冷冻保护剂配方与冻干工艺研究
1
作者 邵新飞 阙莉文 +4 位作者 黄郁葱 蔡佳 黄瑜 王蓓 简纪常 《广东农业科学》 CAS 2024年第6期117-127,共11页
【目的】研究溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)真空冷冻干燥保护剂配方与优化冻干工艺条件,并探究冷冻干燥对菌株毒力及药物敏感性的影响,为菌种在冷冻干燥保藏上的应用提供理论依据。【方法】采用真空冷冻干燥技术,以溶藻弧菌HY9901为... 【目的】研究溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)真空冷冻干燥保护剂配方与优化冻干工艺条件,并探究冷冻干燥对菌株毒力及药物敏感性的影响,为菌种在冷冻干燥保藏上的应用提供理论依据。【方法】采用真空冷冻干燥技术,以溶藻弧菌HY9901为研究对象,通过单因素试验及正交试验,探究L-谷氨酸钠、海藻糖、脱脂乳、葡萄糖、甘露醇、甘氨酸6种单一保护剂对菌株活性的影响,筛选最佳冷冻保护剂复配配方,并研究菌液浓度、预冻时间、预冻温度及复水介质4个因素对菌株冻干工艺的影响,优化溶藻弧菌冻干工艺条件。同时,通过储藏试验、半数致死量(LD_(50))试验和药敏试验,探究冻干菌株的活性变化规律及其生物特性。【结果】6种单一保护剂对溶藻弧菌冻干的保护效果存在显著差异,其效果从强到弱依次为:L-谷氨酸钠、海藻糖、脱脂乳、葡萄糖、甘露醇、甘氨酸;菌株最佳冷冻干燥保护剂复配配方为海藻糖50 g/L+L-谷氨酸钠50 g/L+脱脂乳50 g/L,其存活率为62.12%,与单一保护剂的保护效果差异显著;冻干工艺最适条件:菌液浓度1×10~8~10~9 CFU/mL、预冻时间3 h、预冻温度-80℃、复水介质为PBS或50 g/L脱脂乳,此条件下菌株存活率可达到最大值(63.72%)。最佳冻干条件下,菌株储藏60 d期间,其活性无显著差异;菌株冻干前后的LD_(50)分别为1.22×10~8、1.20×10~8 CFU/mL,LD_(50)无显著差异。菌株在冻干前后的药敏抑菌圈直径无显著差异,对氟苯尼考、氯霉素、环丙沙星等药物均表现敏感;对新霉素、卡那霉素均表现中度敏感;对丁胺卡那、哌拉西林等药物均表现耐药。【结论】溶藻弧菌HY9901的冷冻干燥复配配方为海藻糖50 g/L+L-谷氨酸钠50 g/L+脱脂乳50 g/L,冻干工艺条件为菌液浓度1×10~8~10~9 CFU/mL、预冻时间3 h、预冻温度-80℃、复水介质为PBS或50 g/L脱脂乳,该配方及工艺合理可行,具有良好的储藏性及生物稳定性。 展开更多
关键词 溶藻弧菌 冷冻干燥 冷冻保护剂 冻干工艺 毒力 药敏试验
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复合冷冻保护剂对鲳鱼保鲜效果的影响 被引量：1
2
作者 许璐靖 李莹 +2 位作者 杨怡 孙楠 柴智 《农产品加工》 2023年第6期11-16,共6页
研究了食盐-蔗糖-抗坏血酸钠复合冷冻保护剂对鲳鱼在冷冻贮藏期间保鲜效果的影响。以感官评分为指标,通过单因素试验和响应面法优化复合冷冻保护剂的最佳配方为食盐添加量1.63%,蔗糖添加量6.18%,抗坏血酸钠添加量0.04%。通过对酸价、丙... 研究了食盐-蔗糖-抗坏血酸钠复合冷冻保护剂对鲳鱼在冷冻贮藏期间保鲜效果的影响。以感官评分为指标,通过单因素试验和响应面法优化复合冷冻保护剂的最佳配方为食盐添加量1.63%,蔗糖添加量6.18%,抗坏血酸钠添加量0.04%。通过对酸价、丙二醛含量、总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)和总巯基含量等多项指标的测定,表明复合冷冻保护剂可以显著减少鲳鱼的干耗率,减缓氧化分解和蛋白质变性速率,从而保持冷冻鲳鱼品质,延长其货架期。 展开更多
关键词 鲳鱼 复合冷冻保护剂 保鲜
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血管冷冻保护剂的临床应用 被引量：4
3
作者 王鐥 王成 史业弘 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第24期3920-3925,共6页
