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IL-37通过调控NF-κB通路抑制人主动脉血管平滑肌细胞成骨转化并参与抑制其钙化
1
作者 马晨越 贺琼逸 +2 位作者 王猛 柴萌 张海涛 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第2期304-309,共6页
目的:研究IL-37对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉血管平滑肌细胞(HA-SMCs)钙化的作用及对模式识别受体(TLR)/核转录因子(NF-κB)通路和成骨转录因子的影响,探讨IL-37在钙化反应中的作用机制。方法:采用oxLDL诱导HA-SMCs钙化模... 目的:研究IL-37对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉血管平滑肌细胞(HA-SMCs)钙化的作用及对模式识别受体(TLR)/核转录因子(NF-κB)通路和成骨转录因子的影响,探讨IL-37在钙化反应中的作用机制。方法:采用oxLDL诱导HA-SMCs钙化模型,模型组加入100 ng/ml IL-37或100μmol/L PDTC预处理,CCK-8检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;茜素红染色检测钙化结节;qPCR检测平滑肌肌动蛋白(SMA)、骨形态发生蛋白(BMP2)、IL-37 mRNA水平;qPCR、Western blot检测TLR、NF-κB、p-NF-κB、RUNX相关转录因子(RUNX2)、碱性磷酸酶(ALP)、SMA、平滑肌22α(SM22α)的mRNA和蛋白表达水平。结果:与对照组相比,ox-LDL处理后细胞增殖活性增强并具有浓度依赖性(P<0.05),凋亡率升高,同时模型组产生明显的橘红色钙化结节,TLR、NF-κB等炎症因子mRNA及蛋白表达上调,IL-37、RUNX2、BMP2、ALP的mRNA表达上调,SMA、SM22α的mRNA表达下降,p-NF-κB、RUNX2的蛋白表达量明显升高;与造模组相比,IL-37预处理组细胞增殖率下降,凋亡率降低(P<0.05),钙化结节明显减少,TLR、NF-κB等炎症因子的mRNA及蛋白表达明显下降,RUNX2、BMP2、ALP的mRNA表达下调,SMA、SM22α的mRNA表达升高,p-NF-κB、RUNX2的蛋白表达量明显下降,与抑制剂PDTC组在细胞因子表达上呈现相同趋势。结论:IL-37可抑制HA-SMCs钙化,可能与抑制NF-κB通路及细胞成骨表型转化相关。 展开更多
关键词 IL-37 人主动脉血管平滑肌细胞 成骨转化 TLR/NF-κB通路
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TGF-β1/BMP-4诱导肺动脉血管平滑肌细胞增殖及橙皮素、芍药苷的干预 被引量：10
2
作者 任周新 余海滨 +2 位作者 梅晓峰 冯月 沈俊岭 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第6期1339-1342,共4页
目的：探讨橙皮素和芍药苷对正常培养及TGF-β1/BMP-4诱导肺动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法：首先,0、50、100、150、200μg/mL的橙皮素或芍药苷作用于正常培养条件下的人肺动脉血管平滑肌细胞,24 h及48 h检测药物的细胞增殖抑制... 目的：探讨橙皮素和芍药苷对正常培养及TGF-β1/BMP-4诱导肺动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法：首先,0、50、100、150、200μg/mL的橙皮素或芍药苷作用于正常培养条件下的人肺动脉血管平滑肌细胞,24 h及48 h检测药物的细胞增殖抑制率。接着,应用均匀设计制订TGF-β1与BMP的剂量组合,诱导细胞增殖,多元线性回归和单因素方差分析确定诱导细胞增殖的TGF-β1与BMP的优化剂量组合;应用该剂量诱导细胞增殖,MTT和Brd U两种方法检测药物对细胞增殖的影响。结果：150、200μg/mL的橙皮素或芍药苷抑制正常培养条件下的细胞增殖（P〈0.05或0.01）。多元回归方程显示：TGF-β1和BMP-4对细胞增殖的影响相互拮抗,7.5 ng/mL TGF-β及20 ng/mL BMP-4显著增加细胞的增殖（P〈0.05）。12.5-100μg/mL的橙皮素不能显著抑制TGF-β1/BMP-4诱导肺动脉血管平滑肌细胞增殖（P〉0.05）;25-100μg/mL的芍药苷显著抑制TGF-β1/BMP-4诱导肺动脉血管平滑肌细胞增殖（P〈0.05或0.01）。结论：橙皮素和芍药苷均抑制正常肺动脉平滑肌细胞的增殖。芍药苷抑制TGF-β1/BMP-4诱导肺动脉血管平滑肌细胞增殖,具有较高的研究与开发价值。 展开更多
