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禾谷镰孢半胱天冬氨酸酶FgCas4的生物学功能 被引量：1
1
作者 王晓妍 从威威 +1 位作者 陈莉 张承启 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期332-342,共11页
半胱天冬氨酸酶(caspase)在哺乳动物中参与调控细胞凋亡过程,控制着多种疾病的发生发展。本研究利用基因敲除和回补的方法,获得了禾谷镰孢中半胱天冬氨酸酶基因FgCas4的敲除突变体ΔFgCas4和回补体ΔFgCas4-C。通过观察分析发现,基因FgC... 半胱天冬氨酸酶(caspase)在哺乳动物中参与调控细胞凋亡过程,控制着多种疾病的发生发展。本研究利用基因敲除和回补的方法,获得了禾谷镰孢中半胱天冬氨酸酶基因FgCas4的敲除突变体ΔFgCas4和回补体ΔFgCas4-C。通过观察分析发现,基因FgCas4的缺失并不影响禾谷镰孢(Fusarium graminearum)的生长速率、菌落形态、分生孢子产量、致病和产毒。但是,敲除突变体ΔFgCas4的菌丝分支变多且具有3个隔膜的分生孢子比例较野生型和回补体增加了8.7%。对外界环境胁迫因子耐受性测定显示,ΔFgCas4对杀菌剂和金属离子的敏感性显著增加,同时其细胞内脂滴含量增多,对渗透胁迫因子抗性变强。亚细胞定位发现,半胱天冬氨酸酶FgCas4定位于液泡中。此外,基因FgCas4的缺失导致F.graminearum细胞自噬过程明显提前。上述研究结果表明,F.graminearum中半胱天冬氨酸酶FgCas4主要在菌体无性繁殖、对不同环境胁迫的应答以及细胞自噬过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 禾谷镰孢 半胱天冬氨酸酶fgcas4 无性繁殖环境胁迫 细胞自噬
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依托咪酯对视神经损伤成年大鼠视网膜神经节细胞的保护作用及对半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、脑源性神经营养因子蛋白表达的影响
2
作者 赵翠党 赵红雷 +1 位作者 史炯 赵广平 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第7期905-909,共5页
目的:探讨依托咪酯对视神经损伤成年大鼠视网膜神经节细胞的保护作用及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的影响。方法:选择成年雄性SD大鼠40只,随机选8只为正常照组,其余32只采用动脉夹夹持法损... 目的:探讨依托咪酯对视神经损伤成年大鼠视网膜神经节细胞的保护作用及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的影响。方法:选择成年雄性SD大鼠40只,随机选8只为正常照组,其余32只采用动脉夹夹持法损伤视神经建立视神经损伤模型并分组,即模型组(视神经损伤大鼠),依托咪酯低、中、高剂量组(依托咪酯腹腔注射),剂量分别为2、4、6 mg/kg。分析比较干预后各组大鼠眼压变化。并行HE染色观察视网膜组织结构,比较各组大鼠视网膜神经节细胞(RCGs)存活数目及存活率,Western blot法检测视网膜组织中Caspase-3、BDNF蛋白表达。结果:模型组、依托咪酯各组眼压高于正常组,依托咪酯各组末次给药后眼压降低,且呈剂量依赖性(均P<0.05)。模型组大鼠视网膜水肿增厚,以神经纤维层最为明显,且有空泡,RGC细胞肿胀,内、外核层细胞数量减少,排列紊乱。依托咪酯各组视网膜病理损伤均有改善,高剂量组好于中剂量组,中剂量组好于低剂量组。与正常组比较,模型组大鼠RCGs存活数目减少(P<0.05),与模型组比较,依托咪酯各组RCGs存活数目增多(P<0.05)。依托咪酯高剂量组RCGs存活数目、相对存活率高于中、低剂量组(均P<0.05)。正常组大鼠视网膜组织中BDNF蛋白表达高于模型组,Caspase-3低于模型组,依托咪酯各组视网膜组织中BDNF升高,Caspase-3下降,均呈剂量依赖性(均P<0.05)。结论:Caspase-3蛋白在大鼠视神经损伤中表达升高,BDNF蛋白表达降低,依托咪酯干预能够促进视网膜RGCs存活,对视神经损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 依托咪酯 视神经损伤 视网膜神经节细胞 半胱氨酸天冬氨酸酶3 脑源性神经营养因子 大鼠
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三七总皂苷干预脊髓损伤大鼠诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的变化 被引量：11
3
作者 赵玉鑫 王洪 +2 位作者 杨述华 袁文旗 李艳军 《中国临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2006年第31期31-33,共3页
