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抗大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体制备及其生物学特性鉴定 被引量：3
1
作者 李晓栩 王华俊 +5 位作者 林贤 陈汉忠 曹池 唐大运 孟盟 刘明如 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1395-1399,共5页
【目的】制备大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体,为大片吸虫病的免疫诊断、防治等研究奠定基础。【方法】利用杂交瘤技术,以大片吸虫分泌排泄抗原为免疫原制备单克隆抗体,并用ELISA、硫氰酸盐洗脱法等方法鉴定其生物学特性。【结果】通过... 【目的】制备大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体,为大片吸虫病的免疫诊断、防治等研究奠定基础。【方法】利用杂交瘤技术,以大片吸虫分泌排泄抗原为免疫原制备单克隆抗体,并用ELISA、硫氰酸盐洗脱法等方法鉴定其生物学特性。【结果】通过间接ELISA筛选及3次亚克隆后,共获得5株大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为6D3、6B4、7D2、7D1和7D4。经鉴定,发现5株杂交瘤细胞染色体数为90～110条,均大于亲本细胞,其亚类鉴定分别属于IgG2b、IgM、IgM、IgG1和IgM,其轻链均为κ型;5株单克隆抗体(6D3、6B4、7D2、7D1、7D4)的上清效价分别为1:400、1:3200、1:25600、1:6400和1:6400,腹水效价分别为1:104、1:104、1:105、1:107和1:106;而表位测定结果表明,5株单克隆抗体中,6D3与7D1、7D2以及7D4与7D1、7D2作用于不同表位,6D3与6B4可能识别同一表位或重叠表位,或同一表位有空间位阻,7D4与6D3以及6B4与7D4、7D1、7D2可能具有空间位阻;5株单克隆抗体的相对亲和力为:6B4>7D4>7D1>6D3>7D2;5株杂交瘤细胞株均能稳定地分泌单克隆抗体。【结论】制备获得的分泌排泄抗原单克隆抗体可用于大片吸虫病的诊断和免疫机理等方面的进一步研究。 展开更多
关键词 大片吸虫 分泌排泄抗原 单克隆抗体 生物学特性 鉴定
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牦牛肝片吸虫分泌排泄抗原的生化特性和免疫印迹分析 被引量：2
2
作者 徐恒 吴峰 +2 位作者 沈斌 刘世贵 张西玉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期247-253,共7页
肝片吸虫的分泌排泄抗原（ＥＳ抗原）在诊断及诱导机体产生抗体方面具有重要作用。本文对寄生于牦牛的肝片吸虫ＥＳ抗原的蛋白质组成及其生化特性进行了分析。ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳显示ＥＳ抗原共有９条带，主要由１２－２６ＫＤ的... 肝片吸虫的分泌排泄抗原（ＥＳ抗原）在诊断及诱导机体产生抗体方面具有重要作用。本文对寄生于牦牛的肝片吸虫ＥＳ抗原的蛋白质组成及其生化特性进行了分析。ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳显示ＥＳ抗原共有９条带，主要由１２－２６ＫＤ的小分子量蛋白质组成；糖蛋白及脂蛋白染色后发现ＥＳ抗原中糖蛋白极少，而含有较多的脂蛋白；等电聚焦电泳结果显示ＥＳ抗原有２２条带，几乎全部是酸性蛋白，ｐＩ主要集中在４．２５～５．２５范围内；双向电泳共检出３０个多肽，主要分布在ｐＩ４．５～７．０之间；免疫印迹分析结果表明：ＥＳ抗原中分子量为１６．２ＫＤ～１８．６ＫＤ的蛋白质是主要的抗原成分，其中１７．２ＫＤ多肽具有最强的免疫原性。 展开更多
关键词 牛病 肝片吸虫 分泌排泄抗原 免疫印迹 牦牛
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肝片吸虫分泌排泄抗原及主要多肽对动物模型的免疫保护 被引量：2
3
作者 徐恒 吴峰 +1 位作者 沈斌 刘世贵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期365-370,共6页