关键词 橙皮素 芍药苷 肺动脉血管平滑肌细胞 TGF-β1/BMP-4 增殖
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动脉血管平滑肌细胞、血管内皮细胞原代培养方法的改良及应用 被引量：6
3
作者 王敏 崔连群 +3 位作者 王晓军 烟玉琴 韩秋霞 秦风菊 《山东医药》 CAS 北大核心 2004年第14期17-18,共2页
关键词 动脉血管平滑肌细胞 血管内皮细胞 体外培养 动脉粥样硬化 高血压
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组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞的特征 被引量：10
4
作者 张量 隋璐 +3 位作者 孙成林 王麟 牟艳玲 苏禄辉 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第19期108-110,i003,共4页
目的:采用组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,并应用光镜、电镜和免疫组织化学方法观察细胞各生长时期的形态变化。方法:实验于2004-02/08在中国医科大学基础医学院药理实验室完成。选择健康清洁级Wistar大鼠30只,体质量150～18... 目的:采用组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,并应用光镜、电镜和免疫组织化学方法观察细胞各生长时期的形态变化。方法:实验于2004-02/08在中国医科大学基础医学院药理实验室完成。选择健康清洁级Wistar大鼠30只,体质量150～180g,无菌条件下取全段主动脉中膜组织修剪成1mm×1mm大小的组织块直接贴壁于一次性塑料培养皿中,组织块间距0.5cm,保证细胞从组织块游出后有足够的生长空间并保持局部细胞密度的均匀,发现漂起的组织块及时清理,于37℃孵箱内放置1.5h左右使组织块与壁贴附后,缓慢加入改良Eagle培养液培养3～5d,待有细胞从组织块周围游出后换液。当细胞长满培养皿时即可传代。采用倒置相差显微镜和透射电镜及抗α-平滑肌肌动蛋白免疫组织化学方法观察主动脉平滑肌细胞的形态。绘制主动脉平滑肌细胞生长曲线,观察各生长时期的变化,并评估其培养方法的优点。结果:30只大鼠全部进入结果分析。①技术方法优点:贴块方便,直接一次性贴壁使污染机会少,随组织块生长随时清理漂起的组织块,可减少对其他组织块的毒性作用,并增加已游离出的细胞生长空间。②原代培养血管平滑肌细胞:光镜观察形态多样,大小略有差异,胞体较小,胞质折光性强。③传代血管平滑肌细胞:光镜下观察呈现特征性“峰”、“谷”状生长。电镜下观察:细胞形态不规则,胞浆内有肌丝,纵向平行排列,有密区,具备平滑肌细胞特征。免疫组织化学染色后可见细胞浆中大量平行条状棕黄染色、胞核不着色,所有细胞均染色,呈阳性。④主动脉平滑肌细胞生长曲线:血管平滑肌细胞生长曲线近似“S”形,传代后第1天细胞数有所减少,经过2d潜伏适应期后进入对数生长期,持续两三天进入平台期。结论:组织块贴壁法培养技术具有操作简便,污染机会少,有足够细胞生长空间的优点,经光镜和电镜观察培养出新的主动脉血管平滑肌细胞具有平滑肌细胞特征,免疫组织化学染色也显示所有细胞均呈阳性。传代培养后第2天进入对数生长期,持续两三天进入平台期,可产生纯度高及数量多的平滑肌细胞。 展开更多
关键词 主动脉血管平滑肌细胞 组织块贴壁法 免疫组织化学方法 免疫组织化学染色 α-平滑肌肌动蛋白 细胞生长曲线 Wistar大鼠 主动脉平滑肌细胞 对数生长期 中国医科大学 镜下观察 细胞特征 药理实验室 基础医学院 相差显微镜
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DNA损伤应答通路在高钙磷环境诱导的人主动脉血管平滑肌细胞钙化中的作用 被引量：2
5
作者 范志娟 刘树业 +1 位作者 田亚琼 刘爽 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第16期36-42,共7页