目的:观察三七总皂苷注射液对大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的作用机制。方法:实验于2005-06/11在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成。将64只SD大鼠数字表法随机分为损伤组和三七总... 目的:观察三七总皂苷注射液对大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的作用机制。方法:实验于2005-06/11在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成。将64只SD大鼠数字表法随机分为损伤组和三七总皂苷组(n=32),2组按存活时间分为1,3,7,14d4个时间点,每个时间点8只。所有大鼠采用Allen’s法制备脊髓中度损伤模型(致伤能量为40g·cm),三七总皂苷组伤后30min腹腔注射50mg/L三七总皂苷100mg/kg,伤后2h及4h再次给予50mg/kg,以后1次/d,剂量200mg/kg,连用12d。损伤组相同时间点腹腔注射等体积生理盐水。2组均于预定时间点处死大鼠,取出伤段脊髓(以损伤处为中心,长约10mm),用苏木精-伊红染色观察损伤脊髓组织病理变化,免疫组化染色检测诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞率。结果:64只大鼠全部进入结果分析。①苏木精-伊红染色光镜下发现脊髓组织病理学改变三七总皂苷组明显轻于损伤组。②诱导型一氧化氮合酶阳性细胞率:三七总皂苷组在伤后1,3,7,14d均低于损伤组[(21.38±3.69)%,(36.24±3.27)%,(30.56±2.89)%,(21.64±5.31)%;(39.48±3.78)%,(58.69±5.67)%,(68.97±5.34)%,(40.35±4.36)%,t=9.692,9.701,17.893,3.171,P<0.05]。③半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞率:三七总皂苷组在伤后1,3,7,14d均低于损伤组[(26.29±3.21)%,(35.42±2.25)%,(48.58±2.64)%,(23.72±3.26)%;(32.43±2.69)%,(46.18±3.07)%,(60.31±5.35)%,(31.98±4.80)%,t=4.147,7.996,5.561,11.231,P<0.05]。结论:三七总皂苷注射液能抑制脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达,从而减轻细胞损伤和凋亡。 展开更多
关键词 脊髓损伤 三七皂甙 一氧化氮合酶 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
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三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注后白细胞介素-1β和其相关因子及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶表达的影响 被引量：23
4
作者 唐映红 张淑萍 +1 位作者 梁燕 邓常清 《中西医结合学报》 CAS 2007年第3期328-332,共5页
目的:研究三七总皂苷(Panax notoginsengsaponins,PNS)对大鼠脑缺血再灌注后白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-1受体Ⅰ型(interleukin-1 receptor typeⅠ,IL-1RⅠ)、白细胞介素-1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor ... 目的:研究三七总皂苷(Panax notoginsengsaponins,PNS)对大鼠脑缺血再灌注后白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-1受体Ⅰ型(interleukin-1 receptor typeⅠ,IL-1RⅠ)、白细胞介素-1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1ra)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(cysteinyl-aspartate specific protease,caspase)-1、3、8 mRNA表达的影响。方法:采用颈内动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,在脑缺血前5 min和脑缺血后12 h分别腹腔注射给药1次。在脑缺血2 h再灌注22 h后,以逆转录-聚合酶链反应测定缺血脑组织IL-1β、IL-1RⅠ、IL-1ra、ICAM-1和caspase-1、3、8 mRNA的表达。结果:在脑缺血2 h再灌注22 h后,模型组脑组织IL-1β、IL-1RⅠ、IL-1ra、ICAM-1和caspase-1、3、8 mRNA表达较假手术组均增强(P<0.05或P<0.01)。PNS组脑组织IL-1β、IL-1ra和IL-1RⅠ表达低于模型组,高于假手术组,与模型组和假手术组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);PNS组脑组织caspase-3表达低于模型组(P<0.05),但PNS对ICAM-1、caspase-1和caspase-8表达无明显影响。结论:PNS可抑制caspase-3的表达,同时对脑缺血后IL-1β及其相关炎症因子的表达有一定抑制作用,从而对缺血性脑损伤发挥保护作用。 展开更多
关键词 脑缺血 再灌注 白细胞介素-1Β 白细胞介素-1 白细胞介素-1受体 半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶 逆转录聚合酶链反应 大鼠
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重组荞麦胰蛋白酶抑制剂对人肝癌细胞的凋亡及半胱氨酸天冬酶活性的影响 被引量：8
5
作者 李芳 李玉英 +3 位作者 白崇智 田欣 张政 王转花 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期182-187,共6页
