苓桂术甘汤对心梗后慢性心衰模型大鼠心肌纤维化及心肌组织Wnt1/β-catenin信号通路蛋白表达的影响 被引量：6

1

作者 李向阳 姚娟 +3 位作者 汤同娟 王靓 周鹏 黄金玲 《中药材》 CAS 北大核心 2023年第6期1501-1506,共6页

目的:观察苓桂术甘汤对心肌梗死后慢性心衰大鼠心肌纤维化及心肌组织Wnt/β-catenin通路相关分子表达的影响,探讨其抑制心肌纤维化的作用和可能机制。方法:采用冠状动脉左前降支结扎法复制心肌梗死后慢性心衰大鼠模型;造模24 h后,连续干... 目的:观察苓桂术甘汤对心肌梗死后慢性心衰大鼠心肌纤维化及心肌组织Wnt/β-catenin通路相关分子表达的影响,探讨其抑制心肌纤维化的作用和可能机制。方法:采用冠状动脉左前降支结扎法复制心肌梗死后慢性心衰大鼠模型;造模24 h后,连续干预4 w。采用小动物彩色多普勒超声成像系统检测大鼠LVIDd、LVIDs、LVEF、LVFS;HE及Masson染色观察大鼠心肌组织病理学变化;ELISA法检测大鼠血清CK-MB、cTnT及心肌组织CollagenⅠ、CollagenⅢ水平;Western Blot检测大鼠心肌组织Wnt1、GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin、α-SMA及细胞核β-catenin蛋白表达;RT-qPCR检测大鼠心肌组织β-catenin、MMP-9 mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠LVIDd、LVIDs水平显著升高,LVEF、LVFS水平显著降低(P<0.01),心肌组织出现明显的心肌细胞排列紊乱,心肌纤维部分断裂及间质纤维化等病理变化,血清CK-MB、cTnT和心肌组织CollagenⅠ、CollagenⅢ含量及CollagenⅠ/CollagenⅢ比值显著升高,心肌组织细胞质GSK-3β蛋白表达显著降低,心肌组织α-SMA蛋白及细胞质Wnt1、β-catenin、p-GSK-3β蛋白和细胞核β-catenin表达显著升高,心肌组织β-catenin、MMP-9 mRNA表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,苓桂术甘汤干预4 w后,上述指标均显著改善(P<0.05或P<0.01)。结论:苓桂术甘汤能减轻心肌梗死后慢性心衰大鼠心肌损伤并抑制心肌纤维化,改善CHF大鼠心功能,其作用机制与其抑制心肌组织Wnt/β-catenin信号通路激活有关。 展开更多

关键词 苓桂术甘汤 慢性心衰 心肌纤维化 分泌型糖蛋白wnt1/β-连环蛋白信号通路

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Wnt/β-catenin信号通路与microRNA相互作用的研究进展 被引量：1

2

作者 左慧敏 曾林祥 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第14期2340-2342,共3页

Wnt 基因最早是1982年 Nusse等［1］在用小鼠乳头瘤病毒诱导小鼠产生乳腺癌的过程中发现的。 Wnt基因表达因子参与细胞生长、凋亡及干细胞分化等重要生理过程。 Wnt基因所编码的蛋白是一类分泌型糖蛋白，它具有分泌型生长因子的特点，W... Wnt 基因最早是1982年 Nusse等［1］在用小鼠乳头瘤病毒诱导小鼠产生乳腺癌的过程中发现的。 Wnt基因表达因子参与细胞生长、凋亡及干细胞分化等重要生理过程。 Wnt基因所编码的蛋白是一类分泌型糖蛋白，它具有分泌型生长因子的特点，Wnt 被分泌后，既可与自身细胞的膜受体结合发挥自分泌调节作用，也可与邻近细胞的膜受体结合发挥旁分泌作用。现已发现的Wnt通路分支有（1）经典Wnt／β-连环蛋白（Wnt／β-catenin）信号转导通路；（2）平行细胞极性通路；（3） Wnt／Ca＋通路；（4）调节纺锤体定向和不对称细胞分裂的通路［2］。其中经典Wnt 信号通路即 Wnt／β-catenin 通路，是 Wnt 信号中研究最清楚的一条通路，在整个进化过程中高度保守。微小RNA（microRNA）是广泛存在于真核生物中的一类长度约为22个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA，由一段具有茎环结构、长度为70～80个核苷酸单链RNA前体剪切而成，可通过与其相关的mRNA分子3′端非编码区（untranslated region， UTR）互补配对，与Argonaute 蛋白结合形成 RNA 诱导的沉默复合体（RISCs）促进靶mRNA的降解或抑制其翻译负调控基因表达而发挥生物学作用［3-5］，也可以通过甲基化及调节转录因子参与基因表达的转录后调控［6］。 展开更多

