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流式分选仪的创新调试及在初始T细胞纯化中的应用
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作者 万雅娟 王瑞 +2 位作者 张松 周颖 龙加福 《实验科学与技术》 2024年第2期8-13,共6页
针对敏感细胞样本如何调试流式分选仪以获得高纯度、高活性的分选产物是众多流式分选从业者关注的问题。该文以流式分选仪FACSAria Fusion为例,首创性地将工程师调试界面与用户调试界面相结合调整系统默认最低样品进样压力,并配合85μm... 针对敏感细胞样本如何调试流式分选仪以获得高纯度、高活性的分选产物是众多流式分选从业者关注的问题。该文以流式分选仪FACSAria Fusion为例,首创性地将工程师调试界面与用户调试界面相结合调整系统默认最低样品进样压力,并配合85μm喷嘴,按照用户常规操作流程,在流速1.0的情况下对小鼠原代初始T细胞进行纯化,并对产物的质量进行检测。结果证明阐述的调试方法可以成功地获得高纯度初始T细胞,并且诱导分化成的调节T细胞产生特异转录因子Foxp3的能力与未分选细胞相当。 展开更多
关键词 流式分选 进样压力 初始t细胞 调节t细胞 FOXP3
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骨髓间充质干细胞抑制CD4^+初始T细胞体外分化为Th17细胞
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作者 曲学彬 刘星霞 +2 位作者 韩晶晶 姚瑞芹 赵春华 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第9期1179-1183,共5页
目的探讨骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)对辅助T细胞17(Th17)体外分化的免疫调控作用。方法小鼠CD4+初始T(nave T)细胞与小鼠BM-MSCs共培养,诱导分化3 d后流式细胞术检测CD4+IL-17+Th17的生成比率,ELISA法检测培养上清中IL-17的浓度,qRT-... 目的探讨骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)对辅助T细胞17(Th17)体外分化的免疫调控作用。方法小鼠CD4+初始T(nave T)细胞与小鼠BM-MSCs共培养,诱导分化3 d后流式细胞术检测CD4+IL-17+Th17的生成比率,ELISA法检测培养上清中IL-17的浓度,qRT-PCR及Western blot检测Th17特异转录因子Rorγt的表达水平。共培养体系中加入IL-10和PGE2中和抗体后检测Th17的分化率。结果小鼠BM-MSCs分泌高水平细胞因子TGF-β和IL-6。共培养组CD4+IL-17+Th17的生成率(2.5%±1.5%)和IL-17浓度(23±3 ng/L)均显著低于无BM-MSCs对照组(分别为17.8%±4.2%和268±27 ng/L,P<0.05),且转录因子Rorγt的表达量也明显降低。共培养组IL-10和PGE2浓度随诱导天数的增加而逐渐上升,显著高于同期对照组(P<0.05)。共培养体系中加入IL-10或PGE2中和抗体后,显著提升CD4+IL-17+Th17的生成率(从2.0%±0.5%提高到11.8%±2.5%,P<0.05),提高IL-17分泌水平(从24±4 ng/L上升到123±25 ng/L,P<0.05),增强Rorγt的表达量。联合使用两种中和抗体能进一步提高Th17的分化生成率。结论虽然BM-MSCs分泌高水平的Th17分化所需的细胞因子TGF-β和IL-6,但BM-MSCs却抑制Th17的体外分化,其抑制机制可能与IL-10和PGE2有关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 初始t细胞 辅助t细胞17
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下调DC-SIGN-ManLAM结合信号恢复树突状细胞活化初始T细胞的能力
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作者 李兰 郭述良 +1 位作者 王建军 邬亭亭 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第15期1605-1608,共4页
目的探讨利用RNAi下调DC-SIGN与ManLAM结合信号对树突状细胞(dendritic cells,DCs)活化初始T细胞能力的影响。方法利用筛选出的人DC-SIGN分子RNAi有效靶点,构建并包装产生慢病毒表达载体。实验分为:干扰组、空载体组和空白对照组。利用... 目的探讨利用RNAi下调DC-SIGN与ManLAM结合信号对树突状细胞(dendritic cells,DCs)活化初始T细胞能力的影响。方法利用筛选出的人DC-SIGN分子RNAi有效靶点,构建并包装产生慢病毒表达载体。实验分为:干扰组、空载体组和空白对照组。利用慢病毒表达载体下调DCs表面DC-SIGN分子水平,流式细胞仪、RT-PCR及Westernblot检测各组DCs DC-SIGN分子水平变化,在LPS存在下,与ManLAM共培养18 h后,流式细胞仪检测DCs表面成熟标志物,ELISA方法检测DCs刺激CD4+CD45RA+初始T细胞向Th1分化能力,以了解下调DC-SIGN与ManLAM结合信号对DCs活化初始T细胞的能力的影响。