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大分子拥挤环境下多酚结构类似物抑制人血清白蛋白聚集的研究
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作者 姜梦瑶 闫雨 +2 位作者 关姣 王梦凡 彭鑫 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第15期34-44,共11页
为了揭示生理拥挤环境下巴西苏木素(Brazilin,Bra)、苏木素(Hematoxylin,Hto)和氧化苏木精(Hematein,Hte)抗蛋白质聚集能力,本文首先利用大分子拥挤试剂聚乙二醇构建了模拟拥挤环境,然后利用荧光光谱法、紫外-可见吸收光谱法、动态光散... 为了揭示生理拥挤环境下巴西苏木素(Brazilin,Bra)、苏木素(Hematoxylin,Hto)和氧化苏木精(Hematein,Hte)抗蛋白质聚集能力,本文首先利用大分子拥挤试剂聚乙二醇构建了模拟拥挤环境,然后利用荧光光谱法、紫外-可见吸收光谱法、动态光散射法和原子力显微镜法研究了这三种结构类似的多酚类化合物对人血清白蛋白(HSA)聚集行为的抑制机制。结果表明,在拥挤环境中它们均能够维持HSA结构的稳定,减少形成的淀粉样纤维数量,缩短其长度,从而抑制蛋白质的聚集过程,且抑制能力依次为:Hto>Bra>Hte,此外,与体外稀溶液环境相比,拥挤试剂的存在会导致这三个抑制剂的抑制活性降低。总之,本研究表明Hto可作为潜在的蛋白质聚集抑制剂和功能性食品成分,用于淀粉样变性疾病的治疗干预。 展开更多
关键词 巴西苏木素 苏木素 氧化苏木精 人血清白蛋白 蛋白质聚集 分子拥挤
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分子拥挤策略下硝苯地平表面印迹材料的制备与性能研究 被引量:1
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作者 赖申枝 谢俊英 《山东化工》 CAS 2023年第22期14-17,共4页
采用表面印迹技术和分子拥挤技术,以硝苯地平为模板,介孔二氧化硅微球为载体,制备表面分子印迹材料。扫描电镜和透射电镜结果表明,印迹微球粒径约为700~800 nm,印迹层厚度约为50 nm。分子拥挤试剂的加入使印迹因子得到提高。材料具有较... 采用表面印迹技术和分子拥挤技术,以硝苯地平为模板,介孔二氧化硅微球为载体,制备表面分子印迹材料。扫描电镜和透射电镜结果表明,印迹微球粒径约为700~800 nm,印迹层厚度约为50 nm。分子拥挤试剂的加入使印迹因子得到提高。材料具有较大的饱和吸附量(153.1 mg/g)和快速的吸附动力学(30 min),材料对结构相似的竞争物具有较好的选择性,材料的循环使用性能良好。分子拥挤策略下的表面分子印迹材料表现出对目标物良好的识别选择性和吸附富集能力。 展开更多
关键词 分子拥挤 表面印迹 制备 性能
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细胞内的大分子拥挤环境 被引量:9
3
作者 李剑 王志珍 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第6期788-792,共5页
所有的细胞中都存在着大量的蛋白质、核酸、多糖等各种生物大分子 ,它们大约占用细胞容积的 2 0 %~30 % ,总浓度高达 80~ 2 0 0 g/L ,因此任何一种大分子都处于一个充满其他大分子的拥挤环境中 .对源于排斥容积效应的拥挤理论分析表... 所有的细胞中都存在着大量的蛋白质、核酸、多糖等各种生物大分子 ,它们大约占用细胞容积的 2 0 %~30 % ,总浓度高达 80~ 2 0 0 g/L ,因此任何一种大分子都处于一个充满其他大分子的拥挤环境中 .对源于排斥容积效应的拥挤理论分析表明它对所有大分子之间的反应在热力学和动力学上都有很大的影响 .可是以往人们在体外研究生物大分子的性质和相互作用时几乎都忽略了这样一个细胞大分子拥挤的实际环境 .最近几年建议把大分子拥挤与 pH、离子强度和溶液组成等一样作为常规因素来研究生物大分子的呼声很高 。 展开更多
关键词 细胞 分子拥挤环境 排斥容积效应 蛋白质折叠 拥挤试剂
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大分子拥挤环境中溶菌酶的去折叠过程 被引量:2