体外培养肝片吸虫成虫，制备收集其分泌排泄抗原（ＥＳ抗原）。通过制备性ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分离纯化分泌排泄抗原中免疫印迹信号最强的两种多肽——１８．６ＫＤ和１７．２ＫＤ多肽。用分泌排泄抗原和两种多肽分别对动物模... 体外培养肝片吸虫成虫，制备收集其分泌排泄抗原（ＥＳ抗原）。通过制备性ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分离纯化分泌排泄抗原中免疫印迹信号最强的两种多肽——１８．６ＫＤ和１７．２ＫＤ多肽。用分泌排泄抗原和两种多肽分别对动物模型进行免疫保护性试验。大鼠和家兔经抗原免疫后，口服攻击新鲜活性肝片吸虫囊蚴，攻击感染的第６０天解剖动物，统计活虫数并计算减虫率。试验结果显示：肝片吸虫的ＥＳ抗原和１８．６ＫＤ及１７．２ＫＤ多肽对动物均有免疫保护作用，其最强的免疫保护率分别为大鼠８１．０４％、８７．９３％、７７．５９％；家兔８０．８８％、８８．２４％、７９．４１％。其中ＥＳ抗原和１８．６ＫＤ多肽免疫保护率较高，１７．２ＫＤ多肽则相对较弱。 展开更多
关键词 肝片吸虫 分泌排泄抗原 多肽 免疫保护
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片形吸虫分泌排泄抗原和虫体抗原的分析 被引量：3
4
作者 沈涛 何国声 +2 位作者 沈永林 顾越星 徐梅倩 《中国兽医寄生虫病》 CAS 2001年第2期8-9,共2页
用牛源肝片吸虫 (南京 )、牛源大片吸虫 (广西 )和羊源肝片吸虫 (实验感染 )制备可溶性虫体抗原 (BA)和分泌排泄抗原 (ES) ,以 SDS- PAGE电泳分析比较 ,结果显示 ,3株虫体可溶性虫体抗原至少有 2 0条以上的主要蛋白条带 ,分子量集中于 1... 用牛源肝片吸虫 (南京 )、牛源大片吸虫 (广西 )和羊源肝片吸虫 (实验感染 )制备可溶性虫体抗原 (BA)和分泌排泄抗原 (ES) ,以 SDS- PAGE电泳分析比较 ,结果显示 ,3株虫体可溶性虫体抗原至少有 2 0条以上的主要蛋白条带 ,分子量集中于 10～ 90 KD之间 ,它们之间无显著差异。而 3株分泌排泄抗原蛋白成分较简单 ,明显可分的条带不超过 5条 ,分子量集中于 10～ 30 KD之间 ,且均拥有 2 6～ 2 8KD的蛋白成分 ,提示该蛋白应为片形吸虫 ES抗原的主要免疫成分。 展开更多
关键词 肝片吸虫 片形吸虫病 大片吸虫 可溶性虫体抗原 分泌排泄抗原 SDS-PAGE 单克隆抗体
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牦牛肝片吸虫虫体抗原及分泌排泄抗原的双向电泳分析 被引量：1
5
作者 乔代蓉 赵坚 程书秋 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期25-27,共3页
本文用双向电泳和银染方法，分析了牦牛肝片吸虫虫体抗原（BA）及分泌排泄抗原（ES）的多肽。BA径双向电泳后显示多肽斑点69个，ES为30个，两种抗原共有的斑点9个。BA抗原的多肽主要分布在分子量10～18．6kDPI4．50～6．55之间的狭小区... 本文用双向电泳和银染方法，分析了牦牛肝片吸虫虫体抗原（BA）及分泌排泄抗原（ES）的多肽。BA径双向电泳后显示多肽斑点69个，ES为30个，两种抗原共有的斑点9个。BA抗原的多肽主要分布在分子量10～18．6kDPI4．50～6．55之间的狭小区域的酸性小分子多肽和20～100kD多肽。PI4．50～7．00之间的多肽；ES主要分布在PI4．50～7．0间。两者的双向电泳结果显示同一分子量的蛋白质大多由多种等电点不同的多肽组成，其多肽的数量和性质也有差异。 展开更多
关键词 牦牛 肝片吸虫 虫体抗原 分泌排泄抗原 双向电泳
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弓形虫速殖子分泌排泄抗原研究进展
6
作者 郭虹 《国外医学（寄生虫病分册）》 1999年第1期17-20,共4页
弓形虫分泌排泄抗原具有重要功能。本文综述了近年来速殖子棒状体、致密颗粒及微线体的主要分泌排泄抗原在分子生物学方面的研究进展。
关键词 弓形虫 分泌排泄抗原 分子生物学 速殖子
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日本血吸虫成虫和虫卵排泄分泌抗原对Ⅰ型糖尿病模型小鼠的影响
7
作者 王旗 章乐生 +5 位作者 汪峰峰 汪敏 王毓洁 马晓荷 李清越 操治国 《热带病与寄生虫学》 CAS 2024年第4期239-243,共5页