目的 明确DNA损伤应答通路在高钙磷环境诱导的人主动脉血管平滑肌细胞(HVSMC)钙化过程中的作用。方法 将HVSMC培养分为对照组、模型组、共济失调毛细血管扩张突变激酶(iATM)组、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(iPARP)组,培养12 d。茜素红-S染... 目的 明确DNA损伤应答通路在高钙磷环境诱导的人主动脉血管平滑肌细胞(HVSMC)钙化过程中的作用。方法 将HVSMC培养分为对照组、模型组、共济失调毛细血管扩张突变激酶(iATM)组、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(iPARP)组,培养12 d。茜素红-S染色法定性和邻-甲酚酞法定量检测4组细胞钙化情况,彗星实验检测DNA损伤,Western blotting和免疫荧光方法检测组蛋白γH2AX磷酸化水平,酶联免疫吸附试验检测8-羟基-2’-脱氧鸟苷(8-OHDG)水平,NucleoCounterNC-3000^(TM)高级细胞分析仪分析4组细胞的存活率。结果 光学显微镜和茜素红S染色发现第9天开始,与对照组相比,模型组出现细胞内钙质沉积,第12天钙质沉积明显。对照组与模型组分别在第3、6、9、12天培养状态下Ca^(2+)/蛋白比较,结果:(1)不同时间点Ca^(2+)/蛋白有差异(F=168.970,P=0.000);(2)模型组与对照组Ca^(2+)/蛋白有差异(F=203.040,P=0.000),模型组Ca^(2+)/蛋白较高,钙化明显;(3)两组Ca^(2+)/蛋白变化趋势有差异(F=13.213,P=0.000)。培养12 d时,茜素红S染色发现模型组比对照组钙化程度高,iATM组和iPARP组比模型组钙化程度低。σ-甲酚酞试验发现,iATM组和iPARP组Ca^(2+)/蛋白低于模型组(P <0.05)。彗星试验发现,对照组比较,模型组第9天开始出现更多数量的DNA受损细胞。对照组与模型组分别在第3、6、9、12天培养状态下“彗星细胞”比较,结果:(1)不同时间点“彗星细胞”有差异(F=13.141,P=0.000);(2)模型组与对照组“彗星细胞”有差异(F=121.521,P=0.000),模型组“彗星细胞”百分比较高,DNA损伤明显;(3)模型组与对照组“彗星细胞”变化趋势有差异(F=89.290,P=0.000)。模型组γH2AX蛋白相对表达量高于对照组(P <0.05)。对照组、模型组分别在第3和12天免疫荧光显微镜下观察> 3个γH2AX病灶百分比,结果:(1)不同时间点> 3个γH2AX病灶百分比有差异(F=168.970,P=0.000);(2)模型组与对照组> 3个γH2AX病灶百分比有差异(F=203.040,P=0.000),模型组> 3个γH2AX病灶百分比较高,DNA损伤明显;(3)模型组与对照组> 3个γH2AX病灶百分比变化趋势有差异(F=153.410,P=0.000)。模型组8-OHDG水平高于对照组(P <0.05)。模型组细胞存活率低于对照组、iATM组、iPARP组(P <0.05);iATM组、iPARP组与对照组细胞存活率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 高Ca^(2+)/P环境激活DNA损伤应答信号通路,诱导HVSMC坏死,进而形成钙化。 展开更多
关键词 DNA损伤应答 钙磷失衡 人主动脉血管平滑肌细胞 钙化
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葛根素对大鼠肾动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的影响 被引量：2
6
作者 秦小江 侯晓敏 梁泰刚 《中国药物与临床》 CAS 2014年第9期1203-1204,共2页
葛根素是从豆科植物野葛或甘葛根的干燥根中提取的单体,其化学名为8-β-D-葡萄吡喃糖-4,7-二羟基异黄酮。据研究报道,葛根素具有多种药理学活性,包括降低血压[1]、舒张大鼠冠状动脉[2]、改善急性心肌缺血[3]、清除氧自由基[4]等,但关于... 葛根素是从豆科植物野葛或甘葛根的干燥根中提取的单体,其化学名为8-β-D-葡萄吡喃糖-4,7-二羟基异黄酮。据研究报道,葛根素具有多种药理学活性,包括降低血压[1]、舒张大鼠冠状动脉[2]、改善急性心肌缺血[3]、清除氧自由基[4]等,但关于葛根素对大鼠肾动脉的作用却未见报道。本实验主要研究葛根素对大鼠离体肾动脉的肌源性作用,葛根素对大鼠肾动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道（BKCa）电流的作用及其与过氧化氢（H2O2）的关系。 展开更多
关键词 大电导钙激活钾通道 动脉血管平滑肌细胞 钾通道电流 葛根素 肾动脉 大鼠 豆科植物野葛 二羟基异黄酮
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MAPK抑制剂在高浓度葡萄糖介导大鼠动脉血管平滑肌细胞增殖反应中的调节作用 被引量：1