关键词 wnt β-catenin microRNA 信号通路 相互作用 wnt β-连环蛋白 调控基因表达 自分泌调节 信号转导通路

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Wnt/β-catenin信号通路拮抗因子sFRP1在宫颈组织中的表达及其与HPV相关性研究 被引量：6

3

作者 曹丽雯 何玉 欧玉荣 《蚌埠医学院学报》 CAS 2018年第12期1546-1550,共5页

目的:研究Wnt信号通路中分泌型卷曲相关蛋白(sFRP1)和β-连环蛋白(β-catenin)在宫颈癌变组织中的表达及其临床意义,并探讨两者与HPV感染的相关情况。方法:收集宫颈鳞癌(SCC) 60例、宫颈上皮内瘤变70例(LSIL 15例,HSIL 60例)和30例正常... 目的:研究Wnt信号通路中分泌型卷曲相关蛋白(sFRP1)和β-连环蛋白(β-catenin)在宫颈癌变组织中的表达及其临床意义,并探讨两者与HPV感染的相关情况。方法:收集宫颈鳞癌(SCC) 60例、宫颈上皮内瘤变70例(LSIL 15例,HSIL 60例)和30例正常宫颈组织,采用免疫组织化学SP法检测各组织sFRP1和β-catenin蛋白的表达情况,同时应用杂交捕获(HC2)技术行宫颈黏液脱落细胞HPV-DNA检测。结果:sFRP1在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变、SCC的细胞膜表达是逐渐缺失的,β-catenin在上述组织的细胞质、细胞核中表达是逐渐增强的。不同病理分化程度与浸润深度的SCC组织sFRP1表达差异有统计学意义(P <0. 05),不同FIGO分期与浸润深度的SCC组织β-catenin表达差异有统计学意义(P <0. 05)。在SCC组织中,β-catenin蛋白和sFRP1蛋白表达呈负相关(P <0. 05);β-catenin蛋白与HPV感染呈正相关(P <0. 01); sFRP1蛋白表达与HPV感染呈负相关(P <0. 05)。结论:sFRP-1、β-catenin蛋白表达及HPV感染联合检测对判断宫颈癌的发生、发展及预后有重要意义。 展开更多

关键词 宫颈鳞状细胞癌 wnt信号通路 分泌型卷曲相关蛋白 β-连环蛋白 人乳头瘤病毒

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SFRP5基因甲基化通过激活Wnt/β-catenin通路调节白血病细胞MDR1/P-gp的表达 被引量：7

4

作者 王慧涵 胡荣 +4 位作者 李迎春 赵成海 杨威 廖爱军 刘卓刚 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期278-283,共6页