背景:冷冻保存的同种异体血管在血管移植修复中蕴藏着广泛的临床应用前景。深低温冻存是实现同种异体血管长期保存的常用方法。在低温保存过程中,有效的冷冻保护剂对于防止血管组织低温损伤和保持细胞活力至关重要,但对于最佳保护剂的... 背景:冷冻保存的同种异体血管在血管移植修复中蕴藏着广泛的临床应用前景。深低温冻存是实现同种异体血管长期保存的常用方法。在低温保存过程中,有效的冷冻保护剂对于防止血管组织低温损伤和保持细胞活力至关重要,但对于最佳保护剂的选择并未达成共识。目的:总结近年来各大血管组织库中使用的冷冻保护剂,比较其临床应用效果,以期为将来深低温冻存同种异体血管的应用提供参考。方法:由第一作者检索中国知网、万方、PubMed和Google Scholar数据库2015-2022年发表的相关文献,中文检索词为“同种异体血管,动脉,静脉,深低温冻存,冷冻保护剂,冷冻损伤,血管移植”,英文检索关键词为“cryopreservation,blood vessels,vascular allografts,arteries,veins,cryoinjury,cryoprotectants,cryoprotective agents”,检索国内外有关应用于临床的血管冷冻保护剂及其近远期结果的相关文献,最终选取54篇文献进行综述。结果与结论:(1)在血管的深低温冻存研究中,常使用包含渗透性和非渗透性的冷冻保护剂组合,通过程序性降温及快速解冻的方法减轻对血管壁结构的损伤。(2)尽管二甲基亚砜(DMSO)具有毒性作用,但在许多国家的组织库产品清单中不包括任何单独用DMSO以外的冷冻保护剂冷冻保存的心血管组织。目前深低温冻存同种异体血管用于血管移植后仍然有不少临床并发症的发生,有些甚至是致命的。(3)DMSO作为保护剂中必不可少的成分,如何平衡其毒性作用与保护效果至关重要,并且寻找安全无毒、无异种抗原的新型冷冻保护剂是目前研究的主要方向,对推动同种异体血管移植物临床应用的发展具有重要意义。 展开更多
关键词 同种异体血管 深低温冻存 冷冻保护剂 冷冻损伤 血管移植 移植物感染 原位重建
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褪黑素对无渗透性冷冻保护剂的精子玻璃化冷冻影响
4
作者 邵帅 石学颖 +3 位作者 王洋 丁涛 姜经航 江梅 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2023年第5期498-502,共5页
目的探讨褪黑素在无渗透性冷冻保护剂微量精子玻璃化冷冻技术中的研究。方法选取2022年4-9月在荆门市人民医院生殖医学中心就诊的30例男性患者的精液样本。每份标本分为常规冷冻组、微滴冷冻组、无保护剂微滴冷冻组、褪黑素+无保护剂微... 目的探讨褪黑素在无渗透性冷冻保护剂微量精子玻璃化冷冻技术中的研究。方法选取2022年4-9月在荆门市人民医院生殖医学中心就诊的30例男性患者的精液样本。每份标本分为常规冷冻组、微滴冷冻组、无保护剂微滴冷冻组、褪黑素+无保护剂微滴冷冻组。通过计算机辅助精液分析法(CASA)观察冷冻前及冷冻后精子前向运动(PR),伊红-苯胺黑染色检测精子存活率,改良巴氏染色检测正常形态率以及顶体完整率,低渗肿胀试验检测质膜完整率,SCD法检测DNA完整性检测,试剂盒检测MDA、SOD、GSH-Px水平等。结果微滴冷冻组、无保护剂微滴冷冻组复苏后PR、复苏率及复苏后存活率高于常规冷冻组(P<0.05);褪黑素+无保护剂微滴冷冻组复苏后PR和复苏率高于无保护剂微滴冷冻组(P<0.05)。褪黑素+无保护剂微滴冷冻组复苏后正常形态率和顶体完整性明显高于其他3组(P<0.05)。微滴冷冻组、无保护剂微滴冷冻组复苏后质膜完整率高于常规冷冻组(P<0.05);褪黑素+无保护剂微滴冷冻组复苏后质膜完整率高于微滴冷冻组(P<0.05),而DFI明显低于微滴冷冻组(P<0.05)。与常规冷冻组相比,无保护剂微滴冷冻组、褪黑素+无保护剂微滴冷冻组MDA明显降低(P<0.05),SOD以及GSH-Px明显升高(P<0.01);与微滴冷冻组相比,褪黑素+无保护剂微滴冷冻组MDA明显降低(P<0.05)。褪黑素+无保护剂微滴冷冻组SOD、GSH-Px较其他3组明显升高(P<0.05)。结论无渗透性冷冻保护剂添加褪黑素能够提高复苏后精子的PR、活力、正常形态、DFI、质膜和顶体完整性,主要与降低MDA,增加SOD以及GSH-Px表达有关。 展开更多