先前的研究表明,基因重组荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)具有诱导不同肿瘤细胞凋亡的作用.为了揭示其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机理,从基因水平上探讨与凋亡有关的分子事件,本研究用不同浓度的rBTI体外作用于人肝癌细胞HepG2后,采用MTT比色法... 先前的研究表明,基因重组荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)具有诱导不同肿瘤细胞凋亡的作用.为了揭示其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机理,从基因水平上探讨与凋亡有关的分子事件,本研究用不同浓度的rBTI体外作用于人肝癌细胞HepG2后,采用MTT比色法检测抑制剂对HepG2细胞的抑制率,用DNA凝胶电泳和细胞核的形态学观察检测HepG2细胞的凋亡.结果表明,rBTI在体外能够明显抑制HepG2细胞的增长,并诱导细胞凋亡.另外,细胞凋亡与Bcl-2/Bax mRNA水平有关.通过RT-PCR检测发现,细胞经过rBTI处理后,抗凋亡基因Bcl-2 mRNA水平下调,促凋亡基因Bax mRNA有所上调,而对照GAPDH无变化.对HepG2细胞中Fas/Fas配体及半胱氨酸天冬酶(caspase)的研究证明,细胞经过rBTI处理后,对死亡受体Fas mRNA没有影响;rBTI可明显激活caspase-3和caspase-9酶活性,对caspase-8活性几乎无影响.上述结果表明,rBTI对HepG2细胞具有明显的诱导凋亡作用,其诱导细胞凋亡的机制与caspase-3依赖性凋亡调节信号通路有关,未涉及Fas/Fas配体途径. 展开更多
关键词 重组荞麦胰蛋白酶抑制剂 细胞凋亡 人肝癌细胞 半胱氨酸天冬酶
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二苯乙烯苷对淀粉样前体蛋白/早老蛋白-1双转基因小鼠脑组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3和淀粉样前体蛋白表达的影响 被引量：6
6
作者 刘宁 廖艳花 +3 位作者 赖术 黄健 黎昀 黄忠仕 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2017年第15期1854-1859,共6页
目的观察二苯乙烯苷(TSG)对淀粉样前体蛋白(APP)/早老蛋白-1(PS1)双转基因小鼠脑组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、APP表达水平的影响,探讨其防治AD的可能机制。方法 2014年10月,将50只SPF级、雄性、APP/PS1双转基因小鼠按照随... 目的观察二苯乙烯苷(TSG)对淀粉样前体蛋白(APP)/早老蛋白-1(PS1)双转基因小鼠脑组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、APP表达水平的影响,探讨其防治AD的可能机制。方法 2014年10月,将50只SPF级、雄性、APP/PS1双转基因小鼠按照随机数字表法分为模型组、石杉碱甲组、TSG低剂量组、TSG中剂量组、TSG高剂量组,每组10只。并选取10只SPF级、雄性、C5B7L/6J小鼠为正常对照组。石杉碱甲组小鼠灌胃给予石杉碱甲0.020 mg/kg,TSG低剂量组、TSG中剂量组、TSG高剂量组小鼠分别灌胃给予TSG 0.033、0.100、0.300 g/kg,模型组、正常对照组小鼠灌胃给予0.9%氯化钠溶液10.000 ml/kg;1次/d,连续给药60 d。采用免疫组化法检测各组小鼠脑皮质和海马区caspase-3阳性细胞数,Western blotting法检测各组小鼠脑组织APP表达水平。结果正常对照组、石杉碱甲组、TSG低剂量组、TSG中剂量组、TSG高剂量组小鼠脑皮质、海马区caspase-3阳性细胞数少于模型组(P<0.05);TSG低剂量组、TSG中剂量组、TSG高剂量组小鼠脑皮质、海马区caspase-3阳性细胞数与石杉碱甲组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。正常对照组、石杉碱甲组、TSG低剂量组、TSG中剂量组、TSG高剂量组小鼠脑组织APP表达水平均低于模型组(P<0.05);TSG低剂量组、TSG中剂量组、TSG高剂量组小鼠脑组织APP表达水平与石杉碱甲组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TSG对APP/PS1双转基因小鼠有明显的治疗作用,其防治AD的机制可能与抑制caspase-3和APP表达、减少β淀粉样蛋白产生、减缓神经元凋亡等机制有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 二苯乙烯苷 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 淀粉样前体蛋白分泌酶类
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半胱氨酸天冬氨酸酶在过氧化氢诱导大鼠晶状体上皮细胞凋亡中的表达 被引量：4
7
作者 王凯军 姚克 +2 位作者 徐雯 吴仁毅 戴南平 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2002年第6期502-505,共4页
目的 探讨半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase 3)在氧化损伤致大鼠晶状体上皮细胞凋亡过程中的表达及意义。方法 离体大鼠晶状体于MEM培养液中培养,实验组加入终浓度为2 mmol/L的过氧化氢(H2O2),对照组不加H2O2,观察培养过程中两组晶状体混浊程... 目的 探讨半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase 3)在氧化损伤致大鼠晶状体上皮细胞凋亡过程中的表达及意义。方法 离体大鼠晶状体于MEM培养液中培养,实验组加入终浓度为2 mmol/L的过氧化氢(H2O2),对照组不加H2O2,观察培养过程中两组晶状体混浊程度;透射电镜下观察晶状体上皮细胞超微结构改变;免疫组织化学方法测定细胞中caspase 3表达。 结果在H2O2作用下随培养时间延长,品状体混浊度加重,伴随晶状体上皮细胞凋亡增加;caspase 3表达量随细胞凋亡及晶状体混浊度的增加而增加。结论 晶状体上皮细胞凋亡是氧化损伤诱发白内障模型的细胞学基础;caspase 3可能参与晶状体上皮细胞凋亡和白内障的形成,在白内障的发病机制中占有重要地位。 展开更多