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作者 王莉衡 钦传光 +1 位作者 尚晓娅 牛卫宁 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2009年第9期187-192,共6页
【目的】研究不同大分子拥挤体系对盐酸胍诱导的溶菌酶去折叠过程的影响。【方法】以葡聚糖70(Dextran70)、菲可70(Ficoll70)、聚乙二醇2000(PEG2000)作为大分子拥挤试剂,模拟体内高度拥挤的环境,用荧光相图法研究不同大分子拥... 【目的】研究不同大分子拥挤体系对盐酸胍诱导的溶菌酶去折叠过程的影响。【方法】以葡聚糖70(Dextran70)、菲可70(Ficoll70)、聚乙二醇2000(PEG2000)作为大分子拥挤试剂,模拟体内高度拥挤的环境,用荧光相图法研究不同大分子拥挤试剂中,有无还原剂2-巯基乙醇存征时,盐酸胍诱导溶菌酶去折叠过程的变化及其特点,探讨大分子拥挤环境对蛋白质去折叠的影响。【结果】Dextran’70、Ficoll70和PEG20003种大分子拥挤试剂对溶菌酶活性几乎没有影响。无大分子拥挤试剂条件下,溶菌酶从天然态转变为去折叠态的过程中(盐酸胍浓度为0~6.0mol/L),当无还原剂2-巯基乙醇时,溶菌酶的去折叠过程符合“三态模型”,有1个中间态;当存在还原剂2-巯基乙醇时,该变性过程则符合“二态模型”,不存在任何中间态,溶菌酶可直接从天然态转变为去折叠态。溶菌酶在大分子拥挤体系中变性时,当不存在还原剂2巯基乙醇,变性过程符合“四态模型”,存在2个中间态;而当存在还原剂2-巯基乙醇时,变性过程则符合“三态模型”,有1个中间态。【结论】:通过添加大分子拥挤试剂,增加了溶菌酶变性过程的中间态,改变了蛋白由天然态到完全去折叠态的变性过程。 展开更多
关键词 分子拥挤 溶菌酶 去折叠 荧光相图法 盐酸胍
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大分子拥挤体系下葡聚糖对SPI的共价修饰 被引量:1
5
作者 齐军茹 卓秀英 +2 位作者 杨晓泉 尹寿伟 黄立新 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第12期121-126,共6页
为探讨糖链对蛋白质的共价修饰作用,在大分子拥挤体系中通过Maillard反应制备了大豆分离蛋白(SPI)-葡聚糖共价复合物(SDC),通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、荧光光谱、凝胶渗透色谱、圆二色光谱等方法研究了葡聚糖共价键入后对... 为探讨糖链对蛋白质的共价修饰作用,在大分子拥挤体系中通过Maillard反应制备了大豆分离蛋白(SPI)-葡聚糖共价复合物(SDC),通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、荧光光谱、凝胶渗透色谱、圆二色光谱等方法研究了葡聚糖共价键入后对SPI功能和构象的影响.结果表明,大豆分离蛋白和葡聚糖发生共价结合;Maillard反应的适宜条件为SPI/葡聚糖质量比1∶1,温度60℃、反应时间30 h;在大分子拥挤体系中,与未经Maillard反应的SPI/葡聚糖混合物相比,SDC表面的疏水基团减少,乳化活性较高;与SPI相比,SDC的热稳定性提高;糖链的键入使SPI的结构发生了变化,柔韧性有所增加,更有利于发挥其功能. 展开更多
关键词 分子拥挤 大豆分离蛋白 葡聚糖 共价键 MAILLARD反应
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大分子拥挤对DNA结构的影响 被引量:3
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作者 钟文涛 洪美亚 龚兴国 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2004年第6期583-586,共4页
大分子拥挤(macromolecular crowding effect)代表了细胞内高度拥挤状态,其源于非特异性容积排斥效应,是细胞内与pH、离子强度等同等重要的生理因素。生物大分子介导的拥挤环境对于DNA-DNA、DNA-蛋白质的相互作用以及DNA高级结构、细胞... 大分子拥挤(macromolecular crowding effect)代表了细胞内高度拥挤状态,其源于非特异性容积排斥效应,是细胞内与pH、离子强度等同等重要的生理因素。生物大分子介导的拥挤环境对于DNA-DNA、DNA-蛋白质的相互作用以及DNA高级结构、细胞核或核区结构的稳定具有重要作用。在拥挤环境中,大分子总浓度的增加将增强溶质的浓缩倾向,从而降低溶液的自由能。拥挤效应是胞内大分子环境的,总体反映,具有高度的缓冲性,保证了胞内反应的稳定进行及细胞功能的正常行使。 展开更多
