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中性内切型纤维素酶在毕赤酵母中高水平表达的研究 被引量：21
1
作者 丁少军 宋美静 +3 位作者 杨红军 邢增涛 周蕊 曹杰 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期71-76,共6页
中性内切型纤维素酶在纺织及造纸工业具有重要的应用,为了进一步提高从我国草菇中克隆的一种新的中性内切型纤维素酶(EG1)在Pichiapastoris中的表达水平,我们进行了提高基因拷贝数及高密度发酵等多种手段实现其高水平表达的研究。在前... 中性内切型纤维素酶在纺织及造纸工业具有重要的应用,为了进一步提高从我国草菇中克隆的一种新的中性内切型纤维素酶(EG1)在Pichiapastoris中的表达水平,我们进行了提高基因拷贝数及高密度发酵等多种手段实现其高水平表达的研究。在前期研究的基础上,利用对已整合eg1的重组子再转化的方法,从含有2000μgLZeocin的YPDSZ平板上筛选到高抗Zeocin转化子,在摇瓶培养条件下,该转化子表达量比原来提高了3.8倍,在pH4～8条件下均有稳定表达,接种量(OD600=5.0)表达水平最好,提高甲醇的诱导浓度对表达有显著的促进作用。用3.2L发酵罐进行了高密度发酵,甲醇诱导95.5h后达到最高值,比摇瓶培养再提高了6.4倍,因此利用高抗Zeocin转化子及高密度发酵的手段,使EG1的表达水平提高了34倍,蛋白表达量达8.80mgmL,EG1酶活达到543.36IUmL,实现了中性内切纤维素酶的高水平表达,本研究将大大促进建立我国纺织用纤维素酶大规模高效生产技术。 展开更多
关键词 中性内切型纤维素酶 毕赤酵母 高水平表达
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不同碳源条件下草菇内切型纤维素酶基因(eg1)转录表达的分析 被引量：8
2
作者 丁少军 宋美静 +1 位作者 池杏微 BUSWELL JA 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期419-422,共4页
利用Northernblot方法分析了不同碳源条件下草菇切型纤维素酶基因(eg1)的表达.结果发现,在含有纤维素的液体培养基中生长10d,eg1在草菇菌丝中有高效表达;纤维二糖、α-乳糖、β-乳糖,也能诱导eg1的表达,但和纤维素相比,eg1的表达量相对... 利用Northernblot方法分析了不同碳源条件下草菇切型纤维素酶基因(eg1)的表达.结果发现,在含有纤维素的液体培养基中生长10d,eg1在草菇菌丝中有高效表达;纤维二糖、α-乳糖、β-乳糖,也能诱导eg1的表达,但和纤维素相比,eg1的表达量相对较低,并且它们的诱导效应在加入这类糖12h后迅速减弱;槐糖和龙胆二糖的诱导作用非常弱.在天然稻草为基质的固体栽培料生长时,草菇eg1的表达和草菇菌丝生长与出菇相对应,在菌丝生长期(d8)可见eg1的表达,d12时菌丝已长满,表达减弱,在出菇及菇体的分化及增大期,eg1的表达量逐渐增强,在成熟期达到最高水平;表明在草菇菇体发育中需要更多碳源及能源的补充,eg1在这方面起着非常重要的作用. 展开更多
关键词 草菇 内切型纤维素酶基因 转录表达
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酵母菌C10产内切型菊粉酶发酵条件研究 被引量：5
3
作者 王艳 金征宇 +2 位作者 徐学明 王伟 许继春 《生物技术》 CAS CSCD 2001年第6期25-27,共3页
在多个单因素实验的基础上 ,采用正交试验方法 ,通过对筛选及诱变选育后得到的产内切型菊粉酶较高酵母菌株C10进行发酵工艺条件实验 ,得到一个比较优化的发酵工艺条件为 :pH5 5 ,温度30℃ ,菊芋干粉 5 % ,NH4 H2 PO4 0 5 %。不同金属... 在多个单因素实验的基础上 ,采用正交试验方法 ,通过对筛选及诱变选育后得到的产内切型菊粉酶较高酵母菌株C10进行发酵工艺条件实验 ,得到一个比较优化的发酵工艺条件为 :pH5 5 ,温度30℃ ,菊芋干粉 5 % ,NH4 H2 PO4 0 5 %。不同金属离子及不同诱导物对酶合成的影响表明 ,Mn2 +激活作用最显著 ,而Zn2 +、Cu2 +、Fe2 +有抑制作用 ,菊芋干粉为合成菊粉酶的最佳诱导物。 展开更多