7
作者 张严高 秦永文 +1 位作者 吴弘 文军慧 《微循环学杂志》 2007年第1期26-27,共2页
目的:研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂在高浓度葡萄糖(HG)介导的大鼠动脉平滑肌细胞增殖反应中的作用及其可能的调控机制。方法:将HG处理的血管平滑肌细胞给予MAPK特异性抑制剂PD098059预处理,通过测定3H-亮氨酸和3H-胸苷掺入率,观... 目的:研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂在高浓度葡萄糖(HG)介导的大鼠动脉平滑肌细胞增殖反应中的作用及其可能的调控机制。方法:将HG处理的血管平滑肌细胞给予MAPK特异性抑制剂PD098059预处理,通过测定3H-亮氨酸和3H-胸苷掺入率,观察其对细胞蛋白合成、DNA代谢及细胞增殖的影响。结果:HG(25×10-3mol/L)处理平滑肌细胞,3H-亮氨酸和3H-胸苷掺入率明显增高;这种作用可被MAPK特异性抑制剂PD098059所抑制。结论:MAPK激活在HG致平滑肌细胞增殖反应中具有明显促进作用,但这种作用可被MAPK信号途径的特异性抑制剂所抑制。 展开更多
关键词 MAPK抑制剂 高浓度葡萄糖 SD大鼠 动脉血管平滑肌 细胞增殖反应 丝裂原活化蛋白激酶 调节作 PD098059
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外源性一氧化氮对肺动脉血管平滑肌细胞血红素氧化酶-1/一氧化碳的影响
8
作者 周君琳 凌亦凌 +2 位作者 金国华 黄新丽 王秋红 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1147-1147,共1页
关键词 肺动脉血管平滑肌细胞 血红素氯化酶-1 一氧化碳 外源性一氧化氮
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ERK促进大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞Smad7表达
9
作者 钟华 何芳 +4 位作者 胡清华 陈雄英 邓峰美 孙志萍 李增春 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第10期1104-1105,共2页
关键词 主动脉血管平滑肌细胞 SMAD7 细胞外信号调节蛋白激酶 ERK 信号传导通路 protein 大鼠 转化生长因子
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高脂血清对人主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制
10
作者 刘晴 汤潜 +2 位作者 王莎莎 韩彦弢 王春波 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第47期61-63,共3页
目的观察高脂血清对人主动脉血管平滑肌细胞(HASMC)增殖的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期HASMC细胞分为实验组和和对照组,实验组包括实验1、2、3组,另设空白对照组。对照组常规培养;实验1、2、3组分别加入10%、15%、20%浓度的高... 目的观察高脂血清对人主动脉血管平滑肌细胞(HASMC)增殖的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期HASMC细胞分为实验组和和对照组,实验组包括实验1、2、3组,另设空白对照组。对照组常规培养;实验1、2、3组分别加入10%、15%、20%浓度的高脂血清培养;空白对照组仅加培养基无细胞。继续培养6、12、24、48 h,用CCK-8法测算实验组HASMC细胞增殖率;培养24 h时采用实时荧光定量PCR法检测各组HASMC中GRIM-19和p-STAT3 mRNA,采用Western blotting法检测GRIM-19和p-STAT3蛋白。结果相同时间点细胞增殖率实验3组高于实验2组,实验2组高于实验1组,P均<0.05。随着高脂血清培养时间增加,各组HASMC细胞增殖率呈递增趋势,P均<0.05。培养24 h时HASMC中GRIM-19 mRNA和蛋白实验3组低于实验2组,实验2组低于实验1组,P均<0.05;HASMC中p-STAT3 mRNA和蛋白实验3组高于实验2组,实验2组高于实验1组,P均<0.05。结论高脂血清可以促进HASMC增殖。与10%、15%的高脂血清相比,20%高脂血清促进HASMC增殖的效果最为明显。其作用机制可能与GRIM-19下调p-STAT3表达有关。 展开更多