关键词 分子拥挤 DNA结构 拥挤效应 生物大分子 拥挤试剂 缓冲性
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大分子拥挤下介孔中木瓜蛋白酶的微波辅助固定化 被引量:1
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作者 刘明庆 王安明 +6 位作者 王华 周成 杜志强 祝社民 杨明 张俊 沈树宝 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期157-160,共4页
为了增强酶的固定化效果,通过添加大分子试剂,在微波辐射作用下将木瓜蛋白酶固定在介孔泡沫硅的孔道中.结果表明,在加酶量为400mg/g时,微波辐射下木瓜蛋白酶与牛血清白蛋白(BSA)共固定化制得的固定化酶催化效果最好.当BSA含量为加酶量的... 为了增强酶的固定化效果,通过添加大分子试剂,在微波辐射作用下将木瓜蛋白酶固定在介孔泡沫硅的孔道中.结果表明,在加酶量为400mg/g时,微波辐射下木瓜蛋白酶与牛血清白蛋白(BSA)共固定化制得的固定化酶催化效果最好.当BSA含量为加酶量的5%(ω)时,固定化酶表观活力高达419.1U/mg,相对活力和酶活回收率分别为126.0%和119.1%.影响固定化酶活力的主要因素依次为加酶量、BSA含量、微波功率和固定化pH.该固定化酶的最适反应pH为7.0,最适反应温度为75℃,热稳定性优于游离酶和未加入BSA的固定化酶,80℃下热处理3h,剩余活力仍为初始活力的88.2%. 展开更多
关键词 木瓜蛋白酶 微波辐射 介孔泡沫硅 分子拥挤 固定化
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大分子拥挤环境下大豆7S球蛋白糖基化研究 被引量:2
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作者 张曦 齐军茹 杨晓泉 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期58-61,共4页
生命科学领域中的大分子拥挤环境作为反应介质进行Maillard反应制备大豆7S球蛋白-葡聚糖共价复合物。对液相体系中发生Maillard反应的各种影响因素进行系统研究,并采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术证实大豆7S球蛋... 生命科学领域中的大分子拥挤环境作为反应介质进行Maillard反应制备大豆7S球蛋白-葡聚糖共价复合物。对液相体系中发生Maillard反应的各种影响因素进行系统研究,并采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术证实大豆7S球蛋白和葡聚糖发生了共价结合,得出共价复合物制备的最优条件。结果表明:5%的7S球蛋白与15%的葡聚糖在pH7.0条件下,95℃反应6h后,形成了良好的大分子共价复合物。产物色泽良好,褐变程度较低,反应时间大大缩短。 展开更多
关键词 大豆7S球蛋白 葡聚糖 分子拥挤 MAILLARD反应
原文传递
i-Motif在分子拥挤条件下的性质 被引量:1
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作者 周俊 贾国卿 +1 位作者 冯兆池 李灿 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期309-311,共3页