结果①包装慢病毒产生浓缩病毒悬液的滴度为1×109TU/ml。②流式细胞仪检测干扰组DCs表面DC-SIGN分子表达水平较其余2组显著降低(F=14.19,P<0.05),RT-PCR检测干扰组DC-SIGN目的条带灰度值/内参灰度值(0.252 5±0.139 6)与空白对照组(0.572 2±0.190 9)及空载体组(0.548 7±0.119 3)相比灰度值显著下降(F=8.142,P<0.05),Western blot检测干扰组DCs内DC-SIGN蛋白水平均显著低于空载体组和空白对照组(F=51.376,P<0.05)。③干扰组DCs的成熟标志物CD86(F=15.59,P=0.004)、CD83(F=18.03,P=0.003)、HLA-DR(F=7.684,P=0.022)水平较空载体组和空白对照组明显增高。④DCs与初始T细胞共培养,干扰组分泌IFN-γ(F=18.434,P=0.003)、IL-2(F=31.08,P=0.001)水平较空载体组和空白对照组显著增高。结论利用RNAi慢病毒载体下调DCs表面DC-SIGN水平,减弱DC-SIGN与ManLAM结合信号,能够恢复DCs的成熟受阻,最终使得DCs活化初始T细胞的能力恢复。 展开更多
关键词 树突状细胞 DC-SIGN RNA干扰 初始t淋巴细胞
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雌性和雄性非肥胖糖尿病小鼠中CD8^(+)T细胞分化亚群差异研究
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作者 杨数数 刘东 +2 位作者 黎婕 张梦军 王莉 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期837-848,共12页
目的以雌性和雄性非肥胖糖尿病(nonobese diabetic,NOD)小鼠以及健康对照癌症研究所(institute for cancer research,ICR)小鼠为研究对象,比较分析初始、效应、记忆、耗竭以及调节性CD8^(+)T细胞分化亚群差异,探讨1型糖尿病(type 1 diab... 目的以雌性和雄性非肥胖糖尿病(nonobese diabetic,NOD)小鼠以及健康对照癌症研究所(institute for cancer research,ICR)小鼠为研究对象,比较分析初始、效应、记忆、耗竭以及调节性CD8^(+)T细胞分化亚群差异,探讨1型糖尿病(type 1 diabetes,T1D)背景下的性别因素对CD8^(+)T细胞分化命运的影响。方法采用流式细胞术检测雌雄NOD小鼠脾脏、胰腺引流淋巴结(pancreatic draining lymph nodes,pLN)、胰腺浸润淋巴细胞(pancreas-infiltrating lymphocytes,PIL)、初始T细胞(naive T cells,T_(N))、中枢记忆T细胞(central memory T cells,T_(CM))、效应T细胞(effector T cells,T_(EFF))、效应前体样T细胞(effector precursor T cells,T_(EP))、耗竭T细胞(exhausted T cells,T_(EX))、耗竭前体T细胞(precursor exhausted T cells,T_(PEX))以及调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)等CD8^(+)T细胞分化亚群的频率和表型差异。结果与雄性NOD小鼠比较,雌性NOD小鼠pLN及PIL中IFN-γ^(+)、CD107a^(+)和CCL5^(+)CD8^(+)T_(EFF)频率显著升高(P<0.01,P<0.05,P<0.05),同时脾脏中CD8^(+)T_(N)、CD8^(+)T_(CM)、CD8^(+)T_(EX)、CD8^(+)T_(PEX)和CD122^(+)CD8^(+)Tregs亚群的频率均显著降低(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.001);而雌性和雄性ICR小鼠体内除CD122^(+)CD8^(+)Tregs差异变化与NOD小鼠一致(P<0.05),其余上述各CD8^(+)T细胞分化亚群无显著差异。结论雄激素可能通过抑制记忆T细胞向效应T细胞分化,同时促进效应T细胞功能耗竭,导致雌雄发病率差异。 展开更多
关键词 1型糖尿病 CD8^(+)t淋巴细胞 调节性t细胞 耗竭t细胞 初始t细胞 记忆t细胞
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rhG-CSF动员的外周血采集物与稳态骨髓中CD4^+CD8^+初始及记忆T细胞亚群的比较 被引量:2
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作者 霍明瑞 赵翔宇 +2 位作者 常英军 罗小华 黄晓军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期605-609,共5页
