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猪繁殖与呼吸综合征病毒凝胶层析纯化方法的建立与初步应用
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作者 孙悦 王尚辉 +6 位作者 涂亚斌 杨勇博 王洪峰 夏大松 蔡雪辉 安同庆 孙明霞 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期1-6,共6页
为了高效分离纯化并获得结构完整的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用于PRRSV的形态学研究、动物免疫以及制备高质量疫苗,本试验在Marc-145细胞中增殖PRRSV HuN4株,经超滤浓缩后,分别采用氯化铯密度梯度离心方法和凝胶层析技术纯化PRRS... 为了高效分离纯化并获得结构完整的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用于PRRSV的形态学研究、动物免疫以及制备高质量疫苗,本试验在Marc-145细胞中增殖PRRSV HuN4株,经超滤浓缩后,分别采用氯化铯密度梯度离心方法和凝胶层析技术纯化PRRSV。结果显示,与氯化铯密度梯度离心相比,凝胶层析纯化可以得到纯度更高、结构更完整的病毒粒子。将凝胶层析纯化得到的PRRSV免疫小鼠制备多抗,间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,多抗血清可与PRRSV发生特异性反应;酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,抗体效价可达到1∶25600以上,纯化的病毒具有良好的免疫原性。结果表明,应用凝胶层析技术可得到高纯度、结构完整的PRRSV粒子,且纯化后PRRSV能够诱导良好的免疫应答,本试验结果可为PRRSV的纯化提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 凝胶层析技术 纯化 形态学
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凝胶层析-荧光分光光度法联用分析饮用水中铝的形态 被引量:16
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作者 王文东 杨宏伟 +2 位作者 祝万鹏 蒋展鹏 师绍琪 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期79-81,共3页
将凝胶层析与荧光分光光度法相结合进行饮用水中铝形态的分析.结果表明,凝胶层析对胶体态铝和溶解态铝有较好的分离效果.依据衍生试剂8-羟基喹啉(8-HQ)和铬蓝黑R(EBBR)与不同铝形态结合强度的差异,通过荧光分光光度法可分析饮用水中的... 将凝胶层析与荧光分光光度法相结合进行饮用水中铝形态的分析.结果表明,凝胶层析对胶体态铝和溶解态铝有较好的分离效果.依据衍生试剂8-羟基喹啉(8-HQ)和铬蓝黑R(EBBR)与不同铝形态结合强度的差异,通过荧光分光光度法可分析饮用水中的单核铝、无机单核铝,再结合硝酸消解可测定饮用水中的总铝、溶胶态铝和胶体态铝.对饮用水中铝形态的分析表明:清华大学地区的地下水和北京市给水管网末端水的总铝含量均在50μg·l-1以下,无机单核铝为饮用水中铝的主要存在形态. 展开更多
关键词 饮用水 荧光分光光度法 凝胶层析.
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凝胶层析法精制栀子黄色素的研究 被引量:14
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作者 吕晓玲 姚中铭 姜平平 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期39-42,共4页
研究了凝胶层析法精制栀子黄色素的工艺条件。其较佳的工艺条件是 :以葡聚糖凝胶为支持剂 ,双柱串联层析 (联洗 ) ,单柱高 30cm ,柱径 2cm ,洗脱流速 4mL/min ,以蒸馏水为洗脱剂 ,加样量 1 8mL ,精制得率 4 8 9%
关键词 凝胶层析 栀子黄色素 精制 工艺条件 食品
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利用凝胶层析分离测定胶体态铝和溶解态铝的研究 被引量:8
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作者 赵华章 杨宏伟 +1 位作者 蒋展鹏 师绍琪 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1683-1687,共5页