关键词 褪黑素 精子 冷冻保护剂 玻璃化冷冻
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不同种类冷冻保护剂对海带配子体及孢子的毒性评价
5
作者 钱瑞 陈书秀 +2 位作者 罗世菊 赵聚萍 李晓捷 《水产科技情报》 2023年第4期224-229,共6页
为筛选用于海带超低温保存的冷冻保护剂,采用10%二甲基亚砜(DMSO)、10%甘油、10%蔗糖、10%乙二醇、10%DMSO+10%甘油、10%DMSO+8%葡萄糖、10%DMSO+10%蔗糖、10%DMSO+10%甘油+8%葡萄糖、10%DMSO+10%山梨醇等9种单一或复合冷冻保护剂,在0~... 为筛选用于海带超低温保存的冷冻保护剂,采用10%二甲基亚砜(DMSO)、10%甘油、10%蔗糖、10%乙二醇、10%DMSO+10%甘油、10%DMSO+8%葡萄糖、10%DMSO+10%蔗糖、10%DMSO+10%甘油+8%葡萄糖、10%DMSO+10%山梨醇等9种单一或复合冷冻保护剂,在0~4℃条件下分别对海带配子体和孢子进行处理,对配子体处理30 min、60 min、24 h,对孢子处理15、30、60 min,通过统计配子体细胞的存活率以及孢子萌发成配子体的比例,对不同种类的冷冻保护剂进行毒性评价。结果表明:9种冷冻保护剂均对海带配子体和孢子有一定的毒性作用,并且毒性随着处理时间的延长而增强。10%DMSO对海带配子体细胞的毒性最小,处理60 min后配子体细胞的存活率为100%;其次是10%乙二醇,处理30 min后配子体的存活率为100%;含10%甘油的单一或复合冷冻保护剂对配子体细胞毒性较大,处理后配子体的成活率显著低于DMSO和乙二醇组(P<0.05)。单一冷冻保护剂对海带孢子的毒性显著低于复合冷冻保护剂,除10%甘油组处理30、60 min外,其他单一冷冻保护剂试验组的配子体发生率均在60%~80%。 展开更多
关键词 海带 配子体 孢子 冷冻保护剂 毒性
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冷冻保护剂对家畜精液冷冻保存的研究进展 被引量：16
6
作者 张美娜 郭富强 +7 位作者 宋国欣 张俊杰 李学武 王志英 王瑞军 张家新 李金泉 何利兵 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第21期37-41,45,共6页
家畜精液冷冻保存可以实现在不同时间、不同地点的人工授精,能有效提高优良种公畜的利用率,扩大其基因传播范围,同时也是家畜遗传资源易位保存的主要方法之一。在精液冷冻保存过程中,选择合适的稀释液成分对解冻后精子品质的影响十分重... 家畜精液冷冻保存可以实现在不同时间、不同地点的人工授精,能有效提高优良种公畜的利用率,扩大其基因传播范围,同时也是家畜遗传资源易位保存的主要方法之一。在精液冷冻保存过程中,选择合适的稀释液成分对解冻后精子品质的影响十分重要。精子对低温非常敏感,在稀释液中加入冷冻保护剂可有效提升精子解冻后活力。文章综述了近几年渗透性冷冻保护剂(甘油、乙二醇、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜)和非渗透性冷冻保护剂(卵黄、大豆卵磷脂、蔗糖、脱脂乳)在猪、牛、羊、鸡、兔以及骆驼上的应用与研究,旨在为进一步深入研究家畜精子冻融损伤机制提供理论依据。 展开更多
关键词 家畜 精液 冷冻保存 渗透性冷冻保护剂 非渗透性冷冻保护剂
原文传递
冷冻保护剂及预冷时间对河蟹精子体外冷冻保存的影响 被引量：15
7
作者 陈东华 李艳东 +4 位作者 贾林芝 厉小波 王立人 曲迪 王群 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期579-585,共7页