本研究探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的外周血采集物(G-PB)与稳态骨髓(SS-BM)中CD4+、CD8+初始、记忆T细胞亚群的差异。依据细胞表面CD45RA和CD62L的表达将CD4+、CD8+T细胞划分为初始T细胞(naive,CD45RA+CD62L+)、中心记忆... 本研究探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的外周血采集物(G-PB)与稳态骨髓(SS-BM)中CD4+、CD8+初始、记忆T细胞亚群的差异。依据细胞表面CD45RA和CD62L的表达将CD4+、CD8+T细胞划分为初始T细胞(naive,CD45RA+CD62L+)、中心记忆T细胞(central memory,TCM,CD45RA-CD62L+)、效应记忆T细胞(effector memory,TEM,CD45RA-CD62L-)、终末分化效应记忆T细胞(terminally differentiated effector memory,TTD,CD45RA+CD62L-)。用流式细胞仪测定G-PB与SS-BM中CD4+、CD8+初始和记忆T细胞的比例组成,并计算每微升采集物中各细胞亚群的绝对数量。结果表明:G-PB中CD4+、CD8+T细胞的比例组成及CD4+/CD8+比值均高于SS-BM(p<0.05);G-PB中CD4+初始T细胞的比例显著低于SS-BM(p<0.001),而CD4+TEM比例显著高于SS-BM(p<0.001);G-PB中CD8+初始和记忆T细胞亚群的比例与SS-BM无显著差异(p>0.05);与SS-BM相比,G-PB中CD4+CD62L+T细胞的比例明显降低(p=0.001),每微升G-PB移植物中的各淋巴细胞亚群均明显高于SS-BM(p<0.001)。结论:G-PB与SS-BM中CD4+、CD8+初始和记忆T细胞亚群在相对和绝对数量方面存在明显的差异,这种差异可能影响G-PB和SS-BM移植后急性、慢性移植物抗宿主病发生率及其程度的异同。 展开更多
关键词 骨髓移植物 外周血移植物 CD4^+t细胞 CD8^+t细胞 初始t细胞 记忆t细胞 细胞集落刺激因子
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初始和记忆T细胞的研究进展 被引量:32
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作者 吴长有 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期353-356,共4页
T细胞介导的细胞免疫应答在预防和控制病原微生物感染过程中发挥着重要的作用。T细胞具有多样性和复杂性的特点,不同T细胞亚群在形态、功能及作用机制等方面的研究已成为近年来免疫学研究的热点之一。本文介绍了近年来初始和记忆T细胞... T细胞介导的细胞免疫应答在预防和控制病原微生物感染过程中发挥着重要的作用。T细胞具有多样性和复杂性的特点,不同T细胞亚群在形态、功能及作用机制等方面的研究已成为近年来免疫学研究的热点之一。本文介绍了近年来初始和记忆T细胞的表面标志、细胞内细胞因子、免疫应答的特征和影响记忆T细胞形成、维持的因素等方面的研究新进展,对于疫苗的设计和疫苗效果的评价具有十分重要的意义。 展开更多
关键词 初始t细胞 记忆t细胞 细胞表面标志 细胞因子
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间充质干细胞诱导体外分化来的初始T细胞表型变化的实验研究 被引量:1
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作者 金建刚 冯凯 +1 位作者 石炳毅 陈虎 《白血病.淋巴瘤》 CAS 2009年第1期1-4,共4页
目的将体外由CD34^+细胞分化而来的初始T细胞与异基因骨髓间充质干细胞(MSC)共孵育,观察初始T细胞表型的变化。方法传3代以上的MSC与脐血CD34^+刍细胞分化的初始T细胞共孵育1周,用流式细胞仪检测其表型变化。结果与对照组相比,C... 目的将体外由CD34^+细胞分化而来的初始T细胞与异基因骨髓间充质干细胞(MSC)共孵育,观察初始T细胞表型的变化。方法传3代以上的MSC与脐血CD34^+刍细胞分化的初始T细胞共孵育1周,用流式细胞仪检测其表型变化。结果与对照组相比,CD8^+细胞明显增加(共孵育组(35.9±6.3)%,单纯初始T细胞培养组(18.4±4.5)%],且CD8^+;CD3^+细胞明显增加[共孵育组(27.6±2.8)%,单纯初始T细胞培养组(15.2±3.1)%]。结论骨髓MSC在体外与异基因初始T淋巴细胞共孵育使CD8^+初始T细胞表达增加,这种变化可能与其诱导免疫耐受相关。 展开更多
关键词 间质干细胞 初始t细胞 免疫调节
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非小细胞肺癌患者外周血初始T细胞及记忆T细胞亚群分布 被引量:1
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作者 刘云鹤 李文涛 于建春 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2020年第9期524-529,共6页