目的:研究分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)基因甲基化对耐药白血病细胞多药耐药蛋白1/P-糖蛋白(MDR1/P-gp)表达的调节及其可能的信号通路。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)检测白血病患者及白血病细胞系中SFRP5基因启动子区甲基化状态。采用W... 目的:研究分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)基因甲基化对耐药白血病细胞多药耐药蛋白1/P-糖蛋白(MDR1/P-gp)表达的调节及其可能的信号通路。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)检测白血病患者及白血病细胞系中SFRP5基因启动子区甲基化状态。采用Western blotting检测非磷酸化β-catenin(NP-β-catenin)在SFRP5基因甲基化白血病患者及细胞系中表达。使用去甲基化试剂5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶(DAC)恢复SFRP5表达,采用RT-PCR和real-time PCR检测处理前后MDR1 mRNA表达,采用Western blotting检测P-gp表达。结果:5/12例白血病患者标本及4种白血病细胞系存在SFRP5基因完全甲基化。在5例患者标本中,有3例(L2、L7和L8)NP-β-catenin水平高于其它标本,在4种白血病细胞系中,KG1a中NP-β-catenin水平高于另外3个细胞系。存在NP-β-catenin高水平表达的3例患者(L2、L7和L8)中检出MDR1 mRNA及P-gp表达。在4种细胞系中,KG1a存在MDR1 mRNA及P-gp表达。使用去甲基化试剂DAC处理L2、L7、L8患者标本和KG1a细胞,恢复SFRP5表达,L2、L7、L8和KG1a中MDR1 mRNA水平均显著下降(P<0.01),P-gp表达水平亦被下调。结论:SFRP5基因甲基化可导致Wnt/β-catenin信号通路被激活,活化的β-catenin激活下游靶基因MDR1转录,编码的药物外排泵P-gp表达增加,促进白血病多药耐药的形成。 展开更多

关键词 分泌型卷曲相关蛋白5 白血病 多药耐药 P-糖蛋白 wnt/β-catenin信号通路

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南蛇藤提取物调控Lgr5/Wnt/β-catenin信号通路逆转胃癌前病变的机制 被引量：1

5

作者 张效泽 朱方圆 +2 位作者 文俊凇 刘延庆 朱耀东 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期70-77,共8页

目的:基于胃类器官损伤模型探究南蛇藤提取物(COE)调控富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(Lgr5)/配体分泌介质(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路影响胃类器官增殖分化及Lgr5表达从而逆转胃癌前病变(PLGC)的作用机制。方法:通过... 目的:基于胃类器官损伤模型探究南蛇藤提取物(COE)调控富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(Lgr5)/配体分泌介质(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路影响胃类器官增殖分化及Lgr5表达从而逆转胃癌前病变(PLGC)的作用机制。方法:通过小鼠胃腺体干细胞建立胃类器官,使用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG,0.02 mg·L^(-1))处理胃类器官构建胃类器官损伤模型;将胃类器官损伤模型随机分为正常组、模型组(0.02 mg·L^(-1)MNNG)、COE低、中、高质量浓度组(5、10、20 mg·L^(-1))、Wnt抑制剂Dickkopf相关蛋白1(DKK1)(0.5 mg·L^(-1))组并分别用不同药物处理24 h;镜下观察不同药物浓度胃类器官的数量与体积;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测胃类器官损伤模型活力;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察胃类器官形态与病理学;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同药物浓度胃类器官中Lgr5、黏蛋白2(MUC2)、黏蛋白5AC(MUC5AC)、黏蛋白6(MUC6)、Wnt和β-catenin表达情况。结果:与正常组比较,模型组胃类器官数量显著减少(P<0.01),体积显著减小(P<0.01),活力显著降低(P<0.01),Lgr5、MUC2、Wnt与β-catenin表达显著升高(P<0.01),MUC5AC、MUC6表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,COE低、中、高质量浓度组胃类器官数量及体积均显著升高(P<0.01);胃类器官活力显著增强(P<0.01),且在COE质量浓度为20 mg·L^(-1)时效果最显著(P<0.01);COE中、高质量浓度组Lgr5、MUC2表达显著降低(P<0.01),COE低、中、高质量浓度组MUC5AC、MUC6的表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,Wnt抑制剂能够明显促进胃类器官MUC5AC、MUC6的表达(P<0.05,P<0.01),显著降低MUC2、Wnt与β-catenin的表达(P<0.01),COE高质量浓度与Wnt抑制剂共同使用能够促进这一趋势(P<0.01)。结论:COE通过抑制Lgr5、MUC2、Wnt、β-catenin的表达和促进MUC5AC及MUC6的表达,抑制Wnt/β-catenin通路,促进胃类器官增殖分化,逆转PLGC过程。 展开更多