本文以甘油、二甲亚砜(DMSO)为冷冻保护剂,采用两步降温法,以精子存活率和DNA损伤程度为检验其冷冻效果的评价指标,研究了冷冻保护剂和预冷时间对河蟹Eriocheir sinensis精子冷冻保存效果的影响。胰蛋白酶消化法获得河蟹游离精子,液氮... 本文以甘油、二甲亚砜(DMSO)为冷冻保护剂,采用两步降温法,以精子存活率和DNA损伤程度为检验其冷冻效果的评价指标,研究了冷冻保护剂和预冷时间对河蟹Eriocheir sinensis精子冷冻保存效果的影响。胰蛋白酶消化法获得河蟹游离精子,液氮冷冻保存8h以上,精子保存密度为107个/mL,伊红染色法检测精子存活率,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测精子DNA损伤。实验共设置10个组,分别为不同浓度的单一冷冻保护剂(每种保护剂的体积百分比分别为5%、10%、12.5%、15%)和两种保护剂组合(两种保护剂在同一实验组中的体积百分比含量均为5%、10%)。结果显示,12.5%甘油的保存效果最佳,精子存活率达到62.60%。在此基础上,以10%甘油作为冷冻保护剂,设置5、10、20、30、40min 5个时间梯度,研究了预冷时间对精子冷冻保存效果的影响。结果显示预冷时间的长短对精子冷冻保存效果的影响显著,当预冷时间低于20min时,精子大量死亡,且精子DNA严重损伤;当预冷时间超过30min时,精子存活率明显提高,精子DNA损伤明显减弱。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 河蟹 精子 冷冻保存 冷冻保护剂 二甲亚砜 甘油 单细胞凝胶电泳
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冷冻方法和冷冻保护剂对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响 被引量：10
8
作者 王洪亮 高元奇 +2 位作者 孙妍 薛百功 刘睿智 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期605-607,共3页
目的:探讨冷冻方法和冷冻保护剂类型对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响。方法:16例男性不育患者精液分别于冷冻前、加入甘油卵黄枸橼酸钠(GYC)和甘油两种冷冻液以快速和慢速冷冻6个月后,采用伊红染色分析精子活率和尾部低渗肿胀率。结果... 目的:探讨冷冻方法和冷冻保护剂类型对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响。方法:16例男性不育患者精液分别于冷冻前、加入甘油卵黄枸橼酸钠(GYC)和甘油两种冷冻液以快速和慢速冷冻6个月后,采用伊红染色分析精子活率和尾部低渗肿胀率。结果:冷冻后精子活率和尾部低渗肿胀率明显低于冷冻前(P<0.001,P<0.05);GYC和甘油两种冷冻保护剂对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响差异无显著性(P>0.05);速冻和缓慢冷冻对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响差异亦无显著性(P>0.05)。结论:冷冻后精子活率和尾部低渗肿胀率明显降低,不同冷冻方法和冷冻保护剂类型对精子活率和尾部低渗肿胀率无影响。 展开更多
关键词 精液保存 精子尾 低渗肿胀率 冷冻保护剂 精子活率
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渗透性冷冻保护剂对山羊精子的冷冻保护效果 被引量：11
9
作者 席利萌 罗军 +4 位作者 杨地坤 王维 孙爽 史怀平 马雪瑶 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2015年第8期27-32,共6页