关键词 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸酶 透射电镜 过氧化氢 晶状体上皮细胞 免疫组化 动物实验
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西洛他唑对全脑缺血大鼠海马磷酸化蛋白激酶B及半胱氨酸天冬酶-3表达的影响 被引量：3
8
作者 袁晓东 李云 +2 位作者 刘惠萍 赵东 张勃 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期301-303,共3页
目的研究西洛他唑对全脑缺血大鼠海马磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)及半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)的影响。方法用四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。将112只(模型成功率为75(,死亡后补充动物)约300g的健康成年SD大鼠随机分为3组:假手... 目的研究西洛他唑对全脑缺血大鼠海马磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)及半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)的影响。方法用四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。将112只(模型成功率为75(,死亡后补充动物)约300g的健康成年SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=16)、缺血模型对照组(n=48)及治疗组(n=48)。治疗组于缺血前6h和2h各灌胃给予1次西洛他唑,以后每隔24h在相应时间点给药,其它各组灌胃给予等量二甲基亚砜。缺血模型对照组和治疗组于缺血10min再灌注0h、1h、12h、24h、72h、7d后断头取脑,免疫组织化学方法分析再灌注后不同时间点海马CA1区p-Akt和再灌注后caspase-3表达水平的变化。结果全脑缺血后0h、1h,治疗组海马CA1区p-Akt平均光密度值明显高于模型组(P<0.01;P<0.05)。缺血后24h、72h、7d,治疗组海马CA1区caspase-3平均阳性细胞数明显低于模型组(P<0.05)。结论西洛他唑可以降低大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区caspase-3表达水平,并可抑制再灌注后p-Akt水平的急剧降低。 展开更多
关键词 西洛他唑 脑缺血 再灌注损伤 蛋白激酶B 半胱氨酸天冬酶-3
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促红细胞生成素对大鼠脑缺血再灌注后半胱氨酸天冬酶-9 mRNA表达的影响 被引量：2
9
作者 林晓英 黄涛 +2 位作者 李中昕 李玉华 黄华 《临床神经病学杂志》 CAS 北大核心 2005年第6期449-451,共3页
目的探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠脑缺血再灌注后半胱氨酸天冬酶9(caspase9)mRNA表达的影响。方法制作大鼠全脑缺血再灌注模型,随机分为脑缺血再灌注组(A组)、EPO干预组(B组)。制模后A、B两组再分为6h、12h、24h、48h、72h5个亚组。... 目的探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠脑缺血再灌注后半胱氨酸天冬酶9(caspase9)mRNA表达的影响。方法制作大鼠全脑缺血再灌注模型,随机分为脑缺血再灌注组(A组)、EPO干预组(B组)。制模后A、B两组再分为6h、12h、24h、48h、72h5个亚组。在相应时间点断头取脑,逆转录聚合酶链反应技术检测大鼠皮质caspase9mRNA的表达,并与对照组(C组)比较。结果全脑缺血再灌注后,(1)A组caspase9mRNA的表达各时间点明显高于B组和C组(均P<0.05);(2)B组在6h、12h、24h、48h时caspase9mRNA的表达明显高于C组(均P<0.05),但72h时与C组比较差异无显著性。结论EPO对缺血再灌注损伤后神经元的保护机制之一与阻滞或下调凋亡通路中的caspase9的表达有关。 展开更多
关键词 半胱氨酸天冬酶-9 促红细胞生成素 缺血 逆转录-聚合酶链反应
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不同年龄大鼠脊髓组织中天冬氨酸特异酶切半胱氨酸蛋白酶3的活性及坐骨神经损伤后的表达变化 被引量：1
10
作者 卓豫 吴宝明 +1 位作者 李陶 王禾 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第4期100-103,共4页