关键词 酵母菌C10 正交试验 激活 诱导 内切型葡粉酶 发酵条件
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米曲霉(Aspergillus oryzae)沪酿3.042内切型纤维素酶的分离纯化与鉴定 被引量：2
4
作者 武金霞 常淑英 +2 位作者 孙鹏 张永阔 张贺迎 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2012年第1期68-74,共7页
为了解米曲霉纤维素酶在物料分解过程中的作用,从米曲霉沪酿3.042成曲中提取粗酶液,利用DNS法分析了粗酶液中外切酶、内切酶及β-葡萄糖苷酶的活力.用刚果红染色法确定了沪酿3.042成曲粗酶液中含有4种内切型纤维素酶,分别称为Cx酶Ⅰ,Cx... 为了解米曲霉纤维素酶在物料分解过程中的作用,从米曲霉沪酿3.042成曲中提取粗酶液,利用DNS法分析了粗酶液中外切酶、内切酶及β-葡萄糖苷酶的活力.用刚果红染色法确定了沪酿3.042成曲粗酶液中含有4种内切型纤维素酶,分别称为Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ和Cx酶Ⅳ.经DEAE-Cellulose-52离子交换层析,0.15,0.20,0.25,0.30mol/L NaCl洗脱峰均测得内切型纤维素酶活性,制备电泳纯化得到4个内切型纤维素酶组分,SDS-PAGE结果显示,Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ为单体酶,分子质量分别为31 800,34 000,26 000u,Cx酶Ⅳ含有4个亚基,分子质量分别为14 000,23 600,26 000,33 500u.粗酶液中内切型纤维素酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为4.0. 展开更多
关键词 米曲霉 内切型纤维素酶 刚果红染色 离子交换层析 制备电泳
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一种新型XT切型晶体温度补偿电路的设计 被引量：2
5
作者 董自健 乔国垒 《电子科技》 2008年第11期18-19,34,共3页
XT切型晶体振荡器常用作精密计时的频率源,其频率精度-温度特性是典型的抛物线形状。低温区的晶体频率精度会随着温度变低而变差;而高温区的晶体频率精度会随着温度变高而变差。文中介绍了一种具有双斜率温度系数的温度补偿电路,以补偿... XT切型晶体振荡器常用作精密计时的频率源,其频率精度-温度特性是典型的抛物线形状。低温区的晶体频率精度会随着温度变低而变差;而高温区的晶体频率精度会随着温度变高而变差。文中介绍了一种具有双斜率温度系数的温度补偿电路,以补偿这种抛物线形状的温度特性。设计的温度补偿电路简单、体积小、功耗低、易于集成。 展开更多
关键词 晶体 XT切型 温度补偿 抛物线
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利用原生质体再生技术选育内切型菊粉酶高产菌株 被引量：1
6
作者 曹泽虹 董玉玮 王春艳 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2016年第8期97-105,共9页
利用原生质体制备与再生技术选育内切型菊粉酶高产菌株,以I200913作为出发菌株(酶活为0.413 u/m L),研究了在不同酶配比酶解液、不同酶解温度、不同酶解时间的条件下,对原生质体制备、再生以及内切型菊粉酶酶活的影响。研究结果表明,在... 利用原生质体制备与再生技术选育内切型菊粉酶高产菌株,以I200913作为出发菌株(酶活为0.413 u/m L),研究了在不同酶配比酶解液、不同酶解温度、不同酶解时间的条件下,对原生质体制备、再生以及内切型菊粉酶酶活的影响。研究结果表明,在酶配比为:纤维素酶0.7%+蜗牛酶0.2%+溶菌酶0.1%=1%,酶解温度为30℃,酶解时间为2.5h条件下,原生质体形成率最高,为22.32%。在酶配比为:纤维素酶0.7%+蜗牛酶0.2%+溶菌酶0.1%=1%,酶解温度为30℃,酶解时间为2.5h条件下,原生质体再生率最高,为16.02%。在酶配比为:纤维素酶0.7%+蜗牛酶0.2%+溶菌酶0.1%=1%,酶解温度为30℃,酶解时间为2.5h条件下,原生质体再生菌株内切型菊粉酶酶活最高为0.598 u/m L,比出发菌株提高了28%。 展开更多