目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血初始T细胞及记忆T细胞亚群分布情况。方法选取2018年6月至12月天津中医药大学第一附属医院肿瘤科NSCLC患者25例,同期健康志愿者20例作为对照,应用流式细胞仪分析外周血初始T细胞及记忆T细胞亚群含... 目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血初始T细胞及记忆T细胞亚群分布情况。方法选取2018年6月至12月天津中医药大学第一附属医院肿瘤科NSCLC患者25例,同期健康志愿者20例作为对照,应用流式细胞仪分析外周血初始T细胞及记忆T细胞亚群含量,所得结果应用SPSS 16.0进行统计分析。结果NSCLC患者初始T细胞/干细胞样中央记忆T细胞(TN/SCM)百分率及绝对数均明显低于对照组[(7.71±1.11)%vs.(15.84±2.00)%,t=3.685,P=0.001;(8.38±1.23)×107/L vs.(3.40±0.43)×108/L,t=6.130,P<0.001],中央记忆T细胞(TCM)百分率及绝对数均明显低于对照组[(6.62±1.16)%vs.(17.88±0.83)%,t=7.641,P<0.001;(7.98±1.78)×107/L vs.(3.40±0.31)×108/L,t=9.028,P<0.001],CD8+TCM细胞绝对数明显低于对照组[(5.19±1.04)×106/L vs.(1.49±0.15)×107/L,t=5.561,P<0.001]。NSCLC患者效应记忆T细胞(TEM)百分率明显高于对照组[(38.27±2.01)%vs.(17.37±1.06)%,t=8.776,P<0.001],CD8+TEM细胞百分率及绝对数均明显高于对照组[(13.93±1.55)%vs.(4.65±0.52)%,t=5.310,P<0.001;(1.48±0.14)×108/L vs.(9.97±1.14)×107/L,t=2.584,P=0.014],终末分化效应记忆T细胞(TEMRA)百分率明显高于对照组[(17.33±1.86)%vs.(8.48±1.01)%,t=3.989,P<0.001]。Ⅰ~Ⅱ期NSCLC患者CD8+TCM细胞百分率及绝对数均明显低于Ⅲ~Ⅳ期患者[(0.33±0.06)%vs.(0.89±0.34)%,t=2.600,P=0.020;(3.99±0.84)×106/L vs.(9.03±3.07)×106/L,t=2.270,P=0.040]。不同病理类型NSCLC患者的初始T细胞及记忆T细胞亚群差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论NSCLC患者初始/记忆T细胞亚群较健康志愿者发生变化,具有分化能力和长期存活特性的TN/SCM及TCM降低,而且Ⅰ~Ⅱ期患者降低更为明显,以发挥免疫效应为主的TEM及TEMRA明显升高。 展开更多
关键词 非小细胞 初始t细胞 记忆t细胞亚群
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利用多种表面标志鉴别正常人外周血初始和记忆T细胞亚群 被引量:18
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作者 吴长有 刘杰 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期120-123,128,共5页
目的探索能够准确鉴别初始和记忆T细胞亚群的表面标志及其关联性。方法自正常人静脉血中分离PBMCs,同时加入9种不同标记的抗体,进行染色,利用流式细胞仪检测,并分析结果。结果CD45RA+CD4+T细胞均表达CD27、CCR7、CD28和CD62L,而在CD45RA... 目的探索能够准确鉴别初始和记忆T细胞亚群的表面标志及其关联性。方法自正常人静脉血中分离PBMCs,同时加入9种不同标记的抗体,进行染色,利用流式细胞仪检测,并分析结果。结果CD45RA+CD4+T细胞均表达CD27、CCR7、CD28和CD62L,而在CD45RA-CD4+T细胞中,约有75%的细胞表达CD27,30%为CCR5+,90%为CCR7+,99%为CD28+,70%为CD62L+。与其相一致的是在CD62L+CD4+T细胞中,大约60%的细胞为CD45RA+,但CD62L-CD4+T细胞中,大约95%的细胞为CD45RA-。在CD8+T细胞中,大约有78%的细胞为CD45RA+,其余为CD45RA-。CD45RA+CD8+T细胞的表型与CD45RA+CD4+T细胞基本相似。结论同时检测多种T细胞表面标志,深入了解T细胞各亚群的表型特征,对疾病的诊断、治疗、预后判断以及疫苗的设计和效果评价具有重要的指导意义。 展开更多
关键词 初始和记忆t细胞 t细胞亚群 细胞表面标志
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正常人周围血初始和记忆T细胞亚群及细胞因子表达的探讨 被引量:6
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作者 刘杰 吴长有 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期2-5,共4页
目的:利用多色流式检测技术探讨初始和记忆T细胞亚群与细胞因子表达之间的关系。方法:自正常人静脉血中分离PBMC,经超抗原(SEB)刺激5h后,加入多种抗细胞表面标记和抗细胞因子抗体进行染色,利用流式细胞术检测,并利用FlowJo软件分析结果... 目的:利用多色流式检测技术探讨初始和记忆T细胞亚群与细胞因子表达之间的关系。方法:自正常人静脉血中分离PBMC,经超抗原(SEB)刺激5h后,加入多种抗细胞表面标记和抗细胞因子抗体进行染色,利用流式细胞术检测,并利用FlowJo软件分析结果。结果:根据CD45RO表达与否,将CD4+和CD8+T细胞分为初始和记忆T细胞,再根据归巢受体(CD62L)和趋化因子受体(CCR7)的表达与否,将初始和记忆T细胞进一步分为不同的亚群。当T细胞受到SEB激活后,CD45RO+和CD45RO-的CD4+或CD8+T细胞均表达IL-2、IFN-γ和TNF-α。进一步分析结果表明,CD62Lhi和CD62LhiCCR7+细胞不表达细胞因子,而CD62LloCCR7lo和CCR7+T细胞均表达细胞因子,其中CD62LloCCR7lo细胞表达细胞因子的阳性率明显高于CCR7+细胞亚群。结论:只利用CD45RO表达与否区分初始和记忆T细胞是不够准确的,同时检测CD62L的表达,可明显地提高其准确性。 展开更多