目的:观察不同年龄大鼠脊髓组织中天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达情况及其在坐骨神经损伤后的表达变化,并分析其与脊髓细胞凋亡的关系。方法:实验于2004-03/09在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所完成。选择Wistar大鼠... 目的:观察不同年龄大鼠脊髓组织中天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达情况及其在坐骨神经损伤后的表达变化,并分析其与脊髓细胞凋亡的关系。方法:实验于2004-03/09在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所完成。选择Wistar大鼠324只,成年、幼年、老年大鼠各108只。不同年龄组动物均随机分为对照组和手术组,对照组12只为非手术组;手术组共96只,分为术后1d,3d,1周、2周、3周、4周、5周、6周8个时间组,每组12只。各手术组大鼠均在戊巴比妥钠麻醉后,切除股方肌下缘约6mm的坐骨神经。大鼠脊髓细胞凋亡情况采用原位缺口末端标记法及流式细胞仪AnnexinⅤ/PI双标检测法,原位缺口末端标记阳性细胞及AnnexinⅤ阳性细胞即凋亡细胞;大鼠脊髓组织中天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达情况应用免疫组化法检测;大鼠脊髓组织中天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性应用ActivityAssay试剂盒检测。结果:所有大鼠全部进入结果分析,无脱失。①脊髓细胞凋亡情况的原位缺口末端标记及流式细胞仪AnnexinⅤ/PI双标检测结果:正常成年及老年大鼠未见明显标记的阳性细胞,正常幼年大鼠可见个别阳性标记细胞,坐骨神经损伤诱导脊髓神经细胞凋亡的高发时间为伤后2～4周,老年大鼠细胞凋亡持续时间较长。各手术组正常侧与对照组相比差异无显著性意义(P>0.05)。不同年龄大鼠AnnexinⅤ阳性细胞出现时间均早于原位缺口末端标记阳性细胞。②天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性及表达情况比较:幼年正常组天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达及天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性均高于成年及老年大鼠(P<0.01),损伤后各年龄组均有明显变化,幼年正常组损伤后1d天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3开始升高,升高时间早于成年及老年组。各手术组正常侧与对照组相比差异无显著性意义(P>0.05)。结论:脊髓细胞凋亡情况与天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性测定结果有较好的相同改变趋势,提示天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3的活化是细胞凋亡的早期生物化学指标。不同年龄大鼠正常时脊髓组织中天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达以其在坐骨神经损伤后的表达变化存在差异,说明针对不同年龄段发生的周围神经损伤,其促进神经再生调控时期不同。 展开更多
关键词 坐骨神经损伤 半胱氨酸蛋白酶类 脱噬作用 大鼠 脊髓组织 天冬氨酸特异酶切 半胱氨酸蛋白酶3
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阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者腭帆张肌中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达及意义 被引量：1
11
作者 杨嶷芳 张贤 陈贤明 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2013年第1期13-15,共3页
目的观察阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者腭帆张肌中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA及蛋白表达水平,探讨OSAHS患者上气道扩张肌凋亡情况。方法选取30例OSAHS患者为实验组,1 0例排除OSAHS的慢性扁桃体炎患者为对照... 目的观察阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者腭帆张肌中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA及蛋白表达水平,探讨OSAHS患者上气道扩张肌凋亡情况。方法选取30例OSAHS患者为实验组,1 0例排除OSAHS的慢性扁桃体炎患者为对照组。采用实时荧光定量RT-PCR和Western blot方法检测两组腭帆张肌中Caspase-3的mRNA及蛋白的表达水平。结果①实验组Caspase-3的mRNA及蛋白表达水平明显高于对照组,差异有显著性意义(t=6.71,P<0.05;t=12.63,P<0.05);②实验组Caspase-3蛋白表达水平与呼吸紊乱指数呈正相关(r=0.789,P<0.01)。结论 OSAHS患者腭帆张肌存在肌纤维凋亡现象,且随着病情加重,凋亡程度也加重。 展开更多
关键词 睡眠呼吸暂停 阻塞性 半胱氨酸天冬氨酸蛋 白酶3 细胞凋亡
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半胱氨酸天冬酶家族和创伤性脑损伤 被引量：2
12
作者 尹卫东 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 2001年第8期502-503,共2页
关键词 半胱氨酸天冬酶 创伤性脑损伤 活化 结构
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西洛他唑对全脑缺血大鼠学习记忆功能及半胱氨酸天冬酶-3表达的影响