目的观察日本血吸虫成虫排泄分泌抗原(adult-worm excretory-secretory protein,AES)和虫卵排泄分泌抗原(excretory-secretory antigen of eggs,ESA)对Ⅰ型糖尿病小鼠的影响,并初步探讨其作用机制。方法将24只雄性昆明鼠随机分为空白对... 目的观察日本血吸虫成虫排泄分泌抗原(adult-worm excretory-secretory protein,AES)和虫卵排泄分泌抗原(excretory-secretory antigen of eggs,ESA)对Ⅰ型糖尿病小鼠的影响,并初步探讨其作用机制。方法将24只雄性昆明鼠随机分为空白对照组、PBS组、AES组和ESA组,每组6只。空白对照组不作任何处理,后3组给予链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)溶液注射制备Ⅰ型糖尿病模型,建模成功后分别用PBS、AES、ESA腹部皮下多点免疫,1周免疫1次,持续免疫4周。免疫干预1周后开始检测小鼠血糖,持续检测4周;免疫干预4周后采用ELISA法测定小鼠血清中IL-4和IFN-γ水平变化,采用HE染色法检测小鼠胰腺组织病理变化。结果与PBS组相比,AES组和ESA组小鼠血糖水平从免疫后第2周起出现下降趋势,且ESA组小鼠血糖水平低于AES组,免疫后第2、3、4周小鼠血糖水平组间差异有统计学意义(F=1214.00、1055.00、683.64,P均<0.05)。各组小鼠血清IL-4和IFN-γ水平组间差异有统计学意义(F=146.84、21.11,P均<0.05),ESA组小鼠血清中IL-4水平[(61.45±6.14)pg/mL]高于PBS组[(21.96±3.98)pg/mL]和AES组[(49.31±3.19)pg/mL],IFN-γ水平[(129.48±36.75)pg/mL]低于PBS组[(316.43±66.38)pg/mL]和AES组[(212.09±70.89)pg/mL],差异均有统计学意义(P均<0.05)。PBS组小鼠的胰岛萎缩,数量减少,空泡样变性;ESA组小鼠有轻微胰岛萎缩;AES组介于PBS组和ESA组之间。结论日本血吸虫ESA对Ⅰ型糖尿病小鼠有一定保护作用,其机制可能是ESA刺激机体导致Th1反应抑制和Th2反应增强,表现为IL-4升高和IFN-γ下降,在一定程度上减轻小鼠胰腺组织的病理损伤。 展开更多
关键词 日本血吸虫 成虫排泄分泌抗原 虫卵排泄分泌抗原 Ⅰ型糖尿病
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旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原诱导的肠道免疫保护作用研究
8
作者 那皮沙·居热提 何灵 +1 位作者 艾尼瓦尔·吾买尔 白杰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期650-656,共7页
目的 研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原(Trichinella spiralis muscle larvae excretory-secretory, Ts-Es)诱导小鼠肠道保护性免疫能力以及免疫调节作用。方法 54只BALB/c小鼠随机分为3组,空白对照组、旋毛虫感染组(Ts)、旋毛虫Ts-Es抗原... 目的 研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原(Trichinella spiralis muscle larvae excretory-secretory, Ts-Es)诱导小鼠肠道保护性免疫能力以及免疫调节作用。方法 54只BALB/c小鼠随机分为3组,空白对照组、旋毛虫感染组(Ts)、旋毛虫Ts-Es抗原免疫组(Ts-Es)。空白组小鼠腹腔注射PBS;抗原免疫组小鼠腹腔注射0.1 mL的Ts-Es抗原与等量弗氏完全佐剂;旋毛虫感染组腹腔注射PBS和弗氏完全佐剂,每隔7 d注射1次,共3次,末次注射后7 d旋毛虫感染组和Ts-Es抗原免疫组用400条/mL旋毛虫感染性幼虫灌胃攻击感染。解剖取材,检查肠道成虫及肌肉幼虫减虫率,用HE染色法观察肠道病理变化,RT-qPCR法检测小肠中目的基因mRNA表达水平。