利用凝胶层析柱分别对高浓度(5.4g·L^-1)和低浓度(027mg·L^-1)的聚合氯化铝溶液和氯化铝溶液进行了层析分离,测定了洗脱流出液的电导率和pH值,并采用Al—Ferron逐时络合比色分析了洗脱流出液中的铝形态分布.结果表明... 利用凝胶层析柱分别对高浓度(5.4g·L^-1)和低浓度(027mg·L^-1)的聚合氯化铝溶液和氯化铝溶液进行了层析分离,测定了洗脱流出液的电导率和pH值,并采用Al—Ferron逐时络合比色分析了洗脱流出液中的铝形态分布.结果表明,高浓度和低浓度铝水样中的胶体态铝和溶解念铝浓度均可采用凝胶层析法进行分离测定.利用凝胶层析装置对2.5mL铝水样以1mL·min^-1的速度进行洗脱,40—60mL间的洗脱流出液即为胶体态铝,剩余部分为溶解态铝. 展开更多
关键词 凝胶层析 体态铝 溶解态铝 分离测定
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凝胶层析和离子交换层析结合法纯化高盐发酵液中谷氨酰胺转胺酶 被引量:5
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作者 张莉丽 张兰威 +5 位作者 杜明 韩雪 易华西 张英春 张艳禾 马微 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1225-1230,共6页
采用凝胶层析和离子交换层析相结合的方法分离纯化高盐培养基中的谷氨酰胺转胺酶,优化的凝胶层析的条件,上样量6 mL,流速为0.25 mL/min;离子交换层析的上样量50 mL,流速为3 mL/min。酶被纯化了4.22倍,比活力达17.33 U/mg蛋白,回收率为77... 采用凝胶层析和离子交换层析相结合的方法分离纯化高盐培养基中的谷氨酰胺转胺酶,优化的凝胶层析的条件,上样量6 mL,流速为0.25 mL/min;离子交换层析的上样量50 mL,流速为3 mL/min。酶被纯化了4.22倍,比活力达17.33 U/mg蛋白,回收率为77.5%。液相色谱-串联质谱鉴定、蛋白质数据库比对结果表明,纯酶与AAN01353是同种蛋白质。 展开更多
关键词 谷氨酰胺转胺酶 分离纯化 液相色谱-串联质谱 凝胶层析 离子交换层析
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葡聚糖凝胶层析法分离纯化纤维素酶的研究 被引量:9
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作者 曾家豫 冯克宽 +1 位作者 王渭霞 张振霞 《西北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 1998年第4期70-72,共3页
用绿色木霉(Trichodermaviride)高产变异菌株4131产生的纤维素酶粗酶分别过sephadexG25、sephadexG50、sephadexG75、sephadexG100和sephadexG... 用绿色木霉(Trichodermaviride)高产变异菌株4131产生的纤维素酶粗酶分别过sephadexG25、sephadexG50、sephadexG75、sephadexG100和sephadexG150柱层析.结果表明:sephadexG75对纤维素酶的分离效果最佳,并获得了一个CMC酶组份,其比活力提高到原来的49倍,回收率为416%. 展开更多
关键词 分离 纯化 纤维素酶 葡聚糖凝胶层析
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凝胶层析法分离家蝇幼虫血淋巴中抗真菌肽的研究 被引量:6
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作者 张勇 吴建伟 顾莉娟 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期200-204,共5页
目的拟建立家蝇(Musca domestica)幼虫血淋巴中的抗真菌肽的凝胶分离方法。方法取Ⅲ龄家蝇幼虫,以白假丝酵母菌(Candida albicans)作为诱导源,采用针刺法诱导24 h后取血淋巴,加热后分别用凝胶层析和固相萃取分离活性片段,进一步用高效... 目的拟建立家蝇(Musca domestica)幼虫血淋巴中的抗真菌肽的凝胶分离方法。方法取Ⅲ龄家蝇幼虫,以白假丝酵母菌(Candida albicans)作为诱导源,采用针刺法诱导24 h后取血淋巴,加热后分别用凝胶层析和固相萃取分离活性片段,进一步用高效液相色谱法分离纯化,SDS-PAGE比较凝胶层析和固相萃取分离活性组分的区别和分离效果,采用平板滤纸片法检测抗真菌活力。结果免疫血淋巴经凝胶层析得到1个对真菌有抑制作用的组分,其活性比免疫血淋巴经固相萃取得到的1个抗菌组分稳定;SDS-PAGE电泳结果显示,经凝胶层析分离后的活性组分杂蛋白较少,相对分子质量均在14.4×103以下,而经固相萃取的活性组分杂蛋白较多,泳道中有较多大于14.4×103的片段。结论家蝇幼虫经诱导后可产生抗真菌多肽,凝胶层析法能较好地分离该抗真菌肽。 展开更多
关键词 家蝇幼虫 凝胶层析 抗真菌肽
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凝胶层析和离子交换层析结合法纯化重组降血压肽VLPVPR 被引量:3
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作者 李艳 孙海燕 +1 位作者 周丽珍 刘冬 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期111-114,共4页