【目的】探索渗透性冷冻保护剂甘油、乙二醇、二甲基亚砜（DMSO）、二甲基乙酰胺（DMA）对山羊精子的冷冻保护效果。【方法】采用假阴道法采集繁殖性能正常、健康、年龄2～4岁的6只西农萨能奶山羊种公羊精液，以Tris卵黄为基础稀释液，... 【目的】探索渗透性冷冻保护剂甘油、乙二醇、二甲基亚砜（DMSO）、二甲基乙酰胺（DMA）对山羊精子的冷冻保护效果。【方法】采用假阴道法采集繁殖性能正常、健康、年龄2～4岁的6只西农萨能奶山羊种公羊精液，以Tris卵黄为基础稀释液，分别添加体积分数为6%的甘油、3%和6%的乙二醇、3%和6%的DMSO、3%和6%的DMA，测定冷冻解冻后精子活率、顶体完整性、质膜完整率、线粒体完整性、谷胱甘肽还原酶活性和丙二醛（MDA）浓度，对比不同冷冻保护剂对山羊精子冷冻保护效果。【结果】 甘油（6%）和乙二醇（3%，6%）组解冻后精子活率均极显著（P＜0.01）高于DMSO（3%，6%）和DMA（3%，6%）处理组；甘油（6%）、DMA（6%）和乙二醇（3%）组的线粒体完整性极显著（P＜0.01）高于其他组；甘油（6%）和乙二醇（3%，6%）组的质膜完整率极显著（P＜0.01）高于其他组；从顶体完整性、谷胱甘肽还原酶活性和MDA浓度等指标看，甘油（6%）和乙二醇（3%，6%）组极显著（P＜0.01）优于其他组。【结论】 稀释液中添加乙二醇（3%，6%）和甘油（6%）都能明显提高山羊冷冻精子品质，其中3%乙二醇可以替代甘油作为山羊精液冷冻保护剂从而发挥更好的抗冷冻保护作用。 展开更多
关键词 山羊 冷冻保护剂 精液 冷冻保存
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玻璃化冷冻方法中冷冻保护剂及制冷速度对家兔卵母细胞纺锤体的影响 被引量：7
10
作者 蔡学泳 陈贵安 +2 位作者 廉颖 郑晓英 彭红梅 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期566-570,共5页
目的：探讨玻璃化冷冻方法中冷冻保护剂及制冷速度对家兔第二次减数分裂中期卵母细胞纺锤体的影响。方法：以冷冻环为载体，单用乙二醇(ethylene glycol，EG)或乙二醇与二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide，DMSO)联合作冷冻保护剂，用直投... 目的：探讨玻璃化冷冻方法中冷冻保护剂及制冷速度对家兔第二次减数分裂中期卵母细胞纺锤体的影响。方法：以冷冻环为载体，单用乙二醇(ethylene glycol，EG)或乙二醇与二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide，DMSO)联合作冷冻保护剂，用直投液氮或使用玻璃化冷冻仪高速制冷冷冻家兔卵母细胞；解冻2h 后固定并免疫荧光法染色纺锤丝及染色体；用共聚焦扫描显微镜观察纺锤体形态。结果：在单用 EG 以及 EG 和 DMSO 联合直投液氮的方案中，纺锤体损伤较严重，但在 EG 和 DMSO 联合应用并采用玻璃化冷冻仪提高制冷速度的方案中，纺锤体形态正常的比例与对照组相似 结论：玻璃化冷冻方法中采用冷冻保护剂联合及采用玻璃化冷冻仪高速制冷对保持解冻后家兔卵母细胞纺锤体形态效果最好。 展开更多
关键词 冷冻保护剂 纺锤体 联合 家兔 玻璃化冷冻 单用 卵母细胞 体形 减数分裂 DMSO
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不同冷冻保护剂对人精子染色体及超微结构影响的研究 被引量：6
11
作者 张巧玉 常青 +2 位作者 史常旭 罗平 蔡敏 《重庆医学》 CAS CSCD 2002年第7期550-552,共3页
目的　旨在了解不同冷冻保护剂 (CPM)对人精子染色体畸变率及精子超微结构相对正常精子百分率的影响。方法　应用甘油、甘油 卵黄 柠檬酸钠 (GYC)及甘油 卵黄 柠檬酸钠 L 谷氨酰胺 (GYCG)三种冷冻保护剂 ,检测冻贮前后精子染色体畸变... 目的　旨在了解不同冷冻保护剂 (CPM)对人精子染色体畸变率及精子超微结构相对正常精子百分率的影响。方法　应用甘油、甘油 卵黄 柠檬酸钠 (GYC)及甘油 卵黄 柠檬酸钠 L 谷氨酰胺 (GYCG)三种冷冻保护剂 ,检测冻贮前后精子染色体畸变率和超微结构相对正常的精子百分率。结果　 (1)精子染色体畸变率及精子性染色体的比例在三种冷冻保护剂冷冻前后均无显著改变 ;(2 )在三种冷冻保护剂组冷冻复温后 ,精子超微结构相对正常的精子百分率显著下降 ,但GYCG组高于甘油、GYC组。结论　本研究中三种冷冻保护剂不会增加精子染色体畸变率 ,也不会引起精子性染色体比例失衡 。 展开更多