结果 与旋毛虫感染组相比Ts-Es抗原免疫组成虫和肌幼虫减虫率分别为49%(t=8.109,P<0.05)和67%(t=8.090,P<0.05);与空白对照组相比旋毛虫感染组小肠T-bet(t=5.25,P<0.05)、GATA3(t=2.50,P<0.05)、RORγ-t(t=4.71,P<0.05)、IFN-γ(t=3.17,P<0.05)、IL-4(t=2.60,P<0.05)、IL-5(t=3.05,P<0.05)、IL-17A(t=4.88,P<0.05) mRNA表达量升高,Foxp3表达量没有统计学差异(t=1.55,P>0.05);与旋毛虫感染组相比Ts-Es抗原免疫组T-bet(t=4.23,P<0.05)、RORγ-t(t=4.30,P<0.05)、IFN-γ(t=3.02,P<0.05)、IL-17A(t=3.17,P<0.05) mRNA表达量下降;GATA3(t=3.96,P<0.05)、Foxp3(t=2.76,P<0.05)、IL-4(t=5.16,P<0.05)、IL-5(t=3.69,P<0.05)、IL-10(t=2.61,P<0.05) mRNA表达量升高;与空白对照组相比Ts-Es抗原免疫组GATA3(t=6.4,P<0.05)、Foxp3(t=4.32,P<0.05)、IL-10(t=2.6,P<0.05)、IL-4(t=7.26,P<0.05)、IL-5(t=6.3,P<0.05) mRNA表达量升高均有统计学差异;RORγ-t(t=0.41,P>0.05)、T-bet(t=1.02,P>0.05)、IFN-γ(t=0.09,P>0.05)、IL-17A(t=1.80,P>0.05) mRNA表达量无统计学差异;肠道HE染色结果显示,与旋毛虫感染组相比抗原免疫组炎症好转,肠道HE染色结果显示,与旋毛虫感染组相比抗原免疫组炎症好转。结论 Ts-Es抗原免疫小鼠后可诱发转录因子GATA3,Foxp3相关的混合型免疫应答,并抑制旋毛虫感染引起的T-bet、RORγ-t所介导的炎症型免疫反应,抑制炎型细胞因子的释放,诱导宿主产生抗旋毛虫感染的免疫保护效果。 展开更多
关键词 旋毛虫肌幼虫 排泄分泌抗原 肠道免疫 免疫保护作用
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猪囊尾蚴排泄分泌抗原LRRC15蛋白对仔猪树突状细胞活化的影响
9
作者 王怡 李丽竹 +1 位作者 肖世玉 周必英 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期675-681,共7页
目的 探讨猪囊尾蚴排泄分泌抗原(Excretory secretory antigen, ESA)富含亮氨酸重复序列结构域(Leucine-rich repeat containing 15, LRRC15)蛋白对仔猪树突状细胞(Dendritic cell, DC)成熟活化的影响。方法 收集正常仔猪DC体外诱导、培... 目的 探讨猪囊尾蚴排泄分泌抗原(Excretory secretory antigen, ESA)富含亮氨酸重复序列结构域(Leucine-rich repeat containing 15, LRRC15)蛋白对仔猪树突状细胞(Dendritic cell, DC)成熟活化的影响。方法 收集正常仔猪DC体外诱导、培养,获得成熟与未成熟DC(immature DC, imDC)。在正常仔猪未成熟DC中,分别加入LRRC15蛋白、ESA刺激,将LRRC15组作为实验组;同时建立ESA对照组、LPS阳性对照组、LRRC15+LPS阳性对照组、LPS+ESA阳性对照组和培养基阴性对照组。流式细胞术检测DC表面标志物MHC-Ⅱ、CD80、CD86的表达量;ELISA检测DC细胞培养上清TNF-α、IL-6、IL-10、IL-12的分泌水平。结果 与未刺激DC组相比,LRRC15蛋白组诱导DC表面标志物CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达均增加。在LPS存在情况下,LRRC15蛋白也能诱导CD80、CD86、MHC-Ⅱ分子上调;ELISA检测结果显示,与1640培养基组、LPS组和ESA组相比,LRRC15蛋白组均诱导IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α分泌降低,LRRC15蛋白组与1640培养基组相比IL-6(t=7.529,P<0.05),IL-10(t=2.780,P<0.05),IL-12(t=4.673,P<0.05),TNF-α(t=2.894,P<0.05);LRRC15蛋白组与LPS组相比IL-6(t=26.663,P<0.05),IL-10(t=12.038,P<0.05),IL-12(t=27.594,P<0.05),TNF-α(t=29.540,P<0.05);LRRC15蛋白组与ESA组相比IL-6(t=6.343,P<0.05),IL-10(t=2.579,P<0.05),IL-12(t=8.102,P<0.05),TNF-α(t=3.890,P<0.05)。ESA组与1640培养基组相比能诱导IL-12分泌(t=3.430,P<0.05),其他细胞分子分泌水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 LRRC15蛋白能诱导DC成熟活化,并抑制DC相关细胞因子的分泌,但能否通过其他途径诱导Th细胞分化还需进一步分析。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 排泄分泌抗原 LRRC15 树突状细胞