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作者 李云 袁晓东 +2 位作者 欧阳和中 张轶超 朱美蓉 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第4期366-369,共4页
目的研究西洛他唑对全脑缺血大鼠学习记忆功能及半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)表达的影响。方法采用四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组(n=8×1)、缺血模型组(n=8×7)和治疗组(n=8×7)。治... 目的研究西洛他唑对全脑缺血大鼠学习记忆功能及半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)表达的影响。方法采用四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组(n=8×1)、缺血模型组(n=8×7)和治疗组(n=8×7)。治疗组于缺血前6 h和2 h各灌胃给予西洛他唑(30 mg/kg),以后每隔24 h重复给药,其他各组灌胃给予30%二甲基亚砜(30 mg/kg)。缺血模型组和治疗组于缺血10 min再灌注,6、12、24、48、72 h、5 d和7 d 7个亚组灌注后断头取脑,采用免疫组织化学方法分析再灌注后不同时间点海马CA1区caspase-3表达水平的变化。另取24只大鼠随机分为假手术组、缺血模型组及治疗组,每个亚组8只。应用Morris水迷宫对全脑缺血再灌注7 d的大鼠进行缺血后学习记忆功能的测定。结果caspase-3在假手术组极少见阳性表达;缺血模型组caspase-3的表达于再灌注6 h增加,72 h达高峰,7 d接近正常;治疗组48 h7、2 h5、d和7 d亚组caspase-3平均阳性细胞数明显低于缺血模型组(P<0.05);与假手术组比较,5 d之中缺血模型组和治疗组平均逃避潜伏期明显延长(P<0.01);与缺血模型组比较,前4 d治疗组平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),第5天两组大鼠的平均逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05)。结论西洛他唑可以有效地抑制caspase-3升高,这可能是西洛他唑改善缺血大鼠学习记忆功能的机制之一。 展开更多
关键词 磷酸二酯酶抑制剂 缺血缺氧 脑 再灌注损伤 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
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脊髓损伤后细胞凋亡与半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶-3表达及其意义
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作者 周开锋 蒋赞利 茅祖斌 《国外医学（骨科学分册）》 2005年第4期249-250,252,共3页
半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶家族是诱导脊髓损伤后细胞发生凋亡的关键酶,其中半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶-3是最重要的效应性蛋白水解酶,其活化对细胞凋亡是必需的。抑制半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶-3的活性或拮抗其功能可使细胞凋亡受... 半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶家族是诱导脊髓损伤后细胞发生凋亡的关键酶,其中半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶-3是最重要的效应性蛋白水解酶,其活化对细胞凋亡是必需的。抑制半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶-3的活性或拮抗其功能可使细胞凋亡受抑,减轻继发性组织损伤,有助于神经功能恢复。 展开更多
关键词 天冬氨酸 半胱氨酸 细胞凋亡 脊髓损伤 蛋白酶 特异 其意义 表达及 神经功能恢复 蛋白水解酶 细胞发生 组织损伤 关键酶 继发性
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半胱氨酸天冬氨酸酶3在遗传性视网膜变性中的表达(英文)
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作者 杜 鹃 朱秀安 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2002年第4期307-311,共5页
目的 观察半胱氨酸天冬氨酸酶3（caspase 3）mRNA在RCS大鼠视网膜中的表达,分析caspase 3特异抑制剂 Ac-DEVD-CHO对视细胞凋亡的影响。方法 应用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）检测RCS大鼠出生后不同时间视网膜中caspase3 mRNA的表达。... 目的 观察半胱氨酸天冬氨酸酶3（caspase 3）mRNA在RCS大鼠视网膜中的表达,分析caspase 3特异抑制剂 Ac-DEVD-CHO对视细胞凋亡的影响。方法 应用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）检测RCS大鼠出生后不同时间视网膜中caspase3 mRNA的表达。应用TUNEL方法检测玻璃体内注射Ac-DEVD-CHO后视细胞凋亡的改变。结果RCS大鼠出生后14天至60天视网膜 caspase 3 mRNA均有表达,25天水平明显升高,达到高峰。SD大鼠视网膜15至60天的表达量无明显差异,与RCS大鼠14天水平接近。caspase 3特异抑制剂 Ac-DEVD-CHO能显著抑制视细胞凋亡。结论 caspase 3可能在 RCS大鼠视网膜变性视细胞凋亡中起关键作用。 展开更多