关键词 人主动脉血管平滑肌细胞 细胞增殖 维甲酸干扰素诱导凋亡相关基因 转录信号转导子与激活子3
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促炎因子介导的体外培养人主动脉血管平滑肌细胞凋亡
11
作者 孟丽 吉瑞瑞 +1 位作者 徐丽 陈纪林 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2003年第4期310-312,共3页
目的 :探讨促炎因子对体外培养的人主动脉平滑肌细胞有无致凋亡作用。　　方法 :体外原代培养人主动脉平滑肌细胞 ,用免疫组化方法鉴定 ;肿瘤坏死因子 α (TNF α)和白细胞介素 1β (IL 1β)分别以浓度 2 0 μg/ml单独或二者共同与平... 目的 :探讨促炎因子对体外培养的人主动脉平滑肌细胞有无致凋亡作用。　　方法 :体外原代培养人主动脉平滑肌细胞 ,用免疫组化方法鉴定 ;肿瘤坏死因子 α (TNF α)和白细胞介素 1β (IL 1β)分别以浓度 2 0 μg/ml单独或二者共同与平滑肌细胞培养 3 6h ,实验分 4组 :TNF α组 (T组 )、IL 1β组 (I组 )、TNF α+IL 1β组 (TI组 )及对照组 ,采用流式细胞仪分析细胞凋亡及细胞周期。　　结果 :①细胞凋亡分析显示 :TI组两种因子的联合作用诱导人平滑肌细胞凋亡与对照组比明显增加 ,有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,而二者单独作用未能诱导人平滑肌细胞凋亡。②细胞周期分析发现TI组在TNF α +IL 1β刺激下 ,细胞增殖能力与其他组比有明显下降 ,有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,生长逐渐停滞 ,而二者单独作用对细胞增殖有轻微刺激作用 ,但与对照组无显著性差异。　　结论 :促炎因子TNF α和IL 1β的相互作用 ,可以诱导人平滑肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 促炎因子 人主动脉血管平滑肌细胞 细胞凋亡 流式细胞术 体外培养 免疫组化方法 肿瘤坏死因子-Α
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人动脉血管平滑肌G_(αq)基因表达与原发性高血压关系研究
12
作者 刘忠 黄元伟 胡申江 《浙江医学》 CAS 1998年第3期160-162,共3页
为揭示Cq蛋白α亚单位(G_(aq))基因表达与原发性高血压的关系,我们以G_(aq)cDNA为探针,用斑点杂交方法测定了人动脉血管平滑肌肌层中G_(aq)mRNA的相对含量。结果显示原发性高血压病人组(n=9)与对照组(n=16)相比无显著性差异。这可能是... 为揭示Cq蛋白α亚单位(G_(aq))基因表达与原发性高血压的关系,我们以G_(aq)cDNA为探针,用斑点杂交方法测定了人动脉血管平滑肌肌层中G_(aq)mRNA的相对含量。结果显示原发性高血压病人组(n=9)与对照组(n=16)相比无显著性差异。这可能是由于抗高血压药物作用的结果,也可能是另一条信号传导途径——酩氨酸激酶介导的磷脂酶C途径的异常,或者在原发性高血压病人的发病过程中无G_(aq)与磷脂酶C参与的信号途径的异常。 展开更多
关键词 原发性 高血压 动脉血管平滑肌 Gaq亚单位
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阿司匹林铜对兔主动脉血管平滑肌的作用
13
作者 杨为民 沈志强 +2 位作者 陈植和 彭芳 雷伟亚 《中国药理通讯》 2003年第3期21-22,共2页
关键词 阿司匹林铜 主动脉血管平滑肌 去甲肾上腺素 血管舒张 动物实验
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三油酸甘油酯对大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量：3
14
作者 王雅琴 秧茂盛 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1384-1390,共7页