关键词 南蛇藤提取物 胃癌前病变 胃类器官损伤模型 富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(Lgr5)/配体分泌介质(wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路

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中医药调控Wnt/β-catenin信号通路治疗激素性股骨头坏死的研究进展 被引量：4

6

作者 尚征亚 曹林忠 +1 位作者 杨浩东 胡康一 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第20期205-213,共9页

激素性股骨头坏死(SNOFH)是临床上常见的一种骨科疾病,具有治愈难度大、临床预后差等特点。中国每年的SNOFH患者人数还在呈逐年上升的趋势,严重威胁人类的健康。长期不规范或短期大量使用激素(GC)是造成该病发生的重要原因,目前临床上对... 激素性股骨头坏死(SNOFH)是临床上常见的一种骨科疾病,具有治愈难度大、临床预后差等特点。中国每年的SNOFH患者人数还在呈逐年上升的趋势,严重威胁人类的健康。长期不规范或短期大量使用激素(GC)是造成该病发生的重要原因,目前临床上对SNOFH多采取髋关节置换等手术治疗手段,其存在对患者伤害大、花费较高等局限性。近年来,随着对中医药研究的不断深入与创新,运用中医药方法治疗SNOFH在临床上被广泛应用。SNOFH发生的中医病机主要是肾虚血瘀,故临床多采取补肾活血类中药单体及复方对SNOFH进行治疗。且中医药具有治疗效果明显,不良反应小,花费少等优点。在此之前的研究大都从中医辨证的方向阐述中医药对SNOFH的影响,该文从分子生物及细胞生物学角度来阐述中医药对SNOFH的影响机制。分泌型糖蛋白/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路作为与骨骼密切相关的经典信号通路,其通过促进骨髓间充质干细胞更新、增强成骨细胞的活性并抑制其发生凋亡,从而调节骨组织的代谢平衡,增加骨密度,在骨形成的过程中发挥重要作用。近年来运用中药单体及复方调控Wnt/β-catenin信号通路治疗SNOFH已成为当今研究的新热点。现就中医药通过调控Wnt/β-catenin信号通路防治SNOFH的研究进展做一综述,以期为中医药治疗SNOFH的应用提供参考。 展开更多

关键词 激素性股骨头坏死 分泌型糖蛋白/β-连环蛋白(wnt/β-catenin)信号通路 中医药 研究进展

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肝豆汤对Wilson病模型铜负荷大鼠肝脏Wnt/β-catenin信号通路的调控作用 被引量：10

7

作者 耿昊 李海 +6 位作者 徐陈陈 董健健 陈燕 韩咏竹 韩永升 杨任民 程楠 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期75-81,共7页