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大片吸虫分泌排泄抗原的分析 被引量：11
10
作者 黄维义 张为宇 田锷 《广西农业大学学报》 CSCD 1997年第2期120-124,共5页
取广西牛源大片吸虫成虫制备出分泌排泄（ＥＳ）抗原，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，考马斯亮蓝染色显出７条蛋白带。免疫印迹试验（ＥＩＴＢ）测出其主要特异性免疫成分分子量为３６．３，２８．５及２５．５ｋＤａ，其中２８．５与２５．... 取广西牛源大片吸虫成虫制备出分泌排泄（ＥＳ）抗原，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，考马斯亮蓝染色显出７条蛋白带。免疫印迹试验（ＥＩＴＢ）测出其主要特异性免疫成分分子量为３６．３，２８．５及２５．５ｋＤａ，其中２８．５与２５．５ｋＤａ与法国肝片吸虫ＥＳ的部分抗原成分相同。两种片形吸虫与抗血清可以交叉使用无特异性，但与日本血吸虫抗原及抗血清均无交叉反应，人工感染大片吸虫２周后的兔血清即能识别此抗原。ＥＳ抗原提取方法简便，特异性好，敏感性高，可用于片形吸虫病免疫诊断。 展开更多
关键词 大片吸虫 分泌排泄抗原 抗原 免疫诊断 牛病
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华支睾吸虫分泌/排泄抗原致大鼠肝纤维化 被引量：10
11
作者 胡凤玉 胡旭初 +2 位作者 马长玲 徐劲 余新炳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期393-396,共4页
目的以大鼠为对象,初步探讨华支睾吸虫成虫分泌/排泄抗原(CsESAs)在华支睾吸虫致肝纤维化过程中的作用和可能机制。方法无菌培养华支睾吸虫成虫,收集CsESAs;腹腔注射CsESAs,Masson染色观察CsESAs对大鼠肝脏胶原纤维增生的影响,HE染色和... 目的以大鼠为对象,初步探讨华支睾吸虫成虫分泌/排泄抗原(CsESAs)在华支睾吸虫致肝纤维化过程中的作用和可能机制。方法无菌培养华支睾吸虫成虫,收集CsESAs;腹腔注射CsESAs,Masson染色观察CsESAs对大鼠肝脏胶原纤维增生的影响,HE染色和组织免疫荧光法检测α-SMA(α-smooth muscle actin)的表达以观察CsESAs对大鼠肝星状细胞增生和活化的影响;ELISA法检测实验动物血清中抗CsESAs抗体滴度以探讨抗原-抗体复合物的致病作用。结果腹腔注射CsESAs,大鼠肝脏表现出明显的纤维化、肝星状细胞增生和活化,但大鼠肝纤维化程度与注射的CsESAs量有关而与大鼠血清中抗CsESAs抗体存在量无关。结论CsESAs可以导致肝星状细胞活化和肝纤维化的发生,但抗原-抗体复合物不是CsESAs引起肝星状细胞活化的主要途径。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 分泌/排泄抗原 肝纤维化 肝星状细胞
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旋毛虫排泄分泌抗原p49基因的克隆 被引量：14
12
作者 宋思扬 郑忠辉 +3 位作者 黄耀坚 张伟光 蔡海松 苏文金 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期117-120,共4页