关键词 初始和记忆t细胞 t细胞亚群 细胞表面标志 细胞因子
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趋化因子受体CXCR3及初始/记忆T淋巴细胞在原发性胆汁性肝硬化患者肝脏和外周血中的变化 被引量:1
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作者 唐映梅 包维民 +3 位作者 夏华向 尤丽英 朱森林 杨晋辉 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第23期3044-3047,共4页
目的通过研究原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者与非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者外周血和肝脏内淋巴细胞及其活化状态(分子标记:HLADR+CD3+)、初始T细胞(CD45RA)、记忆T细胞(CD45RO)及趋化因子受体CXCR3,了解肝内淋巴细胞活化状态及其影响因... 目的通过研究原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者与非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者外周血和肝脏内淋巴细胞及其活化状态(分子标记:HLADR+CD3+)、初始T细胞(CD45RA)、记忆T细胞(CD45RO)及趋化因子受体CXCR3,了解肝内淋巴细胞活化状态及其影响因素。方法流式细胞法检测两种肝病患者外周血和肝内淋巴细胞分子标记CD3、CD4、CD8、HLADR+CD3+、CD45RA、CD45RO、CXCR3,进行统计分析。结果 PBC患者在外周血中以CD4+T淋巴细胞为主,肝内浸润淋巴细胞CD8+T和CD4+T淋巴细胞无明显差异;肝内与外周血比较:CD4+T淋巴细胞明显减少,CD4/CD8比例明显降低,HLADR+CD3+T淋巴细胞差异无显著性,CD45RA明显低于外周血,CD45RO则差异无显著性,CXCR3高于外周血中。与NASH患者比较:PBC患者肝内CD4+T细胞增多,CD4/CD8上升,HLADR+CD3+增高,CD45RO、CD45RA减少,CXCR3增多;外周血T淋巴细胞及HLADR+CD3+两组间差异无显著性,CD45RA减少,CXCR3两组间差异无显著性。结论 PBC患者外周血淋巴细胞及其活化状态与肝内免疫状况有关;肝内CD4+T淋巴细胞较NASH患者增多,提示CD4+T的活化和增殖是PBC发生和发展的关键环节;记忆性T淋巴细胞数量(CD45RO)控制在一定范围内可能是自身免疫反应得以不断进行的原因;CXCR3与T淋巴细胞向肝脏定向迁徙有关。 展开更多
关键词 原发性胆汁性肝硬化 肝脏浸润淋巴细胞 外周血单个核细胞 初始t淋巴细胞 记忆t淋巴细胞 CXCR3
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miR-21-5p靶向JAK/STAT信号通路抑制Th1细胞极化
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作者 李露 李雪 +8 位作者 孟广雨 刘元林 王洋 吴楚姗 许婷婷 白海涛 袁福临 郑荣秀 张毅 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期680-687,共8页
目的探讨miR-21-5p对1型辅助性T细胞(Th1细胞)极化相关信号通路的调控作用。方法提取小鼠脾单个核细胞,用免疫磁珠阴性分选试剂盒分离初始(naive)CD4^(+)T细胞,用抗小鼠CD3ε,CD28和白细胞介素4(IL-4)单克隆抗体及小鼠IL-12和IL-2混合... 目的探讨miR-21-5p对1型辅助性T细胞(Th1细胞)极化相关信号通路的调控作用。方法提取小鼠脾单个核细胞,用免疫磁珠阴性分选试剂盒分离初始(naive)CD4^(+)T细胞,用抗小鼠CD3ε,CD28和白细胞介素4(IL-4)单克隆抗体及小鼠IL-12和IL-2混合因子诱导体系诱导初始CD4^(+)T细胞向Th1细胞极化,同时转染miR-21-5p模拟物或模拟物对照,分别命名为Th1诱导组、诱导+模拟物对照组和诱导^(+)miR-21-5p模拟物组,72 h后用流式细胞术检测CD4和干扰素γ(IFN-γ)双阳性(CD4^(+)IFN-γ^(+))细胞百分比;用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Th1细胞极化相关关键转录因子和细胞因子mRNA表达水平;Western印迹法检测Th1细胞极化相关通路关键蛋白及其磷酸化水平。结合双荧光素酶报告系统验证miR-21-5p作用靶标关键细胞因子IFN-γ、信号通路受体IL-12受体β_(1)(IL-12Rβ_(1))和信号转录与转录激活因子1(STAT1)的表达。结果经免疫磁珠分选获得高表达CD62L的初始CD4^(+)T细胞。