目的:探讨肝豆汤对铜负荷大鼠肝脏中分泌型糖蛋白(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的调控作用及机制。方法:SD大鼠115只随机分为正常组(20只)、造模组。造模组予以1 g·kg^(-1)·d^(-1)的硫酸铜饲料及0. 02 m L·g-1&... 目的:探讨肝豆汤对铜负荷大鼠肝脏中分泌型糖蛋白(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的调控作用及机制。方法:SD大鼠115只随机分为正常组(20只)、造模组。造模组予以1 g·kg^(-1)·d^(-1)的硫酸铜饲料及0. 02 m L·g-1·d-1的0. 185%硫酸铜溶液连续喂养12周;造模成功大鼠随机分为模型组(45只),肝豆汤组(25只)和青霉胺(PCA)组(25只);模型组、肝豆汤组和PCA组分别予以0. 02 m L·g-1·d-1生理盐水,0. 4 g·kg^(-1)·d^(-1)的中药肝豆汤和0. 09 g·kg^(-1)·d^(-1)青霉胺灌胃,连续4周,末次灌胃后取各组大鼠肝脏组织检测:电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)检测各组大鼠肝铜含量;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肝脏组织病理改变,免疫组织化学法检测肝脏组织氧化应激相关蛋白的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平。结果:ICP-AES法结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏铜含量显著升高(P <0. 01);肝豆汤可降低铜负荷大鼠肝脏铜含量(P <0. 05),PCA可显著降低模型组大鼠肝脏铜含量(P <0. 01); HE染色结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏组织镜下可见肝细胞大小不一、排列紊乱,部分肝索丧失;肝豆汤组和PCA组细胞损伤程度较模型组明显降低;免疫组化结果显示:肝豆汤和PCA可显著降低模型组8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxyguanosine),硝基酪氨酸(Nitrotyrosine)蛋白表达量(P <0. 01); Western blot结果显示,肝豆汤和PCA可使铜负荷大鼠肝脏内Wnt通路相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin),磷酸化糖原合成激酶3β(glycogen synthase kinase-3,p-GSK3β),原癌基因(cellular myelocytomatosis oncogene,c-Myc)蛋白表达量显著增加(P <0. 01)。结论:肝豆汤可通过促进过量铜排出减轻高铜诱导的肝脏损伤,并通过激活肝脏Wnt/β-catenin信号通路促进损伤的肝组织代偿性自愈以达到减轻高铜诱导氧化应激损伤的治疗效果。 展开更多

关键词 WILSON病 肝豆汤 分泌型糖蛋白(wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路 肝脏损伤

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黄芪甲苷通过调控FoxO3a/Wnt2/β-catenin通路抑制去卵巢大鼠骨质疏松的作用 被引量：47

8

作者 成鹏 白银亮 +2 位作者 胡彩莉 连佛彦 周海宇 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第15期161-166,共6页

目的：通过调控转录因子叉头框蛋白O3a（FoxO3a）/分泌型糖蛋白2（Wnt2）/β-连环蛋白（β-catenin）通路评价黄芪甲苷对去卵巢大鼠骨质疏松的作用,并探讨其作用机制。方法：雌性SD大鼠随机均分6组,分别为假手术组,模型组,阳性药组（尼... 目的：通过调控转录因子叉头框蛋白O3a（FoxO3a）/分泌型糖蛋白2（Wnt2）/β-连环蛋白（β-catenin）通路评价黄芪甲苷对去卵巢大鼠骨质疏松的作用,并探讨其作用机制。方法：雌性SD大鼠随机均分6组,分别为假手术组,模型组,阳性药组（尼尔雌醇,1.5 mg·kg-1）,黄芪甲苷低、中、高剂量组（20,40,80 mg·kg-1）,每组8只。通过摘除大鼠双侧卵巢复制绝经后大鼠骨质疏松模型。术后6周,灌胃给药,每日1次,连续8周。酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒检测大鼠骨钙素（bone gla protein,BGP）,降钙素（calcitonin,CT）,骨保护素（osteoprotegerin,OPG）,核转录因子-κB（NF-κB）受体活化因子配体（receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL）,丙二醛（malondialdehyde,MDA）,过氧化氢酶（catalase,CAT）,谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）含量,双能X射线骨密度检测仪分别测定股骨和腰椎的骨密度值（bone mineral density,BMD）,采用三点弯曲法测量胫骨生物力学指标,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠股骨组织中β-catenin,FoxO3a,Wnt2,p66（shc）,p-p66（shc）蛋白的表达。结果：与模型组比较,黄芪甲苷组CT和OPG水平显著升高,BGP和RANKL水平则显著降低（P〈0.05,P〈0.01）;黄芪甲苷显著升高腰椎、股骨的BMD和胫骨的最大载荷及最大应力（P〈0.05,P〈0.01）;同时,黄芪甲苷显著降低MDA水平（P〈0.05）,升高CAT,SOD和GSH-Px水平（P〈0.05,P〈0.01）。Western blot显示,黄芪甲苷显著降低p-p66（shc）/p66（shc）水平（P〈0.05）;升高β-catenin和Wnt2蛋白表达水平（P〈0.05,P〈0.01）,抑制FoxO3a蛋白表达水平（P〈0.01）。结论：黄芪甲苷能够有效缓解氧化应激介导的去卵巢大鼠的骨质疏松,该作用可能与其调节FoxO3a/Wnt2/β-catenin通路有关。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 骨质疏松 去卵巢大鼠 转录因子叉头框蛋白O3a(FoxO3a)/分泌型糖蛋白2(wnt2)/β-连环蛋白(β-catenin)通路