i-Motif is formed from two parallel duplexes by intercalating with each other in an antiparallel orientation and each duplex is held together-via-hemiprotonated cytosine+-cytosine base pairs.However,a cell is crowded ... i-Motif is formed from two parallel duplexes by intercalating with each other in an antiparallel orientation and each duplex is held together-via-hemiprotonated cytosine+-cytosine base pairs.However,a cell is crowded with various biomolecules and little is known about the properties of i-Motif under molecular crowding conditions until now.In the present study,we used human telomeric DNA sequence,[C3TA23C3,as a model system to investigate such problem by circular dichroism(CD) and UV absorbance spectroscopy.Based on the CD spectra,we found that there were no changes about the structure of i-Motif in the presence of polyethylene glycol(PEG).CD melting results showed that the thermal stability of i-Motif was increased under molecular crowding conditions compare to that in dilute buffer,which was further demonstrated by UV-melting results.This work suggests that molecular crowding could not affect the structure of i-Motif,which may depend on pH,while could enhance the thermal stability of i-Motif. 展开更多
关键词 I-MOTIF 分子拥挤 聚乙二醇
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大分子拥挤条件下光诱导辣根过氧化物酶还原的光谱研究
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作者 曹洪玉 王珍 +1 位作者 唐乾 郑学仿 《影像科学与光化学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期321-329,共9页
稀溶液中光诱导辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)能够发生还原反应,但这一研究忽略了生物体细胞内因存在各种分子而高度拥挤的真实环境。本文采用紫外可见、荧光、同步荧光及圆二色光谱法,研究了大分子拥挤环境中光诱导HRP... 稀溶液中光诱导辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)能够发生还原反应,但这一研究忽略了生物体细胞内因存在各种分子而高度拥挤的真实环境。本文采用紫外可见、荧光、同步荧光及圆二色光谱法,研究了大分子拥挤环境中光诱导HRP的还原过程及外界环境对其光还原的影响。UV-Vis光谱和同步荧光光谱结果表明,采用403nm单色光照射时,HRP在拥挤试剂葡聚糖70(Dextran70)中还原程度较好,而HRP在聚蔗糖70(Ficoll70)拥挤环境下不发生光还原反应;采用280nm单色光照射时,在拥挤试剂Dextran70和Ficoll70中HRP光还原反应程度增加,且HRP的光还原程度在Ficoll70溶液中远高于在Dextran70溶液中;光诱导HRP还原的最适温度在Dextran70和Ficoll70环境中分别为4℃和24℃;HRP在Dextran70溶液中的最佳光还原浓度是100g/L,在Ficoll70环境中HRP还原程度随着Ficoll70浓度的增加而增大;CD光谱结果表明拥挤环境中HRP被光还原后,蛋白的二级结构基本没有变化。 展开更多
关键词 分子拥挤环境 辣根过氧化物酶 光照还原 光谱法
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干热法及大分子拥挤体系制备的共价复合物的物化性质