为了提高VLPVPR的纯度,采用凝胶层析结合离子交换层析的方法对VLPVPR进行纯化。先用Sephadex G-10凝胶对VLPVPR溶液脱盐,再考察离子交换剂(SP Sepharose Fast Flow和Q Sepharose Fast Flow)对重组降血压肽VLPVPR的纯化效果,确立纯化VLP... 为了提高VLPVPR的纯度,采用凝胶层析结合离子交换层析的方法对VLPVPR进行纯化。先用Sephadex G-10凝胶对VLPVPR溶液脱盐,再考察离子交换剂(SP Sepharose Fast Flow和Q Sepharose Fast Flow)对重组降血压肽VLPVPR的纯化效果,确立纯化VLPVPR的优化工艺。实验结果表明SP Sepharose Fast Flow不适于VLPVPR的纯化。采用Q Sepharose Fast Flow的纯化工艺为:上样量为柱床体积的10%,用10mmol/L pH9.0的CHES缓冲液洗脱,流速为1mL/min。VLPVPR回收率为93.8%,纯度达到47.2%。采用Q Sepharose Fast Flow纯化提高了VLPVPR的纯度。 展开更多
关键词 纯化 VLPVPR 凝胶层析 离子交换层析
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用凝胶层析法和示踪技术评估腐植酸分子量分级组成及其与Cd、Zn的络合特性 被引量:5
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作者 华珞 陈世宝 +1 位作者 白玲玉 韦东普 《核农学报》 CAS CSCD 1999年第4期236-241,共6页
通过凝胶层析法对土壤腐植酸进行了分组提取,并对其各分子量分级组成及其与Cd、Zn的络合特性进行了研究。结果表明:土壤胡敏酸通过G50可以分成3个较集中的组分,分子量分别为M=78180、M=48339及M=2286... 通过凝胶层析法对土壤腐植酸进行了分组提取,并对其各分子量分级组成及其与Cd、Zn的络合特性进行了研究。结果表明:土壤胡敏酸通过G50可以分成3个较集中的组分,分子量分别为M=78180、M=48339及M=22863;通过G100可以得到2个组分,分子量分别为M=63343和M=19870。富里酸通过G50、G100层析,则从总体上成为单一的宽带,分子量约为M=2300。腐植酸对Cd、Zn络合量的测定显示:胡敏酸对Cd、Zn的络合量呈2个明显的峰值,而富里酸只有1个峰值。两者对Cd、Zn络合量随洗脱体积的变化曲线与其吸光值随洗脱体积的变化曲线相一致。65Zn示踪技术研究65Zn与胡敏酸、富里酸络合的结论与常规方法一致。 展开更多
关键词 凝胶层析 腐植酸 分子量 重金属 土壤
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大米镉结合蛋白的凝胶层析纯化及生化性质 被引量:3
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作者 刘珊珊 陈季旺 +2 位作者 陈露 丁文平 吴永宁 《食品安全质量检测学报》 CAS 2015年第6期2269-2274,共6页
目的研究大米镉结合蛋白(rice cadmum-binding protein,RCBP)的纯化及生化性质,探讨RCBP的形成机制。方法采用Sephedex G-75凝胶层析从乙醇沉淀的大米蛋白(Ethanol precipitation protein,EP)中纯化RCBP,SDS-PAGE鉴定RCBP的纯度及测定... 目的研究大米镉结合蛋白(rice cadmum-binding protein,RCBP)的纯化及生化性质,探讨RCBP的形成机制。方法采用Sephedex G-75凝胶层析从乙醇沉淀的大米蛋白(Ethanol precipitation protein,EP)中纯化RCBP,SDS-PAGE鉴定RCBP的纯度及测定分子质量,氨基酸自动分析仪、FTIR分析RCBP的氨基酸组成及二级结构。结果凝胶层析纯化得到组分b(目标RCBP),组分b为纯度均一的RCBP,分子质量约为32 kDa。组分b中疏水性氨基酸占56.76%、芳香族氨基酸占19.41%,是一类富含疏水性氨基酸和芳香族氨基酸的镉结合蛋白。组分b中N-H相对于C=O以反式构型存在,二级结构只含有β-折叠和β-转角。结论镉通过疏水氨基酸或芳香族氨基酸的特征基团与大米蛋白结合形成RCBP。 展开更多
关键词 大米镉结合蛋白 纯化 凝胶层析 氨基酸组成
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凝胶层析法测定蛋白含量的方法 被引量:3
11
作者 王娜娜 姚秀清 +1 位作者 谢小莉 张全 《应用化工》 CAS CSCD 2011年第5期906-908,共3页