目的：研究三油酸甘油酯对大鼠主动脉血管平滑肌细胞（rat aortic smooth muscle cells,RASMC）增殖的影响。方法：采用体外细胞培养、油红染色观察细胞形态的变化;MTT法、流式细胞术检测三油酸甘油酯对RASMC增殖的影响。结果：油红染... 目的：研究三油酸甘油酯对大鼠主动脉血管平滑肌细胞（rat aortic smooth muscle cells,RASMC）增殖的影响。方法：采用体外细胞培养、油红染色观察细胞形态的变化;MTT法、流式细胞术检测三油酸甘油酯对RASMC增殖的影响。结果：油红染色结果显示三油酸甘油酯使RASMC失去原来长梭形外观,胞体变大;三油酸甘油酯浓度越高变化越明显,2 000 mg/dl已无正常细胞存在。三油酸甘油酯对RASMC增殖的影响与作用时间及三油酸甘油酯的浓度密切相关。在24 h≤125 mg/dl,表现为抑制增殖作用;24 h≥250 mg/dl及48～72 h≤500 mg/dl,表现为促进增殖作用,其中24 h,1 000 mg/dl时增殖率最大约为115.9%,与对照组相比差异有统计学意义（t=-3.74,P=0.002）;48～72 h〉500 mg/dl及96～144 h,62.5～2 000 mg/dl表现为抑制增殖作用,其中,48、72 h这2个时间点在2 000 mg/dl的增殖率分别较对照组下降42.7%（t=13.08,P=0.000）和65%（t=129.53,P=0.000）,与对照组相比差异有统计学意义。流式周期结果表明,三油酸甘油酯组G0/G1期的百分比较对照组降低,而S期百分比增高。流式凋亡结果为,除了24 h和144 h外,其余各时间点的凋亡率较对照组降低,其中72 h及120 h的凋亡率分别为1.1%（F=14.39,P=0.019）,0.7%（F=9.96,P=0.034）,与对照组相比差异有统计学意义。另外,细胞增殖与凋亡的变化方向一致。结论：三油酸甘油酯对RASMC增殖的影响是双向的,即在低浓度短时间及高浓度长时间的抑制增殖作用,在中间合适的浓度及时间表现为促进增殖作用;细胞增殖周期试验结果也支持三油酸甘油酯具有一定的促进或抑制大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖作用;高浓度脂质对细胞的直接毒性作用、诱导细胞的增殖或凋亡作用,可能共同参与调控血管平滑肌细胞的数目及功能。 展开更多
关键词 三油酸甘油酯 大鼠主动脉血管平滑肌细胞 增殖
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myocardin通过激活miR-93-5p促进人主动脉血管平滑肌细胞分化 被引量：1
15
作者 史丹阳 刘美玲 +3 位作者 刘翔 张建 张同存 王楠 《天津科技大学学报》 CAS 2019年第2期19-24,共6页
myocardin是促进平滑肌细胞分化的重要转录因子.微小RNA(microRNAs,miRNA)在近年来已经证实参与多种生物学过程,包括平滑肌的表型转化.然而在平滑肌分化过程中myocardin与哪些microRNA具有相关性仍有待于阐明.通过将外源性myocardin转... myocardin是促进平滑肌细胞分化的重要转录因子.微小RNA(microRNAs,miRNA)在近年来已经证实参与多种生物学过程,包括平滑肌的表型转化.然而在平滑肌分化过程中myocardin与哪些microRNA具有相关性仍有待于阐明.通过将外源性myocardin转入人主动脉血管平滑肌细胞(human aortal vascular smooth muscle cells,HA-VSMCs)中,利用免疫印迹(Western blot)检测分化标志基因肌动蛋白α2(actin alpha2,ACTA2)和肌动蛋白相关蛋白(smooth muscle 22 alpha,SM22α)的表达;利用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)检测过表达或敲低myocardin对miR-93-5p水平的影响;构建miR-93-5p启动子的荧光素酶报告质粒,利用荧光素酶报告分析证实myocardin对mi R-93-5p启动子的转录激活作用.上述结果证实myocardin可能通过激活miR-93-5p的转录,上调其表达,进而促进血管平滑肌细胞的分化. 展开更多
关键词 MYOCARDIN 人主动脉血管平滑肌细胞 表型转化 miR-93-5p
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剪切力对动脉血管平滑肌细胞增殖分化的影响 被引量：3
16
作者 王莹 樊瑜波 孙安强 《生命科学仪器》 2008年第1期31-35,共5页