应用ＤＮＡ重组技术将编码旋毛虫肌幼虫４９ＫＤａ抗原的基因克隆于大肠杆菌中．设计特异的ＰＣＲ引物，用ＰＴ－ＰＣＲ技术直接从旋毛虫肌幼虫总ＲＮＡ中反转录并扩增出约１．１Ｋｂ的靶ＤＮＡ．用ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ酶解后将其克... 应用ＤＮＡ重组技术将编码旋毛虫肌幼虫４９ＫＤａ抗原的基因克隆于大肠杆菌中．设计特异的ＰＣＲ引物，用ＰＴ－ＰＣＲ技术直接从旋毛虫肌幼虫总ＲＮＡ中反转录并扩增出约１．１Ｋｂ的靶ＤＮＡ．用ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ酶解后将其克隆到质粒载体ｐＵＣ１９中，用Ｘ－ｇａｌ培养基筛选重组子．该重组子经相同的核酸内切酶水解获得约２．７Ｋｂ和１．１Ｋｂ两个片段，分别与ｐＵＣ１９和目的基因的大小相同，目的基因经序列分析并与文献报道的序列比较发现具有９７．８％的同源性． 展开更多
关键词 旋毛虫 p49基因 RT-PCR 克隆 排泄-分泌抗原
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猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B1蛋白原核表达条件的优化 被引量：13
13
作者 王秋霞 张美英 +5 位作者 张改平 王选年 宁长申 鲁琨 张龙现 菅复春 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期59-63,共5页
研究了培养基、温度、诱导时间I、PTG和氨苄青霉素终浓度以及诱导前后温度变化等不同条件对重组菌菌体生长和融合蛋白表达量的影响,以期获得猪囊尾蚴排泄分泌抗原(ES Ag)Ts8B1蛋白基因在大肠杆菌中的最大表达量。结果显示,使用TB培养基... 研究了培养基、温度、诱导时间I、PTG和氨苄青霉素终浓度以及诱导前后温度变化等不同条件对重组菌菌体生长和融合蛋白表达量的影响,以期获得猪囊尾蚴排泄分泌抗原(ES Ag)Ts8B1蛋白基因在大肠杆菌中的最大表达量。结果显示,使用TB培养基于37℃培养3 h后,采用终浓度为0.2mmol/L的IPTG和200mmol/L的氨苄青霉素在32℃过夜诱导培养,pGEX-6p-1/Ts8B1融合蛋白表达量最大,表达的融合蛋白约占菌体总蛋白的33%。SDS-PAGE表明pGEX-6p-1/Ts8B1融合蛋白大小约为33 kDa,与预计的分子量大小一致,Western blot分析表明其能与猪囊尾蚴多克隆抗体起特异性反应,并获得最大产量的融合蛋白。为研究其在猪囊尾蚴病检测中的应用价值奠定了基础。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 排泄分泌抗原 Ts8B1蛋白 原核表达
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旋毛虫肌幼虫可溶性抗原、排泄分泌抗原的电泳分析 被引量：5
14
作者 朱兴全 窦兰清 +2 位作者 史晓红 石磊 牛炳亨 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期168-173,共6页
本文报道了应用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦（ＩＥＦ）电泳及二维电泳（ＩＥＦ／ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对旋毛虫肌动虫排泄分泌（ＥＳ）抗原和肌幼虫可溶性抗原的分析结果。肌幼虫Ｅ... 本文报道了应用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦（ＩＥＦ）电泳及二维电泳（ＩＥＦ／ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对旋毛虫肌动虫排泄分泌（ＥＳ）抗原和肌幼虫可溶性抗原的分析结果。肌幼虫ＥＳ抗原经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后用考马斯亮蓝染色蛋白质，结果显示１６条蛋白带，分子量范围２１～８０ＫＤ，其中主带９条。ＩＥＦ电泳后分别用ＰＡＳ染多糖、考马斯亮蓝Ｒ－２５０染蛋白质、Ｎｉｌｅ＇ｓ蓝染脂、醋酸ａ－萘酯／坚固蓝染酪酶同工酶，结果肌幼虫ＥＳ抗原分别显示１６，２６、７及０条带；肌幼虫可溶性抗原分别显示２１、３８、４及１１条带。二维电泳后用考马斯亮蓝Ｇ－２５０染色多肤斑点，结果ＥＳ抗原显示多肽斑点６１个；肌幼虫可溶抗原显示１２２个多肽斑点。 展开更多
关键词 旋毛虫 排泄分泌抗原 肌幼虫 可溶性 抗原 电泳
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弓形虫排泄-分泌抗原鼻内免疫小鼠诱导的脾与肠相关淋巴组织细胞免疫效应及动态变化 被引量：8