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复肾功方对慢性肾衰竭大鼠Wnt/β-catenin信号途径的影响 被引量：9

9

作者 张洋 黄学宽 +6 位作者 沈清 童潘 徐珂 罗洪玉 田珈瑜 邹波 殷实 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第24期89-95,共7页

目的:观察复肾功方对慢性肾衰竭(CRF)大鼠分泌型糖蛋白(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号途径的影响,探讨其减少细胞外基质(ECM)的沉积,抗肾小管间质纤维化(TIF)及延缓CRF进展的作用机制。方法:将55只雄性SD大鼠随机将分为正常组,模型... 目的:观察复肾功方对慢性肾衰竭(CRF)大鼠分泌型糖蛋白(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号途径的影响,探讨其减少细胞外基质(ECM)的沉积,抗肾小管间质纤维化(TIF)及延缓CRF进展的作用机制。方法:将55只雄性SD大鼠随机将分为正常组,模型组,复肾功方低、中、高剂量组,每组11只。正常组常规饲养,其余4组大鼠则用腺嘌呤含量为0.5%的饲料建立CRF模型,连续喂养21 d。造模成功后所有大鼠改用常规饲料,正常组和模型组大鼠给予20 mL·kg^-1生理盐水灌胃;复肾功方低、中、高剂量组大鼠则按体质量分别灌胃4,8,16 g·kg^-1复肾功方水煎剂,1次/d,连续灌胃30 d。实验结束后,马松(Masson)染色观察大鼠肾组织病理形态学变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾组织Wnt4,β-catenin mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织Wnt4,β-catenin,基质金属蛋白酶-7(MMP-7)蛋白的表达,免疫组化检测肾组织Wnt4,β-catenin蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾小管间质纤维化明显增多,肾组织Wnt4,β-catenin mRNA及Wnt4,β-catenin,MMP-7蛋白的表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,复肾功方各组大鼠肾组织Wnt4,β-catenin mRNA及Wnt4,β-catenin,MMP-7蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论:复肾功方减少ECM的沉积、抗肾小管间质纤维化、延缓CRF进展可能与抑制Wnt/β-catenin信号途径的激活有关。 展开更多

关键词 复肾功方 慢性肾衰竭 分泌型糖蛋白(wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号途径 细胞外基质 肾小管间质纤维化

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基于Wnt/β-catenin调控EMT探讨氧化苦参碱联合贝伐珠单抗抗乳腺癌的体外活性机制 被引量：4

10

作者 张贝贝 张艳 +4 位作者 王风仙 杨婷 徐晶 解伟 王进 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第24期109-117,共9页