目的:探讨剪切力作用下人脐动脉血管平滑肌细胞的增殖分化的变化。方法:利用改进的灌流及流动培养装置,通过蠕动泵提供稳定的剪切力,同时提供静态培养所需的其它条件,建立体外人脐动脉血管平滑肌流动培养模型。分别对体外培养的人脐动... 目的:探讨剪切力作用下人脐动脉血管平滑肌细胞的增殖分化的变化。方法:利用改进的灌流及流动培养装置,通过蠕动泵提供稳定的剪切力,同时提供静态培养所需的其它条件,建立体外人脐动脉血管平滑肌流动培养模型。分别对体外培养的人脐动脉血管平滑肌细胞加载3,4,5,8,10dyn/cm2的定长流剪切力24h,同时以静态培养的细胞为对照组。相差倒置显微镜观察玻片上细胞的数量并作细胞计数,α-actin免疫组化染色.结果:细胞记数显示,同对照组相比,切应力各组的增殖能力都有所下降,5dyn/cm2切应力作用下,细胞增殖缓慢最为明显.α-actin免疫组化染色提示切应力各组的分化程度较对照组高。结论:初步研究表明,剪切力对人脐动脉血管平滑肌细胞的增殖有一定抑制作用,并且可能促进了细胞的分化。 展开更多
关键词 剪切力 流动腔 动脉血管平滑肌细胞 细胞培养
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透明质酸对游离脂肪酸引起的人主动脉血管平滑肌细胞表达IL-6、IL-8和TNF-α的影响
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作者 杨兴文 李伟华 +3 位作者 李元 董莉 权金星 韩平治 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2017年第2期115-121,共7页
目的探讨透明质酸(HA)对游离脂肪酸(FFA)引起的人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)表达白细胞介素6(IL-6)、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法培养HA-VSMC,用不同浓度(0、100、200、400μmol/L)FFA和不同浓度FFA+高分子量HA(HMW-... 目的探讨透明质酸(HA)对游离脂肪酸(FFA)引起的人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)表达白细胞介素6(IL-6)、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法培养HA-VSMC,用不同浓度(0、100、200、400μmol/L)FFA和不同浓度FFA+高分子量HA(HMW-HA)或低分子量HA(LMW-HA)处理细胞24、48 h。噻唑蓝法检测FFA和FFA+HA对HA-VSMC存活率的影响;Ed U染色检测细胞增殖活性;酶联免疫吸附法检测培养上清IL-6、IL-8和TNF-α含量;实时荧光定量PCR和Western blot检测IL-6、IL-8和TNF-αmRNA及蛋白表达水平。结果(1)FFA在400μmol/L内呈浓度依赖性诱导HA-VSMC增殖;(2)HMW-HA、LMW-HA均对FFA诱导的HA-VSMC增殖有抑制作用,且HMW-HA抑制作用强于LMW-HA;(3)FFA显著促进HA-VSMC IL-6、IL-8和TNF-α的分泌,且有明显的时间和浓度依耐性;HA可以抑制上述作用;(4)实时荧光定量PCR和Western blot结果显示,FFA+HMWHA组、FFA+LMW-HA组IL-6、IL-8、TNF-αmRNA及蛋白表达水平均低于FFA组(均P<0.01),其中FFA+HMW-HA组又低于FFA+LMW-HA组(P<0.01)。结论 (1)FFA诱导HA-VSMC IL-6、IL-8、TNF-αmRNA和蛋白表达升高;(2)HA对FFA引起的HA-VSMC IL-6、IL-8和TNF-α的表达有抑制作用,且HMW-HA抑制效果强于LMW-HA。 展开更多
关键词 透明质酸 游离脂肪酸 人主动脉血管平滑肌细胞 白细胞介素6 白细胞介素8 肿瘤坏死 因子Α
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黄连素对人主动脉血管平滑肌细胞钙化的作用及其机制 被引量：3
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作者 张鑫鹏 曾存良 +5 位作者 孙晓磊 何虎强 胥雄飞 曾宏 施森 刘勇 《山东医药》 CAS 2018年第33期1-4,共4页