利用蛋白纯化仪建立一种凝胶层析测定蛋白含量的方法,采用HiTrapTMDesalting 5×5 mL色谱柱,流动相为超纯水,以蛋白浓度为横坐标,以蛋白出峰面积为纵坐标,建立标准曲线。与BCA试剂盒法比较,BCA试剂盒法相对误差范围为9.13%~144.00%... 利用蛋白纯化仪建立一种凝胶层析测定蛋白含量的方法,采用HiTrapTMDesalting 5×5 mL色谱柱,流动相为超纯水,以蛋白浓度为横坐标,以蛋白出峰面积为纵坐标,建立标准曲线。与BCA试剂盒法比较,BCA试剂盒法相对误差范围为9.13%~144.00%,此法的相对误差范围为0.78%~44.72%,可见凝胶层析法测定结果准确性高,操作简单,快速,是一种可行的测蛋白含量的方法。 展开更多
关键词 蛋白测定 蛋白纯化仪 凝胶层析 BCA法
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凝胶层析在发酵液中分离提纯透明质酸中的应用 被引量:2
12
作者 吴华昌 马钦元 +2 位作者 邓静 徐静 陈哲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期184-187,共4页
采用葡聚糖凝胶G-100,以0.1mol/L氯化钠溶液为洗脱剂,在优化的凝胶层析条件(层析柱高度30cm、进样量2ml、洗脱流速1ml/4min)下,对透明质酸发酵液进行分离纯化,得到了高纯度的透明质酸。HA提取率达到79.85%,蛋白质去除率为84.93%。
关键词 透明质酸 分离提纯 凝胶层析
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凝胶层析分离蛋白质实验方法的优化 被引量:2
13
作者 薛金艳 李俏俏 +1 位作者 王云飞 王爱民 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第6期627-628,共2页
目的建立一种简单,操作方便,实验结果可靠且重复性好的生化实验。方法用G75凝胶,柱高20cm,内径1~1.5 cm,分离两组样品:血红蛋白与溴酚蓝;牛血清蛋白与酪氨酸,点样,洗脱并收集。540 nm和280nm检测样品的吸光值,绘制洗脱曲线。结果在层... 目的建立一种简单,操作方便,实验结果可靠且重复性好的生化实验。方法用G75凝胶,柱高20cm,内径1~1.5 cm,分离两组样品:血红蛋白与溴酚蓝;牛血清蛋白与酪氨酸,点样,洗脱并收集。540 nm和280nm检测样品的吸光值,绘制洗脱曲线。结果在层析柱上出现明显移动速度不同的色带,洗脱曲线显示每组样品可呈现两个洗脱峰。结论本实验改变了以往的复杂处理操作程序,适用于本科生和研究生进行科研训练的实验方法。 展开更多
关键词 凝胶层析 血红蛋白与溴酚蓝 牛血清蛋白与酪氨酸 洗脱 分光光度法
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凝胶层析法及其在米面类制品研究开发中的应用 被引量:1
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作者 鲁战会 李里特 +1 位作者 张泽俊 刘期成 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期145-148,共4页
本文系统地介绍了凝胶层析法的原理、装置和应用,阐述了该方法在米面类制品研究开发中的应用前景,并举例说明了其操作方法。为面条、米粉等米面类食品的深入研究提供了一个新的研究手段,可以为企业原料选择、质量控制及产品开发提供更... 本文系统地介绍了凝胶层析法的原理、装置和应用,阐述了该方法在米面类制品研究开发中的应用前景,并举例说明了其操作方法。为面条、米粉等米面类食品的深入研究提供了一个新的研究手段,可以为企业原料选择、质量控制及产品开发提供更好的参考。 展开更多
关键词 凝胶层析 淀粉 蛋白质
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凝胶层析分离蛋白质的实验改进 被引量:2
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作者 刘明 晁代军 王淑娟 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2000年第5期315-315,共1页
关键词 蛋白质 分离 凝胶层析 实验
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凝胶层析分离桔梗皂苷方法的研究 被引量:1
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作者 张海华 王鑫 徐丽萍 《哈尔滨商业大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第1期97-101,共5页
以桔梗为原料对桔梗总皂苷的分离方法进行了研究.采用超声波-水提法提取总皂苷,并采用凝胶层析法进行分离.通过单因素分析,确定了洗脱剂体积分数、上样量、流速、洗脱剂用量为影响凝胶层析的显著因素.通过凝胶层析分离实验确定了桔梗总... 以桔梗为原料对桔梗总皂苷的分离方法进行了研究.采用超声波-水提法提取总皂苷,并采用凝胶层析法进行分离.通过单因素分析,确定了洗脱剂体积分数、上样量、流速、洗脱剂用量为影响凝胶层析的显著因素.通过凝胶层析分离实验确定了桔梗总皂苷的最佳分离工艺参数为:洗脱剂体积分数为70%,凝胶体积与上样量比为1∶4,流速为1 mL/min,洗脱剂用量与上样量为1∶1. 展开更多