关键词 黑曲霉 原生质体 内切型菊粉酶 酶活
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平切型和波浪型牙刷刷牙效果的临床对比试验 被引量：2
7
作者 李刚 戴娟 +2 位作者 王成龙 郭玲 唐荣银 《口腔材料器械杂志》 2000年第1期14-15,22,共3页
目的　对平切型和波浪型牙刷的刷牙效果作一比较。方法　将实验对象分成两组 ,分别使用平切型和波浪型牙刷 ,刷牙前后分别各做一次菌斑检查。结果　统计分析结果显示使用波浪型牙刷清除菌斑效果较平切型牙刷略为有效 ,相差率为 5 .2 6 ... 目的　对平切型和波浪型牙刷的刷牙效果作一比较。方法　将实验对象分成两组 ,分别使用平切型和波浪型牙刷 ,刷牙前后分别各做一次菌斑检查。结果　统计分析结果显示使用波浪型牙刷清除菌斑效果较平切型牙刷略为有效 ,相差率为 5 .2 6 % ,主要表现在牙齿的唇颊面 (P <0 .0 1)和近中牙面的 (P<0 .0 1)清洁效果相差显著 ,而在牙齿的远中牙面和舌腭牙面的清洁效果两者没有明显差异 (P <0 .0 5 )。结论　波浪型牙刷与平切型牙刷相比较更易清除唇颊面和近中牙面菌斑。 展开更多
关键词 牙刷 牙菌斑 平切型 波浪型
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内切型菊粉酶高活力菌株的筛选 被引量：11
8
作者 陈雄 《湖北农业科学》 北大核心 2003年第3期93-94,共2页
利用透明圈初筛、摇瓶复筛 ,得到了一株产内切型菊粉酶的高活力菌株 ,活力可达到 30U·ml-1,对 2 %的菊粉溶液的活性 (I)和 2 %蔗糖溶液的活性 (S)之比 ,即I/S值达到 16 5 ,表现为明显的内切酶活性 ,经鉴定该菌株为黑曲霉。
关键词 内切型 菊粉酶 高活力菌株 菌株筛选 黑曲霉 多聚甲糖
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LGS晶体优化切型声表面波特性计算 被引量：2
9
作者 杨虹 黄文奇 《北京信息科技大学学报（自然科学版）》 2011年第5期16-18,24,共4页
针对La3Ga5SiO14(LGS)压电晶体的特性,利用2种边界条件下克里斯托夫方程,计算了LGS晶体典型欧拉角为切型的相速度、能流角、各项异性因子,机电耦合系数和频率温度系数等声表面波(SAW)性质。计算结果表明,对欧拉角为(90.0°,20.0... 针对La3Ga5SiO14(LGS)压电晶体的特性,利用2种边界条件下克里斯托夫方程,计算了LGS晶体典型欧拉角为切型的相速度、能流角、各项异性因子,机电耦合系数和频率温度系数等声表面波(SAW)性质。计算结果表明,对欧拉角为(90.0°,20.0°,122.2°)和(90.0°,17.5°,121.9°)等切型,LGS晶体同时具有低能流角,低温度频率系数和适中的机电耦合系数,可用于高温环境下声表面波器件制作。 展开更多
关键词 LGS晶体 声表面波 切型
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气切型面罩雾化吸入器的改进 被引量：2
10
作者 王孟云 高建珍 《当代护士（中旬刊）》 2016年第12期85-85,共1页
目前一次性使用气切型面罩雾化吸入器（见图1）被广泛应用于临床气管切开患者，特别是用于气管切开患者持续氧气雾化吸入进行气道湿化，可有效减少气管切开并发症，减轻肺部感染。但现有的一次性气切型面罩雾化吸入器，向雾化杯内加湿... 目前一次性使用气切型面罩雾化吸入器（见图1）被广泛应用于临床气管切开患者，特别是用于气管切开患者持续氧气雾化吸入进行气道湿化，可有效减少气管切开并发症，减轻肺部感染。但现有的一次性气切型面罩雾化吸入器，向雾化杯内加湿化液必须要把雾化杯与雾化盖的接口拧开，才能进行添加湿化液，每次添加量最多不超过12ml，如果按每24h添加湿化液250ml计算，每天要拧开雾化盖20次左右。这不仅会增加护士工作量，而且容易造成污染，同时长期频繁地拧开雾化杯， 展开更多