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作者 齐军茹 翁静宜 +2 位作者 冯纪璐 刘倩茹 杨晓泉 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第11期16-22,共7页
通过干热法和大分子拥挤体系分别制备大豆7S球蛋白-葡聚糖共价复合物,讨论不同反应体系制备的产物的物化性质差异.根据糖基化产物在7S等电点(p H=4.8)和中性条件(p H=6.5)下的溶解性将其分成两组分,对其接枝度、蛋白质二级结构、内置荧... 通过干热法和大分子拥挤体系分别制备大豆7S球蛋白-葡聚糖共价复合物,讨论不同反应体系制备的产物的物化性质差异.根据糖基化产物在7S等电点(p H=4.8)和中性条件(p H=6.5)下的溶解性将其分成两组分,对其接枝度、蛋白质二级结构、内置荧光和浊度进行分析.结果表明:在大分子拥挤环境下,7S在液相环境中发生了一定程度的水解,生成小分子的肽链,有利于多糖的共价接入;MC48(p H=4.8时制得,大分子拥挤体系)中主要是接枝程度较高的糖基化产物,MC65(p H=6.5时制得,大分子拥挤体系)中含有的糖基化产物接枝度较低,且程度不均匀;干热法制备得到的DH48(p H=4.8时制得)和DH65(p H=6.5时制得)接枝度较低,差异性不及大分子拥挤环境显著.SDSPAGE、圆二色光谱、内置荧光分析结果表明,大分子拥挤环境下制得的MC48和MC65物化性质差异显著,而干热法制得的DH48和DH65的物化性质差异不明显. 展开更多
关键词 大豆7 S球蛋白 葡聚糖 物化性质 分子拥挤体系 MAILLARD反应
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分子伴侣、蛋白质聚集和大分子拥挤环境对蛋白质折叠的影响(英)
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作者 李剑 王志珍 《中国科学院研究生院学报》 CAS CSCD 2002年第2期215-218,共4页
研究了细胞内存在的分子伴侣、蛋白质聚集和大分子拥挤环境对蛋白质折叠的影响.首先,发现分子伴侣GroEL与底物蛋白的结合有 半位 "和 全位"两种模式,它是由底物蛋白的分子形状、分子大小以及与GroEL的相互作用性质决定的.接着... 研究了细胞内存在的分子伴侣、蛋白质聚集和大分子拥挤环境对蛋白质折叠的影响.首先,发现分子伴侣GroEL与底物蛋白的结合有 半位 "和 全位"两种模式,它是由底物蛋白的分子形状、分子大小以及与GroEL的相互作用性质决定的.接着,发现两种不同的蛋白质一起复性时相互不干扰,提示细胞内蛋白质折叠可能不受其他蛋白聚集的影响;后又发现α 乳清蛋白的前熔球态不仅是分子伴侣也是蛋白质聚集体的作用对象.最后,研究大分子拥挤环境对蛋白质折叠热力学和动力学的影响,揭示了这种影响的复杂性和多样性. 展开更多
关键词 蛋白质折叠 分子伴侣 蛋白质聚集 分子拥挤 折叠热力学 折叠动力学
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大分子拥挤环境中脂肪酸影响磷脂囊泡相变的差示扫描量热研究(英文) 被引量:2
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作者 王娇 杨利军 +2 位作者 朱甜甜 汪慎之 陈忠秀 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第8期2027-2038,共12页
脂肪酸诱导的磷脂膜的热力学行为对于认识细胞内复杂的机制有着重要意义,而前人在研究脂肪酸与磷脂膜相互作用时大都在稀溶液中进行;拥挤环境下脂肪酸诱导磷脂膜的相变行为还未见报道。本文以二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)构建囊泡模型,... 脂肪酸诱导的磷脂膜的热力学行为对于认识细胞内复杂的机制有着重要意义,而前人在研究脂肪酸与磷脂膜相互作用时大都在稀溶液中进行;拥挤环境下脂肪酸诱导磷脂膜的相变行为还未见报道。本文以二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)构建囊泡模型,采用差示扫描量热法系统地研究了在不同浓度、不同分子量的聚乙二醇(PEG)拥挤环境中不同结构的脂肪酸对DMPC磷脂囊泡相变的影响。研究结果表明,在拥挤环境中,PEG对纯的磷脂囊泡相变的影响与大分子的分子量和浓度相关。