关键词 冷冻保护剂 人精子 染色体 超微结构 影响 研究
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不同冷冻保护剂对犬精子冻存的影响 被引量：7
12
作者 张志平 张君涛 +2 位作者 丁佩佩 牛森 林峰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第2期122-124,共3页
本试验通过对比冷冻保护剂和冷冻程序,优化犬精液冷冻保存方法,比较了不同甘油、乙二醇浓度、不同平衡时间对犬精子冷冻复苏率及精子顶体完整率的影响。结果发现,甘油作为冷冻保护剂时,其对精液冷冻保存后的效果明显优于乙二醇,当甘油... 本试验通过对比冷冻保护剂和冷冻程序,优化犬精液冷冻保存方法,比较了不同甘油、乙二醇浓度、不同平衡时间对犬精子冷冻复苏率及精子顶体完整率的影响。结果发现,甘油作为冷冻保护剂时,其对精液冷冻保存后的效果明显优于乙二醇,当甘油浓度为4%时,平均冷冻复苏率最高;冷冻平衡时间为1 h最佳。因此,犬精液在冷冻保存时,甘油浓度为4%,平衡60 min,可获得平均39.21%±0.013%的冷冻复苏率,且比较稳定。 展开更多
关键词 犬 冷冻精液 冷冻保护剂 甘油 乙二醇
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三种冷冻保护剂对人精子活力及生育潜力影响的研究 被引量：8
13
作者 张巧玉 史常旭 +1 位作者 罗萍 蔡敏 《重庆医学》 CAS CSCD 2001年第1期25-26,28,共3页
目的　通过比较甘油、甘油—卵黄—柠檬酸钠 (GYG)和甘油—卵黄—柠檬酸钠—L—谷氨酰胺 (GYCG)三种冷冻保护剂 (CPM)的冷冻保护效果 ,旨在寻求简单、安全、有效、经济的精子冻贮方法。方法　应用甘油、GYG和GYCG三种冷冻保护剂(CPM) ,... 目的　通过比较甘油、甘油—卵黄—柠檬酸钠 (GYG)和甘油—卵黄—柠檬酸钠—L—谷氨酰胺 (GYCG)三种冷冻保护剂 (CPM)的冷冻保护效果 ,旨在寻求简单、安全、有效、经济的精子冻贮方法。方法　应用甘油、GYG和GYCG三种冷冻保护剂(CPM) ,通过冻贮前后精液常规分析 ,精尾低渗肿胀率 (HOSR)、精子穿卵率 (SPR)等精子功能的检测指标评价三种CPM的冷冻保护效果。结果　三种CPM对精子功能的冷冻保护作用各不相同 ,但GYCG较其他两种CPM具有更显著的保护人精子功能的作用。结论　在三种CPM中 ,GYCG的冷冻保护效果明显优于GYC和单一甘油 ,预示应用GYCG作为CPM可使人精子保持较高的生育潜力 ,具有安全、价廉、简单等优点 。 展开更多
关键词 冷冻保护剂 人精子 精子活力 生育潜力 甘油-卵黄-柠檬酸钠
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细胞及玻璃化冷冻保护剂显微实验研究 被引量：5
14
作者 马学虎 孙冰冰 +1 位作者 刘天庆 崔占峰 《大连理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期517-521,共5页
利用低温冷冻显微实验平台,测定了DMSO和甘油两种保护剂的凝固点和玻璃化条件.采用4种不同的冷冻方案对SD大鼠的成骨细胞进行了低温冷冻保存研究.实验结果表明冷冻保护剂的凝固点温度随保护剂浓度和降温速率变化而变化,玻璃化的产生需... 利用低温冷冻显微实验平台,测定了DMSO和甘油两种保护剂的凝固点和玻璃化条件.采用4种不同的冷冻方案对SD大鼠的成骨细胞进行了低温冷冻保存研究.实验结果表明冷冻保护剂的凝固点温度随保护剂浓度和降温速率变化而变化,玻璃化的产生需要很高的保护剂浓度或很快的降温速率.保护剂的性能、冷冻和解冻程序及冻存时间是影响冷冻细胞比活的关键因素.所得结论对研究不同的细胞系、不同尺度组织的最佳低温冷冻保存方案具有指导意义. 展开更多
关键词 低温保存 玻璃化 冷冻保护剂 成骨细胞