关键词 气管切开 气切型面罩雾化器 改良
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用于振动能收集器的弛豫铁电单晶切型研究
11
作者 史翔 王伟 +1 位作者 杜慧玲 安群力 《压电与声光》 CSCD 北大核心 2017年第4期557-560,564,共5页
弛豫铁电单晶具有优越的压电性能和良好的温度适应性,在压电器件领域具有良好的应用前景。但是由于其复杂的工程化畴组态和各向异性,在器件设计过程中必须要考虑切型问题。该文从物联网电源的需求出发,以弛豫铁电单晶应用于振动能收集... 弛豫铁电单晶具有优越的压电性能和良好的温度适应性,在压电器件领域具有良好的应用前景。但是由于其复杂的工程化畴组态和各向异性,在器件设计过程中必须要考虑切型问题。该文从物联网电源的需求出发,以弛豫铁电单晶应用于振动能收集器为例,构造了以输出电压为考核目标的优化切型判据;利用基于欧拉旋转定理的张量计算方法计算分析了沿其赝立方结构的[001]、[011]和[111]极化的铌镁酸铅-钛酸铅单晶适用于振动能收集器的优化切型;分析了3种切型对切角误差的敏感性;最后给出了优化切型下的相关物理性能张量。 展开更多
关键词 弛豫铁电单晶 振动能收集器 切型 工程化畴
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赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)内切型纤维素酶组分鉴定及纯化
12
作者 武金霞 张永阔 田志鹏 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2011年第1期63-68,共6页
从赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)匀浆液中提取出粗酶液,利用DNS法分析粗酶液中内切型纤维素酶(也称Cx酶)的活力.用刚果红染色法确定了赤子爱胜蚓含有3种内切型纤维素酶,将其分别称作Cx酶Ⅰ、Cx酶Ⅱ和Cx酶Ⅲ.经DEAE-Cellulose-52离子交换... 从赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)匀浆液中提取出粗酶液,利用DNS法分析粗酶液中内切型纤维素酶(也称Cx酶)的活力.用刚果红染色法确定了赤子爱胜蚓含有3种内切型纤维素酶,将其分别称作Cx酶Ⅰ、Cx酶Ⅱ和Cx酶Ⅲ.经DEAE-Cellulose-52离子交换层析分离内切型纤维素酶,得到0.15～0.20mol/L NaCl洗脱峰含有活性组分.以制备电泳得到了Cx酶Ⅰ和Cx酶Ⅱ,并用SDS-PAGE测定它们的分子质量分别为33 400u和28 800u.用DNS法测得在粗酶液中内切型纤维素酶的最适反应温度为40℃,最适反应pH值为7.0. 展开更多
关键词 赤子爱胜蚓 内切型纤维素酶 离子交换层析 刚果红染色
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刀切型层叠实体制造割缝形态尺寸的试验研究
13
作者 余国兴 丁玉成 李涤尘 《制造技术与机床》 CSCD 北大核心 2004年第1期60-63,共4页
刀切型层叠实体制造具有不产生烟雾、控制简单、综合成本低的优点。从理论上分析了刀具结构对割缝的影响 ,采用微观测量法对自行开发的刀切型层叠实体制造系统每个制作周期中割缝形态与尺寸变化进行了试验研究。研究表明 ,为消除切割变... 刀切型层叠实体制造具有不产生烟雾、控制简单、综合成本低的优点。从理论上分析了刀具结构对割缝的影响 ,采用微观测量法对自行开发的刀切型层叠实体制造系统每个制作周期中割缝形态与尺寸变化进行了试验研究。研究表明 ,为消除切割变形而增加的碾压工序能使割缝尺寸减小 ;割缝尺寸是切割深度的线性函数。利用研究结果进行的计算表明 ,在正常切割深度范围内因割缝引起的尺寸误差不超过 3μm ,加工表面粗糙度 (Ra)不超过 6 μm。 展开更多
关键词 快速成形 层叠实体制造 刀切型 割缝形态 割缝尺寸 试验研究
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{110}_(cub)切型Pb(Mg_(1/3)Nb_(2/3))O_3-PbTiO_3单晶铁电相变的研究
14