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作者 刘娟娟 殷国荣 +2 位作者 张建红 孟晓丽 陈洁 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第8期580-583,共4页
目的观察弓形虫与Vero细胞共培养提取的排泄-分泌抗原(ESA)鼻内免疫BALB/c小鼠诱导的脾及肠相关淋巴组织(GALT)细胞免疫效应及动态变化。方法84只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组以ESA(20μg/只)为抗原,对照组用未接种弓形虫... 目的观察弓形虫与Vero细胞共培养提取的排泄-分泌抗原(ESA)鼻内免疫BALB/c小鼠诱导的脾及肠相关淋巴组织(GALT)细胞免疫效应及动态变化。方法84只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组以ESA(20μg/只)为抗原,对照组用未接种弓形虫的细胞培养上清液(20μl/只),鼻内免疫2次,间隔2周。末次滴鼻后第1、2、3、4、5、6、7周处死小鼠,分离脾、派伊尔结(PP)及小肠上皮内淋巴细胞(IEL)并计数。结果实验组小鼠脾淋巴细胞第3周达高峰,第1、2、3周明显高于对照组;PP淋巴细胞明显增生,第3周达高峰,第1、2、3、4、5周显著高于对照组;IEL第2周增生达高峰,第1～3周显著高于对照组。结论弓形虫ESA鼻内免疫BALB/c小鼠可有效诱导不同黏膜部位及系统特异性的细胞免疫应答,且可持续较长时间。 展开更多
关键词 弓形虫 排泄-分泌抗原 鼻内免疫 细胞免疫应答
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华支睾吸虫分泌-排泄抗原在血清学诊断中的意义 被引量：9
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作者 崔香淑 金元哲 李顺玉 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1857-1858,共2页
目的评价华支睾吸虫分泌-排泄抗原在华支睾吸虫病血清学诊断中的价值,应用ELISA技术对华支睾吸虫的成虫粗抗原和分泌-排泄抗原的敏感性和特异性进行比较。方法制备华支睾吸虫的粗抗原和分泌-排泄抗原,以ELISA方法对华支睾吸虫感染患者50... 目的评价华支睾吸虫分泌-排泄抗原在华支睾吸虫病血清学诊断中的价值,应用ELISA技术对华支睾吸虫的成虫粗抗原和分泌-排泄抗原的敏感性和特异性进行比较。方法制备华支睾吸虫的粗抗原和分泌-排泄抗原,以ELISA方法对华支睾吸虫感染患者509人、麝猫后睾吸虫感染者47人、卫氏并殖吸虫感染者20人、日本血吸虫感染者14人以及健康人血清163人,检测血清特异性IgG。结果比较华支睾吸虫分泌-排泄抗原的诊断的敏感性高于粗抗原,分泌-排泄抗原的特异性反应明显高于粗抗原。结论分泌-排泄抗原用于诊断感染华支睾吸虫病有较高的敏感性和特异性,是一种有效的诊断抗原。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 分泌-排泄抗原 酶连免疫吸附法 诊断
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旋毛虫排泄分泌抗原的研究进展 被引量：31
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作者 王中全 崔晶 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期155-158,共4页
关键词 旋毛虫病 旋毛虫 排泄分泌抗原 研究
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旋毛虫排泄分泌抗原的成分及应用价值 被引量：5
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作者 赵光辉 张龙现 +5 位作者 王选年 张改平 石团员 朱惠丽 宋海涛 宁长申 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第5期395-398,共4页
旋毛虫病是一种重要的人畜共患寄生虫病,长期以来用于免疫诊断和免疫预防的旋毛虫抗原,尤其是排泄分泌(ES)抗原引起了国内外众多学者的关注。本文综述了近年来旋毛虫ES抗原有效成分的研究及其在免疫诊断和免疫预防方面的应用价值,并且... 旋毛虫病是一种重要的人畜共患寄生虫病,长期以来用于免疫诊断和免疫预防的旋毛虫抗原,尤其是排泄分泌(ES)抗原引起了国内外众多学者的关注。本文综述了近年来旋毛虫ES抗原有效成分的研究及其在免疫诊断和免疫预防方面的应用价值,并且提出应用DNA重组技术在体外大量表达ES抗原和利用多肽合成技术在体外大量合成抗原用于免疫诊断和免疫预防将是今后的研究方向。 展开更多