关键词 遗传性视网膜变性 半胱氨酸天冬氨酸酶3 信使核糖核酸
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半胱天冬酶家族的研究进展
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作者 李晓芳 张勇 朱宇旌 《饲料研究》 CAS 2008年第10期59-62,共4页
关键词 半胱天冬酶 半胱氨酸蛋白酶 CASPASE CASPASES 家族 天冬氨酸 细胞凋亡 IL-1Β
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半胱氨酸蛋白酶抑制剂C对局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑皮质caspase-9、脑红蛋白表达和过氧化损伤的影响
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作者 陈萌 梁秀军 +2 位作者 吴晓光 马凯旋 陈元操 《解剖学杂志》 CAS 2021年第1期40-44,F0002,共6页
目的:探讨不同浓度半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)对大鼠损伤大脑皮质组织caspase-9和脑红蛋白(NGB)的表达、氧化损伤和脑组织形态学的影响。方法:大鼠按照随机数字表分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、CysC低、中、高浓度组。... 目的:探讨不同浓度半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)对大鼠损伤大脑皮质组织caspase-9和脑红蛋白(NGB)的表达、氧化损伤和脑组织形态学的影响。方法:大鼠按照随机数字表分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、CysC低、中、高浓度组。线栓法制备右侧局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,缺血2h再灌注24 h后行H-E染色,观察脑组织形态学变化;免疫组织化学法检测caspase-9的阳性细胞数;免疫组织荧光法检测皮质神经元NGB阳性细胞数;免疫印迹检测脑皮质组织中caspase-9蛋白的表达。羟胺法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力,化学比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量。结果:与I/R组相比,CysC低、CysC中浓度组caspase-9表达较I/R组明显减少;而CysC高浓度组caspase-9的表达明显升高,与I/R无明显差别。CysC低、CysC中浓度组caspase-9阳性细胞数较I/R组明显减少,NGB阳性细胞数较I/R组显著增多,SOD和GSH-PX活力升高,MDA含量下降;而CysC高浓度组caspase-9阳性细胞数增多,NGB阳性细胞数减少,SOD和GSH-PX活力降低,MDA含量升高;CysC高浓度组与I/R组相比,差异无统计学意义。结论:CysC低、中浓度可能通过上调NGB的表达,下调caspase-9的表达,减轻脑缺血再灌注后的自由基损伤。而浓度过高则作用相反。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 大脑皮质 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9 脑红蛋白 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶 丙二醛
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同型半胱氨酸对肝细胞增殖及CyclinD1、ALT和AST表达的影响 被引量：4
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作者 蔡欣 杨晓玲 +5 位作者 杨程 曹成建 王磊 田珏 张焱 姜怡邓 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1468-1470,1473,共4页
目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对肝细胞增殖及细胞周期素D1(CyclinD1)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)表达的影响。方法将HL-7702细胞体外常规培养,分别用0、50、100、200、500μmol/L Hcy刺激细胞,分别于刺激后6、12... 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对肝细胞增殖及细胞周期素D1(CyclinD1)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)表达的影响。方法将HL-7702细胞体外常规培养,分别用0、50、100、200、500μmol/L Hcy刺激细胞,分别于刺激后6、12、24h采用MTT法检测肝细胞的增殖情况;采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CyclinD1mRNA的表达;采用微板法检测各组细胞培养液中ALT和AST的变化。结果不同浓度Hcy刺激肝细胞不同时间后,细胞的增殖受到抑制,其中100、200、500μmol/L Hcy组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),24h作用最明显;不同浓度Hcy刺激肝细胞24h后,CyclinD1mRNA的表达显著下降(P<0.01),细胞培养液中ALT和AST水平显著升高(P<0.01)。结论 Hcy可以抑制肝细胞增殖,并引起CyclinD1的mRNA表达下降,ALT和AST释放增多。 展开更多