与Th1诱导组和诱导+模拟物对照组相比,诱导+miR-21-5p模拟物组CD4^(+)IFN-γ^(+)细胞百分比显著降低(P<0.01);Th1细胞极化相关Janus激酶(JAK)/STAT信号通路关键转录因子STAT1(P<0.01)、STAT4(P<0.05)和T盒21转录因子(T-bet)(P<0.01)mRNA表达显著下调,IFN-γ(P<0.01)和IL-12Rβ_(1)(P<0.05)mRNA表达水平亦显著下调,同时STAT1和STAT4蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.01)。结合双荧光素酶报告系统结果表明,miR-21-5p模拟物可分别特异性靶向结合IFN-γ(P<0.01),IL-12Rβ_(1)(P<0.01)和STAT1(P<0.05)基因的3′-非翻译区,而对应靶向位点突变后miR-21-5p模拟物不影响其表达。结论miR-21-5p可靶向下调IFN-γ,IL-12Rβ_(1)和STAT1表达,抑制IL-12和IFN-γ介导的JAK/STAT信号通路活化,从而抑制Th1细胞极化。 展开更多
关键词 miR-21-5p 辅助性t细胞 初始CD4^(+)t细胞 JANUS激酶 信号转导与转录激活因子
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乳腺癌患者荷瘤状态T淋巴细胞亚群检测及其临床意义 被引量:11
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作者 王文慧 李海滨 +1 位作者 李景生 宋玉国 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1873-1874,共2页
目的检测乳腺癌患者外周血T淋巴细胞总数及T淋巴细胞亚群中的CD4+T细胞、CD8^+T细胞、CD45RA^+T细胞、CD45RO^+T细胞的百分率以评价患者的免疫状态。方法试验组选择女性原发性乳腺肿瘤患者40例,其中Ⅰ期乳腺癌23例,Ⅱ+Ⅲ期乳腺癌17例;... 目的检测乳腺癌患者外周血T淋巴细胞总数及T淋巴细胞亚群中的CD4+T细胞、CD8^+T细胞、CD45RA^+T细胞、CD45RO^+T细胞的百分率以评价患者的免疫状态。方法试验组选择女性原发性乳腺肿瘤患者40例,其中Ⅰ期乳腺癌23例,Ⅱ+Ⅲ期乳腺癌17例;以女性健康体检者30例为对照组。应用流式细胞仪,采用三色荧光免疫标记技术分别检测各组外周血T淋巴细胞亚群的数量,统计分析各组检测结果的差异性。结果试验组CD3^+T细胞、CD4^+T细胞百分率明显低于对照组(P<0.05),Ⅱ+Ⅲ期患者明显低于Ⅰ期患者(P<0.05)。与对照组比较,试验组CD45RA^+T细胞明显减少,而CD45RO^+T细胞明显增多(P<0.05);与Ⅰ期乳腺癌患者比较,Ⅱ+Ⅲ期乳腺癌患者CD45RA^+T细胞明显减少,而CD45RO^+T细胞明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 T细胞亚群检测是评价肿瘤患者细胞免疫功能的重要指标,具有重要的临床应用价值。乳腺癌患者免疫功能与肿瘤恶变的发生、发展及临床分期有一定相关性,随着病情的进展,机体免疫功能呈现下降趋势。 展开更多
关键词 乳腺癌 t淋巴细胞亚群 初始t细胞 记忆t细胞
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CHOP方案治疗前后外周T细胞淋巴瘤患者外周血CD45RA~+ T和CD45RO~+ T的变化特点 被引量:7
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作者 吕学文 王博 李扬秋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期531-533,536,共4页
目的:探讨CHOP方案对外周T细胞淋巴瘤(PTCL)患者外周血中初始和记忆T细胞水平的变化及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测20例PTCL患者CHOP方案化疗前后外周血中CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD8+CD45RA+和CD8+CD45RO+T细胞的比例,分析... 目的:探讨CHOP方案对外周T细胞淋巴瘤(PTCL)患者外周血中初始和记忆T细胞水平的变化及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测20例PTCL患者CHOP方案化疗前后外周血中CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD8+CD45RA+和CD8+CD45RO+T细胞的比例,分析疗效与T细胞亚群的关系。结果:PTCL患者化疗前外周血中CD4+T细胞、CD4+CD45RO+细胞的比例明显降低,CD4+CD45RA+、CD8+、CD8+CD45RO+和CD8+CD45RA+T细胞的比例均明显升高(P<0.05),而化疗后PTCL患者CD4+、CD4+CD45RO+细胞的比例较治疗前升高,CD4+CD45RA+、CD8+、CD8+CD45RO+和CD8+CD45RA+T细胞比例则较治疗前稍下降(P<0.05)。治疗前后化疗有效组的CD4+CD45RA+均明显高于化疗无效组(P<0.05)。结论:CHOP治疗对PTCL患者胸腺输出功能有一定的影响,伴有较高胸腺输出功能者对化疗效果更好。 展开更多
关键词 外周t细胞淋巴瘤 CHOP方案 初始t细胞 记忆t细胞
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外周T细胞淋巴瘤患者CD45RO^+T以及CD45RA^+T在外周血中的分布特点分析 被引量:4