关键词 旋毛虫 排泄分泌抗原 免疫诊断 免疫预防 综述
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斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot-ELISA诊断肺吸虫病研究 被引量：9
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作者 王光西 毛樱逾 +1 位作者 张跃辉 杨兴友 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第3期68-69,共2页
目的　探索斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原的免疫诊断价值。方法　采用斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot-ELISA检测 2 8例斯氏狸殖吸虫病人血清、6份日本血吸虫病人血清、4份华支睾吸虫病人血清、2 0份健康人血清中抗斯氏狸殖吸虫幼虫排... 目的　探索斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原的免疫诊断价值。方法　采用斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot-ELISA检测 2 8例斯氏狸殖吸虫病人血清、6份日本血吸虫病人血清、4份华支睾吸虫病人血清、2 0份健康人血清中抗斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原的抗体IgG。结果　斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原与 2 8例斯氏狸殖吸虫病人血清均呈阳性反应 ,与其它 2种吸虫病和健康人血清未发生反应。结论　斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot -ELISA为诊断肺吸虫病敏感。 展开更多
关键词 斯氏狸殖吸虫 排泄分泌抗原 DOT-ELISA 肺吸出病 免疫诊断
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弓形虫排泄-分泌抗原鼻内免疫小鼠诱导体液免疫应答的动态观察 被引量：6
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作者 殷国荣 周永安 +2 位作者 刘娟娟 孟晓丽 刘红丽 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2007年第3期135-140,共6页
观察从Vero细胞与弓形虫速殖子共培养液分离的排泄-分泌抗原（Excreted-secreted antigens，ESA）鼻内免疫小鼠诱导的体液免疫应答及动态变化，为弓形虫复合黏膜疫苗候选抗原提供实验依据。BALB／c小鼠84只随机分为实验组和对照组，实... 观察从Vero细胞与弓形虫速殖子共培养液分离的排泄-分泌抗原（Excreted-secreted antigens，ESA）鼻内免疫小鼠诱导的体液免疫应答及动态变化，为弓形虫复合黏膜疫苗候选抗原提供实验依据。BALB／c小鼠84只随机分为实验组和对照组，实验组以ESA为抗原（20μg／只），对照组用未接种弓形虫的细胞培养上清液20μL（μg／只），滴鼻免疫2次（间隔2周）。分别于2次免疫后第1、2、3、4、5、6、7周颈椎脱位处死小鼠。ELISA法测定血清IgG、IgA，粪便sIgA及肠液sIgA。结果表明，免疫组小鼠血清IgG、IgA和粪便sIgA及肠液sIgA均增高。血清IgG、IgA水平分别第5周、第4周达高峰，免疫后第1～7周（P〈0．05）显著高于对照组。粪便sIgA第4周即达高峰，之后逐渐降低，至第7周仍（P〈0．05）显著高于对照组。肠液sIgA第4周达高峰，第2、3、4周（P〈0．05）高于对照组。可见，弓形虫ESA鼻内免疫BALB／c小鼠可有效诱导体液免疫应答，特异性抗体生成明显且可持续较长时间。 展开更多
关键词 弓形虫 排泄-分泌抗原 鼻内免疫 黏膜免疫 IgA
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