关键词 肝细胞 细胞增殖 同型半胱氨酸 细胞周期素D1 丙氨酸转氨酶 天冬氨酸氨基转移酶
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TAp63对MPP^(+)处理的SH-SY5Y细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9和酪氨酸羟化酶表达的影响
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作者 刘晨 任继文 谢安木 《中国临床神经科学》 2023年第2期132-137,共6页
目的探讨TAp63基因表达水平对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^(+))诱导的帕金森病(PD)细胞模型细胞活性、酪氨酸羟化酶(TH)和凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)的影响。方法将小鼠神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞系)依据不同处理... 目的探讨TAp63基因表达水平对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^(+))诱导的帕金森病(PD)细胞模型细胞活性、酪氨酸羟化酶(TH)和凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)的影响。方法将小鼠神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞系)依据不同处理方法分为6组:(1)对照组,无任何干预措施;(2)MPP^(+)处理组,MPP^(+)10μmol·L^(-1)处理24 h;(3)TAp63-NC组,用携带无义序列的慢病毒颗粒转染48 h;(4)TAp63-NC+MPP^(+)组,用携带无义序列的慢病毒颗粒转染48 h后,加MPP^(+)10μmol·L^(-1)处理24 h;(5)TAp63过表达组,用携带过表达TAp63基因的慢病毒颗粒转染48 h;(6)TAp63过表达+MPP^(+)组,用携带过表达TAp63基因的慢病毒颗粒转染48 h,换液后予以MPP^(+)10μmol·L^(-1)处理24 h。采用CCK-8法检测6组细胞的存活率;Western blot法检测TAp63、TH、caspase-9表达水平。结果CCK-8检测显示,与对照组比较,MPP^(+)组细胞活性显著下降(P<0.01)。与TAp63-NC+MPP^(+)组比较,TAp63过表达+MPP^(+)组细胞存活率升高,差异有显著统计学意义(P<0.001)。Western blot检测显示:与对照组比较,MPP^(+)组的TAp63蛋白和TH蛋白表达量降低,而caspase-9表达量升高(均P<0.05);与TAp63-NC+MPP^(+)组比较,TAp63过表达+MPP^(+)组TAp63蛋白和TH蛋白表达量升高,而caspase-9蛋白表达水平降低(均P<0.05)。结论TAp63基因过表达可提升MPP^(+)诱导的PD细胞的存活率,提高TH表达量,降低caspase-9表达水平,进一步发挥其潜在的神经保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 TAp63基因 酪氨酸羟化酶 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9 SH-SY5Y细胞系 1-甲基-4-苯基吡啶离子
原文传递
埃及伊蚊来源半胱亚磺酸脱羧酶的性质解析
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作者 郑文慧 刘佳伟 +2 位作者 刘子铭 周哲敏 刘中美 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期30-36,共7页
原核来源L-天冬氨酸-α-脱羧酶的活性较低,是限制生物法合成β-丙氨酸的主要因素,该研究将目光由原核来源转向真核来源,意在寻找具有更高催化活性的酶。该文通过基因合成获得埃及伊蚊来源半胱亚磺酸脱羧酶,并添加sumo标签实现了其在大... 原核来源L-天冬氨酸-α-脱羧酶的活性较低,是限制生物法合成β-丙氨酸的主要因素,该研究将目光由原核来源转向真核来源,意在寻找具有更高催化活性的酶。该文通过基因合成获得埃及伊蚊来源半胱亚磺酸脱羧酶,并添加sumo标签实现了其在大肠杆菌中的高效表达,酶学性质表征实验结果表明,重组酶可催化L-天冬氨酸生成β-丙氨酸,比酶活力为(5.00±0.074)U/mg,添加sumo标签后比酶活力为(5.40±0.129)U/mg;最适反应条件为40℃,pH 6.0;带标签酶的稳定性要明显优于野生型,在50℃处理30 min后酶活力仍保留40%,在pH 5.0~8.0酶活力都维持在80%左右。利用大肠杆菌自身的天冬氨酸裂解酶与重组半胱亚磺酸脱羧酶相偶联,实现了从富马酸到天冬氨酸的一步转化,产物的摩尔转化率达到93.03%。该研究中半胱亚磺酸脱羧酶对于L-天冬氨酸具有较高的催化活性,为β-丙氨酸的工业化生产提供理论支持和技术参考。 展开更多
关键词 半胱亚磺酸脱羧酶 L-天冬氨酸 Β-丙氨酸 酶学性质 全细胞催化
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