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长双歧杆菌BBMN68冷冻保护剂筛选与优化 被引量：6
15
作者 刘松玲 蒋菁莉 +3 位作者 刘爱萍 郭慧媛 冷小京 任发政 《农业机械学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第4期140-144,共5页
为提高长双歧杆菌BBMN68的冷冻保藏效果,以冷冻存活率和菌株活力为评价指标,分别评价了4个类型的18种冷冻保护剂。结果表明,脱脂乳、海藻糖、果糖、甘油、维生素C、L-Glu能对BBMN68有效保护。采用二次回归正交设计,对筛选得到的6种保护... 为提高长双歧杆菌BBMN68的冷冻保藏效果,以冷冻存活率和菌株活力为评价指标,分别评价了4个类型的18种冷冻保护剂。结果表明,脱脂乳、海藻糖、果糖、甘油、维生素C、L-Glu能对BBMN68有效保护。采用二次回归正交设计,对筛选得到的6种保护剂进行复配,得到复配保护剂的最优配方（质量分数）为：甘油3%、海藻糖5%、果糖5%、脱脂乳8%、维生素C 0.05%、L-Glu 0.05%。在复配保护剂的作用下,-80℃保藏期间BBMN68菌数稳定,活菌对数值始终保持在10.51g（cfu/mL）;冷冻浓缩物作为直投发酵剂应用于酸奶中,在21 d内菌数变化不大,始终保持在10~7 cfu/mL以上。 展开更多
关键词 长双歧杆菌BBMN68 冷冻保护剂 发酵剂 优化
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两种冷冻保护剂对精子冷冻保护的效果比较 被引量：4
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作者 向祖琼 胡明广 +3 位作者 曹文雷 李铮 郑菊芬 王益鑫 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期318-319,共2页
精液冷冻保护剂可以为三类,即单纯甘油型、甘油复合型以及无甘油型,其中甘油复合型由于效果较好,得到广泛应用.甘油复合型中根据其复合成分的不同,还可分为不同类型,如含有Tes-Tris、卵黄等的冷冻保护剂(TYB),含有卵黄、柠檬酸盐的冷冻... 精液冷冻保护剂可以为三类,即单纯甘油型、甘油复合型以及无甘油型,其中甘油复合型由于效果较好,得到广泛应用.甘油复合型中根据其复合成分的不同,还可分为不同类型,如含有Tes-Tris、卵黄等的冷冻保护剂(TYB),含有卵黄、柠檬酸盐的冷冻保护剂(egg yolk-citrate medium, ECM),另外如含有人血清白蛋白(HSA)及HEPES的冷冻保护剂(human sperm preservation medium, HSPM).此前有学者[1]研究表明,ECM对精子冷冻的保护效果略差于HSPM.由于我们沿用的是自制ECM型的冷冻保护剂,因此,我们拟通过比较本所自制的ECM与商品化的HSPM,来探讨这两种冷冻保护剂的对精子的保护效果.已有研究[2]证实,精子的活动率和活力与精子的生育力明显相关,所以我们采用的比较参数是应用两种冷冻保护液后,其冻融精子活动率、活力及复苏率的变化. 展开更多
关键词 冷冻保护剂 效果比较 精子冷冻 甘油 ECM 不同类型 单纯 卵黄 精液冷冻 复合型
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不同冷冻保护剂在鸡精液冷冻中的作用效果分析 被引量：6
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作者 王红军 张忠诚 陈淑勤 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 1997年第5期13-14,共2页