目的:观察氧化苦参碱(OM)联合贝伐珠单抗(BV)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移的作用,并基于分泌型糖蛋白(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对OM调控BV引起的上皮间质转化(EMT)的机制进行探讨。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK... 目的:观察氧化苦参碱(OM)联合贝伐珠单抗(BV)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移的作用,并基于分泌型糖蛋白(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对OM调控BV引起的上皮间质转化(EMT)的机制进行探讨。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)实验观察OM(0,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0 mmol·L^(-1))及BV(0,0.25×10^(-4),0.50×10^(-4),1.00×10^(-4),2.00×10^(-4),4.00×10^(-4),8.00×10^(-4)mmol·L^(-1))联合后对MCF-7细胞增殖的影响;通过侵袭小室法(transwell)和划痕损伤修复实验观察OM(4.0 mmol·L^(-1))与BV(2.00×10^(-4)mmol·L^(-1))联合后对MCF-7细胞侵袭与迁移能力的影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)观察OM(4.0 mmol·L^(-1))与BV(2.00×10^(-4)mmol·L^(-1))联合后对MCF-7细胞增殖相关蛋白的影响,并对Wnt/β-catenin信号通路及EMT相关蛋白的表达水平进行检测。结果:与空白组比较,OM(2.0,4.0,8.0,16.0 mmol·L^(-1))可呈浓度依赖性地抑制MCF-7细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),而BV未表现出抑制MCF-7细胞增殖的作用,两药联合对MCF-7细胞增殖的抑制作用与OM比较差异无统计学意义。与空白组比较,OM可显著减少MCF-7细胞的迁移距离和侵袭细胞数目(P<0.01),BV可明显增加MCF-7细胞的迁移距离和侵袭细胞数目(P<0.05,P<0.01)。与BV比较,联合后OM可显著抑制BV引起的MCF-7细胞的侵袭和迁移(P<0.01)。与空白组比较,OM及两药联用可明显抑制MCF-7细胞中与细胞增殖相关蛋白激酶B(Akt)和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)蛋白的磷酸化(P<0.01);OM及两药联用后显著降低Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin,原癌基因(c-Myc),CD44,G_(1)/S-特异性周期蛋白-D_(1)(cyclin D_(1))蛋白表达(P<0.05,P<0.01);OM及两药联用可显著降低EMT中钙离子依赖的细胞N-钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(Vimentin)蛋白表达,增加钙离子依赖的细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达水平(P<0.01),BV组上述相关蛋白的表达相反(P<0.05,P<0.01)。结论:OM与BV联合后OM可通过有效抑制BV引起的Wnt/β-catenin通路激活逆转EMT机制发挥抗乳腺癌的作用。 展开更多

关键词 氧化苦参碱 贝伐珠单抗 乳腺癌 分泌型糖蛋白(wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路 上皮间质转化(EMT)

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白皮杉醇对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468抗肿瘤作用及机制 被引量：3

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作者 王风仙 叶诗华 +2 位作者 赵卓佳 解伟 王进 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期42-48,共7页