目的探讨黄连素影响人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)钙化的作用及机制。方法利用糖基化终末产物(AGEs)建立HASMCs钙化模型,予以不同浓度(10、25、50μmol/L)的黄连素干预。用冯库萨、茜素红染色观察细胞钙化程度,采用细胞内钙含量试剂... 目的探讨黄连素影响人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)钙化的作用及机制。方法利用糖基化终末产物(AGEs)建立HASMCs钙化模型,予以不同浓度(10、25、50μmol/L)的黄连素干预。用冯库萨、茜素红染色观察细胞钙化程度,采用细胞内钙含量试剂盒测定钙含量,Western blotting检测各组细胞骨保护素(OPG)、骨桥蛋白(OPN)及骨形成蛋白2(BMP2)、细胞外信号调节激酶(ERK)、p38蛋白表达。结果与对照组比较,AGEs组钙化程度、细胞内钙含量升高(P均<0.05),不同浓度黄连素干预HASMCs钙含量呈浓度依赖性减少(P均<0.05);AGEs组OPG、BMP2、OPN、ERK、p38蛋白表达量较对照组明显增高(P均<0.05),不同浓度黄连素呈浓度依赖性地减少HASMCs的OPG、BMP2、OPN、ERK、p38蛋白表达量(P均<0.05)。结论黄连素可抑制AGEs诱导的HASMCs钙化,其机制可能与下调ERK、p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路导致OPG、OPN、BMP2表达减少有关。 展开更多
关键词 黄连素 人主动脉血管平滑肌细胞 血管钙化 糖基化终末产物 丝裂原活化蛋白激酶通路
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晚期糖基化终末产物通过AKT信号通路促进人主动脉血管平滑肌细胞钙化 被引量：3
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作者 侯青春 曾宏 +4 位作者 孙晓磊 何虎强 张雷 袁罡 刘勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第19期3169-3173,共5页
目的探讨蛋白激酶B在晚期糖基化终末产物(AGEs)引起的人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)钙化中的作用。方法体外培养HASMCs,随机分为对照组、DMSO组、AGEs组和AGEs+LY294002组,冯库萨染色检测各组钙化情况;Western blot检测相关蛋白的表... 目的探讨蛋白激酶B在晚期糖基化终末产物(AGEs)引起的人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)钙化中的作用。方法体外培养HASMCs,随机分为对照组、DMSO组、AGEs组和AGEs+LY294002组,冯库萨染色检测各组钙化情况;Western blot检测相关蛋白的表达。结果与对照组相比,AGEs组钙化相关蛋白骨形成蛋白-2(BMP-2)、骨保护素(OPG)表达量明显升高(P<0.05),且呈浓度依赖性;与对照组相比,AGEs组P-AKT表达量明显升高(P<0.05),且呈时间和浓度依赖性;与AGEs组相比,AGEs+LY294002组钙化相关蛋白BMP-2、OPG的表达量明显降低(P<0.01)。结论 AKT信号通路在AGEs引起的HAVSMCs钙化中可能起重要作用。 展开更多
关键词 人主动脉血管平滑肌细胞 晚期糖基化终末产物 血管平滑肌细胞 钙化 AKT
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血栓烷A_2类似物对大鼠肺动脉血管平滑肌细胞钾离子通道表达的影响
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作者 齐霁 邹小龙 蔡丽英 《微循环学杂志》 2009年第1期7-9,16,共4页
目的:观察血栓烷A2(TXA2)类似物U46619对实验大鼠肺动脉血管平滑肌细胞(PASMCs)K+通道Kv1.2、Kv1.5、Kv2.1蛋白质和mRNA表达的影响。方法:采用酶法分离、培养Wistar大鼠PASMCs,通过Western-blot和RT-PCR方法分别从蛋白质水平和mRNA水平... 目的:观察血栓烷A2(TXA2)类似物U46619对实验大鼠肺动脉血管平滑肌细胞(PASMCs)K+通道Kv1.2、Kv1.5、Kv2.1蛋白质和mRNA表达的影响。方法:采用酶法分离、培养Wistar大鼠PASMCs,通过Western-blot和RT-PCR方法分别从蛋白质水平和mRNA水平分析U46619对Kv1.2、Kv1.5、Kv2.1表达的抑制作用。结果:100nmol/LU46619对Kv1.2表达有明显抑制作用。结论:TXA2类似物U46619可能通过抑制Kv1.2表达而参与大鼠肺动脉血管的收缩。 展开更多
关键词 肺动脉血管平滑肌细胞 血栓烷A2 钾离子通道 电压门控性K^+通道 L-型Ca^2+通道 胞内[Ca^2+]i 类似物 血管平滑肌收缩
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