对于脂肪酸/磷脂囊泡(FA/DMPC),PEG的存在对囊泡相变产生显著影响。在所考察的分子量和浓度范围内,PEG使FA/DMPC囊泡相变增加。短链饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸原本使DPMC囊泡相变降低,但PEG缩小了降低幅度,甚至导致相变增加。进一步的研究表明,在大多数情况下,PEG对FA/DMPC的相变具有协作增强效应,且其影响均与大分子的分子量和浓度相关。另外,随着PEG浓度的升高,磷脂囊泡的协同单位数逐渐降低,表明拥挤环境会影响磷脂双分子层的均一性,使协同发生相变的分子数降低。本文的研究表明,大分子拥挤环境能够对扰动的磷脂双分子层起到一定的修复作用,这一现象在生物膜相关领域不可忽视。 展开更多
关键词 分子拥挤 磷脂囊泡 脂肪酸 相变 差示扫描量热法
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大分子拥挤试剂对人肌肌酸激酶折叠途径的影响作用研究 被引量:3
14
作者 赵明 井健 李森 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期442-446,共5页
为研究大分子拥挤试剂对蛋白质折叠过程的影响作用及其机制提供有价值的依据,在大分子拥挤环境下进行了人肌肌酸激酶的折叠动力学研究,发现质量浓度高的大分子拥挤试剂(ρ=200 g.L-1的BSA、Dextran 70与Ficoll70)通过增进部分折叠中间... 为研究大分子拥挤试剂对蛋白质折叠过程的影响作用及其机制提供有价值的依据,在大分子拥挤环境下进行了人肌肌酸激酶的折叠动力学研究,发现质量浓度高的大分子拥挤试剂(ρ=200 g.L-1的BSA、Dextran 70与Ficoll70)通过增进部分折叠中间体的错误聚集,使酶的复性产率显著降低.相对质量浓度较低的大分子拥挤试剂(ρ≤100 g.L-1)对酶的复性产率影响不大,但对酶复性的动力学过程有较大影响,一方面可使无活性单体的二聚化变为复性速率最慢的限速步骤,另一方面又加快了二聚化的折叠中间体到天然构象的复性过程. 展开更多
关键词 分子拥挤 人肌肌酸激酶 折叠
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大分子拥挤及其对蛋白质折叠的影响 被引量:3
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作者 闫菡 郭占云 +1 位作者 冯佑民 席丹 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2003年第3期246-247,共2页
关键词 分子拥挤 蛋白质折叠 细胞化学
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大分子拥挤环境对不同糖基化MUC5AC折叠和聚集的影响 被引量:1
16
作者 景雯 童瑾 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第23期2817-2821,共5页
目的:研究大分子拥挤环境对不同糖基化程度的黏蛋白(MUC5AC)在复性过程中折叠和聚集的差异效应。方法:首先对哺乳系统表达的天然MUC5AC进行酶切去糖基化并利用蛋白拥挤试剂牛血清白蛋白(BSA)以及多糖拥挤剂聚乙二醇2000(PEG2000)、聚蔗... 目的:研究大分子拥挤环境对不同糖基化程度的黏蛋白(MUC5AC)在复性过程中折叠和聚集的差异效应。方法:首先对哺乳系统表达的天然MUC5AC进行酶切去糖基化并利用蛋白拥挤试剂牛血清白蛋白(BSA)以及多糖拥挤剂聚乙二醇2000(PEG2000)、聚蔗糖70(Ficoll70)和葡聚糖70(Dextran70)体外模拟大分子拥挤环境。将盐酸胍(GdnHCl)诱导变性的去糖基化蛋白(d-MUC5AC)及天然蛋白(n-MUC5AC)分别加入上述四种大分子拥挤体系中复性,25℃室温条件下,紫外分光光度计连续监测复性过程中其在488 nm光吸收的聚集变化。结果:质量浓度高(ρ=200 g/L)的大分子拥挤试剂通过增加部分折叠中间体的错误聚集从而降低蛋白复性产率,而质量浓度相对较低(ρ≤100 g/L)的大分子拥挤试剂能使蛋白很好的复性。同时,在相同浓度的同种拥挤试剂中,d-MUC5AC复性产率均高于n-MUC5AC,而异常聚集的程度则低于n-MUC5AC。结论:细胞内的大分子拥挤环境可不同程度降低MUC5AC的复性产率,并且对加剧糖基化MUC5AC的错误折叠和聚集的影响更显著。 展开更多