本实验采用一定浓度的甘油、乙二醇、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）、二甲基乙酰胺（ＤＭＡ）作为冷冻保护剂，用含冷冻保护剂的稀释液将精液稀释后常温保存，观察精子活率，比较精子生存指数，并进行输精实验，发现在常温下对精子毒害作用最... 本实验采用一定浓度的甘油、乙二醇、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）、二甲基乙酰胺（ＤＭＡ）作为冷冻保护剂，用含冷冻保护剂的稀释液将精液稀释后常温保存，观察精子活率，比较精子生存指数，并进行输精实验，发现在常温下对精子毒害作用最大的是甘油，其次是ＤＭＳＯ，而ＤＭＡ及乙二醇对精子的毒害作用最小。以一定浓度的４种冷冻保护剂将精液冷冻后观察解冻活率，发现以ＤＭＡ作为冷冻保护剂，解冻后精子活率最高。在输精实验中，以ＤＭＡ作为冷冻保护剂采用深阴道输精，取得了５０％的受精率。浅输精取得了４０％的受精率。 展开更多
关键词 鸡 精液 冷冻保护剂 毒性 受精力
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冷冻保护剂对猪精液的冷冻保护作用 被引量：5
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作者 王春伟 高璞 +3 位作者 苏泽智 李青旺 杨公社 胡建宏 《家畜生态学报》 北大核心 2013年第7期88-90,共3页
论文通过阐述猪精液冷冻保护过程中冷冻保护剂与精子之间的相互作用,揭示渗透性保护剂和非渗透性保护剂的作用机制,指出目前猪精液冷冻保存的局限性,同时展望了猪精液冻存的研究趋势,为猪精液的冷冻保存研究和应用提供参考。
关键词 猪精液 冷冻保护剂 发展趋势
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冷冻保护剂对丹参酮脂质体冻融后粒度分布的影响及机理考察 被引量：4
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作者 储茂泉 古宏晨 刘国杰 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期445-449,共5页
考察了单糖、二糖、三糖、多醇、二甲亚砜以及高分子 PVP等附加剂对冻融 3次的丹参酮脂质体粒度的影响及机理 ,结果表明 ,所选附加剂均能不同程度地抑制丹参酮脂质体在冻融后粒子的显著增大 ,附加剂对冻融脂质体起保护作用的机理包括脂... 考察了单糖、二糖、三糖、多醇、二甲亚砜以及高分子 PVP等附加剂对冻融 3次的丹参酮脂质体粒度的影响及机理 ,结果表明 ,所选附加剂均能不同程度地抑制丹参酮脂质体在冻融后粒子的显著增大 ,附加剂对冻融脂质体起保护作用的机理包括脂质体的静电斥力增大和附加剂的空间位阻的协同作用 ,以及附加剂减少了脂质体周围的冰晶等。 展开更多
关键词 冷冻保护剂 丹参酮脂质体 冻融 粒度分布 影响 机理
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不同冷冻保护剂对早期卵裂期小鼠胚胎冷冻后成活率和发育的影响 被引量：3
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作者 刘伟信 黄萍 +5 位作者 王丽 岳利民 何亚平 张金虎 王颖佳 郑煜 《细胞生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期317-320,共4页
为了评价利用不同冷冻保护剂冷冻早期卵裂期胚胎的效果,用小鼠为实验动物,采用慢速冷冻、快速融解的冷冻技术,比较丙二醇、二甲基亚砜和甘油作冷冻保护剂对小鼠2-细胞、4-细胞、8-细胞胚胎冷冻后胚胎存活率和囊胚形成率的影响。发现以... 为了评价利用不同冷冻保护剂冷冻早期卵裂期胚胎的效果,用小鼠为实验动物,采用慢速冷冻、快速融解的冷冻技术,比较丙二醇、二甲基亚砜和甘油作冷冻保护剂对小鼠2-细胞、4-细胞、8-细胞胚胎冷冻后胚胎存活率和囊胚形成率的影响。发现以丙二醇和蔗糖为冷冻保护剂冷冻4-细胞、8-细胞胚胎,解冻后胚胎成活率和囊胚形成率显著高于以二甲基亚砜或甘油为冷冻保护剂。结果表明,丙二醇是一种冷冻早期卵裂期小鼠胚胎有效的冷冻保护剂。 展开更多
关键词 冷冻保护剂 小鼠胚胎 成活率 囊胚形成率 发育
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