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作者 贾新颜 杨文忠 +1 位作者 苏洋 李琦 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期1017-1020,共4页
目的:探讨外周T细胞淋巴瘤(Peripheral T cell lymphoma,PTCL)患者记忆T细胞(CD45RO+T)以及初始T细胞(CD45RA+T)在外周血中的不同分布特点的临床意义。方法:选取我院2010年2月~2014年2月收治的27例PTCL患者,以同期30例健康体检者作为对... 目的:探讨外周T细胞淋巴瘤(Peripheral T cell lymphoma,PTCL)患者记忆T细胞(CD45RO+T)以及初始T细胞(CD45RA+T)在外周血中的不同分布特点的临床意义。方法:选取我院2010年2月~2014年2月收治的27例PTCL患者,以同期30例健康体检者作为对照,通过比较PTCL患者与健康受试者外周血中CD45RO+T、CD45RA+T的分布差异,分析不同临床分期的PTCL患者外周血中上述指标的差异。结果:PTCL患者的淋巴结中T细胞抗原呈多样性表达,以CD4+为主要免疫表型,无B细胞相关抗原表达;患者组外周血CD4+/CD8+、CD4+CD45RO+T显著低于正常组(P<0.05),CD4+CD45RA+T、CD8+CD45RA+T、CD8+CD45RO+T显著高于正常组(P<0.05);I/II期PTCL患者外周血CD4+/CD8+、CD4+CD45RO+T显著高于III/IV期患者(P<0.05),CD4+CD45RA+T、CD8+CD45RA+T、CD8+CD45RO+T显著低于III/IV期患者(P<0.05)。结论:CD45RO+T和CD45RA+T在PTCL患者中存在明显的分布差异,针对其不同分布情况制定相应PTCL的处理方案,可提高PTCL的确诊率,改善患者的预后。 展开更多
关键词 外周t细胞淋巴瘤 t淋巴细胞 外周血 记忆t细胞 初始t细胞
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外周T细胞淋巴瘤患者中PD-1的表达对CD45RA^+、CD45RO^+T细胞的影响 被引量:5
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作者 吕学文 陈焕伟 +2 位作者 徐琼 王博 李晟 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第10期1643-1646,共4页
目的:探讨外周T细胞淋巴瘤(PTCL)患者淋巴瘤组织中PD-1的表达与外周血中初始和记忆T细胞水平的关系。方法:20例PTCL患者采用免疫组化法检测淋巴瘤组织中PD-1的表达,采用流式细胞术检测CHOP方案化疗前后外周血中CD4^+CD45RA^+、CD4^+、CD... 目的:探讨外周T细胞淋巴瘤(PTCL)患者淋巴瘤组织中PD-1的表达与外周血中初始和记忆T细胞水平的关系。方法:20例PTCL患者采用免疫组化法检测淋巴瘤组织中PD-1的表达,采用流式细胞术检测CHOP方案化疗前后外周血中CD4^+CD45RA^+、CD4^+、CD45RO^+、CD8^+CD45RA^+和CD8^+CD45RO^+T细胞的比例,分析PD-1的表达与T细胞亚群的关系。结果:PD-1、PD-L1蛋白在PTCL患者中表达升高,PD-1阳性患者疗效较差。PD-1阳性患者中CD4^+T细胞、CD8^+T细胞明显低于PD-1阴性患者;PD-1阴性组患者CD4^+CD45RO^+、CD8^+CD45RA^+、CD8^+CD45RO^+T细胞明显高于PD-1阳性患者,差异有统计学意义。结论:PTCL患者中存在PD-1/PD-L1蛋白的表达异常,PD-1阳性患者存在更明显的T细胞免疫功能缺陷。 展开更多
关键词 外周t细胞淋巴瘤 PD-1 CHOP方案 初始t细胞 记忆t细胞
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外周T细胞淋巴瘤患者外周血CD45RA^+T和CD45RO^+T细胞分布特点 被引量:3
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作者 吕学文 陈焕伟 李扬秋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期871-875,共5页
目的探讨外周T细胞淋巴瘤(PTCL)患者外周血中初始和记忆T细胞水平及其临床意义。方法采用流式细胞术检测10例PTCL患者外周血CD4+和CD8+T细胞中CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD8+CD45RA+和CD8+CD45RO+T细胞的比例,10例正常健康成人外周血... 目的探讨外周T细胞淋巴瘤(PTCL)患者外周血中初始和记忆T细胞水平及其临床意义。方法采用流式细胞术检测10例PTCL患者外周血CD4+和CD8+T细胞中CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD8+CD45RA+和CD8+CD45RO+T细胞的比例,10例正常健康成人外周血作为对照。结果 PTCL患者外周血中CD4+的比例明显降低,CD8+的比例明显升高,CD4+CD45RO+细胞明显低于对照组,CD4+CD45RA+、CD8+CD45RO+和CD8+CD45RA+T比例均升高(P<0.05)。结论 PTCL病人胸腺近期输出功能仍较强,但仍需进一步分析T细胞活化和效应功能。 展开更多