作者 郭益平 罗豪甦 +2 位作者 曹虎 徐海清 殷之文 《无机材料学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第1期220-224,共5页
测试了PMNT68/32{110}cub切型单晶的介电、压电性能和电滞回线,发现单晶铁电性能与所施加的极化电场及单晶中PbTiO3含量的变化密切相关.研究结果表明,相结构的变化是引起铁电性能变化的主要原因,即在<110>取向施加电场诱导出来的... 测试了PMNT68/32{110}cub切型单晶的介电、压电性能和电滞回线,发现单晶铁电性能与所施加的极化电场及单晶中PbTiO3含量的变化密切相关.研究结果表明,相结构的变化是引起铁电性能变化的主要原因,即在<110>取向施加电场诱导出来的正交相是本征亚稳的,它的稳定性不仅取决于所施加的极化电场大小,而且与单晶中PbTiO3含量的变化密切相关. 展开更多
关键词 {110]cub切型Pb(Mg1/3Nb2/3)O3-PbTiO3单晶 PMNT单晶 铁电相变 铁电体 压电性能 介电性能
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低能离子束诱变选育高产内切型菊粉酶菌株
15
作者 曹泽虹 董玉玮 +3 位作者 王陶 高兆建 袁航 余立祥 《中国食品添加剂》 北大核心 2017年第12期86-91,共6页
从18株黑曲霉菌株中,筛选得到产内切型菊粉酶酶活最高的一株菌株,编号为08013,酶活为3.01U/mL。用低能离子束N^+对选育出的黑曲霉菌株进行诱变研究,当N^+注入能量为10Kev,注入靶室的真空度为10^(-3)Pa,脉冲剂量为10^(14) N^+/cm^2s,N^+... 从18株黑曲霉菌株中,筛选得到产内切型菊粉酶酶活最高的一株菌株,编号为08013,酶活为3.01U/mL。用低能离子束N^+对选育出的黑曲霉菌株进行诱变研究,当N^+注入能量为10Kev,注入靶室的真空度为10^(-3)Pa,脉冲剂量为10^(14) N^+/cm^2s,N^+注入剂量为60×2.6×10^(13)N^+/cm^2时,筛选出一株内切型菊粉酶酶活最高的菌株,编号为08-DT-60-09,酶活为4.20 U/mL,比出发菌株的酶活提高了39.53%。 展开更多
关键词 内切型菊粉酶 黑曲霉 低能离子束 诱变
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酵母产内切型菊粉酶水解菊芋生产饲用低聚果糖的研究 被引量：3
16
作者 王艳 金征宇 +2 位作者 徐学明 许继春 王伟 《饲料工业》 北大核心 2001年第1期44-46,共3页
利用酵母所产内切型菊粉酶水解廉价菊芋 30min后，其饲用低聚果糖的最高含量达 42％，应用于饲料工业具有广阔的生产前景。
关键词 内切型菊粉酶 菊芋 饲用低聚果糖 水解
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内切型菊粉酶生产菌株的筛选及诱变选育 被引量：2
17
作者 王艳 金征宇 +1 位作者 徐学明 王伟 《生物技术》 CAS CSCD 2001年第1期26-28,共3页
采用透明圈法筛选得到了产菊粉酶的多株菌株，并得到了１株产内切型菊粉酶较高的隐球酵母属（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）菌株Ｌ１，以Ｌ１作为出发菌株经Ｃｏ６０诱变后，得到１株产内切型菊粉酶最好菌株Ｃ１０，其诱变后低聚果糖得率... 采用透明圈法筛选得到了产菊粉酶的多株菌株，并得到了１株产内切型菊粉酶较高的隐球酵母属（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）菌株Ｌ１，以Ｌ１作为出发菌株经Ｃｏ６０诱变后，得到１株产内切型菊粉酶最好菌株Ｃ１０，其诱变后低聚果糖得率比诱变前提高了５２．６％，酶活力提高了５１．９％。 展开更多
关键词 内切型菊粉酶 CO^60诱变 低聚果糖 酶活力 生产菌株 诱变选育
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ST切型石英膜片的应力分析 被引量：2
18
作者 舒茂盛 王生楠 何鹏举 《传感技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期430-432,共3页