关键词 MUC5AC 糖基化 分子拥挤 折叠 聚集
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分子拥挤增强DNA-AgNCs的抗真菌能力及其在柑橘保鲜中的应用
17
作者 杜宁 陈旭 +1 位作者 刘海燕 许文涛 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第24期347-354,共8页
为探究分子拥挤对DNA-AgNCs抗真菌能力的影响及其对柑橘的保鲜作用,本实验先将DNA序列(5'-CCCCCCCCCCCC-3')与AgNO3溶液混合,以50%聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG)200溶液模拟分子拥挤环境,制备DNA-AgNCs。以DNA-AgNCs为研... 为探究分子拥挤对DNA-AgNCs抗真菌能力的影响及其对柑橘的保鲜作用,本实验先将DNA序列(5'-CCCCCCCCCCCC-3')与AgNO3溶液混合,以50%聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG)200溶液模拟分子拥挤环境,制备DNA-AgNCs。以DNA-AgNCs为研究对象,以扩展青霉、黄曲霉、禾谷镰刀菌、串珠镰刀菌为模型,以孢子计数法测定DNA-AgNCs对四种孢子萌发的抑制率,用微量稀释法确定DNA-AgNCs对四种真菌的最低抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration,MIC)。将DNA-AgNCs加入淀粉-壳聚糖基质中制备复合薄膜,通过拉伸实验、水接触角和抑菌圈实验探究其对薄膜力学性能、疏水性和抗菌性的影响,以涂膜的形式应用到柑橘保鲜,记录柑橘失重率、菌斑直径和感官评价。结果表明:分子拥挤DNA-AgNCs对孢子萌发的抑制作用优于正常DNA-AgNCs(P<0.05),MIC均在2.5μmol/L内;加入分子拥挤DNA-AgNCs的薄膜的拉伸性能由4.729 MPa增加至7.300 MPa,断裂伸长率由51.399%增加至77.287%,水接触角由59.700°增加至66.717°,对四种真菌的抑菌圈分别为23.969、19.176、16.822和13.349 cm;将柑橘在添加分子拥挤DNA-AgNCs溶液中浸泡涂膜,于28℃贮藏14 d,失重率(23.8%)和病斑直径(2.3 cm)显著低于对照组(P<0.05),感官评价(52分)显著高于对照组(P<0.05)。因此,分子拥挤能够增强DNA-AgNCs的抗菌能力,所制得涂膜能很好地保持柑橘的贮藏品质。 展开更多
关键词 分子拥挤 DNA-AgNCs 抗真菌能力 淀粉-壳聚糖复合薄膜 柑橘保鲜
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大分子拥挤对脂肪干细胞增殖及其成骨分化能力的影响
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作者 耿英楠 韦敏 毛豪丽 《组织工程与重建外科杂志》 2018年第6期311-313,共3页
目的研究大分子拥挤环境对脂肪干细胞(ADSCs)增殖及体外成骨分化能力的影响。方法将大分子拥挤试剂Ficoll 400和Ficoll 70分别以25 mg/mL和37.5 mg/mL的浓度混合,制备成50 mg/mL Fc混合液,用于体外培养ADSCs。通过CCK-8法、dsDNA核酸定... 目的研究大分子拥挤环境对脂肪干细胞(ADSCs)增殖及体外成骨分化能力的影响。方法将大分子拥挤试剂Ficoll 400和Ficoll 70分别以25 mg/mL和37.5 mg/mL的浓度混合,制备成50 mg/mL Fc混合液,用于体外培养ADSCs。通过CCK-8法、dsDNA核酸定量分析及BCA蛋白浓度测定,定量检测大分子拥挤环境对ADSCs增殖能力的影响;在不同培养时间对ADSCs进行成骨诱导,茜素红染色,检测ADSCs成骨分化能力。结果 CCK-8法检测显示大分子拥挤促进了ADSCs的增殖;dsDNA核酸定量分析及BCA蛋白浓度测定结果表明,大分子拥挤促进了ADSCs的DNA和蛋白质的合成;茜素红染色结果显示,大分子拥挤环境下ADSCs成骨分化能力增强,钙结节增加。结论大分子拥挤环境对ADSCs的增殖及其体外成骨分化均有一定的促进作用。 展开更多
关键词 分子拥挤 成骨分化 细胞外基质