关键词 外周t细胞淋巴瘤 初始t细胞 记忆t细胞
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记忆T细胞在支气管哮喘中的作用 被引量:4
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作者 李艳春 赵丽娜 华树成 《中国实验诊断学》 2013年第12期2290-2293,共4页
Th1/Th2比例失衡被认为是过敏性哮喘的重要发病机制之一,其中,记忆T细胞发挥了重要作用.效应Th2细胞在接触过敏原、发生免疫应答、完成分泌细胞因子的功能后,绝大多数高表达KLRG1hi的细胞凋亡,少部分表达IL-7Rhi的Th2细胞演变成记忆T细... Th1/Th2比例失衡被认为是过敏性哮喘的重要发病机制之一,其中,记忆T细胞发挥了重要作用.效应Th2细胞在接触过敏原、发生免疫应答、完成分泌细胞因子的功能后,绝大多数高表达KLRG1hi的细胞凋亡,少部分表达IL-7Rhi的Th2细胞演变成记忆T细胞[1],长期存在于机体内.当机体再次接触同种过敏源时,记忆T细胞能够迅速转变为活化的Th2细胞,再次引发Th2介导的气道炎症.因此,记忆T细胞/初始T细胞的比值也就决定了哮喘严重程度[2].本文对近20年来有关记忆T细胞在支气管哮喘中发挥作用的文献做一综述. 展开更多
关键词 记忆t细胞 支气管哮喘 th1 th2比例 tH2细胞 分泌细胞因子 过敏性哮喘 th2介导 初始t细胞
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重度苯中毒患者T细胞受体Vβ亚家族TRECs的分析 被引量:1
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作者 李萡 李扬秋 +3 位作者 杨力建 陈少华 刘薇薇 陈嘉榆 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2007年第4期271-272,275,共3页
目的检测重度苯中毒患者外周血23个TCRVβ-Dβ1TRECs的存在情况,进一步了解重度苯中毒患者胸腺近期各Vβ亚家族初始T细胞的输出情况。方法分别在5×104和1×104个外周血单个核细胞水平下,采用半巢式对12例重度苯中毒患者和10例... 目的检测重度苯中毒患者外周血23个TCRVβ-Dβ1TRECs的存在情况,进一步了解重度苯中毒患者胸腺近期各Vβ亚家族初始T细胞的输出情况。方法分别在5×104和1×104个外周血单个核细胞水平下,采用半巢式对12例重度苯中毒患者和10例正常人的23个TCRVβ-Dβ1TRECs进行扩增。结果在5×104和1×104细胞水平下,苯中毒组检出各TCRVβ-Dβ1TRECs数均显著低于对照组(P<0.05)。在5×104细胞水平时,对照组检测到23个TCRVβ-Dβ1TRECs,苯中毒组仅检测到17个TCRVβ-Dβ1TRECs,其中12个TCRVβ-Dβ1TRECs检出率与对照组相比明显降低(P<0.05)。结论本研究提供了苯中毒患者外周血中各TCRVβ-Dβ1TRECs存在情况。苯中毒患者TCRVβ-Dβ1TRECs检出数量和检出率低于正常人,提示重度苯中毒患者胸腺近期输出功能存在部分缺陷和低下的情况。 展开更多
关键词 tCRVΒ基因 t细胞受体重排删除环 初始t细胞
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一种检测小鼠T淋巴细胞中sjTRECs含量简易方法的研究 被引量:1
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作者 张华华 曾耀英 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第2期114-117,共4页
目的 建立一种快速、简单的检测小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞的信号结合T细胞受体删除环(signaljointTCRrearrangementexcisioncircles,sjTRECs)水平的方法,并研究其准确性,以期推测初始T细胞含量从而评价胸腺功能。方法 根据标准质粒荧光... 目的 建立一种快速、简单的检测小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞的信号结合T细胞受体删除环(signaljointTCRrearrangementexcisioncircles,sjTRECs)水平的方法,并研究其准确性,以期推测初始T细胞含量从而评价胸腺功能。方法 根据标准质粒荧光定量PCR的扩增曲线选择合适有效的扩增循环次数;优化PCR条件;梯度稀释的标准质粒(10 3 - 10 8拷贝)PCR扩增后使用图像分析软件包分析琼脂糖凝胶电泳的图像,测量PCR产物带的光密度,经统计获得标准曲线及方程。将样本的PCR产物带的光密度代入标准曲线方程,从而获得样本的sjTRECs水平读数,并和实时定量PCR结果比较。结果 获得适合的PCR条件;成功建立可信度高的标准曲线;与实时定量PCR的检测结果比较,小鼠sjTRECs含量随年龄变化的趋势一致。结论 成功建立研究方法,与实时定量PCR评价sjTRECs水平得到明显相似的结果。 展开更多
关键词 sjtRECs 初始t细胞 胸腺功能 实时定量PCR
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