关键词 桔梗 皂苷 超声波 凝胶层析
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生物化学教学实验葡聚糖凝胶层析的改进与完善 被引量:2
17
作者 杨洪涛 宾文 +2 位作者 王淼 崔勇 曾红 《实验室科学》 2013年第2期10-12,共3页
葡聚糖凝胶层析是生物化学领域常用的分离技术,也是生物化学实验教学中的一个典型实验。为了提高实验教学质量和解决实验教学中存在的一些问题,对该实验进行了改进与完善。选择优化了实验样品,改进了洗脱液配方,设计并采用自制仪器洗脱... 葡聚糖凝胶层析是生物化学领域常用的分离技术,也是生物化学实验教学中的一个典型实验。为了提高实验教学质量和解决实验教学中存在的一些问题,对该实验进行了改进与完善。选择优化了实验样品,改进了洗脱液配方,设计并采用自制仪器洗脱液瓶完善了层析系统,应用自编计算机程序处理实验数据并绘制曲线图,提高了实验教学效率,降低了实验成本,得到学生和教师的好评。 展开更多
关键词 生物化学 实验教学 葡聚糖 凝胶层析
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日本血吸虫抗原凝胶层析纯化与分析 被引量:1
18
作者 张雪娟 黄熙照 +4 位作者 王一成 杨继宗 潘金日 金美玲 朱家新 《中国兽医科技》 CSCD 1996年第3期28-29,共2页
日本血吸虫病是人兽共患寄生虫病,病畜是主要的传染源。为人畜同步消灭日本血吸虫病,国内外普遍应用血清学方法诊断血吸虫病,但血清学诊断技术的特异性、敏感性及诊断试剂的稳定性关键取决于血吸虫抗原的纯度、活性和特异性。为了使斑... 日本血吸虫病是人兽共患寄生虫病,病畜是主要的传染源。为人畜同步消灭日本血吸虫病,国内外普遍应用血清学方法诊断血吸虫病,但血清学诊断技术的特异性、敏感性及诊断试剂的稳定性关键取决于血吸虫抗原的纯度、活性和特异性。为了使斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)技术更具备灵敏、特异、稳定等特点。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 抗原 凝胶层析 纯化
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凝胶层析分离提纯纳豆激酶研究 被引量:5
19
作者 刘超 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2010年第8期174-176,192,共4页
从纳豆菌发酵液中提取纳豆激酶,采用20%~60%饱和度的硫酸铵沉淀,Supherdex G-75凝胶过滤层析对活性组分进行分离提纯。并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电(SDS-PAGE)对分离纯化的效果进行了检验。结果表明在SDS-PAGE中观察到单一条... 从纳豆菌发酵液中提取纳豆激酶,采用20%~60%饱和度的硫酸铵沉淀,Supherdex G-75凝胶过滤层析对活性组分进行分离提纯。并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电(SDS-PAGE)对分离纯化的效果进行了检验。结果表明在SDS-PAGE中观察到单一条带,分子量27.7ku。 展开更多
关键词 纳豆激酶 分离纯化 凝胶层析
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茜素红S-牛血清白蛋白配合物的凝胶层析分离制备及紫外可见吸收光谱研究
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作者 邓跃全 迟燕华 +2 位作者 古泳梅 张强 杨瑞 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期511-514,共4页
用葡聚糖凝胶层析分离制备牛血清蛋白(BSA)-茜素红S(ARS)配合物。在420和530 nm处用紫外可见吸收光谱法同时测定含有BSA-ARS配合物和茜素红S的联立方程为:A420=4.89×103cARS+3.06×104cBSA-ARS,A530=4.60×102cARS+2.29... 用葡聚糖凝胶层析分离制备牛血清蛋白(BSA)-茜素红S(ARS)配合物。在420和530 nm处用紫外可见吸收光谱法同时测定含有BSA-ARS配合物和茜素红S的联立方程为:A420=4.89×103cARS+3.06×104cBSA-ARS,A530=4.60×102cARS+2.29×104cBSA-ARS;正交试验选择了合适的分离条件:柱直径1.0 cm,柱长30.0 cm,凝胶用量1.3 g,最佳进样浓度为ARS:5×10-3mol/L、BSA:1.49×10-4mol/L,进样体积1.5 mL,洗脱流速0.33 mL/min,分离度为1.25;测定了纯BSA-ARS配合物紫外吸收光谱,最大吸收峰在530 nm。 展开更多
关键词 葡聚糖凝胶层析 牛血清白蛋白 茜红素S 配合物 分离 紫外可见光谱
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