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大分子拥挤条件下光诱导细胞色素C还原的光谱研究 被引量:7
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作者 刘艳伟 曹洪玉 +1 位作者 唐乾 郑学仿 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第2期246-252,共7页
稀溶液中高铁细胞色素C(ferric cytochrome c,Fe(III)-Cyt c)能被光照还原成亚铁细胞色素C(ferrous cytochrome c,Fe(II)-Cyt c),但这一研究忽略了生物体细胞的真实环境是高度拥挤的,因此采用紫外可见、同步荧光及圆二色谱光谱法研究了... 稀溶液中高铁细胞色素C(ferric cytochrome c,Fe(III)-Cyt c)能被光照还原成亚铁细胞色素C(ferrous cytochrome c,Fe(II)-Cyt c),但这一研究忽略了生物体细胞的真实环境是高度拥挤的,因此采用紫外可见、同步荧光及圆二色谱光谱法研究了大分子拥挤环境中光诱导Cyt c的还原过程及其对外界环境的依赖情况.UV-Vis光谱和同步荧光光谱结果表明,拥挤试剂葡聚糖70(Dextran70)和聚蔗糖70(Ficoll70)的加入利于Cyt c光还原的进行,且Ficoll70存在时Cyt c光还原程度远高于Dextran70存在时;Dextran70和Ficoll70环境中光诱导Cyt c还原的最适温度分别为37℃和25℃,定波长280 nm光照射利于Cyt c还原;Cyt c的光还原程度随着Dextran70浓度增加而增大,Ficoll70环境中Cyt c的最适光还原浓度为100 g?L-1;拥挤环境下Met,Trp,Tyr和Phe的存在对光诱导Cyt c的还原过程依Phe>Tyr>Trp>Met顺序有催化促进作用;CD光谱结果表明光照射稀溶液中Cyt c蛋白还原后,其α-螺旋含量降低,β-折叠含量升高,而光照射拥挤环境中Cyt c还原后蛋白的二级结构基本没变化.结果表明拥挤试剂具有稳定蛋白质二级结构的作用,且影响光还原Cyt c的电子传递过程及效率. 展开更多
关键词 分子拥挤环境 光照还原 细胞色素C 光谱法 蛋白二级结构
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大分子拥挤环境下多糖对蛋白肽的修饰研究 被引量:3
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作者 齐军茹 翁静宜 +3 位作者 卓秀英 康燕辉 冯纪璐 杨晓泉 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第2期26-31,共6页
采用胃蛋白酶适度水解大豆分离蛋白得到蛋白肽,在大分子拥挤环境下通过Maillard反应制备蛋白肽-葡聚糖共价复合物(Hydrolated Soy Protein Isolated-Dextran Conjugates,HDC),采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术证实... 采用胃蛋白酶适度水解大豆分离蛋白得到蛋白肽,在大分子拥挤环境下通过Maillard反应制备蛋白肽-葡聚糖共价复合物(Hydrolated Soy Protein Isolated-Dextran Conjugates,HDC),采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术证实大豆7S球蛋白和葡聚糖发生了共价结合,并通过乳化剪切机、荧光分光光度计、差示扫描量热仪和粒度分布仪等对其接枝度、溶解性、热稳定性、抗氧化性和乳化性能进行系统分析。结果表明:大分子拥挤环境下大豆水解蛋白肽-葡聚糖60℃反应4 h就可以形成较高接枝度的共价复合物,溶解性较大豆分离蛋白(Soybean protein isolated,SPI)和大豆分离蛋白-葡聚糖(Soybean Protein Isolated-Dextran Conjugates,SDC)有所提高,热稳定性好,HDC的自由基清除率明显高于大豆水解蛋白和它与葡聚糖的混合物,达到66.39%,且羟自由基清除率高于维生素C,HDC的乳液粒径最小并具有优越的乳化稳定性。 展开更多
关键词 分子拥挤环境 胃蛋白酶 糖肽 葡聚糖 MAILLARD反应
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