通常石英膜片的应力分布是根据弹性力学薄板弯曲理论分析得到的,但所选模型及边界条件相对简单,不能满足实际工程的需要。文中的ST切型石英膜片的边界条件复杂,用弹性力学薄板弯曲理论是很难得出结果的,为此采用了有限元法对ST切型石英... 通常石英膜片的应力分布是根据弹性力学薄板弯曲理论分析得到的,但所选模型及边界条件相对简单,不能满足实际工程的需要。文中的ST切型石英膜片的边界条件复杂,用弹性力学薄板弯曲理论是很难得出结果的,为此采用了有限元法对ST切型石英膜片进行应力分析,并根据其应力分布规律,得出合理安放SAW(表面波)谐振器的位置。 展开更多
关键词 ST切型石英膜片 SAW压力传感器 应力分析 有限元法
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表面溅射FeGa薄膜的AT切型石英谐振磁场传感器 被引量：3
19
作者 张家泰 文玉梅 +2 位作者 鲍祥祥 李平 王遥 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第3期42-49,共8页
针对谐振传感器Q值低导致输出信号噪声水平高、传感分辨率低的问题,提出FeGa薄膜与AT切型石英晶片复合的高品质因数谐振磁场传感器。AT切型石英晶片受到交流电压激励以厚度剪切模态振动,FeGa薄膜在磁场中磁化而受到磁场作用力并通过层... 针对谐振传感器Q值低导致输出信号噪声水平高、传感分辨率低的问题,提出FeGa薄膜与AT切型石英晶片复合的高品质因数谐振磁场传感器。AT切型石英晶片受到交流电压激励以厚度剪切模态振动,FeGa薄膜在磁场中磁化而受到磁场作用力并通过层间耦合传递到石英晶片,由于石英晶片具有力频特性,其谐振频率因此会发生改变。此外,石英晶体低内损耗、高Q值的特性使得传感器具有很高的品质因数,可以实现稳定、低噪声的传感输出。实验结果显示:该谐振磁场传感灵敏度为0.2 Hz/Oe,品质因数达到46 000以上,功耗低于8μW,最大测量磁场可达1 200 Oe,具有较宽的磁场测量范围。该谐振磁场传感器在高信噪比输出信号、低功耗等方面均具有明显优势,且结构简单、易于加工。 展开更多
关键词 谐振磁场传感器 AT切型石英晶体 FeGa薄膜 高品质因数
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来自Yeosuana marina sp.JLT21内切型海藻酸裂解酶的异源表达及酶学表征 被引量：2
20
作者 常晴 束月蓉 +6 位作者 王文韬 蒋昊 延泉德 钱政 高雪纯 吴金鸿 张勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期123-131,共9页
褐藻寡糖有着丰富的生物学功能,酶法制备功能性褐藻寡糖具有重要实践应用价值。为发掘高活性及稳定性的褐藻寡糖制备酶,对浅海热液嗜热菌Yeosuana marina sp.JLT21中的海藻酸裂解酶YMA-1的基因在大肠杆菌中进行表达、纯化及酶活鉴定。... 褐藻寡糖有着丰富的生物学功能,酶法制备功能性褐藻寡糖具有重要实践应用价值。为发掘高活性及稳定性的褐藻寡糖制备酶,对浅海热液嗜热菌Yeosuana marina sp.JLT21中的海藻酸裂解酶YMA-1的基因在大肠杆菌中进行表达、纯化及酶活鉴定。结果发现YMA-1由306个氨基酸残基构成,是多糖裂解酶家族7(PL7)新成员;重组YMA-1酶的最适催化条件是55℃,pH 9.0,比活力1.3×10^(4) U/mg,Cu^(2+)可有效促进酶活;在37℃,pH 9.0条件下,该酶对海藻酸钠、聚甘露糖醛酸和聚古罗糖醛酸的比活力分别达到(5201.21±86.46)U/mg、(6399.73±253.12)U/mg和(3751.68±116.25)U/mg,酶解海藻酸钠终产物多为不饱和三糖和四糖,表现出内切双功能型海藻酸裂解酶活性。YMA-1酶作为PL7家族中较宽底物谱、高活性及稳定性的内切海藻酸裂解酶,在高效绿色生产功能性褐藻寡糖上有着潜在应用价值。 展开更多
关键词 内切型海藻酸裂解酶 重组表达 酶学性质 Yeosuana marina sp.JLT21
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