目的:考察白皮杉醇(PIC)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-468增殖、凋亡及细胞周期的作用,并对其作用机制进行探讨。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法考察PIC(0,2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0,160.0μmol·L-1)对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞成... 目的:考察白皮杉醇(PIC)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-468增殖、凋亡及细胞周期的作用,并对其作用机制进行探讨。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法考察PIC(0,2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0,160.0μmol·L-1)对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞成活率的影响,并计算半抑制率(IC50);采用碘化丙啶(PI)染色观察PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^(-1))对MDA-MB-468细胞周期的影响;采用细胞凋亡检测(Annexin V-FITC/PI)双染法观察PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^(-1))对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞的诱导凋亡作用;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)观察不同浓度PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^(-1))对MDA-MB-468细胞增殖、凋亡蛋白的影响,并用Western blot对分泌型糖蛋白Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路相关蛋白进行检测。结果:MTT比色法结果显示,与空白组比较,PIC(5.0,10.0,20.0,40.0,80.0,160.0μmol·L^(-1))可呈浓度依赖性地抑制MDA-MB-468细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),IC50为(39.4±4.6)μmol·L^(-1);作用48 h,PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^(-1))呈浓度依赖性地升高MDA-MB-468细胞处于细胞周期G0/G1期细胞(P<0.01);呈浓度依赖性地诱导MDA-MB-468细胞凋亡(P<0.01),其中,PIC(20.0μmol·L^(-1))诱导细胞凋亡率为49.87%;PIC(10.0,20.0μmol·L^(-1))可明显降低MDA-MB-468细胞中β-catenin及原癌基因(C-myc),黏附因子(CD44)蛋白的表达水平(P<0.05,P<0.01);PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^(-1))可显著抑制蛋白激酶B(Akt)磷酸化,p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)蛋白的磷酸化,B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的蛋白表达水平(P<0.01);增强半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和磷酸化β-catenin的蛋白表达(P<0.01)。结论:PIC可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制MDA-MB-468细胞增殖,并将细胞周期阻滞在G0/G1期,从而诱导其凋亡。 展开更多

关键词 白皮杉醇 三阴性乳腺癌 分泌型糖蛋白wnt/β-连环蛋白(wnt/β-catenin)信号通路 MDA-MB-468细胞 凋亡

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益气活血方对慢性心力衰竭大鼠心室重构的干预作用及其机制 被引量：19

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作者 方子寒 谢盈彧 +4 位作者 王铭扬 王亚楠 李渊芳 穆怀玉 张军平 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期82-87,共6页

目的:观察益气活血方对慢性心力衰竭模型大鼠心脏结构变化的影响,并从线粒体动力学和分泌型糖蛋白(Wnt)/β-链蛋白(β-catenin)通路探讨其作用机制。方法:40只雄性SD大鼠随机选取10只为假手术组,其余行左冠状动脉前降支结扎术构建慢性... 目的:观察益气活血方对慢性心力衰竭模型大鼠心脏结构变化的影响,并从线粒体动力学和分泌型糖蛋白(Wnt)/β-链蛋白(β-catenin)通路探讨其作用机制。方法:40只雄性SD大鼠随机选取10只为假手术组,其余行左冠状动脉前降支结扎术构建慢性心力衰竭(CHF)大鼠模型,造模完成后随机分为模型组、卡托普利组和益气活血组,每组10只。给药组分别予以卡托普利片13.5 mg·kg^-1·d^-1,益气活血颗粒20 g·kg^-1·d^-1灌胃给药,干预8周后取心脏组织,称取体质量与心脏质量结合超声心动图检测心脏结构变化情况,行马松(Masson)染色测定心肌间质胶原容积分数,应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌线粒体融合蛋白视神经萎缩相关蛋白1(Opa1),分裂蛋白线粒体动力相关蛋白1(Drp1)的表达水平,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Wnt/β-catenin通路相关因子低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6),糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β),β-catenin mRNA的表达。结果:与假手术组比较,模型组左心室壁明显增厚(P<0.05),心腔明显扩大、心肌间质胶原含量升高(P<0.01);Opal表达水平降低,Drp1表达水平升高(P<0.01),LRP6,GSK-3β,β-catenin的mRNA表达量升高(P<0.01)。与模型组比较,益气活血组可减轻室壁增厚和心腔扩大(P<0.05,P<0.01),降低心肌间质胶原含量(P<0.05);上调Opa1的低表达、下调Drpl的高表达、下调LRP6,GSK-3β,β-catenin的高表达(P<0.01),作用效果优于或不劣于卡托普利组。结论:益气活血方可有效减轻慢性心力衰竭大鼠心室重构、改善线粒体能量代谢,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin的相关因子的表达相关。 展开更多

关键词 益气活血方 慢性心力衰竭 心室重构 线粒体动力学 分泌型糖蛋白/β-链蛋白(wnt/β-catenin)信号通路

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